LAPORAN MAGANG

PERTUMBUHAN TUNAS IN VITRO DAN AKLIMATISASI SORGUM VAR.

SUPER 2 HASIL RADIASI SINAR GAMMA

Oleh:

Qurrota Aini

150510170187

Diajukan untuk menyelesaikan tugas Mata Kuliah Magang pada Program Studi
Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran

UNIVERSITAS PADJADJARAN

FAKULTAS PERTANIAN

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

Jalan Raya Bandung – Sumedang Km 21 Jatinangor 45363

Telp./Fax 022 – 779 6316 Website: www.faperta.unpad.ac.id

 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadirat Allah S.W.T. atas karunia-Nya, penulis dapat
melaksanakan program magang serta dapat menyelesaikan laporan magang yang
berjudul “Pertumbuhan Tunas In Vitro dan Aklimatisasi Sorgum Var. Super 2
Hasil Radiasi Sinar Gamma”. Penulisan laporan ini merupakan tugas dan prasyarat
untuk menyelesaikan program magang dari Fakultas Pertanian, Universitas Padjadjaran.

Laporan ini disusun berdasarkan kegiatan yang penulis laksanakan selama 02

Januari – 02 Maret 2020 di BB Biogen (Balai Besar Bioteknologi dan Genetika Pertanian),
Kelompok Peneliti Biologi Sel Jaringan. Program kegiatan magang ini memberikan
pengalaman dan pelajaran berharga bagi penulis baik dari segi akademik maupun non-
akademik yang tidak dapat penulis temukan di bangku perkuliahan, yang mana akan
berguna di kemudian hari.

Dalam penyelesaian kegiatan dan laporan magang ini, tidak sedikit hambatan dan
tantangan, maka penulis mengucapkan banyak terimakasih dan memohon maaf yang
setulus-tulusnya kepada banyak pihak yang telah memberikan masukan, dukungan, doa,
bantuan, serta motivasi yang begitu tinggi yang telah membantu dan melancarkan
kegiatan Magang, yakni:

1. Bapak Nono Carsono, S.P., M.Sc., Ph.D., selaku Ketua Program Studi Agroteknologi
Universitas Padjadjaran yang telah memfasilitasi mahasiswa dalam kegiatan
magang.
2. Ibu Santika Sari, S.P, M.P., selaku Dosen Pembimbing Magang atas bimbingan dan
arahannya kepada penulis,
3. Prof. Dr. Dra. Endang Gati Lestari, M.Si., selaku Pembimbing Lapangan Magang
yang telah mendukung, membimbing dan mengajari penulis selama berlangsungnya
magang,
4. Bapak Ir. Mastur, M.Si., Ph.D., selaku Kepala Balai Besar Bioteknologi dan Genetika
Pertanian beserta jajaran staff yang mengizinkan dan memfasilitasi penulis dalam
pelaksanaan magang,
5. Ibu Dr. Ika Rostika Tambunan, S.P., M.Si., selaku Ketua Kelompok Peneliti Biologi
Sel Jaringan,
6. Ibu Suci Rahayu, S.Si., MS., selaku Bagian Administratif Magang Kelti Biologi Sel
Jaringan, BB Biogen,

i
7. Bapak Wawan Sukmawan dan Bapak Anto, selaku teknisi laboratorium dan
lapangan BB Biogen, Kelti Biologi Sel dan Jaringan,
8. Kedua orang tua yang telah memberikan dukungan moril dan materiil selama
kegiatan magang.
9. Windi Safitri, Vias Aulia, Alwa, Izza Karina, Maya dan teman-teman magang yang
telah bekerja sama selama kegiatan magang berlangsung.
10. Mba Duma, Mba Dinar, Mba Puji, Mba Nur, Mas Wira dan kakak-kakak yang sedang
melakukan penelitian studi dan menyusun tugas akhir yang telah membimbing
penulis saat magang, dan banyak lagi yang belum bisa saya sebutkan satu per satu.

Akhir kata, penulis mengharapkan laporan magang ini dapat memberikan manfaat
bagi siapa saja yang membacanya. Terima kasih.

Bogor, 25 Februari 2020

Penyusun

ii
 DAFTAR ISI

hal
KATA PENGANTAR......................................................................................................i

DAFTAR ISI................................................................................................................iii

DAFTAR GAMBAR.........................................................................................................v

DAFTAR TABEL...........................................................................................................vi

DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................................vii

BAB I : PENDAHULUAN................................................................................................1

1.1 Latar Belakang ..............................................................................................1

1.2 Tujuan dan Manfaat Magang ..........................................................................3
1.3 Capaian Kegiatan Magang .............................................................................3
BAB II : ANALISIS SITUASI UMUM................................................................................3

2.1 Situasi dan Kondisi tempat Magang.................................................................4

2.1.1 Sejarah Singkat.......................................................................................4
2.1.2 Lokasi Geografis......................................................................................5
2.1.3 Status Kelembagaan dan Struktur Organisasi.............................................5
2.1.4 Sarana dan Prasarana..............................................................................7
2.2 Tugas Pokok dan Fungsi Tempat Magang........................................................8
2.2.1 Visi.........................................................................................................8
2.2.2 Misi.........................................................................................................8
2.2.3 Kebijakan Mutu........................................................................................8
2.2.4 Tugas Pokok dan Fungsi...........................................................................8
2.3 Peluang dan Tantangan yang Dihadapi............................................................9
2.4 Rencana Jadwal Kegiatan Magang.................................................................11
BAB III : PELAKSANAAN KEGIATAN MAGANG..............................................................12

3.1 Waktu Magang, Tempat Magang, dan Realisasi Kegiatan Magang ...................12
3.2 Kegiatan Magang yang Dilakukan..................................................................12
3.2.1 Sterilisasi Alat........................................................................................12
3.2.2 Pembuatan Media..................................................................................13
3.2.3 Membuat Bahan Komponen Steril...........................................................21
3.2.4 Menyiapkan Eksplan...............................................................................22

iii
 3.2.5 Penanaman Eksplan...............................................................................24
3.2.6 Aklimatisasi...........................................................................................25
3.2.7 Pengamatan dan Analisis Data...............................................................26

3.3 Hasil Kegiatan Magang..............................................................................27

3.3.1 Sterilisasi Sorgum Var. Numbu................................................................27
3.3.2 Pertumbuhan Tunas In Vitro Sorgum Var. Super 2 Hasil Radiasi Sinar
Gamma..............................................................................................................30
3.3.3 Aklimatisasi Sorgum Hasil Radiasi...........................................................36
BAB IV......................................................................................................................37

KESIMPULAN DAN SARAN..........................................................................................37

4.1 Kesimpulan .................................................................................................37

4.2 Saran..........................................................................................................37
DAFTAR PUSTAKA......................................................................................................39

iv
 DAFTAR GAMBAR
hal

Gambar 1. Peta lokasi BB Biogen..................................................................................5

Gambar 2. Status kelembagaan Badan Litbang Pertanian...............................................5

Gambar 3. Struktur Organisasi BB Biogen......................................................................7

Gambar 4. Tahap Sterilisasi Alat.................................................................................13

Gambar 5. Pembuatan Media dan Alat Laboratorium....................................................21

Gambar 6. Sterilisasi Bakar pada Eksplan Jeruk............................................................23

Gambar 7. Sterilisasi Eksplan Sorgum..........................................................................24

Gambar 8. Sub-Kultur Sorgum Radiasi.........................................................................25

Gambar 9. Aklimatisasi Sorgum...................................................................................26

Gambar 10. Jenis kontaminasi pada sorgum................................................................29

Gambar 11. Pertumbuhan Sorgum Perlakuan Taraf Radiasi Media B 0,1 pada 7 HST......35

Gambar 12. Pertumbuhan Sorgum Perlakuan Radiasi Media MS 0 pada 7 HST...............35

Gambar 13. Penampakan akar pada media BAP 0,1 (7 HST).........................................36

v
 DAFTAR TABEL
hal

Tabel 1. Sejarah singkat BB Biogen...............................................................................4

Tabel 2. Rencana Kegiatan Magang Pekanan...............................................................11

Tabel 3. Jenis dan Komposisi Media In vitro.................................................................17

Tabel 4. Perlakuan Sterilisasi Sorgum..........................................................................23

Tabel 5. Kontaminasi Botol Sorgum Var. Numbu Hasil Sterilisasi...................................27

Tabel 6. Kontaminasi Benih Sorgum Var. Numbu Hasil Sterilisasi...................................27

Tabel 7. Persentase Hidup Benih Sorgum Var. Super 2 pada 4 HST...............................31

Tabel 8. Rata-Rata Pertumbuhan Kecambah Mutan Sorgum Var. Super 2......................32

Tabel 9. Statistik ANOVA Rata-Rata Pertumbuhan Mutan Sorgum.................................33

Tabel 10. Jumlah Planlet Aklimatisasi dan Presentase kematian Planlet Hasil Kultur
Sorgum Super 2 Perlakuan Radiasi..............................................................................36

vi
 DAFTAR LAMPIRAN
hal

Lampiran 1 Lembar Pengesahan.................................................................................41

Lampiran 2 Logbook Magang......................................................................................42

Lampiran 3. Dokumentasi...........................................................................................48

vii
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Sorgum merupakan tanaman serealia yang berpotensi di Indonesia, karena

memiliki daya tahan terhadap kekeringan, toleran terhadap genangan air, adaptasi yang
luas, input rendah dan relatif tahan terhadap hama penyakit (Yu et al., 2008). Sorgum
dapat dimanfaatkan sebagai bahan pangan serta bahan baku industri pakan dan
pangan seperti industri gula, monosodium glutamat (MSG), asam amino, dan
industri minuman. Biji sorgum dapat dijadikan sebagai bahan baku industri
bioethanol karena mengandung 65−71% pati yang dapat dihidrolisis menjadi gula
sederhana. Biji sorgum dapat dibuat gula atau glukosa cair atau sirup fruktosa
sesuai dengan kandungan gula pada biji (Sumarno dan Karsono, 1996).
Bioethanol sorgum terbuat dari fermentasi gula yang terkandung dalam batang
dan biji sorgum menjadi alkohol. Kandungan brix sorgum lebih tinggi dari tebu,
yaitu sebesar 13,6-18,4%, sedangkan brix tebu sebesar 12-19% (Suryaningsih,
2014).

Varietas yang umum dikembangkan untuk produksi bahan baku bioethanol

salahsatunya sorgum varietas Super 2, yang merupakan hasil perbaikan galur 15021 dari
ICRISAT. Sorgum Super 2 memiliki keunggulan potensi hasil biji mencapai 6 t/ha dan
potensi kandungan nira lebih dari 17% skala brix serta tahan terhadap sejumlah hama
penyakit utama seperti aphids, antraknos, karat daun, dan hawar daun. Namun
kelemahan sorgum Super 2 adalah umur panen yang lama yaitu 115-120 hari (Balitsereal,
2012).

Sorgum ( Sorghum bicolor (L.) Moench) merupakan tanaman asli tropis

Ethiopia, Afrika Timur, dan dataran tinggi Ethiopia yang dianggap sebagai pusat
utama domestikasi sorgum (Vavilov, 1926). Varietas sorgum di Indonesia banyak
bersumber pada introduksi, sehingga keragaman karakter terbatas (Iriany, 2013).
Teknik mutasi dan kultur in vitro memberikan peluang untuk perbaikan genetik dan
pembentukan varietas baru untuk mendapatkan sifat baik seperti daya hasil biji serta
kandungan brik gula dan ketahanan terhadap penyakit (Pusat Penelitian Kimia LIPI,
2010; CV. Agro Darma Sekar Wangi, 2010; BATAN, 2010; Jain 2010; Lestari et al

1
2010; dan Soedjono 2003). Teknik mutasi dapat mempercepat dihasilkannya varietas
baru dengan berbagai sifat atau karakter yang diinginkan (Soeranto 2003).

Kultur in vitro memungkinkan teknik mutasi menjadi lebih berkembang, karena

lebih cepat diperoleh hasil dan menguntungkan serta dapat memperkaya plasma nutfah
yang ada sekaligus untuk perbaikan varietas (Kharkwal et al. 2004). Kombinasi antara
mutasi dan kultur in vitro dapat mempercepat hasil yang diperoleh karena melalui kultur
in vitro, eksplan yang diberi mutagen jumlahnya tidak terbatas dan dapat menggunakan
materi dengan ukuran kecil seperti kalus, suspensi sel, protoplas atau tunas pucuk
sehingga mutagen yang diberikan langsung mengenai bagian inti yang mengandung DNA
(Suprasanna dan Nakagawa, 2012).

Dalam melakukan keterampilan perakitan dan perbaikan tanaman,

dibutuhkan aspek keahlian dasar profesional yang didapatkan dari pemahaman
teori dan keahlian praktik lapangan. Hal ini merupakan bentuk persiapan diri
menghadapi dunia kerja sesungguhnya. Melalui magang inilah mahasiswa
difasilitasi kegiatan bekerja secara langsung di dunia kerja. Selain itu mahasiswa
juga diharapkan dapat meningkatkan soft-skill dalam menganalisa masalah,
berkomunikasi dan membangun relasi yang baik antara mahasiswa dan ahli di
dunia kerja.

