MICROBIOLOGIA APLICADA

Biotecnología microbiana
Áreas de aplicación de microrganismos

Tipos de productos obtenidos a partir de microorganismos

Mejora de Cepas
Fermentación
Tipos de fermentación

YOGURT

PROBIOTICOS
QUESOS
BIBEDAS ALCOHOLICAS
 FERMENTACIÓN
• El término FERMENTACION, puede tener varios significados:
• Cultivo masivo de microorganismos (o incluso de células
vegetales y animales).
• Requiere de medios de cultivo apropiados y la selección a gran
escala de los microorganismos.
• Se precisan años para lograr producciones óptimas del producto.

• Se prueban muchos aislados para comprobar su capacidad de

producir un producto nuevo en la cantidad deseada. Sólo unos
poco tienen éxito.
• Proceso, aeróbico o anaeróbico, que conlleve al cultivo masivo
de microorganismos.
• Todo proceso biológico que se produzca en ausencia de Oxígeno.
• Descomposición de los alimentos.
• Utilización de un sustrato orgánico como dador o aceptor de
electrones.
• Utilización de un sustrato orgánico como reductor, y del mismo
sustrato orgánico parcialmente degradado como oxidante.
• Crecimiento dependiente de fosforilación a nivel del sustrato.
• 1. EL CULTIVO MICROBIANO
• El cultivo microbiano para aplicaciones industriales se realiza en tubos de cultivo, matraces oscilantes
y fermentadores con agitación u otros sistemas de cultivo masivo (la denominación FERMENTADOR
no hace referencia a que el proceso metabólico que se lleve a cabo en este incubador sea una
fermentación necesariamente.
• El tamaño de los fermentadores con agitación puede variar entre 3 o 4 y 100,000 o más litros,
dependiendo de las necesidades de producción.

Los pasos necesarios en el crecimiento y

en la recolección de los productos deben
llevarse a cabo en condiciones de
asepsia. No sólo se debe esterilizar el
medio, sino que la aireación, la
regulación del pH, el muestreo y la
vigilancia del proceso han de realizarse
en condiciones estrictamente
controladas.
En ciertos casos hay que añadir agentes
anti-espumantes. Sobre todo con medios
de alto contenido proteíco.
 2. UNIDAD DE FERMENTACION A GRAN ESCALA
Esta unidad requiere una gran inversión de capital y operarios especializados.

Se utilizan ordenadores para vigilar el rendimiento mediante sondas que determinan la biomasa microbiana,
los niveles de los productos metabólicos críticos, el pH, la composición del gas de entrada y de salida, y otros
parámetros. Esta información es necesaria para un proceso y control del producto meticulosos.

• Para el cultivo de microcrganismos industriales a menudo se

utilizan fermentadores con agitación especialmente
diseñados, que pueden funcionar en condiciones aeróbicas
o anaeróbicas. La adición de nutrientes, el muestreo y la
vigilancia de la fermentación pueden realizarse en
condiciones de asepsia. Los biosensores y el control con
infrarrojos pueden proporcionar información en tiempo real
del curso de la incubación. Es posible detectar sustratos
específicos, intermediarios metabólicos y productos finales.
El tamaño del fermentador utilizado depende del proceso y
de cómo se va a operar. Los procesos con grandes
volúmenes que se recogen al final, requieren fermentadores
más grandes que los procesos que funcionan de modo
continuo o semicontinuo.
 Tamaño De Los Fermentadores Para Diversos
Procesos Industriales

En la tabla siguiente se muestra un resumen de las medidas de los fermentadores

utilizados para algunas fermentaciones comunes.

Tamaño del fermentador Producto

(litros)
1 – 2,000 Enzimas para diagnóstico
Sustancias para biología molecular
40 – 8,000 Algunas enzimas antibióticas
100 – 15,000 Penicilina,
Antibióticos aminoglicosídicos
Proteasas, Amilasas,
Aminoácidos,
Transformaciones de esteroides.
200 – 50,000 Aminoácidos (ácido glutámico)
 CLASES DE FERMENTADORES INDUSTRIALES
• Los primeros productos microbianos que se produjeron industrialmente se obtuvieron
anaeróbicamente, mediante fermentación.
• De aquí, que en la actualidad, independientemente de que el proceso sea aeróbico o anaeróbico, a las
transformaciones industriales que se realizan utilizando microorganismos se les denomina
FERMENTACIONES.
• Y los recipientes en los que se realizan estas transformaciones se les llama FERMENTADORES.

