20 渔业现代化 2008年第 35卷第 4期

臭氧处理海水对小球藻生长和水质的影响研究
1 2 1
张延青 , 刘 鹰 , 冯亚鹏
( 1 青岛理工大学, 青岛, 266033; 2 中国科学院海洋研究所, 青岛, 266071)

摘要: 臭氧消毒后生成的氧化物如果过量将影响养殖生 物和饵 料微藻 的生长, 为此 采用经臭 氧处理 的海水

培养小球藻 ( Chlor ella spp. ) , 分析臭氧处理海水生成氧化物对小球藻 生长的影响以及 臭氧处理 海水后氨氮
( NH 4 + -N )和亚硝酸盐氮 ( NO 2 - -N ) 含量变化。试验结果表明, 在温度 ( 25 1) , 光照度 10 000 lx左 右, 光
照时数 黑暗时数为 14 h 10 h, pH 8. 0 0. 1, 盐度 30. 0 0. 1的条 件下, 臭氧生成氧 化物质 量浓度 < 0. 735
m g /L时, 对小球藻不产生毒害作用; 在臭氧生成氧化物质量浓度 > 1. 036 mg /L 时, 有明显 的毒害作用 (小球
藻大量死亡 ); 质量浓度为 2. 364 m g /L 时, 小球藻全部死 亡。经臭氧处理 的海水, 其氨氮和 亚硝酸盐 氮的质
量浓度降低, 其中氨氮最大降低 82. 6% 。
关键词: 臭氧生成氧化物; 小球 藻; 生长; 水质净化

在海水养殖中, 臭氧 ( O3 ) 主要用于海水的消 N ) 的变化, 以确定适当的臭氧生成氧化物质量浓

[ 1- 4]
毒灭菌、
水质改良、
预防疾病等 。饵料生物培 度及处理工艺参数。
养是海水育苗的基础, 在生产中大规模培养和应
[ 5]
用的饵料微藻 有小球藻、螺旋藻、盐藻等 。传 1 材料与方法
统的饵料微藻培育用水的消毒和灭杂藻大多采用
1. 1 材料
加热或投加化学消毒剂方法, 此法操作管理麻烦、
试 验 藻 种: 试 验 所 用 小 球 藻 ( Chlorella
能耗高, 使用臭氧消毒海水培育饵料生物已在部
[ 6] spp. ), 取自青岛金瀛海 洋科技有 限公司饵 料车
分生产和试验 中付诸 实施 。臭 氧具有强 力杀
[ 7] 间。
菌作用, 但过量 后对养殖生物 也有毒害 , 尤其
- - - 试验海水: 取自青岛近海经蓄水沉淀、
砂滤罐
是自然海水组成复杂, 其中含有的 Br 、C l 、I 、
2+
M n 等离子都能被臭氧及其分 解产生的强氧化 过滤处理, 放置数日后使用。

剂氧化而生成氧化性物质, 即氧化性副产物 臭氧发生装置: 臭氧发生器为烟台豪尔电器

臭 氧 生 成 氧 化 物 ( O zone produced ox idants, 有限公司生产, 臭氧产量为 5 g /h, 气源为空气。
[ 7]
OPO) 。自然海水因成分复杂, 确定臭氧处理海 1. 2 方法
水生成氧化物的成分十分困难, 曾有研究报道了 1. 2. 1 臭氧处理氧化物获得 向盛有 60 L 试验
采用臭氧直接处理微藻而对微藻的毒害作用 。
[ 8]
海水的塑料桶中通臭氧以获得氧化物海水, 所用
微藻培育用水采用臭氧处理后再接种藻液, 可以 器材均经消毒处理 ( 1 N 稀盐酸浸泡数日 )。
[ 9]
避免臭氧对藻种的直接毒害, 但臭氧处理海水生 1. 2. 2 藻种培养 采用 f /2培养基 , 培养温度
成的氧化物可能对微藻的生长产生毒害, 影响或 25 左右, 2个 40 W 日光灯管 ( 光照距离约 10
抑制微藻的正常生长。因此, 有必要研究臭氧生 cm ) 全天照明, 以 3 000 mL 的三角烧瓶为培养容
成氧化物对小球藻的毒害作用以及海水养殖关键 器进行培养。
+ -
水质指标氨氮 ( NH 4 -N ) ) 和亚硝酸盐氮 ( NO2 - 1. 2. 3 小球藻的培养 (未添加营养盐 ) 获得不