Salahsatu keterampilan dasar yang perlu dikuasai adalah kultur in vitro .

Kultur in vitro merupakan kompetensi dasar di bidang pertanian saat ini dan di
masa yang akan datang. Kultur in vitro menunjang kemajuan aplikasi teknologi terbaru
dalam pengembangan dunia pertanian sehingga hasil pertanian yang didapatkan optimal
dan memuaskan. Begitu pula dalam pemuliaan tanaman yang juga berkaitan erat
dengan pertanian dan pengembangan teknologi, kultur in vitro sangatlah
berperan penting. Dalam metode pemuliaan tanaman, kultur in vitro seringkali
dijadikan alternatif daripada metode konvensional. Kultur in vitro memungkinkan
pengembangan genetik tanaman pertanian yang lebih cepat, efisien dan efektif
dengan hasil optimum, terlebih kini pertumbuhan penduduk yang semakin cepat
menuntut kebutuhan pertanian cepat berkembang.

Untuk menunjang pembelajaran lapangan terhadap kompetensi kultur in

vitro, maka kegiatan magang ini dilaksanakan di Laboratorium Biologi Sel dan
Jaringan, BB Biogen (Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan
Genetika Pertanian). BB Biogen dipilih sebagai lokasi magang karena BB Biogen
merupakan salah satu instansi pemerintah dalam bidang penelitian dan

2
pengembangan pertanian, Kementrian Pertanian Republik Indonesia. BB Biogen
juga dinilai memiliki fasilitas yang memadai sehingga menunjang tercapainya
tujuan magang. Adapun pemilihan Laboratorium Biologi Sel dan Jaringan karena
kultur in vitro merupakan salah satu keahlian dasar yang sangat diperlukan dan
menunjang dalam pemuliaan tanaman. Pembelajaran terhadap kompetensi dasar
kultur in vitro di BB Biogen dilakukan melalui pengembangan komoditas sorgum.

1.2 Tujuan dan Manfaat Magang

Tujuan magang mahasiswa di Laboratorium Biologi Sel dan Jaringan, BB

Biogen, yaitu:

 Mengetahui, memahami, mampu serta terampil dalam melakukan kultur in

vitro sesuai dengan standar operasional prosedur,
 Mampu melaksanakan pengamatan, pengambilan data hingga menganalisa
hasil dengan benar,
 Memperoleh pengalaman bekerja dan suasana kerja yang sebenarnya
 Mendapatkan kesempatan untuk meningkatkan soft-skills dalam berkomunikasi
secara formal dalam dunia kerja, serta membangun jaringan dengan para peneliti

1.3 Capaian Kegiatan Magang

Capaian magang mahasiswa di Laboratorium Biologi Sel dan Jaringan, BB

Biogen yaitu:

 Mengetahui pengaruh perlakuan ZPT (Zat Pengatur Tumbuh) tanaman terhadap

perkembangan tanaman in vitro, baik secara embriogenesis maupun
organogenesis,
 Mengetahui pengaruh mutasi terhadap pertumbuhan sorgum,
 Memahami serta terampil dalam kultur in vitro,
 Memahami prinsip aklimatisasi, utamanya pada sorgum .

BAB II

ANALISIS SITUASI UMUM

3
2.1 Situasi dan Kondisi tempat Magang

BB Biogen (Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumber

Daya Genetik Pertanian) adalah unit pelaksanan teknis eselon IIB di bawah Balitbangtan
(Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian), Kementerian Pertanian. Berdasarkan
struktur fungsional BB Biogen sebagai Lembaga penelitian memiliki empat kelompok
peneliti (kelti) yakni Kelti Pengelolaan Sumber Daya Genetik, Kelti Biologi Molekuler, Kelti
Biologi Sel dan Jaringan, dan Kelti Biokimia. Kelti Biologi Sel dan Jaringan (BSJ) memiliki
tugas melakukan penelitian kultur sel dan jaringan dengan tujuan perbanyakan dan
perbbanaikan tanaman, produksi metabolit sekunder dan konservasi tanaman secara in
vitro.
BB-Biogen menurut data September 2019, memiliki sumber daya manusia (SDM)
sebanyak 160 orang (termasuk 2 orang CPNS), terdiri atas 71 orang peneliti (termasuk 2
orang Calon Peneliti), 23 orang Litkayasa (termasuk 1 orang Calon Litkayasa), 1 orang
arsiparis, 1 orang analisis kepegawaian, 1 orang calon Pranata Humas Pertama, 11 orang
struktural serta 52 orang tenaga Fungsional Umum. Berdasarkan jenjang fungsionalnya,
tenaga peneliti BB Biogen terdiri atas Peneliti Utama 9 orang, Peneliti Madya 27 orang,
Peneliti Muda 18 orang dan Peneliti Pertama 17 orang.

2.1.1 Sejarah Singkat

Pada tahun 1918 Algemeen Proefstation voor den Landbouw (Balai Besar
Penyelidikan Pertanian) didirikan dan mengalami tujuh kali perubahan dan reorganisasi
hingga didirikannya Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumber
Daya Genetik Pertanian (BB Biogen) 30 Desember 2003.

Tabel 1. Sejarah singkat BB Biogen

Algemeen Proefstation voor den Landbouw (Balai
Tahun 1918 – 1949
Besar Penyelidikan Pertanian)

Tahun 1949 – 1952 Jawatan Penyelidikan Pertanian

Algemeen Proefstation voor den Landbouw (Balai

Tahun 1952 – 1966 Besar Penyelidikan Pertanian / General Agriculture
Experiment Station)

Tahun 1966 – 1980 Lembaga Pusat Penelitian Pertanian

Tahun 1980 – 1994 Balai Penelitian Tanaman Bogor (Balittan)

Tahun 1994 – 2002 Balai Penelitian Bioteknologi Tanaman Pangan

4
 (Balitbio)

Balai Penelitian Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik

Tahun 2002 – 2003
Pertanian (Balitbiogen)

Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi

Tahun 2003 – sekarang
dan Sumberdaya Genetik Pertanian (BB Biogen)

2.1.2 Lokasi Geografis

Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik

Pertanian (BB Biogen) terletak di Kampus Penelitian Pertanian Cimanggu, Bogor atau di
Jalan Tentara Pelajar 3A, Kedung Jaya, Kec. Tanah Sereal, Kota Bogor, Jawa Barat, 1611.
Secara administrasi pemerintahan, BB Biogen terletak di Kelurahan Menteng, Kecamatan
Bogor Barat, Kota Bogor, 1611. Sedangkan secara geografis kota bogor terletak di 106'
48' BT dan 6' 26' LS.

Sumber: https://goo.gl/maps/nsPi7qzMRhyPXbRF8
Gambar 1. Peta lokasi BB Biogen
2.1.3 Status Kelembagaan dan Struktur Organisasi

BB Biogen menurut status kelembagaan badan Litbang Pertanian berdasarkan

Surat Menteri Pertanian No.199/TU.210/M/9/2009 tanggal 9 September 2009.

Sumber: http://www.litbang.pertanian.go.id/profil/organisasi
Gambar 2. Status kelembagaan Badan Litbang Pertanian

5
 Keterangan:

PUSLITBANGTAN : Pusat Penelitian dan Pengembangan Tanaman Pangan

PUSLITBANGHORTI : Pusat Penelitian dan Pengembangan Hortikultura
PUSLITBANGBUN : Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan
PUSLITBANGNAK : Pusat Penelitian dan Pengembangan Peternakan
BB PASCAPANEN : Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Pascapanen
Pertanian
BB BIOGEN : Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan
Sumberdaya Genetik Pertanian
BBP Mektan : Balai Besar Pengembangan Mekanisasi Pertanian
BB SDLP : Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Sumberdaya Lahan
Pertanian
BB PENGKAJIAN : Balai Besar Pengkajian dan Pengembangan Teknologi
Pertanian
BB PADI : Balai Besar Penelitian Tanaman Padi
BB LITVET : Balai Besar Penelitian Veteriner
BALITKABI : Balai Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi
BALITSEREAL : Balai Penelitian Tanaman Serealia
BALITSA : Balai Penelitian Tanaman Sayuran
BALITBU TROPIKA : Balai Penelitian Tanaman Buah Tropika
BALITHI : Balai Penelitian Tanaman Hias
BALITJESTRO : Balai Penelitian Jeruk dan Buah Subtropika
BALITTRO Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat
BALITTAS : Balai Penelitian Tanaman Tembakau dan Serat
BALIT Palma : Balai Penelitian Tanaman Palma
BALITTRI : Balai Penelitian Tanaman Industri dan Penyegar
BALITNAK : Balai Penelitian Ternak
BALITTRA : Balai Penelitian Pertanian Lahan Rawa
BALITTANAH : Balai Penelitian Tanah
BALITKLIMAT : Balai Penelitian Agroklimat dan Hidrologi
BALINGTAN : Balai Penelitian Lingkungan Pertanian
BALAI PATP : Balai Pengkajian Alih Teknologi Pertanian
BPTP : Balai Pengkajian Teknologi Pertanian

6
 LOLITTUNGRO : Loka Penelitian Penyakit Tungro
LOLITSAPI : Loka Penelitian Sapi Potong
LOLITKAMBING : Loka Penelitian Kambing Potong
Struktur organisasi BB Biogen berdasarkan SK Menteri Pertanian
No.631/Kpts/OT.140/12/2003 Tentang Organisasi dan Tata Kerja Balai Besar Penelitian
dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian.

Sumber: http://biogen.litbang.pertanian.go.id/struktur-organisasi/
Gambar 3. Struktur Organisasi BB Biogen
2.1.4 Sarana dan Prasarana

BB Biogen memiliki Fasilitas Uji Terbatas (FUT), Laboratorium Kimia/ Biokimia,

Laboratorium Biologi Molekuler, Laboratorium Biologi Sel dan Jaringan, Laboratorium
Mutu Benih, Laboratorium Konservasi In-vitro, Laboratorium Mikrobiologi, perpustakaan,
4 Kebun Percobaan (KP): Cikeumeuh, Citayam, Cimanggu dan Pacet, Rumah Kaca, Bank
Gen, Unit Pengelola Benih Sumber (UPBS), dan Pusat Genom Pertanian Indonesia (PGPI).

Fasilitas yang dimiliki Laboratorium Biologi Sel dan Jaringan, yaitu: Laminar air
flow (import), Laminar air flow (lokal), Autoclave, Oven, pH meter, Inverted microscope,
Stereo microskope with digital camera, Timbangan analitik (4 digit), Timbangan analitik
(3 digit), Distiling unit, Orbital shaker, Hot plate magnetic stirrer , Growth chamber, Rak
kultur, dan Sentrifuse.

7
2.2 Tugas Pokok dan Fungsi Tempat Magang

2.2.1 Visi

Menjadi lembaga litbang berkelas dunia dalam mengembangkan sumberdaya lokal

Indonesia berbasis bioteknologi.

2.2.2 Misi

Misi BB Biogen adalah:

1. Memperkuat kapasitas sumberdaya institusi dalam bidang pemanfaatan

sumberdaya genetik lokal berbasis bioteknologi,
2. Menghasilkan dan mendiseminasikan teknologi dan rekomendasi bioteknologi dan
pengelolaan sumberdaya genetik,
3. Melakukan analisis kebijakan dan rekomendasi tentang pengembangan dan
penerapan bioteknologi modern dan pengelolaan sumberdaya genetik,
4. Mengembangkan jejaring kerjasama dalam rangka pengembangan ipteks dan
pengembangan peran BB Biogen dalam pembangunan pertanian

2.2.3 Kebijakan Mutu

Untuk mendukung visi dan misinya telah ditetapkan kebijakan mutu BB Biogen,
sebagai berikut:

1. Menjadi pusat penelitian bioteknologi dan SDG pertanian yang unggul dan mampu
menumbuhkembangkan teknologi keilmuan profesionalisme dan kesejahteraan
masyarakat secara luas.
2. Berkomitmen tinggi untuk senantiasa melakukan perbaikan terus menerus dalam
memberikan dan meningkatkan kepuasan stakeholder melalui hasil penelitian dan
setiap aspek terkaitnya.
3. Berkontribusi untuk menerapkan sistem manajemen mutu secara efektif dan
berupaya memenuhi kebutuhan dan kepuasan pelanggan yang relevan.

2.2.4 Tugas Pokok dan Fungsi

Berdasarkan SK Menteri Pertanian No.631/Kpts/OT.140/12/2003, BB-Biogen

mempunyai tugas melaksanakan penelitian dan pengembangan bioteknologi dan
sumberdaya genetik pertanian. Dalam melaksanakan tugas, BB-Biogen
menyelenggarakan fungsi, yaitu:

1. Penyusunan program dan evaluasi penelitian dan pengembangan bioteknologi dan

sumberdaya genetik pertanian;

8
 2. Pelaksanaan penelitian konservasi dan karakterisasi yang meliputi fisik, kimia,
biokimia, metabolisme biologis dan biomolekuler sumberdaya genetik pertanian;
3. Pelaksanaan penelitian bioteknologi sel, bioteknologi jaringan, rekayasa genetik,
dan bioprospeksi sumberdaya genetik ;
4. Pelaksanaan penelitian keamanan hayati dan keamanan pangan produk
bioteknologi;
5. Pelaksanaan pengembangan sistem informasi hasil penelitian  dan pengembangan
bioteknologi dan sumberdaya genetik pertanian;
6. Pelaksanaan pengembangan  komponen teknologi sistem dan usaha agribisnis
produk bioteknologi pertanian;
7. Pelaksanaan kerjasama dan pendayagunaan hasil penelitian bioteknologi dan
sumberdaya genetik pertanian;
8. Pengelolaan tata usaha dan rumah tangga BB Biogen.

