Bacilos Gram positivos aerobios y

anaerobios, formadores de esporas

Bacillus
Clostridium
Los Bacilos Gram positivos aerobios
comprenden un gran número de
géneros y especies que viven en el
ambiente (piel, mucosas de animales y
humanos).
Hasta hace poco solo se consideran
patógenos:
 Corynebacterium diphteriae
 Bacillus anthracis
 Clostridium tetani
 Listeria monocytogenes
 Género Bacillus
Bacilos Gram positivos
Aerobios, grandes agrupados
en cadenas
Presentan esporas
Muy resistentes a condiciones
adversas
La mayoría son saprofitos
Son productoras de antibióticos
(polimixinas, bacitracina),
vitaminas, alcoholes y enzimas
Ampliamente diseminados en
la naturaleza, suelo, polvo,
agua, plantas y animales.
Especies

Bacillus cereus

Bacillus subtilis

Bacillus anthracis
 Bacillus anthracis
Produce carbunco:
– Cutáneo (anthrax)
– Respiratorio
– Gastrointestinal
Características
– Bacilo grande recto 3
a 5um x 1 a 1,2 um
– Gram +
– Formador de esporas Cadenas largas en medios de cultivo.
– Extremos La espora es elipsoidal, central
No deforma al soma bacteriano
rectangulares
– Catalasa +,
inmóvil.
Bacillus Anthracis
Epidemiología

En suelo contaminado con

esporas de B anthracis
de cadáveres de
animales; las esporas
permanecen viables
durante años.
Pueden germinar en suelo
a PH 6.5 temp.
adecuada Los animales
que pastan estas tierras
se infectan por medio de
una mucosa lesionada
iniciando la cadena
infección.
CICLO DEL ANTHRAX
Patogenia – Bacillus anthracis
Piel o mucosas Germinan en el tejido
lesionadas
en el hombre
Crecimiento de
células vegetativas
Edema
gelatinoso
Esporas
Multiplicación - Diseminación

Liberación de la toxina
Carbunco cutáneo

“pústula maligna” Edema Necrosis Hemorragia

Patogenia – Bacillus anthracis
Carbunco Carbunco

Pulmonar Digestivo
Aspiración Ingestión
Esporas
pulmonar

Germinación en Germinación mucosa

Los pulmones o ganglios Intestinal digestiva
linfáticos traqueobronquiales

Linfáticos mesentéricos
Mediastinitis hemorrágica
Neumonía, meningitis
y septicemia Adenitis hemorrágica
Carbunco cutáneo y pulmonar
 Determinantes de patogenicidad
Espora, diseminación del MO
Cápsula, Actividad antifagocitica y su
producción es regulada por un
plásmido
Exotoxina, depende de un plásmido, tipo
A – B.
Actuación AP Unión a los receptores de las
Sinérgica FE
células del Activa
huéspedla adenilciclasa (reacción edematosa)

FL Efecto letal
Diagnóstico
Muestras: de pus y líquidos de
la lesión local
Frotis teñidos: de la lesión
local o de la sangre de
animales muertos
Cultivo
– En placas de gelosa
sangre: colonias grises no
hemolíticas
– Medio semisólido, es
inmóvil
– Prueba de ASCOLI,
extractos de tejidos
muestran anillo precipitado
– Pruebas serológicas
Anticuerpos
Tratamiento
En el hombre debe ser iniciado
rápidamente
Penicilina
Tetraciclinas
Eritromicina
Clindamicina
Epidemiología y Prevención
Cadáveres de animales muertos
(suelo)
Hombre infecta por contacto
Medidas sanitarias
Inmunización con vacunas del
bacilo vivo atenuado.
Uso de guantes y mascarillas
 Bacillus cereus
Emético
Incubación: 6 h
Envenenamiento
Alimentario por Intoxicación
carne y salsa
Diarreico
Incubación: 1 a 24 h

Enterotoxina
 Género Clostridium
Grupo de bacilos Gram (+) anaerobios, esporulados. No
sobreviven en aerobiosis, pero las endosporas sobreviven
largos períodos.
Ampliamente distribuido en el ambiente y tracto intestinal
de especies animales incluido el hombre, puede causar
infecciones de origen exógeno y de origen endógeno.

