PENGARUH PERBEDAAN PELARUT TERHADAP

PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

PADA EKSTRAK RIMPANG KENCUR
(Kaempferia galanga L.)
Yanah Sri1, Kusnadi2, Purgiyanti3
1,2
PoliTeknik Harapan Bersama Tegal, Jl. Mataram No.09 Kota Tegal Telp/Fax. (0283) 352000
3
Prodi DIII Farmasi, PoliTeknik Harapan Bersama Tegal, Indonesia
email: 1sriyanah342@gmail.com

Abstract

Kaempferia Galanga (Kaempferia galanga L.) is plant that belongs to the family zingiberaceae which is often
used in medicine. From several studies, Kaempferia Galanga contains secondary metabolites consisting of flavonoids,
polyphenols, tannins, kuinons, dan monoterpen/seskuiterpen.
This study aimed to determine the content of secondary metabolites contained in Kaempferia Galanga rhizome
extract based on Thin Layer Chromatography. Kaempferia Galanga rhizome extraction was done using maceration
method (1 : 7) b/v with 70% ethanol, ethyl acetate and hexane. Identification of Kaempferia Galanga rhizome powder
was carried out by macroscopic and microscopic test. Identification of secondary metabolites was carried out by
phytochemical screening and Thin Layer Chromatography.
The results of phytocemical screening obtained alkaloids compound, saponins and flavonoids in the 70%
ethanol solvent. Alkaloid and flavonoid compounds are interested in ethyl acetate solvents. Essential oil compounds are
intersted in n-hexane solvent. TLC test results show that alkaloid compounds contained in ethyl acetate extract. Saponin
compounds contained in 70% ethanol extract, ethyl acetate and n-hexane. Flavonoid compounds contained in ethyl
acetate extract and n-hexane extract. Essential oil compounds contained in ethyl acetate extract.

Keywords : Kaempferia Galanga Rhizome, Maceration, Phytocemical Screening, Thin Layer Chromatography
INTISARI

Kencur (Kaempferia galanga L.) adalah tanaman yang termasuk famili Zingiberaceae yang sering digunakan
dalam pengobatan. Dari beberapa penelitian, kencur mengandung senyawa metabolit sekunder yang terdiri dari
flavonoid, polifenol, tanin, kuinon, dan monoterpen/seskueterpen.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam
ekstrak rimpang kencur berdasarkan Kromatografi Lapis Tipis. Ekstraksi rimpang kencur dilakukan dengan
menggunakan metode maserasi (1 : 7) b/v dengan pelarut etanol 70%, etil asetat dan n-heksana. Identifikasi serbuk
rimpang kencur dilakukan dengan uji makroskopis dan uji mikroskopis. Identifikasi senyawa metabolit sekunder
dilakukan dengan skrining fitokimia dan Kromatografi Lapis Tipis.
Hasil skrining fitokimia diperoleh senyawa alkaloid, saponin dan flavonoid tertarik dalam pelarut etanol 70%.
Senyawa alkaloid dan flavonoid tertarik dalam pelarut etil asetat. Senyawa minyak atsiri tertarik dalam pelarut n-
heksana. Hasil uji KLT menunjukan bahwa senyawa alkaloid terkandung dalam ekstrak etil asetat, senyawa saponin
terkandung dalam ekstrak etanol 70% ekstrak etil asetat dan ekstrak n-heksana, senyawa flavonoid terkandung dalam
ekstrak etil asetat dan ekstrak n-heksana, senyawa minyak atsiri terkandung dalam ekstrak etil asetat.

