Urine, unlike plasma or serum, is generally free of protein and lipids and therefore can usually be

extracted directly with an organic solvent. Urine does, however, have a wide variation in its
composition, this most obviously being seen in the dark amber of an overnight specimen compared with
the pale urine collected during the day. The gross composition of urine depends very largely on the diet
and this can account for a quite startling range of colors. Fortunately the normal type of compound
found in urine is water soluble, whereas most drugs are lipid soluble and can be extracted with an
appropriate solvent. One of the greatest difficulties that arises, however, is the volume of urine that may
be produced over fixed time intervals. For most analytical tests it is usual to perform the analysis on a
fixed volume of sample: with urinary excretion, however, it is the amount of substance excreted in a
certain interval which is of interest, not its concentration, and the amount is obtained by multiplying the
volume by the concentration. The problem that arises is twofold: if the urine volume is large, then the
sample is dilute and the method may be operating near its limit of detection, and the inevitable errors at
the low concentrations will be multiplied on adjustment for the volume. The large relative error
becomes a large absolute error in assessing the amount of urinary excretion. Thus in a series of urines
collected from a single subject, the individual urine samples will be subject to different errors and there
will be considerable uncertainty in the total drug excreted. It is wise to be aware of this factor when
drawing conclusions over total drug excretion: the error in one urine collection could well exceed the
total in another collection in the same series.

A related problem has been noted in the assay of the urine of athletes, when random test samples,
particularly for abnormal levels of caffeine, have been taken following a race. The sport has set a
concentration limit for caffeine in urine: however, the urine can become very concentrated particularly
when the athlete is dehydrated and a normal level of caffeine can easily turn into a prohibited level.
Sports authorities have been castigated for taking an unscientific view of the problem and its
interpretation.'-- On the other hand, the nature of the urine sample can often cause false negatives.
Lafolie'-'^ prefers to assess the possibility of false negatives by reference to creatinine content rather
than the color differences in urines as suggested by Simpson et al.

Urine has a wide range of pH values, predicated to a great extent on the diet, or on medication.
Antacids, for example, if absorbed, may cause the urine to be alkaline: strongly acid urine is less likely,
the normal pH range being 5.5 to 7. This applies to the pH of the urine as excreted. The nature of the
excreted drug could depend on the pH at this time. Weakly basic drugs such as amphetamine are more
efficiently excreted in acid urine, whereas weakly acidic drugs are more excreted in alkaline urine. Urine
which is left standing will slowly lose carbon dioxide and become more alkaline, resulting in the
precipitation of inorganic phosphates. In addition to the pH change, which can cause changes in
degradation of the analyte, the analyte may coprecipitate with these phosphates and be lost for the
analysis. Thus, stored urine will have a different composition from fresh urine and analytical
methodology and assessment of stability of drug in this matrix must account for the properties of both
types.
One aspect of urine that may be overlooked when used in quantitative studies is the method of
sampling and the amount sampled. Does the subject provide a complete emptying of the bladder so that
a total production of drug or metabolite into the urine over a given period can be calculated? Subjects
asked “to provide a sample'’ may give the minimum and it may be of a first catch rather than a
midstream sample, which may or not be representative. Cone et al.'“^ studied this in connection with
marijuana metabolites and concluded the concentrations were similar for consecutively collected
samples of the same urine voided.