2.3 Peluang dan Tantangan yang Dihadapi

Berdasarkan Renstra BB Biogen 2015-2019 (revisi III), tantangan dan

peluang dapat datang dari isu global dan isu nasional. Berikut tantangan dan
peluang yang berasal dari isu global yang dihadapi, yaitu:
1. Prediksi jumlah penduduk dunia yang akan terus naik, menuntut ekspansi
ketersediaan pangan sebesar 60-100%;
2. Perubahan iklim global dan ketidakseimbangan lingkungan berpotensi
meningkatkan terjadinya cekaman biotik (ledakan hama atau penyakit) dan
abiotik (kekeringan, banjir/rendaman, salinitas, suhu tinggi) sehingga
menurunkan produktivitas;
3. Kompetisi pemanfaatan komoditas pertanian untuk pemenuhan kebutuhan
pangan, pakan, dan bahan bakar;
4. Industri bioteknologi pertanian mulai bergantung pada data sekuen DNA,
namun masih sedikit negara yang memiliki keterampilan untuk
menghasilkan, mengakses, menginterpretasi dan memanfaatkannya untuk
program perakitan varietas unggul di negaranya;
5. Komponen-komponen dalam industri bioteknologi pertanian, seperti
tanaman transgenik, gen, promoter, terminator, plasmid, teknologi
transformasi telah banyak dipatenkan, sehingga membatasi akses
pemanfaatannya;

9
6. Fenomena double-burden malnutrition sehingga perlu diantisipasi dengan
program diversifikasi pangan yang lebih masif; dan
7. Kemunculan teknologi-teknologi baru dalam industri bioteknologi pertanian
sehingga menuntut negara-negara yang sedang berkembang untuk
mengejar ketertinggalan dalam penguasaan teknologi baru tersebut dan
menyiapkan regulasi untuk melindungi hak atas kekayaan sumber daya
genetik yang dimiliki.

Sedangkan tantangan berdasarkan isu nasional, yaitu:

1. Laju pertumbuhan penduduk Indonesia yang masih tinggi (periode 2010–

2015 = 1.38% per tahun) sedangkan ketergantungan konsumsi beras dalam
pola konsumsi pangan masih tinggi (kebutuhan beras 114 kg/kapita/tahun);
2. Tekanan pasar global dan ketergantungan impor pangan khususnya kedelai,
gula, daging sapi, susu, dan produk hortikultura dikarenakan produksi
nasional belum mencukupi;
3. Konversi lahan pertanian masih tinggi dan tidak terkendali (sekitar 65 ribu
ha/tahun);
4. Sektor pertanian paling terdampak oleh perubahan iklim, kompetisi
pemanfaatan air, dan degradasi sumber daya air;
5. Sistem pengelolaan dan pemanfaatan SDGP belum optimal dan terintegrasi;
6. Permintaan pasar domestik dan internasional terhadap produk pertanian
unggul (kompetitif dalam harga, kuantitas, dan kualitas serta suplai yang
kontinyu) dan ramah lingkungan terus meningkat;
7. Harga sarana produksi pertanian meningkat dan berfluktuasi karena
bergantung pada bahan baku impor;
8. Ketersediaan energi berbasis fosil semakin menipis, sedangkan teknologi
dan ketersediaan bahan bakar/energi baru dan terbarukan masih terbatas;
9. Kondisi pasar produk pertanian yang tidak menentu (stabilitas harga dan
permintaan konsumen) dan terbatasnya akses modal serta minimnya
jaminan asuransi kegiatan pertanian;
10. Jumlah tenaga kerja usia produktif yang berminat di bidang pertanian
semakin berkurang karena urbanisasi dan industrialisasi;
11. Meningkatnya kesadaran konsumen terhadap kualitas pangan yang sehat
dan aman untuk dikonsumsi;
12. Belum optimalnya pelaksanaan program diversifikasi pangan nasional

10
 13. Masih rendahnya insentif dan jaminan usaha tani; dan
14. Kebijakan swasembada pangan masih belum didukung dengan komponen
teknologi yang memadai.

Dari isu-isu diatas merupakan tantangan sekaligus peluang yang nantinya

diwujudkan melalui program dan capaian rencana kerja yang telah diatur
sehingga indikator dan standar keberhasilan BB Biogen jelas dan terukur.

2.4 Rencana Jadwal Kegiatan Magang

Tabel 2. Rencana Kegiatan Magang Pekanan

Januari Februari Maret
No. Kegiatan
1 2 3 4 5 1 2 3 4 1

1. Pengenalan dan arahan magang

Sterilisasi alat dan pembuatan

2.
media

Persiapan dan sterilisasi eskplan

3.
(bahan tanaman) kultur

4. Radiasi eksplan sorgum

5. Subkuktur eksplan

6. Aklimatisasi planlet sorgum

7. Pengamatan

8. Membuat logbook magang

Mengerjakan laporan magang

9.
dan mengurus berkas magang

11
 BAB III

PELAKSANAAN KEGIATAN MAGANG

3.1 Waktu Magang, Tempat Magang, dan Realisasi Kegiatan Magang

Kegiatan magang dilaksanakan pada tanggal 02 Januari – 02 Maret 2020 di Balai

Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian,
Laboratorium Biologi Sel dan Jaringan yang bertempat di Kampus Penelitian Pertanian
Cimanggu, Bogor atau di Jalan Tentara Pelajar 3A, Kedung Jaya, Kec. Tanah Sereal, Kota
Bogor, Jawa Barat, 1611. Kegiatan magang dilaksanakan sesuai ketentuan hari dan jam
kerja BB Biogen, yaitu setiap Senin-Kamis pukul 07.30-16.00 WIB, dengan jam istirahat
pukul 12.00-13.00 WIB dan Jum’at pukul 07.30-16.30 WIB, dengan jam istirahat pukul
11.30-13.00 WIB. Realisasi kegiatan magang dibuktikan dengan surat keterangan selesai
magang pada lampiran 1, catatan kegiatan magang harian yang ditulis dalam logbook
yang dilengkapi dengan gambar pada lampiran 2, dan dokumentasi pendukung kegiatan
magang yang dilampirkan pada lampiran 3.

3.2 Kegiatan Magang yang Dilakukan

3.2.1 Sterilisasi Alat

Dalam kultur in vitro alat-alat yang digunakan terbuat dari logam, gelas,
aluminium foil, plastik dan karet. Alat-alat yang akan digunakan untuk kultur perlu
disterilisasi sebelum digunakan, seperti alat diseksi (pisau scapel, pinset, gunting dll),
Laminar Air Flow (LAF), botol kaca, gelas erlenmeyer, botol kultur, cawan petri dll.

Berdasarkan standar operasional prosedur di Laboratorium Biologi Sel dan

Jaringan, sterilisasi dilakukan bertahap. Alat-alat logam dan gelas dicuci terlebih dahulu
menggunakan sabun dan dibilas dengan air mengalir, namun untuk botol media bekas
kultur dan kontaminasi perlu dilakukan autoclave dengan tujuan mematikan kontaminan,
setelah dicuci kemudian dikeringkan dan disterilkan dengan metode dry heat sterilization
menggunakan oven dengan suhu 150°C selama +- 2 jam. Mekanisme kerja Dry heat
adalah dengan dengan proses oksidasi (al-Mohanna, 2016), sehingga dapat
menghancurkan endotoksin bakteri (atau pirogen) yang sulit dihilangkan (Sultana, 2007).

12
 Alat- alat yang umumnya digunakan didalam LAF seperti pinset, scapel, dan petri
disterilkan dengan dry heat method menggunakan oven secara terpisah pada suhu 150°C
dan dengan pembakaran di atas api Bunsen dalam LAF sebelum pemakaian.

a) b) c) d)

Gambar 4. Tahap Sterilisasi Alat : a) Autoclaving botol dan media yang terkontaminasi; b)
Mencuci botol; c) Mengoven botol dengan metode sterilisasi panas kering; d) Mengoven
alat kultur (petri, scapel, spatula, pinset, dll).
3.2.2 Pembuatan Media

Eksplan (berupa sel, jaringan atau irisan organ) yang ditumbuhkan secara in vitro
pada media buatan, juga membutuhkan hara untuk terjadinya morfogenesis dan
pertumbuhan (Dwiyani, 2015), sehingga media merupakan salah satu faktor penentu
keberhasilan dalam kultur in vitro (Lestari, 2008). Pemilihan media pun harus
dipertimbangkan karena setiap nutrisi untuk mencapai tingkat pertumbuhan maksimum
bervariasi di antara spesies.

Media kultur umumnya harus mengandung beberapa komponen, yaitu:

makronutrien, mikronutrien, vitamin, asam amino atau tambahan nitrogen, sumber
karbon, suplemen organik, zat pengatur tumbuh dan zat pemadat (Saad & Elshashed,
2012).

 Hara Makro dan Mikro

Menurut Asosiasi Internasional untuk Fisiologi Tumbuhan, makronutrien memiliki

konsentrasi >0,5 mM/l dan mikronutrien memiliki konsentrasi 0,5 mM/l. Hara makro
antara lain ialah karbon (C), hidrogen (H), oksigen (O), nitrogen (N), fosfor (P), kalium
(K), kalsium (Ca), magnesium (Mg) dan belerang (S). Sedangkan hara mikro esensial
berfungsi yaitu: besi (Fe), mangan (Mn), seng (Zn), boron (B), tembaga (Cu) dan
molibdenum (Mo). Selain itu Cobalt (Co) dan iodine (I) dapat ditambahkan dengan syarat
untuk pertumbuhan sel belum ditentukan secara tepat. Sodium (Na) dan klorin (Cl) juga
digunakan meski ada laporan bahwa mereka tidak penting untuk pertumbuhan (R.,
1976).

 Karbon dan Sumber Energi

13
 Tanaman kultur bersifat heterotrof, tidak dapat melakukan fotosintesis. Sehingga
tanaman kultur melakukan respirasi untuk menghasilkan energi yang digunakan untuk
pembelahan sel tanaman. Dengan demikian karbon dan sumber energi perlu
ditambahkan pada media kultur sebagai sumber energi.

Umumnya karbon dan sumber energi yang sering digunakan adalah sukrosa/gula.
Namun, selain sukrosa, pada konsentrasi 2-5%, karbohidrat lain juga digunakan, seperti
laktosa, galaktosa, maltosa dan pati meski kurang efektif dibanding sukrosa atau glukosa
karena digunakan pada fase awal sel, kemudian diikuti fruktosa.

Sukrosa yang telah di autoclave lebih efektif daripada di sterilkan, karena sukrosa
terhidrolisis menjadi gula yang dapat dimanfaatkan lebih efisien seperti fruktosa. Sukrosa
dapat memicu morfogenetik dalam pembentukan tunas tambahan dan percabangan akar
adventif (D.BS, 2012). Sukrosa yang digunakan umumnya sebanyak 2-3% atau 20-30 g/l
(Dwiyani, 2015).

 Vitamin

Vitamin berfungsi sebagai katalisator dalam proses metabolisme, faktor pembatas

pertumbuhan dan diferensiasi sel ketika sel dan jaringan tanaman ditanam in vitro.
Beberapa tanaman dapat mensintesis sendiri vitamin untuk kebutuhan pertumbuhannya.

Vitamin yang paling banyak digunakan dalam media kultur sel dan jaringan
meliputi: tiamin (B1) 0,1- 10 mg/l, asam nikotinat 0,1-5 mg/l, dan piridoksin (B6) 0,1-10
mg/l. Selain itu vitamin seperti biotin, asam folat, asam askorbat, asam pantotenat,
tokoferol (vitamin E), riboflavin, asam p-amino-benzoat juga dapat ditambahkan ke media
kultur. Penambahan vitamin lain disarankan hanya ketika konsentrasi thiamin di bawah
tingkat yang diinginkan atau ketika sel-sel diharuskan untuk ditanam pada kepadatan
populasi yang rendah.

Myo-inositol umumnya digunakan dalam konsentrasi 50-5000 mg/l yang berperan

dalam merangsang pertumbuhan sel sebagian besar spesies tanaman, pembelahan sel
terjadi karena myo-inositol dipecah menjadi asam askorbat dan pektin dan digabung
didalam fosfoinositida dan fosfatidil-inositol.

