Professional Documents
Culture Documents
The Effect of Fasting On The Functioning of The Immune System Based On The Measurement of Plasma Granulysin Level
The Effect of Fasting On The Functioning of The Immune System Based On The Measurement of Plasma Granulysin Level
1- Department of Immunology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran.
Abstract
Background and Objectives: Plasma granulysin levels as a biomarker of the immune system are currently being
considered. NK cells are a major source of plasma granulysin. Plasma granulysin levels can reflect the total population
of NK cell activity in the body. The effect of Ramadan fasting on the immune system function based on the
measurement of plasma granulysin levels have not been studied yet.
Materials and Methods: A total of 44 male volunteers with a mean age of 41.15±13.6 years were selected for the
study. Blood samples were obtained on the 29th days of fasting and also four month after Ramadan. Plasma Granulysin,
triglyceride (TG), cholesterol (Chol), low-density lipoprotein (LDL) and high-density lipoprotein (HDL), FBS, Uric
acid and CRP were investigated.
Results: It was observed that the mean concentrations of serum CRP on the 29th day of Ramadan were significantly
lower than those recorded four months after Ramadan. Mean concentrations of serum LDL on the 29th day of Ramadan
were significantly higher than those recorded four months after Ramadan. There was no difference between fasting and
non-fasting groups in plasma granulysin levels.
Conclusion: Fasting caused modulation in the CRP level, but did not affect plasma granulysin levels.
Keywords: Ramadan fasting; Granulysin; Immunomodulation
*
Corresponding Author: Mostafa Haji Molla Hoseini; Email: hajimolahoseini@yahoo.com
مجلهی پژوهش در دین و سالمت
مقالهی اصیل
دورهی ،1شمارهی ،3تابستان ،1314صفحههای 25تا 32
-1گروه ایمونولوژی ،دانشکدهی پزشکی ،دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی ،تهران ،ایران.
چکیده
سابقه و اهداف :میزان پالسمایی گرانوالیزین که میتواند بیومارکری باشد برای بیان وضعیت فعالیت سیستم ایمنی ،در حال حاضر
بسیار مورد توجه است .سلولهای ،NKمنبع اصلی گرانوالیزین پالسما محسوب میشوند ،بنابراین میزان پالسمایی گرانوالیزین
میتواند انعکاسی از فعالیت جمعیت کلی سلولهای NKبدن باشد .تاکنون مطالعهیی در زمینهی تأثیر روزهداری بر کارکرد سیستم
ایمنی ،بر مبنای اندازهگیری گرانوالیزین پالسمایی انجام نشده است.
مواد و روشها :در مجموع 44داوطلب مرد با میانگین سنی 41/15 ± 13/6سال برای مطالعه انتخاب شدند .در بیست و نهمین روز
ماه رمضان و 4ماه پس از ماه رمضان ،خونگیری صورت گرفت و غلظت پالسمایی گرانوالیزین ،CRP ،تری گلیسرید ،کلسترول ،اسید
اوریک و قند خون اندازهگیری شد.
یافتهها :غلظت سرمی CRPپس از 21روز روزهداری بهطور قابل توجهی کمتر از مقدار آن در ماه چهارم پس از روزهداری بود.
متوسط غلظت LDLدر روز 21روزهداری ،بیش از ماه چهارم پس از روزه داری بود .تفاوتی در میانگین غلظت گرانوالیزین در شرایط
روزهداری در مقایسه با غیر روزهداری دیده نشد.
نتیجهگیری :روزهداری تعدیل CRPرا سبب میشود ولی بر سطح پالسمایی گرانوالیزین اثر ندارد.