Modelo pequeño para investigación Gran Escala Fermentador industrial

Los Fermentadores Anaeróbicos requieren poco equipamiento especial, excepto

el necesario para eliminar el calor que se genera durante la fermentación.

Los Fermentadores Aeróbicos requieren un equipamiento mucho más

elaborado, para asegurar que se logra el mezclado y la aireación adecuados.
 Fermentaciones Anaeróbicas
• Puesto que las fermentaciones en un sentido estricto generan sólo pequeñas cantidades
de ATP, los microorganismos anaerobios, cuando fermentan, utilizan grandes cantidades
de sustrato y dan lugar a grandes cantidades de productos finales.
• Algunos productos de la fermentación tienen un gran valor comercial y la obtención de
los mismos es relativamente fácil.
• La aireación del cultivo no es necesaria; asimismo, no es necesario seguir unos
procedimientos asépticos muy rigurosos, ya que la contaminación por microorganismos
aerobios es imposible y la mayoría de los anaerobios competidores crecen tan
lentamente que no pueden desplazar a la población previamente establecida.
• La viabilidad económica de un producto industrial obtenido anaeróbicamente está
determinada por el precio relativo del producto y del substrato, así como por el coste de
la purificación del producto a partir del cultivo líquido.
• La fuente del substrato para la fermentación, generalmente un azúcar, debe ser barata. Deposito con grano de cereal sacrificado y
Los substratos más corrientes son las melazas (líquido residual que queda después de hervido, que se fermentara.
obtener la mayor parte del azúcar presente en la caña de azúcar o en la remolacha) y los
granos de cereales (que quedan pueden sacrificarse si es necesario).
• El margen precio/costo es casi siempre muy bajo, ya que
la mayoría de los productos obtenidos anaeróbicamente
son productos químicos industriales relativamente
baratos que también pueden obtenerse mediante otros
procedimientos por ejemplo, químicamente a partir del
petróleo. El precio o los costos cambian con frecuencia,
de manera que ciertas fermentaciones industriales eran
rentables pueden abandonarse y volverse a reiniciar tras
un cierto periodo de tiempo. Las bebidas alcohólicas, el
ácido acético, el vinagre son productos obtenidos
microbiológicamente.
• Un generador de vinagre,es un gran cilindro relleno
con virutas de madera, que están cubiertas con una
capa de Acetobacter. Por la parte superior se añade
zumo de frutas fermentado.
 Fermentaciones Aerobicas
• La mayoría de los procesos microbiológicos industriales incluidos los de la obtención
de penicilina y otros antibióticos, aminoácidos, vitaminas y proteínas de intéres
terapéutico son aeróbicos.
• El oxígeno es muy poco soluble en agua y es utilizado rápidamente por los densos
cultivos microbianos que se utilizan en procesos industriales, el mantenimiento de
una masa de cultivo en condiciones aeróbicas no es fácil ni barato.
• Además, para evitar la contaminación debe esterilizarse el aire que masivamente se
suministra al cutivo.
• El mayor reto de la industria de la fermentación aeróbica moderna fue el desarrollo
de la tecnología para poder cultivar aeróbicamente cientos de miles de litros de
cultivos microbianos sin que se contaminaran.
• La tasa a la que se añade el oxígeno a un cultivo líquido, esta limitada por el área de
la superficie del líquido que se puede exponer al gas.
• Para aumentar dicha superficie, los fermentadores industriales modernos se llenan
con pequeña burbuja de aire, que quedan retinadas en el líquido durante el mayor
tiempo posible.
• Los microorganismos se eliminan del aire que entran en el fermentador mediante
filtración, pero las principales vías de contaminación son las válvulas a través de las
cuales se añaden o se extraen los materiales del fermentador.
• Aunque las mismas estén perfectamente cerradas, los microorganismos
contaminantes pueden pasar a través de ellas y penetrar en el fermentador.
• Por esta razón, se hace pasar vapor de agua a través de la mayoría de las válvulas de
• los se
Esto fermentadores.
consigue forzando el paso del aire a través de una corona difusora (parecida a un cabezal de una ducha) situada en la zona inferior
del sistema de agitación (un eje con varios conjuntos del palas) que gira rápidamente.
• El sistema de agitación convierte el chorro de aire en diminutas burbujas que siguen una trayectoria helicoidal (y por lo tanto más
prolongada) hacia la superficie.
 METODOS ALTERNATIVOS DE CUTIVOS
MASIVOS