 Asam Amino

Penambahan asam amino tertentu atau campuran asam amino sangat penting
untuk membangun kultur sel dan protoplas, meskipun sebagian besar tanaman dapat

14
mensintesis sendiri kebutuhan asam amino. Asam amino merupakan sumber nitrogen
yang mudah diasimilasi oleh jaringan dan sel lebih cepat dari sumber nitrogen anorganik.

Campuran asam amino organik yang sering ditambahkan pada media kultur
seperti kasein hidrolisat 0,25-1 g/l, L-glutamin 1-8 mM, L-asparagin 100mg/l, glisin 2 mg/l
dan adenin, glutamin hingga 8 mM, asparagin pada, L-arginin dan sistein 10 mg/l dan L-
tirosin pada 100mg/l.

 Suplemen Organik

Beberapa media dilengkapi dengan bahan alami atau ekstrak seperti protein
hidrolisat, santan, ekstrak ragi, ekstrak malt, pisang, jus jeruk dan jus tomat, arang aktif.
Penambahan bahan organik mungkin memiliki efek menguntungkan atau merusak. Arang
aktif didasarkan pada adsorpsi senyawa penghambat dari medium, adsorpsi zat pengatur
tumbuh dari media kultur atau penggelapan medium dan meningkatkan hidrolisis sukrosa
selama autoklaf yang menyebabkan pengasaman media kultur.

 Zat Pemadat

Kepadatan media kultur sangat mempengaruhi pertumbuhan jaringan,

penyerapan nutrisi dan perkecambahan tanaman. Sebaiknya media dibuat tidak terlalu
padat. Polisakarida zat pemadat diperoleh dari rumput laut dengan keunggulan dapat
dicampur dengan air, mudah meleleh dalam kisaran suhu 60-100°C dan membeku pada
sekitar 45°C, membentuk gel yang stabil pada semua suhu inkubasi yang layak, tidak
bereaksi dengan konstituen media dan tidak dicerna oleh enzim tanaman.

Zat pemadat yang digunakan umumnya berupa agar, agarose dan gellan gum.
Gellan gum dijual dengan nama dagang Gellrite, Phytagel, Gelzan dan Kelcogel.
Penggunaan sediaan agar murni sangat penting terutama dalam percobaan yang
berhubungan dengan metabolisme jaringan. Kontaminan agar dapat berupa Ca, Mg, Ba,
Si, Cl, SO4-, N, Fe, Cu.

 ZPT (Zat Pengatur Tumbuh)

Zat pengatur tumbuh tanaman diklasifikasikan ke dalam; auksin, sitokinin,

giberelin, dan asam absisat. Setiap jenis dalam kelompok ZPT akan berbeda dalam
aktivitas fisiologisnya, translokasi melalui jaringan, metabolism dan efektifitas
pertumbuhan dan perkembangan jaringan. Konsentrasi dan proporsi setiap ZPT
menentukan jenis dan tingkat organogenesis dalam kultur sel tanaman. Rasio auksin
yang lebih tinggi dari sitokinin akan menstimulasi terbentuknya akar, sedangkan rasio

15
sitokinin yang lebih tinggi dari auksin akan menginduksi terbentuknya tunas. Jika auksin
dan sitokinin pada konsentrasi yang sama (rasio 1) maka akan terbentuk kalus. Untuk
pembentukan kalus juga dapat digunakan 2,4-D (Dwiyani, 2015).

Auksin biasanya digunakan untuk merangsang produksi kalus dan pertumbuhan

sel, untuk memulai tunas dan rooting, untuk menginduksi embriogenesis somatik, untuk
merangsang pertumbuhan dari apeks pucuk dan kultur batang pucuk. Auksin yang umum
digunakan dalam media kultur jaringan tanaman meliputi: indole-3-acetic acid (IAA),
indole-3-butricacide (IBA), 2,4-dichlorophenoxy-acetic acid (2,4-D) dan asam
naphthalene-acetic (NAA). Auksin sintetis lain yang digunakan dalam media kultur seperti
asam asetat 4-klorofenoksi atau asam p-kloro-fenoksi asetat (4-CPA, pCPA), 2,4,5-
trichloro-asam fenoksi asetat (2,4,5 T), asam 3,6-dikloro-2-metoksi-benzoat (dicamba)
dan asam 4-amino-3,5,6-trikloro-pikolinat (pikloram). IAA adalah satu-satunya auksin
alami yang terjadi dalam jaringan tanaman. Auksin dapat disimpan pada suhu 4°C.
Umumnya IAA dan 2,4-D dilarutkan dalam volume kecil etil alkohol 95%. NAA, 2,4-D dan
IAA dapat dilarutkan dalam jumlah kecil 1N NaOH.

Sitokinin terbukti merangsang pembelahan sel, menginduksi pembentukan tunas

dan proliferasi tunas aksila, dan menghambat pembentukan akar. Sitokinin adalah
senyawa yang relatif stabil dalam media kultur dan dapat disimpan kering pada suhu -
20°C. Sitokinin yang biasa digunakan dalam media kultur termasuk BAP (6-
benzyloaminopurine), 2iP (6-dimethylaminopurine), kinetin (N-2-furanylmethyl-1H-purine-
6-amine), Zeatin (6-4-hydroxy-3-methyl-trans-2-butenylaminopurine) dan TDZ (thiazuron-
N-phenyl-N-1,2,3 thiadiazol-5ylurea). Senyawa ini meningkatkan pertumbuhan kalus dan
membantu perpanjangan planlet kerdil. Pelarutan sitokinin umumnya dapat dibantu oleh
penambahan beberapa tetes 1NHCl, 1N NaOH atau dimetilsulfoksida (DMSO).

Gibberelin terdiri lebih dari dua puluh senyawa, dimana GA3 adalah giberelin yang
paling sering digunakan. Regulator pertumbuhan lainnya kadang-kadang ditambahkan ke
media kultur jaringan tanaman sebagai asam absisat, suatu senyawa yang biasanya
ditambahkan untuk menghambat atau merangsang pertumbuhan kalus, tergantung pada
spesiesnya.

Terdapat beberapa jenis media kultur in vitro, dengan jenis, konsentrasi dan rasio
setiap komponennya berbeda-beda, sehingga pemilihan media menjadi penting sesuai
dengan tanaman dan tujuan yang akan dicapai. Berikut beberapa jenis media dasar kultur
in vitro.

16
Tabel 3. Jenis dan Komposisi Media In vitro
Medium MS G5 W LM VW Km M NN
Components
(mg/l)

Makronutrien / Hara Makro

Ca3(PO4)2 - - - - 200.0 - - -

NH4NO3 1650.0 - - 400.0 - - - 720.0

KNO3 1900.0 2500.0 80.0 - 525.0 180.0 180.0 950.0

CaCl2.2H2O 440.0 150.0 - 96.0 - - - 166.0

MgSO4.7H2O 370.0 250.0 720.0 370.0 250.0 250.0 250.0 185.0

KH2PO4 170.0 - - 170.0 250.0 150.0 150.0 68.0

(NH4)2SO4 - 134.0 - - 500.0 100.0 100.0 -

NaH2PO4.H2O - 150.0 16.5 - - - - -

CaNO3.4H2O - - 300.0 556.0 - 200.0 200.0 -

Na2SO4 - - 200.0 - - - - -

KCl - - 65.0 - - - - -

K2SO4 - - - 990.0 - - - -

Mikronutrien / Hara Mikro

KI 0.83 0.75 0.75 - - 80.0 0.03 -

H3BO3 6.2 3.0 1.5 6.2 - 6.2 0.6 10.0

MnSO4.4H2O 22.30 - 7.0 - 0.75 0.075 - 25.0

MnSO4.H2O - 10.0 - 29.43 - - - -

ZnSO4.7H2O 8.6 2.0 2.6 8.6 - - 0.05 10.0

Na2MoO4.2H2O 0.25 0.25 - 0.25 - 0.25 0.05 0.25

CuSO4.5H2O 0.025 0.025 - 0.25 - 0.025 - 0.025

CoCl2.6H2O 0.025 0.025 - - - 0.025 - -

Co(NO3)2.6H2O - - - - - - 0.05 -

17
 Na2EDTA 37.3 37.3 - 37.3 - 74.6 37.3 37.3

FeSO4.7H2O 27.8 27.8 - 27.8 - 25.0 27.8 27.8

MnCl2 - - - - - 3.9 0.4 -

Fe(C4H4O6)3.2H2O - - - - 28.0 - - -

Vitamin dan Suplemen Lain

Inositol 100.0 100.0 - 100.0 - - - 100.0

Glysine 2.0 2.0 3.0 2.0 - - - 2.0

Thiamin HCL 0.1 10.0 0.1 1.0 - 0.3 0.3 0.5

Pyridoxine HCl 0.5 - 0.1 0.5 - 0.3 0.3 0.5

Nicotinic acid 0.5 - 0.5 0.5 - - 1.25 5.0

Ca-panthothenate - - 1.0 - - - - -

Cysteine HCl - - 1.0 - - - - -

(Cysteine acid)

Riboflavin - - - - - 0.3 0.05 -

Biotin - - - - - - 0.05 0.05

Folic acid - - - - - - 0.3 0.5

Keterangan: MS = Murashige & Skoog; G5 = Gamborg; W = White; LM = Lloyd &

McCown; VW = Vacin & Went; Km = Modified Knudson; M = Mitra et al.; NN = Nitsch & Nitsch
(Plant Breeding and Genetics Section International Atomic Energy Agency, 2002).
Dalam membuat media umumnya dibuat terlebih dahulu larutan stok, supaya
pengambilan dan penimbangan komponen yang kecil seperti hara mikro, vitamin dan ZPT
dapat lebih mudah. Larutan stok umumnya dibuat dalam (1) stok hara makro, (2) stok
hara mikro, (3) stok Fe, (4) stok vitamin, dan (5) stok ZPT. Larutan stok baiknya disimpan
di lemari pendingin agar tidak cepat mengalami kerusakan. Larutan stok yang sudah
mengendap tidak dapat digunakan lagi.

Secara umum sebelum membuat larutan stok perlu memahami prinsip

pengeceran:

V 1 x N 1=V 2 x N 2

Keterangan:

V1 = Volume media yang akan dibuat

18
 N1 = Konsentrasi media yang akan dibuat

V2 = Volume yang harus dipipet dari stok untuk membuat media 1L

N2 = konsentrasi stok

Berdasarkan standar prosedur operasional laboratorium Biologi Sel dan Jaringan

BB Biogen tahap pembuatan beberapa larutan adalah sebagai berikut :

1. Larutan stok hara makro MS

Stok dibuat sebanyak 1000 mL untuk pemakaian 20x, maka pengambilan larutan
untuk setiap pembuatan media 1000 mL adalah 50 mL. Mula-mula satu per satu bahan
ditimbang dan dilarutkan dalam 700 mL menggunakan magnetic stirer dalam beaker
glass. Setiap bahan harus dipastikan larut sebelum ditambahkan hara makro selanjutnya.
Setelah semua larut, larutan ditera menggunakan tabung ukur 1000 mL dan ditambahkan
aquades hingga 1000 mL. Banyak hara makro yang ditimbang dan dilarutkan adalah hara
makro (lihat tabel 3) dikali 20. Larutan stok hara makro disimpan dalam botol kuning
tanpa dimasukkan ke lemari pendingin.

2. Larutan stok hara mikro MS

Pembuatan stok hara mikro mirip dengan pembuatan larutan stok hara makro.
Stok dibuat dalam 1000 mL untuk pemakaian 100x, maka pengambilan larutan untuk
setiap pembuatan 1000 mL media adalah 10 mL. Banyak bahan hara makro yang
ditimbang dan dilarutkan adalah jumlah kebutuhan pembuatan media untuk 1 L dikali
100. Larutan stok hara mikro disimpan dalam botol kuning tanpa dimasukkan ke lemari
pendingin.

3. Larutan stok Fe EDTA

Pembuatan stok Fe EDTA mirip dengan pembuatan larutan stok hara mikro yaitu
dibuat dalam 1000 mL untuk pemakaian 100x, maka pengambilan larutan untuk setiap
pembuatan 1000 mL media adalah 10 mL. Banyak bahan hara makro yang ditimbang dan
dilarutkan adalah jumlah kebutuhan pembuatan media untuk 1 L dikali 100. Larutan stok
Fe EDTA disimpan dalam botol yang dilapisi aluminium foil dan dimasukkan ke lemari
pendingin pada suhu min. 4°C.

4. Larutan stok myo-inositol

Myo-inositol termasuk kedalam vitamin namun karena penggunaannya seringkali

berubah sesuai dengan rasio penambahn vitamin lainnya, maka larutan stok myo-inositol
dibuat terpisah. Larutan stok myo-inositol dibuat sebanyak 1 L dengan penggunaan 100x,

19
yang berarti penimbangan myo-inositol adalah kebutuhan untuk 1 L media dikalikan 100.
Penggunaan myo-inositol untuk setiap 1000 mL media adalah 10 mL. Larutan stok myo-
inositol disimpan dalam botol bening dan dimasukkan ke lemari pendingin pada suhu min.
4°C.