Kata kunci : Rimpang Kencur, Maserasi, Skrining Fitokimia, KLT

I. PENDAHULUAN
Semua makhluk hidup melakukan proses metabolisme,
yaitu pembentukan senyawa terutama metabolit primer.
Selain itu, tanaman juga menghasilkan metabolit sekunder
yang merupakan hasil metabolit primer yang mengalami
reaksi yang spesifik sehingga dihasilkan senyawa-senyawa
tertentu. Metabolit sekunder merupakan hasil metabolisme
dari tumbuhan itu sendiri dan biasanya hanya ditemukan
dalam organisme atau golongan-golongan organisme tertentu
saja, tidak semua tumbuhan memiliki kandungan senyawa
metabolit sekunder yang sama.
Salah satu tumbuhan yang memiliki senyawa metabolit
sekunder yaitu rimpang kencur (Kaempferia galanga L.).
Rimpang kencur mengandung beberapa senyawa aktif. Hasil
penelitian (Hasanah et al., 2011) menginformasikan bahwa
hasil skrining fitokimia ekstrak etanol rimpang kencur
terdeteksi mengandung senyawa golongan flavonoid,
polifenol, tanin, kuinon, dan monoterpen/seskueterpen.
Penelitian lain juga menyebutkan bahwa metabolit sekunder
yang terdapat pada kencur antara lain alkaloid, saponin,
flavonoid, steroid dan kuinon (Fitriyani, 2011). Menurut
(Helmisari RD, Winarsih S, R. A, 2012) kandungan zat aktif
dalam rimpang kencur berupa flavonoid, tanin, sineol dan
saponin. Kencur sudah di kenal luas masyarakat sebagai
bumbu masakan atau untuk pengobatan diantaranya batuk,
mual, bengkak, bisul, dan antioksidan. Selain itu, minuman
beras kencur juga berkhasiat untuk menambah daya tahan
tubuh, menghilangkan masuk angin, dan kelelahan (Latifah,
2015).
Salah satu upaya untuk memperoleh kandungan senyawa
metabolit sekunder dalam tanaman dapat dilakukan dengan
cara ekstraksi yaitu maserasi. Keuntungan dari metode
maserasi adalah dapat mengekstrak jaringan tanaman yang
belum diketahui kandungan senyawanya yang kemungkinan
bersifat tidak tahan panas sehingga kerusakan komponen
tersebut dapat dihindari. Selain itu juga metode maserasi
merupakan salah satu metode ekstraksi yang paling
sederhana baik alat yang digunakan maupun cara
pengerjaannya. Metode ekstraksi sangat bergantung pada
tingkat kepolaran dari senyawa yang akan diekstrak. Suatu
senyawa menunjukan tingkat kelarutan yang berbeda-beda
dalam pelarut yang berbeda pula. Keberhasilan dari proses
ekstraksi tergantung pada pemilihan pelarut yang digunakan
(Fath, 2016).
Pelarut yang digunakan untuk mengekstraksi senyawa
metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak rimpang
kencur adalah pelarut polar (etanol 70%), pelarut semipolar
(Etil asetat) dan pelarut nonpolar (n-heksana). Penggunaan
pelarut yang berbeda bertujuan untuk mengetahui senyawa
apa saja yang dapat tertarik pada masing-masing pelarut.
Etanol merupakan pelarut universal yang memiliki gugus
C2H5 yang bersifat nonpolar dan gugus OH yang bersifat
polar, sehingga pelarut etanol dapat menarik komponen
kimia yang bersifat polar maupun nonpolar. Selain itu, etanol
adalah pelarut yang aman dengan toksisitas rendah
dibandingkan dengan metanol, lebih selektif, etanol dapat
bercampur dengan air dengan segala perbandingan, serta
daya absorpsi yang baik (Sunyoto, 2010). Etil asetat
merupakan pelarut semipolar yang aman, toksisitas rendah,
tidak higroskopis, dan mudah menguap sehingga dapat
melarutkan senyawa yang bersifat semipolar sedangkan n-
heksana adalah pelarut nonpolar yang bersifat inert (tidak
bereaksi dengan bahan lain), pelarut yang aman, mudah
menguap serta murah (Romandanu, 2014).
Pemisahan senyawa aktif dalam ekstrak rimpang kencur
dapat dilakukan dengan metode Kromatografi Lapis Tipis
(KLT). Kromatografi Lapis Tipis merupakan cara sederhana
untuk pemisahan senyawa berdasarkan perbedaan distribusi
fase diam dan fase gerak sehingga akan didapatkan senyawa
aktif (Latifah, 2015). Metode pemisahan jenis ini memiliki
kelebihan karena selain menggunakan alat dan bahan yang
sederhana, cara ini juga hanya memerlukan jumlah cuplikan
atau sampel yang sangat sedikit serta waktu yang diperlukan
pun cukup singkat (Sunyoto, 2010). Deteksi senyawa pada
uji Kromatografi Lapis Tipis dapat dilakukan dengan
pemeriksaan dibawah sinar UV dengan panjang gelombang
254 nm dan 366 nm. Pada plat Kromatografi Lapis Tipis,
identifikasi awal suatu senyawa didasarkan pada
perbandingan nilai Rf dibandingkan Rf standar (Wulandari,
2011).
Berdasarkan penjelasan di atas maka peneliti tertarik
untuk melakukan penelitian dengan judul PENGARUH
PERBEDAAN PELARUT TERHADAP PROFIL
KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS PADA EKSTRAK
RIMPANG KENCUR (Kaempferia galanga L.).
II. METODOLOGI PENELITIAN
Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah
eksperimen yang menggunakan metode skrining fitokimia
dan Kromatografi Lapis Tipis pada masing-masing ekstrak.
Pembuatan Ekstrak Rimpang Kencur (Kaempferia
galanga L.)
Rimpang kencur yang didapat dilakukan sortasi basah
kemudian dicuci dengan air mengalir hingga bersih.
Selanjutnya diiris atau dirajang tipis-tipis dengan ketebalaan
±3 mm. Lalu menimbang rimpang kencur sebanyak 4.000
gram dan dikeringkan di bawah sinar matahari tidak langsung
dengan ditutup 10%. Setelah kering rimpang kencur di
sortasi kering kemudian diblender hingga menjadi serbuk.
Ekstraksi rimpang kencur dilakukan dengan metode
Maserasi pada suhu ruang (15-30°C) dengan menggunakan
tiga pelarut yang berbeda kepolarannya, yaitu etanol 70%,
etil asetat dan n-heksana. Perbandingan antara sampel dan
pelarut yang digunakan adalah 1 : 7 Serbuk rimpang kencur
ditimbang masing-masing sebanyak 100 gram kemudian
masukkan ke dalam masing-masing maserator lalu
tambahkan pelarut berupa etanol 70%, etil asetat dan n-
heksana masing-masing 700 ml. Simplisia direndam dalam
maserator atau wadah yang telah dilapisi lakban hitam
selama 5 hari pada tempat yang terhindar dari cahaya dengan
dilakukan pengadukan setiap hari selama ± 5 menit. Setelah 5
hari, kemudian disaring menggunakan kain flanel. Masukkan
ekstrak ke dalam cawan uap dan diuapkan dengan
menggunakan waterbath pada suhu 60 °C hingga diperoleh
ekstrak kental. Menguji ekstrak dengan uji bebas etanol 70%,
etil asetat dan n-heksana. Lalu menimbang dan menghitung
rendemen tiap ekstrak.
Uji Bebas Pelarut Etanol 70 %, Etil Asetat dan N-
Heksana
1. Uji Bebas Etanol 70 %
Uji bebas etanol dilakukan dengan menggunakan pereaksi
H2SO4 pekat dan asam asetat dengan cara 2 tetes ekstrak
dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian
menambahakan 2 tetes H2SO4 pekat dan 2 tetes asam asetat
lalu panaskan. Mengamati perubahan bau yaitu jika tidak
berbau ester maka ekstrak sudah terbebas dari etanol dan jika
masih berbau maka ekstrak belum bebas etanol sehingga
perlu diuapkan kembali (Wulandari, 2017).
2. Uji Bebas Etil Asetat
Uji bebas etil asetat dilakukan dengan mengguanakn
pereaksi NaOH, asam asetat dan H2SO4. Caranya dengan
mengambil 2 tetes ekstrak dimasukkan ke dalam tabung
reaksi, kemudian menambahkan 2 ml NaOH, 2 ml asam
asetat dan 2 ml H2SO4. Mengamati perubahan bau yaitu jika
tidak berbau etil asetat maka ekstrak sudah terbebas dari etil
aseat dan jika masih maka perlu diupkan kembali
(Wulandari, 2017).
3. Uji Bebas N-Heksana
Uji bebas n-heksana dilakukan dengan cara 2 tetes
ekstrak dimasukkan ke dalam tabung lalu dibakar.
Mengamati api dan asap yang terbentuk yaitu jika tidak
menghasilkan api dan asap maka ekstrak sudah terbebas dari
n-heksana dan jika menghasilkan api dan asap maka ekstrak
perlu diuapkan kembali (Wulandari, 2017).
Uji Skrining Fitokimia
1. Uji Alkaloid
Sampel dibagi menjadi 2, masukan 3 tetes sampel dalam
kaca arloji, kaca arloji I ditambahkan 3 tetes pereaki mayer
sedangkan kaca arloji II ditambahkan 3 tetes pereaksi
bouchardat. Jika dengan mayer terbentuk endapan
menggumpal berwarna putih atau kuning dan dengan
bouchardat terbentuk endapan berwarna coklat sampai hitam,
maka kemungkinan terdapat alkaloid (DepKes RI, 1977).
2. Uji Saponin
Sampel sebanyak 0,5g dimasukkan dalam tabung
reaksi, tambahkan 10 ml air panas, dinginkan dan kemudian
kocok kuat-kuat selama 10 detik. Terbentuk buih yang
mantap selama tidak kurang dari 10 menit, setinggi 1-10 cm.
Pada penambahan 1 tetes asam klorida 2N, buih tidak hilang
(DepKes RI, 1977).
3. Uji Flavonoid
Sampel sebanyak 1 ml dimasukkan dalam tabung
reaksi, tambahkan 1 ml etanol 95% P, tambahkan 0,1 g
serbuk magnesium P dan 10 tetes asam klorida P, jika terjadi
warna merah jingga sampai merah ungu menunjukan adanya
flavonoid, jika terjadi warna kuning jingga menunjukan
adanya flavon, kalkon dan auron (DepKes RI, 1977).
4. Uji Tanin
Sampel sebanyak 2 ml dimasukkan dalam tabung reaksi,
ditambahkan 2 tetes larutan FeCl3 5 %. Tanda positif tanin
jika terbentuk warna hijau gelap/biru (Yuda, dkk., 2017).
5. Uji Minyak Atsiri
Mengambil sedikit sampel lalu ditaruh di atas kaca objek,
tambahkan 2 tetes sudan III dan 2 tetes etanol90% P. Jika
