Analele SNBC Vol.

XIII/2008

CAP. II Date Morfofiziologice i Biochimice

INFLUENA RASEI ASUPRA PROFILULUI BIOCHIMIC AL SERULUI RECOLTAT DE LA OVINE Elena ogorescu1, Stela Zamfirescu2, Andreea Hortanse Anghel1
LABORATORUL DE REPRODUCIE I BIOTEHNOLOGII, ICDCOC PALAS, CONSTANTA; 2 FACULTATEA DE TIINE ALE NATURII I TIINE AGRICOLE, UNIVERSITATEA OVIDIUS, CONSTANTA, ROMANIA
1

Abstract. The research objective was observation about influence of race at serum biochemical profile recovered from sheep into Laboratory of Sheeps and Goats Reproduction and Biotechnologies from ICDCOC Palas Constanta. The research experiments was realized at 3 sheep lots of Australian Merinos (experimental lot no. 1), prolifically type (experimental lot no. 2) and Merinos of Palas (experimental lot no. 3) (N=60). Blood samples were recovered from jugular vein of experimental sheeps at November 2007- January 2008 and biochemical analyses were realized with Balmed kits. For stabilized the biochemical profile was observed next sanguine parameters: total proteins (g/l), alkaline phosphatase (U/L), acid phosphatase (U/L), TGP (U/L), TGO (U/L), creatine kinase (U/L), uric acid (mg/dl), creatine (mg/dl), urea (mg/dl), triglycerides (mg/dl), calcium (mg/dl), HDL- cholesterol (mg/dl) and LDL- cholesterol (mg/dl) with a SP 830 Plus spectrophotometer. Comparative with literature references the biochemical values from experimental sheep was increased for total proteins (experimental lot no. 1- Australian Merinos - 107,29 1,24 g/l vs experimental lot no. 2- prolifically type 99,69 1,44g/l vs experimental lot no. 3- Merinos of Palas - 96,711,33 g/l, p<0,05). Other biochemical determinations of sheeps were included in normal limits but existent a significant variation in function of race. Key words: sheep, biochemical profile Abstract. Obiectivul cercetrilor tiinifice efectuate a fost observarea influenei rasei asupra profilului biochimic al serului recoltat de la ovine, n cadrul Laboratorului de Reproducie i Biotehnologii a Ovinelor i Caprinelor din cadrul ICDCOC Palas. Experimentele s-au realizat pe 3 loturi de ovine de rasele Merinos Australian (lotul experimental 1), tipul prolific (lotul experimental 2) i Merinos de Palas (lotul experimental 3) (N=60). Probele de snge s-au recoltat din vena jugular de la ovinele experimentale (N=60) n perioada noiembrie 2007 ianuarie 2008, analizele biochimice fiind realizate cu ajutorul kiturilor Balmed. La stabilirea profilului biochimic s-au observat urmtorii parametri sanguini: proteine totale (g/l), fosfataza alcalin (U/L), fosfataza acid (U/L), TGP (U/L), TGO (U/L), creatin kinaza (U/L), acid uric (mg/dl), creatinina (mg/dl), ureea (mg/dl), trigliceride (mg/dl), calciu (mg/dl), HDL- colesterol (mg/dl) i LDL- colesterol (mg/dl) spectrofotometrul SP 830 Plus. Comparativ cu referinele de specialitate, valorile biochimice pentru oile experimentale au fost crescute n cazul proteinelor totale (lotul 1- Merinos Australian- 107,29 1,24 g/l vs lotul 2- tipul prolific99,69 1,44g/l vs lotul 3- Merinos de Palas - 96,711,33 g/l, p<0,05). Celelalte determinrii biochimice pentru ovine, se ncadreaz n limitele normale, existnd o variaie semnificativ n funcie de ras. Cuvinte cheie: ovine, profil biochimic

Introducere

Rezistena natural i capacitiile adaptative ale animalelor, circumstanele tehnologiei avansate n nutriia ovinelor sunt influenate de diferii factori precum: regimul de hranire i punat, condiii climatice i de mediu, microclimatul, transportul, activitile terapeutice i - 137 -

imunopreventive, stresul prelungit i puternic reduc mecanismele de adaptare ale animalelor, cresc sensibilitatea lor la ageni patogeni i scad calitatea produciei determinnd pierderi economice. Factorii precum: concentrarea unui numr mare de ovine ntr-un spaiu limitat, micrile lor, hrnirea animalelor cu promotori de

