Faculté de Médecine d’Alger

Département de Médecine
2ème année de Médecine

CMH et implication en médecine

Pr. Habiba . AMROUN-AITBELKACEM

Année universitaire 2019/2020

 Introduction

 La transplantation d’organes permet le traitement de nombreuses pathologies liées à des déficiences de fonctions

vitales.

 Principal obstacle : Phénomène de rejet.

 Ce rejet dépend essentiellement de la réaction immunologique du receveur contre l'organe greffé.

 Plusieurs formes de rejets existent: Se caractérisent par :

 Le moment de leur survenue.

 Les mécanismes immunologiques mis en jeux.

 Les types de lésions constituées au niveau du greffon.

 Définitions

Transplantation:
Prélèvement d’un organe sur un donneur et implantation chez un receveur avec rétablissement
de la continuité vasculaire.
Exemple: Rein, foie, poumon, cœur.

Greffe:
Transposition de tissus ou de cellules chez un receveur sans anastomose vasculaire.
Exemple: Peau, cornée, MO.
Introduction

La transplantation
rénale

Traitement de CHOIX +
+
Progrès réalisés dans la compréhension
des mécanismes de la REPONSE
IMMUNE dirigée contre le greffon.

Obstacle= Phénomène
de REJET
 Définitions

Selon la relation génétique liant le donneur et le

receveur:

Autogreffe

Isogreffe
D et R =
même individu
Allogreffe

D et R = génétiquement
identiques Xénogreffe

D et R= même espèce mais

génétiquement différents.

D et R = d’espèce
différentes.
 e g re ff e
Re je t d
 e g re ff e
Re je t d
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Allo antigènes

types d’allo Ag sont particulièrement impliqués :

 Les antigènes majeurs d’histocompatibilité.

 Le système antigénique ABO.

 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Allo antigènes

Trois types d’allo Ag sont particulièrement impliqués :

 Les antigènes majeurs d’histocompatibilité.

 Les antigènes mineurs d’histocompatibilité.

 Le système antigénique ABO.

 Réponse immunitaire aux allo antigènes

Etapes de la réponse:

1. Initiation de la réponse immunitaire.

2. Activation des lymphocytes.

3. Génération des effecteurs.

4. Agression du parenchyme.
 IV. Réponse immunitaire aux allo antigènes
A- Initiation de la réponse

Ischémie/
Reperfusion

ROS CD

TLR
DAMPS
« HMGB1, HSP »
GREFFON

Chimiokines
Selectines OLS
Cellule endothéliale

C. Brick et al. /Néphrologie & Thérapeutique 7 (2011) 18–26

 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Voies d’allo reconnaissance

Allo reconnaissance DIRECTE

CD8+ LT allo réactif

CD4+ Receveur
TCR

CMHI

CMHII

CD du DONNEUR

 Ce mode de reconnaissance n’obéit pas à la loi de restriction au CMH du soi.

American Journal of Transplantation : 10.1111/j.1600-6143.2011.03863.x

 IV. Réponse immunitaire aux allo antigènes
B- Voies d’allo reconnaissance

Allo reconnaissance DIRECTE

L’allo reconnaissance directe constitue une forme de mimétisme

moléculaire

LT LT

peptide Peptide
Allo génique

CMH du soi CMH allo- génique

Les LT assimilent la structure 3D de complexe CMH allogénique/PP à celle du CMH autologue/PP

American Journal of Transplantation : 10.1111/j.1600-6143.2011.03863.x

N Engl J Med 2010;363:1451-62
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
B- Voies d’allo reconnaissance

Allo reconnaissance DIRECTE

L’allo reconnaissance directe est à l’origine:

 Première vague de stimulation allogénique.

 Génération de cellules cytotoxiques spécifiques de l’allogreffe.

 Réaction d’hypersensibilité retardée.

Rejet aigu cellulaire

 Réponse
Réponse immunitaire
immunitaire aux
aux allo
allo antigènes
antigènes
Voies d’allo reconnaissance

Allo reconnaissance INDIRECTE

CD8+
CD4+
TCR

Matériel CMHI
Allogénique
CMHII

CD du Receveur

American Journal of Transplantation : 10.1111/j.1600-6143.2011.03863.x

N Engl J Med 2010;363:1451-62
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Voies d’allo reconnaissance

Allo reconnaissance INDIRECTE

L’allo reconnaissance indirecte est à l’origine:

 Réponse qui Durera aussi longtemps que le greffon est en place.

 Génération d’allo anticorps.

Rejet aigu humoral et rejet Chronique.

