Page 

iv

Address All Inquiries to the Publisher

Wiley­Liss, Inc., 605 Third Avenue, New York, NY 10158­0012

Copyright   1997 Wiley­Liss, Inc.

Printed in the United States of America.

This text is printed on acid­free paper.

Under the conditions stated below the owner of copyright for this book hereby grants permission to users to make photocopy reproductions of any part or all of its 
contents for personal or internal organi ational use, or for personal or internal use of specific clients. This consent is given on the condition that the copier pay the stated 
per­copy fee through the Copyright Clearance Center, Incorporated, 27 Congress Street, Salem, MA 01970, as listed in the most current issue of "Permissions to 
Photocopy" (Publisher's Fee list, distributed by CCC, Inc.), for copying beyond that permitted by sections 107 or 108 of the US Copyright Law. This consent does 
not extend to other kinds of copying for general distribution, for advertising or promotional purposes, for creating new collective works, or for resale.

Cover Illustration: An artist's conception of the initiation of the DNA transcription mechanism cataly ed by RNA polymerase and involving protein transcription 

factors.

Subject Editor: Stephanie Diment 
Design: Laura Ierardi 
Senior Managing Editor: John Sollami 
Marketing Managers: David Stier and David Steltenkamp
Manufacturing Manager: Rick Mumma 
Illustration Coordinator: Barbara Kennedy 
Illustrations and Cover: Page Two

This book was set in ITC Garamond Light by Bi­Comp Incorporated, and was printed and bound by Von Hoffmann Press.

Library of Congress Cataloging­in­Publication Data

Textbook of biochemistry: with clinical correlations/edited by 
Thomas M. Devlin   4th ed. 
p.  cm. 
Includes bibliographical references and index. 
ISBN 0­471­15451­2 
1. Biochemistry.  2. Clinical biochemistry.  I. Devlin, Thomas M. 
DNLM: 1. Biochemistry.  QU 4 T355 1997  
QP514.2.T4  1997                                                                                            97­1078
612'.015 dc21                                                                                                      CIP

10 9 8 7 6 5 4 3

    
 Page 1083

muscle cells in particular take up large amounts of dietary lipids for storage or metabolism. The bypass of the liver may have evolved to protect this organ from a lipid 
overload after a meal.

The differential handling of medium­ and long­chain fatty acids by intestinal cells can be specifically exploited to provide the liver with high­caloric nutrients in the form 
of fatty acids. Short­ and medium­chain fatty acids are not very palatable; however, triacylglycerols synthesi ed from these fatty acids are quite palatable and can be 
used as part of the diet.

26.7
Bile Acid Metabolism

All bile acids are synthesi ed within the liver from cholesterol but can be modified by bacterial en ymes in the intestinal lumen. Primary bile acids synthesi ed by the 

liver are cholic and chenodeoxycholic (or chenic) acid. The secondary bile acids are derived from the primary bile acids by bacterial dehydroxylation in position 7 
of the ring structure, resulting in deoxycholate and lithocholate, respectively (Figure 26.35).

Primary and secondary bile acids are reabsorbed by the intestine into the portal blood, taken up by the liver, and then resecreted into bile. Within the liver, primary as 
well as secondary bile acids are linked to either glycine or

Figure 26.35
Bile acid metabolism in the rat.
Green and black arrows indicate reactions cataly ed by liver en ymes; red arrows 
indicate those of bacterial en ymes within the intestinal lumen. (NH ), glycine 
or taurine conjugate of the bile acids.

    
 Page 1084

taurine via an isopeptide bond. These derivatives are called glyco­ and tauro­conjugates, respectively, and constitute the forms that are secreted into bile. With the 
conjugation, the carboxyl group of the unconjugated acid is replaced by an even more polar group. The pK values of the carboxyl group of glycine and of the sulfonyl 
group of taurine are lower than that of unconjugated bile acids, so that conjugated bile acids remain ioni ed over a wider pH range (see Table 26.10). The conjugation 
is partially reversed within the intestinal lumen by hydrolysis of the isopeptide bond.

The total amount of conjugated and unconjugated bile acids secreted per day by the liver is 16–70 g for an adult. As the total body pool is only 3–4 g, bile acids have 
to recirculate 5–14 times each day between the intestinal lumen and the liver. Reabsorption of bile acids is important to conserve the pool. Most of the uptake is 
probably by passive diffusion along the entire small intestine. In addition, the lower ileum contains a speciali ed Na+­bile acid cotransport system for concentrative 
reuptake. Thus during a meal, bile acids from the gallbladder and liver are released into the lumen of the upper small intestine, pass with the chyme down the small 
intestinal lumen, are reabsorbed by the epithelium of the lower small intestine into the portal blood, and are then extracted from the portal blood by the liver 
parenchymal cells. The process of secretion and reuptake is referred to as the enterohepatic circulation (Figure 26.36). Reabsorption of bile acids by the intestine is 
quite efficient as only about 0.5 g of bile acids escapes reuptake each day and is secreted with the feces. Serum levels of bile acids normally vary with the rate of 
reabsorption and therefore are highest during a meal.

Cholate, deoxycholate, chenodeoxycholate, and their conjugates continuously participate in the enterohepatic circulation. In contrast, most of the lithocholic acid that 
is produced by bacterial en ymes is sulfated during the next passage through the liver. The sulfate ester of lithocholic acid is not a substrate for the bile acid transport 
system in the ileum and therefore is excreted in the feces.

Figure 26.36
Enterohepatic circulation of bile acids.
Redrawn from Clark, M. L., and Harries, J. T. In: I. McColl and G. E. Sladen (Eds.), 
Intestinal Absorption in Man. New York: Academic Press, 1975, p. 195.