*
hajimolahoseini@yahoo.com نویسندهی مسئول مکاتبات :مصطفی حاجی مالحسینی؛ پست الکترونیک:
بررسی تأثیر روزهداری بر کارکرد … /27مجله ی پژوهش در دین و سالمت
میکند( .)11میزان پالسمایی گرانوالیزین که میتواند مقدمه
بیومارکری باشد برای بیان وضعیت فعالیت سیستم ایمنی ،در
روزهداری فریضهیی است که نه تنها موجب صفای باطن و
حال حاضر مورد توجه است( .)12-14بر همین مبنا،
قرب الی اهلل میگردد ،بلکه به صحت و سالمت جسم نیز
نتیجههای مطالعهیی نشان داده است که سبک زندگی سالم،
کمک مینماید .افزایش وزن و چاقی سبب توسعهی بافت
باعث افزایش بیانگری گرانوالیزین میشود( .)15سلولهای
چربی و تولید فاکتورهای التهابی میشود( .)1الگوی تغذیهیی
،NKمنبع اصلی گرانوالیزین پالسما محسوب میشوند،
و تغییر سبک زندگیِ متعاقب روزهداری ،ممکن است در
بنابراین میزان پالسمایی گرانوالیزین میتواند انعکاسی از
کاهش چربی بدن وخطرهای ناشی از التهاب مؤثر باشد.
فعالیت جمعیت کلی سلولهای NKبدن باشد( .)16تاکنون
چندین مطالعه نشان داده است روزهداری در ماه مبارک
مطالعهیی در زمینهی تأثیر روزهداری بر کارکرد سیستم
رمضان ،در تغییر تری گلیسیرید و کلسترول تام خون و HDL
ایمنی ،بر مبنای اندازهگیری گرانوالیزین پالسمایی ،انجام
کلسترول مؤثر است( .)2-6متا آنالیز نتیجههای مطالعههایی
نشده است .با توجه به اینکه پرهیز از مصرف غذا در جریان
که از سال 2001میالدی تا 2014انجام شده ،نشان داد که
روزهداری ،سبب تغییر الگوی تغذیهیی میگردد و اینکه
روزهداری سبب کاهش کلسترول و تری گلیسرید در مردان و
روزهداری موجب تغییر عادتهای روزانهی فرد میگردد ،به
افزایش HDLکلسترول در زنان میشود( .)7به هر حال تأثیر
نظر میرسد تغییر الگوی تغذیهیی و تغییر سبک زندگی
روزهداری ماه رمضان بر پارامترهای بیوشیمیایی خون،
متعاقب روزهداری بتواند موجب تغییرهای متابولیک بدن و
نتیجههای متناقضی به دنبال داشته و مورد بحث است ،از این
همچنین تعدیل سیستم ایمنی شود .شاید بتوان گفت که
رو مطالعههای بیشتری را طلب میکند .تأثیر روزهداری بر
روزهداری سبب کاهش زمینهی التهاب و افزایش عملکرد
تعدیل فعالیت سامانهی ایمنی ،موضوع دیگری است که مورد
سلولی سیستم ایمنی میگردد .به منظور بررسی این نظریه،
توجه محققان بوده است .در مطالعهیی بر روی 35مرد سالم
سطح فاکتورهای بیوشیمیایی CRP ،و گرانوالیزین در سرم 44
داوطلب ،غلظت آنتی بادیها قبل و بعد از ماه مبارک رمضان
فرد داوطلب سالم در دو حالت روزهدار و غیر روزهدار،
اندازه گرفته شد .یافتهها نشان داد اگرچه غلظت IgGدر
اندازهگیری و مقایسه شد.
