Predtransplantaciona

imunoloka testiranja
bolesnika na programu
transplantacije bubrega
Doc.dr Svetlana Vojvodi
Zavod za transfuziju krvi Vojvodine
Odeljenje za tipizaciju tkiva

IMUNOLOKA PRIPREMA
BOLESNIKA

cilj sticanje uvida u

imunoloki rizik od
postupka primene
transplantacije
presudna su u izboru
odgovarajue terapijske
strategije
vreme i broj testova koji se
vre moe da varira u
zavisnosti od specifinosti
transplantacionog programa,
duine ekanja na
transplantaciju, broja i vrste
imunizacijskih dogaaja kod
svakog pojedinanog
pacijenta i drugih faktora

Tri grupe testiranja:

-odreivenje imunogenetskih
faktora (ABO,
HLA,MICA/MICB
sistema)
-detekcija i identifikacija
anti-HLA antitela,antiMICA/B antitela
-detekcija donor specifinih
antitela-CROSS MATCH

ODREIVANJE IMUNOGENETSKIH
FAKTORA - ABO sistem

Tri grupe gena

determiniu krvne
grupe ABO sistema:
ABO, Hh i Sese geni
Prisustvo izoaglutinina
anti-A i anti-B

PRIMENA TRANSPLANTACIJE I
KOD ABO INKOPATIBILIJE

Plazmafereze - da fiziki uklone antitela

Imunoadsorpcija-otklanja samo anti A ili anti-B
antitela
Imunoglobulin koji putem vezivanja za antitela
smanjuje destruktivnu aktivnost antitela
Splenektomija - slezina koncentrie B limfocite
oko svojih krvnih sudova u borbi protiv infekcije,
pa njeno uklanjanje, kod osoba sa visokim nivoom
antitela spreava odbacivanje grafta
Anti-CD20 antitela (Rituksimab) smanjuje nivo
CD20 proteina, koji se nalazi na zidu veine B
elija

ODREIVANJE IMUNOGENETSKIH
FAKTORA - HLA sistem
na 6. hromozomu u
regionu p21.3
prostor od 4
centimograma
0,1% humanog
genoma
redak crossing over
neravnotea vezivanja
alela:
A1B8,A2B5,A3B7,
A2B12,A33B14

HLA ANTIGENI

nasleivanje u vidu
haplotipova
p= 1-(3/4)n

METODE DETEKCIJE U HLA

SISTEMU

Seroloke
elijske:
meana limfocitna kultura,
elijski posredovana
limfoliza, izoelektrofokusiranje
Molekulske:
-RFLP(Restriction Fragment
Lenght Polymorphism)
-PCR (Polimerase Chain
Reaction):
SSP,SSO,PCR-RFLP,
SBT,RT-PCR,PCR in situ,
cDNK

CROSS-REACTIONS
SPLIT-ovi
SUPERTIPOVI
DISEKVILIBRIJUM
LINKAE

IZBOR DONORA

ivi srodni i podudarni u

ABO i HLA sistemu
roditelji ili braa sestre
manje od 17% bolesnika
ima srodnog donora:

hipertenzija (visok krvni

pritisak)
bolesti bubrega
bolesti zavisnosti
Dijabetes
Trudnoa
kardiovaskularne bolesti
HIV
ekstremna gojaznosti

lista ekanja na
kadaverinu Tx
Priprema:
-I HLA klasa
serolokim
testovima
-II HLA
molekuleskim, PCR
niske rezolucije
-RETIPIZACIJA IZ
2. uzorka
-match -DR,-B,-A

ANTI-HLA ANTITELA

Senzibilizacija alogenim HLA

antigenima putem:
trudnoa,
transfuzija krvi,
prethodnim transplantacijama
Preformisana anti-HLA antitela
su udruena sa:
akutnim odbacivanjem bubrega i
ostalih organa(jetra,plua),
neefektivnim transfuzijama
trombocita,
hroninim odbacivanjem organa i
transfuzijom udruenim
oteenjem plua (TRALI)

ODBACIVANJE TRANSPLANTATA

KLINIKI ZNAAJ ANTI-HLA

ANTITELA
Funkcionalnost
grafta

Pacijenti bez
anti-HLA
antitela

Pacijenti sa antiHLA antitelima

5 godina

85%

65%

10 godina

76%

53%

15 godina

56%

25%

Lee P.C., et al. Transplant Proceedings 2009;41:121-123.

METODE DETEKCIJE ANTIHLA ANTITELA

ANTIGEN SPECIFINE

ELISA
Luminex tehnologija
protona citometrija
putem primene perli

ANTIGEN NONSPECIFINE

CDC
AHG-CDC PRA (antihuman globulin
enhanced cytotoxicity
PRA determination)
elijska protona
citometrija

KREIRANJE ISTORIJE HLA

ALOSENZIBILIZACIJE
Identifikacija pacijenata koji imaju ili
nemaju aloantitela na antigene HLA klase I
i klase II
Odreivanje specifinosti antitela kod
pacijenata sa detektovanim cirkuliuim
antitelima
Praenje razvoja antitela kod pacijenata koji
nemaju antitela
Svaka 3 meseca (mart, jun, septembar,
decembar), pohranjivanje svih seruma

CROSS-MATCH

Detekcija donorspecifinih anti-HLA

antitela I ili II klase

Metode:
-CDC
-AHG-CDC
-ELISA
-Luminex tehnologija
-Protona citometrija

STRATEGIJA PRIMENE CROSS

MATCH-a

Odabir tehnike
prema senzitivnosti

Odabir seruma

Vreme primene Tx

ivi srodni donori :

-prospektivni
-finalni (unutar 48h
od Tx)

Kadaverini donori:
-serum unutar 48h od
Tx
-istorijski serum

PRIMENA PROTOKOLA
DESENZIBILIZACIJE KOD
POZITIVNOG CROSS-MATCH-a

Visoke doze IV imunoglobulina (2g/kg TT)

Izmene plazme (pre i posle Tx)
Imunoadsorpcija proteinom A
Primena anti-CD20 antitela
Primena antitimocitnog globulina
Splenektomija
Blokada komponente C5 komplementa (Eculizumab)
ili anti-C5 antitelom
Primena proteazomne inhibicije plazma elija putem
bortezomib-a
Gloor, J. & Stegall, M. D. Nat. Rev. Nephrol. 2010;6: 297306.

ZAKLJUAK
Primena

reproducibilnijih tehnika
detekcije anti-HLA antitela i CROSSMATCH-a
Permanentno unapreenje kvaliteta
rada u skladu sa standardima EFI
Uee u aktivnostima za postanak
Srbije punopravnog lana
Eurotransplanta