Réponse immunitaire aux allo antigènes
Activation des LT CD4+

CD

LT

L’activation des LT CD4+ nécessite

l’association de 4 signaux
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Activation des LT CD4+

1er signal: Calcium et calcineurine dépendant

CMH
CD4

Ca++
TCR

IP3 PIP2

DAG
Lck Fyn
Ca++ Zap 70
PKC
calmoduline
Ras
RAF-1
MEK
calcineurine NFKB MAPK

NFAT AP-1

Nx
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Activation des LT CD4+

2eme signal: Signal de co stimulation

ICOS L ICOS

CMH II TCR

LBF T naïf
CD
CD80 86 CD28

CD40 CD40 L
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Activation des LT CD4+

L’action conjointe des signaux 1 et 2 aboutit :

 Au passage de la phase G0 à la phase G1.

 Synthèse de l’IL-2.

 Expression de la chaine α du récepteur de l’IL-2 « CD25 ».

 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Génération des effecteurs

LB
IL-2
IL-4
CD IL-5
CD4+

IL-2 IFN-γ
Mo
CD8+ TNF- α

NK
CTL
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Infiltration du greffon

Vx sanguin

L- Selectines VLA-4 Endothélium

LFA-1
CD34
VCAM-1 vasculaire
ICAM
CCl-2

Rooling CCl-5

Adhésion
Ferme Migration
Trans- Greffon
endothéliale

TRENDS in Immunology Vol.24 No.6 June 2003 3

Annu. Rev. Pathol. Mech. Dis. 2008. 3:189–220
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Agression du parenchyme

Cytotoxicité des Lymphocytes T

CTL CTL

TCR FAS-L

Perforine
FAS
CMH I Granzyme

Cellule du greffon Cellule du greffon

Annu. Rev. Pathol. Mech. Dis. 2008. 3:189–220

 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Agression du parenchyme

Réaction de type hypersensibilité retardée « DTH »

Vx Sanguin

NO
TNF-α
TNF-α

Mo
Greffon TH1
IFN-γ

Annu. Rev. Pathol. Mech. Dis. 2008. 3:189–220

 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Agression du parenchyme

Action médiée par les LB

LB

Activation Cytotoxicité dépendante des Ac

du complément « ADCC »
« V Classique »
 Réponse immunitaire aux allo antigènes
Agression du parenchyme

Activation du complément

Ig
Ag
Cible
C1
C3a

C5a
Cellule C4 C2
Du greffon

C4b C2a C3 CAM

C4d
C4c

Activation de la voie classique du complément

IV. Réponse immunitaire aux allo antigènes
Agression du parenchyme

ADCC

Perforine
Granzyme

NK
 Types de rejet
Le rejet de greffe : la reconnaissance des antigènes allogéniques du Donneur par le
système immunitaire du Receveur.
03 Types de rejet:

Hyper aigu Chronique

Aigu

Cellulaire Vasculaire
 Types de rejet d’allogreffes:
Rejet Hyper aigu

 Minutes ou heurs « ≈1-2Heurs » suivant la reperfusion de l’organe.

 Conséquence de la présence d’allo Ac préformés chez le receveur:

 Naturels : contre les Ag AB.

 Contre les Ag HLA (Transfusions, grossesses, greffes antérieurs.).

 Cellule cible : Cellule Endothéliale.

 Types de rejet d’allogreffes:
Rejet Hyper aigu

CE

Thrombose
Facteur de
C3a, C5a Von Willebrand
! ! !
!! !
! ! !
!
Activation des CE

CE activée

Ac
préformé plaquette

Complément Allo Ag

CAI J, TERASAKI PI. Hum Immunol 2005a, 66 : 334-342

 Types de rejet d’allogreffes:
- Rejet aigu

 Se manifeste dans les:

02 semaines 03 mois

 Fréquence: 10-15%

 Deux types:

 Rejet aigu cellulaire « RAC »: 90%

 Rejet aigu humoral « RAH »: 20-30%

 Biopsie du greffon : Détermination du type de rejet.

Néphrologie & Thérapeutique (2008),4 173-180

 Types de rejet d’allogreffes:
Rejet aigu

Facteurs de risque

1. Ischémie/Reperfusion.

2. Nombres de Mismatch HLA.

3. DSA « Donor Specific Antibody ».

4. TRT Immuno suppresseur inadéquat.

5. Retard de reprise de la fonction du greffon.

Néphrologie & Thérapeutique (2008),4 173-180

Types de rejet d’allogreffes:
- Rejet aigu

Rejet Aigu humoral

Biopsie: Dépôt de C4d

•Produit de dégradation du C4.

•Liaison covalente avec la surface de la CE et de la
membrane basale

•Caractéristique de l’ AMR:Antibodies Mediated Rejection.

•Spécificité: 100%
•N’est retrouvé que dans30% Des rejets aigus.

J Am Soc Nephrol 2007;18:1046-56

 Types de rejet d’allogreffes:
- Rejet Chronique

 Dysfonction chronique d’allogreffe:

 Déclin progressif le plus souvent irréversible de la fonction rénale se développant plus de 3

mois après la transplantation.

