１０８

・论著・ ＥＧＦ培养条件下ＮＧＦ与ＢＤＮＦ对大鼠海马神经干 细胞向神经元分化的差异

王振宇 佟 雷 季丽莉 唐源远赵久红 （中国医科大学基础医学院人体解剖学教研室辽宁沈阳１１０００１） 【摘要】
目的探讨在表皮生长因子（ＥＧＦ）培养条件下，相同浓度神经生长因子（ＮＧＦ）与脑源性神经生长因子

（ＢＤＮＦ）对成年大鼠海马神经干细胞向神经元分化比例的差异。方法用含碱性成纤维生长因子（ｂＦＧＦ）、ＥＧＦ、Ｂ２７的无 血清细胞培养技术体外培养成年大鼠海马神经干细胞，单细胞克隆后行Ｎｅｓｔｉｎ免疫细胞化学染色，诱导分化１周，行 ＧＦＡＰ和ＮＳＥ免疫细胞化学染色；根据培养液中所加营养因子的不同将单细胞克隆传代细胞分为５组培养：ＥＧＦ组、ＮＧＦ 组、ＢＤＮＦ组、ＥＧＦ＋ＮＧＦ组、ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ组，此５组细胞培养１周，进行ＮＳＥ免疫细胞化学染色，计数阳性细胞比例后进行 统计学分析。结果：单细胞克隆培养后克隆球细胞表达Ｎｅｓｔｉｎ，诱导分化１周，细胞表达ＮＳＥ、ＧＦＡＰ；与ＥＧＦ组、ＮＧＦ组、 ＢＤＮＦ组相比。ＥＧＦ＋ＮＧＦ组和ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ组细胞分化为神经元的比例较高（尸＜Ｏ．０５），其中ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ组细胞的比例最 高。结论在ＥＧＦ培养条件下．ＢＤＮＦ促进成年大鼠海马神经干细胞向神经元分化的能力高于ＮＧＦ。

【关键词】
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ

神经干细胞；

海马；

表皮生长因子；

神经生长因子；

脑源性神经生长因子

ｂｅｔｗｅｅｎ ＮＧＦ ａｎｄ

ＢＤＮＦ

ｏｎ

ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ

ｉｎｔｏ

ｎｅｕｒｏｎｓ

ｏｆ

ｒａｔ

ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｎｅｕｒａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ

ｍｅｄｉａ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ＥＧＦ

Ｃｈｉｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ

ＷＡ ＮＧ Ｚｈｅｎ—ｙｕ，ＴＯＮＧ Ｉ １０００１ Ｃｈｉｎａ

ｌｅｉ，Ｊｌ

ｌｉ—ｌｉ，ＴＡ ＮＧ

ｙｕａｎ－ｙｕａｎ，ＺＨＡ

０－７ｊ【ｕ－７ｌｏ嗨Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ａ ｎａｔｏｍｙ，
ｂｒａｉｎ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ

Ｕｎｗｅ巧毋，Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】
（ＢＤＮＦ）ｏｎ

Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ

ｎｅｒｖｅ

ｇｒｏｗｔｈ

ｆａｃｔｏｒ（ＮＧＦ）ａｎｄ

ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｕｒａｌ ｓｔｅｍ

ｃｅｌｌｓ（ＮＳＣｓ）ｆｒｏｍ

ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｒａｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｄｉａ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ Ｂ２７

Ｗ８８

ｆａｃｔｏｒ（ＥＧＦ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ

Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ—ｂｅｅ ｍｅｄｉｕｍ

ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｂＦＧＦ，ＥＧＦ ａｎｄ

ｕｓｅｄ

ｔｏ

ｃｕｌｔｕｒｅ ＮＳＣｓ ｆｉｂｒｉｌｌａｒｙ ｗｅｅｋ

ｉｓｏｌａｔｅｄ

ｆｒｏｍ

ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｏｆ ｒａｔｓ．Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｆｏｒ Ｎｅｓｔｉｎ

ｗ鹊ｕｓｅｄ
ｉｄｅｎｔｉｆｙ

ｔｏ

ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｍｏｎｏｅｌｏｎａｌ

ｃｅｌｌｓ，

ｆｏｒ幽ａｌ
ｏｎｅ

ａｃｉｄｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ
ｗｅｒｅ

（ＧＦＡＰ）

ａｎｄ

ｎｅｕｒｏｎｅ

ｓｐｅｃｉｆｉｃ

ｅｎｏｌａｓｅ（ＮＳＥ）ｔｏ

ａｓｔｒｏｅｙｔｅｓ

ａｎｄ ｎｅｕｒｏｎｓ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ

ａｆｔｅｒ ＮＳＣｓ

ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｐａｓｓａｇｅｄ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ＮＳＣｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｆｉｖｅ ｇｒｏｕｐｓ：ＥＧＦ，ＮＧＦ，ＢＤＮＦ，ＥＧＦ＋ＮＧＦ ａｎｄ ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ
ｇｒｏｕｐｓ．Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｆｏｒ ＮＳＥ
ｗａｓ

ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ

ｗｅｅｋ ｌａｔｅｒ

ｔｏ

ｃｏｕｎｔ

ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｅｋ ａｆｔｅｒ ｉｎｄｕｃｅｄ

Ｔｈｅ

ｃｕｌｔｕｒｅｄ

ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ

ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｎｅｓｔｉｎ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＮＳＥ ＮＳＥ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｆｒｏｍ ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ ｉｓ ＮＳＣｓ ｉｎ

ａｎｄ ＧＦＡＰ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ

ｏｎｅ

ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ
ｔｈｏｓｅ

ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ

ＥＧＦ＋ＮＧＦ ａｎｄ ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ

ｇｒｏｕｐｓ
ｏｎ

ａｌｅ

ｍｕｃｈ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ

ｉｎ ｏｔｈｅｒ

ｇｒｏｕｐｓ

ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｎ ＮＳＣｓ ｉｎｔｏ

ｎｅｕｒｏｎｓ

ｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ

Ｔｈｅ

ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ＢＤＮＦ

ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｒａｔ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ

ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ

ＮＧＦ ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｄｉａ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ＥＧＦ． ｃｅｌｌｓ；Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ； Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ； Ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ； Ｂｒａｉｎ．ｄｅｒｉｖｅｄ

【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】
ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ

Ｎｅｕｒａｌ ｓｔｅｍ

神经干细胞ｎｅｕｒＭ

ｓｔｅｍ

ｃｅｌｌｓ，ＮＳＣｓ）是存在

何得到大量的神经干细胞、如何控制神经干细胞 向神经元定向分化极为重要。表皮生长因子 （ｅｐｉｄｅｒｍａｌ

ｇｒｏｗｔｈ

于哺乳动物中枢神经系统的一类具有多向分化和 自我更新能力的细胞…引。神经干细胞不仅能诱导 分化为神经元、促进脑组织的修复，而且可以作为 载体用于神经系统疾病的基因治疗［３巧］。因此，如

ｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）作为丝裂原广泛用

于神经干细胞的体外培养［引，并可作为诱导剂促 进神经干细胞向神经元、星形胶质细胞和少突胶 质细胞分化［７］。ＮＧＦ是神经系统中最重要的生物 活性物质之一，对神经系统的正常发育及促进再

基金项目：国家自然科学基金（３０４７０９６３） 通讯作者：王振宇．Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｙｗａｎ９６０＠１６３．ｅｏｍ
２３２５６６６６．５２９３ Ｔｅｌ：０２４．

生等方面均有重要的生物学作用［引。脑源性神经 生长因子（ＢＤＮＦ）是神经生长因子家族的重要成

万 　 方数据

员，可以维持神经元的存活、影响神经元的迁移。

限稀释法稀释细胞到５个／ｍＬ。于９６孔板内滴加 稀释后的单细胞悬液，２００斗Ｌ／孔，每天观察细胞 增殖情况。单细胞克隆形成的克隆球进行传代培 养。待大多数克隆球１００倍镜下直径为２００斗ｍ 时，部分克隆球放置在涂有多聚赖氨酸的孔板中 生长４ｈ后，４％多聚甲醛固定，进行巢蛋白免疫细 胞化学染色：部分克隆球接种于涂有多聚赖氨酸 的孔板中．含１０％胎牛血清的ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养液 诱导分化，１周后进行ＮＳＥ、ＧＦＡＰ免疫细胞化学 染色。 １．４神经干细胞的分组培养

在体外，ＢＤＮＦ可以促进神经干细胞的存活和分
化［９１。本实验通过单独和联合应用ＥＧＦ、ＮＧＦ或 ＥＧＦ、ＢＤＮＦ，探索ＥＧＦ培养条件下，ＮＧＦ与ＢＤＮＦ 诱导神经干细胞向神经元分化比例的差异。