berwarna jingga menandakan adanya minyak atsiri (DepKes
RI, 1977).
6. Uji Glikosida
Sampel sebanyak 0,1 ml dimasukan dalam tabung reaksi,
ditambahkan 5 ml asam asetat anhidrat P, tambahkan 10 tetes
asam sulfat P, terjadi warna biru/hijau, menunjukan adanya
glikosida (reaksi Lieberman-Burchard) (DepKes RI, 1977).
Uji Kromatografi Lapis Tipis
Setelah pengujian skrining fitokimia selanjutnya
dilakukan uji KLT ekstrak kencur. Plat KLT yang akan
digunakan dioven terlebih dahulu selama 3 menit pada suhu
45°C untuk mengurangi kadar air dalam plat KLT.
Selanjutnya plat KLT yang sudah dioven diberi garis batas
atas dan garis batas bawah masing-masing 1 cm. Kemudian
membuat fase gerak dengan menggunakan beberapa eluen
lalu dimasukan ke dalam chamber dan dijenuhkan dengan
kertas saring sebagai tanda fase gerak yang dibuat sudah
jenuh atau belum. Selanjutnya ekstrak ditotolkan pada garis
batas bawah plat KLT lapis silika gel dengan menggunakan
pipa kapiler, kemudian plat KLT dimasukkan ke dalam
chamber yang berisi fase gerak yang telah dijenuhkan.
Menunggu hingga eluen naik sampai garis batas atas plat
KLT. Mengangkat plat KLT dan kering anginkan. Noda-
noda yang terbentuk pada plat silika gel kemudian diamati
dibawah sinar UV pada panjang gelombang 254 nm dan
366 nm. Kemudian amati masing-masing noda yang
terbentuk. Pengamatan noda meliputi jumlah noda, warna
noda dan penghitungan nilai Rf dan hRf noda serta
membandingkan dengan nilai Rf dan hRf standar teoritis
(Fath, 2016).
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui senyawa
metabolit sekunder apa sajakah yang terkandung dalam
masing-masimg pelarut dan senyawa metabolit sekunder apa
sajakah yang paling mendekati standar pada masing-masing
ekstrak berdasarkan profil Kromatografi Lapis Tipis. Dalam
penelitian ini, langkah awal yang dilakukan adalah penyiapan
sampel. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini yaitu
rimpang kencur yang memiliki kualitas cukup baik (tidak
busuk) yang di peroleh dari Pasar Brebes. Rimpang kencur
disortasi basah untuk memisahkan kotoran atau benda asing
serta bagian tanaman lain yang tidak diinginkan. Setelah itu,
rimpang dicuci dengan air mengalir dengan menggunakan
jenis air sumur, penggunaan air sumur karena air sumur
mudah didapat. Proses perajangan pada rimpang jangan
terlalu tipis yaitu ± 3 mm, agar kandungan zat aktif yang
mudah menguap seperti minyak atsiri tidak berkurang atau
menghilang sehingga tidak mempengaruhi komposisi, bau
dan rasa simplisia (KemenKes RI, 2015).
Rimpang kencur yang telah dirajang kemudian
dikeringkan. Proses pengeringan dilakukan dengan
menggunakan sinar matahari tidak langsung dengan di tutup
kain hitam. Penggunaan kain hitam dikarenakan kain hitam
menyerap panas serta bertujuan untuk menghindari
kerusakan komponen-komponen senyawa dalam bahan
(Wulandari, 2017). Proses pengeringan dilakukan ± selama 6
hari dan dihasilkan simplisia kering sebanyak 314,53 gram
dari berat awal simplisia segar sebanyak 4.000 gram.Setelah
dilakukan perhitungan dapat diketahui prosentase berat
kering terhadap berat basah rimpang sebesar 12,72 %. Kadar
air ini melebihi dari batas kadar air yang ditentukan yaitu ≤
10% (DepKes RI, 2008), tetapi dalam hal ini, kadar air dalam
rimpang cukup aman. Ada beberapa faktor yang
mempengaruhi proses pengeringan seperti waktu
pengeringan, suhu, kelembaban udara, luas permukaan bahan
dan sirkulasi udara (KemenKes RI, 2015). Rimpang kencur
selanjutnya disortasi kering untuk memisahkan bahan-bahan
yang belum kering seutuhnya dan bahan asing yang mungkin
terbawa. Setelah itu rimpang kencur diblender hingga
menjadi serbuk halus untuk kemudian dilakukan proses
berikutnya. Serbuk rimpang kencur yang telah diperoleh
selanjutnya dilakukan identifikasi serbuk dengan uji
makroskopis dan uji mikroskopis sebelum dilakukan
ekstraksi. Hal ini bertujuan untuk memastikan apakah sampel
yang digunakan benar-benar serbuk rimpang kencur atau
tidak. Identifikasi makroskopis rimpang kencur dilakukan
dengan pengamatan secara langsung. Tujuannya untuk
mengetahui karakteristik dari rimpang kencur yang meliputi
bentuk, bau, warna dan rasa. Hasil identifikasi makroskopis
rimpang kencur dapat dilihat pada tabel 4.1.
Tabel 4.1 Hasil Identifikasi Serbuk Rimpang Kencur
Secara Makroskopis
Literatur
Gambar Serbuk Pengujian Hasil
Rimpang Kencur Makroskopis (DepKes Pengamatan
RI, 1977)
Bentuk Serbuk Serbuk
Khas Khas
Bau
aromatik aromatik
Putih
kecoklatan Putih
Warna
sampai kecoklatan
coklat
 Pedas, Pedas,
Rasa hangat,agak hangat,agak
Periderm
pahit pahit
dengan
Setelah uji makroskopis selanjutnya uji mikroskopik parenkim +
serbuk rimpang kencur dengan menggunakan mikroskop. Uji
ini bertujuan untuk mengetahui fragmen-fragmen yang ada di
dalam rimpang kencur. Fragmen-fragmen tersebut meliputi
periderm, parenkim, pembuluh kayu dengan penebalan
spiral, parenkim dan sel minyak, parenkim dan periderm Butir pati
serta butir pati (DepKes RI, 1977). Hasil identifikasi +
mikroskopis serbuk rimpang kencur dapat dilihat pada tabel
4.2.
Tahap selanjutnya dilakukan ekstraksi dengan metode
Tabel 4.2 Hasil identifikasi serbuk rimpang kencur maserasi. Pelarut yang digunakan dalam metode maserasi
secara mikroskopis yaitu etanol 70% (polar), etil asetat (semi polar) dan n-
heksana (nonpolar) dengan perbandingan sampel dan pelarut
Literatur 1 : 7 (b/v) (Marjoni, 2016). Maserasi digunakan karena
Gambar Nama
(DepKes RI, Hasil sederhana, relatif murah, dan terjadi kontak antara sampel
pengamatan fragmen
1977) dengan pelarut yang cukup lama memudahkan pelarut untuk
mengikat senyawa yang ada pada sampel serta dapat
menghindari kerusakan komponen senyawa yang tidak tahan
Periderm + panas (Latifah, 2015).
Penggunaan etanol sebagai pelarut karena memiliki
rumus molekul C2H5OH, dimana C2H5 merupakan gugus
yang bersifat nonpolar dan OH merupakan gugus yang
bersifat polar, sehingga pelarut etanol dapat menarik
Parenkim + kandungan kimia yang bersifat polar maupun non polar
(Mahatriny, 2013). Selain itu, pelarut etanol paling banyak
digunakan dan lebih aman, memiliki toksisitas lebih rendah
dibandingkan metanol, serta daya absorbsi yang baik (Fath,
Pembuluh
2016). Etil asetat merupakan pelarut dengan toksisitas
kayu
rendah yang bersifat semi polar sehingga diharapkan
dengan +
dapat menarik senyawa yang bersifat polar maupun
penebalan
nonpolar (Akbar, 2010). Senyawa ini berwujud cairan tak
spiral
berwarna, memiliki aroma khas dan mudah menguap
sedangkan n-heksana adalah jenis pelarut nonpolar yang
murah, relatif aman, secara umum tidak reaktif dan
Parenkim
mudah diuapkan.
dan sel +
Proses maserasi dilakukan dengan cara menimbang
minyak
serbuk rimpang kencur masing-masing 100 gram, masukan
serbuk ke dalam masing-masing maserator lalu tambahkna
masing-masing pelarut yaitu pelarut polar (etanol 70%),
pelarut semipolar (etil asetat) dan pelarut nonpolar (n-
heksana) masing-masing 700 ml. Selanjutnya dimaserasi
selama 5 hari. Umumnya maserasi berlangsung selama 3-5
hari, dipilih 5 hari karena pada waktu 5 hari sudah terjadi
keseimbangan konsentrasi dalam bahan dan diharapkan
semakin lama proses maserasi, semakin banyak senyawa asetat sebesar 7 gram dan ekstrak terendah dihasilkan oleh
metabolit sekunder yang diperoleh. Kemudian lakukan pelarut n-heksana sebesar 2,59 gram. Nilai rendemen ekstrak
pengadukan selama ± 5 menit setiap harinya. Proses menggunakan pelarut etanol 70%, etil asetat dan n-heksana
pengadukan akan menjamin keseimbangan konsentrasi berturut turut yaitu 26,16%, 7,06% dan 2,61%. Berikut tabel
sampel lebih cepat, tanpa pengadukan akan mengakibatkan hasil ekstrak rimpang kencur.
berkurangnya perpindahan senyawa metabolit sekunder yang
Tabel 4.6 Hasil Ekstrak Rimpang Kencur
diekstrak (Marjoni, 2016). Setelah itu, saring dengan
menggunakan kain flanel dan masukan ke dalam beaker Gambar Hasil Berat
glass. Proses penyaringan dilakukan untuk memisahkan Pelarut Rendemen
Ekstrak Pengamatan Ekstrak
ekstrak cair yang mengandung senyawa dengan ampas
sampel. Lalu ekstrak cair yang didapatkan diuapkan Bentuk :
menggunakan waterbath pada suhu 60°C. Penguapan dengan Ekstrak
waterbath keuntungannya suhu dapat diatur dan konstan. kental
Penggunaan suhu 60°C karena dilihat dari pelarut yang
Etanol Warna : 25,92
digunakan dimana dari ketiga pelarut memiliki titik didih 26,16%
70% coklat gram
yang hampir sama yaitu etanol (78,4), etil asetat (77,1) dan n-
heksana (68,7). Kemudian dilakukan uji bebas etanol 70%, Bau : khas
bebas etil asetat dan bebas n-heksana untuk mengetahui rimpang
apakah ekstrak masih mengandung pelarut atu tidak yang kencur
dibuktikan dengan mengamati perubahan yang terjadi setelah
dilakukan perlakuan. Hasil dari pengujian bebas etanol 70%, Bentuk :
bebas etil asetat dan bebas n- heksana dapat dilihat pada tabel Ekstrak
4.4. kental

