Translated from English to Vietnamese - www.onlinedoctranslator.

com

Tạp chí Ung thư Anh (2003) 88, 1587 - 1591& 2003 Nghiên cứu Ung
thư Vương quốc Anh Bảo lưu mọi quyền 0007 - 0920/03 $ 25,00

www.bjcancer.com

Thỏa thuận giữa sắc tố tại chỗ hybridisation (CISH) và FISH

trong việc xác định tình trạng HER2 trong ung thư vú
--
-
-
- L Arnould *, 1, Y Denoux2, G MacGrogan3, F Penault-Llorca4, M Fiche5, Tôi Treilleux6, MC Mathieu7, Một
-
- Vincent-Salomonsố 8, MO Vilain9 và J Couturiersố 8
-
-
- 1Khoa Bệnh lý, Trung tâm GF Leclerc, 1 rue Pr Marion, 21034 Dijon cedex, Pháp; 2Khoa Bệnh lý, Trung tâm F Baclesse, Caen, Pháp;
-
- 3Institut Bergognie, Bordeaux, Pháp; 4Trung tâm J Perrin, Clermont-Ferrand, Pháp; 5Hôpital G et R Laennec, Nantes, Pháp; 6Trung tâm L Berard, Lyon,
-
- Pháp; 7Viện G Roussy, Villejuif, Pháp; số 8Institut Curie, Paris, Pháp; 9Centre O Lambret, Lille, Pháp
- Tất cả các tác giả đều là thành viên của Groupe d'Etude des Facteurs de Pronostic Immunohistochimiques dans les Cancers du Sein, Fédération Nationale
-
- des Centers de Lutte Contre le Cancer, 101 rue de Tolbiac, Paris, Pháp
-
-
-
-
-
-
- Việc xác định tình trạng HER2 / neu (HER2) trong ung thư biểu mô vú đã trở nên cần thiết để lựa chọn bệnh nhân ung thư vú cho liệu pháp
-
- trastuzumab. Khuếch đại gen được phân tích bằng huỳnh quangtại chỗ lai hóa (FISH) hoặc biểu hiện quá mức của protein được xác định bằng
-
- hóa mô miễn dịch (IHC) là hai phương pháp chính để thiết lập tình trạng này. Một mối tương quan chặt chẽ đã được chứng minh trước đây giữa
-
- hai phương pháp này. Tuy nhiên, FISH không phải lúc nào cũng khả thi trong thực hành thông thường và các khối u IHC dương tính yếu (2NS)
-
- không phải lúc nào cũng tương ứng với sự khuếch đại gen. Nghiên cứu của chúng tôi được thực hiện để đánh giá sự đóng góp của chất tạo màu
-
- tại chỗ hybridisation (CISH), cho phép phát hiện các bản sao gen thông qua phản ứng immunoperoxidase. CISH đã được thực hiện ở 79 ca ung
-
- thư vú mà tình trạng HER2 đã được xác định trước đó bởi IHC và FISH. Kết quả IHC, FISH và CISH được so sánh cho từng khối u. Quy trình CISH đã
-
- thành công trong 95% trường hợp của chúng tôi. Dù kết quả IHC ra sao, chúng tôi đã tìm thấy sự tương đồng rất tốt (96%) giữa CISH và FISH.
-
- Nghiên cứu của chúng tôi xác nhận rằng CISH có thể là một thay thế cho FISH để xác định tình trạng khuếch đại gen trong 2NS các khối u. Kết
-
-
- quả của chúng tôi cho phép chúng tôi nghĩ rằng, trong nhiều phòng thí nghiệm, CISH cũng có thể là một phương pháp tuyệt vời để hiệu chỉnh
-
- các quy trình IHC hoặc, như một thử nghiệm kiểm soát chất lượng, để kiểm tra thường xuyên xem tín hiệu IHC có phù hợp với trạng thái gen hay
-
- không.
-
- Tạp chí Ung thư của Anh (2003) 88, 1587 - 1591. doi: 10.1038 / sj.bjc.6600943 www.bjcancer.com& 2003 Nghiên cứu
-
- Ung thư Vương quốc Anh
-
-
Từ khóa: ung thư vú; HER2; khuếch đại gen; CÁ; CÁ; hóa mô miễn dịch