Urine, tidak seperti plasma atau serum, umumnya bebas dari protein dan lipid dan oleh karena itu
biasanya dapat diekstraksi langsung dengan pelarut organik. Namun, urin memiliki variasi yang luas
dalam komposisinya, hal ini paling jelas terlihat dalam warna kuning gelap spesimen semalam
dibandingkan dengan urin pucat yang dikumpulkan pada siang hari. Komposisi kasar urin sangat
tergantung pada makanan dan ini dapat menjelaskan rentang warna yang cukup mengejutkan.
Untungnya jenis senyawa normal yang ditemukan dalam urin adalah larut dalam air, sedangkan
sebagian besar obat larut dalam lemak dan dapat diekstraksi dengan pelarut yang sesuai. Namun, salah
satu kesulitan terbesar yang muncul adalah volume urin yang dapat diproduksi selama interval waktu
tertentu. Untuk sebagian besar tes analitik, biasanya dilakukan analisis pada volume sampel yang tetap:
dengan ekskresi urin, bagaimanapun, jumlah zat yang diekskresikan dalam interval tertentu yang
menarik, bukan konsentrasinya, dan jumlahnya diperoleh dengan mengalikan volume dengan
konsentrasi. Masalah yang muncul ada dua: jika volume urin besar, maka sampelnya encer dan
metodenya mungkin beroperasi mendekati batas deteksinya, dan kesalahan yang tak terhindarkan pada
konsentrasi rendah akan berlipat ganda pada penyesuaian volume. Kesalahan relatif yang besar menjadi
kesalahan mutlak yang besar dalam menilai jumlah ekskresi urin. Jadi dalam serangkaian urin yang
dikumpulkan dari satu subjek, sampel urin individu akan mengalami kesalahan yang berbeda dan akan
ada ketidakpastian yang cukup besar dalam total obat yang diekskresikan. Adalah bijaksana untuk
menyadari faktor ini ketika menarik kesimpulan atas ekskresi obat total: kesalahan dalam satu koleksi
urin bisa melebihi total dalam koleksi lain dalam seri yang sama.

Masalah terkait telah dicatat dalam pengujian urin atlet, ketika sampel uji acak, terutama untuk kadar
kafein yang tidak normal, telah diambil setelah perlombaan. Olahraga telah menetapkan batas
konsentrasi kafein dalam urin: namun, urin bisa menjadi sangat terkonsentrasi terutama ketika atlet
mengalami dehidrasi dan tingkat normal kafein dapat dengan mudah berubah menjadi tingkat yang
dilarang. Otoritas olahraga telah dihukum karena mengambil pandangan yang tidak ilmiah tentang
masalah dan interpretasinya.'-- Di sisi lain, sifat sampel urin sering kali dapat menyebabkan negatif
palsu. Lafolie'-'^ lebih memilih untuk menilai kemungkinan negatif palsu dengan mengacu pada konten
kreatinin daripada perbedaan warna dalam urin seperti yang disarankan oleh Simpson et al.
Urine memiliki kisaran nilai pH yang luas, sebagian besar didasarkan pada diet, atau pada pengobatan.
Antasida, misalnya, jika diserap, dapat menyebabkan urin menjadi basa: urin asam kuat lebih kecil
kemungkinannya, kisaran pH normal adalah 5,5 hingga 7. Ini berlaku untuk pH urin saat diekskresikan.
Sifat obat yang diekskresikan dapat bergantung pada pH saat ini. Obat basa lemah seperti amfetamin
lebih efisien diekskresikan dalam urin asam, sedangkan obat asam lemah lebih diekskresikan dalam urin
basa. Urine yang didiamkan secara perlahan akan kehilangan karbon dioksida dan menjadi lebih basa,
sehingga terjadi pengendapan fosfat anorganik. Selain perubahan pH, yang dapat menyebabkan
perubahan degradasi analit, analit dapat mengendap dengan fosfat ini dan hilang untuk analisis. Dengan
demikian, urin yang disimpan akan memiliki komposisi yang berbeda dari urin segar dan metodologi
analitik dan penilaian stabilitas obat dalam matriks ini harus memperhitungkan sifat-sifat kedua jenis.

Salah satu aspek urin yang mungkin diabaikan ketika digunakan dalam studi kuantitatif adalah metode
pengambilan sampel dan jumlah sampel. Apakah subjek menyediakan pengosongan kandung kemih
yang lengkap sehingga produksi total obat atau metabolit ke dalam urin selama periode tertentu dapat
dihitung? Subyek yang diminta “untuk memberikan sampel” dapat memberikan jumlah minimum dan
mungkin merupakan tangkapan pertama daripada sampel aliran tengah, yang dapat mewakili atau tidak.
Cone et al.'“^ mempelajari ini sehubungan dengan metabolit ganja dan menyimpulkan bahwa
konsentrasinya serupa untuk sampel yang dikumpulkan secara berurutan dari urin yang sama yang
dikeluarkan.

