Lekárska biofyzika – obsah štúdia

Biofyzika bunky, transportné mechanizmy

Pokojový membránový potenciál

Ján Jakuš

(www.jfmed.uniba.sk/index.php?id=2642)

Martin
 1. Lekárska biofyzika
- nie je FYZIKA ani MATEMATIKA
- je časť BIOFYZIKY- vedy, ktorá skúma fyzikálne
procesy v živých organizmoch
- interdisciplinárny odbor štúdia medicíny
- skúma fyzikálne zákonitosti v biologických
systémoch a účinok fyzikálnych javov na živé
systémy (ekobiofyzika)
- princípy Lekárskej biofyziky využívajú predmety
ako biológia, fyziológia a biochémia, etc
- vysvetľuje fyzikálne vlastnosti a biologické účin-
ky ionizujúceho a neionizujúceho žiarenia
- prináša nové metódy diagnózy a liečby ochorení,
dáva návrhy na konštrukciu nových lekárskych
prístrojov a nástrojov
2. Lekárska biofyzika v systéme vied
 3. Rozvoj mikro- a nanotechnológií
- štruktúry o veľkosti 10-6 a 10-9 m
- nanorúrky a fulerény sú zlúčeniny uhlíka
- do nanorúrky alebo fulerénu môžeme
"vložiť iný atóm či atómy, čím zmeníme
ich vlastnosti.
- v medicíne - mohli by slúžiť ako "doprav-
covia" liekov na presne určené miesto v
ľudskom tele. Fulerén by predstavoval
obal, vo vnútri ktorého by bol prepravo-
vaný liek a po dopravení na dané miesto
by liek uvoľnil, alebo by vytvoril “ nano-
robot“ – liečenie ochorení
Fulerén Nanorúrka

DNA – nanočip
Nanoroboty v genetickom inžinierstve
Nanorobot „opravuje“ chorý neurón
 4. Ľudská bunka
- základná anatomická a funkčná jednotka
- veľkosť 5-120 µm, počet 60000 miliárd
- znaky: metabolizmus, dráždivosť,
reprodukcia
- súbor buniek tvorí tkanivo, súbor tkanív
orgány (206 kostí a cca 600 svalov )
- zloženie: povrchová membrána, cytoplazma,
organely (jadro, jadierko, mitochondrie,
Golgiho komplex,endoplazmatické
retikulum, ribozómy...pozri biológiu)
 Bunková membrána
- intracelulárna (na povrchu organel)
- plazmatická, pokrýva povrch buniek
- polopriepustná (semipermeabilná), hrúbka
cca 7,5 ηm
- zloženie: 2 vrstvy lipidov (lipidická dvojvrstva)
+ 2 vrstvy bielkovín + cukry + cholesterol
- u lipidickej 2-vrstvy rozlišujeme tzv. hydrofilné
hlavy a hydrofóbne chvosty
- „hlavy“ sú tvorené fosfátmi, vo vode sú
rozpustné, s kladným (+) nábojom, „chvosty“
sú mastné kyseliny so záporným (– ) nábojom
 Plazmatická membrána
-
;
 Chemické zloženie a funkcia membrán
- 45% tukov (fosfolipidy + cholesterol)
- 55% proteínov (na povrchu sú plazmatické
proteíny.Tie prestupujúce membránou sú
integrálne). Proteíny vytvárajú stabilné otvory
v membráne, ale aj nestabilné dynamické
iónové kanále (pre Na+,K+,Ca2+... ).
- Glykoproteíny na povrchu slúžia ako
receptory pre väzbu hormónov a prenášačov.
Iné tvoria enzýmy (Na-K ATP-áza čo je tzv. Na -
K pumpa)
- Funkcia membrán: rozdeľovacia (voda, soli, el.
náboj), integračná (transportné mechanizmy)
Membrány sú elektricky polarizované (zvonka
sú kladne a zvnútra záporne nabité) a
 5. Transportné mechanizmy bunky
- sú vitálne dôležité pre metabolizmus
buniek, pre tvorbu pokojového membrá-
nového, ako aj činnostného elektrické-
ho potenciálu
- Rozdelenie: A.PASÍVNY transport
(jednoduchá difúzia, uľahčená difúzia,
osmóza, filtrácia ) – nevyžadujú dodanie
voľnej energie
B. AKTÍVNY transport (Na-K
pumpa, Ca-pumpa, H-pumpa, exocytóza,
fagocytóza, pinocytóza)- vyžadujú dodanie
voľnej energie (z ATP)
Pasívny transport – Jednoduchá difúzia

Definícia:
je to samovoľný, pasívny pohyb vody a rozpus-
tených látok cez bunkovú membránu, z miesta s
vyššou do miesta s nižšou konc. v smere koncen-
tračného gradientu, ktorý sa riadi Fickovým záko-
nom:
Q = -d.A.(S1-S2 )
[Q- hustota dif. toku, -d- koef.difúzie, A- difúz.
plocha,S1,S2 - konc. gradient]
Difúzia sa zastaví pri vyrovnaní konc. látok v
oboch kompartmentoch, pričom objem roztoku
v nich zostáva rovnaký. Difundujú: plyny, ióny,
chem. Látky - cez lipid. dvojvrstvu a bielk.kanále.
3 druhy: Jednoduchá, Cez bielk. kanále, Uľahčená
Jednoduchá difúzia cez memebránu
 Difúzia cez bielkovinové kanále-je
Pasívny transport iónov Na+, K+, Ca2+, Cl- a
nízkomolekul. vo vode rozpustných látok cez
bielkovinové kanále uložené v membráne, na
základe koncentračného gradientu. Kanále sa
otvárajú pri zmene napätia na membráne ( volta-
ge gated ),alebo ligandom-hormón ( ligand gated )