Việc xác định tình trạng HER2 hiện đã trở nên quan trọng trong lâm sàng et al, Năm 1997; Bartlettet al, Năm 2001; Tubbset al, Năm 2001). Vì lý do
với sự ra đời của liệu pháp kháng HER2, thuốc kháng p185 tái tổ hợp nhân này, và đặc biệt là ở Châu Âu, xác nhận về sự khuếch đại gen HER2 của FISH
tính.Her-2 / neu kháng thể trastuzumab (HerceptinNS) (Pegram et al, Năm 1998; đã trở thành bắt buộc đối với bệnh nhân được đưa vào thử nghiệm lâm

Xe trượt tuyếtet al, Năm 1999; Đóng sầm cửaet al, Năm 2001).
Hóa mô miễn dịch (IHC) được kỳ vọng là phương pháp tốt nhất để
xác định tình trạng HER2, vì IHC đánh giá mức độ biểu hiện quá mức
của HER2, là mục tiêu của HerceptinNS liệu pháp. Hơn nữa, việc bệnh
nhân lựa chọn HerceptinNS liệu pháp chủ yếu dựa trên IHC vì các
nghiên cứu trước đây đã chứng minh mối tương quan tốt giữa kết quả
IHC và tình trạng gen, được xác định bằng huỳnh quang tại chỗ
hybridisation (FISH) (Pegram et al, Năm 1998; Jacobset al, 1999, 2000;
Couturieret al, Năm 2000; Jimenezet al, Năm 2000; Lebeauet al, Năm
2001; Lehret al, Năm 2001). Tuy nhiên, việc phát hiện HER2-IHC bị chỉ
trích vì thiếu khả năng tái lập liên phòng và hơn nữa, HerceptestNS,
một phương pháp IHC chuẩn hóa, đã được chứng minh là một phương
pháp có độ nhạy quá mức khi so sánh với FISH (Người et al, Năm 1997;
Bartlettet al, Năm 2001; Tubbset al, Năm 2001). Mặc dù HER2 biểu hiện
quá mức mà không cần khuếch đại gen đã được báo cáo trong 2,9–
8,3% trường hợp (Kallioniemiet al,Năm 1992; Ngườiet al, Năm 1997;
Couturieret al, Năm 2000; Jimenezet al, Năm 2000; Paulettiet al, 2000),
kết quả trái ngược giữa IHC và FISH chủ yếu được quan sát đối với các
khối u được cho điểm 2NS bởi IHC (Người
Di truyền và gen
sàng sử dụng HerceptinNS, khi khối u tương ứng được cho điểm 2NS bởi
IHC (Hoàng et al, Năm 2000; Ridolfiet al, Năm 2000; Diaz, 2001; Tubbset al,
Năm 2001; Vogelet al, Năm 2002).
Một số tác giả nhận thấy rằng trạng thái HER2 được xác định bởi FISH có
khả năng tái tạo cao hơn (Báo chí et al, Năm 1994; Ngườiet al, Năm 1997;
Bartlettet al, Năm 2001; Tubbset al, Năm 2001). Do đó, các tác giả này nghĩ
rằng FISH phải được đề xuất như là phương pháp duy nhất để chọn bệnh
nhân cho HerceptinNS. Tuy nhiên, FISH là một thủ tục dài và tốn kém, đòi hỏi
nhân viên được đào tạo và kính hiển vi huỳnh quang.
Chromogenic tại chỗ hybridisation (CISH) là một kỹ thuật được giới
thiệu gần đây, trong đó mẫu dò DNA được phát hiện bằng cách sử
dụng phản ứng immunoperoxidase (Tanner et al, 2000). Phương pháp
này rất gần với FISH nhưng không cần sử dụng kính hiển vi huỳnh
quang. Hơn nữa, tín hiệu FISH mờ dần trong vòng vài tuần và kết quả
FISH phải được ghi lại bằng hệ thống kỹ thuật số đắt tiền. Đây không
phải là trường hợp nhuộm CISH. Do sự tương đồng với phương pháp
nhuộm IHC, CISH cũng dễ hiểu hơn đối với các nhà bệnh lý học không
được đào tạo về chất huỳnh quang. Trong một nghiên cứu (Tanneret
al, 2000), CISH đã được chứng minh là có tương quan tốt với FISH.