Tabel 4.4 Hasil Identifikasi Bebas Etanol 70%, Etil Warna :

Etil
Asetat, N-Heksana pada Ekstrak Rimpang Kencur coklat 7 gram 7,06%
asetat
kehitaman
Identifikasi Hasil Literatur Bau : khas
rimpang
kencur
Tidak berbau
Bebas Tidak berbau ester Bentuk :
ester
Etanol 70% Ekstrak
(Wulandari, 2017)
(+) kering

N- Warna : 2,59
2,61%
Tidak berbau heksana coklat gram
Bebas Etil ester Tidak berbau ester
Bau : khas
Asetat (Wulandari, 2017)
(+) rimpang
kencur
Tidak
Tidak Berdasarkan tabel di atas, rendemen ekstrak masing-
Bebas N- menghasilkan api
menghasilkan api masing pelarut menghasilkan nilai yang cukup berbeda. Hal
Heksana dan asap
dan asap (+) ini karena perbedaan jenis pelarut mempengaruhi jumlah
(Wulandari, 2017)
ekstrak yang dihasilkan, ekstrak dengan menggunakan
Hasil ekstrak tertinggi didapatkan pada ekstrak etanol pelarut etanol (polar) memiliki rendemen paling tinggi diikuti
70% yaitu sebesar, 25,92 gram. ekstrak dengan pelarut etil rendemen ekstrak menggunakan pelarut etil asetat
(semipolar) dan rendemen ekstrak dengan menggunakan tetap(DepKes RI
pelarut n-heksana (nonpolar).Etanol memiliki gugus polar 1977)

yang lebih kuat daripada gugus nonpolar, hal ini dapat Merah jingga -
terlihat dari struktur kimia etanol yang mengandung gugus merah ungu dan
hidroksil (polar) dan gugus karbon (nonpolar)(Ukhty, 2011). Flavonoid + + + - kuning jingga
Rendemen pada pelarut etil asetat lebih kecil dibandingkan (DepKes RI
1977)
dengan pelarut etanol 70% namun lebih besar dari pelarut n-
heksana, hal ini diduga adanya gugus metoksi yang terdapat Hijau
pada struktur kimia etil asetat. Adanya gugus metoksi Tanin - - - - gelap/biru(Yuda,
dkk., 2017)
tersebut yang menyebabkan etil asetat dapat membentuk
ikatan hidrogen dengan senyawa yang terdapat pada sampel. Minyak Jingga (DepKes
+ - - + RI 1977)
Ikatan hidrogen yang terbentuk pada pelarut etil asetat lebih Atsiri
lemah dibandingkan dengan ikatan hidrogen yang terbentuk Biru /
pada pelarut etanol sehingga mempengaruhi hasil rendemen Glikosida - - - - hijau(DepKes RI
dari pelarut etil asetat yang lebih sedikit. Nilai rendemen 1977)
terkecil terdapat pada ekstrak terlarut n-heksana, hal ini
menunjukan bahwa senyawa aktif yang bersifat nonpolar Keterangan : + : Mengandung senyawa
pada sampel rimpang kencur jumlahnya sedikit (Romandanu, - : Tidak mengandung senyawa
2014).Hasil ini mirip dengan penelitian (Romandanu, 2014) Berdasarkan hasil skrining fitokimia dapat diketahui
yaitu rendemen ekstrak bunga lotus (Nelumbo nucifera) pada bahwa pada serbuk rimpang kencur positif mengandung
ekstrak metanol dihasilkan rendemen sebesar 0,708%, alkaloid, saponin, flavonoid, dan minyak atsiri. Ekstrak
ekstrak etil asetat sebesar 0,286% dan ekstrak n-heksana etanol 70% positif mengandung alkaloid, saponin dan
sebesar 0,108%. flavonoid. Ekstrak etil asetat positif mengandung alkaloid
Ekstrak rimpang kencur yang didapatkan selanjutnya dan flavonoid. Ekstrak n-heksana positif mengandung
dilakukan skrining fitokimia. Skrining fitokimia adalah tahap minyak atsiri.
pendahuluan dalam pengujian fitokimia. Pendekatan skrining
fitokimia meliputi analisis kualitatif kandungan kimia dengan 1. Alkaloid
pengujian warna menggunakan suatu pereaksi warna. Pada Hasil positif dari uji alkaloid adalah pada penambahan
penelitian ini senyawa metabolit sekunder yang di reagen mayer terbentuk endapan putih-kekuningan
identifikasi meliputi alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, sedangkan pada penambahan reagen bouchardat terbentuk
minyak atsiri dan glikosida. Hasil uji skrining fitokimia tiap endapan coklat-kehitaman. Hasil uji alkaloid dapat dilihat
ekstrak dapat dilihat pada tabel 4.6 pada gambar 4.1