Especies: Clostridium botulinum, Clostridium difficile,

Clostridium perfringens, Clostridium tetani.
Algunos tienen capacidad de producir potentes exotoxinas
responsables de ocasionar graves cuadros tóxicos.
 Especies del género Clostridium

C. perfringes
C. botulinum

C. difficile

C. Tetani
 Clostridium tetani
Características
Microbiota intestinal animal. Esporas en
suelo, especialmente sitios [animal ]
y descomposición vegetal.

Bacteria no invasiva requiere tejido

desvitalizado para germinar.
Bacilos fino Gram,(+) esporulado,
móvil, acapsulado y anaerobio estricto.
Presentan flagelos peritricos.
Escasa actividad metabólica. Las esporas son esféricas,
terminales y deforman a soma
Sintetiza toxinas: Tetanospasmina y bacteriano.
Tetanolisina (hemolisina O2– lábil).
Se encuentra en el ambiente.
Epidemiología

Fuente de infección :
Medio ambiente
Trasmisión:
Contaminación de
heridas por las esporas
Población de riesgo:
No vacunada o
vacunada
incorrectamente.
 Determinantes de patogenicidad
Por acción de un
PLASMIDO Toxoide
Sintetizada
Durante el
Crecimiento Por acción del formol
Se libera Exponencial
por autolisis
celular Toxina pasmogénica
(tetanospasmina)
Activada por
proteasa
Sinaptobrevina endógena

Hidroliza
Toxina Binaria Vacuna
L H
Metaloenzima
dependiente de Zn
 Transporte de la Neurotoxina Tetánica hasta su sitio de acción en el
Sistema Nervioso.

Después de liberada por la bacteria, la toxina viaja por vía linfática o circulatoria
hasta llegar a la unión neuromuscular. La toxina tetánica se transporta a través de
los axones motores dentro de vesículas e ingresa al sistema nervioso central por las
raíces anteriores hasta alcanzar las astas anteriores de la médula espinal donde se
acumula en los somas de las neuronas motoras. De allí, se libera retrógradamente
para actuar sobre las interneuronas inhibitorias espinales
Patogenia
del
Tétanos
 Manifestaciones clínicas
Periodo de Incubación: 4 días – varias
semanas
Formas Clínicas:
– Tétanos generalizado
– Tétanos localizado
– Tétanos Neonatal
 Tétano Síntoma Inicial: contractura o espasmo
Generalizado de los músculos que rodean la puerta
de entrada y trismus.

La afectación se limita a los músculos

próximos a la puerta de entrada, por que
Tétano
la toxina se fija a las zonas medulares
Local
de los nervios que lo inervan.
Puede evolucionar un tétano
generalizado.

Tras un periodo de 7 días aparece

dificultad o incapacidad de succión.
Espasmos musculares, trismus e
Tétano
Neonatal irritabilidad y rechazo a la limentación.
 Tétanos
Enfermedad.
Contracciones tónico clónicas
involuntarias dolorosas
Rigidez muscular
 Diagnóstico
Directo
Bacilos finos Gram (+) o (–), con una espora
esférica deformante terminal.

Cultivo e identificación
Siembra en agar sangre – anaerobiosis
Muestra se somete a un calentamiento (10 min),
para eliminar flora acompañante, se siembra e
incuba.
 Tratamiento
Medidas de sostén
Mantener funciones vitales y mitigar síntomas clínicos
hasta la eliminación de la toxina del sistema
nervioso.

Neutralización de la toxina
administrar toxoide específico o suero equino
antitetánico.