Mục đích của nghiên cứu của chúng tôi là: (a) xác nhận mối tương quan tốt
* Thư từ: Tiến sĩ L Arnould; E-mail: larnould@dijon.fnclcc.fr Nhận ngày 4 tháng 7 năm giữa FISH và CISH trong một loạt các khối u vú không đồng
2002; sửa đổi ngày 31 tháng 1 năm 2003; chấp nhận ngày 5 tháng 3 năm 2003 nhất đến từ tám phòng thí nghiệm khác nhau sử dụng
 CISH trong việc xác định tình trạng gen HER2
L Arnould et al

1588
quy trình cố định, (b) phân tích mối tương quan này theo sự biểu hiện
của protein HER2 được phân tích bởi IHC (c) tập trung vào IHC 2NScác
trường hợp và phân tích trong tình huống này nếu CISH cung cấp
thông tin giống như FISH để điều trị bệnh nhân.

NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

Khối u
Tổng cộng có 79 khối u được thu thập từ tám phòng thí nghiệm của
Pháp. Mỗi phòng thí nghiệm chọn các trường hợp mà IHC và FISH đã
được thực hiện trước đó và thành công. Để phân tích sức mạnh phân
biệt của CISH trong những trường hợp khó khăn, các khối u đã cho
điểm là 2NS bởi IHC đã được ưu tiên lựa chọn cho nghiên cứu này. Do
sự khác biệt trong quy trình cố định giữa các phòng thí nghiệm, 47
khối u đã được cố định trong formalin đệm trung tính, 10 khối u trong
bouin của Holland và 22 khối u trong cồn-formalin-axit axetic (AFA).

IHC
Kháng thể đơn dòng CB11 (Novocastra, Newcastle, Anh) được sử dụng
trong 25 trường hợp và kháng thể đa dòng A485 (Dako, Glostrup, Đan
Mạch) trong 44 trường hợp. Đối với tất cả các slide, nhuộm miễn dịch được
chấm điểm theo HerceptestNS hệ thống tính điểm, cũng được sử dụng trong
các thử nghiệm lâm sàng (Cobleigh et al, Năm 1999; Đóng sầm cửaet al,
Năm 2001). Sự tiêu cực của các tuyến bình thường là điều kiện tiên quyết để
giải thích các trường hợp, theo khuyến nghị của Trường Cao đẳng Bệnh học
Hình 1 (MỘT) CISH, chỉ một hoặc hai tín hiệu hiện diện trong hạt nhân của
Hoa Kỳ (Fitzgibbonset al, 2000).
tế bào khối u (NAC). (NS) Trường hợp tương tự được phân tích với FISH (NAF). Các
chấm màu hồng tương ứng với đầu dò HER2 và các chấm màu xanh lá cây tương
CÁ ứng với đầu dò tâm động 17. (NS) CISH, sáu tín hiệu có trong nhân của tế bào
khối u (LAC). (NS) Trường hợp tương tự được phân tích với FISH (LAF) với tỷ lệ
FISH được thực hiện trong ba phòng thí nghiệm giới thiệu khác điểm HER2 / tâm động 17 điểm ¼3. (E) CISH, các cụm sao chép gen lớn có trong
nhau. Nó được thực hiện trên các phần khối u đông lạnh trong 65 nhân của tế bào khối u (HAC). (NS) Trường hợp tương tự được phân tích với FISH
(HAF).
trường hợp và trên các mẫu nhúng cố định trong 14 trường hợp
còn lại. Các thí nghiệm FISH được thực hiện theo quy trình do nhà
cung cấp đưa ra (bộ PathVysion, V thận, Downers Grove, IL hoặc
Ventana HER2 thông báo, Tucson, AZ). Đầu dò tâm động của KẾT QUẢ
nhiễm sắc thể số 17 được đưa vào phân tích FISH trong 62 trường
hợp. Trong 62 trường hợp này, sự khuếch đại HER2 được xác định Đánh giá nhuộm IHC, tín hiệu FISH và CISH được thực hiện
Di truyền và gen