Analele SNBC Vol. XIII/2008

CAP. II Date Morfofiziologice i Biochimice

hrnire, neasigurarea proteciei animalelor mpotriva agenilor patogeni i a paraziiilor pot determina tulburri ale metabolismului i alterarea homeostaziei ( Binev i colab., 2006). Condiia fiziologic, nutriional i patologic poate fii determinat cu ajutorul parametrilor biochimici din snge (Jain, 1986; Bush 1991; Awah i Nottidge, 1998). Nutriia, vrsta, sexul, reproducia, adpostul , mediul nconjurtor, stresul i transportul au influen asupra parametrilor biochimici att la animalele din regiunile tropicale ct i la cele din regiunile temperate (Ogunrinade i colab., 1981; Bush, 1991; Ogunsanmi i colab., 1994). Obiectivul cercetrilor tiinifice efectuate a fost observarea influenei rasei asupra profilului biochimic la ovine, n cadrul Laboratorului de Reproducie i Biotehnologii din cadrul ICDCOC Palas, n perioada noiembrie 2007 ianuarie 2008, pe 3 loturi de animale experimentale (N=60).

anticoagulant (EDTA) sunt centrifugate la 3500-4000 rot/minut timp de 10 minute- la temperatura camerei, plasma fiind ndeprtat cu grij de eritrocite, apoi probele de plasm sunt introduse n flacoane sterile fiind congelate pentru realizarea de determinrii biochimice ulterioare. La stabilirea profilului biochimic, s-au folosit seruri de la ovinele din cele 3 loturi experimentale, urmrinduse urmtorii parametri sanguini: proteine totale (g/l), fosfataza alcalin (U/L), fosfataza acid (U/L), TGP (U/L), TGO (U/L), creatin kinaza (U/L), acid uric (mg/dl), creatinina (mg/dl), ureea (mg/dl), trigliceride (mg/dl), calciu (mg/dl), HDLcolesterol (mg/dl) i LDL- colesterol (mg/dl) utilizndu-se spectrofotometrul SP 830 Plus.

Rezultate i discuii

Material i metode
Experimentele s-au realizat pe 3 loturi de ovine de rasele Merinos Australian (lotul experimental 1), tipul prolific (lotul experimental 2) i Merinos de Palas (lotul experimental 3) (N=60). Loturile experimentale au fost ntreinute n boxe separate, mieii avnd acces liber la ap i furaje. Probele de snge s-au recoltat din vena jugular, pe i fr anticoagulant, de la ovinele experimentale (N=60) n perioada noiembrie 2007 ianuarie 2008, analizele biochimice fiind realizate cu ajutorul tehnicilor curente i a protocolului de lucru recomandat de firma care a furnizat trusele Balmed. Probele de snge recoltate fr EDTA (anticoagulant) n eprubete numerotate corespunztor loturilor experimentale sunt lsate la exprimat la incubator timp de 1,5 2 ore. Probele de ser obinute sunt colectate cu ajutorul unor seringii i sunt introduse n eprubete de centrifug fiind centrifugate la 3500-4000 rot/minut timp de 10 minute, la temperatura camerei. Probele de snge pe 138

Modificrile calitative i cantitative n compoziia biochimic a sngelui i a componentelor sale pot fii indicatori ai statusului fiziologic al organismului i pot caracteriza profilul metabolic i constiional al animalelor de ferm n corelaie cu variabilitatea genetic i ereditatea caracteristicilor animalelor de ferm (Galzko, 1990; Al Sadi,1995 citai de Pastorama i colab., 2000). Indicatori fiziologici i biochimici au rol important n caracterizarea fenotipului individual, relaiei animal- sistem de cretere, greutatea i viabilitatea animalelor (Jelinek i colab., 1987; Hoode i Nagvi, 1990; Golberg, 1992; Nagvi i colab., 1991 citai de Pastorama i colab., 2000). Cel mai semnificativ factor extern care are influen considerabil asupra condiiei fiziologice i a homeostaziei corporale la animale este hrnirea (tipul i cantitatea hranei, raia diferiilor nutrieni, dieta bazat pe proteine, carbohidrai, grsimi i macroelemente). Acest lucru s-a observat la animalele din loturile experimentale (13) care au prezentat o uoar hiperproteinemie (fig 1) datorit alimentaiei bogate n proteine i carbohidrai.