Tabel 4.7 Hasil Uji Skrining Fitokimia Ekstrak Rimpang

Kencur

Ekstrak Pelarut
Golongan
Serbuk Hasil Positif
Senyawa Etanol Etil N-
70 % Asetat Heksana Simplisia Etanol 70% Etil Asetat N-Heksana
Gambar 4.1 Hasil Uji Alkaloid
- (endapan
Alkaloid putih-kuning) Berdasarkan hasil identifikasi, senyawa alkaloid ditemukan
-mayer
pada simplisia, ekstrak etanol 70% dan ekstrak etil asetat.
+ + + - - (endapan
Pada penambahan reagen mayer terbentuk endapan putih
coklat-hitam)
- pada serbuk rimpang kencur, terbentuk endapan kuning pada
+ + + - (DepKes RI
bouchardat
1977) ekstrak etanol 70%, dan terbentuk endapan kuning pada
ekstrak etil asetat. Pada penambahan reagen bouchardat
Saponin + + - -
Terbentuk buih terbentuk endapan hitam pada serbuk rimpang kencur,
terbentuk endapan hitam pada ekstrak etanol 70%, dan
terbentuk endapan coklat pada ekstrak etil asetat.Alkaloid
dalam tumbuhan umumnya berbentuk garam dan bersifat
larut dalam pelarut polar etanol dan air (Hanani, 2016).
Sedangkan menurut (Simaremare, 2014) alkaloid
mengandung nitrogen sebagai bagian dari sistem
sikliknyaserta mengandung substituen yang bervariasi seperti
gugus amina, amida, fenol dan metoksi sehingga bersifat
semipolar. Oleh karena itu, senyawa alkaloid dapat tertarik
dalam pelarut etanol 70% dan etil asetat. Endapan yang
terbentuk dalam uji alkaloid karena adanya pembentukan
senyawa kompleks antara ion logam dari reagen dengan
senyawa alkaloid(Latifah, 2015). Pengujian alkaloid
dilakukan dengan 2 pereaksi yang berbeda karena menurut
(Marjoni, 2016) menyatakan apabila terdapat endapan paling
sedikit dengan 2 atau 3 pengujian, maka simplisia dinyatakan
positif mengandung alkaloid.
2. Saponin
Hasil positif dari uji saponin adalah terbentuknya busa
yang stabil setelah penambahan HCl 2N. Hasil uji saponin
dapat dilihat pada gambar 4.2
Simplisia Etanol 70% Etil Asetat N-Heksana
Gambar 4.2 Hasil Uji Saponin
Berdasarkan hasil identifikasi, saponin hanya ditemukan
pada serbuk rimpang kencur dan ekstrak etanol 70%.
Menurut (Simaremare, 2014) saponin merupakan glikosida
triterpen yang memiliki sifat cenderung polar karena ikatan
glikosidanya, sehingga saponin dapat tertarik dalam pelarut
etanol yang bersifat polar. Busa yang ditimbulkan saponin
dikarenakan adanya kombinasi struktur senyawa
penyusunnya yaitu rantai sapogenin nonpolar dan rantai
samping polar yang larut dalam air (Khotimah, 2016).
Penambahan HCl 2N pada uji saponin bertujuan untuk
menambah kepolaran sehingga gugus hidrofil akan berikatan
lebih stabil dan buih yang terbentuk menjadi stabil
(Simaremare, 2014).
3. Flavonoid
Hasil positif dari uji flavonoid adalah terjadi warna merah
jingga sampai merah ungu, menunjukan adanya flavonoid.
Jika terjadi warna kuning jingga, menunjukan adanya flavon,
kalkon dan auron. Hasil uji flavonoid dapat dilihat pada
gambar 4.3
Simplisia Etanol 70% Etil Asetat N-Heksana
Gambar 4.3 Hasil Uji Flavonoid
Berdasarkan hasil identifikasi, flavonoid terdapat dalam
serbuk rimpang kencur ditandai warna kekuningan, ekstrak
etanol ditandai warna merah jingga dan ekstrak etil asetat
ditandai warna kuning jingga. Umumnya flavonoid
ditemukan berikatan dengan gula membentuk glikosida yang
menyebabkan senyawa ini mudah larut dalam pelarut polar
seperti metanol, etanol (Hanani, 2016). Selain itu, flavonoid
memiliki gugus gula yang menyebabkan flavonoid bersifat
polar, flavonoid lebih efisien dalam menarik komponen polar
hingga semipolar (Simaremare, 2014). Oleh karena itu,
senyawa flavonoid dapat tertarik dalam pelarut etanol 70%
dan etil asetat. Pada uji flavonoid ditambahkan etanol 95%
tujuannya untuk menarik aglikon dari senyawa flavonoid,
dimana flavonoid dihidrolisa dengan HCl P menjadi glikon
(Wulandari, 2017). Penambahan HCl pekat dalam uji
flavonoid digunakan untuk menghidrolisis flavonoid menjadi
aglikonnya, yaitu dengan menghidrolisis O-glikosil. Glikosil
akan tergantikan oleh H+ dari asam karena sifatnya yang
elektrofilik. Sedangkan penambahan logam Mg untuk
mereduksi inti benzopiron yang terdapat dalam struktur
flavonoid sehingga terbentuk garam flavilium berwarna
merah atau jingga (Khotimah, 2016).
4. Tanin
Hasil positif dari uji tanin adalah terbentuknya warna
hijau gelap/biru setelah penambahan FeCl3. Hasil uji tanin
dapat dilihat pada gambar 4.4
 diharapkan dapat mengidentifikasi senyawa nonpolar seperti
minyak atsiri.

