Practica 6

PRUEBAS CRUZADAS.

PRUEBA MAYOR
 OBJETIVOS

 1.- Conocer el procedimiento de la

pruebas cruzadas (Prueba mayor).

 2.- Interpretar las resultados.

 Material y equipo
 Centrifugas
 Tubos de ensaye limpios.
 Pipetas automáticas
 Material de toma y bioseguridad.
 Reactivos hemoclasificadores y Coombs.
 Gradillas
 Baño maría.
Procedimiento
 1.- Tomar muestras sanguíneas una con EDTA y
otra sin, para realizar la prueba mayor, una
compatible otra incompatible.

2.- Hacer los lavados al 5% de G.R.

3.- Preparar un autocontrol.

4.- Confirmar el grupo sanguíneo y Rh e inverso.

 Técnica en tubo (Prueba mayor).

Fase 1. Fase 2. Fase 3.

Agregar dos gotas del Lavar 4 veces a 3000
suero del receptor r. p. m. durante 2’
Agregar una gota de Al cuarto lavado
suspensión de desechar el
eritrocitos del donante Agregar dos gotas de sobrenadante
al 5% albumina y mezclar Agregar dos gotas del
Centrifugar 1’ a 1000 Incubar a 37º C suero de Coombs
r. p. m durante 15’ Centrifugar
Observar aglutinación Centrifugar a 1000 r. inmediatamente y
y/o hemolisis p. m durante 1’ observar
-Interpretación: -Interpretación: -Interpretación:
Aglutinación y/o Hemolisis: positivo Aglutinación y/o
hemolisis: positivo (detener la prueba) hemolisis: positivo
(detener la prueba) Negativo: continuar (detener la prueba)
Negativo: continuar fase tres. Negativo: es
fase dos compatible
 Autocontrol
1. Preparar una dilución de
eritrocitos al 1%
2. En uno de los tubos, agregar 50
microlitros de eritrocitos del
receptor y 25 microlitros del
suero del mismo
3. Incubar, centrifugar y leer
Resultados
 Datos de receptor.

Determinación:

 Realizo:
 Se puede determinar si es Compatible
(Prueba Negativa) o Incompatible
(Prueba Positiva).
Interpretacion de la prueba
PRUEBA NEGATIVA (COMPATIBLE)
La prueba cruzada es compatible si no hay aglutinación, ya que indica que no existen
aloAc eritrocitarios en el suero del receptor.
No obstante hay que tener en cuenta que todas las pruebas de la antiglobulina negativas
deben ser comprobadas para asegurar que la técnica se ha realizado correctamente.

PRUEBA POSITIVA (INCOMPATIBLE)

La aglutinación indica incompatibilidad ya que significa que algún Ac del suero del
receptor se ha unido a los hematíes del donante.
La valoración se puede hacer con cruces, o bien se puede hacer una prueba cruzada
titulada empleando diluciones dobles progresivas.
Para diferenciar aloAc de los autoAc se debe disponer de un autocontrol, y cuando este
es negativo se sospecha la existencia de aloAc en una prueba cruzada incompatible.
Los Ac se deben identificar antes de que el paciente reciba la transfusión.
Si el autocontrol es positivo se sospecha la presencia de autoAc.
Los aloAc producen reacciones transfusionales más graves que los autoAc.