دورهی پس از ماه مبارک رمضان در مقایسه با قبل از ماه
مواد و روشها مبارک رمضان کاهش یافت ،اما از محدودهی طبیعی خارج
نشد .کاهش در غلظت IgAبزاقی نیز مشاهده شد ،اما تعداد
نمونهگیری:
لنفوسیتها افزایش داشت( .)8مطالعهی دیگری که بر روی
برای انجام این پژوهش از 52نفر از داوطلبان روزهدار در
50نفر انجام شده بود ،نشان داد که غلظت IL-1β ،IL-6و
منطقهی درکهی تهران ،در پایان ماه رمضان و چهار ماه پس از
( TNF-αسایتوکاینهای التهابی) ،همچنین تعداد لکوسیتها،
ماه رمضان ،خونگیری با رضایتنامهی کتبی ،رعایت اصول
گرانولوسیتها ،لنفوسیتها و مونوسیتها به طور قابل توجهی
اخالق پژوهش و تأیید کمیتهی اخالق دانشگاه علوم پزشکی
در طول ماه مبارک رمضان در مقایسه با قبل از این ماه کاهش
شهید بهشتی صورت گرفت .نمونهگیری اول ،در هفتهی پایانی
دارد(.)1
ماه مبارک رمضان در تابستان سال (1312مرداد ماه) و در
گرانوالیزین ،پروتئین کاتیونیک کوچکی است که ژن آن
ساعت 14:00انجام شد .مدت زمانی که این افراد(از اذان صبح
روی کروموزوم شمارهی دوی انسان است و معادل موشی
تا اذان مغرب) روزهدار بودند ،دست کم 16ساعت بود.
ندارد(.)10گرانوالیزین در گرانولهای سلولهای مختلفی از
نمونهگیری صرفاً از مردان صورت گرفت(به علت احتمال
جمله NKC ،TC ،THو NKTوجود دارد و پس از فعالیت
تداخالت هورمونی در زنان) و افراد منتخب دست کم به مدت
این سلولها آزاد میشود و اثرهای ایمنولوژیک متعددی مثل
23روز ،روزهدار بودند و بر مبنای پرسشنامهی خوداظهاری،
لیز سلول آلوده یا توموری و کموتاکسی گلبولهای سفید ،بر
سابقهی هیچگونه بیماری خودایمنی و بیماری مزمن التهابی و
جای میگذارد و جالب اینکه در مقام یک آالرمین عمل
مصرف سیگار نداشتهاند ،دارای فشار خون نرمال(اندازهگیری
میکند و TLR-4سطح سلولهای ایمنی ذاتی را نیز تحریک
با فشار سنج) بودهاند و چاق(بر مبنای اندازهگیری قد و وزن)
میکند .بر خالف اغلب آالرمینها که منشأ آنها سلولهایی
نبودند .از این افراد ،تعدادی برای مرحلهی دوم خونگیری
همچون فاگوسیتها و سلولهای اپیتلیال است ،این پروتئین
مراجعه نداشتند ،از این رو در نهایت از 52نفر 44 ،نفر مورد
از لنفوسیتها آزاد شده ،ارتباط ایمنی تطبیقی و ذاتی برقرار
کنعان گرجیپور و همکاران28 / دورهی .1شمارهی .3تابستان 1314
گرانوالیزین به هرچاهک اضافه گردید و انکوباسیون صورت مطالعه قرار گرفتند .نمونهگیری مرحلهی دوم چهار ماه بعد در
گرفت .پس از شستوشو ،محلول Avidin-HRP Dبه هر ساعت 5:30صبح و حالت ناشتایی انجام شد .از هر فرد به
چاهک اضافه شد و بعد از انکوباسیون و مراحل شستوشو ،در میزان 10سیسی خون گرفته شد .نمونهها به لولههای فالکون
مرحلهی آخر سوبسترا اضافه گردید و پلیت در تاریکی انکوبه 15میلی لیتری منتقل شد که حاوی مادهی ضدانعقاد EDTA
شد .بعد از متوقف کردن واکنش ،خوانش جذب نوری در 450 بودند .خونهای تهیه شده از افراد ،با حفظ زنجیرهی سرمایی
nmصورت گرفت .حساسیت این روش 0/3 ،نانوگرم در میلی به آزمایشگاه گروه ایمونولوژی دانشگاه علوم پزشکی شهید
لیتر است. بهشتی منتقل شد .سپس پالسما جدا گردید و تا زمان انجام
روش تجزیه و تحلیل آمار: تستها در -20◦ Cنگهداری شد.