(Joseph Chamberlain, 1995)

Urine is an aqueous solution of byproducts of the body secreted by the kidneys. More than 95% of urine
is water and the rest is a complex mixture of inorganic salts and organic compounds. Some major
constituents in the order of decreasing concentrations are urea 9.3 g/l, chloride 1.9 g/l, sodium 1.2 g/l,
potassium 0.75 g/l and creatinine 0.67 g/l. In addition to these substances urine contains a range of
substances that vary with what is introduced into the body (food). The composition of urine therefore
varies between persons and during the day. The pH of urine is normally close to 7 but can vary between
4 and 8. A diet of citrus fruits and vegetables can increase urine pH and a diet of meat and cranberries
can decrease urine pH (more acidic). Drugs and chemicals can be taken to alter urinary pH. Intake of
sodium bicarbonate and potassium citrate makes urine pH more basic while intake of ammonium
chloride makes the urine more acidic. Urinary pH effects the excretion of a drug into urine. For example,
the excretion of an alkaline drug is greatly reduced in alkaline urine because the solubility is reduced.
Therefore the pH and the creatinine concentration are normally checked during standard urine drug
testing. High creatinine levels indicate a normal sample, whereas low amounts of creatinine in the urine
indicate a manipulated (diluted) sample, either through the addition of water in the sample or by
drinking excessive amounts of water.

Avariety of drugs are metabolized by conjugation with glucuronic acid or sulfate and are excreted into
urine as glucuronide and sulfate conjugates. These have a much higher water solubility that the parent
drugs. In urine drug-testing conjugates can be hydrolyzed to release the parent drug and increase their
concentration in the sample. For this purpose acid-base hydrolysis or enzymes that cleave the glycoside
bond of a glucuronide such as betaglucuronidase, are frequently used.

Normally, the concentrations of drugs and metabolites found in urine are higher than those found in
plasma or serum. Urine is therefore a preferred matrix for screening of compounds that are not
normally present such as doping agents, illicit drugs and poisons. In addition urine sample are easily
collected without intervention.

Urine adalah larutan encer dari produk sampingan tubuh yang disekresikan oleh ginjal. Lebih dari 95%
urin adalah air dan sisanya merupakan campuran kompleks dari garam anorganik dan senyawa organik.
Beberapa konstituen utama dalam urutan penurunan konsentrasi adalah urea 9,3 g/l, klorida 1,9 g/l,
natrium 1,2 g/l, kalium 0,75 g/l dan kreatinin 0,67 g/l. Selain zat-zat ini, urin mengandung berbagai zat
yang bervariasi dengan apa yang dimasukkan ke dalam tubuh (makanan). Oleh karena itu, komposisi
urin bervariasi antara orang dan pada siang hari. PH urin biasanya mendekati 7 tetapi dapat bervariasi
antara 4 dan 8. Diet buah jeruk dan sayuran dapat meningkatkan pH urin dan diet daging dan cranberry
dapat menurunkan pH urin (lebih asam). Obat-obatan dan bahan kimia dapat dikonsumsi untuk
mengubah pH urin. Asupan natrium bikarbonat dan kalium sitrat membuat pH urin lebih basa
sedangkan asupan amonium klorida membuat urin lebih asam. PH urin mempengaruhi ekskresi obat ke
dalam urin. Misalnya, ekskresi obat alkali sangat berkurang dalam urin alkali karena kelarutannya
berkurang. Oleh karena itu pH dan konsentrasi kreatinin biasanya diperiksa selama tes obat urin
standar. Kadar kreatinin yang tinggi menunjukkan sampel yang normal, sedangkan jumlah kreatinin yang
rendah dalam urin menunjukkan sampel yang dimanipulasi (diencerkan), baik melalui penambahan air
dalam sampel atau dengan meminum air dalam jumlah berlebihan.

Berbagai obat dimetabolisme oleh konjugasi dengan asam glukuronat atau sulfat dan diekskresikan ke
dalam urin sebagai konjugat glukuronida dan sulfat. Ini memiliki kelarutan air yang jauh lebih tinggi
daripada obat induknya. Dalam konjugat pengujian obat urin dapat dihidrolisis untuk melepaskan obat
induk dan meningkatkan konsentrasinya dalam sampel. Untuk tujuan ini hidrolisis asam-basa atau enzim
yang memotong ikatan glikosida dari glukuronida seperti betaglucuronidase, sering digunakan.