• Además del tradicional fermentador con agitación aeróbica o anaeróbico, se pueden

emplear otros métodos para cultivar microorganismos. Entre estos métodos alternativos,
se encuentran los fermentadores con aspiración que eliminan la necesidad de agitadores
que pueden causar problemas con los hongos filamentosos. También se dispone de la
fermentación en estado sólido, en la que el sustrato no se diluye en agua. En varios tipos
de reactores de lecho fijo y de lecho fluidizado los microorganismos se asocian a
superficies inertes como biofilms, y el medio fluye por delante de las partículas fijas o
suspendidas.
• También pueden utilizarse las unidades de cultivo en diálisis. Estas unidades permiten que
los productos finales o los metabolitos de los residuos tóxicos difundan desde el cultivo
microbiano, y que nuevos sustratos difundan hacia el cultivo a través de la membrana. Las
técnicas de cultivo continuo pueden mejorar en gran medida la producción de células y la
velocidad de utilización del sustrato, ya que los microorganismos pueden mantenerse en
una fase logarítmica continua. Sin embargo en muchos procesos industriales no es
deseable mantener continuamente un microorganismo en una fase de crecimiento activo.
FERMENTADOR CON ASPIRACIÓN
La diferencia de densidad de las burbujas de
gas atrapado en el medio da lugar a la
circulación del fluído

FERMENTACIÓN EN ESTADO SOLIDO

Crecimiento del cutivo en ausencia de
agua libre adicional

REACTOR DE LECHO FIJO vapor

Los microorganismos se localizan en

las superficies del material de
soporte, el flujo puede ascender o
descender

REACTOR DE LECHO FLUIDIZADO

Los microorganismos se localizan en las
superficies de partículas suspendidas en
líquido o gas que fluye corriente arriba.
UNIDAD DE CULTIVO EN DIALISIS
Los productos de desecho se separan del
cultivo por difusión el sustrato puede
difundir al cultivo a través de la
membrana.

UNIDAD DE CULTIVO CONTINUO

El medio entra en la unidad y el
exceso de medio y las células
consumidas lo abandonan.
 DESARROLLO DEL MEDIO Y CONDICIONES DE
CRECIMIENTO

• El medio utilizado para cultivar un microorganismo es decisivo, ya que puede afectar a la

competitividad económica de un proceso concreto. Como fuentes de carbono, nitrógeno y
fósforo suelen emplearse materiales sin refinar de menor costo.
• A menudo se utilizan hidrolizados vegetales como fuente compleja de carbono, nitrógeno y
factores de crecimiento.
• Los productos procedentes de la industria de elaboración de bebidas se utilizan con frecuencia
debido a su menor costo y a su mayor disponibilidad.
• Otras fuentes de carbono útiles son las melazas y el suero procedente de la elaboración del
queso.
• Los niveles y el equilibrio de los minerales (especialmente hierro) y los factores de crecimiento
pueden ser cruciales en la formulación del medio. Por ejemplo, la biotina y la tiamina controlan
la acumulación del producto en muchas fermentaciones al influir en las reacciones biosintéticas.
• El medio puede diseñarse de forma que el carbono, el nitrógeno, el fósforo, el hierro o un factor
de crecimiento específico se haga limitante tras un tiempo de fermentación dado. En tales casos,
esta limitación suele ocasionar un desplazamiento del crecimiento a la producción de los
metabolitos deseados.
 Principales Componentes De Los Medios De Cultivo
Utilizados En Procesos Industriales

FUENTE MATERIA PRIMA

Carbono y Energía Melazas
Suero
Semillas
Desechos agrícolas (mazorcas de maíz)
Nitrógeno Líquido de macerar maíz
Harina de soja
Desechos de matadero
Amoníaco y sales de amonio
Nitratos Solutos de destilador
 Principales Componentes De Los Medios De Cultivo
Utilizados En Procesos Industriales

FUENTE MATERIA PRIMA

Vitaminas Preparaciones sin refinar de productos vegetales y animales.

