K THUT V TRNG V CC PHNG PHP LN MEN

Ths. Bi Hng Qun 09.09.25.24.19/09.17.27.26.25 Email: buihongquan@hui.edu.vn Website: www.buihongquan.tk

GBD gi gn mu xanh cho qu hng, xy dng tng lai t cht lng cuc sng

K THUT V TRNG
K thut v trng dit sch cc t bo v bo t ca vi sinh vt trong mi trng ban u Kh trng Ty trng St trng

Ths. Bi Hng Qun

PHNG PHP KH TRNG

Vt l Ha hc Sinh hc

Ths. Bi Hng Qun

Phng php vt l
C Nhit Quang Bc x

Ths. Bi Hng Qun

Phng php ha hc
C n Oxide ethylene: kh trng dng c plastic Phenol Formaline

Ths. Bi Hng Qun

C s khoa hc
V trng tng i V trng tuyt i

Ths. Bi Hng Qun

V TRNG TNG I
V trng tng i l v trng nhng vi sinh vt gy nh hng nghim trng C s: ln t v cnh trang trong sinh hc S dng: trong qu trnh ln men truyn thng v qu trnh thu nhn sinh khi vi sinh vt dng trong chn nui hoc trong qu trnh ch bin tip theo

Ths. Bi Hng Qun

LN MEN KHNG V TRNG

cho qu trnh ln men din ra c kt qu th cn phi ngn cn s pht trin ca cc c th l Trong vic sn xut sinh khi (nh sinh khi nm men, sinh khi vi khun, to) thng tin hnh ln men khng v trng S pht trin ca cc c th l b ngn cn mnh m bng cch to ra nhng iu kin nui sao cho chng sn xut c th sinh trng tri hn. V d: nh c cht c hiu hay pH mi trng
Ths. Bi Hng Qun 8

V TRNG TUYT I
Tiu dit ton b vi sinh vt gy tp, mi trng khng cha mm mng vi sinh vt p dng: thu nhn sn phm tinh khit, c th phn ln l sn phm bc hai

Ths. Bi Hng Qun

LN MEN V TRNG
Nhim v thanh trng l tiu dit ht vi sinh vt c mt trong mi trng (do c sn t trong thnh phn nh nc, nguyn liu, khng kh v trn b mt cc thit b tip xc vi mi trng) Nhng vi sinh vt ny cn sng st s pht trin cnh tranh vi chng sn xut, lm hng qu trnh ln men Cc vi sinh vt thng c sc bn vi nhit, mt s c mt trong nguyn liu di dng bo t. Mun dit chng phi gia nhit ti 120oC 121oC trong vi chc pht
Ths. Bi Hng Qun 10

KH TRNG BNG NI HP
Trong ln men tng m cc thit b sau khi lm v sinh c kh trng bng hi nng ti 120oC 130oC. Sau mi cho mi trng lng vo cc ni ln men kh trng mi trng cng vi c h thng khuy v cc on ng ng, van tip cn Vic gia nhit cao c th dn n s ph hy cc thnh phn dinh dng mn cm vi nhit v caramen ha cc ngun ng cng nh xy ra cc phn ng melanoid gia ng vi amino acid hoc cc vitamin b ph hng Nhng thnh phn mn cm vi nhit c khi phi kh trng ring, sau mi trn ln hoc kh trng theo phng php khc nh lc qua phin v trng Ngoi cch kh trng theo phng php hi nc gin on ny, ngi ta cn dng phng php kh trng bng hi lin tc bng cch cho mi trng chy qua thit b kh trng chuyn dng nhit 140oC trong vi pht
Ths. Bi Hng Qun 11

KH TRNG MI TRNG NUI CY B MT

Mi trng nui cy b mt thng l nhng hp cht rn (cm, bt v cc cht dinh dng) Trong sn xut cng nghip mi trng rn c kh trng bng hi nng trong thit b chuyn dng vi p sut d, t nhit 104oC 110oC Thanh trng bng hi nng c th qua hai giai on:
Giai on u nng nhit ti 100oC v o khi mi trng lin tc trong 15 20 pht Giai on sau nng nhit ti 110oC khong 60 90 pht v c sau 15 pht li o mi trng 3 5 pht

