Pengukuran aktivitas inhibitor ACE mengacu pada metode Hayes et al, 2007.

Yang telah dimodifikasi dlm hal konsentrasi enzim, substrat, dan bahan pelarut
lainnya yg digunakan utk uji in vitro. Substrat enzim yg digunakan utk uji in-vitro
penghambatan ACE adalah Hippuryl-L-Histidyl-L-Leucine (HHL).

http://dx.doi.org/10.1128/AEM.00096-07
Casein fermentate of Lactobacillus animalis DPC6134 contains a range of novel
propeptide angiotennsin-converting enzyme inhibitors.

Beberapa bahan makanan dan obat tradisional diketahui mengandung

senyawa yang mempunyai fungsi dan aksi sama dengan ACE-I. Bahan makanan
yang memiliki kandungan fenolik dapat berkhasiat menurunkan tekanan darah
melalui penghambatan dan penurunan ekspresi ACE (Chen et al., 2009).
Salah satu golongan senyawa fenolik yang mempunyai aktivitas ACE-I
adalah flavonoid (Al Shukor et al., 2013). Mekanisme penghambatan ACE oleh
flavonoid dihasilkan melalui komponen fenolik yang berinteraksi dengan ACE (Al
Shukor et al., 2013). Senyawa flavonoid banyak terkandung di dalam bahan
konsumsi terutama buah dan sayur. Salah satu tanaman tropis yang memiliki
kandungan flavonoid adalah daun singkong (Asif et al., 2013).

In a previous study, two kinds of antihypertensive

peptides, Ile-Pro-Pro and Val-Pro-Pro, were purified
from sour milk fermented by a starter culture containing
L. helveticus and S. cerevisiae. Both peptides
had strong ACE inhibitory activities and were
produced in the sour milk during fermentation (8).
[8] --> Nakamura, Y., N. Yamamoto, K. Sakai, A. Okubo, S. Yamazaki,
and T. Takano. 1995. Purification and characterization of angiotensin
I-converting enzyme inhibitors from sour milk. J.
Dairy Sci. 78:777–783.

