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All content following this page was uploaded by José Francisco Ibla Gordillo on 18 July 2016.
William Giovanni Cortes Ortiz, José Francisco Ibla Gordillo, Lina María Calderón Velásquez, Andrés Felipe Herrera
Bueno et Altri.
Resumen Abstract
n este trabajo se evaluó la hidrólisis ácida de la n this work the acid hydrolisis of orange and
cáscara de banano y de naranja para la extrac- banana peels was studied to improve the
E ción de azúcares presentes en la biomasa
de dicho material, para ello se cuantificó la
I extraction of reducing sugar present into
biomass of this kind of organic samples. This
cantidad de azúcares reductores presentes en process was started with physics pretreatment,
las muestras de cáscara de naranja y cáscara de banano. washing and cutting were made and then a reaction with NaOH
0,100 M was done to eliminate the lignin present in each sample.
Este proceso inició con un pre-tratamiento físico de los resi- The result was a samples with cellulose (glucose biopolymer).
duos: lavado y reducción de las muestras, para luego llevar a Then, the acid hydrolysis was started using aqueous solution of
cabo la eliminación de la lignina (polímero que protege los sulfuric acid 5,0 N, under three different heating and shaking
azúcares presentes en la biomasa ligno-celulósica) presente condition to find the most effective method to break down the
en las cáscaras de naranja y banano mediante una inmersión cellulose to glucose. The pH was fixed in all samples to deter-
en solución básica de NaOH 0,100 M, obteniendo muestras minate the concentration of reducing sugar by DNS method.
con presencia de celulosa (bio-polímero compuesto princi-
palmente de glucosa) y carentes de lignina; posteriormente se Keywords: Biomass, Colorimetry, DNS, Hydrolysis, Lignin, pH,
llevo a cabo un proceso de hidrólisis ácida con una solución de Reducing sugars.
H2SO4 al 5,0 N bajo 3 condiciones diferentes de calentamiento
y agitación con el fin de comparar y encontrar el método más
efectivo para la separación o fragmentación de dicha celulosa
en moléculas de glucosa. Luego se realiza el ajuste del pH, para
finalmente determinar los azúcares reductores mediante una
técnica de colorimetría denominada DNS.
Para las muestras 3 (B3, N3) se realizó la hidrólisis metro, y se realizó la curva de calibración; seguido a esto
ácida a una temperatura de 68°C con agitación cons- se tomaron 1000 μL de cada una de las 6 muestras y se le
tante, utilizando la plancha de calentamiento –hot adicionaron 1000 μL de DNS, luego se agregó 10 mL de
plate-stirrer hp220- a 300 r.p.m. Agregando 100 mL agua destilada y se llevaron a baño de maría, a continua-
de ácido sulfúrico (H2SO4) al 5,0 N por cada 50 g de ción se trasladaron al espectrofotómetro y se cuantificó el
cáscara sin lignina. Las seis muestras se dejaron reac- azúcar presente en cada una de las muestras.
cionar durante 30 minutos.