6. Glikosida

Hasil positif dari uji glikosida adalah terbentuknya warna

Simplisia Etanol 70 Etil Asetat N-Heksana
biru atau hijau setelah penambahan asam asetat anhidrat dan
Gambar 4.4 Hasil Uji Tanin
asam sulfat pekat. Hasil uji glikosida dapat dilihat pada tabel
Berdasarkan hasil identifikasi, senyawa tanin tidak terdapat
4.6
pada semua sampel. Uji fitokimia dengan menggunakan
FeCl3digunakan untuk menentukan apakah sampel
mengandung gugus fenol. Adanya gugus fenol ditunjukkan
dengan warna hijau kehitaman atau biru tua setelah
ditambahkan dengan FeCl3, tetapi pada sampel ini tidak
ditemukan senyawa tanin setelah penambahan FeCl3yaitu Simplisia Etanol 70% Etil Asetat N-Heksana
tidak terjadi perubahan warna dimungkinkan tidak adanya Gambar 4.6 Hasil Uji Glikosida
gugus hidroksil yang ada pada senyawa tanin (Simaremare, Berdasarkan hasil identifikasi, senyawa glikosida tidak
2014). terdapat pada semua sampel.Hasil uji glikosida pada sampel
terbentuk warna coklat. Penambahan pelarut asam asetat
5. Minyak Atsiri
anhidrat dan H2SO4 P akan menyebabkan reaksi antara
Hasil positif dari uji minyak atsiri adalah terbentuknya senyawa glikosida dan keduanya yang menimbulkan
warna jingga setelah penambahan sudan III dan etanol 90%. perubahan warna. Senyawa akan mengalami dehidrasi
Hasil uji minyak atsiri dapat dilihat pada gambar 4.5 dengan penambahan asam kuat dan membentuk garam
dengan menghasilkan perubahan warna menjadi biru atau
hijau (Tanaya, 2015). Tetapi dalam hal ini sampel tidak
mengandung senyawa glikosida dibuktikan dengan tidak
terjadinya perubahan warna menjadi hijau atau biru. Pada
penelitian sebelumnya juga menyatakan bahwa kandungan
rimpang kencur berupa flavonoid, tanin, sineol dan saponin
Simplisia Etanol 70% Etil Asetat N-Heksana (Helmisari RD, Winarsih S, R. A, 2012), tidak terdapat
Gambar 4.5 Hasil Uji Minyak Atsiri senyawa glikosida.
Pada penelitian ini dapat dilihat perbedaan jenis pelarut
Berdasarkan hasil identifikasi, senyawa minyak atsiri hanya
menghasilkan perbedaan jenis senyawa metabolit sekunder
terdapat dalam serbuk rimpang kencur dan ekstrak n-
yang didapat. Perbedaan ini dipengaruhi beberapa faktor
heksana. N-heksana adalah salah satu jenis pelarut nonpolar
seperti faktor biologi dan faktor kimia. Faktor biologi
dan pelarut nonpolar dapat mengekstrak senyawa kimia
meliputi spesies tumbuhan, lokasi tumbuh, waktu
seperti lilin, lipid, dan minyak yang mudah menguap
pemanenan, penyimpanan bahan tumbuhan, umur tumbuhan
(Khotimah, 2016). Sedangkan etanol 70% dan etil asetat
dan bagian yang digunakan. Sedangkan faktor kimia yaitu
adalah pelarut polar dan semipolar sehingga tidak
faktor internal (jenis senyawa aktif dalam bahan, kadar total
teridentifikasi senyawa minyak atsiri. Hal ini sesuai Prinsip
rata-rata senyawa aktif) dan faktor eksternal (metode
dari ekstraksi adalah mengekstrak senyawa aktif yang dapat
ekstraksi, perbandingan ukuran alat ekstraksi, ukuran,
larut dalam pelarut berdasarkan tingkat kepolaran masing-
kekerasan dan kekeringan bahan, pelarut yang digunakan
masing pelarutnya (like dissolves like). Penambahan sudan
dalam ekstraksi, kandungan pestisida) (Khoirani, 2013).
III pada uji minyak atsiri karena sudan III merupakan pelarut
Hasil positif dari uji skrining fitokimia kemudian
berwarna merah yang larut dalam minyak dan digunakan
dilanjutkan pemisahan senyawa dengan cara Kromatografi
untuk menunjukan apakah bahan mengandung minyak atau
Lapis Tipis. Kromatografi Lapis Tipis adalah salah satu
tidak sedangkan penggunaan etanol 90% karena etanol
analisis kualitatif dari suatu sampel yang ingin dideteksi
memiliki gugus C2H5yang bersifatnonpolar sehingga
dengan memisahkan senyawa atau komponen senyawa
berdasarkan tingkat kepolarannya. Fase diam yang digunakan
adalah plat silika gel yang bersifat polar yang terlebih dahulu
dilakukan aktivasi/dioven pada suhu 45°C selama 3 menit.
Tujuannya untuk menghilangkan kelembaban air atmosfer
(air yang terserap oleh plat akibat tekanan udara) yang
terabsorpsi dalam plat, sehingga tidak akan ada senyawa
yang melekat (L. Wulandari, 2011). Sedangkan fase gerak
yang digunakan berbeda-beda tergantung golongan senyawa.
Pada senyawa alkaloid menggunakan campuran
kloroform : metanol (9:1), senyawa saponin menggunakan
campuran kloroform : metanol : air (3:7:2), senyawa
flavonoid menggunakan campuran n-butanol : asam asetat :
air (4:1:5), senyawa tanin menggunakan campuran n-heksana
: etil asetat (6:4), dan senyawa minyak atsiri menggunakan
campuran benzena : kloroform (1:1). Pemilihan eluen-eluen
tersebut didasarkan pada sifat kelarutan komponen atau
senyawa terhadap pelarut yang digunakan. Fase gerak atau
eluen yang bersifat lebih polar digunakan untuk mengelusi
senyawa-senyawa yang adsorpsinya kuat, sedangkan fase
gerak yang kurang polar digunakan untuk mengelusi
senyawa yang adsorpsinya lemah (Fath, 2016).
Bejana yang akan digunakan dijenuhkan terlebih, karena
biasanya eluen terdiri dari pelarut dengan titik didih rendah
dan sangat mudah menguap yang dapat menyebabkan
terjadinya efek tepi dan melengkungnya bentuk garis depan
eluen. Hal ini karena penguapan tidak hanya terjadi dari atas
ke bawah tapi juga dari samping tepi chamber ke tengah
chamber. Efek ini dapat diatasi dengan membuat chamber
jenuh yaitu dengan kertas saring. Kondisi jenuh yaitu ketika
uap eluen memenuhi ruangan dalam chamber ditandai
dengan mencapainya eluen pada kertas saring hingga ke
tutup chamber. Kejenuhan biasanya dicapai 5-15 menit tetapi
tergantung pelarutnya juga (L. Wulandari, 2011). Setelah
bejana jenuh, kemudian masukan plat KLT yang sudah
ditotoli sampel dan tutup rapat, tunggu hingga fase gerak
mencapai batas atas plat KLT. Kemudian plat KLT diangkat
dan dikeringkan lalu dilamati di bawah sinar UV pada
panjang gelombang 254 nm dan 366 nm. Selanjutnya
Selanjutnya menganalisa nilai Rf dan hRf pada
masing0masing ekstrak lalu membandingkan dengan standar