    
Fisiologi Hewan (2019)

Analisis Enzim Pencernaan menggunakan Variasi Uji

Siti Fatimah, Mukhammad Akmal Surur, Muhammad A’tourrohman,

Afinatur Rohmah, dan Fuadela Khumaera*

Laboratorium Biokimia
Jurusan Biologi
Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Walisongo
*Corresponding Author: athoqsara11@gmail.com

Abstrak. Sistem pencernaan pada hewan umumnya sama dengan manusia, yaitu terdiri atas
mulut, faring, esofagus, lambung, dan usus. Namun demikian struktur alat pencernaaan
bebeda-beda dalam berbagai jenis hewan, tergantung pada tinggi rendahnya tingkat
organisasi sel hewan tersebut serta jenis makanannya. Tujuan dari percobaan analisis enzim
pencernaan adalah untuk mengetahui macam-macam enzim yang terdapat dalam sistem
pencernaan dan membuktikannya. Pertama, kami membuktikan adanya enzim amilase pada
pencernaan dengan cara menggunakan ekstrak usus yang dicampurkan dengan reagen
benedict; 2,5 ml larutan amilum 1% dan aquades. Pada perlakuan uji, diperoleh bahwaa ada
aktivitas enzim amilase yang menghidrolisis amilum. Selanjutnya kami juga membuktikan
adanya enzim sukrase pada sistem pencernaan dengan cara menggunakan ekstrak usus yang
ditambah dengan larutan sukrosa 2,5 ml, reagen benedict, dan aquades. Perubahan warna
terjadi karena enzim sukrase menguraikan sukrosa menjadi glukoa dan fruktosa. Pengujian
enzim sukrase positif apabila larutan mengandung endapan warna coklat dan terdapat
gelembung, jadi hasil pada tabung kedua yaitu positif mengandung sukrase. Yang ketiga
kami membuktikan adanya enzim tripsin dengan menggunakan albumin yang telah
diencerkan kemudian dipanaskan, setelah itu ditambahkan ekstrak usus dan aquades kedalam
tabung reaksi. Hasil yang didapatkan yaitu pada larutan uji yang ditambah dengan ekstrak
enzim yaitu terbentuk warna coklat muda pada larutan. Hal ini menunjukan bahwa larutan
kedua positif mengandung enzim tripsin. Uji terakhir yang kami lakukan pada percobaan
kemarin adalah uji pengaruh empedu terhadap lemak. Dengan cara menggunakan cairan
empedu yang telah diencerkan dan ditambah dengan aquades dan minyak goreng, kemudian
dikocok dengan kuat selama 10 menit. Terakhir diamati perubahan yang terjadi pada masing
tabung uji. Pada uji ini terbukti bahwa empedu memiliki fungsi dapat menyerap lemak atau
minyak.
Kata Kunci: Amilase, maltase, tripsin, empedu

PENDAHULUAN namun karbohidrat lebih banyak di

Latar Belakang konsumsi sehari-hari sebagai bahan
Karbohidrat atau Hidrat Arang makanan pokok, terutama pada negara
adalah suatu zat gizi yang fungsi utamanya sedang berkembang (Hutagalung, 2004)
sebagai penghasil enersi, dimana setiap
Pencernaan karbohidrat terjadi
gramnya menghasilkan 4 kalori. Walaupun
ketika polisakarida, senyawa karbohidrat
lemak menghasilkan enersi lebih besar,
kompleks yang mengandung lebih dari

1
Fisiologi Hewan (2019)
merah bata dengan jumlah sangat sedikit.
Hal ini menunjukkan bahwa amilum
tersebut telah berubah menjadi gula-gula
sederhana. Hal ini sesuai Isnaeni (2006)
bahwa enzim amilase berfungsi mengubah
amilum menjadi glukosa.
Larutan Benedict adalah larutan
yang mengandung ion-ion tembaga(II)
yang dikompleks dalam sebuah larutan
basa. Larutan Benedict mengandung ion-
ion tembaga(II) yang membentuk
kompleks dengan ion-ion sitrat dalam
larutan natrium karbonat. Pengompleksan
ion-ion tembaga(II) dapat mencegah
terbentuknya sebuah endapan - kali ini
endapan tembaga(II) karbonat. Benedict
merupakan reagen yang dapat
membuktikan adanya zat yang
mengandung glukosa dan turunannya,
hasil yang positif memberikan endapan
berwarna merah bata karena terbentuknya
ikatan antara atom Cu atau tembaga yang
berikatan dengan gugus aldehid dari
glukosa yang bersifat aktif. Pada keadaan
ini atom tembaga yang berada pada bentuk
ioniknya dengan bilangan oksidasi 2 akan
membentuk ikatan ionik dengan oksigen
pada sisi aldehid atau keton membentuk
endapan Tembaga(II) Oksida.
Uji Empedu
Pada uji empedu digunakan dua
perlakuan. Tabung A menggunakan bahan
utama empedu. Tabung B menggunakan
5
bahan utama berupa aquades. Setelah itu
masing-masing tabung diberi 2 ml minyak,
lalu di kocok selama 5 menit. Dan
didiamkan.
Berdasarkan hasil pengamatan
pada tabung A empedu dan minyak
tercampur menjadi satu dan bewarna hijau
gelap. Hal ini membuktikan fungsi
empedu yaitu dapat menyerap lemak.
Karena minyak merupakan senyawa non
polar, sehingga dapat bercampur dengan
empedu yang juga bersifat non polar.
Sedangkan pada tabung B diperoleh hasil
ada dua larutan yang terbentuk yaitu
minyak dan air. Hal ini membuktikan
bahwa minyak dan air tidak bia menyatu
karena berbeda sifat. Minyak bersifat non
polar, sedangkan air bersifat polar.
Uji Sukrosa
Yang ketiga yaitu uji enzim
sukrase. Yang dilakukan yaitu dua tabung
diisi dengan 2,5 ml larutan sukrosa pada
tiap-tiap tabungnya. Kemudian ditambah
dengan 1 ml ekstrak enzim, dan yang satu
ditambah dengan 1ml aquades,
penambahan tersebut dilakukan secara
bersamaan. Kemudian kedua tabung reaksi
tersebut digojog selama 10 menit. Setelah
itu kedua tabung ditambah dengan 2ml
reagen benedict dan dipanaskan selama
10menit.
Hasil yang didapatkan yaitu tabung
reaksi yang ditambah dengan akuades
Acquisitions Editor: Susan Rhyner
Product Manager: Angela Collins
Development Editor: Kelly Horvath
Marketing Manager: Joy Fisher-Williams
Production Manager: David Salt berg
Art and Page Design: Debbie McQuade
Cover Design: Holly McLaughlin