Hierro, trazas de sales Productos químicos inorgánicos crudos.
Soluciones amortiguadoras Yeso o carbonatos crudos
(tampones) Fosfatos para fertilización
Agentes antiespumantes Alcoholes de alta graduación
Siliconas Ësteres naturales
Manteca de cerdo y aceites vegetales
 ALIMENTACION CONTINUA
•A menudo se añaden en forma continua un componente esencial del medio, que suele ser la fuente de carbono. Este
proceso se denomina ALIMENTACION CONTINUA, de forma que el microorganismo no disponga en ningún momento de
un exceso de sustrato que pueda originar una acumulación indeseable de productos metabólicos de desecho.
•Una vez, que se desarrolla un medio, en el sistema de cultivo masivo se debe definir el ambiente físico para el
funcionamiento microbiano.
•Esto suele conllevar un control preciso de la agitación, refrigeración, cambios de pH y oxigenación.
•Pueden utilizarse tampones de fosfato para controlar el pH al mismo tiempo que actúan como fuente de fósforo.

FACTORES LIMITANTES
1. Disponibilidad De Oxígeno:
•Las limitaciones de oxígeno pueden ser especialmente decisivas en los procesos de crecimiento aeróbicos.
•La concentración de Oxígeno y la tasa de flujo deben ser suficientemente altas como para disponer de oxígeno en
exceso en el interior de las células con objeto de que esto no constituya un factor limitante.
•La disponibilidad de oxígeno pueden explicarse en barreras al desplazamiento del oxígeno desde una burbuja de gas al
oxígeno disuelto en el sitio en que se encuentran las enzimas respiratorias en el interior de un microorganismo.
•Sólo si la concentración de oxígeno y la tasa de flujo desde la burbuja a través de cada barrera son suficientes será
posible evitar la limitación de oxígeno. Esto es especialmente cierto en el crecimiento de un cultivo microbiano denso.
2. Barreras a La Transferencia de Oxigeno:
•Existen muchas barreras que limitan la transferencia de oxígeno, desde el aire hasta las enzimas en el interior del
microorganismo. A pesar de existir una concentración de oxígeno alta en el interior de la burbuja de aire, las barreras a
la transferencia dentro del medio líquido y, finalmente a través de la membrana plasmática, dan lugar a un bajo nivel de
oxígeno en la enzima. La intensidad del color pretende indicar la concentración de oxígeno que disminuye desde la
burbuja de aire hasta el sitio en que se ubica la enzima activa dentro de la célula. Solamente manteniendo una tasa de
aireación alta es posible asegurar que el oxígeno no limite la actividad microbiana. La concentración de oxígeno (ppm) se
expresa en una escala logarítmica, y el oxígeno presente en el sitio de utilización puede ser inferior a una millonésima
parte del que está presente en la burbuja de aire.
3. Crecimiento De Filamentos Durante La Fermentación
•Cuando se cultivan hongos filamentosos y actinomicetos, estos procesos de aireación física pueden verse incluso más
limitados por el crecimiento filamentoso. Este crecimiento filamentosos da lugar a un medio viscoso y plástico conocido
como caldo no newtoniano. Este medio ofrece incluso más resistencia a la agitación y la aireación. Para reducir al mínimo
este problema, los cultivos pueden realizarse como partículas o flóculos unidos a partículas artificiales.
•Es fundamental que estos factores físicos no limiten el crecimiento microbiano. Esto es más crucial durante el
INCREMENTO EN ESCALA (SCALEUP), en el que un procedimiento desarrollado con éxito en un pequeño matraz oscilante
se modifica para usarlo en un fermentador de gran tamaño.
•Es preciso conocer el microambiente del cultivo y mantener unas condiciones similares cerca de la célula individual a
pesar del incremento del volumen del cultivo.
•Si se puede hacer una transición con éxito desde un proceso originalmente desarrollado en un matraz de 250 ml a un
reactor de 100,000 litros, el proceso de SCALEUP se ha llevado a cabo correctamente.
 FERMENTACION DISCONTINUA

Una fermentación discontinua puede ser

considerada como un “sistema cerrado”.
A tiempo cero T=0, la solución esterilizada de
nutrientes se inocula con microorganismos y se
permite que se lleve a cabo la incubación en
condiciones óptimas de fermentación.