Filtrácia
Pasívny transport iónov, solí a živín cez bielkov.
kanále v membráne na základe tlakového grad.
hydrostatického tlaku (nie koncentračného
gradientu !) (napr. v kapilárnej kľučke, v glomeru-
le obličky )
Napäťovo a ligandom riadené
proteínové kanále
Uľahčená (facilitovaná) difúzia
 Uľahčená (facilitovaná) difúzia
je to pasívny transportný mechanizmus
prenosu vačších molekúl (aminokyseliny)
pozdĺž koncentračného gradientu, pričom
prenášaná látka sa viaže na bielkovinový
prenášač uložený v bunkovej membráne
(tvar nožníc)
po naviazaní látky prenášač prechádza
konformačnými zmenami
výsledkom je prenos naviazanej látky a jej
vylúčenie na druhej strane membrány, bez
dodania voľnej energie
 Osmóza
- pasívny transport výlučne len molekúl
vody, ktorá prechádza membránou z
miesta s nižšou do miesta s vyššou
koncentráciou až do vyrovnania kon-
centrácií, Pritom dochádza ku zmenám
objemu.
- voda má snahu zriediť konc. prostredie,
ktoré má vyšší osmotický tlak
- rýchlosť osmózy sa riadi Vant´ Hoffovým
zákonom, Závisí úmerne od počtu rozp.
častíc (osmotického tlaku) a od teploty
- zisťovanie osmot. odolnosti krviniek-viď
praktiká
Osmóza schematicky
Zmeny objemu červených krviniek
v roztokoch v dôsledku osmózy
 AKTíVNY TRANSPORT
- transport molekúl proti smeru koncentrač.
a/alebo elektrického gradientu
- dodanie energie je nutné (Energia vzniká
hydrolýzou ATP)
- rozdelenie: Primárny aktívny transport
prenos iónov cez špecifické iónovo selek-
tívne kanále. Pumpy : Na-K+ sodíková
(všetky bunky), Ca 2+- vápniková (sval), H +-
protónová (sliznica žalúdka)
Sekundárny aktívny transport
prenos látok (napr. glukóza), naviazaním na
ión, ktorý sa prenáša cez membránu aktívne
napr. Na ( glukózo-Na+ kotransport ).
 Na+- K+ ATP-áza (sodíková pumpa)
- Je to enzým, uložený v membráne buniek
(počet 106 v membráne neurónu )
- prenáša 3 ióny Na+ zvnútra bunky navo-
nok a 2 ióny K+ zvonka dovnútra
- pri max. rýchlosti prenesie 200 Na+ a 133
K+ iónov / s
- vyžaduje dodanie voľnej energie (z ATP)
- je dôležitá pre obnovu elektrických nábo-
jov na membránach buniek ( obnovuje
pokojový membránový potenciál bunky)
Sodíková pumpa schematicky
Na +- K+ pumpa - detail
 EXO - ENDO-FAGO- a PINOCYTÓZA
- považované za aktívne deje, pritom látky sa
neprenášajú cez lipidickú dvojvrstvu a bielk.
kanále membrán, ale sa dostávajú dnu a
von z bunky vchlípením, príp.vychlípením
bunkovej membrány
- príklad exocytózy (bunkové „zvracanie“ ) :
vylúčenie mediátora v synapse
- príklad endocytózy : pohltenie tuhých lá-
tok, napr. baktérií bielymi krvinkami a ich
usmrtenie (fagocytóza)
- pinocytóza - pohltenie kvapalného obsahu
Exocytóza a endocytóza
6. Pokojový membránový potenciál-PMP
- Je potenciálový rozdiel (el. napätie) namerané
medzi + nabitým povrchom a záporne nabitým
vnútrom bunky.
- Je dôsledkom rozdielnej priepustnosti
bunkovej membrány pre ióny K+,Na+, Cl-,, čo
vedie k ich nerovnomernému rozloženiu
zvonka a zvnútra bunky
- Priepustnosť pre K+: Na+ : Cl- = 100 :4 : 45 (%)
PMP bunky je dôsledkom najmä difúzie iónov
K+ v smere konc. gradientu zvnútra bunky na-
vonok.Proti konc. gradientu K+pôsobí gradient
elektrický-výsledkom je vznik rovnovážneho
potenciálu, ktorý sa dá vypočítať (Nernstova a
Goldmanova rovnica)
- Hodnoty PMP: -70 mV neurón, -90mV kostrový
sval,-80 mV srdcový sval, -50 mV hladký sval.
Rozloženie iónov na membráne a ich
koncentračné a elektrické gradienty
 Rovnovážny potenciál (RP)
Rovnovážny potenciál je také elektrické napätie
na membráne, ktoré zastaví difúziu iónov putujú-
cich v smere konc. gradientu, takže účinok konc.
a elektrického gradientu sa vyrovnajú.
Nernstova rovnica: je statická, berie do úvahy
výpočet RP separátne pre ióny K+, Na+,Cl-,napr.
RPK+ = R .T . ln [Ke]
z.F [Ki]
kde[ R - plyn. konstanta, T - absol. teplota, z - mo-
censtvo K+, F - Faradayova konštanta]
Neberie do úvahy preiepustnosť membrány !
Výpočet Rovnovážneho Potenciálu pre K+
 GOLDMANOVA ROVNICA
- Je dynamická, berie do úvahy toky všetkých 3
hlavných iónov K+, Na+ a Cl- , priepustnosť mem-
brány a velkosti ich RP v kludovom stave ,takže
výsledkom výpočtu je reálna hodnota pokojového
membránového potenciálu (Vm)
Ďakujem za pozornosť !