Después de cada uno de los procedimientos anteriores Resultados
se realizó una filtración con el fin de separar la solución
de ácido sulfúrico con hidróxido de sodio. [11], [12] Figura 1. Curva de calibracion de glucosa
1,200
c. Determinación de azúcares reductores: Para y= 3,590E-01x - 5,297E-03
1,000
la determinación de azúcares reductores se aplicó R2= 9,818E-01
Absorbancia
salicílico) usando el espectrofotómetro -Thermo 0,600
spectronic- se realizó la cuantificación de los azúcares 0,400
presentes en cada una de las seis muestras, para lo 0,200
cual se creó una curva de calibración a partir de una
0,000
solución de glucosa (2,002 g/L), la cual está repre- 0,000 0,500 1,000 1,500 2,000 2,500 3,000 3,500
sentada en la figura 1. Concentración g/L
Inmediatamente después se procedió a realizar la neutra- Tabla 1. Cuantificación de azúcares reductores en las
lización de las muestras, ya que el medio se encontraba cáscaras de naranja y banano
con un pH de 2, adicionando 10.5 g de carbonato de
sodio (NaCO3) por cada 100 mL de muestra. Muestras Absorbancia Concentración * Fd (g/L)
B1 1,383 38,77
Posteriormente se procede a realizar el método DNS
B2 0,989 27,72
con la curva de calibración, el cual se realiza de la B3 1,250 35,04
siguiente forma: N1 1,434 40,20
N2 0,900 25,23
Para la curva de calibración se toman seis muestras
N3 2,136 59,88
de la solución patrón que se llevaron al espectrofotó-
metro, en la primera muestra se toman únicamente
1000 μL de agua destilada, en la segunda muestra Discusión
se diluyen 200 μL de solución patrón en 800 μL de
Al aplicar la técnica DNS, se pudo determinar que la mayor
agua destilada, en la tercera muestra se diluyen 400
cantidad de azúcares se encuentran en las cáscaras de
μL de solución patrón en 600 μL de agua destilada,
naranja, pues su valor más alto se reportó en la muestra
en la cuarta se diluyen 600 μL de solución patrón en
N3 (ver tabla 1), es decir, esta muestra contenía 59,88 g/L
400 μL de agua destilada, en la quinta se diluyen 800
de glucosa. Sin embargo, la cantidad de azúcares que se
μL de solución patrón en 200 μL de agua destilada y
reportaron en las muestras de banano son significativa-
en la sexta se agrega 1000 μL de la solución patrón.
mente altas a las reportadas por Hoyos y Pérez (2003)
A cada una de estas diluciones se les adiciona 1000 [7], con un valor de 38,77 g/L de azúcares reductores
μL de DNS y 10 mL de agua destilada. mostrados en la tabla 1.
Posterior a la realización de las diluciones, estas se llevaron La concentración de azúcares reductores que se obtu-
a baño de maría para que el DNS reaccionara con el azúcar vieron muestran un valor alto, debido a que el tiempo que
de las muestras. Luego se introdujeron en el espectrofotó- permanecieron las muestras sumergidas en Hidróxido de
[8] L. TEJEDA, J. QUINTANA, J. PÉREZ, H. YOUNG. [10] L. HOYOS, Y. PEREZ, “pretratamiento del material
“Obtención de etanol a partir de residuos de poda, lignocelulósicos de la planta de banano y su fruto
mediante hidrólisis ácida e hidrólisis enzimática, para la producción de jarabe, (universidad nacional
(Fundación Universitaria Tecnológico Comfenalco),”. de colombia),” medellín, 2003.
Rev. U.D.C.A. Cartagena, 2011, pp. 111-116. [11] G. BELDMAN, A. G. J. VORAGEN, F. M. ROMBOUTS,
[9] Ministerio de ambiente, vivienda y desarrollo territo- W. PILNIK. “Synergism in cellulose hydrolysis by
rial viceministerio de ambiente. 2008. Construcción endoglucanases and exoglucanases purified from
de criterios técnicos para el aprovechamiento y trichoderma viride, (biotechnology and bioengi-
valorización de residuos sólidos orgánicos con alta neering),” vol. 31. february 1988, pp. 173-178.
tasa de biodegradación, plásticos, vidrio, papel y [12] C.A, CARDONA, O.J, SÁNCHEZ, M.I, MONTOYA, J.A,
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gov.co/documentos/4077_170909_criterios_tec_ rial lignocelulósicos una nueva alternativa, (Universidad
residuos_org.pdf]. del Valle),”. Vol. II, núm. 1, 2005, pp. 47-55.
Los Autores
Bachiller Académico del Colegio La Presentación de Ocaña, Premio en las Olimpiadas de Matemáticas
de la Universidad El Bosque en el año 2011. Curso Intensivo de Ingles en la misma universidad.
Bachiller Académico del Colegio Instituto Henao y Arrubla, medalla mejor ICFES y medalla honorifica
“Pedro Nel Mateus” promoción 2008. Seleccionado por la beca “Quiero Estudiar” Universidad de los
Andes, 2009. Curso Intensivo En Ingles, Universidad Pedagógica Nacional, Bogotá D.C, 2011.