A lo largo de toda la fermentación no se añade nada, excepto oxígeno (en forma de aire), un agente
antiespumante y ácidos o bases para controlar el pH.
La composición del medio de cultivo, la concentración de la biomasa y la concentración de metabolitos
cambia generalmente en forma continua como resultado del metabolismo de las células.
 FERMENTACION DISCONTINUA

Curva de crecimiento de un cultivo

bacteriano
Después de la inoculación de una solución
nutritiva estéril con microorganismos y su
cultivo en condiciones fisiológicas se
observan cuatro fases típicas de crecimiento:
Fase de latencia
Fase logarítmica
Fase estacionaria y
Fase de muerte.
 FERMENTACION DISCONTINUA

1.Fase de latencia.
Cuando las células se transfieren de un medio a otro no existe incialmente un número de células,
aunque la masa celular puede cambiar.
Durante la fase de latencia los microorganismos se adaptan a su nuevo ambiente.
Debido a esta transferencia al nuevo medio probablemente serán alterados por las células del
inóculo varios parámetros: cambios en el valor de pH, aumento en el suministro de nutrientes,
descenso en los inhibidores del crecimiento.
En las células deben ser inducidos nuevos sistemas de transporte. Fuera de la célula pueden
difundir cofactores esenciales y las enzimas del metabolismo primario deben ajustarse a las nuevas
condiciones.
 FERMENTACION DISCONTINUA

1.Fase de latencia.
Además, la condición fisiológica del inóculo es crucial respecto de la longitud de la fase de latencia.
Si el cultivo que se va a utilizar como inóculo se encuentra todavía en la fase logaritmica, puede no
existir período de latencia y el crecimiento puede comenzar inmediatamente.
Sin embargo, el inóculo que se toma de un cultivo en el que se ha detenido el crecimiento debido a
una limitación de un substrato necesita más tiempo para adaptarse a la nueva solución de
nutrientes.
La concentración del inóculo tiene también influencia en la fase de latencia.
 FERMENTACION DISCONTINUA

2. Fase logarítmica.
Al final de la fase de latencia las células se han adaptado a las nuevas condiciones de crecimiento.
El crecimiento de la masa celular puede ahora ser descrito cuantitativamente:
En función de la duplicación del número de células por unidad de tiempo (levaduras y bacterias) o
• Por la duplicación de la biomasa por unidad de tiempo (organismos filamentosos como estreptomicetos
y hongos).
• Representando el número de células o la biomasa frente al tiempo en una gráfica semilogarítmica se
obtiene una línea recta de ahí el nombre de fase logarítmica.
 FERMENTACION DISCONTINUA

2. Fase logarítmica.
Aunque las células alteran el medio debido a la toma de substratos y la secreción de productos
metabólicos, la velocidad de crecimiento permanece constante durante la fase logarítmica.
La velocidad de crecimiento es independiente de la concentración de substrato en tanto que exista
exceso de substrato.
 FERMENTACION DISCONTINUA

3. Fase estacionaria
Tan pronto como el substrato es metabolizado o se han formado substancias tóxicas, el crecimiento
desciende o se detiene completamente. La biomasa aumenta sólo gradualmente o permanece
constante durante esta fase estacionaria, aunque la composición de las células puede cambiar.
Debido a la lisis se liberan nuevos substratos (carbohidratos, proteínas) que pueden servir como
fuentes de energía para el crecimiento lento de los supervivientes. Los distintos metabolitos
formados en la fase estacionaria son frecuentemente de gran intéres biotecnológico.
 FERMENTACION DISCONTINUA

4. Fase de muerte
En esta fase las reservas de energía de las células se agotan. Cuando se representan en forma
semilogarítmica los supervivientes frente al tiempo, puede ser obtenida una línea recta, lo que
indica que las células mueren a una velocidad exponencial.
La longitud de tiempo entre la fase estacionaria y la fase de muerte dependen del organismo y del
proceso utilizado. En los procesos comerciales la fermentación frecuentemente se interrumpe al
final de la fase logarítmica o antes de que comienze la fase de muerte.
 FERMENTACION ALIMENTADA “FED-
BATCH”
En los procesos convencionales discontinuos que acabamos de describir, todos los substratos se
añaden al principio de la fermentación.
Una mejora del proceso cerrado discontinuo es la fermentación alimentada, que se utiliza en la
producción de substancias como la penicilina.
En los procesos alimentados los substratos se añaden escalonadamente a medida que progresa la
fermentación.
La formación de muchos metabolitos secundarios está sometida a represión catabólica por altas
concentraciones de glucosa, por otros carbohidratos, o por compuestos nitrogenados.
 FERMENTACION ALIMENTADA “FED-
BATCH”
En los procesos discontinuos todos los substratos se añaden al
principio de la fermentación.
Una mejora del proceso cerrado discontinuo es la fermentación
alimentada, que se utiliza en la producción de substancias como
la penicilina.
En los procesos alimentados los substratos se añaden
escalonadamente a medida que progresa la fermentación.
La formación de muchos metabolitos secundarios está sometida
a represión catabólica por altas concentraciones de glucosa, por
otros carbohidratos, o por compuestos nitrogenados.