Sixth Edition

Copyright 2014 (2011, 2008, 2005, 1994, 1987) Lippincott Williams Wilkins, a Wolters Kluwer business

351 West Camden Street Two Commerce Square; 2001 Market Street
Baltimore, MD 21201 Philadelphia, PA 19103

Printed in China

All rights reserved. This book is protected by copyright. No part of this book may be reproduced or transmitted in any
form or by any means, including as photocopies or scanned-in or other electronic copies, or utili ed by any information
storage and retrieval system without written permission from the copyright owner, except for brief quotations embodied in
critical articles and reviews. Materials appearing in this book prepared by individuals as part of their official duties as U.S.
government employees are not covered by the above-mentioned copyright. To request permission, please contact
Lippincott Williams Wilkins at Two Commerce Square, 2001 Market Street, Philadelphia, PA 19103, via email at
permissions@lww.com, or via website at lww.com (products and services).

987654321

Library of Congress Cataloging-in-Publication Data

Ferrier, Denise R.
Biochemistry / Denise R. Ferrier. -- 6th ed.
p. ; cm. -- (Lippincott s illustrated reviews)
Rev. ed. of: Biochemistry / Richard A. Harvey, Denise R. Ferrier. 5th ed. c2011.
Includes bibliographical references and index.
ISBN 978-1-4511-7562-2 (alk. paper)
I. Title. II. Series: Lippincott s illustrated reviews.
DNLM: 1. Biochemistry--Examination Questions. QU 18.2

612.3 9--dc23

2012025941

DISCLAIMER
Care has been taken to confirm the accuracy of the information presented and to describe generally accepted practices.
However, the authors, editors, and publisher are not responsible for errors or omissions or for any consequences from
application of the information in this book and make no warranty, expressed or implied, with respect to the currency,
completeness, or accuracy of the contents of the publication. Application of this information in a particular situation remains
 gene for the CF transmembrane conductance regulator (CFTR) protein that functions
as a chloride channel on epithelium in the pancreas, lungs, testes, and sweat gands.
Defective CFTR results in decreased secretion of chloride and increased uptake of
sodium and water. In the pancreas, the depletion of water on the cell surface results
in thickened secretions that clog the pancreatic ducts, preventing pancreatic
en ymes from reaching the intestine, thereby leading to pancreatic insufficiency.
Treatment includes replacement of these en ymes and supplementation with fat-
soluble vitamins. Note: CF also causes chronic lung infections with progressive
pulmonary disease and male infertility.

B. Emulsification of dietary lipid in the small intestine

The critical process of emulsification of dietary lipids occurs in the duodenum.
Emulsification increases the surface area of the hydrophobic lipid droplets so that the
digestive en ymes, which work at the interface of the droplet and the surrounding
aqueous solution, can act effectively. Emulsification is accomplished by two
complementary mechanisms, namely, use of the detergent properties of the
conjugated bile salts and mechanical mixing due to peristalsis. Bile salts, made in the
liver and stored in the gallbladder, are amphipathic derivatives of cholesterol (see p.
224). Conjugated bile salts consist of a hydroxylated sterol ring structure with a side
chain to which a molecule of glycine or taurine is covalently attached by an amide
linkage (Figure 15.3). These emulsifying agents interact with the dietary lipid particles
and the aqueous duodenal contents, thereby stabili ing the particles as they become
smaller from peristalsis and preventing them from coalescing. A more complete
discussion of bile salt metabolism is given on p. 225.

Figure 15.3 Structure of glycocholic acid.

C. Degradation of dietary lipids by pancreatic en ymes

The dietary TAG, cholesteryl esters, and phospholipids are en ymically degraded
(“digested ) by pancreatic en ymes, whose secretion is hormonally controlled.
1. Triacylglycerol degradation: TAG molecules are too large to be taken up
efficiently by the mucosal cells of the intestinal villi. They are, therefore, acted upon
by an esterase, pancreatic lipase, which preferentially removes the fatty acids at
 carbons 1 and 3. The primary products of hydrolysis are, thus, a mixture of 2-
monoacylglycerol and free fatty acids (see Figure 15.2). Note: This en yme is found
in high concentrations in pancreatic secretions (2%–3% of the total protein
present), and it is highly efficient catalytically, thus insuring that only severe
pancreatic deficiency, such as that seen in CF, results in significant malabsorption of
fat. A second protein, colipase, also secreted by the pancreas, binds the lipase at a
ratio of 1:1 and anchors it at the lipid–aqueous interface. Colipase restores activity
t o lipase in the presence of inhibitory substances like bile salts that bind the
micelles. Note: Colipase is secreted as the ymogen, procolipase, which is activated
in the intestine by trypsin. Orlistat, an antiobesity drug, inhibits gastric and
pancreatic lipases, thereby decreasing fat absorption, resulting in weight loss.
2. Cholesteryl ester degradation: Most dietary cholesterol is present in the free
(nonesterified) form, with 10%–15% present in the esterified form. Cholesteryl
esters are hydroly ed by pancreatic cholesteryl ester hydrolase (cholesterol
esterase), which produces cholesterol plus free fatty acids (see Figure 15.2). Activity
of this en yme is greatly increased in the presence of bile salts.
3. Phospholipid degradation: Pancreatic juice is rich in the proen yme of
phospholipase A2 that, like procolipase, is activated by trypsin and, like cholesteryl
ester hydrolase, requires bile salts for optimum activity. Phospholipase A2 removes
one fatty acid from carbon 2 of a phospholipid, leaving a lysophospholipid. For
example, phosphatidylcholine (the predominant phospholipid of digestion) becomes
lysophosphatidylcholine. The remaining fatty acid at carbon 1 can be removed by
lysophospholipase, leaving a glycerylphosphoryl base (for example,
glycerylphosphorylcholine, see Figure 15.2) that may be excreted in the feces,
further degraded, or absorbed.