收稿日期: 2008-04-10; 修回日期: 2008-07-10

基金项目: 国家自然科学基金项目 ( 30671620) ; 国家 863 计划项目 ( 2006AA 100305 ) ; 国 家科技支 撑计划项 目 ( 2006BAD 09A 03 ) ; 江苏省
科技成果转化专项资金项目 ( BA 2005039 )
作者简介: 张延青 ( 1963 ) , 女, 博士, 硕士研究生导师, 主要从事环境工程教育与研究。 E-m ai:l zyqlu ck@ 163. com
通讯作者: 刘鹰 ( 1969 ) , 男, 副研究员, 博士, 主要从事水产养殖工程学研究。 E-m ai:l y in liu@ m s. qdio. ac. cn
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同质量浓度的臭氧氧化物海水, 在不添加营养盐 1. 3. 3 氨氮和亚硝酸盐氮测定 用 0. 45 m 醋

的条件下, 接种小球藻观察其生长情况。试验设 酸纤维滤膜将小球藻滤出, 滤出液中氨氮和亚硝
计 2个处理组 (组 I、
组 II), 每一处理组又设 5水 酸盐氮的质量浓度测定 方法参考海洋监 测规范
平, 每个水平设 3个重复。具体操作如下: 向 2个 ( GB /T 17378. 3 1998) 。
( 组 I、组 II) 盛有 60 L 试验海水的塑料桶中分别
通入臭氧 30 m in、50 m in, 获得 2种氧化物质量浓 2 结果与讨论
度的臭氧处理海水, 按照试验设计, 取 5组不同体
2. 1 藻细胞浓度的日变化情况
积的臭氧处理海水分别加入到 3 000 mL 灭菌三
I、II两组逐日藻细胞浓度情况分别见图 1和
角烧瓶中, 暗光、
低温下静置 22 h。接种藻前用灭
图 2。
菌移液管取三角烧瓶中臭氧处理海水, 测定组 I、
在不添加营养盐情况下, 试验 组的臭氧生
组 II臭氧生成氧化物质量浓度分别为 1. 481 m g /
成氧化物质量浓度为 0. 373 m g /L 和 0. 518 m g /L
L 和 2. 072 mg /L。测定后立即接种指 数期藻液
7 时, 小 球藻生长 情况明显 好于对照 组; 在 0. 799
( 小球藻藻 细胞浓 度约 为: 3 10 个 /mL ) 1 500
m g /L 时, 小球藻生长被抑制, 藻细胞浓度逐渐降
mL, 然后再加入自然海水, 加入 的自然海水和臭
低; 在 0. 735 m g /L 时, 小球藻生长情况稍好于对
氧处理海水总体积为 1 500 mL ( 表 1) 。接种后立
照组, 对小球藻生长无明显影响, 不产生毒害作
即测得臭氧 生成氧 化物 质量浓 度, 处理 组 I: 0,
用。试验 II 组的 臭 氧生 成 氧化 物 质 量浓 度 在
0. 373, 0. 518, 0. 735, 0. 799 m g /L; 处 理组 II: 0,
0. 159 mg /L和 0. 259 mg /L 时, 小球藻生长良好;
1. 036, 0. 777, 0. 259, 0. 124 m g /L。组 I、组 II分
别培养 6 d和 12 d, 每天测定藻细胞浓度 1次, 每 在 1. 036 mg /L 时, 观察到明显的毒害作用 ( 小球