5. Larutan stok vitamin MS

Penggunaan vitamin dalam pembuatan media sangat sedikit, sehingga larutan

stok yang dibuat cukup sebanyak 100 mL dengan ketentuan 100x pemakaian dan setiap
pengambilan larutan untuk 1000 mL media adalah 1 mL. Mula-mula satu per satu bahan
ditimbang dan dilarutkan dalam 70 mL menggunakan magnetic stirer dalam beaker glass
100 mL. Setiap bahan harus dipastikan larut sebelum ditambahkan vitamin selanjutnya.
Setelah semua larut, larutan ditera menggunakan tabung ukur 100 mL dan ditambahkan
aquades hingga 100 mL. Banyak vitamin yang ditimbang dan dilarutkan adalah
kebutuhan vitamin (lihat tabel 3) dikali 100. Larutan stok vitamin disimpan dalam botol
bening dan dimasukkan ke lemari pendingin pada suhu min. 4°C

6. Larutan stok ZPT

Pembuatan laruran stok ZPT berbeda dengan larutan lain. ZPT tidak dapat
langsung dilarutkan dengan aquades melainkan dengan bahan kimia pelarut, tergantung
pada jenis ZPT. Bahan kimia pelarut yang biasa dipakai seperti NaOH 1N, HCL 1 N,
etanhol 95% dan DMSO. Kemudian setelah larut volume ditera dalam labu ukur 100 mL
dengan penambahan aquades. Pengambilan larutan stok disesuaikan dengan kebutuhan
media.

Larutan stok dilarutkan dengan aquades, setiap zat dimasukkan secara bertahap
sambil diaduk dengan stirer agar menghindari pengendapan. Setelah semua komponen
larut tambahkan aquades sampai volume akhir yang ingin dibuat. Simpan larutan stok
dalam botol berwarna gelap atau dibungkus aluminium foil.

Tahap membuat media in vitro secara umum, adalah :

1. Pipet dan masukkan larutan stok sesuai volume yang telah ditentukan
kedalam erlenmeyer dengan urutan; hara makro, hara mikro, Fe EDTA,
Vitamin, Myo-inositol, ZPT,
2. Tambahkan gula 30 g/L,
3. Tambahkan aquades hingga ¾ volume yang akan dibuat,
4. Ukur pH hingga 5,7-5,8. Bila pH rendah tambahkan NaOH dan bila pH
tinggi tambahkan HCl,

20
 5. Pindahkan ke tabung ukur dan tambahkan aquades sampai volume media
yang akan dibuat kemudian tuang kembali ke erlenmeyer,
6. Tambahkan zat pemadat atau agar,
7. Aduk dengan magnetic stirer dan panaskan diatas hot plate
8. Setelah mendidih tuang kedalam botol atau petri,
9. Tutup dengan aluminuim foil, tutup plastik, plastik PE dan karet, atau
untuk petri bungkus dengan kertas
10. Beri nama kemudian autoclave pada 121°C selama 15 menit

d)
a) b) c)

f) g) h
e)

Gambar 5. Pembuatan Media dan Alat Laboratorium : a) Bahan media MS (larutan stok,
gula dan agar); b) Alat pembuatan media; c) Pipeting dan memasukan larutan stok dan
bahan-bahan media kedalam erlemeyer; d) Alat ukur pH (pH meter) untuk media; e)
Mengaduk media diatas hot plate dengan magnetic stirer; f) Autoclave otomatis; g)
Destilator aquades; h) Timbangan digital
3.2.3 Membuat Bahan Komponen Steril

Dalam kultur in vitro metode, alat dan bahan yang digunakan adalah aseptik.
Umumnya bahan-bahan yang digunakan dalam LAF adalah bahan yang steril. Komponen
steril yang umumnya diperlukan ialah aquades, klorox, botol steril, larutan ZPT, antibiotik.
Bahan-bahan tesebut dapat dibuat dengan cara disterilisasi metode moist heat
menggunakan autoclave selama 15 menit pada suhu 121°C. Moist heat sterilization
dengan steam under pressure melibatkan penggunaan uap untuk menghasilkan suhu

21
tinggi yang diperlukan untuk sterilisasi (Sultana, 2007). Prinsip autoclave adalah koagulasi
protein. Sterilisasi dengan autoclave teruji lebih efektif membunuh mikroorganisme
termasuk pada alat-alat berbentuk tabung yang sulit disterilisasi (Sezdi & Yoleri, 2014).

Metode autoclave tidak dapat digunakan untuk komponen sensitive panas, maka
selain dengan itu sterilisasi dapat dilakukan dengan sterilisasi saring/filter untuk membuat
larutan steril. Larutan dibuat dalam LAF menggunakan aquades steril dan disaring
umumnya dengan filter berdiameter pori 0,22 mikrometer, tergantung pada jenis cairan
korosif, cairan kental dan pelarut organik, nilai reduksi titer, kedalaman membran,
muatannya dan tortuositas saluran (Sultana, 2007).

3.2.4 Menyiapkan Eksplan

Dalam menyiapkan eksplan pemilihan tanaman haruslah yang sehat, bebas

penyakit dan memiliki pertumbuhan yang baik, agar tidak menjadi sumber kontaminan
dan ketidakberhasilan kultur. Maka pemilihan eksplan dapat dimulai dari isolasi dengan
diberi perlakuan dan dirawat dengan baik. Selanjutnya eksplan perlu disterilisasi bila
berasal bukan dari kultur in vitro agar kontaminan hilang dan tidak terbawa dalam kultur.

Metode sterilisasi disesuaikan dengan jenis bagian tanaman yang digunakan.

Faktor penting dalam sterilisasi antara lain permukaan bahan eksplan, konsentrasi
sterilan, komponen yang digunakan, lama perendaman, waktu sterilisasi. Konsentrasi
yang terlalu tinggi akan menyebabkan kematian pada sel-sel tanaman, sedangkan
konsentrasi yang terlalu rendah tidak efektif karena tidak mampu membunuh
mikroorganisme yang ada di permukaan eksplan.

Untuk mendapatkan konsentrasi dan waktu perendaman yang tepat pada awal
kultur umumnya didapatkan dari percobaan ( trial and error) terlebih dahulu. Secara
umum metode sterilisasi yang sering digunakan adalah sterilisasi bakar untuk eksplan
buah yang akan diambil bijinya dan sterilisasi perendaman bertahap yang dapat
diaplikasikan pada semua jenis ekplan. Berikut sterilisasi yang dikerjakan oleh penulis
selama magang:

 Jeruk

Sterilisasi biji jeruk apabila masih dalam buahnya, umumnya dilakukan dengan
sterilisasi bakar. Tahap sterilisasi bakar pada buah jeruk:

1. Cuci eksplan dengan sabun dan bilas pada air mengalir,

22
 2. Masukkan kedalam LAF. Tusuk buah dengan pinset steril dan Celupkan buah jeruk
kedalam alkohol 96%,
3. Bakar buah diatas lampu bunsen, dan
4. Potong buah dan pisahkan biji dari kulit dan bulir jeruk.

a) b) c)

Gambar 6. Sterilisasi Bakar pada Eksplan Jeruk : a) Jeruk dibakar diatas bunsen, yang
sebelumnya dicelupkan ke alkohol 96%; b) Pemilihan dan pemisahan biji jeruk dari
daging dan kulitnya; c) Kultur biji, pengujian kontaminasi.
 Sorgum
Untuk mencari konsentrasi perendaman yang tepat sterilisasi benih sorgum
dilakukan dengan 8 pelakuan metode perendaman bertahap. Sterilisasi dilakukan didalam
tube ukutan 50 mL sebanyak 50 butir/ tube. Sterilisasi dilakukan diluar LAF dan didalam
LAF secara aseptik. Sterilisasi yang dilakukan diluar LAF yaitu cuci bersih dengan sabun
dan air mengalir sebanyak 3 kali, perendaman dengan fungisida benlox 50 WP selama 15
menit sambil dikocok sesekali lalu bilas dengan air mengalir. Setelah itu dilakukan
kedalam LAF secara aseptik. Setiap jeda setelah perendaman komponen dibuang tanpa
dibilas setelahnya.

Tabel 4. Perlakuan Sterilisasi Sorgum

Waktu Perendaman (menit)
No. Tahap Sterilisasi
N1 N2 N3 N4 N5 N6 N7 N8

1. Alkohol 70% 5 5 5 5 5 5 5 5

2. HgCl 0,2% - - - - 2 1 2 1

3. Klorox 30% 15 10 10 10 15 15 15 15

4. Klorox 20% 10 10 7 15 15 15 10 10

Cuci aquades steril

5. 2 2 2 2 2 2 2 2
sebanyak 3x

6. Betadine + aquades 20 20 20 20 20 20 20 20

23
 steril

a) b) c) d)

e) f) g) h)

i) j) k)

Gambar 7. Sterilisasi Eksplan Sorgum : a) Rinso sebagai sabun pencuci tahap awal
sterilisasi; b) Benlox: Fungisida sterilan; c) Tempat sterilisasi: tube ; d) Alkohol 70%:
sterilan ; e) Aquades steril: sterilan; f) HgCl2 0,2% : sterilan; g) Benih sorgum var.
Numbu ; h) Klorok 30% dan 20%; i) Sterilisasi rendaman benlox; j) Sterilisasi rendaman
alkohol; k) Sterilisasi rendaman betadhine.
3.2.5 Penanaman Eksplan

Penanaman eksplan sorgum yang dilakukan selama magang, yaitu:

1. Penanaman benih di media petri untuk keperluan radiasi

24
 2. Subkultur sorgum perlakuan radiasi pada media BAP 0,1 dan MS kontrol
3. Subkultur media MS untuk pemulihan pertumbuhan sorgum akibat radiasi dan
media BAP 0,1
4. Subkultur media perakaran (IBA 0,1)

Penanaman eksplan dilakukan dalam LAF ( Laminar Air Flow) secara aseptik.
Prinsip aseptik LAF karena LAF memiliki pad filter, kipas, dan filter HEPA (High Efficiency
Particulates Air). Kipas menghisap udara melalui saringan tempat debu terperangkap.
Setelah itu udara yang disaring harus melewati filter HEPA di mana jamur, bakteri, debu,
dan kontaminan lain dihilangkan, setelah itu udara steril mengalir ke area kerja (flasking)
sehingga menghilangkan resiko kontaminasi.

a) b) c)

d) e) f)

Gambar 8. Sub-Kultur Sorgum Radiasi : a) Eksplan sorgum sebelum radiasi pada 2 HST;
b,c) Persiapan radiasi sorgum dengan wrapping plastik untuk melingungi dalam
perjalanan; d,e) Penampakan sorgum setelah radiasi; f) Sorgum perlakuan radiasi setelah
subkultur
3.2.6 Aklimatisasi

Aklimatisasi merupakan proses adaptasi bertahap terhadap lingkungan baru

(lapangan). Kondisi dalam kultur in vitro berbeda dengan kondisi di lapang, sehingga
aklimatisasi perlu dilakukan sebelum tanaman benar-benar hidup di lapang. Kondisi
tersebut menyebabkan tanaman hasil kultur jaringan tidak memiliki lapisan lilin dan

25
stomata tidak berfungsi sehingga sangat riskan jika langsung ditanam di lapang (Dwiyani,
2015).

Aklimatisasi dapat dilakukan dengan pemindahan planlet langsung ke tanah atau

pun dengan disambung ke pohon induk (umumnya untuk tanaman berkayu). Pada
sorgum aklimatisasi dilakukan dengan memindahkan tanaman ke media campuran tanah
dan kompos (2:1). Sebelum ditanam planlet dicuci bersih dengan air mengalir hingga
bersih dari media agar, kemudian direndam dalam fungisida (dithane) +- selama 5 menit.
Untuk menjaga kelembaban dan meminimalisir respirasi planlet yang di aklimatisasi
ditutupi sungkup dan daun yang mulai layu atau sudah patah sebaiknya dipotong.

c)

a) b)

f)

d) e)

Gambar 9. Aklimatisasi Sorgum : a) Larutan dithane; b) Perendaman planlet dengan

dithane; c) Larutan IBA 0,1 dalam sprayer; d) Aklimtisasi sorgum dengan sungkup,
tampak depan; e) Aklimtisasi sorgum dengan sungkup, tampak atas; f) Planlet pada saat
aklimatisasi.
3.2.7 Pengamatan dan Analisis Data

Pengamatan yang dilakukan meliputi beberapa variabel pengamatan, yaitu :

a. Kontaminasi sorgum hasil sterilisasi

Kontaminasi terdiri dari 2 data, yaitu kontaminasi dihitung dari jumlah botol dan
persentase jumlah benih terkontaminasi. Pengamatan dilakukan sejumlah dengan eksplan
benih yang telah disterilisasi dan ditanam. Data kontaminasi dianalisa secara deskriptif.

b. Rata-rata pertumbuhan panjang akar dan kecambah pada sorgum

26
Rata-rata perkecambahan sorgum dihitung 3 kali, yaitu pada: (1) 4 hari setelah tanam
(HST), (2) 7 HST dan (3) 15 HST. Pengambilan sampel dalam pengamatan berjumlah 10-
20 tanaman. Analisis varians data dilakukan dengan bantuan aplikasi R statistik, hasil
dianalisis secara deskriptid dan statistik anova.

c. Jumlah tanaman yang berhasil aklimatisasi

Jumlah tanaman aklimatisasi dihitung persentase keberhasilan. Penanaman dilakukan

bertahap kemudian diamati.