Figure 15.4 Hormonal control of lipid digestion in the small intestine.

 DOI:http://dx.doi.org/10.7314/APJCP.2012.13.KKSuppl.77
Biliary Bile Acids in Patients with Benign Biliary Diseases, Hepatocellular Carcinoma and Cholangiocarcinoma

RESEARCH ARTICLE

denti cation of Biliar BileAcids in atients with Benign Biliar

Diseases, Hepatocellular Carcinoma and Cholangiocarcinoma
Apinya Jusakul1,4,5, Narong Khuntikeo2 4, W Geoffrey Haigh5, Rahul Kuver5,
George N Ioannou5, Watcharin Loilome1,4, Nisana Namwat1,4, Vajarabhongsa
Bhudhisawasdi2 4, Ake Pugkhem2 4, Chawalit Pairojkul3,4, Puangrat Yongvanit1,4*

Abstract
Bile acids are implicated as aetiological factors in many types of gastrointestinal tract cancer including
cholangiocarcinoma (CCA). Alterations in bile acid concentrations may affect the pathogenesis of these different
t es of cancer. Our aim was to determine the bile acid ro le in gallbladder bile from atients who underwent
liver resection. Thirty-seven patients with cholangiocarcinoma, 5 with hepatocellular carcinoma, and 7 with
benign biliary diseases were studied. High pressure liquid chromatography was used to analyze conjugated and
uncon ugated bile acids. A atients with low ( 2 mg dl and high ( 2 mg dl levels of total serum bilirubin
had signi cantl higher total bile acid and con ugated bile acid concentrations than the benign biliar disease
group. Markedly elevated levels of cholic and chenodeoxycholic acid were found in CCA cases with high levels
of total serum bilirubin. Concentrations of total bile acids and primary bile acid were correlated with serum
cholesterol, bilirubin and ALP in CCA. Notably, correlation of the carcinoembryonic antigen, a tumor marker,
was found with level of total bile acids and chenodeox cholic acid. hese ndings suggest a different attern of
bile acid concentration in cancer patients compared to patients with benign biliary diseases. Thus, accumulation
of certain bile acids may be involved in carcinogenesis.
Keywords: Bile acids - cholangiocarcinoma - hepatocellular carcinoma

As an ac c J Cancer rev, 13, 77-82

Introduction of the esophagus, stomach, small intestine, biliary tract,

pancreas and colon (Kuwahara et al., 1989; Reveille et
Bile acids are sterol-derived compounds synthesized al., 1990; Ross et al., 1991; Bayerdorffer et al., 1995;
and secreted by hepatocytes into bile canaliculi (Plaa et al., Kauer and Stein, 2002; Tucker et al., 2004). As bile
1982). Bile acids are actively secreted by the liver into bile uid contains major ool of bile acids, the interaction
and discharged into the intestinal lumen upon ingestion of of bile acids with cholangiocytes leads to alterations
a meal. Bile acids confer detergent-like properties that are of cholangiocyte secretion, proliferation, apoptosis and
important for their physiological functions in absorption differentiation (Alpini et al., 1999; Alpini et al., 2001;
of dietary lipids and fat-soluble vitamins from the small 2002a). Deleterious effects of bile acid exposure that are
intestine (Chiang, 2009). Bile acids that are synthesized thought to be related to carcinogenesis include induction
from cholesterol in hepatocytes are termed primary bile of reactive oxygen and reactive nitrogen species; induction
acids. The most abundant primary C24 bile acids are of DNA damage, mutations, apoptosis in the short term,
chenodeoxycholic acid (CDCA) and cholic acid (CA). Bile and selection for apoptosis resistance in the long term
acids that are formed by bacterial modi cation by removal, (Craven et al., 1987; Booth et al., 1997; Crowley-Weber
oxidation, or epimerization of the nuclear hydroxyl groups et al., 2002). Bile acids may promote carcinogenesis by
of primary bile acids are termed secondary bile acids. stimulating a variety of kinase signaling pathways; for
The most common C24 7-deoxy bile acids are lithocholic example proliferation of cholangiocytes induced by bile
acid (LCA), formed by bacterial 7-dehydroxylation of acids occurs by a phosphatidylinositol 3-kinase-dependent
CDCA, and deoxycholic acid (DCA), formed by bacterial pathway (Alpini et al., 2002b). Transactivation of the
7-dehydroxylation of CA. epidermal growth factor receptor by bile acids has been
Bile acids are also implicated as causative agents in shown to stimulate cholangiocyte proliferation (Yoon et
cancers of the gastrointestinal tract, including cancers al., 2002a).
1
e artments of B ochem stry, 2 e artments of Surgery, 3 e artments of athology, 4L ver Fluke and Cholang ocarc noma Research
Center, Faculty of Med c ne, Khon Kaen Un vers ty, Khon Kaen, Tha land 5 e artment of Med c ne, Un vers ty of ash ngton, School
of Med c ne and the e artment of Veterans Affa rs Med cal Center, Seattle, A, USA For corres ondence uangrat@kku ac th
As an ac c Journal of Cancer revent on, Vol 1 , 2012 77