Ths. Bi Hng Qun

12

KH TRNG MI TRNG LNG NUI CY CHM

Kh trng ni ln men v h thng ng ng tip xc vi mi trng bng hi nng Cho dch mi trng pha ch vo ni (lng dch bng th tch ni v phi tnh thm phn nc ngng khi cho hi trc tip vo mi trng) Gia nhit ti nhit thanh trng Gi nhit ny trong khong thi gian thanh trng cn thit Lm ngui dch ngay trong ni bng cch cho nc vo v hoc ng xon trao i nhit cng vi h thng khuy lm vic
Ths. Bi Hng Qun 13

KH TRNG MI TRNG LNG NUI CY

trnh bin i thnh phn dinh dng ca mi trng nn ch tin hnh nhit 110oC 120oC trong khong thi gian 1 1,5 gi t lc t c nhit ti hn Ngoi ra c th tin hnh thanh trng lin tc nhit cao hn (140oC 145oC) v gi thi gian ngn hn (5 15 pht) nhit ny
Ths. Bi Hng Qun 14

KH TRNG BNG HA CHT

i vi nhng cht km bn nhit d b phn hy nhit cao th vic kh trng c th bng cch lc qua phin lc hoc bng cc ha cht dit khun S dng cc ha cht dit khun cn phi cn nhc k v tnh gy c cho vi sinh vt nui cy, cho ngi s dng sn phm cng nh v v sinh an ton lao ng Mt s ha cht c dng kh trng trong mt s trng hp ngoi l nh ethylenoxyl, propiolacton rt thch hp cho vic kh trng cc cht km bn nhit (enzyme)
Ethylenoxyl hn hp vi khng kh theo t l 3 8% s gy n, v vy khi dng phi trn ln vi CO2 hoc N2 V vy kh trng bng ha cht t c s dng trong cng ngh ln men

Ths. Bi Hng Qun

15

CUNG CP KH
Khng kh dng cung cp oxy c kh trng bng cch lc kh trng Nguyn liu lc thng dng l bng , bng thy tinh hoc bng Hin nay trong cng ngh vi sinh ph bin l cc loi mng lc Lc kh trng c th s dng lm sch khng kh
Ths. Bi Hng Qun 16

CUNG CP KH SCH CHO NUI CY B MT

Cung cp kh sch cho nui cy b mt l mt b phn nhng my iu ha v lm sch kh t bn trn hoc bn cnh phng nui cy Trong cc x nghip sn xut quy m ln c th thit k s dng kh tun hon Vic cung cp kh sch cn c b phn iu nhit v iu m m bo nhit v m ti u cho qu trnh nui cy trnh lm kh mi trng
Ths. Bi Hng Qun 17

CUNG CP KH CHO QU TRNH NUI CY CHM

Khng kh => lc s b => my nn => lm ngui khng kh => tch du m => lc tng th => lc ring =>cp cho thit b ln men Lc s b: hai lp li inox t trc v sau hai u hp hnh tr (gia hai lp li xp mnh s, c tm du nhn) Phin lc khng kh cu to theo hnh tr, bn trong xp vt liu lc (bng thy tinh, bng m vi, amiang, mng lc vi sinh,)
Ths. Bi Hng Qun 18

THANH TRNG KHNG KH TRONG SN XUT

Khng kh trong phng: khng kh l vt cht c th len li vo tt c cc v tr, cc khe trong my mc thit b,=> lm sao thanh trng? Bin php:
n UV: Lp rp nh n hunh quang
u im: tiu dit nhanh, khng li du vt Nhc im: khng tiu dit c bo t, s tiu dit vi sinh vt b cn tr

Formalin: X l trc khi lm th nghim

u im: r, nhanh, hn ch c nhc im ca vic s dng n UV Nhc im: c hi, cn lu li trong khng kh => Hun lyn ging quen dn vi formalin

Mng lc: Thng nui cy (t cy v trng)

iu kin: thc hin trc khi nui cy u im: t tn in, y khng kh mt ph, ht khng kh mt pha

Ths. Bi Hng Qun

19

PHNG V TRNG
Phng v trng, phng cy, t cy v trng Phng v trng thi kh v trng to p sut ao bn trong phng (ngi thc hin: ph qua phng ring tm v mc qun o chuyn bit ph ton thn)

Ths. Bi Hng Qun

20

KIM TRA MC SCH CA KHNG KH

H thng cung cp khng kh: bt buc phi qua kim tra vi sinh vt nh k Phng php kim tra: kim tra vi sinh vt khng kh trong phng th nghim

