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Le Sang
Le Sang
Physiologie - Hémolyse
Globules rouges
PRINCIPAUX CONSTITUANTS DU GLOBULE ROUGE
• Membrane érythrocytaire
- Bicouche phospholipidique
- Cholestérol
- Protéines : glycophorines, spectrine, actine, ankyrine …
- Importance du cytosquelette
- groupes sanguins
• Hémoglobine
- Structure tétramérique representant 95% des protéines intracellulaires
du GR
- 4 chaînes de globines (protéines) (140 AA)
2 paires de chaînes polypeptidiques
, ou ou
- Groupe prosthétique de l’hème
. Fer
. Protoporphyrine
Pigment coloré rouge
PRINCIPAUX CONSTITUANTS DU GLOBULE ROUGE
• Equipement enzymatique
Métabolisme énergétique
- Absence de mitochondries
- Voies glycolytique anaérobie
Shunt
NADPH dépendant
Glucose phosphate déshydrogénase (G6PD)
Globules rouges Numération sanguine : 4-6 .1012/L
Réticulocytes : 20-120. 1019/L
Equipement enzymatique :
-GGlycolyse :
Membrane = déformabilité Voie principale anaérobie
-BBicouche lipidique Pyruvate kinase
-PProtéine 3, glycophorine Shunt des pentoses
Glucose 6 phosphate deshydrogénase
-CCytosquelette : spectrine, NADPH
2-3 Diphosphoglycérate
actine
Protéine 4.1, ankyrine
ATP = énergie
Hémoglobine
Echanges gazeux
Structure de l’hémoglobine
MM 64 kDa
22
Structure de l’hème
(hémoglobine, myoglobine)
Protoporphyrine IX
tétrapyrrolique Histidine distale
FER FERREUX O2
Histidine proximale
Evolution de la synthèse des chaînes
d’hémoglobine en fonction de l’âge
HbA
100
96-98 %
HbF <2%
HbA2
2-3,5 %
Différentes hémoglobines
Région régulatrice
5’ 3’
Chromosome 11
Région régulatrice
5’ 3’
Chromosome 16
Sens de la transcription
Gènes de globine
Bras p
5’ 3’
télomères
Au cours du développement
Synthèse de la chaîne
Noyau
Transcription
Mitochondrie
Epissage
Ribosome
ARNm
Chaîne
Hème
Chaîne
ERYTHROPOIESE R-EPO R-TrF Hb
CFU-GEMM IL-3,IL-4,IL11 - + -
GM-CSF
BFU-E IL-3,IL-9 +/- + +/- Colonies très volumineuses 14-21 J
précoces GM-CSF Prolifération +++
GR - - + Perte de l’ARN
Propriétés chimiques
Fixation,transport et délivrance de
l’oxygène
Egalement du CO2 et ions H+
Forme T (tendu) de faible affinité et forme
R (relâché) de forte affinité
Passage de la forme T à la forme R par
changement de conformation
Effet de l’oxygénation/déoxygénation sur la
structure quaternaire de l’hémoglobine
2,3 DPG
2 1
2 1
x
HEMOGLOBINE
Courbes de dissociation de l’oxygène
Hb H, Hb Bart’s
Hb A, A2, F
Affinité de l’hémoglobine pour l’oxygène
Hémoglobine A Hémoglobine F
2,3 DPG
2 1 2 1
O2
2 1
x 2 1
x
Mère Foetus
Fonctions de l’hémoglobine
• Transport de l’oxygène :
– Hème : transport (Fe++)
– Globine : hydrophobie, protection contre
l’oxydation
– Fe+++ : irréversible
• Transport du CO2 (10 %)
– Carbamation groupes N-terminaux
• Tampon
• Transport d’oxide nitrique (NO)
– Et effet « scavenger » : anti-oxydant
N.B : Modification post-synthèse GLYCOSYLATION HbA1C
Hémolyse physiologique
Définition
• Hémolyse = destruction physiologique des
GR au terme de leur vie évaluée à 120
jours
• 9 pour mille GR sont détruits par jour (=
50ml de sang environ )
HEMOLYSE PHYSIOLOGIQUE
• Durée de vie des GR :
- 120 jours
Mécanisme de la sénescence érythrocytaire
- Déficit énergétique
- Modification de la membrane
Augmentation de la méthémoglobine et de l’affinité
pour l’oxygène (déficit en 2-3 DPG)
Hème Bilirubine
albumine