Eliminación de la fuente de producción de la

toxina.
Desbridización y drenaje.
 Clostridium botulinum
Producen botulismo
Debilidad muscular o
parálisis flácida
descendente y simétrica
(por ingestión de alimentos
con toxinas preformadas).
Características
Bacilos gram (+),
esporulados, móviles,
acapsulados, anaerobios
estrictos y prod. toxinas
Son proteolíticas o no.
Toxinas tienen 8 tipos Las esporas son ovales, subterminales
inmunogénicos (A – H) y distienden el soma bacteriano,
con flagelos peritricos
 Epidemiología
Reservorio : Medio
ambiente .
Trasmisión: Ingestión
conservas vegetales y
embutidos mal
INTOXICACION
procesados y
ALIMENTARIA contaminación de
heridas por esporas
Se destruye a 100ºC x
20 min/
BOTULISMO DE HERIDAS

Termoresistencia espora:
100ºC x 3-5 h
B
O
Determinantes de patogenicidad
Citoplasma

Se acumulan en
Se liberan
por lisis

Toxoide Neurotoxinas

Cadena proteica atoxica

(protoxina o toxina progenitora)
Activada por
enzimas proteolíticas
endógenas o exógenas

Son los venenos

mas potente Toxina Binaria
neuroparalíticos A B
PATOGENIA DEL
BOTULISMO
 Botulismo de heridas
Incubación: 4 – 14 d
Produce manifestaciones
neurológicas y de disfunción
autónoma, sin síntomas
gastrointestinales.

Intoxicación alimentaria
Incubación: 8 – 10 d Acción patógena
Produce manifestaciones
neurológicas y de disfunción
autónoma
Botulismo del lactante
Incubación: 8 – 10 d
Produce estreñimiento
y manifestaciones
neurológicas (dificultad en la
alimentación: succión, deglución).
Debilidad muscular e hipotonía
Diagnóstico Tratamiento
Muestras: Neutralizar o eliminar la toxina
Alimento sospechoso, heces, material de
Inducción del vómito o lavado
origen digest. exudados de heridas y gástrico
tejidos
Antitoxina Trivalente (A, B, E)
Presencia de la Toxina
Mantener las funciones del
Prueba neutralización en ratón. PCR huésped
Técnica inmunoenzimatica Función respiratoria
Desbridación y drenaje de la
Cultivo herida
Tratamiento térmico o c/ alcohol para
enriquecer la muestra Administración de
Medio no selectivo (agar yema de Antimicrobianos
huevo)
y selectivos.
No debe administrarse en casos de
formas vegetativas en el intestino
 Clostridium perfringes
Produce la Mionecrosis (gangrena
gaseosa), celulitis, Tosxiinfecciones
alimentarias, enteritis necrosante,
diarreas enterotoxicasno relacionada
con alimentos e infec. inespecíficas.

Bacilo Gram+, capsulado, esporulado,

inmóbil y anaerobio poco estricto.

Metabólicamente activo: es sacarolítico

y produce gas (H2 y CO2)

Se divide en 5 tipos: A, B, C, D, E.
(toxinas: alfa, beta, épsilon, iota) Bacilo corto y ancho, no suele
aparecer esporulado
En el hombre se da el tipo A (parte de
la flora normal del suelo e intestino
animales).
 Mionecrosis
(Gangrena gaseosa)

C.perfringens hemocultivo
 Epidemiología
Los pacientes con enfermedades vasculares subyacentes son más propensos
a manifestar gangrena gaseosa espontáneamente, la cual es de progresión
rápida y con frecuencia mortal.
 Determinantes de patogenicidad
Infecciones humanas
12 Son exotoxinas proteicas, (tipo A, alfa es letal
Toxinas Histotoxicas antigénicas y solubles dermonecrótica
y hemolítica)

Tiene acción en el íleon.

Enterotoxina Estimula la secreción
de agua y electrolitos. Actúa:

Fosfolipasa C
y
Neuraminidasa Esfingomielasa
Enzimas Colagenasa
Hialuronidasa
Desoxirribonucleasa
Gangrena gaseosa Celulitis necrotizante
Destrucción muscular y fascitis difusas
progresiva y toxemia Acción Patógena Se produce en tejidos
Incubación 1-4 d blandos

Intoxicación alimentaria
Incubación 8 24 h
Dolor abdominal y diarrea acuosa
sin sangre o moco
Se mantiene 12 – 18 horas
Desaparece espontáneamente
 Diagnóstico
Tinción Gram
Hay ausencia de PMN
(destruidos por la toxina
alfa)
Cultivo en agar sangre
y agar yema de huevo
en anaerobiosis
Actividad lecitinásica
se inhibe añadiendo
antisuero a la mitad de
la placa (prueba Nagler)
Tecnicas serológicas
Produce una doble hemólisis
para presencia de toxina
(una interna mas intensa tox. beta y
en heces una externa menos intensa tox.
alfa
 Tratamiento
Medidas quirúrgicas
Práctica de fasciotomias favorece la
irrigación muscular
Tratamiento antibiótico con Penicilina G,
clindamicina o metronidazol,
imipenem, meropenem
Oxigeno Hiperbárico (puro a 3 atm)
 Clostridium difficile
Produce Entercolitis
seudomembranosa