Ths. Bi Hng Qun

21

CC PHNG PHP LN MEN

Trong qu trnh thu nhn cc sn phm sinh hc ni chung v cc ch phm dit su hi ni ring, ty tng i tng vi sinh vt m ngi ta p dng cc phng php ln men khc nhau Cc phng php ln men gm:
Nui khng lin tc
Nui cy chm Nui cy b mt Nui cy xp

Nui cy lin tc
Ths. Bi Hng Qun 22

NUI KHNG LIN TC

Phng php nui khng lin tc (batch culture) hay cn gi l nui gin on Vi sinh vt sinh trng n khi mt thnh phn ch yu ca mi trng dinh dng b gii hn Culture (ging) chuyn t pha ly tha sang pha cn bng Sinh trng gn lin vi s thay i ko di ca iu kin nui, s gim cht dinh dng v s tng khi lng t bo Trong qu trnh trng thi sinh l ca t bo cng thay i Vic to thnh sn phm mong mun lin quan vi mt trng thi sinh l nht nh trong pha sinh trng Khng th duy tr c trng thi ny trong mt thi gian di Phng php nui gin on thng c s dng cho s ln men v trng D dng v mt k thut
Ths. Bi Hng Qun 23

NUI KHNG LIN TC NUI CHM

Dng cho c vi sinh vt k kh v hiu kh i vi nui vi sinh vt k kh trong qu trnh nui khng cn sc kh, ch thnh thong khuy trn Vi sinh vt hiu kh th phi sc kh lin tc L phng php hin i c dng trong khang na cui th k XX Kt qu ln i vi cng ngh vi sinh Nui chm hay nui cy b mt su dng trong mi trng dch th Chng vi sinh vt cy vo mi trng c phn tn khp mi im v chung quanh b mt t bo c tip xc vi dch dinh dng c im ny i hi trong sut qu trnh nui cy phi khuy v cung cp oxy bng cch sc kh lin tc
Ths. Bi Hng Qun 24

Phng php nui cy chm c dng ph bin trong cng ngh vi sinh Men bnh m Protein n bo Cc ch phm vi sinh lm phn bn Thuc tr su Cc enzyme Cc acid amin Vitamin, cc cht khng sinh, cc cht kch thch sinh hc,
Ths. Bi Hng Qun 25

U IM
Tn t mt bng xy dng v lp t dy chuyn Chi ph in nng, nhn lc, cc khan ph cho mt n v sn phm thp D t chc c x nghip c sn lng ln Cc thit b ln men chm d c kh ha, t ng ha

Ths. Bi Hng Qun

26

NHC IM
i hi trang b k thut cao, d b nhim trng ton b Nhng thit b ln men chm cn phi ch to c bit, chu p lc cao, i hi kn v v trng tuyt i Trong ln men chm phi khuy, sc kh lin tc (i vi vi sinh vt hiu kh) v vi sinh vt ch s dng c oxy ha tan trong mi trng. Kh c nn qua mt h thng lc sch tp trng, h thng ny tng i phc tp v d gy nhim cho mi trng nui cy.
Ths. Bi Hng Qun 27

NUI KHNG LIN TC NUI CY B MT

Cc t bo vi sinh vt tn ti b mt mi trng. Cc t bo hng v khong khng kh c cung cp y oxy. cc vng nm, cht dinh dng ca mi trng ch c hp thu nh cc t bo chm v c chuyn vo si nm kh sinh. S to vng trong phng php nui b mt dn ti mt trng thi sinh l c ngha quan trng (i vi vic sn xut cc cht trao i, v d sn xut acid citric hay cc enzyme). C gng t n trng thi sinh l tng ng vi mi trng nui cy chm u im:
n gin, t tn chi ph

Nhc im:
Bi tr H ng Khng pht trin mt Ths. cch nQun vn nh nui cy chm 28

NUI KHNG LIN TC NUI CY XP

Nui h si nm trn cc c cht rn: la m, cm hoc la nc trong cc thng quay chm Phng php ny c dng sn xut mt s enzyme Phng php ny thng thch hp cho mt s nm mc v x khun Vic nui thng c tin hnh trn cc khay phng xp chng ln nhau v trong cc bung cha v trng ng kn. Ging c cy vo bng cch thi bo t vo bn trong bung cha Ging vi sinh vt hiu kh sau khi cy s pht trin trn b mt v dn dn lan xung pha di theo cc k h gia cc cu t thnh phn mi trng