Glycuro-conjugaison (foie)
Excrétion biliaire
• Extra-vasculaire (physiologique)
- (Foie, rate: faible)
- Système macrophagique de la moelle osseuse
• Intra-vasculaire (pathologique)
- Haptoglobine (2), synthèse hépatique
- Complexes Hp-Hb (très forte affinité, irréversibles)
- Clairance hépatique des complexes (MM 150 000)
- Elimination urinaire de l’hémoglobine libre
(hémoglobinurie)
. Réabsorbtion tubulaire saturable
. Perte de fer
HEMOLYSE PATHOLOGIQUE
Régénération Hémoglobine,
Bilirubine
Anémie « régénérative »
INTERET CLINIQUE
• Comprendre la physiopathologie
- des anémies
- des anémies hémolytiques
(étiologies)
HbA2
HbC HbS
HbE HbD HbF HbA1 HbH
- +
Électrophorégramme sur acétate de cellulose, pH 8,6
Origine
Analyse de l’hémoglobine
Isoélectrofocalisation: fonction du pHi
•
Analyse de l’hémoglobine
Techniques électrophorétiques des chaînes
d'hémoglobine en milieu dissociant (HPLC)
Drépanocytose
hétérozygote AS
HbA1 = 58 %
HbS = 35,3 %
HbA2 = 4,7 %
Non Hb = 0,2 %
Analyse de l’hémoglobine
Techniques de biologie moléculaire
Laboratoires spécialisés
Diagnostic prénatal
Epidémiologie
MORPHOLOGIE DES GLOBULES ROUGES
5’ 3’
Chromosome 11
Région régulatrice
5’ 3’
Chromosome 16
Mutations :
- faux sens (exon) : Hémoglobine S, C, E
- introns/hors gène : certaines thalassémies
Délétions :
- thalassémies, certaines /thalassémies
Drépanocytose
Mutation faux sens : gène de la chaîne globine
Diminution de la
Solubilité de la forme
déoxygénée
Polymérisation de
l’hémoglobine
FALCIFORMATION
Drépanocytose
Polymérisation de l’HbS
Physiopathologie
(drépanocytose)
• Drépanocytose= état stable émaillé de
complications aigues de fréquence et de
sévérité variable d’un patient à l’autre
-Phénylcétonurie
- Hypothyroïdie
• Intégré aux autres
- Hyperplasie des
dépistages surrénales
- Drépanocytose
- Mucoviscidose
Diagnostic des doubles
hétérozygotes
• Autres syndromes drépanocytaires
majeurs(SDM)
• SβThal:anémie,microcytose
hypochromie, HbS, HbA présente ou pas
selon β° ou β+, HbF et HbA2
• DPG mutase
• (normale du 2-3DPG= 15µM/g Hb)
• Récepteur à l’EPO
Variations quantitatives
l’HbA2 : -thalassémie
thalassémies
Thalassémies:Epidémiologie
• Défaut de synthèse d’une ou plusieurs
chaines de globine (famille hétérogène)
• αThalassémies : Sud-Est asiatique
Afrique noire bassin méditerranéen
Moyen Orient
• βThalassémies : bassin méditerranée Sud-
Est asiatique
• Mais répartition plus grande du fait des
migrations de populations
Diagnostic biologique βthal
homozygote
1. Electrophorèse de l’Hb
- HbF 50 à 95%
- HbA 5 à 45% pour β+thal
- HbA=0 pour β°thal
- HbA2 normale ou augmentée
Génétique: transmission autosomique
récessive(β thal)
1. Mutation ponctuelle
2. sur 1 gène β = βthal hétérozygote
3. sur 2 gènes β = βthal homozygote
β°thal si pas de chaîne produite
β+thal si diminution de synthèse
4. Rarement délétion β°thal
5. si délétion gène δ et γ = {β δ}thal
6. voir {β δ γ}thal
si délétion étendue = persistance héréditaire
Hb F(déficitβ compensé par γ)
7. Hb Lepore crossing over entre β et δ
α thalassémies
• α thalassémie • Microcytose ou
mineure pseudo-polyglobulie
• Perte 1 ou 2 gènes • Adulte:parfois
• Type 1 HbA2<2,5%
• Hb Bart’s Y4 à la • Diagnostic sur
naissance 1à2% ou antécédents
5% familiaux
• Asymptomatique
Génétique: alpha thalassémie
transmission autosomique
récessive(α thal)