là tỷ lệ giữa số lượng tín hiệu tâm động HER2 và nhiễm sắc thể 17.
Như trong nghiên cứu đã xuất bản trước đây (Tanneret al, 2000),
tỷ lệ o2 được xác định là không có khuếch đại với FISH (NAF) (Hình
1B), từ 2 đến 5 là khuếch đại mức thấp với FISH (LAF) (Hình 1D) và
những 45 như khuếch đại mức cao với FISH (HAF) (Hình 1F). Trong
14 trường hợp khác, không có phân tích tâm động 17, giống như
đối với phân tích CISH trong nghiên cứu được công bố trước đây
(Tanneret al, 2000), gen HER2 được đánh giá là NAF khi có 1–5 tín
hiệu trên mỗi nhân. Khi có 6–10 tín hiệu trong hơn 50% nhân tế
bào khối u, khối u được đánh giá là LAF. Cuối cùng, các khối u có
hơn 10 tín hiệu trong hơn 50% nhân được đánh giá là HAF.
một cách mù quáng.
IHC
Tổng số 27 (34%) khối u được xác định là 0 hoặc 1NS, 29 (37%)
khối u được xác định là 2NS, và 23 (29%) khối u còn lại được
xác định là 3NS (Bảng 1).
CÁ
Do vật liệu được chọn cho nghiên cứu này, phân tích FISH nhất
thiết phải thành công trong mọi trường hợp. Tổng cộng, 41 khối u
được xác định là NAF, 11 khối u là LAF và 26 khối u là HAF (Bảng 1).

CISH
Các thí nghiệm CISH được thực hiện theo quy trình do nhà
cung cấp đưa ra (Zymed Inc., Nam San Francisco, CA, Hoa Kỳ).
Việc giải thích tín hiệu đã được các tác giả khác sử dụng
(Tanneret al, 2000) và chỉ được thực hiện trên các mô hình
khối u xâm lấn. Gen HER2 được đánh giá là không đơn giản
với CISH (NAC) khi có 1–5 tín hiệu trên mỗi nhân (Hình 1A). Khi
có 6–10 tín hiệu trong hơn 50% nhân tế bào khối u, các khối u
được đánh giá là có mức độ thấp mức độ khuếch đại với CISH
(LAC) (Hình 1C). Cuối cùng, các khối u có hơn 10 tín hiệu hoặc
với các cụm sao chép gen lớn trong hơn 50% nhân được đánh
giá là có mức độ khuếch đại gen HER2 (HAC) cao (Hình 1E).
CISH
CISH đã thành công ở 75 trong số 79 khối u (94,9%). Bốn trường hợp không
có tín hiệu (WS) tương ứng với bốn trong số 22 khối u được cố định trong
AFA. Ở những khối u này, mặc dù đã sử dụng nhiều phương pháp tiền xử lý
khác nhau, nhưng không có tín hiệu nào xuất hiện trong bất kỳ tế bào khối
u nào. Tổng cộng, 39 khối u được xác định là NAC, chín khối u là LAC và 27
khối u là HAC (Bảng 1).
So sánh kết quả CISH và FISH
Chỉ có 75 khối u có sẵn để so sánh này (Bảng 1). Khi chúng tôi so
sánh tất cả các bộ khuếch đại CISH (LACNSHAC) cho tất cả