Analele SNBC Vol. XIII/2008

CAP. II Date Morfofiziologice i Biochimice

Fig. 1: Evoluia proteinelor totale, fosfataza alcalin, fosfataza acid, TGP i TGO n funcie de ras intracelulare eliberate n circulaia n funcie de ras, proteinele totale sangvin pot indica distrugerile celulare. au variat nesemnificativ la animalele din Valorile biochimice TGP i TGO pentru loturile experimentale (lotul 1- Merinos lotul 1 Merinos Australian (59,64 Australian- 107,29 1,24 g/l vs lotul 232,77; 95,0121,36 U/l, p<0,05), au tipul prolific- 99,69 1,44g/l vs lotul 3variat semnificativ comparativ cu lotul 2Merinos de Palas - 96,711,33 g/l, tipul prolific (74,690524,50 ; p<0,05). Valoarea proteinelor totale a 77,690023,89 U/l) i lotul 3- Merinos de diferit nesemnificativ n funcie de ras Palas (86,5028,21 ; 89,8123,58 U/l, nici n rezultatele obinute de Binev i p<0,05 ). Diferene semnificative ale TGP colab, 2006 - 69,93 1,65 g/l pentru lotul i TGO ntre rasele de ovine au fost de ovine Ile de France i 70,422,42 g/l observate i de ali autori Pastorova i pentru lotul de ovine Merinos Trakia, dar colab., 2000 ( 0,370,09; 0,850,18 kat/l i n cazul studiilor realizate de Masek, pentru Merinos Slovacic vs 0,28 0,07; 2007- 71,6 1,26 g/l, p<0,01 pentru rasa 0,710,15 kat/l, p<0,01 pentru Merinos Friz estic ncruciat cu Istrian. Valahian). Aceste diferene semnificative Rezultate similare au fost prezentate i de ale valorilor GPT i GOT ntre rasele de Kaneko i colab., 1997 i Ricardeau i ovine au fost confirmate i de Vrzgula i colab., 2006. Valorile fosfatazei alcaline au colab. (1990) i Goldberg i colab. (1992). variat n funcie de ras, pentru toate cele Valorile biochimice ale creatin kinazei trei loturi experimentale (lotul 1- Merinos (CK, fig. 2) obinute pentru cele 3 loturi Australian - 685,4159,48 U/l vs lotul 2experimentale au fost variabile n funcie tipul prolific- 654,53 16,84 U/l vs lotul 3ras (141,8460,94 U/l vs 119,0735,89 Merinos de Palas -490,0916,31 U/l, U/l vs 125,4635,98 U/l, p<0,05). p<0,05). Rezultate similare au fost obinute Rezultate similare au fost obinute i de de Masek, 2007 pentru rasa Friz estic Masek, 2007, care a studiat activitatea ncruciat cu Istrian (220 U/l, p<0,01 ). creatin kinazei pentru rasa Friz Estic Rezultatele obinute pentru fosfataza acid ncruciat cu Istrian (1220,02 U/l, au fost diferite pentru cele trei loturi p<0,01). Pastorova i colab., 2000, nu au experimentale de ovine (lotul 1 - Merinos nregistrat creteri sau scderi Australian- 17,90 8,18 U/l vs lotul 2semnificative ale activitii creatin kinazei tipul prolific- 17,719,84 U/l vs lotul 3pentru Merinos Slovacic (0,16 0,06 Merinos de Palas- 14,838,24 U/l, kat/l, p<0,01 ) i Merinos Valahian (0,18 p<0,05). Determinrile biochimice ale 0,05 kat/l, p<0,01). TGP i TGO sunt foarte importante n diagnosticul clinic. Fiind enzime 139

Analele SNBC Vol. XIII/2008

CAP. II Date Morfofiziologice i Biochimice

Fig. 2 : Evoluia acidului uric, ureei, creatinei i a creatin kinazei n funcie de ras

Carcateristicile comune ale enzimelor (GPT, GOT i CK) au o mare variabilitate datorit instabilitii indicilor biochimici sangvini. Goldberg i colab, 1992, arat c o rat de cretere a animalelor determin o cretere a activitii enzimatice a GPT i GOT, reflectndu-se nu att n variabilele morfologice ci i n caracteristicile fiziologice. Nagvi i colab., 1991, prezint faptul c originea filogenetic a animalelor influeneaz valorile enzimatice i activitatea enzimelor plasmatice, fiind importante pentru metabolismul fiecrui tip de animal n parte. Valorile biochimice ale creatininei, acidului uric i a ureei determinate din serurile ovine din loturile experimentale (13,393,11 mg/dl; 0,900,77 mg/dl ; 15,2812,15 mg/dl vs 12,683,45 mg/dl; 0,67850,52 mg/dl; 14,08208,45 mg/dl vs 10,45 3,89 mg/dl ; 1,551,08 mg/dl i 19,5511,32 mg/dl, p<0,05 ) variaz n funcie de ras. Rezultate similare au fost prezentate i de Masek i colab., 2007 pentru rasa Friz Estic ncruciat cu Istrian (80,7 2,25 mol/l, p<0,01).