نرمافزارgraph pad prism5 جهت انجام آنالیزهای آماری ،از آزمایشهای بیوشیمیایی و ایمونولوژیک:
استفاده شد .با توجه به توزیع نرمال دادهها و یکسان بودن در هر دو مرحلهی خونگیری ،آزمایشهای بیوشیمیایی که
افراد گروه کنترل و گروه آزمون ،برای انجام آنالیزهای تحلیلی شامل قند خون ناشتا ( ،)FBSچربی ( ،)TGکلسترول (،)CHL
آماری مقایسهی میانگین ،از آزمون آماری تی زوج استفاده کلسترول با دانسیتهی باال( ،)HDLکلسترول با دانسیتهی
شده است .در مقایسهی میانگینها ،سطح معنیداری کمتر از پائین( ،)LDLاوره( ،)UREAدر آزمایشگاه تشخیص طبی
0/05در نظر گرفته شد. انجام شد .آزمایش ایمونولوژیک CRPتوسط آزمایشگاه
تشخیص طبی؛ و گرانوالیزین با استفاده از کیت
یافتهها الیزا ) ،(LEGEND MAX™ Human Granulysin ELISAکه
الف) نتیجههای حاصل از بررسی لیپیدهای خون: بر مبنای ساندویچ ELISAاست ،در آزمایشگاه ایمونولوژی
نتیجهها نشان داد که در شرایط روزهداری افزایش در دانشکدهی پزشکی ،مطابق دستورالعمل کیت صورت پذیرفت.
کلسترول تام اتفاق افتاده است و آنالیز زیرگروههای کلسترول، به طور خالصه شش رقت سریال با ضریب ،2از استاندارد 40
حکایت از این دارد که این افزایش مربوط به LDLاست(شکل ng/mlدر لولههای جداگانه تهیه شد .به هر چاهک الیزا به
)1اما روزهداری در میزان تریگلیسیرید خون تغییری ایجاد میزان 50میکرولیتر از رقتهای استاندارد و یا نمونهها اضافه
نکرده است. شد و انکوباسیون در دمای اتاق صورت گرفت .محتویات پلیت،
تخلیه و سپس پلیت شستوشو داده شد .سپس آنتیبادی ضد
مداخلهایی همچون ورزش گزارش شده است(.)16 در گروه روزهدار و گروه غیر روزهدار در مطالعهی ما ،حکایت از
ما در این مطالعه به کاهش معنیداری در سطوح پالسمایی کاهش معنیدار CRPمتعاقبِ روزهداری دارد( )p=0/01و مؤید
تریگلیسیرید در دو حالت روزهداری و غیر روزهداری دست این مطلب است که CRPشاخصی است التهابی ،تحت تأثیر
نیافتیم( ،)p=0/16اما در مطالعهیی دیگر ،کاهش تری گلیسرید روزهداری کاهش مییابد و این موضوع از فرضیهی ابتدایی ما،
متعاقبِ روزهداری گزارش شده است( .)2از طرفی در مبنی بر کاهش فاکتورهای التهابی تحت تأثیر تغییر الگوی
مطالعهیی نیز تغییر معنیداری در میزان تریگلیسیرید تغذیه و محدودیت دریافت کالری ،حمایت میکند .با توجه به
مشاهده نشد که با یافتههای کار ما منطبق است( .)5در این نکته که افزایش میزان CRPدر نتیجهی افزایش سنتز آن
مطالعهی ما ،نتیجهی آنالیز میزان کلسترول تام در حالت توسط کبد است ،که توسط سایتوکاینهای IL-1و IL-6القا
روزهداری نسبت به حالت غیر روزهداری ،افزایش معنیدار میشود ،پس احتمال میرود در مطالعهی ما میزان بیان
نشان داد( ،)p=0/002در صورتی که در مطالعههای دیگران، ژنهای سایتوکاینهای IL-1و IL-6نیز همچون مطالعهی
کاهش این فاکتور گزارش شده است( )2و در مطالعههایی هم، Faris MAو همکاران کاهش یافته باشد( ،)1که این خود
تغییر معنیداری در میزان کلسترول تام مشاهده نشده مستلزم مطالعههای بیشتر در این زمینه است .البته در
تناقض با این یافته ،در مطالعهیی که در سال 2011انجام
… بررسی تأثیر روزهداری بر کارکرد مجله ی پژوهش در دین و سالمت/31
2. Zare A, Hajhashemi M, Hassan Z M, Zarrin S, متعاقبِ روزهداریLDL در مطالعهی ما میزان.)18(است
Pourpak Z, Moin M, et al. Effect of Ramadan fasting
on serum heat shock protein 70 and serum lipid profile, ) که مطالعههایp=0.0001(افزایش معنیداری را نشان داد
Singapore Med J 2011; 52: 491-495 را در روزهداران تأییدLDL دیگری نیز افزایش معنیدار
3. Argani H, Mozaffari S, Rahnama B, Rahbani BM, نیز پرداختیمHDL از طرفی ما به بررسی.)11 و4(میکند
Rejaie M, Ghafari A.Evaluation of biochemical and
immunologic changes in renal transplant recipients ولی در حالت روزهداری نسبت به حالت غیر روزهداری تغییری
during ramadan fasting. Transplantation Proceedings,
، در حالی که مطالعههایی،)p=0.0887(مشاهده نکردیم
2003;35:2725-2726.