１材料与方法
１．１材料与试剂 成年ＳＤ大鼠，由中国医科大学实验动物部 提供。ＤＭＥＭ／Ｆ１２（１：１）无血清培养基、Ｂ２７添加 剂购于Ｇｉｂｃｏ公司。ｂＦＧＦ、ＥＧＦ、ＢＤＮＦ购于Ｒ＆Ｄ 公司，巢蛋白（Ｎｅｓｔｉｎ）抗体、胶质原纤维酸性蛋白 （ＧＦＡＰ）抗体、神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）抗 体、ＳＡＢＣ试剂盒均购于博士德公司．ＤＡＢ显色剂 购于迈新公司。 １．２神经干细胞的原代和传代培养 无菌条件下分离出ｓＤ大鼠海马组织．放人 Ｄ—Ｈａｎｋ’ｓ液中，眼科剪刀剪碎组织至１
ｉｎｌｎ３，

将单细胞克隆传代培养的神经干细胞分成
ＥＧＦ、ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＥＧＦ＋ＮＧＦ、ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ

５个组。

每组培养液中均用含１０％胎牛血清的ＤＭＥＭ／ Ｆ１２，在此培养液的基础上分别加入处理因素 ＥＧＦ、ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＥＧＦ＋ＮＧＦ、和ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ。ＥＧＦ 的浓度为２０¨ｇ／Ｌ，ＮＧＦ、ＢＤＮＦ的浓度为５０斗ｇ／ Ｌ。将细胞以５ｘ１０５／ｍＬ的密度接种于涂有布多聚

０．２５％的胰蛋白酶３７℃消化８ ｍｉｎ后。加入血清终 止消化，用２００目、４００目不锈钢滤网依次过滤一 次，ｌ

０００

赖氨酸的６孔板，６孔／组，放人３７℃、５％ＣＯ：孵
箱中静置培养，每隔２４～４８ ｈ半量换液１次。每天 观察细胞生长情况。培养ｌ周后行ＮＳＥ免疫细胞 化学染色，通过计数阳性细胞率检测神经干细胞 向神经元分化情况。
２
２．１

ｒ／ｒａｉｎ离心５ ｍｉｎ，倾去上清，用ＤＭＥＭ／

Ｆ１２＋２％Ｂ２７＋ＥＧＦ（２０ ｐｇ／Ｌ）＋ｂＦＧＦ（２０斗ｇ／ Ｌ）将沉淀悬起，Ｐａｓｔｅｕｒ吸管吹打，台盼蓝计数活 细胞比例后．以１×１０６／ｍＬ密度接种于５０ ｍＬ培 养瓶中，放入３７℃、５％ＣＯ：孵箱中静置培养，每隔

２４～４８

ｈ半量换液１次．倒置显微镜下观察不同

成年大鼠脑海马神经干细胞原代和传代培

培养时间细胞的生长状况。１００倍镜下观察，原代
培养大多数克隆球直径为２００¨ｍ时进行传

养过程中的增殖情况

由成年大鼠脑海马分离的细胞。原代培养４

代。将克隆球连同培养液一同倒人５０ ｍＬ离心
管，ｌ
０００

时，一些细胞出现分裂现象，杂质较多（图１）；７ 天时细胞分裂增殖形成直径约为１¨ｍ大小的克 隆球，其周围附着轮廓清晰的圆形单个细胞，杂质 逐渐减少（图２）；１０ ｄ左右克隆球直径增大到２ 斗ｍ左右；随着培养时间的延长，克隆球中心逐渐 变黑。传代后细胞增殖速度较原代加快，在传代培 养第７天时即形成直径约２斗ｍ的克隆球。 ２．２神经干细胞鉴定结果 单细胞克隆培养细胞开始增长速度缓慢。在 培养２～３周形成直径约为２¨ｍ的克隆球。免疫 细胞化学染色结果显示：克隆球在涂布多聚赖氨 酸的六孔板中贴壁培养４ ｈ后，Ｎｅｓｔｉｎ免疫细胞化 学染色结果为阳性。一部分Ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞从克 隆球中长出。呈多角形或梭形，圆形细胞核清晰可 见（图３）；克隆球诱导分化１周后，周围可见

ｒ／ｍｉｎ离心５ ｍｉｎ。Ｐａｓｔｅｕｒ吸管吹打离

心管内液体，约３０次，制成单细胞悬液。台盼兰计
数活细胞比例．以５ｘｌ ０５／ｍＬ密度ＩＳ］接种于５０
ｍＬ

培养瓶中，放入３７℃、体积分数为ｏ．０５的ＣＯ：孵
箱中静置培养，每隔２４—４８ｈ半量换液１次，约每 隔１０ ｄ传代１次。 １．３神经干细胞的鉴定 第４代细胞１００倍镜下克隆球直径约为２００ 斗ｍ时，进行单细胞克隆。０．２５％的胰蛋白酶于 ３７℃消化５ ｍｉｎ，Ｐａｓｔｅｕｒ吸管吹打，镜下观察，细胞 分散后，离心，用ＤＭＥＭ／Ｆ１２＋２％Ｂ２７＋ＥＧＦ （２０斗ｇ／Ｌ）＋ｂＦＧＦ（２０ ｐｇ／Ｌ）＋条件培养液（细胞 原代培养第７天的上清液的过滤液）悬起沉淀，吸 管吹打成单细胞悬液，台盼蓝计数活细胞比例，有