Tạp chí Ung thư Anh (2003) 88 (10), 1587 - 1591 & 2003 Nghiên cứu Ung thư Vương quốc Anh

Khuếch đại FISH (LAFNSHAF), một thỏa thuận được tìm thấy ở 72
trong số 75 (96%) khối u (Bảng 3). Hệ số kappa (k)đo lường thỏa
thuận giữa các phương pháp (0: không thỏa thuận, 1: thỏa thuận)
là 0,97 (Po10-9), và nếu FISH được chọn làm tiêu chuẩn vàng, thì độ
nhạy của CISH sẽ gần 97% với độ đặc hiệu là 95%. Trong các khối
u IHC không có vấn đề (0, 1NS và 3NS), thỏa thuận này được tìm
thấy trong 46 trong số 47 (98%) trường hợp(k¼0,95 (Po10-9), sự
nhạy cảm ¼95% và độ đặc hiệu¼100%). Mặt khác, trong các khối u
có vấn đề (2NS), thỏa thuận này được tìm thấy trong 26 trong số
28 (92,8%) trường hợp (k¼0,85 (Po5 10-6), sự nhạy cảm¼ 100% và
độ đặc hiệu ¼85%). Khi chúng tôi so sánh mức độ khuếch đại được
xác định với hai phương pháp, 70 trên 75 (93,3%) đã thống nhất
đượck¼0,88(Po10-9).
Phân tích các trường hợp đa bội nhiễm sắc thể số 17
Các đầu dò tâm động của nhiễm sắc thể 17 đã được đưa vào phân tích FISH
ở 61 trong số 75 trường hợp được phân tích thành công với CISH. Kết quả
phân tích tâm động này được tóm tắt trong Bảng 2. Sử dụngw2 kiểm tra,
chúng tôi nhận thấy rằng polysomy là tĩnh (Po0,005) được quan sát thường
xuyên hơn trong IHC 2NS khối u (10 trên 16: 62,5%) so với các tình huống
khác (7 trên 45: 15,55%).
THẢO LUẬN
Kể từ khi FDA phê duyệt HerceptinNS để điều trị ung thư vú di
căn (Pegram et al, Năm 1998; Xe trượt tuyếtet al,
Bảng 1 Khuếch đại gen HER2 được xác định bởi FISH và CISH, theo sự
biểu hiện quá mức của protein HER2 được xác định bởi IHC
IHC
0 hoặc 1+ 2+
(N¼27) (N¼29)
CÁ 27 NAF 14 NAF 11 LAF 4 HAF
CISH 25 NAC 12 NAC 8 LAC 4 HAC
2 WS 1 LAC 2 HAC
1 HAC 1 WS
NAF ¼ không có khuếch đại với FISH; KHÔNG CÓ NGHĨA¼ mức độ khuếch đại thấp với
FISH; HAF¼ mức độ khuếch đại cao với FISH; WS¼không có bất kỳ tín hiệu nào; NAC¼
CISH trong việc xác định tình trạng gen HER2L
Arnould et al
1589
Năm 1999; Roche và Ingle, 1999; Đóng sầm cửaet al, 2001), và để xác định
bệnh nhân nào có thể được hưởng lợi từ liệu pháp mới này, cần phải đánh
giá chính xác tình trạng HER2 của các mẫu bệnh phẩm ung thư vú. Việc xác
định tình trạng này cũng sẽ rất quan trọng để lựa chọn chiến lược bổ trợ
nếu các thử nghiệm lâm sàng bao gồm HerceptinNS vì liệu pháp bổ trợ cho
kết quả dương tính (Hortobagyi và Perez, 2001). Hơn nữa, trong tương lai,
tình trạng HER2 cũng có thể giúp lựa chọn bệnh nhân cho liệu pháp ức chế