teoritis. Nilai Rf yang baik untuk deteksi sinar UV yaitu
antara 0,2-0,8 karena Rf ˂0,2 belum terjadi keseimbangan
antara komponen senyawa dan fase gerak sehingga bentuk
noda kurang simetris sedangkan Rf ˃0,8 noda analit akan
diganggu adsorben pengotor plat/fase diam yang teramati di
sinar UV (L. Wulandari, 2011). Identifikasi senyawa dengan
cara Kromatografi Lapis Tipis meliputi uji alkaloid, saponin,
flavonoid dan minyak atsiri.
1. Pemisahan senyawa alkaloid pada ekstrak
Pemisahan senyawa alkaloid pada ekstrak rimpang
kencur menggunakan eluen kloroform : metanol (9 : 1).
Eluen ini mampu menghasilkan 1 noda ekstrak etanol 70%, 4
noda ekstrak etil asetat dan 1 noda ekstrak n-heksana di
bawah sinar UV 366 nm. Noda pada ekstrak tanpa penampak
noda.
Campuran eluen kloroform : metanol (9 : 1) memiliki
sifat kepolaran yang berbeda, di mana kloroform bersifat
semipolar dengan konstanta dielektrikum (4,81) dan metanol
bersifat polar memiliki konstanta dielektrikum (33,60).
Namun, karena jumlah perbandingan eluen kloroform lebih
besar, maka campuran eluen ini cenderung bersifat
semipolar. Hasil pemisahan menunjukan jumlah noda yang
berbeda dengan harga Rf berturut-turut yaitu pada ekstrak
etanol 70% (0,47), ekstrak etil asetat (0,63), (0,71), (0,80),
(0,94) dan pada ekstrak n-heksana (0,92). Noda pada ekstrak
etanol 70% lebih berdistribusi pada fase diamnya karena
memiliki harga Rf rendah sehingga bersifat polar. Sedangkan
pada ekstrak etil asetat dan ekstrak n-heksana memiliki harga
Rf yang tinggi sehingga lebih terdistribusi ke fase geraknya.
Berdasarkan data di atas, harga Rf yang paling mendekati
standar terdapat pada ekstrak etil asetat yaitu pada noda ke 1
dan noda ke 2, maka dapat disimpulkan bahwa senyawa
alkaloid terkandungdalam ekstrak etil asetat.Hal ini karena
alkaloid mengandung nitrogen sebagai bagian dari sitem
sikliknya serta mengandung substituen yang bervariasi
seperti gugus amina, amida, fenol dan metoksi sehingga
bersifat semipolar (Simaremare, 2014) dan teridentifikasi
dalam pelarut etil asetat.
2. Pemisahan senyawa saponin pada ekstrak
Pemisahan senyawa saponin pada ekstrak rimpang kencur
menggunakan eluen kloroform : metanol : air (3 : 7 : 2).
Eluen ini mampu menghasilkan 1 noda ekstrak etanol 70%, 2
noda ekstrak etil asetat dan 1 noda ekstrak n-heksana di
bawah sinar UV 366 nm. Noda pada ekstrak tanpa penampak
noda.
Campuran eluen kloroform : metanol : air (3 : 7 : 2)
memiliki sifat kepolaran yang berbeda, di mana kloroform
bersifat semipolar dengan konstanta dielektrikum (4,81)
sedangkan metanol (33,60) dan air (78,4) yang bersifat polar.
Campuran eluen ini cenderung bersifat polar karena
perbandingan antara metanol dan air lebih besar
dibandingkan kloroform. Hasil pemisahan menunjukan
jumlah noda yang berbeda dengan harga Rf berturut-turut
yaitu pada ekstrak etanol 70% (0,67), ekstrak etil asetat
(0,87), (0,91) dan pada ekstrak n-heksana (0,24). Noda pada
ekstrak n-heksana lebih berdistribusi pada fase diamnya
karena memiliki harga Rf rendah sehingga bersifat polar.
Sedangkan pada etanol 70% dan ekstrak etil asetat memiliki
harga Rf yang tinggi sehingga lebih terdistribusi ke fase
geraknya. Berdasarkan data di atas, harga Rf masing-masing
ekstrak mendekati harga Rf standar, maka dapat disimpulkan
bahwa senyawa saponin terdapat pada semua ekstrak. Hal ini
karena saponin memiliki glikosil yang berfungsi sebagai
gugus polar dan gugus steroid sebagai gugus nonpolar
sehingga bisa larut dalam pelarut polar sampai nonpolar
(Fath, 2016).
3. Pemisahan senyawa flavonoid pada ekstrak
Pemisahan senyawa flavonoid pada ekstrak rimpang
kencur menggunakan eluen n-butanol : asam asetat : air (4 : 1
: 5). Eluen ini mampu menghasilkan 1 noda ekstrak etanol
70%, 2 noda ekstrak etil asetat dan 1 noda ekstrak n-heksana
di bawah sinar UV 366 nm. Noda pada ekstrak tanpa
penampak noda.
Campuran eluen n-butanol : asam asetat : air (4 : 1 : 5)
memiliki sifat kepolaran yang berbeda, di mana n-butanol
bersifat semipolar dengan konstanta dielektrikum (15,80)
sedangkan asam asetat (6,2) dan air (78,4) yang bersifat
polar. Campuran eluen ini cenderung bersifat polar sampai
semipolar karena perbandingan antara n-butanol dan asam
asetat yang bersifat semipolardengan air yang bersifat polar
perbandingannya sama. Hasil pemisahan menunjukan jumlah
noda yang berbeda dengan harga Rf berturut-turut yaitu pada
ekstrak etanol 70% (0,19), ekstrak etil asetat (0,89), (0,91)
dan pada ekstrak n-heksana (0,86). Noda pada ekstrak etanol
70% lebih berdistribusi pada fase diamnya karena memiliki
harga Rf rendah sehingga bersifat polar. Sedangkan pada
ekstrak etil asetat dan ekstrak n-heksana memiliki harga Rf
yang tinggi sehingga lebih terdistribusi ke fase geraknya.
Berdasarkan data di atas, harga Rf ekstrak etil asetat dan
ekstrak n-heksana lebih mendekati harga Rf standar, maka
dapat disimpulkan bahwa senyawa flavonoid terdapat pada
ekstrak etil asetat dan ekstrak n-heksana. Hal ini karena
senyawa flavonoid mempunyai tipe yang beragam dan
terdapat dalam bentuk bebas (aglikon) maupun terikat
sebagai glikosida. Aglikon polimetoksi bersifat nonpolar
sedangkan aglikon polihidroksi bersifat semipolar (Astarina,
2013).
4. Pemisahan senyawa minyak atsiri pada ekstrak
Pemisahan senyawa minyak atsiri pada ekstrak rimpang
kencur menggunakan eluen benzena : kloroform (1 : 1).
Eluen ini mampu menghasilkan 1 noda ekstrak etanol 70%, 3
noda ekstrak etil asetat dan 1 noda ekstrak n-heksana di
bawah sinar UV 366 nm. Noda pada ekstrak tanpa penampak
noda.
Campuran eluen benzena : kloroform (1 : 1) memiliki
sifat kepolaran yang berbeda, di mana benzena bersifat
nonpolar dengan konstanta dielektrikum (2,38) sedangkan
kloroformbersifat semipolar dengan konstanta dielektrikum
(4,81). Campuran eluen ini memiliki sifat antara semipolar
sampai nonpolar dilihat dari perbandingan jumlah eluen yang
sama. Hasil pemisahan menunjukan jumlah noda yang