小组取 3个样, 取平均值。培养条件: 温度 ( 25 藻大 部分 死 亡 ), 并 且浓 度 越高, 毒性 越 强; 在

1) , 光照度 10 000 lx 左右, 光照时数 黑暗时数 2. 364 mg /L 时, 观 察到 小球 藻已 全部 死亡。另

为 14h 10h, pH 8. 0 0. 1, 盐度 30. 0 0. 1。 外, 从试验中亦发现小球藻对臭氧生成氧化物的
毒害有一定的抵抗力。在一定臭氧生成氧化物质
表 1 各处理组加入臭氧水和自然海水的体积 量浓度的臭氧化海水中, 小球藻细胞浓度降到一
以及氧化物质量浓度 定值后 ( 未出现零值 ), 又恢复增长, 藻细胞浓度
T ab. 1 V o lum e o f ozonated seaw ater, raw seawa ter and 又逐渐增加, 该现象值得进一步研究。
m ass concen tra tion in d ifferent treatm ents 2. 2 小球藻培养液中氨氮和亚硝酸盐氮变化
处理组 组成 A B C D E
臭氧水体积 ( m L) 0 755 1050 1320 1500 臭氧处理海水中臭氧生成氧化物质量浓度越
自然海水体积 ( m L) 1500 745 450 180 0
藻液体积 ( m L) 1500 1500 1500 1500 1500
高, 氨氮和亚硝酸盐氮质量浓度越低。培养小球藻
氧化物质量浓度 ( m g /L ) 0 0. 373 0. 518 0. 735 0. 799
的藻液中, 试验 I组中对照组的氨氮和亚硝酸盐氮
臭氧水体积 ( m L) 0 1500 1125 375 180
自然海水体积 ( m L) 1500 0 375 1125 1320 明显高于处理组 (图 3、
图 4) 。在试验第 6天, 处理
藻液体积 ( m L) 1500 1500 1500 1500 1500
氧化物质量浓度 ( m g /L ) 0 1. 036 0. 777 0. 259 0. 124 组和对照组的氨氮质量浓度相差达到 0. 3 m g /L 以
上; 对照组的氨氮和亚硝酸盐氮逐日升高, 而各处
1. 3 指标测定 理组中其含量逐日降低, 其中 E组氨氮浓度降低的
1. 3. 1 臭氧处理海水生成氧化物测定 ( 比色法 ) 最多, 氨氮质量浓度从 0. 327 m g /L 降低到 0. 057
在比色管中混合臭氧处理的海水与同量的 2% m g /L, 下降了 82. 6% 。试验 II组除 E 组的氨氮和
K I海水溶液以 H 2 SO4溶液调节 pH 值至 7. 0 后, 亚硝酸盐氮出现先上升再下降的情况外, 其它处理
在 25 时置于暗处, 使之反应 10 m in, 以 7200型 组显示出和试验 I组类似的情况 ( 图 5、
图 6) 。臭
UN ICO分光光度计进 行零调节, 测定 352 nm 时 氧生成氧化物由于具有极强的氧化性, 可以促进氨
的吸光度, 利用标准曲线计算测定吸光度的对应 氮的转化, 同时臭氧可以和亚硝酸盐反应, 生成硝
质量浓度。 酸盐。已有试验证明, 只要水中有剩余臭氧存在,
[ 10]
1. 3. 2 藻细胞浓度 血球计数板计数 亚硝酸盐就会被全部氧化; 理论上, 每降解 1 m g亚
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[ 11]
硝酸盐, 需要消耗 1. 04 m g臭氧 。说明臭氧具
有较强降解和氧化作用。

图 5 II组培养藻液中氨氮质量浓度变化
F ig. 5 V ariation o f NH 4 + -N concentration in cultured
Chlorella of group II

图 1 臭氧处理 组对藻细胞浓度的影响
F ig. 1 E ffect o f ozone treatment on ce ll concentration of
Chlorella in group

图 6 II组培养藻液中亚硝酸盐氮质量浓度变化
F ig. 6 V ariation of NO2 - -N concen tra tion in cultured
Ch lorella of g roup II