Explorarea biochimic a trigliceridelor din ser furnizeaz indicaii asupra evoluiei diferitelor procese constitutive ale metabolismului lipidic: procese de depozitare, procese de mobilizare din esuturi, lipoliz sau lipogenez. Trigliceridele reprezint 95% din lipidele esutului adipos. Valorile biochimice ale trigliceridelor, HDL- colesterolului, LDLcolesterolului i calciului din serurile ovine corespunztoare loturilor experimentale sunt prezentate n fig. 3. Valorile biochimice ale trigliceridelor i al calciului pentru lotul 1 - Merinos Australian (2,711,14 mg/dl i 21,95 7,82 mg/dl ) variaz comparativ cu lotul 2- tipul prolific (2,560,56 mg/dl i 16,864,81 mg/dl) i lotul 3- Merinos de Palas (2,480,72 mg/dl i 20,78 6,58 mg/dl, p<0,05). Valorile colesterolului (HDL- colesterol i LDLcolesterol) determinate biochimic variaz n funcie de ras (lotul 1- 15,758,85 mg/dl i 55,111,25 mg/dl vs 13,9015,97 mg/dl i 55,161,85 mg/dl- lotul 2 vs 14,2315,13 mg/dl i 55,77 1,78 mg/dllotul 3, p<0,05).

Fig. 3: Evoluia HDL- colesterol, LDL- colesterol, trigliceride i a calciului n funcie de ras

140

Analele SNBC Vol. XIII/2008

CAP. II Date Morfofiziologice i Biochimice

Cantitatea mare de grsimi din alimentaie determin un nivel crescut al colesterolului din ser (Abrams, 1980 citat de Opara, 2006).

Modificrile calitative i cantitative n compoziia biochimic a sngelui i a componentelor sale pot fii indicatori ai statusului fiziologic al organismului i pot caracteriza profilul metabolic i constiional al animalelor de ferm. Factor extern cel mai important cu influen considerabil asupra condiiei fiziologice i a homeostaziei corporale la animale este hrnirea, acest lucru fiind observat la animalele din loturile experimentale (1-3) care au prezentat o uoar hiperproteinemie datorit alimentaiei bogate n proteine i carbohidrai. Toate valorile biochimice pentru determinrile realizate pe serurile ovine corespunztoare celor 3 loturi experimentale (lotul 1Merinos Australian vs lotul 2- tipul prolific vs lotul 3- Merinos de Palas) prezint o variaie semnificativ n funcie de ras.

Concluzii

Bibliografie
Abrams HL.: Vegetarianism: An Anthropological /Nutritional Evaluation. J. Appl. Nutr. 32, 2, 1980; Awah JN, Nottidge HO.: Serum biochemical parameters in clinically healthy dogs in Ibadan. Trop. Vet. 16, 123, 1998; Binev R., Slavova P. , Laleva S. : Effects of fasting on blood cell from lambs of various breds, Trakia Journal of Sciences, Vol. 4, No. 3, 37-43, 2006; Bush BM. : Interpretation of Laboratory Results for Small Animal Clinicians.

Blackwell scientific publication London, 1991; Goldberg D.M.: Enzyme as agents for treatment of deasease. Clin. Chim. Acta 206, 45-76, 1992; Jain NC.: Schalm Veterinary Haematology. 4th ed. Lea and Febiger, Philadelphia,U.S.A, 1986 Kaneko J.J., Harvey J.W, Bruss M.L: Clinical biochemistry of domestic animals. 5ed San Diego Academy Press, San Diego, CA, USA, 1997; Masek T., Mikulec Z., Valpotic H., Pahovic S.: Blood biochemical parameters of crossbred Istrian x East Friesian dairy ewes: relation with milking period. Ital. J. Anim. Sci. Vol. 6; 281-288, 2007; Nagvi S.M. K, Hooda O.K., Purnima-Saxena : Some plasma enzymes of sheep under thermal nutrional and exercise stress. Indian Vet. J. 68, 1045-1047, 1991; Ogunrinade A, Fajimi J, Adenike A.: Biochemical indices in the White Fulani (Zebu) cattle in Nigeria. Rev. Elev. Med. Vet. Pays. Trop., 34 (4):41, 1981; Ogunsanmi AO, Akpavie SO, Anosa VO.: Serum biochemical changes in West African Dwarf sheep experimentally infected with Trypanosoma brucei. Rev. Elev. Med. Vet. Pays. Trop. 47 (2): 195, 1994; Pastorova B., Buleca J., Pilipcinec E., Svicky E., Szvarek : Plasma neuromediators and enzymatic profile of sheep. ACTA Vet. BRNO, 69, 277-280, 2000; Ricordeau G, Flamant J.C: Croisements entre les races ovines Prealpes de Sud et Frissone. Reproduction, viabilite, croissanse, conformation. Ann. Zooteh, 18: 131-149, 1969; Vrzgula et al.: Metabolism disorders in farm animals and their prevention. Natura, Bratislava, 495, 1990.

141