Biliary Bile Acids in Patients with Benign Biliary Diseases, Hepatocellular Carcinoma and Cholangiocarcinoma
HB. This nding suggests that bile duct obstruction may
alter bile acid levels. Higher levels of primary bile acids
resulting in an increased primary:secondary bile acid
ratio in samples from patients with CCA with HB were
also found. A positive correlation between total bile acids
or total primary bile acids and biliary tract obstruction
was also found, with total bilirubin and direct bilirubin
representing markers of bile obstruction. CA and CDCA
were also increased in the CCA group compared to the
benign biliary disease group.
A previous study showed that bile duct obstruction
increases bile acid synthesis. Bile duct ligation in
rats increased serum, liver and urine bile acid levels
(Kinugasa et al., 1981). The mechanism by which bile duct
obstruction induces bile acid synthesis remain unclear but
accelerated hepatic cholesterol synthesis and increased
serum cholesterol levels have been proposed (Cooper
and Ockner, 1974). A correlation between total bile acids
and primary bile acids and cholesterol concentrations was
also found in this study. Therefore, increased cholesterol
synthesis is consistent with increased bile acid production.
Park et al. (2006) also reported increased CA in bile from
patients with biliary tract cancer compared to patients’
bile with biliary tract stones and normal bile. In contrast,
they found decreased total and secondary bile acids in
biliary tract cancers. Low levels of secondary bile acids
may be caused by primary bile acids that cannot reach
the regions in bowel where secondary bile acids are
produced. Production of secondary bile acids also depends
on bacterial enzymes, so infection could be a contributing
factor. Recently, Hel cobacter ylor was found in 66%
of bile samples in patients with CCA (Boonyanugomol
et al., 2012). This nding su orts higher roduction of
secondary bile acids in CCA compared to benign biliary
diseases. Although we used benign biliary disease as a
control, signi cantly different results com ared to the
cancer groups were obtained. Sharif et al. (2010) reported
different patterns of bile acids in bile from patients with
CCA compared to bile from patients with benign biliary
disease. They also suggested bile acids as potential
disease biomarkers for distinguishing malignant from
benign biliary disease. Although the differences were not
signi cantly different, we also found increasing levels of
total bile acids, total conjugated bile acids and rimary bile
acids in bile from patients with CCA with HB compared to
bile from patients with hepatocellular carcinoma. Lower
levels of ALT, AST and ALP were found in the bile from
patients with hepatocellular carcinoma compared to the
bile from patients with CCA and high levels of serum
bilirubin. This suggested that liver function affected the
bile acid concentration.
Alterations in bile acid concentrations in CCA were
also previously reported in serum. Increased levels of CA
and CDCA was found in human opisthorchiasis which
is a CCA-associated liver uke (Migasena et al., 1 8 ).
levations of total bile acids and total conjugated bile
acids were reported in the serum of patients in the CCA
group compared with normal controls (Changbumrung et
al., 1990). Increased bile acids in serum may be caused
by biliary obstruction (Hong et al., 1973). Chronic
exposure to bile acids may play an important role in
As an ac c Journal of Cancer revent on, Vol 1 , 2012
DOI:http://dx.doi.org/10.7314/APJCP.2012.13.KKSuppl.77
cholangiocarcinogenesis (Jansen, 2007). Concurrent with
the present study, the positive correlation of total bile acids
and CDCA with levels of serum CEA was observed in
CCA patients. This result indicates the possible association
of bile acid and cancer development. Previous studies
suggested a role for bile acids in cholangiocarcinogenesis
(Sirica, 2005). DCA, a potent promoter in the CCA
hamster model, was shown to induce COX-2 in cultured
immortalized human cholangiocytes via an EGFR-
dependent mechanism and to block protein degradation
of myeloid cell leukemia protein 1, a potent anti-apoptosis
protein (Yoon et al., 2002a; 2002b). The underlying
mechanism of bile acids on cholangiocarcinogenesis
may involve their receptors. Adding the antagonist of
farnesoid x receptor (FXR), a nuclear receptor for bile acid
enhanced cholangiocarcinogenesis induced by free bile
acids (Dai et al., 2011). Moreover, in bile duct obstruction,
increased biliary bile acid concentration initiated enhanced
cholangiocyte proliferation in an animal model (Alpini et
al., 2002b).
n conclusion, total bile acids, conjugated bile acids,
unconjugated bile acids and individual bile acids were
analyzed in this study. Elevated levels of total bile acids,
conjugated bile acids and rimary bile acids were found
in CCA. Bile duct obstruction may contribute to an
alteration of bile acid concentration. Levels of CA, CDCA
and DCA were increased in cancer groups. Moreover,
levels of total bile acids and CDCA were also related to
the level of C A. These ndings suggest a different bile
acid concentration ro le in the cancer grou s com ared
to benign biliary disease groups. Alteration of bile acid
concentration may be a re ection of the disease rocess.
Since cholangiocytes are directly exposed to carcinogens
in bile, ro ling of bile acids in this study rovides useful
information about which bile acids may contribute to
pathogenesis. Further studies are needed to determine the
mechanisms underlying the correlation between bile acid
composition and carcinogenesis.
Acknowledgements
This study was supported by the Thailand Research
Fund through the Royal Golden Jubilee Ph.D. Program
(Grant No. PHD/0177/2549) to AJ and PY, Thailand
Research Fund through Window II (BRG 5280020), and
NIH grant CA114403 to RK.
References
Alpini G, Baiocchi L, Glaser S, et al (2002a). Ursodeoxycholate
and tauroursodeoxycholate inhibit cholangiocyte growth
and secretion of BDL rats through activation of PKC alpha.
He atology, 35, 1041-52.
Alpini G, Glaser S, Alvaro D, et al (2002b). Bile acid depletion
and repletion regulate cholangiocyte growth and secretion
by a phosphatidylinositol 3-kinase-dependent pathway in
rats. Gastroenterology, 123, 1226-37.
Alpini G, Glaser SS, Ueno Y, et al (1999). Bile acid feeding
induces cholangiocyte proliferation and secretion: evidence
for bile acid-regulated ductal secretion. Gastroenterology,
116, 179-86.
Alpini G, Ueno Y, Glaser SS, et al (2001). Bile acid feeding
81
Koolman, Color Atlas of Biochemistry, 2nd edition © 2005 Thieme
All rights reserved. Usage subject to terms and conditions of license.
Koolman, Color Atlas of Biochemistry, 2nd edition © 2005 Thieme
All rights reserved. Usage subject to terms and conditions of license.
 Isolation and characterization of chicken bile matrix metalloproteinase