Ths. Bi Hng Qun

29

NUI KHNG LIN TC NUI CY XP

Mt s vi khun cng c th sn xut theo phng php ny m ca mi trng khong 55 60% Khi vi sinh vt pht trin s thi CO2 gy hin tng ta nhit lm nng v kh mi trng => cn phi thng gi, phun m hoc lm m trc tip gi cho m tng i ca khng kh khong 90% Nhc im: Tn nhiu din tch mt bng, kh c kh ha v t ng ha Chi ph nhn cng, in nc, cho mt n v sn phm
Ths. Bi Hng Qun 30

NUI CY LIN TC
Mi trng mi cho vo ng bng lng mi trng c(sn phm) rt ra Quy trnh c sn xut lin tc Duy tr trng thi n nh:
Mi trng cung cp vo bn theo tc thch hp S hnh thnh sinh khi mi cn bng vi s mt sinh khi t bn Trng thi cn bng c thit lp
Ths. Bi Hng Qun 31

PHNG PHP N CP
Nui vi sinh vt trong mt ni ln men Mi trng dinh dng c b sung cng nh mi trng ln men rt ra khi ni ln men mt cch lin tc vi cng mt tc Phng php n gin, d ng dng Sn xut thu sinh khi nm men hoc sn phm l cc cht chuyn ha gn trc tip vi s pht trin ca t bo
Ths. Bi Hng Qun 32

PHNG PHP NHIU CP

Vi sinh vt c nui h thng ni ln men t lm nhiu cp Ni th nht c dng cho vi sinh vt pht trin tt nht Cc ni sau cc t bo tit ra cht chuyn ha Mi trng dinh dng mi c b sung vo ni th nht v t ln lt chy vo ni tip theo Ni ln men thng xuyn c cung cp thm dung dch dinh dng mi Cng vi tc nh vy, mi trng b s dng mt phn v cc t bo c rt i
Ths. Bi Hng Qun 33

PHNG PHP NHIU CP

Vic khuy v thng kh nhm trn u cht cha trong ni ln men(h thng ng nht)=> Cc t bo trong ni ln men lun lun sinh trngtheo hm s m v lun lun tn ti trong cng nhng iu kin sinh l Tuy nhin, cc t bo ang phn chia v cc t bo khng phn chia cng tn ti v khng c s sinh sn ng b Cc t bo ch hot ng trong mt thi gian nht nh nn sau mt thi gian no cn phi thay th hoc b sung ging Thc cht th h thng ny l s ko` di pha cn bng ca s nui gin on nh vic a c cht vo mt cch lin tc
Ths. Bi Hng Qun 34

U IM CA PHNG PHP NUI CY LIN TC

Gim bt thi gian lm v sinh thit b, kh khun v lm ngui Gim bt th tch ca tan b thit b Lao ng d dng v c kh nng t ng ha cc thao tc Tng hiu sut ca tan b qu trng cng ngh nh chn lc tt nht cc iu kin thao tc

Ths. Bi Hng Qun

35

NHC IM CA PHNG PHP NUI CY LIN TC

i hi cn b v cng nhn thnh tho chuyn mn. Khi hot ng, cng mt lc phi c cc dng nng lng cn thit, gi thnh cao i vi t ng ha v dng c o lng hin i Trong qu trnh nui cy t bo vi sinh vt c th c nhng t bin bt ng xy ra lm hng c qu trnh Phi v khun tuyt i trong ton b thi gian thao tc. V trong qu trnh nui lin tc to ra cc iu kin ti u cho chng nui cy th cng ti u i vi nhiu loi tp khun
Ths. Bi Hng Qun 36

FED BATCH
L kiu nui cy khng lin tc (nui cy theo m - batch) Mi trng c b sung lin tc m khng loi b dch nui cy Theo thi gian th tch dch nui cy tng
Ths. Bi Hng Qun 37

CC DNG FED BATCH

S dng mi trng thm vo tng t mi trng ban u (MT batch) => tng th tch S dng c cht gii hn thm vo c nng tng t MT batch => tng th tch C c dung dch c cht gii hn => tng th tch va phi Dung dch c cht gii hn rt c => tng th tch nh H thng ln men fed batch s duy tr nng c cht gii hn mc sinh l Trnh nh hng c ch do nng c cht cao
Ths. Bi Hng Qun 38