图 2 臭氧处理 组对藻细胞浓度的影响
3 结论
F ig. 2 E ffect o f ozone treatment on ce ll concentration of
Chlorella in group 臭氧生成氧化物质量浓度越高, 对小球藻的生
长影响越大。臭氧生成氧化物质量浓度在 0. 735
m g /L 时, 对小球藻生长无影响, 不产生毒害作用;
质量浓度 0. 799 m g /L 时, 小球藻生长被抑制, 藻细
胞浓度逐渐降低; 质量浓度 1. 036 m g /L 时, 观察到
明显的毒害作用 ( 小球藻大部分死亡 ), 并且质量
浓度越高, 毒性越强。在质量浓度为 2. 364 m g /L
图 3 组培养藻液中氨氮质量浓度变化 时, 小球藻已全部死亡。
+
F ig. 3 V ariation o f NH 4 -N concentration in cultured 从大量的试验发现, 小球藻对臭氧生成氧化
Chlorella of group 物的毒害作用有一定的抵抗力, 在一定臭氧生成
氧化物质量浓度的臭氧化海水中小球藻细胞浓度
降到一定值后 ( 未出现零值 ), 又恢复增长, 藻细
胞浓度又逐渐增加, 该浓度值需通过进一步试验
来确定。经臭氧处理的海水, 氨氮和亚硝酸盐氮
的含量降低, 处理组的氨氮和亚硝酸盐氮质量浓
度明显低于对照组, 在整个试验阶段, 这种效应一
直存在。
图 4 组培养藻液中亚硝酸盐氮质量浓度变化 参考文献
F ig. 4 V ariation of NO2 - -N concen tra tion in cultured
[ 1] 孙广明, 李宝华, 杨建 军, 等. 臭氧 水处理原 理及在水 产养殖
Ch lorella of g roup
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Effect of ozone produced oxidant in

seaw ater to the grow th of Chlorella spp. and w ater quality
1 2 1
ZHANG Yan-q ing , L IU Y ing , FENG Ya-peng
( 1 Qingdao T echnolog ical University, Q ingdao 2660003, Ch in a;
2 Institu te of O ceanology, Chinese A cadem y of Sciences, Qingdao 266071, China )

Abstract: The effect o f O zone produced ox id ants in seaw ater to the grow th o f chlorella spp. and w ater qua lity
+ -
w as stud ie d. M eanw hile, NH 4 -N and NO2 -N concentration in seaw ater by treated ozone w ere ana ly zed.
The resu lts show ed that the density o f OPO under th e leve l o f 0. 735 m g /L was harm less to the g row th o f
chlorella spp. , w h ile it w as obviously harm ful above 1. 036 mg /L and lots of chlorella spp. had perished.
+ -
NH 4 -N and NO 2 -N concem trat ion in ozone treated seaw ater decreased.
K ey w ord s: ozone produced ox idan;t Chlorella spp. ; m icro-algae; seed breed ing; w ater quality purification

( 上接第 27页 )

Effects of hyperoxic dissolved oxygen levels

on grow th and digestive enzym e of turbot, Scophthalm us maxim us
XU Yong, QU Ke-m ing, MA Shao-sa i
( K ey Laboratory of Sustainable Utilization of M arine F isheries R esources, M inistry of Agricultu re,
Yellow S ea F isheries Research Institute, Chinese A cadem y of F ishery S ciences, Q ingdao 266071, China )

Abstract: To determ in e the e ffects of hyperox ic oxygen on tu rbo t w ith eng in eerin g culture system, w e dis-
cussed the effects o f d ifferent dissolved oxygen env ironm en t ( hyperox ic oxygen conditions ( 12 1, 14 1 m g /
L, norm a l oxygen leve 17 0. 5 mg /L ) on grow th, digesit iv e activ ity o f tu rbo .t T he resu lts show ed that the
grow th speed of turbot and ut ilization rate of feedstuff w ith the hyperox ic cond itionsw ere higher th an th at o f the
norm a l oxygen leve l ( p < 0. 05). There w as no obv io usly d ifference ( p > 0. 05) betw een fat facto r under hy-
perox ic oxygen conditions and that at th e norm a l dissolved oxygen leve.l The d ig est iv e enzym e in the turbo t
stom ach and gu t w ere researched respect iv e ly. The results show ed that there w as no obv iously h igher betw een
am ylase and lip ase o f stom ach, gut under hyperox ic oxygen cond itions than norm al oxygen level ( p > 0. 05),
but the pro tease activ ity of stom ach under hyperox ic oxygen w as effect iv e ly streng thened ( p < 0. 05 ), a-l
though th e protease act iv ity of gut had been raised, but the d ifference w as no t obv ious ( p > 0. 05).
K ey w ords: Turbot ( Scoph tha lm u s m ax im us ); d isso lved oxygen; hyperox ic oxygen; grow th; d ig est iv e en-
zym e