3.3 Hasil Kegiatan Magang

3.3.1 Sterilisasi Sorgum Var. Numbu

Sterilisasi sorgum var. Numbu dilakukan sebanyak 8 perlakuan, masing-

masing 5 ulangan (botol), setiap botol berisi 5-15 eksplan (benih).

Tabel 5. Kontaminasi Botol Sorgum Var. Numbu Hasil Sterilisasi

JUMLAH KONTAMINASI /BOTOL
NO STERILISASI BOTOL
H-2 H-3 H-4 H-5 H-6 H-7
1 N1 5 0 5 5 5 5 5
2 N2 5 0 4 4 4 4 4
3 N3 5 3 3 3 4 4 4
4 N4 5 3 3 5 5 5 5
5 N5 5 0 1 1 1 1 4
6 N6 5 1 2 2 2 2 2
7 N7 5 0 0 0 0 3 3
8 N8 5 1 5 5 5 5 5

Tabel 6. Kontaminasi Benih Sorgum Var. Numbu Hasil Sterilisasi

WAKTU
JUMLAH %KONTAMINASI
NO STERILISASI PENGAMATAN
BENIH /BENIH
(HST)
1 N1 57 9 100
2 N2 52 9 80
3 N3 25 9 60
4 N4 25 9 100
5 N5 50 7 34
6 N6 54 7 11

27
 7 N7 50 7 26
8 N8 50 7 33
Kontaminasi berdasarkan botol menunjukkan hasil yang beragam. Kontaminasi
terbanyak terjadi pada perlakuan N1, N4 dan N8 dengan kontaminasi pada ke lima botol.
Kemudian pada perlakuan N2, N3, N5 kontaminasi terjadi pada empat dari lima botol.
Perlakuan N7 kontaminasi terdapat pada tiga dari lima botol dan N6 dengan kontaminasi
paling sedikit yaitu dua dari lima botol. Dalam data harian kontaminasi botol
menunjukkan munculnya kontaminan bermacam-macam dan tidak bergantung pada hasil
akhir kontaminasi yang terjadi.

Kontaminasi berdasarkan persentase benih terkontaminasi tertinggi terdapat pada

perlakuan N1 dan N4 yaitu sebesar 100%, disusul N2 sebesar 80%, N3 sebesar 60%, N5
sebesar 34% dan N8 selisih 1%, kemudian N7 sebesar 26% dan kontaminasi terkecil
pada N6 sebesar 11%.Bila dikelompokkan perlakuan N1-N4 memiliki jumlah kontaminasi
lebih dari 50% dan N5-N8 dibawah dari 35% hal ini terjadi karena penggunaan HgCl2
0,2% sebagai sterilan efektif mengurangi kontaminasi. HgCl2 (merkuri II klorida)
termasuk kelompok disinfektan, namun merkuri merupakan unsur kimia yang sangat
berbahaya karena sifatnya yang mudah menguap dan beracun. Sedangkan klor adalah
elektronegatif yang mengoksidasi hubungan peptida sehingga dapat mendenaturasi
protein mikroba (Das, L. , S., & Chatt, 2012). Namun HgCl2 juga beracun bagi organisme
lain. HgCl2 dapat menyebabkan menyebabkan iritasi parah pada mata, kulit dan saluran
pernapasan, menyebabkan reaksi alergi pada kulit, mempengaruhi ginjal dan sistem saraf
pusat, menginduksi bahaya kelahiran, berpotensi membatasi fungsi tanah, menyebabkan
keracunan bagi tanaman dan mencemari rantai makanan. Selain itu waktu pengamatan
pada kontaminasi benih yang berbeda atau selisih 2 hari memungkinkan kontaminan
tumbuh menyebar ke benih sekitarnya sehingga benih yang terkontaminasi lebih banyak.

Dari data diatas disimpulkan perlakuan sterilisasi terbaik adalah N6 dengan total
kontaminasi dua dari lima botol dan 11% kontaminasi dari total benih. Sedangkan
perlakuan sterilisasi dengan kontaminasi terbanyak adalah N1 dan N4 dengan total
kontaminasi 5 dari 5 botol dan 100% dari total benih. Sterilisasi sorgum dianjurkan
menggunakan HgCl2 0,2% karena mengurangi jumlah kontaminan.

28
 a) b) c) d) e)

f) g) h) i) j)

Gambar 10. Jenis kontaminasi pada sorgum; a - i) jamur; j) bakteri

Berdasarkan hasil pengamatan kontaminan banyak berasal dari kelompok fungi.

Kontaminasi dapat terjadi karena faktor eksternal dan internal. Penyebab terjadinya
kontaminasi yaitu; (1) udara, (2) bahan tanaman eksplan, (3) alat yang digunakan, (4)
manusia dan pekerja, dan (5) tempat atau lokasi (Tamami, 2013). Dari hasil pengamatan
kontaminasi disebabkan oleh teknik kultur yang masih beradaptasi dan tahap
pembelajaran, alat yang digunakan dan bawaan dari permukaan benih sorgum.

Faktor penting dalam sterilisasi antara lain permukaan bahan eksplan, konsentrasi
sterilan, komponen yang digunakan, lama perendaman, waktu sterilisasi. Konsentrasi
yang terlalu tinggi akan menyebabkan kematian pada sel-sel tanaman, sedangkan
konsentrasi yang terlalu rendah tidak efektif karena tidak mampu membunuh
mikroorganisme yang ada di permukaan eksplan.

Konsep sterilisasi adalah menghilangkan kontaminan terbawa dalam eksplan yang

berupa penyakit (jamur, protozoa, bakteri, virus), hama maupun beda asing selain
eksplan yang akan ditanam. Metode sterilisasi secara umum yaitu pencucian dengan air
mengalir selanjutnya sterilisasi dapat dilakukan dengan metode bakar atau perendaman
dengan sterilan. Sterilan yang digunakan pada percobaan, ialah :

 Klorox, Sodium hipoklorit atau biasa dijual sebagai cairan pemutih.

Pemutih cucian komersial adalah 5,25% natrium hipoklorit. Cairan pemutih ini
dicairkan dalam 20% dan 30% aquades, menghasilkan konsentrasi akhir 0,5 - 1,0%

29
natrium hiperklorit. Keseimbangan antara konsentrasi dan waktu harus ditentukan secara
empiris untuk setiap jenis eksplan, karena dapat menyebabkan fitotoksisitas.

 Alkohol, etanol atau isopropil alkohol

Alkohol adalah agen sterilisasi yang kuat tetapi juga sangat fitotoksik. Semakin
lunak jaringan, semakin banyak itu akan rusak oleh alkohol. Konsentrasi yang digunakan
adalah 70% dengan lama perendaman 5 menit. Pemilihan waktu perendaman yang
tergolong cukup lama karena permukaan biji sorgum yang keras sehingga kuat dalam
perendaman dan mengoptimalisasi sterilan dalam mematikan kontaminan.

 Merkuri (ii) klorida atau HgCl2.

HgCl2 sangat beracun bagi tanaman dan manusia sehingga harus dibuang dengan
hati-hati. Bersifat fitotoksik, karsinogenik dan korosif. HgCl2 0,2% yang digunakan secara
hati-hati menggunakan sarung tangan latex. Penggunaan HgCl2 bila menurut hasil
kontaminasi merupakan sterilan efektif menurunkan jumlah kontaminasi, karena HgCl2
memiliki sifat sterilan yang sangat keras, namun berbahaya.

 Antibiotik, fungisida, bakterisida

Fungisida yang digunakan ialah benlox 50 WP yang mengandung bahan aktif

benomil 50% yang berfungsi sebagai pencegahan dan pembasmi sistemik fungisida ;
askarisida. Meningkatkan tingkat/derajat oksidasi biologi kotoran-kotoran dan pupuk.
Kontrol range yang luas pada penyakit buah-buahan, kacang-kacangan, sayuran, hasil
panen, tanah berumput, pohon-pohon dan tanaman hias (BPOM, 2012).

3.3.2 Pertumbuhan Tunas In Vitro Sorgum Var. Super 2 Hasil Radiasi Sinar
Gamma

Sorgum var. Super 2 disterilisasi menggunakan metode bertingkat dengan

bahan sterilan dan lama sterilisasi setiap sterilan mengacu pada hasil sterilisasi
var. Numbu (lihat pada 3.3.1). Sterilisasi dilakukan dalam botol kultur kaca
sebanyak 200 benih di botol ke-1 danmasing-masing 400 benih pada 4 botol.
Pemisahan ini awalnya ditujukan untuk memudahkan penghitungan sorgum yang
akan diberi perlakuan radiasi. Botol dengan 200 benih digunakan sebagai kontrol
dan 4 botol lain sebagai benih yang akan diradiasi. Selanjutnya sorgum yang
sudah disterilisasi ditanam pada 20 petri yang berisi media MS. Setiap petri
ditanami 50 butir benih sorgum. Sedangkan untuk kontrol (tanpa radiasi), benih
langsung ditanam pada 10 botol kultur masing-masing sebanyak 10 butir benih.

30
 Pada umur 2 hari, bakal kecambah sorgum var. super 2 diinduksi dengan
sinar gamma. Radiasi dilakukan di Batan (Badan Tenaga Nuklir Nasional),
Jakarta. Perlakuan radiasi sorgum dilakukan dalam 4 taraf (40 Gy, 50 Gy, 60 Gy,
70 GY). Subkultur mutan sorgum dilakukan pada hari yang sama dengan hari
radiasi. Mutan sorgum dipindah ke media MS sebagai kontrol dan perlakuan
media pertunasan BAP 0,1 ppm. Pertumbuhan selanjutnya dihitung mulai dari
subkultur pasca radiasi.

Tabel 7. Persentase Hidup Benih Sorgum Var. Super 2 pada 4 HST

DOSIS
%
NO. MEDIA RADIASI
HIDUP
(gy)
1 MS 0 35
2 BAP 0,1 0 87
3 MS 40 87
4 BAP 0,1 40 79
5 MS 50 92
6 BAP 0,1 50 98
7 MS 60 78
8 BAP 0,1 60 95
9 MS 70 100
10 BAP 0,1 70 98
Persentase hidup sorgum terendah terjadi pada sorgum media MS tanpa
perlakuan radiasi yaitu sebesar 35%, hal ini terjadi karena sterilisasi yang
dilakukan terlalu peka. Jumlah benih yang disterilisasi sebanyak 200 benih dalam
botol sedangkan jumlah sterilan yang digunakan sama dengan botol sterilisasi
yang berisi 400 benih, sehingga kepekatan dan banyaknya sterilan dua kali lebih
banyak. Kepekatan ini menjadikan sterilan bersifat fitotoksik bagi benih dan benih
tidak tumbuh. Sterilan HgCl2 diketahui dapat merusak protein, karsinogenik dan
mematikan benih dalam konsentrasi tinggi. Pada pengamatan selanjutnya kultur
MS tanpa radiasi diganti dengan eksplan dalam petri yang tidak diradiasi,
sehingga data pertumbuhan selanjutnya menjadi normal kembali.

Persentase hidup pada mutan sorgum varietas Super 2 menunjukkan

angka jauh diatas 50% yang artinya sensitivitas sorgum varietas super 2 yang
cukup tinggi terhadap dosis radiasi. Perlakuan dosis 40 gy – 70 gy belum
menunjukkan LD50. LD50 (Letal dosis 50%) yaitu dosis radiasi yang menyebabkan

31
kematian 50% populasi tanaman dan akan menentukkan radiosensitivitas. Tingkat
sensitivitas pada setiap tanaman sangat bervariasi bergantung pada jenis dan genotipe.