در مطالعهی ما نتیجهی.)20( را مطرح کردهاندHDL افزایش
4. Hallak M H ,Nomani M Z. Body weight loss and
changes in blood lipid levels in normal men on در گروه روزهدار و،آنالیز میزان قند خون ناشتا در دو حالت
hypocaloric diets during Ramadan fasting. The
American journal of clinical nutrition,1998;48:1197-
) ولی یافتههایp=0/051( معنیدار نبود،گروه غیر روزهدار
1210. متناقض دربارهی این معیار هم تحت تأثیر روزهداری گزارش
5. Khafaji HARH, Bener A, Osman M, Al Merri A, Al حکایت از، یافتههای مطالعههای مختلف.)21(شده است
Suwaidi J, The impact of diurnal fasting during
Ramadan on the lipid profile, hs-CRP, and serum leptin تغییرهای متنوع و متناقض در پروفایل لیپیدی و بیوشیمیایی
in stable cardiac patients. Vascular Health and Risk در طی روزهداری دارند؛ به نظر میرسد تغییرها در مؤلفههای
Management,2012;8:7-14.
متأثر از کمیّت و کیفیت،بیوشیمیایی و پروفایل لیپیدی
6. Yousefi B,Faghfoori Z,Samadi N,Karami
H,Ahmadi Y,Badalzadeh, et al. The effects of .مصرف مواد غذایی باشد
Ramadan fasting on endothelial function in patients
with cardiovascular diseases.2014;68:835-839. محدودیتهای تحقیق
7. Rouhani MH, Azadbakht L. Is Ramadan fasting
related to health outcomes? A review on the related عدم امکان دسترسی به،از جمله محدودیتهای این مطالعه
evidence. J Res Med Sci. 2014 ; 19: 987–992 افراد برای نمونهگیری قبل و در جریان ماه مبارک رمضان بود
8. Develioglu ON, Kucur M, Ipek HD, Celebi S, Can
، همچنین،که میتوانست بر اعتبار یافتههای حاصل بیافزاید
G, Kulekci M. Effects of Ramadan fasting on serum
immunoglobulin G and M, and salivary مطالعهی سلولی و مولکولی در زمینهی گرانوالیزین که
immunoglobulin A concentrations. J Int Med Res.
2013 Apr;41:463-72
میتوانست منجر به قضاوت دقیقتری دربارهی تأثیر روزهداری
9. Faris MA, Kacimi S, Al-Kurd RA, Fararjeh MA,
به هر. میسّر نشد، شودNK بر میزان گرانوالیزین سلولهای
Bustanji YK, Mohammad MK, et al. Intermittent اولین گزارش از وضعیت میزان پالسمایی،حال تحقیق حاضر
fasting during Ramadan attenuates proinflammatory
cytokines and immune cells in healthy subjects. Nutr .گرانوالیزین افراد سالم در ایران است
Res. 2012;32: 947-55.