万 　 方数据

１１０

ＧＦＡＰ阳性的星形胶质细胞和ＮＳＥ阳性的神经细 胞，前者胞体呈多角形或长梭形，核小，呈椭圆形

（图４），后者胞体近圆形，核较大、呈圆形，个别有 较长的突起（图５）。

图１

原代培养４ ｄ的细胞．箭头所示为悬浮生长的细胞×２００

图２原代培养７ ｄ的神经干细胞克隆球ｘ２００
图３

Ｎｅｓｔｉｎ阳性细胞免疫细胞化学染色．经复染ｘ２００ ＧＦＡＰ阳性细胞免疫细胞化学染色．经复染ｘ２００ ＮＳＥ阳性细胞免疫细胞化学染色．未经复染×４００ 图３～５中细箭头所示分别为神经干细胞、星形胶质细胞、神经元，粗箭头所示分别为神经干细胞、星形胶质细胞、神 经元的细胞核。

图４
图５

２．３各组神经干细胞分化为神经元的比例 经ＮＳＥ免疫细胞化学染色后．各组神经干细

及向神经元和神经胶质细胞多向分化潜能的细 胞。目前，Ｎｅｓｔｉｎ阳性、自我更新和多向分化能力 为鉴定神经干细胞的３个标准［川。本实验进行单 细胞克隆培养．说明我们所培养细胞具有分裂增 殖和自我更新能力．单细胞克隆培养和诱导分化

后细胞进行Ｎｅｓｔｉｎ和ＧＦＡＰ、ＮＳＥ免疫细胞化学染 色的结果为阳性。证明我们所培养的细胞符合上 述神经干细胞的标准。

胞分化为神经元的比例见图６。ＥＧＦ组、ＢＤＮＦ组
ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ组、ＮＧＦ组、ＥＧＦ＋ＮＧＦ组的比例（％） 分别为１３．３３±３．４４、１９．６７±２．０７、２３．１７±２．０７、 １７．３３±２．５０、２５．５０±２．０７。ＥＧＦ＋ＮＧＦ组和ＥＧＦ＋ ＢＤＮＦ组明显高于ＥＧＦ组。其中ＥＧＦ＋ＮＧＦ组的比

例最高（Ｐ＜０．０５）；ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ组的比例明显高于
ＢＤＮＦ组（Ｐ＜０．０５）。ＥＧＦ＋ＮＧＦ组的比例明显高于 ＮＧＦ组（Ｐ＜０．０５）。ＢＤＮＦ组神经干细胞的比例明 显高于ＮＧＦ组（Ｐ＜０．０５）。
∞ 笛

ＢＤＮＦ是神经营养因子家族的重要成员。众所
周知，ＢＤＮＦ主要与神经元的生长发育、营养及存

活和表型分化。目前研究显示ＢＤＮＦ可诱导神经 于细胞向神经元分化并促进其成熟．Ｗａｃｈｓ等［¨］
研究认为，当ＢＤＮＦ浓度为２００斗ｇ／Ｌ时，神经干

Ｓ
墨 丑 ｌＲ 翻 霖

细胞分化为神经元的比例最高。有文献报道，ＮＧＦ
促进增殖后期神经干细胞的存活和分化．ＥＧＦ对 增殖后期的神经干细胞也有明显的促增殖和分化 的作用［Ｊ２，１３１。我们曾观察到ＥＧＦ是ＮＧＦ、ＢＤＮＦ促 进神经干细胞向神经元分化的影响因素之一［１４，蚓．
ＥＧＦ
ＢＤＮＦ

∞
：２

坩
５ Ｏ

ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ

ＮＧＦ

ＥＧＦ＋ＮＧＦ

但对那种因子的影响较大并未比较。本实验通过

设立ＥＧＦ组、ＢＤＮＦ组、ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ组、ＮＧＦ组、
图６各组神经干细胞分化为神经元的比例（ｉ±ｓ，ｎ－－６）