tyrosine kinase (Moasseret al, Năm 2001). Hai phương pháp chính (IHC và
FISH) để xác định tình trạng HER2 này đã được phát triển trên khắp thế giới
nhưng cho đến nay vẫn chưa có sự đồng thuận về các phương pháp tốt
nhất để xác định tình trạng này (Thor, 2001). Trong hai thử nghiệm lâm
sàng khác nhau gần đây, đã phát hiện thấy sự phù hợp kém giữa xét
nghiệm IHC địa phương và trung ương hoặc xét nghiệm IHC tham chiếu
cho HER2 (Paiket al, Năm 2002; Rocheet al, Năm 2002). Sự phù hợp kém này
được đưa ra, các tác giả của các nghiên cứu này khuyến cáo rằng tình trạng
HER2 của bệnh nhân được đưa vào các thử nghiệm lâm sàng nên được thực
hiện trong các phòng thí nghiệm tham chiếu khối lượng lớn. Những dữ liệu
này cũng cho thấy nhu cầu cấp thiết phải cải thiện chương trình kiểm soát
chất lượng trong các phòng thí nghiệm sử dụng thử nghiệm IHC
(Fitzgibbonset al, Năm 2000; Hoànget al, Năm 2000; Ridolfiet al,Năm 2000;
Tubbset al, Năm 2001; Paiket al, Năm 2002; Rocheet al, Năm 2002; Vogelet
al, Năm 2002). Trong một nghiên cứu trước đây, chúng tôi đã chỉ ra rằng
FISH có thể được sử dụng để hiệu chuẩn thành công kỹ thuật IHC nội bộ
(Vincent-Salomonet al, 2003).
CISH, một quy trình lai tạo sử dụng nhuộm mẫu dò tương tự
như nhuộm IHC, trước đây đã được đề xuất như một phương
pháp thay thế cho FISH (Thuộc da et al, 2000). Khi so sánh với
FISH, CISH được mô tả là có một số ưu điểm (Thuộc daet al, Năm
2000; Zhaoet al, Năm 2002). Nó không yêu cầu một kính hiển vi
huỳnh quang đắt tiền với các bộ lọc đa dải, nhuộm CISH là vĩnh
viễn và nó không cần phải được ghi lại bằng một máy ảnh CDD
đắt tiền. Hơn nữa, hình thái học được phân tích dễ dàng hơn trên
các slide CISH, đặc biệt để phân biệt các tế bào ung thư xâm lấn và
tại chỗ các thành phần. Cuối cùng, các nhà nghiên cứu bệnh học
quen thuộc với tín hiệu IHC hơn là tín hiệu FISH. Ưu điểm và
3+ nhược điểm của hai kỹ thuật lai này được tóm tắt trong Bảng 3.
(N¼23)
Để xác nhận kết quả của nghiên cứu này và xác định vị trí của kỹ
1 NAF 22 HAF thuật này trong các trường hợp IHC có vấn đề (2NS), chúng tôi đã thực
hiện một nghiên cứu trên một nhóm 79 khối u vú có tỷ lệ phần trăm
1 NAC 20 HAC bất thường (37%) là 2NS. Nghiên cứu của chúng tôi cũng khác với
1 NAC nghiên cứu được công bố trước đó vì mô vú đến từ các phòng thí
1 WS
nghiệm cung cấp khác nhau sử dụng các chất cố định khác nhau. Quy
trình CISH thành công trong 95% trường hợp của chúng tôi, giống với
kết quả quan sát được với FISH trên các đoạn parafin (Lebeauet al,