Tabel 8. Rata-Rata Pertumbuhan Kecambah Mutan Sorgum Var. Super 2 pada Umur 7
HST dan 15 HST

DOSIS 7 HST 15 HST

NO. MEDIA RADIASI PANJANG PANJANG PANJANG PANJANG

KECAMBAH AKAR KECAMBAH AKAR
(gy)
(cm) (cm) (cm) (cm)

1 MS 0 5,40 3,60 8,10 4,40

2 BAP 0,1 0 5,89 3,78 7,10 3,60

3 MS 40 2,08 1,87 4,83 2,92

4 BAP 0,1 40 1,98 1,20 7,28 0,98

5 MS 50 1,99 1,48 3,35 1,41

6 BAP 0,1 50 1,82 1,15 1,78 1,40

7 MS 60 1,69 1,29 5,68 2,56

8 BAP 0,1 60 1,70 1,12 4,01 1,80

9 MS 70 1,58 1,35 4,25 1,45

10 BAP 0,1 70 1,72 1,16 3,17 1,80

32
Tabel 9. Statistik ANOVA Rata-Rata Pertumbuhan Mutan Sorgum (a) Panjang kecambah 7
HST, (b) Panjang akar 7 HST, (c) Panjang kecambah 15 HST dan (d) Panjang akar 15
HST
Source Df Sum Sq Mean Sq F value Pr(>F)
(a)
MEDIA 1 0.3 0.26 0.351 0.554
RADIASI 4 473.6 118.39 160.151 <2e-16 ***
MEDIA:RADIASI 4 2.6 0.65 0.884 0.475
Residuals 190 140.5 0.74
(b)
MEDIA 1 2.69 2.69 3.977 0.0476 *
RADIASI 4 180.71 45.18 66.757 <2e-16 ***
MEDIA:RADIASI 4 3.85 0.96 1.422 0.2281
Residuals 190 128.58 0.68
(c)
MEDIA 1 6.6 6.61 1.227 0.2718
RADIASI 4 250.2 62.55 11.608 2.76e-07 ***
MEDIA:RADIASI 4 47.1 11.78 2.186 0.0794 .
Residuals 70 377.2 5.39
(d)
MEDIA 1 7.94 7.938 2.881 0.094085 .
RADIASI 4 66.32 16.581 6.017 0.000321 ***
MEDIA:RADIASI 4 12.37 3.094 1.123 0.352857
Residuals 70 192.88 2.755
Keterangan : Signif. codes: 0 ‘***’ 0.001 ‘**’ 0.01 ‘*’ 0.05 ‘.’ 0.1 ‘ ’ 1, koefisien variasi
(a) 33.19636, (b) 45.70312, (c) 46.75403, dan (d) 74.52166
Berdasarkan hasil analisis ragam data rata-rata pertumbuhan kecambah
mutan sorgum varietas Super 2 memiliki besaran nilai koefisien variasi yang besar. Nilai
koefisien variasi menggambarkan range variasi pada data. Semakin kecil nilai koefisien
variasi data semakin homogen dan ketika nilai semakin besar range variasi angka
semakin luas. Nilai koefisien variasi yang lebih besar dari 20 berarti data yang diperoleh
memiliki range variasi yang sangat luas, tidak homogen dan data tidak dapat dipakai.
Meskipun nilai menunjukkan signifikansi atau pengaruh nyata pada perlakuan yang
dilakukan. Koefisien variasi yang besar ini dapat terjadi karena sorgum merupakan mutan

33
yang memiliki perubahan bersifat acak, tidak terarah dan berbeda setiap individu. Maka
angka yang didapat akan sangat bervariasi. Solusi yang dapat dilakukan dalam penelitian
mutan adalah analisis data harusnya menggunakan analisis Student’s T-Test. Analisis
Student’s T-Test merupakan uji komparatif dengan satu sampel yang berfungsi untuk
menilai perbedaan antara nilai tertentu dengan rata-rata kelompok populasi.

Bila diperhatikan terdapat beberapa angka rata-rata pertumbuhan antara 7 HST

dan 15 HST yang mengalami penurunan. Penurunan angka rata-rata pertumbuhan
disebabkan oleh pemilihan tanaman sampel yang berganti setiap pengambilan data. Hal
ini dapat menjadi penyebab data yang dianalisis memiliki galat yang besar dan koefisien
variasi yang tinggi. Maka rancangan percobaan harusnya dilakukan sebaik mungkin
sebelum penelitian dilakukan atau selambat-lambatnya sebelum pengambilan data
dilakukan, sehingga data yang didapat normal.

Pada 7 HST menunjukkan reduksi panjang kecambah dan panjang akar yang
signifikan antara perlakuan radiasi dan kontrol, namun reduksi tidak berbeda
nyata antar taraf dosis radiasi. Pada 15 HST pertumbuhan panjang kecambah
sangat bervariasi. Penggunaan BAP 0,1 pada media kultur tidak menunjukkan
adanya pengaruh pada pertumbuhan panjang akar baik pada 7 HST maupun 15
HST. Penggunaan BAP nyatanya menyebabkan reduksi panjang dan jumlah akar,
warna akar menjadi tua dan coklat, mengeluarkan senyawa fenol sehingga media
akan menjadi staining . BAP dihararapkan dapat mendorong pertumbuhan tunas
sorgum, namun respon yang dihasilkan pada percobaan ini tidak demikian. Benzyl
adienine dan benzyl aminopurine dilaporkan menghambat pertumbuhan akar
pada padi (Liu, Goto, & Nishiyama, 2000) dan tanaman herbaceous (Grossman,
Freebon, Scoggins, & Latimer, 2012).

d)

34
 a) b) c)

e)

Gambar 11. Pertumbuhan Sorgum Perlakuan Taraf Radiasi Media B 0,1 pada 7 HST, dari
kiri ke kanan: a) Dosis radiasi 0 gy dan 40 gy; b) Dosis radiasi 0 gy dan 50 gy; c) Dosis
radiasi 0 gy dan 60 gy; d) Dosis radiasi 0 gy dan 70 gy; e) Dosis radiasi 0 gy, 40 gy, 50
gy, 60 gy, 70 gy.

d) e)
a) b) c)

Gambar 12. Pertumbuhan Sorgum Perlakuan Radiasi Media MS 0 pada 7 HST: a) 0 gy; b)
40 gy; c) 50 gy; d) 60 gy; e) 70 gy.

a) b) c) d) e)

35
 Gambar 13. Penampakan akar pada media BAP 0,1 (7 HST): a) 0 gy; b) 40 gy; c) 50 gy;
d) 60 gy; e) 70 gy
Sorgum dengan perlakuan radiasi menunjukkan kematian planlet pada
umur 15 HST dengan gejala terhambatnya pertumbuhan kecambah, munculnya
plumula kemudian bercak merah perlahan muncul dan menjadi browning pada
planlet dan staining pada media. Hal ini terjadi baik pada media MS dan BAP 0,1.
Berdasarkan penelitian sebelumnya dosis radiasi sorgum dengan sinar gamma
diketahui sebesar 800 gy telah mengalami kematian lebih dari 50%. Maka
hipotesis awal pengambilan taraf radiasi 40, 50, 60, dan 70 gy diharapkan
menghasilkan keragaman yang tinggi dengan semakin tinggi dosis angka
kematian benih semakin besar.

3.3.3 Aklimatisasi Sorgum Hasil Radiasi

Jumlah planlet yang diaklimatisasi menunjukkan hasil kultur planlet sehat dan baik
setiap perlakuannya, karena dalam parameter keberhasilan planlet siap aklimatisasi
adalah akar yang cukup minimal 0,5 cm, memiliki plumula atau daun sehat dan segar,
dan tinggi tanaman minimal 2 cm. Jumlah total planlet aklimtisasi menggambarkan
persentase kematian pada setiap perlakuan radiasi, kecuali pada kontrol.

Tabel 10. Jumlah Planlet Aklimatisasi dan Presentase kematian Planlet Hasil Kultur
Sorgum Super 2 Perlakuan Radiasi
AKLIMATISASI TOTAL 20/02/2020 25/02/2020
RADIAS
10/0 13/0 14/0 19/0 20/0 TANAMA MAT HIDU %MAT HIDU
I MATI %MATI
2 2 2 2 2 N I P I P

0 GY 10 10 0 30 0 50 0 50 0% 0 50 0%

40 GY 5 5 15 12 8 45 2 43 4% 9 36 20%

50 GY 4 5 15 5 3 32 2 30 6% 2 30 6%

60 GY 5 5 20 10 4 44 0 44 0% 5 39 11%

70 GY 5 5 16 5 3 34 2 32 6% 3 31 9%

Kematian planlet aklimatisasi terbesar pada perlakuan dosis radiasi 40 Gy.

Kematian planlet disebabkan oleh karakterisik planlet saat aklimatisasi masih belum
memadai; planlet teralu pendek, mengalami gejala browning, daun masih melipat,
pendeknya akar, tidak adanya cabang-cabang akar muda. Selain itu planlet hasil radiasi
M1 masih mengalami kerusakan fisiologis sehingga bisa terjadi layu begitu saja. Kematian
juga dapat berasal dari lingkungan seperti jamur, hama dan tingginya kelembaban.

36
 BAB IV

KESIMPULAN DAN SARAN

4.1 Kesimpulan

Metode sterilisasi yang diujikan adalah metode bertahap dengan benlox, klorok,
alkohol dan HgCl2 0,2%. Hasil percobaan menunjukkan penggunaan HgCl2 dalam
metode sterilisasi bertahap efektif sebagai sterilan benih sorgum. Kepekatan sterilan,
durasi perendaman dan jumlah benih yang disterilisasi perlu diperhatikan dan disesuaikan
agar sterilan tidak bersifat toksik bagi eksplan tanaman.

Radiasi terhadap pertumbuhan tunas in vitro menunjukkan reduksi panjang

kecambah dan akar. Radiasi pada sebagian planlet menyebabkan kematian
kecambah yang ditandai dengan browning pada akar. Penggunaan BAP tidak
menunjukkan yang pengaruh terhadap pertumbuhan tunas. Pengaruh BAP yang
terjadi adalah terhambatnya pertumbuhan jumlah dan panjang akar.

Analisis dan pengambilan sampel data untuk mutan sebaiknya dilakukan

dengan Student’s T-Test, sehingga apabila variasi dari setiap planlet diasumsikan
terjadi karena mutasi yang terjadi pada tanaman. Pengambilan dan penentuan
sampel perlu diperhatikan karena menentukkan hasil akhir normalitas data dan
data yang baik.

Faktor keberhasilan aklimatisasi sorgum adalah keadaan tanaman sehat,

akar sehat, minimal tinggi 0,5 cm, dan memiliki daun muda segar. Kematian
sorgum pada aklimatisasi terjadi karena lemahnya planlet, infeksi jamur, dan
hama.

4.2 Saran

Dalam dunia kerja sebagai peneliti, dasar penelitian seperti memahami dan
mengetahui metode dan teknik pengambilan data, penyusunan rancangan percobaan,
pemilihan parameter pengamatan, pembuatan tabel dan olah data, penarikan kesimpulan
dan analisis sangatlah diperlukan. Sehingga sangat disarankan matakuliah penunjang
seperti MIPKI, Rancangan Percobaan, dll telah dilaksanakan ataupun mahasiswa
diberikan arahan dan pembekalan yang mendalam terkait dunia kerja yang akan dijadikan
lokasi magang.

37
 DAFTAR PUSTAKA
D.BS, V. (2012). Micropropagation of Dracaena sp. Biotechnology in agriculture and
forestry 40, High-tech. and Micropropagation VI Springer , 1997131146 .
Das, M. P., L. , J., S., S., & Chatt, S. (2012). Study on the effect of mercury (II) chloride
as disinfectant on mixed culture. Journal of Chemical and Pharmaceutical
Research, 4(12):4975-4978.
Dwiyani, R. (2015). Kultur Jaringan Tanaman . Denpasar: Pelawasari.

38
Grossman, M., Freebon, J., Scoggins, H., & Latimer, J. (2012). Benzyladenine Increases
Branching but Reduces Root Growth of Herbaceous Perennial Liners. American
Society for Horticultural Science, 1085-1090.
Lestari, D. E. (2008). Kultur Jaringan. Bogor: Akademia.

Liu, Z., Goto, Y., & Nishiyama, I. (2000). Effects of Benzylaminopurine on Shoot and Root
Development and Growth of Rice (cv. North Rose) Grown Hydroponically with
Different Nitrogen Forms. Plant Production Science, 349-353.

Nur, A., Syahruddin, K., & Herawati. (2015). PENGARUH RADIOSENSIVISITAS IRADIASI
SINAR GAMMA TERHADAP PERKEMBANGAN KECAMBAH DAN PERTUMBUHAN
VEGETATIF TANAMAN M1 SORGUM MANIS (Sorghum bicolor L.). Prosiding
Seminar Nasional Serealia (hal. 131-139). Sulawesi Selatan: Balai Penelitian
Tanaman Serealia.

Plant Breeding and Genetics Section International Atomic Energy Agency. (2002). Low
cost options for tissue culture technology in developing countries. FAO/IAEA
Division of Nuclear Techniques in Food and Agriculture (hal. 102). Vienna:
International Atomic Energy Agency.

R., d. F. (1976). Tissue culture for plant propagation. Armidale: University of New
England.

Saad, A. I., & Elshashed, A. M. (2012). Plant Tissue Culture Media. Intechopen.

Sezdi, M., & Yoleri, G. (2014). STERILIZATION PERFORMANCE OF AUTOCLAVE UNITS ON

CANNULAR. Biomedical Engineering: Applications, Basis and Communications, Vol.
26, No. 3, 1450037 (9 pages).
Sultana, D. Y. (2007). PHARMACEUTICAL MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY,
Sterilization Methods and Principles. New Delhi: Dept. of Pharmaceutics Faculty of
Pharmacy Jamia Hamdard Hamdard Nagar.

Tamami, D. (2013). Keragaman dan Cara Eleminasi pada Kegiatan Kultur jaringan.
Prosiding Temu Teknis Jabatan Fungsional Non Peniliti (hal. 101-105). Bogor:
Balai Penelitian dan Pengembangan Pertanian .

Sihono, Wijaya, M. I dan Soeranto Human. 2010. Perbaikan Kualitas Sorgum Manis
Melalui Teknik Mutasi untuk Bioetanol. ISBN : 978-979-8940-29-3. Jakarta
Selatan : Prosiding Pekan Serealia Nasional.