Bacilo Gram(+), esporulado,

móvil, capsulado y anaerobio

Sintetiza dos toxinas: A

(enterotoxina) y B( citotoxina)

Se encuentra en heces de
neonatos y lactantes (70%)

Son susceptibles a la infección

los ancianos y pacientes con
administración de antimicrob. Espora oval y subterminal
 Esporas y celulas
vegetativas de
Clostridium difficile son
ingestadas

Rectosigmoidoscopia C. Difficile se
multiplica en
Muchas celuas vegetativas el colon
son eliminadas en el
estómago, pero las esporas
Acción patógena superviven a los ácidos del
ambiente

Produce diarreas La mucosa de

los intestinos
asociada a Las esporas de C. difficile
Los flagelos facilitan el
movimiento del C. difficile,
facilita la
adherencia

antimicrobianos. germinan en el intestino delgado

para colonizar
un polisacárido de la cápsula el epitelio
sobre la exposicion a los acidos inhibe la fagocitosis
biliares

Por su espora
produce
una colonización
persistente.
Hay diarrea
sanguinolenta
retortijones,
leucocitosis y
fiebre.
Acción de la Toxina A
en C. difficile
Identificación in vitro de
especies de Bacillus
 Medios de cultivos
1. Tioglicolato
2. agar sangre,
3. agar chocolate y
4. agar nutriente.
5. PLET (B. anthracis.) (Polymyxin-Lysozyme-
EDTA-Thallous acetate)
Requerimientos atmosféricos
Dependen del grupo
• aerobias como aerobias facultativas y
• anaerobias.

Para esto sembramos en un caldo de Tioglicolato.

Realizaremos posteriormente
• un cultivo en medios de cultivos y
• las diferentes pruebas bioquímicas.
 Características de las colonias

B. anthracis colonias grandes, grises, opacas, chatas, de

bordes irregulares que remedan una cabeza de
medusa. Son no hemolíticos
B. cereus colonias grandes, blanco grisáceas, opacas,
beta hemolíticas
B. subtilis colonias grandes, chatas, con pigmento
naranja, pueden ser beta hemolíticas
Pruebas bioquímicas
Identificación de especies de Clostridium
 Medios de cultivos

1. Tioglicolato (enriquecimiento)
2. agar sangre
3. agar Brucella,
4. agar sangre PEA,
5. agar Schaedler,
6. agar sangre para anaerobios CDC,
7. Agar con yema de huevo (investigar la producción de
lipasa y lecitinasa)
 Requerimientos atmosféricos

La incubación se hará a 35-37ºC

en anaerobiosis (cámaras, jarras o bolsas con
generadores de atmósfera anaerobia).
Tiempo, de 18 – 24 horas
Características morfológicas de las colonias
 Pruebas bioquímicas
MATERIALES
Asa bacteriológica
Mechero
Tubos con caldo glucosado con sello
Tubos con caldo lactosado con sello
Tubos con gelatina bacteriológica con sello
Tubos con leche con sello
Tubos con medio SIM con sello
Cultivo Clostridium sesión anterior

PROCEDIMIENTO
Colocar los tubos de caldo glucosado, lactosado y leche en agua hirviendo, para extraerles el aire previamente
al desarrollo de la práctica.
Debe enfriar sin mover para evitar aireación
Sembrar cuidadosamente con el cultivo obtenido en la sesión anterior
Sembrar el tubo de gelatina por picadura e incubar a temperatura ambiente.
Incubar los tubos de caldo glucosado, lactosado y leche así como el medio de SIM a 37º C durante 48 hrs y
comparar con la siguiente tabla de pruebas bioquímicas e interpretar resultados.
Pruebas bioquímicas