10. Clayberger C, Krensky AM. Granulysin. Current نتیجهگیری
Opinion in Immunology,2003;15:560-565.
،تغییر الگوی تغذیهیی و تغییر سبک زندگیِ متعاقبِ روزهداری
11. Tewary P, Yang D, de la Rosa G, Li Y, Finn MW,
Krensky AM, et al.Granulysin activates antigen- موجب تغییرهای متابولیک و ایمونولوژیک عمده در بدن
presenting cells through TLR4 and acts as an immune بر مبنای.نمیشود و تعادل دینامیک بدن را بر هم نمیزند
alarmin. Blood. 2010;116:3465-3474.
به نظر میرسد تأثیر روزهداری بر کارکرد سامانهی،این تحقیق
12. Di Liberto D,Buccheri S,Caccamo N, Meraviglia
S,Romano A,Di Carlo P,et al. Decreased serum قابل،ایمنی بدن بر مبنای سنجش گرانوالیزین پالسمایی
granulysin levels in childhood tuberculosis which
reverse after therapy. Tuberculosis,2007;87:322-328.
که مارکری برایCRP با توجه به کاهش.ارزیابی نباشد
13. Fujita Y,Yoshioka N,Abe R,Murata J,Hoshina
میتوان گفت روزهداری در کاهش التهاب مؤثر،التهاب است
D,Mae H,et al. Rapid immunochromatographic test for که عامل خطر بیماریهایLDL اما با توجه به افزایش،است
serum granulysin is useful for the prediction of
Stevens-Johnson syndrome and toxic epidermal ارتباط روزهداری و بیماریهای قلب و،قلب و عروق است
necrolysis.2011;65:65-68. . نیازمند مطالعههای جامع و دقیقتری است،عروق
14. Sahiratmadja E,Alisjahbana B,Buccheri S,Di
Liberto D,de Boer T,Adnan I, et al. Plasma granulysin Refrences
levels and cellular interferon-ɣ production correlate
1. Speakman JR, Mitchell SE, Caloric restriction,
with curative host responses in tuberculosis, while
Molecular Aspects of Medicine 2011;32:159-221
plasma interferon-?? levels correlate with tuberculosis
32 /کنعان گرجیپور و همکاران 1314 تابستان.3 شمارهی.1 دورهی
disease activity in adults. Tuberculosis,2007;87:312- 18. Aksungar FB, Topkaya AE, Akyildiz M.
321. Interleukin-6, C-reactive protein and biochemical
parameters during prolonged intermittent fasting. Ann
15. Li Q, Morimoto K, Nakadai A, Qu T, Matsushima
Nutr Metab. 2007;51:88-95
H, Katsumata M, et al. Healthy lifestyles are associated
with higher levels of perforin, granulysin and 19. Ziaee V, Razaei M, Ahmadinejad Z, Shaikh H,
granzymes A/B-expressing cells in peripheral blood Yousefi R, Yarmohammadi L,et al: The changes of
lymphocytes. Prev Med. 2007;44:117-23. metabolic profile and weight during Ramadan fasting.
Singapore Med J 2006, 47:409-414. 20
16. Xiumin Z, Kaori M, Arta F, Yohei H, Kazuyuki O,
Kinya N,et al. Exhaustive exercise induces differential 20. Trepanowski JF, Canale RE,Marshall KE,Kabir
changes in serum granulysin and circulating number of MM,Bloomer R J. Impact of caloric and dietary
natural killer cells. Tohoku J Exp Med. 2006;210: 117- restriction regimens on markers of health and longevity
24. in humans and animals: a summary of available
findings Nutrition Journal 2011, 10:107
17. Koo SH, Flechner L, Qi L, Zhang X, Screaton RA,
Jeffries S, et al. The CREB coactivator TORC2 is a key 21. Trepanowski JF, Bloomer RJ. The impact of
regulator of fasting glucose metabolism. Nature. 2005 religious fasting on human health Nutrition Journal
Oct 20;437:1109-11 2010, 9:57