Surya, M. Imam dan Soeranto R. 2006. PENGARUH IRADIASI SINAR GAMMA TERHADAP
PERTUMBUHAN SORGUM MANIS (Sorghum bicolor L.). Depok : Risalah Seminar
Ilmiah Aplikasi lsotop don Radiasi

Subagio, Herman dan Muh. Aqil. 2014. Perakitan dan Pengembangan Varietas Unggul
Sorgum untuk Pangan, Pakan, dan Bioenergi. Maros : Balai Penelitian Tanaman
Serealia.

Sumarno, et.al. 2013. Jurnal Sorgum : Inovasi Teknologi dan Pengembangan. Jakarta :
Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian Kementerian Pertanian.

39
Sirappa, M.P. 2003. PROSPEK PENGEMBANGAN SORGUM DI INDONESIA SEBAGAI
KOMODITAS ALTERNATIF UNTUK PANGAN, PAKAN, DAN INDUSTRI, 22(4).
Sulawesi Selatan : Jurnal Litbang Pertanian.

Sentra Informasi Keracunan Nasional (SIKerNas). 2012. BENOMIL. Jakarta : Pusat

Informasi Obat dan Makanan, Badan POM RI.

LAMPIRAN

40
Lampiran 1 Lembar Pengesahan

Lampiran 2 Logbook Magang

LOGBOOOK MAGANG

41
Nama : Qurrota Aini
NPM : 150510170187
Tempat Magang : Laboratorium Kelompok Peneliti
Biologi Sel & Jaringan, Balai Besar
Bioteknologi dan Genetika Pertanian (BB
BIOGEN)
Dosen Pembimbing Akademik : Santika Sari, S.P., M.P.
Dosen Pembimbing Lapangan : Prof. Dr. Endang Gati L., M.Si

NO TANGGAL KEGIATAN PARAF

1 Kamis, 02 Januari Perkenalan dan pemberian arahan magang oleh
2020 Ibu Suci Rahayu, S.Si., MS., selaku Bagian
Administratif Magang Kelti Biologi Sel Jaringan, BB
Biogen dan Prof. Dr. Endang Gati L., M.Si selaku
Pembimbing Lapangan
Mengamati dan membantu pembuatan media
kultur (MS VMW)
2 Jum’at, 03 Pemberian arahan terkait sistem dan pelaksanaan
Januari 2020 magang oleh Ibu Suci Rahayu, S.Si., MS.
Bimbingan topik magang oleh Prof. Dr. Endang
Gati L., M.Si
Membantu persiapan pembuatan media kultur :
Mencuci botol kultur
Penjelasan dan arahan oleh Pak Wawan Setiawan
selaku penanggung jawab laboratorium tentang
laboratorium kultur jaringan: SOP, Pembuatan
media, Larutan stok, dll
3 Senin, 06 Januari Pengamatan dan pengambilan data kultur in vitro
2020 penyimpanan Ludwigia sp.
Membantu pembuatan media kultur
1. MS + IBA 0,5 + BAP 0,3 + PVP
2. MS + BA 5 + 2,4-D 0,1 + arang aktif 2 gr/l
3. MS + BA 5 + 2,4-D 1,0 + arang aktif 2 gr/l
4. MS + BA 5 + 2,4-D 100 + arang aktif 2 gr/l

42
 5. MS + BA 5 + arang aktif 2 gr/l
4 Selasa, 07 Januari Membantu persiapan pembuatan media kultur :
2020 Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur
Membantu pengamatan dan pengambilan data
kultur in vitro penyimpanan Ludwigia sp. varietas
Red Malang dengan perlakuan berbagai
konsentrasi BA dan Paclobutrazol (10 perlakuan)
5 Rabu, 08 Januari Membantu persiapan pembuatan media kultur :
2020 Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur
Membuat media kultur :
1. MS
2. MS + VMW + KH2PO4 + 2,4-D 0,1 + BA 3
3. MS + VMW + BAP 0,1
4. MS + VMW + kinetin 0,01
Membantu sterilisasi eksplan jeruk nipis (biji dalam
buah)
6 Kamis, 09 Membantu membuat media kultur :
Januari 2020 1. MS + VMW
2. MS + BAP 2 + NAA 0,5
3. MS + BAP 4 + NAA 0,5
Membantu sterilisasi eksplan jeruk nipis (biji dalam
buah)
7 Jum’at, 10 Membantu membuat media kultur :
Januari 2020 1. MS + VMW + 2,4-D 0,1
2. MS + NaCl 50
3. MS + NaCl 100
4. MS + NaCl 150
5. MS + NaCl 200
6. MS + VMW cair
7. MS + VMW
8. MS
Mencari literatur di Perpustakaan BB Biogen
8 Senin, 13 Membantu persiapan pembuatan media kultur :
Januari 2020 Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur

43
 Membuat media kultur :
1. MS petridish
2. MS (Fe x2 tanpa EDTA)
3. MS (Fe x3 tanpa EDTA)
9 Selasa, 14 Januari Membuat media kultur :
2020 1. MS petridish
2. MS + BAP 0,1
Melakukan sterilisasi benih sorgum (2 perlakuan)
Melakukan kultur eksplan sorgum
Membantu subkultur eksplan jeruk nipis
10 Rabu, 15 Membantu membuat media MS + VMW + BAP 3 +
Januari 2020 ekstra malt
Membuat aquades steril
Melakukan sterilisasi benih sorgum (2 perlakuan)
11 Kamis, 16 Januari Membantu membuat media kultur :
2020 1. MS + VMW
2. MS + CH3 3 + 2,4-D 1
3. MS + CH3 3 + 2,4-D 3
4. MS + CH3 3 + 2,4-D 5
5. MS + BAP 2 + NAA 0,5
6. MS + BAP 4 + NAA 0,5
Membantu persiapan pembuatan media kultur :
Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur
12 Jum’at, 17 Pengamatan kultur sorgum perlakuan sterilisasi
Januari 2020 Persiapan eksplan sorgum varietas Super 2
Membuat media kultur :
1. MS
2. MS + BAP 0,1
13 Senin, 20 Januari Pengamatan kultur sorgum perlakuan sterilisasi
2020 Melakukan sterilisasi benih sorgum (2 perlakuan)
Penanaman eksplan sorgum varietas numbu
perlakuan sterilisasi
Membantu persiapan pembuatan media kultur :
Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur
Membantu membuat media kultur :

44
 1. MS
2. MS + VMW
3. MS +CH3 3 + 2,4-D 5
14 Selasa, 21 Januari Membantu persiapan pembuatan media kultur :
2020 Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur
Membuat media kultur :
1. MS
2. MS + IBA 0,1
3. MS + VMW
4. MS + VMW + arang aktif 2 gr/l
Melakukan sterilisasi benih sorgum (2 perlakuan)
Pengamatan kultur sorgum perlakuan sterilisasi
15 Rabu, 22 Januari Membuat media kultur MS + VMW
2020 Pengamatan kultur sorgum perlakuan sterilisasi
16 Kamis, 23 Januari Membuat media kultur :
2020 1. MS
2. MS + 2,4-D 3 + CH3 3
Pengamatan kultur sorgum perlakuan sterilisasi
17 Jum’at, 24 Membuat media kultur :
Januari 2020 1. MS + VMW
2. MS + VMW + arang aktif 2 gr/l
3. MS + 2,4-D 3 + CH3 3 + CeFO 250 mg
4. MS + BA 2 + NAA 0,5 + CeFO 250 mg
5. MS + BA 4 + NAA 0,5 + CeFO 250 mg
Pengamatan kultur sorgum perlakuan sterilisasi
18 Senin, 27 Januari Pengamatan kultur sorgum perlakuan sterilisasi
2020
19 Selasa, 28 Januari Membantu persiapan pembuatan media kultur :
2020 Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur
Sterilisasi sorgum varietas Super 2 dengan metode
N6 (hasil terbaik sterilisasi numbu)
20 Rabu, 29 Januari Pengamatan kultur sorgum perlakuan sterilisasi
2020 Membantu persiapan pembuatan media kultur :
Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur

45
21 Kamis, 30 Januari Subkultur mutan sorgum pada media MS dan MS +
2020 BAP 0,1
22 Jum’at, 31 Jum’at bersih : sterilisasi alat, membersihkan rak
Januari 2020 penyimpanan kultur, membersihkan ruang kultur
Aklimatisasi sorgum varietas Numbu perlakuan
sterilisasi di rumah kaca
23 Senin, 03 Pengamatan mutan sorgum varietas Super 2
Februari 2020
24 Selasa, 04 Membuat media kultur :
Februari 2020 1. MS
2. MS + BAP 0,1
3. MS + BAP 0,3 + IBA 0,5 + PVP 0,1
Subkultur sorgum perlakuan radiasi kontrol pada
media MS
25 Rabu, 05 Februari Membantu persiapan pembuatan media kultur :
2020 Mencuci botol kultur dan mengoven botol kultur
Pengamatan dan pengambilan foto sorgum
perlakuan radiasi dan media
26 Kamis, 06 Pengamatan sorgum perlakuan radiasi dan media
Fabruari 2020
27 Jum’at, 07 Pengamatan aklimatisasi sorgum varietas numbu
Februari 2020 Jum’at bersih : sterilisasi alat, membersihkan rak
penyimpanan kultur, membersihkan ruang kultur
28 Senin, 10 Aklimatisasi mutan sorgum varietas Super 2
Februari 2020 perlakuan media BAP 0,1
Pengamatan awal planlet sorgum untuk
aklimatisasi
29 Selasa, 11 Pengamatan 7 HST sorgum varietas Super 2 MS
Februari 2020 tanpa radiasi
Subkultur sorgum varietas super 2 perlakuan
radiasi media BAP 0,1 ke media MS dengan tujuan
menguji hipotesis recovery pertumbuhan dan
perkembangan planlet sorgum
Pengamatan awal hasil subkultur mutan sorgum

46
 varietas Super 2 media BAP 0,1 ke MS
Membuat media kultur MS IBA 0,1
30 Rabu, 12 Februari Mencuci botol dan melakukan tahap sterilisasi alat
2020 kultur
Subkultur sorgum varietas super 2 perlakuan
radiasi ke media perakaran (IBA 0,1)
Memilih planlet sorgum varietas super 2 media MS
untuk keperluan aklimatisasi
31 Kamis, 13 Aklimatisasi sorgum varietas super 2 perlakuan
Februari 2020 radiasi MS 0
Membuat larutan IBA 0,1 dalam sprayer untuk
disemprotkan pada tanaman hasil aklimatisasi
sorgum agar memicu pengaktifan akar
32 Jum’at, 14 Pengamatan kultur sorgum varietas super 2
Februari 2020 perlakuan radiasi
Mencuci botol dan melakukan tahap sterilisasi alat
kultur
Bimbingan dan konsultasi penulisan laporan
magang
33 Senin, 17 Pengamatan kultur sorgum varietas super 2
Februari 2020 perlakuan radiasi dan pengambilan foto
34 Selasa, 18 Membuat media kultur :
Februari 2020 1. MS
2. MS + BAP 0,1
Pengamatan subkultur sorgum varietas super 2
perlakuan radiasi ke media IBA 0,1
35 Rabu, 19 Februari Aklimatisasi sorgum varietas super 2 perlakuan
2020 radiasi
Pengambilan foto subkultur sorgum varietas super
2 perlakuan radiasi media IBA 0,1
36 Kamis, 20 Aklimatisasi sorgum varietas super 2 perlakuan
februari 2020 radiasi
Pengamatan sorgum hasil aklimatisasi perlakuan
radiasi

47
 37 Jum’at, 21 Pengamatan sorgum aklimatisasi perlakuan radiasi
Februari 2020 media B 0,1
Melakukan tahap sterilisasi alat : mencuci botol
38 Senin, 24 Melakukan tahap sterilisasi alat : mencuci botol
Februari 2020 Menulis laporan magang
39 Selasa, 25 Pengamatan sorgum aklimatisasi perlakuan radiasi
Februari 2020 Menulis laporan magang
Mempersiapkan eksplan sorgum merah
40 Rabu, 26 Februari Membuat media petri MS
2020 Pengamatan sorgum media IBA 0,1
41 Kamis, 27 Menulis laporan magang
Februari 2020 Mencuci botol kultur
42 Jum’at, 28 Menyelesaikan administrasi magang
Februari 2020
43 Senin, 02 Menyelesaikan administrasi magang
Februari 2020 Sterilisasi sorgum merah

Lampiran 3. Dokumentasi

Wawancara penelitian oleh abdurrahman

monis (Mahasiswa S3 Universiti Malaya)
tentang hubungan ketentuan hukum Allah
dalam Al-Qur’an terhadap penelitian pertanian
Kanan : Qurrota Aini
Tengah : Prof. Endang Gati Lestari
Foto bersama mahasiswa penelitian,
Kiri : Abdurrahman Monis
mahasiswa magang dan penanggung jawab
lab (Bapak Joko) Laboratorium Biologi Sel dan
Jaringan, BB Biogen

48