Por esta razón en el método alimentado los elementos críticos de la solución de nutrientes se añaden en pequeñas
concentraciones al principio de la fermentación y continúan añadiéndose pequeñas dosis durante la fase de
producción.
 FERMENTACION ALIMENTADA “FED-
BATCH”
Puesto que generalmente no es posible medir la concentración del
substrato directa y continuamente durante la fermentación a fin
de controlar el proceso de alimentación, tienen que ser medidos
parámetros indirectos que estén correlacionados con el
metabolismo del substrato crítico.
Por ejemplo: en la producción de ácidos orgánicos,
El valor de pH puede ser utilizado para determinar la velocidad de
alimentación de la glucosa.
En fermentaciones con valores osmóticos críticos la alimentación
puede ser regulada controlando el valor de pO 2 o el contenido en
CO2 en los gases que se liberan.
 FERMENTACION CONTINUA

• En la fermentación continua se establece un sistema

abierto.
• La solución nutritiva estéril se añade continuamente
al biorreactor y una cantidad equivalente de
solución utilizada de los nutrientes, con los
microorganismos, se saca simultáneamente del
sistema.
• Entre las distintas clases de fermentaciones
continuas pueden ser distinguidos dos tipos básicos:
 FERMENTACION CONTINUA

• Han sido desarrollados procesos de fermentación continua para:

• La producción de proteína de origen unicelular,
• Antibióticos,
• Solventes orgánicos,
• cultivos iniciadores y para la descomposición de la celulosa (en estudios de laboratorio).

• Se han instalado plantas piloto o plantas de producción para:

• La producción continua de proteína de origen unicelular a partir de n-alcanos, compuestos C1 y
almidones.
 FERMENTACION CONTINUA

• Los procesos industriales que utilizan fermentación continua incluyen el tratamiento de las aguas
residuales así como la producción de cerveza, glucosa-isomerasa y etanol.
• Aunque muchas fermentaciones para la producción de metabolitos funcionan bien como procesos
continuos, sólo unos pocos procesos han resultado útiles para la aplicación práctica por varias
razones:

Muchos métodos de laboratorio operan

continuamente durante solamente 20 a 200 horas;
para que sea de utilidad industrial el sistema debe
ser estable durante al menos 500 a 1000 horas.
Mantener las condiciones estériles a escala
industrial a lo largo de un largo período de tiempo
es difícil.
Una bateria de fermentadores de investigación
en el desarrollo de los procesos
 FERMENTACION CONTINUA

 La composición de los substratos debe ser constante a fin de obtener una producción máxima. La
composición de las soluciones de nutrientes industriales son variables, (por ejemplo: el líquido de
maceración de maíz, la peptona, el almidón).
 Cuando se utilizan cepas de alto rendimiento se producen mutantes degenerados, los cuales
pueden crecer en cultivo continuo más de prisa que las cepas de producción.
• Los cultivos continuos también encuentran considerable uso en investigación sobre procesos
ecológicos. El crecimiento a bajos niveles de substrato en un cultivo continuo es análogo al
crecimiento a bajos niveles de substrato en la naturaleza, de forma que el cultivo continuo
proporciona excelentes modelos para el análisis de los procesos ecológicos.
 CLASIFICACION DE LOS PROCESOS DE
FERMENTACION

Los procesos de fermentación se subdividen en tres tipos:

 Dicontinuo
 Discontinuo-alimentado
 Continuo.

Se ha creado otra forma de clasificación de acuerdo con la dependencia de la

formación del producto respecto del metabolismo energético.
 Tipo I
 Tipo II
 Tipo III
 TIPO I
En un proceso de tipo I, el producto deriva directamente del metabolismo primario utilizado para la
producción de energía.
El producto puede ser también la propia biomasa.
El crecimiento, el catabolismo del carbohidrato y la formación del producto se llevan a cabo casi en
paralelo y la trofase y la idiofase no se separan una de la otra.