ABSTRACT

INTRODUCTION

MATERIALS AND METHODS

Chemicals and Reagents
 Azocoll Assay

Bile Collection Affinity Purification of Bile MMP

Gelatin and Collagen Zymography

In-Gel Digestion
UNESA Journal of Chemistry Vol.2 No. 3 September 2013

PENGARUH VARIASI pH DAN LAMA PEREBUSAN KACANG PANJANG (Vigna

Sesquipedalis (L) fruhw) TERHADAP KADAR ASAM KOLAT DAN ASAM
DEOKSIKOLAT PADA FESES HEWAN COBA (Rattus norvegicus L)

THE EFFECT OF pH VARIATION AND LENGTH BOILING TIME OF YARD-LONG BEAN

(Vigna Sesquipedalis (L) fruhw) ON THE PERCENTAGE
OF CHOLIC ACID AND DEOXYCHOLIC ACID IN FECAL

Rizkiyanto* dan Leny Yuanita

Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural sciences
State University of Surabaya
Jl. Ketintang Surabaya (60231), Telp. 031-8298761
Corresponding author, tel/fax: 085731110231, rizkiyantoiik@yahoo.com

Abstrak. Tujuan penelitian adalah untuk mengetahui pengaruh variasi pH dan lama perebusan kacang panjang
terhadap kadar asam kolat dan asam deoksikolat pada feses Rattus norvegicus L. Rancangan penelitian
menggunakan faktorial dua faktor yaitu pH (3 dan 7) dan Lama perebusan 0 (tanpa perebusan), 5, 20, dan 35
menit sebanyak 36 sampel. Analisis pengikatan asam kolat dan asam deoksikolat pada feses Rattus norvegicus
L oleh serat pangan ditentukan melalui metode spektrofotometri UV-Vis, data dianalisis dengan Anova dua
arah ( asil litia m j kka ah a ada gar h da lama perebusan terhadap
pengikatan asam kolat dan asam deoksikolat oleh serat pangan pada feses Rattus norvegicus L (p < 0,005).
Persentase pengikatan asam kolat dan asam deoksikolat tertinggi didapat pada perlakuan pH 3- Lama
perebusan 35 menit secara berturut-turut sebesar 31,301 ppm dan 34,497 ppm, sedangkan; pengikatan asam
kolat dan asam deoksikolat terendah terjadi pada perlakuan pH 7- tanpa perebusan secara berturut-turut
sebesar 11,211 00m dan 13,463 ppm.
Kata kunci: asam kolat, asam deoksikolat, pH, lama perebusan, kacang panjang

Abstract. The research has purpose are to know the effect of pH variation and length of boiling time of
yard-long bean (Vigna Sesquipedalis (L) fruhw) on the percentage of cholic acid and deoxycholic acid in Rattus
norvegicus L fecal. Design of the research use two factors factorial, namely, pH (3 and 7) and length of boiling
time 0 (without boiling), 5, 20, and 35 minutes. Binding analysis of cholic acid and deoxycholic acid in Rattus
norvegicus L fecal by dietary fiber is determined through UV-Vis spectrophotometry, data analyzed by using
two ways Anova ( ). The results of this research was presented that there is effect of pH and length of
boiling time on cholic acid and deoxycholic acid binding by dietary fiber in Rattus norvegicus L fecal (p <
0.005). The highest binding percentages of cholic acid and deoxycholic acid gained in the treatment of pH 3-
length of boiling time 35 minutes are 31.301 ppm and 34.497 ppm respectively but the lowest binding of
percentages of cholic acid and deoxycholic acid gained in the treatment of pH 7- length of boiling time 0
(without boiling) are 11.211 ppm dan 13.463 ppm respectively.
Keyword: cholic acid, deoxycholic acid, pH, boiling time, yard-long bean

PENDAHULUAN dalam tubuh manusia dapat memberi dampak

Kolesterol adalah golongan lipida yang
merupakan bagian dari membran luar sel dalam
tubuh hewan mempunyai rumus molekul
C27H45OH. Lima puluh persen dari jumlah
kolesterol tubuh berasal dari sintesis pada hati
(endigenik) dan sisanya berasal dari makanan
sehari-hari (eksogenik) yang berupa karbohidrat
(glukosa), lemak (asam lemak), dan protein (asam
amino) [1]. Kolesterol yang tidak terekskresi dalam
sistem metabolisme pada jumlah konsentrasi tinggi
negatif bagi kesehatan, antara lain: kegemukan
(obesitas), kanker usus besar (colon), penyakit
divertikular, dan penyakit kardiovaskular [2].
Kolesterol yang tertinggal dalam tubuh tersusun
atas asam empedu.
Asam empedu tersusun atas asam empesdu
primer yang terdiri dari asam kolat dan
kenedeoksikolat dan asam empedu sekunder yang
terdiri dari asam deoksikolat dan litokolat. [3]
Jumlah gugus hidroksil pada masing-masing asam

