BÁO CÁO VI SINH VẬT THỰC PHẨM

BÀI 2 : PHÂN LẬP VÀ ĐỊNH LƯỢNG VI SINH VẬT

PHẦN B: ĐỊNH LƯỢNG VI SINH VẬT

PHẦN 1 : PHA LOÃNG MÔI TRƯỜNG VÀ NUÔI CẤY VI SINH VẬT TRÊN
THẠCH TRONG HỘP PEPTRI

1. Pha loãng môi trường

THAO TÁC

- Lấy một ống nghiệm đã chứa môi trường lỏng đã vô khuẩn

( Dùng pipet để lấy 900 microlit môi trường cho vào ống
Môi nghiệm )
trường - Dùng pipet cấy vật phẩm nghiên cứu : NƯỚC vào ống
lỏng nghiệm thứ nhất ( 100 microlit)
- Sau đó, đánh tan và lắc đều rồi lấy 100microlit bằng pipet từ
ống nghiệm thứ nhất chuyển sang ống nghiệm thứ 2
- Lặp lại như vậy đến ống nghiệm thứ 10
( Các ống nghiệm đều chứa trước 900microlit môi trường )

- Cân 1g khối lượng ĐẤT cho vào cối thủy tinh rồi nghiền nát
chuyển tất cả vào bình định mức 100ml. Sau đó, lắc đều trong
5 phút và để lắng trong tầm 1 đến 2 giây ( vật phẩm nghiên
Môi cứu)
trường đất - Dùng pipet lấy 900 microlit môi trường cho vào ống nghiệm
thứ nhất. Lấy thêm 100 microlit vật phẩm nghiên cứu cho vào
- Đánh tan và lắc đều rồi dùng pipet lấy tiếp 100microlit trong
ống nghiệm thứ nhất cho sang ống nghiệm thứ hai
- Thực hiện lặp lại đến ống nghiệm thứ 10
( Các ống nghiệm đều chứa trước 900microlit môi trường )
2. Gieo cấy vi sinh vật trên thạch :

THAO TÁC KẾT QUẢ

- Dùng pipet lấy 30

microlit từ ống nghiệm
thứ 10 cho lên hộp pepri.
- Dùng que tran tam giác
Canh trường sau khi được khử trùng di
lỏng chuyển đều trên thạch
trong hộp peptri cho đến
khi que tran di chuyển
trên lớp thạch sít lại
- Đậy nắp hộp peptri lên rồi
bao bên ngoài bằng giấy
rồi đem đi nuôi cấy .
- Chú ý: Mọi thao tác đều
thực hiện trên ngọn lửa
đèn cồn.
 - Dùng pipet lấy 30
microlit từ ống nghiệm
thứ 10 cho lên hộp pepri.
- Dùng que tran tam giác
sau khi được khử trùng di
Canh trường chuyển đều trên thạch
đất trong hộp peptri cho đến
khi que tran di chuyển
trên lớp thạch sít lại
- Đậy nắp hộp peptri lên rồi
bao bên ngoài bằng giấy
rồi đem đi nuôi cấy .
Chú ý: Mọi thao tác đều thực
hiện trên ngọn lửa đèn cồn.
 Cơ sở: Theo Omelianxki ước
tính trên 1 diện tích rộng
100cm2 mở ra trong 5 phút thì
lượng vsv rơi xuống tương
đương với lượng vsv có trong
Canh trường 10l không khí.
không khí
- Đặt hộp peptri có môi
trường đã được vô trùng
vào vùng không khí muốn
nghiên cứu.
- Mở nắp hộp trong thời
gian khoảng 5 phút rồi
đậy nắp và đem đi bỏ
trong tủ ấm 24 đến 48h.
- Đo đường kính hộp
peptri.

3. Nhận xét về cách tiến hành, thao tác và kết quả gieo cấy và định
lượng vi sinh vật .
 Nhận xét về kết quả và chú ý trong gieo cấy VSV:
- Trong quá trình gieo cấy phải thực hiện trên ngọn lửa đèn cồn
- Que tran tam giác cần phải được thanh trùng.
- Khi nuôi cấy mẫu không khí cần để hộp peptri ở 1 nơi cố định,
tránh tụ tập và nói chuyện ở không gian đó.
- Khuẩn lạc có dính vào nhau ở 1 vài trường hợp ( mẫu nước).
- Dùng pipet để lấy đầu côn.
Phần Định lượng vi sinh vật ( Báo cáo tuần sau )