Many ACE inhibitory peptides have been isolated

from hydrolysates of various food materials (3, 4, 5, 6,
14).
[3] Maruyama, S., H. Mitachi, J. Awaya, M. Kurono, N. Tomizuka,
and H. Suzuki. 1987. Angiotensin I-converting enzyme inhibitory
activity of the C-terminal hexapeptide of a
-casein. Agric.
Biol. Chem. 51:2557–2561.
s1
[4] Maruyama, S., H. Mitachi, H. Tanaka, N. Tomizuka, and H.
Suzuki. 1987. Studies on the active site and antihypertensive
activity of angiotensin I-converting enzyme inhibitors derived
from casein. Agric. Biol. Chem. 51:1581–1586.
[5] Maruyama, S., S. Miyoshi, T. Kaneko, and H. Tanaka. 1989.
Angiotensin I-converting enzyme inhibitory activities of synthetic
peptides related to the tandem repeated sequence of a
maize endosperm protein. Agric. Biol. Chem. 53:1077–1081.
[6] Maruyama, S., K. Nakagomi, N. Tomizuka, and H. Suzuki.
1985. Angioten I-converting enzyme Inhibitor derived from an enzymatic hydrolysate of casein. II. Isolation and bradykininpotentiating
activity on the uterus and the ileum of rats. Agric.
Biol. Chem. 49:1405–1409.
ACE inhibitors
Organisasi Kesehatan Dunia menjelaskan hipertensi sebagai
nomor satu faktor risiko kematian, seperti di seluruh dunia setiap tahunnya 7,5 juta kematian (13% dari semua kematian) yang disebabkan
tekanan darah tinggi (BP) penyakit -terkait, terutama penyakit kardiovaskular (CVD) [1]. Untuk itu, pedoman hipertensi dan kardiologi
masyarakat menekankan bahwa pengobatan hipertensi harus bertujuan untuk mengurangi risiko jangka panjang (kardiovaskular) morbiditas dan
kematian. [2,3] Hipertensi sering disebut sebagai 'silent killer',
sebagai kehadirannya biasanya tanpa gejala. Oleh karena itu, pemenuhan
obat antihipertensi adalah tantangan bagi kebanyakan pasien,
terutama kontrol BP sebagai memadai sering memerlukan penggunaan beberapa
agen, menyebabkan efek samping tambahan dan sebagai hasil rendah
adherence.2 Jadi, ada kebutuhan terus untuk obat kuat,
sebaiknya dengan efek menguntungkan pada kematian, untuk meningkatkan
kepatuhan pasien terhadap pengobatan yang ditentukan.
Manfaat pengobatan antihipertensi pada kardiovaskular
morbiditas dianggap terutama disebabkan oleh penurunan tekanan darah
efek per se, independen dari kelas obat yang digunakan, seperti memiliki
dibuktikan dengan b-blocker, diuretik, calcium channel
blocker, dan baru-baru dengan renin-angiotensin-aldosteron
sistem (Raas) inhibitors.2 Blokade Raas adalah salah satu
target terapi utama pada pasien dengan hipertensi, sebagai terlalu aktif
Raas sangat terkait dengan BP tinggi. Kontrol Raas
volume sirkulasi dan keseimbangan elektrolit dalam manusia
Oleh karena itu tubuh dan merupakan regulator penting dari hemodinamik
stability.4 Raas inhibitor adalah kelas yang paling banyak diresepkan
obat untuk pengelolaan hipertensi. Saat ini,
yang paling relevan secara klinis agen farmakologis yang menghalangi
Raas adalah angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitor dan
receptor blockers AT1 (ARB). Kedua obat memblokir angiotensin II,
tapi ACE inhibitor yang ditandai dengan penurunan degradasi
bradikinin menyebabkan pelepasan oksida nitrat dan prostaglandin
mengakibatkan vasodilatasi tambahan. Perbedaan-perbedaan ini di
mode aksi antara inhibitor ACE dan ARB mungkin memiliki
implikasi klinis untuk pasien dengan hypertension.5
Qaaf 7-11
Dan Kami hamparkan bumi itu dan Kami letakkan padanya gunung-gunung yang kokoh dan
Kami tumbuhkan padanya segala macam tanaman yang indah dipandang mata,
untuk menjadi pelajaran dan peringatan bagi tiap-tiap hamba yang kembali (mengingat Allah).
Dan Kami turunkan dari langit air yang banyak manfaatnya lalu Kami tumbuhkan dengan air
itu pohon-pohon dan biji-biji tanaman yang dipanen untuk menjadi rezeki bagi hamba-
hamba (Kami).
Yaasiin 33
Dan suatu tanda (kekuasaan Allah yang besar) bagi mereka adalah bumi yang mati. Kami
hidupkan bumi itu dan Kami keluarkan dari padanya biji-bijian, maka daripadanya mereka
makan.
Abasa 25-32

An Naba' 15
supaya Kami tumbuhkan dengan air itu biji-bijian dan tumbuh-tumbuhan
Al-Luqman:10
Dia menciptakan langit tanpa tiang sebagaimana kamu melihatnya, dan Dia
meletakkan gunung-gunung (di permukaan) bumi agar ia (bumi) tidak
menggoyangkan kamu; dan memperkembangbiakkan segala macam jenis makhluk
bergerak yang bernyawa di bumi. Dan Kami turunkan air hujan dari langit, lalu
Kami tumbuhkan padanya segala macam tumbuh-tumbuhan yang baik.

Asy-Syuara:7
Dan apakah mereka tidak memperhatikan bumi, berapakah banyaknya Kami tumbuhkan
di bumi itu berbagai macam tumbuh-tumbuhan yang baik?
an-Nahl:11
Dengan (air hujan) itu Dia menumbuhkan untuk kamu tanam-tanaman, zaitun,
kurma, anggur dan segala macam buah-buahan. Sungguh, pada yang demikian itu
benar-benar terdapat tanda (kebesaran Allah) bagi orang-orang yang mengerti.

