Professional Documents
Culture Documents
12 Polimorfizm Mutasyon Tarama
12 Polimorfizm Mutasyon Tarama
tarama teknikleri
Yrd. Doç. Dr. Bengi ÇINAR KUL
Not:
Polimorfizm bireyin
herhangi bir gen açısından
en az 2 alleli olması
durumudur (A yada a gibi)
Bir popülasyonda aynı
gen için çok farklı
alleller olabilir
(multipleallelizm)
Polimorfizmin yararları
• Pedigrinin saptanması,soy testi, babalığın
belirlenmesi
• Polimorfik genlerden verim ve hastalıklara
dayanıklık ile ilgili işaret gen olarak yararlanılması.
• Tek yumurta ikizliğinin belirlenmesi (özellikle
sığırlarda önemli)
• Irkların kökenlerinin belirlenmesi, popülasyon
genetiği ve hayvan ıslahı çalışmaları.
• Polimorfizmin temelinde ne vardır?
1- DENATÜRASYON
2- PRİMER BAĞLANMASI DÖNGÜ
3- UZAMA
1- DENATÜRASYON
Çift sarmal DNA’nın yüksek sıcaklık altında (93-96⁰C)
çözülerek tek zincir hale geçmesidir. Hidrojen bağlarının
kırılmasıyla olmaktadır.
2- PRİMER BAĞLANMASI
Hedef bölgeye komplementer primerin tek iplik DNA’da
ilgili bölgeye bağlanmasıdır (54-64⁰C).
3- UZAMA
• DNA polimeraz enzimi, primerlerin ucuna kalıp DNA’ya
eşlenik bazlar (dNTP) ekleyerek yeni DNA iplikçiğini uzatır.
(70-72⁰C)
PCR Reaksiyonu için gerekenler:
• Kalıp DNA
• Primerler
• Sıcaklığa dirençli polymerase
– DNA Polymerase Thermus aquaticus
• dNTP
– (dATP, dTTP, dCTP, dGTP)
• Tampon çözelti + Mg++
• Thermocyler (ısı döngü cihazı)
• Animasyon
(http://www.youtube.com/watch?v=DkT6XHWne6E)
PCR ürünlerinin görüntülenmesi