La reacción puede ser expresada de la siguiente forma:

Substrato A ---------- Producto

Substrato A ----- B ----- C ----- Producto

 TIPO I

Los procesos para la producción de proteína de origen unicelular, el etanol y el ácido glucónico
pertenecen todos a esta categoría.
Las fermentaciones continuas en reactores sin un sistema en cascada, se incluyen también aquí.
 TIPO II

En este caso el producto deriva también del substrato utilizado para el metabolismo primario,
pero la producción tiene lugar en una vía secundaria que está separada del metabolismo
primario.

Substrato A  B  C  D  Metabolismo primario


E  F  Producto
 TIPO II

En las fermentaciones discontinuas de este

tipo hay dos máximos. En el primero se
produce un buen crecimiento acompañado
por alto consumo de substrato y poca o
ninguna formación de producto. Luego el
crecimiento decrece y comienza la formación
de producto acompañado por una alta
velocidad de consumo de substrato.
 TIPO II

FERMENTACIÓN DEL ACIDO CITRICO

En los procesos de tipo II la trofase y la

idiofase están separadas en el tiempo.
Los ácidos cítricos itacónico y algunos
aminoácidos son producidos por
procesos de este tipo.
A.niger, aeróbicas, deficiencia de Fe.
 TIPO III

En los procesos tipo III el metabolismo primario y

la formación del producto se producen en
tiempos completamente separados. El producto
no deriva del catabolismo sino de vías anfibólicas.
En este tipo de fermentación opera primero el
metabolismo primario, acompañado por el
consumo del substrato y el crecimiento. Después
se forma el producto mediante reacciones del
metabolismo intermediario. Muchos antibióticos
y vitaminas son producidas por este tipo de
fermentación.
 TIPO III

Este clasificación no puede ser aplicada a todos

los procesos de fermentación. Dependiendo de
la producción del metabolito, la composición de
medio de cultivo y la regulación en la cepa
utilizada hay muchas formas intermedias. Por
ejemplo la producción de ácido láctico cae entre
los tipos I y II y la producción de antibióticos
aminoglicósidos cae entre los tipos II y III.
 TIPO III

La producción, cuando implica microorganismos

que producen micelio no puede ser clasificada
entre estos tipos sencillos de fermentación, ya
que la correlación entre la producción de micelio
y los cambios en la estructura del micelio con la
producción del antibiótico es compleja.
Las etapas en la formación de oxitetracicilina con
el organismo formador de micelio Streptomyces
rimosus .
 PRODUCTIVIDAD

La productividad de una fermentación se define como:

Productividad (P) = Concentración de producto /l = Unidades/h-1

Tiempo de Fermentación

Para evaluar la economía de un proceso deben ser considerados varios factores, el tiempo de
producción de la fermentación, el tiempo requerido para limpiar y poner a punto el fermentador, el
tiempo de esterilización y la duración de la fase de latencia.
 PRODUCTIVIDAD
Productividad Total Y Productividad Máxima

En la figura la pendiente de la tangente de la curva de formación del producto es una medida de la productividad
máxima y la pendiente de la línea recta, al final de la curva de formación de producto, indica la productividad
total.
 PRODUCTIVIDAD

Que el proceso de fermentación termine al tiempo de la productividad máxima o más tarde

depende de los costos de operación, que incluyen:
• La energía
• Gastos generales
• Costes de mano de obra
• Gastos en personal y
• La capacidad del sistema.
 PRODUCTIVIDAD

Usando una gráfica como el de la figura

anterior se puede hacer una estimación de
cómo optimizar el proceso.
En fermentaciones a tiempo corto (8 – 70 h)
el tiempo para la puesta a punto es
significativo,
Mientras que en fermentaciones largas (3
días) el tiempo de puesta a punto es menos
crucial.
 CINÉTICA DE LA FERMENTACIÓN
DE LA PENICILINA
CON PENICILLIUM CHRYSOGENUM

Observese que la
producción de penicilina Biomasa (g/l)
tiene lugar cuando las carbohidratos,
células están entrando en la
sales de amonio,
fase estacionaria y la mayor
parte del carbono y del penicilina
nitrógeno se han agotado. (g/l x 10)
Reponer nutrientes hace
que se mantenga alta la
producción de penicilina.
GRACIAS POR SU ATENCIÓN