Di truyền và gen
không có khuếch đại với CISH; LAC¼ mức độ khuếch đại thấp với CISH; HAC¼ mức độ 2001) và rất gần với kết quả (98%) được công bố với CISH trong một
khuếch đại cao với CISH. nhóm khối u không được chọn (Tanner et al, 2000). Nó có thể

ban 2 Phân tích các trường hợp có hoặc không có đa bội nhiễm sắc thể số 17

IHC

0 hoặc 1+ 2+ 3+
n¼24 n¼16 n¼21

Tình trạng nhiễm sắc thể 17 bình thường n¼18 n¼6 n¼20
CÁ 18 HAF 4 NAF 2 LAF 1 NAF 19 HAF
CISH 18 HAC 4 NAC 2 LAC 1 NAC 18
HAC
1 NAC

Đa bội nhiễm sắc thể 17 n¼6 n¼10 n¼1

CÁ 6 NAF 6 NAF 1 LAF 3 HAF 1 HAF
CISH 6 NAC 5 NAC 1 LAC 3 HAC 1 HAC
1 LAC

NAF ¼không có khuếch đại với FISH; KHÔNG CÓ NGHĨA¼ mức độ khuếch đại thấp với FISH; HAF¼ mức độ khuếch đại cao với FISH; WS¼
không có bất kỳ tín hiệu nào; NAC¼không có khuếch đại với CISH; LAC¼ mức độ khuếch đại thấp với CISH; HAC¼ mức độ khuếch đại cao với
CISH.

& 2003 Nghiên cứu Ung thư Vương quốc Anh Tạp chí Ung thư Anh (2003) 88 (10), 1587 - 1591
 CISH trong việc xác định tình trạng gen HER2
L Arnould et al

1590
bàn số 3 Ưu nhược điểm của CÁ và CÁ trường hợp trái ngược trong nghiên cứu của chúng tôi, được phát hiện
là khuếch đại với FISH nhưng không phải với CISH. Sự khác biệt khác
CÁ CISH cũng có thể là do sự khác biệt về vật liệu mẫu hoặc độ dày của các
Chuyên nghiệp Con trang trình bày. Các tình huống khó khăn nhất với CISH là khi có 6–10
K Khả năng có nhiều màu (HER2 K Không phát hiện nhiều màu điểm trong tế bào khối u. Phân tích FISH hai màu có thể cung cấp
và nhiễm sắc thể 17) nhiều thông tin hơn, đặc biệt là tỷ lệ giữa tín hiệu HER2 và số lượng
K Là đơn giản nhất, không có bất kỳ K Cần một quy trình tạo màu nhiễm sắc thể 17, và có thể tách biệt mức độ đa bội cao của nhiễm sắc
phát hiện sắc tố thể 17 và mức độ khuếch đại HER2 rất thấp. Chúng tôi nhận thấy rằng
K Hiện là tiêu chuẩn K Chưa phải là sự lai tạo tiêu chuẩn sự đa bội của nhiễm sắc thể số 17 tĩnh thường xuyên hơn trong IHC 2
quy trình lai hóa cho thủ tục cho HER2 NS các khối u, nhưng chỉ một trong những trường hợp bất hòa của
HER2 chúng tôi có thể liên quan đến hiện tượng này. Theo thông lệ, những
tình huống này rất hiếm khi xảy ra và nó không được chứng minh rằng
Con Chuyên nghiệp