156
UNESA Journal of Chemistry Vol. 2No. 3 September 2013
ditunjukkan oleh nilai signifikan > 0.05, maka
akan dilanjutkan uji Anava dua arah untuk
mengetahui ada tidaknya pengaruh variasi pH dan
lama perebusan serat pangan terhadap kadar asam
deoksikolat pada feses hewan coba dan dilanjutkan
dengan uji LSD (Least Significant Difference) yang
dapat dilihat pada Tabel 2.
Menurut hasil uji Anava 2 arah yang disajikan
pada Tabel 2 diperoleh angka signifikan (p) sebesar
0,007 kurang dari 0,05 yang menunjukkan bahwa
hipotesis penelitian yang berbunyi “pH dan lama
perebusan kacang panjang berpengaruh terhadap
kadar asam deoksikolat pada feses hewan coba”
dapat diterima, serta hasil yang ditunjukkan pada uji
lanjutan LSD menyatakan bahwa ada beberapa
perlakuan mengalami perbedaan yang nyata pada
taraf signifikansi 0,05.
Tabel 2 Rerata Persentase Kadar Pengikatan Asam
Deoksikolat tang terekskresi pada hewan
coba oleh Serat Pangan (Pengaruh pH dan
Lama Perebusan)
Lama Perebusan (menit) F,p
pH
0 5 20 35 F=
3 23.863c 26.137cd 28.259cd 34.497d 75.198
p=
7 13.463a 15.196ab 17.567ab 19.497b 0,000
F=
F = 865.282 5,046
p = 0,000 p=
0,007
Tabel 2 menunjukkan bahwa pengikatan
tertinggi didapat pada perlakuan pH 3 dengan lama
perebusan 35 menit dengan persentase sebesar
34.189% dan pengikatan terendah terjadi pada
perlakuan pH 7 dengan lama perebusan 0 menit
13.463%. Pada pengaruh pH didapatkan rerata
kadar tertinggi yaitu pH 3.. Asam empedu semakin
terikat dengan serat pangan pada pH rendah,
dikarenakan komponen-komponen serat pangan
seperti lignin akan mengalami degradasi melalui
hidrolisis disebabkan antara sub unit lignin
berikatan dengan stabilitas yang tinggi, yaitu ikatan
–C-O-C dan –C-C [7]. Lignin merupakan senyawa
yang efisien dalam mengikat asam deoksikolat pada
asam dengan g g s metoksil dan -karboksil.
Pada selulosa dalam keadaan asam dengan
konsentrasi tinggi atau asam kuat akan terjadi
degradasi melalui hidrolisis ikatan glikosidik atau
dise t dengan degradasi -1,4) [7]. Tingginya
pengikatan asam deoksikolat oleh serat pangan tak
larut (lignin dan selulosa) terjadi pada pH 3 karena
lignin dan selulosa memiliki sifat yang hidrofobik,
sehingga pada pH asam terjadi hidrolisis yang
159
mengakibatkan sub unit lignin memiliki ikatan yang
stabil dan ikatan rantai selulosa terhidrolisis melalui
ikatan glikosidik. Sifat tersebut mendukung dalam
pengikatan dengan serat pangan kacang panjang.
Asam deoksikolat di dalam tubuh khususnya dalam
usus besar, nantinya akan langsung dikeluarkan
bersama dengan feses.
Pengaruh lama perebusan didapatkan rerata
pengikatan tertinggi yaitu lama perebusan 35 menit.
Perebusan yang semakin lama dapat meningkatkan
pengikatan dengan asam empedu dikarenakan pada
proses perebusan terjadi kerapuhan dinding sel
akibat degradasi komponennya, hal ini
mengakibatkan meningkatnya luas permukaan
adsorpsi [7]. Gorecka [3], mengungkapkan bahwa
lama pemasakan pada sayuran dapat meningkatkan
pengikatan serat pangan dengan asam empedu.
Pengikatan asam empedu oleh serat pangan
dipengaruhi sifat kehidrofobikan asam empedu, hal
ini dikarenakan pengikatan asam empedu oleh serat
pangan melalui interaksi hidrofobik. [12]
menerangkan, proses perebusan dapat menghasilkan
produk milliard yang dianggap lignin. [7], produk
milliard memiliki karakter fenol yang sama dengan
lignin. Semakin lama perebusan maka semakin
besar produk milliard yang dihasilkan, sehingga
semakin banyak klason lignin yang terbentuk dan
semakin banyak yang dapat mengikat asam
deoksikolat.
Asam deoksikolat merupakan asam empedu
sekunder yang dihasilkan dari sintesis asam kolat
yang terjadi di dalam hati pada siklus enterohepatik.
Asam deoksikolat salah satu asam empedu yang
memiliki 2 gugus hidroksil dan bersifat hidrofobik.
Sifat hidrofobik asam deoksikolat dalam tubuh
dapat membantu proses interaksi pengikatan oleh
serat pangan dengan baik. Asam deoksikolat yang
telah terikat oleh serat pangan di dalam tubuh
khususnya di usus besar, akan langsung dikeluarkan
bersamaan dengan feses, karena asam deoksikolat
terdapat dalam jumlah yang cukup banyak pada
usus besar. Asam deoksikolat yang telah
dikeluarkan dalam tubuh mempunyai manfaat,
antara lain : mencegah kegemukan (obesitas),
mencegah kanker usus besar (colon), mencegah
penyakit divertikular, dan mencegah penyakit
kardiovaskular.
SIMPULAN
Dari hasil penelitian ini dapat ditarik
kesimpulan : 1) Ada pengaruh pH dan lama
perebusan kacang panjang (Vigna Sesquipedalis
 18
12 17
11 16
13
19 C D
1 9
14 15
2 8
10
A B
3 7
5
4 6