Biasanya, konsentrasi obat dan metabolit yang ditemukan dalam urin lebih tinggi daripada yang
ditemukan dalam plasma atau serum. Oleh karena itu, urin merupakan matriks yang lebih disukai untuk
menyaring senyawa yang biasanya tidak ada seperti zat doping, obat-obatan terlarang dan racun. Selain
itu sampel urin mudah dikumpulkan tanpa intervensi.

(Steen Honore´ Hansen et al., 2012)

Drug class-specific windows of detection are dependent on a number of factors. The detection time of a
drug in urine represents how long after administration of a drug a person continues to excrete that drug
and/or metabolite at a concentration above a specific test cutoff level. Although influenced by several
factors including dose, route of administration, metabolism, urine concentration and pH, the detection
time of most drugs or their metabolites in urine is usually 1–3 days.10,16 Chronic use of a lipid-soluble
drug such as marijuana may extend the window of detection to a week or more.16,18 Benzodiazepines
and their metabolites differ widely in their elimination halflives, which affects both their clinical effect,
excretion and detection.19 The window of detection for commonly tested drugs is presented in Table 1.

Jendela deteksi khusus kelas obat bergantung pada sejumlah faktor. Waktu deteksi obat dalam urin
menunjukkan berapa lama setelah pemberian obat seseorang terus mengekskresikan obat dan/atau
metabolit pada konsentrasi di atas batas uji tertentu. Meskipun dipengaruhi oleh beberapa faktor
termasuk dosis, cara pemberian, metabolisme, konsentrasi urin dan pH, waktu deteksi sebagian besar
obat atau metabolitnya dalam urin biasanya 1-3 hari.10,16 Penggunaan kronis obat larut lemak seperti
ganja dapat memperpanjang jendela deteksi hingga seminggu atau lebih.16,18 Benzodiazepin dan
metabolitnya sangat berbeda dalam waktu paruh eliminasinya, yang mempengaruhi efek klinis, ekskresi,
dan deteksinya.19 Jendela deteksi untuk obat yang umum diuji disajikan dalam Tabel 1.

(Neelima Kale, 2019)

Food and Drug Administration (FDA) AS telah menyetujui patch untuk pengumpulan keringat untuk
pengujian obat yang ditempatkan pada kulit selama 3-7 hari sebelum dikirim ke laboratorium untuk
interpretasi [8,9]. Di Eropa. penghapusan juga tersedia yang saat ini tidak disetujui FDA karena
kekhawatiran mengenai akurasinya [9,12]. Tes keringat memeriksa zat dan metabolitnya dalam aliran
darah pada jam-jam sebelum dan selama patch diterapkan [8,9]. Saat ini, pengujian keringat hanya
tersedia untuk SAMHSA-5. Tambalan yang mengerut atau menunjukkan bukti gangguan lain saat dilepas
telah dirancang untuk mengurangi gangguan [8].

Keringat adalah biofluid jernih dan hipotonik yang dihasilkan oleh kelenjar ekrin dan prokrin yang
terletak di epidermis. Biofluida yang sedikit asam ini (kisaran pH 4,0–6,8) terutama terdiri dari air (99%),
yang mengandung apa yang disebut elektrolit (misalnya natrium, klorida, dan kalium), urea, piruvat, dan
laktat; tetapi protein, peptida, amina, asam amino dan ion logam dalam konsentrasi yang lebih kecil juga
ditemukan dalam biofluida ini selain inhibitor, antigen, antibodi dan berbagai xenobiotik seperti obat-
obatan, kosmetik, dan etanol. Zat-zat ini disimpan di kelenjar keringat, disekresikan ke dalam keringat
dan akhirnya diangkut ke permukaan epidermis dengan reabsorpsi selektif parsial natrium dan klorida
selama transportasi, yang menghasilkan hipotonisitas keringat yang disekresikan pada individu yang
sehat [1]. Penyakit dapat mengubah komposisi keringat baik dengan mengubah konsentrasi komponen
umum atau melaporkan komponen baru yang, bagaimanapun, dapat bertindak sebagai biomarker
penyakit tertentu.