berbeda dengan harga Rf berturut-turut yaitu pada ekstrak
etanol 70% (0,12), ekstrak etil asetat (0,12), (0,43), (0,81)
dan pada ekstrak n-heksana (0,93). Noda pada ekstrak etanol
70% lebih berdistribusi pada fase diamnya karena memiliki
harga Rf rendah sehingga bersifat polar. Sedangkan pada
ekstrak etil asetat dan ekstrak n-heksana memiliki harga Rf
yang tinggi sehingga lebih terdistribusi ke fase geraknya.
Berdasarkan data di atas, harga Rf ekstrak etil asetat yang
paling mendekati harga Rf standar terdapat pada noda ke 3,
maka dapat disimpulkan bahwa senyawa minyak atsiri
terdapat pada ekstrak etil asetat. Hal ini karena pelarut etil
asetat sedikit dapat menarik senyawa nonpolar maupun polar.
Berdasarkan hasil Kromatografi Lapis Tipis pada ekstrak
etanol 70%, ekstrak etil asetat dan ekstrak n-heksana
diperoleh perbedaan jumlah noda, harga Rf dan hRf serta
senyawa metabolit sekunder yang tertarik pada masing-
masing ekstrak. Hal ini disebabkan karena perbedaan jenis
pelarut menghasilkan perbedaan jenis senyawa yang
diperoleh, selain itu juga dipengaruhi oleh struktur kimia dari
senyawa yang dipisahkan, sifat dari penyerap dan derajat
aktivitasnya, tebal dan kerataan lapisan penyerap, pelarut dan
derajat kemurnian fase gerak, derajat kejenuhan dari uap
dalam pengembang, jumlah cuplikan yang digunakan, suhu
dan kesetimbangan dalam bejana (Fath, 2016).
Hasil antara skrining fitokimia dengan uji KLT juga
terdapat perbedaan, sebagai contoh pada hasil skrining
fitokimia senyawa saponin terdapat pada pelarut etanol 70%
tetapi pada uji KLT ditemukan pada pelarut etil asetat dan n-
heksana, hal ini dapat terjadi karena salah satunya adalah
penggunaan jenis eluen pada proses KLT. Bila noda yang
dihasilkan belum bagus (noda masih berekor atau belum
simetris), eluen dapat dimodifikasi dengan menambahkan
sedikit asam atau basa sehingga merubah Ph eluen. Pada
pencampuran pelarut sangat polar dengan pelarut sangat
nonpolar sebaiknya ditambah satu pelarut lagi yaitu pelarut
semipolar sehingga eluen yang terbentuk dapat bercampurr
dengan baik (tidak terlihat kekeruhan), hal ini juga untuk
menghindari terjadinya efek demixing eluen (kurang
bercampurnya eluen) yang dapat mengganggu kromatogram
yang dihasilkan. Efek demixing eluen yaitu munculnya dua
garis depan (garis depan eluen teramati dan garis depan eluen
nyata). Pemilihan pelarut menjadi sangat penting, maka dari
itu dipilih pelarut yang memiliki sifat antara lain pelarut
dapat melarutkan solut tetapi sedikit atau tidak melarutkan
diluen, pelarut tidak mudah menguap pada saat ekstraksi,
pelarut mudah dipisahkan dari solut, sehingga dapat
dipergunakan kembali dan pelarut tersedia di pasaran dan
tidak mahal (Wulandari, 2011).
IV. KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka
dapat disimpulkan bahwa :
1. Senyawa alkaloid, saponin dan flavonoid tertarik dalam
pelarut etanol 70%. Senyawa alkaloid dan flavonoid tertarik
dalam pelarut etil asetat. Senyawa minyak atsiri tertarik
dalam pelarut n-heksana.
2. Hasil uji KLT menunjukan bahwa senyawa alkaloid
terkandung dalam ekstrak etil asetat, senyawa saponin
terkandung dalam ekstrak etanol 70% ekstrak etil asetat dan
ekstrak n-heksana, senyawa flavonoid terkandung dalam
ekstrak etil asetat dan ekstrak n-heksana, senyawa minyak
atsiri terkandung dalam ekstrak etil asetat.
V. UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada laboran
Politeknik Harapan Bersama Tegal yang telah membantu
penulis dalam menyelesaikan penelitian ini dan juga teman-
teman saya yang telah memberi semangat sehingga penelitian
ini dapat diselesaikan.
VI. DAFTAR PUSTAKA
Agoes, A. (2010). Tanaman obat Indonesia. Jakarta :
Salemba Medika.
nutans ) Berpotensi sebagai Antioksidan. Skripsi.
Bogor : IPB
DepKes RI. (1977). Materia Medika Indonesia JILID 1-4.
Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia
DepKes RI. (2008). Farmakope Herbal Indonesia, Edisi I.
Jakarta : Departemen Kesehatan RI
Fath, M. A. (2016). Profil Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak
Etanol Biji Adas (Foeniculum vulgare Mill), Rimpang
Kencur (Kaempferia galanga L.), Rimpang Kunyit Putih
(Curcuma zedoaria (Berg.) Roscoe), Herba Pegagan
(Centella asiatica) Serta Ramuannya (Skripsi). Jurusan
Kimia Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam
Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.
Hanani, E. (2016). Analisis Fitokimia. Jakarta: EGC.
Haris, M. (2011). Penentuan Kadar Flavanoid Total dan
Aktivitas Antioksidan Dari Daun Dewa (Gynura
pseudochina) Dengan Spektrofotometer UV-Visibel. Skripsi
S1 (Tidak dipublikasikan).
Hasanah et al., A. N., Nazaruddin, F. .. Febrina, E. .. dan
Zuhrotun, A. (2011). Analisis Kandungan Minyak Atsiri
dan Uji Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Rimpang Kencur
(Kaempferia galanga L.). Jurnal Matematika & Sains.
Marjoni, R. (2016). Dasar-Dasar Fitokimia untuk Diploma
III Farmasi. Jakarta: CV. Trans Info Media.
Romandanu. (2014). Pengujian Aktivitas Antioksidan
Ekstrak Bunga Lotus (Nelumbo nucifera).
Sakinah, F. (2017). Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi
Ekstrak Rimpang Kunyit Putih (Curcuma longa L.) dan
Rumput Bambu (Lophatherium gracile B.) Menggunakan
Metode dpph Serta Identifikasi Golongan Senyawa Aktifnya.
Ukhty, N. (2011). Kandungan Senyawa Fitokimia Total
Fenol dan Aktivitas Antioksidan Lamun (Syringodium
isoetifolium).
Umar et al., M. I., Mohd Zaini Asmawi, Amirin Sadikum,
Item J. Atangwho I, Mun Fei Yam, et al. (2012). Bioactivity-
Guided Isolation of Ethyl-p-methoxycinnamate, an
Antiinflammatory Constituent from Kaemferia galanga L.
Extracts. Molecule.
Wulandari, A. (2017). Pengaruh Perbedaan Pelarut
Terhadap Polarisasi Kromatografi Ekstrak Temulawak
(Curcuma xanthorrhiza Roxb). Politeknik Harapan Bersama
Tegal.
Wulandari, L. (2011). Kromatografi Lapis Tipis.Fakultas
Farmasi Universitas Jember. Diterbitkan oleh PT. Taman
Kampus Presindo, Jember. ISBN : 978-979-17068-1-0