22
21
20 23
26
18 25
17
24
27
19

3
HO 5
6

8
3
7
HO 5
6
 Fungsi Empedu dalam Pencernaan Lemak

Debby O.L Sihombing, Lucia D.U.A Lubis, Nisrina Setiowati, Septa Sophiana
Jurusan Biologi FMIPA
Universitas Negeri Medan
Jl. Williem Iskandar Pasar V Medan Estate

ABSTRAK

Kantung empedu atau kandung empedu adalah organ berbentuk buah pir yang dapat menyimpan
sekitar 50 ml empedu yang dibutuhkan tubuh untuk proses pencernaan. Pada manusia, panjang
kantung empedu adalah sekitar 7-10 cm dan berwarna hijau gelap - bukan karena warna jaringannya,
melainkan karena warna cairan empedu yang dikandungnya. Organ ini terhubungkan dengan hati
dan usus dua belas jari melalui saluran empedu. Didalam empedu terdapat garam empedu yang
menyebabkan meningkatnya kelarutan kolesterol, lemak dan vitamin yang larut dalam lemak,
sehingga membantu penyerapannya dari usus. Tujuan dari praktikum ini antara lain mengetahui
fungsi empedu dalam proses pencernaan lemak dan mengetahui adanya lemak dalam kantung
empedu.Manfaat dari jurnal ini adalah untuk menguraikan hasil pembahasan dari praktikum fisiologi
hewan yang berjudul fungsi empedu dalam lemak sehingga mahasiswa memahami fungsi empedu dan
ada atau tidaknya lemak dalam empedu.

Kata Kunci:empedu, lemak, pengemulsi, kandung empedu

PENDAHULUAN shaped) yang menempel erat pada

Pohon empedu (biliary tree) permukaan belakang hati.

merupakan saluran keluar untuk sekresi Menurut Campbell (2004), hati

empedu, suatu cairan yang mengandung melakukan berbagai fungsi penting dalam

garam empedu (yang penting dalam tubuh, termasuk produksi empedu (bile),

membuat lemak menjadi emulsi dan dalam suatu campuran zat-zat yang disimpan

mempermudah penyerapan lemak dari dalam kantung empedu sampai diperlukan.

usus), dan sejumlah senyawa yang Empedu tidak mengandung enzim

merupakan bentuk ekskresi dari produk pencernaan, tetapi mengandung garam

akhir metabolisme hemoglobin (bilirubin) empedu, yang bertindak sebagai deterjen

dan inaktivasi obat-obatan dan hormon- dan membantu dalam pencernaan dan

hormon (Bevelander, 1988). penyerapan lemak. Empedu juga

Lebih jauh Bevelander menjelaskan mengandung pigmen yang merupakan

bahwa kandung empedu adalah suatu hasil sampingan perusakan sel darah

organ berongga berbentuk buah per (pear- merah dalam hati; pigmen empedu ini
Pembahasan pencernaan lemak dan kekurangan
vitamin-vitamin yang hanya larut dalam
Dari hasil percobaan diketahui
lemak , seperti vitamin A, D, E, dan K.
bahwa cairan empedu katak yang
ditambahkan dengan 2 ml aquades dan 2 Empedu merupakan cairan bersifat
tetes minyak kelapa kemudian dikocok basa yang pahit dan berwarna hijau
selama 5-10 menit, menghasilkan larutan kekuningan karena mengandung pigmen
homogen berwarna kuning cerah. Aquades bilirubin, biliverdin, dan urobilin, yang
dan minyak kelapa dapat menyatu berkat disekresikan oleh hepatosit hati pada
kehadiran cairan empedu. Garam-garam sebagian besar vertebrata. Pada beberapa
empedu yang terkandung di dalam cairan spesies, empedu disimpan di dalam
empedu berperan melarutkan minyak kantung empedu dan dilepaskan ke usus
kelapa dalam aquades, yakni dengan cara dua belas jari untuk membantu proses
membuat stabil emulsi lemak yang berasal pencernaan makanan.
dari minyak kelapa.
Pada percobaan II, 2 ml aquades yang Fungsi Empedu yang dihasilkan oleh
dicampurkan dengan 2 tetes minyak kelapa Hati
kemudian dikocok selama 5-10 menit,
1. Mencerna lemak
menghasilkan larutan keruh yang berwarna
2. Mengaktifkan lipase
putih. Tanpa kehadiran cairan empedu,
3. Mengubah lzat yang tak larut
minyak kelapa tidak dapat larut dalam
dalam air diubah menjadi zat yang
aquades. Minyak kelapa berada di atas
larut dalam air
aquades, karena massa jenis minyak lebih
4. Membantu daya absorbsi lemak pd
kecil daripada aquades.
dinding usus
Keberadaan cairan empedu 5. Serta tidak ketinggallan
dalam saluran pencernaan hewan sangat menetralisir racun.
penting. Cairan empedu membantu
pencernaan semua makanan berbahan Proses pembentukkan empedu

dasar lemak dan turunannya. Bila garam

Empedu sebagian besar adalah
empedu bergabung dengan kolesterol,
hasil dari excretory dan sebagian adalah
gliserid, dan asam lemak, maka akan
sekresi dari pencernaan. Garam-garam
terbentuk micel yang dapat diserap oleh
empedu termasuk ke dalam kelompok
dinding usus. Karena itu kekurangan
garam natrium dan kalium dari asam
cairan empedu dapat menurunkan