An-Nahl:69
Kemudian makanlah dari segala (macam) buah-buahan lalu tempuhlah jalan
Tuhanmu yang telah dimudahkan (bagimu). "Dari perut lebah itu keluar minuman
(madu) yang bermacam-macam warnanya, di dalamnya terdapat obat yang
menyembuhkan bagi manusia. Sungguh pada yang demikian itu benar-benar
terdapat tanda (kebesaran Allah) bagi orang yang berfikir.

An-Naba' : 15
Untuk Kami tumbuhkan dengan air itu biji-bijian dan tanaman-tanaman.

Ar-Rahman:10-12
Dan bumi telah dibentangkan-Nya untuk makhluk(-Nya),
di dalamnya ada buah-buahan dan pohon kurma yang mempunyai kelopak
mayang,
dan biji-bijian yang berkulit dan bunga-bunga yang harum baunya.
A. OKK (%DH)
2.4. Persiapan hidrolisat protein

hidrolisis dilakukan dalam reaktor gelas dalam kondisi yang terkendali (suhu dan
kecepatan pengadukan). The PuOC
PI ditangguhkan dengan pH glisin / HCl penyangga 3.00 (0,2 mol / l)
untuk konsentrasi fi nal dari 0,08% (w / v). Campuran yang
diinkubasi pada suhu yang sesuai dan hidrolisis dimulai dengan penambahan
larutan enzim untuk
diperlukan konsentrasi, sesuai dengan rencana eksperimental
(Tabel 1). Aliquot dibawa keluar setelah 60, 80 dan 100 menit
dan segera dipanaskan (100◦C, 5 menit) untuk mengakhiri reaksi.
Campuran dengan enzim yang tidak aktif disentrifugasi pada
14.500 rpm (Eppendorf Mini berputar ditambah) selama 10 menit dan
supernatan digunakan untuk analisis lebih lanjut.

2.5. Penentuan derajat hidrolisis (DH)

DH di PuOC hidrolisat PI ditentukan menurut

dengan metode oleh Pericin et al. (2009b). Untuk alikuot 0,5 ml
hidrolisat volume yang sama dari 0,44 mol / l trichloroacetic
acid (TCA) ditambahkan. Campuran diinkubasi selama 30 menit
di 4◦C. Setelah itu, campuran disentrifugasi pada 14500 rpm
(Eppendorf Mini berputar ditambah) selama 10 menit. Yang diperoleh 0,22 mol /
l
fraksi protein TCA-larut dan campuran hidrolisat dengan
out penambahan TCA masing-masing dianalisis untuk menentukan protein
konten dengan metode Lowry et al. (1951), menggunakan bovine
serum albumin sebagai protein standar. DH dihitung
sebagai rasio 0,22 mol / l protein TCA-larut terhadap total
protein dalam campuran hidrolisat, dinyatakan sebagai persentase.
B. DH 2
volume 100 g. Sebelum menundukkan untuk kimia atau enzimatik
hidrolisis, suspensi diatur untuk pH yang cocok dengan 4
N NaOH. Campuran reaksi diinkubasi pada 50 ° C dengan
pengadukan terus menerus selama 90 menit. Setelah itu, reaksi itu
dihentikan dan disentrifugasi pada 8000 g selama 30 menit untuk mendapatkan
supernatan sebagai hidrolisat protein. Tingkat% dari
hidrolisis (% DH) didefinisikan sebagai persentase dari peptida
obligasi dibelah selama reaksi hidrolisis relatif terhadap total
ikatan peptida [6]. Untuk menentukan nitrogen terlarut total dalam
protein hidrolisat supernatan, 20% asam trikloroasetat
(TCA) ditambahkan ke setara dengan hidrolisat protein dan
dicampur selama 2 menit. Setelah itu, disentrifus
di 10000G selama 15 menit sebelum nitrogen total di
supernatan diukur menurut [4].