 Entité hétérogène, liée à des agressions immunologiques et non immunologiques.

 l o r a t i o n
E xp q u e
u n o l og i
imm
 Exploration immunologique en transplantation
rénale
DONNEUR RECEVEUR

+++ Suivi sérologique +++

Rein
Groupage ABO
Recherche et identification Tous les 3 mois
des  Après chaque
Typage HLA : A,B,DR B1, DQ événement immunisant
Anticorps anti-HLA I et II
(grossesse-transfusion)
préformés

Sur un panel Lymphocytes T et B

d’Antigènes HLA du donneur
classe I et II connus Cross Match
+ Recherche et identification des
anticorps anti HLA en post greffe Prévention du rejet
hyperaigu
 Exploration immunologique en transplantation
rénale
A- Typage HLA: 1. Sérologie :  spécificité : Ag HLA
DR4 DR5 - Microlymphocytotoxicité (LCT)

B8

DQ2 DP1
A A3 B7 DR 4 DQ2 DP1
B A2 B8 DR5 DQ3 DP2
A2
DQ3

A3 2. Biologie moléculaire :
ADN  allèles HLA
DP2 - PCR-SSO (PCR-sequence specific probes)
- PCR-SSP (PCR-sequence specific primers)
- PCR- SBT (Sequence Based Typing)
Exploration immunologique en transplantation
rénale

A- Typage HLA: Par LCT

Exploration immunologique en transplantation
rénale

A- Typage HLA: Par LCT

Exploration immunologique en transplantation
rénale

A- Typage HLA: Par LCT

Exploration immunologique en transplantation
rénale

A- Typage HLA: Par Biologie

Moléculaire
Exploration immunologique en transplantation
rénale

A- Typage HLA: Par BM

Exploration immunologique en transplantation
rénale
Recherche et identification des Ac anti HLA:

Par ELISA

Par immunofluoromètrie
en flux Luminex

C- Recherche et identification des Ac anti HLA:

Exploration immunologique en transplantation
rénale

C- Recherche et identification des Ac anti HLA: ELISA

 Recherche et identification des anticorps anti-HLA par technique luminex :

Laser vert
Quantification
PE Le laser vert analyse la fluorescence à la
surface de la microbille, la quantifie par
Ac du
rapport à une calibration. Celle-ci étant
patient
directement proportionnelle à la
Ag quantité de conjugué fixé.
Conjugué:
Anti IgG-PE

Bille Identification
Le laser rouge identifie la signature de
Laser rouge chaque microbille et par extension de
chaque antigène ou anticorps
 Identification des anticorps anti HLA: Haute
définition
Single ANTIGEN
 Utilisation de molécules HLA recombinantes (Classe I et classe II) 96 billes Luminex
 Chaque bille ne porte qu’une spécificité HLA
 Technique plus sensible et plus spécifique que l’ELISA et LCT.

M. Resse et al. / Human Immunology 74 (2015)

l’utilisation du Luminex permet:

 Permet de préciser le statut immunologique du malade : NON IMMUNISE

IMMUNISE
HYPERIMMUNISE

 améliorer la définition des antigènes acceptables ou permis (anticorps négatifs) et

des antigènes inacceptables ou interdits (anticorps positifs).
 Anticorps spécifiques du donneur: DSA

 L’interprétation clinique des résultats issus des techniques en phase solide est
basée sur de nombreux facteurs: la densité , le type d’antigène et la valeur du MFI.
C. Giannoli et al, 2011.
Exploration immunologique en transplantation
rénale

D- Cross match par LCT

 HLA et Maladies
 Cherchent à mettre en évidence des gènes de susceptibilité à certaines maladies
dans la région du CMH.
 Etude d’association :
Entre le caractère maladie et un ou des allèles du locus HLA.
Par comparaison de la fréquence de cet allèle HLA chez les patients à celle d’un
échantillon de témoins non apparentés .

Pour mesurer l’intensité de cette association on utilise le plus souvent le risque

relatif,=RR pour chaque antigène .
 HLA et Maladies
 Si RR >1 Le risque de faire la maladie est d’autant plus élevé
pour le sujet portant le marqueur.

Marqueur HLA Présent Absent

Malades a b
Témoins c d

RR= a x d
bxc
 HLA et Maladies
 Etude de liaison : ( etudes familiales)
Ne peut se faire que sur des familles présentant plusieurs malades dans la même
fratrie .
HLA Maladie Effet
B27 Spondylarthrite Susceptibilité
ankylosante
DR3/DR4 Diabète Insulino- Susceptibilité
dépendant
B51 Maladie de Behçet Susceptibilité

DR2 Sclérose en plaques Susceptibilité

DQ2/DQ8 Maladie Coeliaque Susceptibilité