ＥＧＦ＋ＮＧＦ组进行神经干细胞的诱导分化．结果表 明：ＥＧＦ＋ＮＧＦ组神经干细胞分化为神经元的比例 明显高于ＥＧＦ＋ＢＤＮＦ组，说明在促进神经干细胞 分化为神经元方面．ＥＧＦ对ＮＧＦ影响的作用强于

３讨论
神经干细胞是具有分裂增殖、自我更新能力

对ＢＤＮＦ的影响。其机制尚不清楚，还需进一步实

万 　 方数据

ｌｌｌ

验研究。我们推测可能与下列机制有关：ＥＧＦ和 ＮＧＦ均通过受体结合起作用．ＥＧＦ和ＮＧＦ与其在

神经干细胞定向分化的调控．中华神经医学杂志．
２００５。４：５５６－５５９．

神经干细胞膜上的受体结合后。通过某种机制起
到协同作用。而ＥＧＦ和ＢＤＮＦ的协同作用较弱， 此种机制需要进一步实验探索。
参考文献
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Ｊ Ｄｅｖ

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ｕｓｉｎｇ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ａｄｅｎｏ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ

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ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｍ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｔｈｅ ｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ

ｏｆ ｎｅｕｒｏｎ—ｓｐｈｅｒｅｓ ｆｒｏｍ ｒｏｕｔｉｎｅ

ｎｅｒｖｏｕｓ

ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ

ｄａｙ １４

ｃｅｎｔｒａｌ

ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｕｒａｌ ０ｆ ａｄｌｌｌｔ

ｓｔｅｍ ｃｅｌｔｓ ｆｒｏｍ Ｚｕｚｈｉ

ｔｈｅ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ Ｙｕ

ｓｙｓｔｅｍ ｔｉｓｓｕｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，

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ｒａｔｓ．

Ｚｈｏｎｇｇｕｏ

Ｇｏｎｇｃｈｅｎｇ Ｙａｎｊｉｕ

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Ｋ觚ｇｆｕ，２００７，ｌｌ：９２５５—９２５８．
（收稿日期：２００８—１—２０）

姬西团，章翔，黄舟，等．ＥＧＦ、ｂＦＧＦ、ＮＧＦ、ＲＡ对小鼠

（上接１０７页）
９．Ｓｃｈｍａｌｆｅｌｄｔ Ｍ，Ｂａｎｄｆｌｏｗ ＣＥ，Ｄｏｕｒｓ—Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ ＭＴ，
ｅｔ

Ａｓｔｒｏｃｙｔｏｓｉｓ，

ｍｉｃｒｏｇｌｉａ

ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，

ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ
ａｃｕｔｅ

ａ１．Ｂｒａｉｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｖｅｒｓｉｃａｎ Ｖ２ ｉｓ

ｐｏｔｅｎｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｏｆ

ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，ａｎｄ ｐｙｋｎｅｓｉｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ

ｉｎｊｕｒｙ．Ｅｘｐ

ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ

ａｘｏｎａｌ

ｇｒｏｗｔｈ．Ｊ Ｃｅｌｌ Ｓｅｉ，２０００，１ １３：８０７－８１６． Ｗａｌｚ，Ｒｉｃｈａｒｄ

１０．Ａｎｄｒｅａｓ

Ｂ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ａｔｓｕｓｈｉ
ａｘｏｎ

ｌｒｉｅ，ｅｔ ｔｈｅ

１２．Ｌｅｍｏｎｓ

ＭＬ，Ｈｏｗｌａｎｄ

Ｎｅｕｒｏｌ，２００４，１９０：４５６－４６７． ＤＲ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ ＤＫ．Ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎ

ｉｎｕｎｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ａｎｄ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ． Ｅｘｐ

ａ１．Ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎ ｓｕｌｆａｔｅ ｄｉｓｒｕｐｔｓ ｏｐｔｉｃ

ｔｒａｃｔ

ｐａｔｈｆｉｎｄｉｎｇ ｉｎ

ｓｕｌｆａｔｅ ｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ

ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ
Ｎｅｕｒｏｌ，

ａｎｄ

ａｌｔｅｒｓ

ｇｒｏｗｔｈ

ｃｏｎｅ

ｄｙｎａｍｉｃｓ．

ｉｎｊｕｒｙ

Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ，２００２，５３：３３０—３４２．

１９９９．１６０：５１—６５． Ｆｒｅｉｒｅ ＭＡ，

ｅｔ

１１．Ｃｏｍｅｓ・Ｌｅａｌ Ｗ，

Ｃｏｒｋｉｌｌ

ＤＪ，

ａ１．

（收稿日期：２００７—１０—２０）

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