K Yêu cầu hiện đại và đắt tiền K Một kính hiển vi thông thường là
sự khác biệt này có liên quan đến phản ứng với HerceptinNS
kính hiển vi huỳnh quang FISH không có hiệu lực
liệu pháp. Các thử nghiệm lâm sàng, bao gồm một số lượng lớn
K được sử dụng thường xuyên trong K Các nhà bệnh lý học quen thuộc với IHC 2NScác khối u có mức độ khuếch đại thấp, là cần thiết để xác
bệnh lý học và các nhà bệnh lý học Tín hiệu IHC nhận rằng mức độ khuếch đại gen HER2 chính xác là rất quan
không được đào tạo để phân tích các trọng để bệnh nhân lựa chọn liệu pháp cụ thể. Dù sao đi nữa, các
tín hiệu FISH quy trình CISH nhuộm hai màu, bao gồm đầu dò HER2 và nhiễm
K Tín hiệu huỳnh quang có thể mờ dần K Phản ứng tạo nhiễm sắc thể là
sắc thể 17, sẽ sớm ra mắt. Kết quả của các quy trình mới này cũng
trong vòng vài tuần dài hạn
sẽ phải được so sánh với phân tích CÁ hai màu.
K Kết quả phải được ghi lại với K Lưu trữ slide thông thường
một máy ảnh CCD đắt tiền Hình thái
Nghiên cứu của chúng tôi xác nhận rằng CISH có thể là một thay thế cho
K không phải lúc nào cũng dễ dàng K Hình thái học dễ phân tích hơn
để phân tích
FISH để xác định tình trạng gen HER2, đặc biệt là trong các phòng thí
nghiệm không được trang bị hoặc đào tạo từ các phân tích huỳnh quang.
Theo ý kiến của chúng tôi, CISH quá đắt và quá phức tạp để có thể thay thế
cho việc tầm soát IHC đối với tất cả các khối u ở vú. Tuy nhiên, do mối tương
nhận thấy rằng AFA dường như là một quy trình cố định ít hiệu quan tốt giữa CISH và FISH, ngay cả trong các kết quả IHC không rõ ràng,
quả hơn đối với CISH, vì CISH chỉ thành công ở 18 (82%) trong số chúng tôi nghĩ rằng nó có thể được sử dụng để xác định tình trạng khuếch
22 khối u được cố định trong AFA và thành công ở tất cả (100%) đại gen trong IHC 2NS các khối u. Do sự phù hợp kém giữa trạng thái HER2
khối u được cố định trong formalin đệm trung tính hoặc Holland's được thiết lập trong các phòng thí nghiệm địa phương so với các phòng thí
bouin. Chúng tôi đã tìm thấy một sự phù hợp rất tốt giữa CISH và nghiệm tham chiếu, chúng tôi cũng nghĩ rằng, trong nhiều phòng thí
FISH. Về khả năng khuếch đại, thực sự có một thỏa thuận giữa nghiệm, CISH có thể là một phương pháp tuyệt vời để hiệu chuẩn các quy
CISH và FISH trong 96% khối u, gần giống với thỏa thuận được trình IHC hoặc, như một phép thử kiểm soát chất lượng, để kiểm tra
công bố trước đây (93,6%) (Tanneret al, 2000). Thỏa thuận cao hơn thường xuyên rằng Tín hiệu IHC phù hợp với trạng thái gen.
một chút (98%) đối với không có vấn đề (0, 1NS, 3NS) Các trường
hợp IHC hơn là các trường hợp có vấn đề (2NS) Khối u IHC (93%).
Do số lượng nhỏ (3%) của 2NScác trường hợp trong nghiên cứu
của họ, Tanner et al đã không nhận thấy sự khác biệt nhỏ này. Về SỰ NHÌN NHẬN
độ nhạy, khi chúng tôi so sánh mức độ khuếch đại được ước tính
bởi hai phương pháp (không khuếch đại, mức thấp và mức khuếch Công việc này được hỗ trợ một phần bởi 'Ligue Bourguignonne
đại cao), chúng tôi nhận thấy rằng kết quả phân tích CISH rất gần Contre le Cancer'. Chúng tôi cảm ơn các thành viên khác của
Di truyền và gen

với kết quả của FISH, với một sự đồng ý. 93% các khối u. Theo GEFPICS (AJ Balaton, JP Bellocq, F Ettore, V Fridman, JP Ghnassia,
Tanneret al(2000), sự khác biệt giữa CISH và FISH có thể là do độ JM Guinebretière, J Jacquemier, B Lannes, V Le Doussal, C Migeon,
nhạy của CISH thấp hơn. Tuy nhiên, điều này chỉ giải thích một P Roger, JC Sabourin, B Sigal-Zafrani , J Simony-Lafontaine, V
Veriele, MO Vilain, JJ Voigt, C Voisin-Rigaud.

NGƯỜI GIỚI THIỆU

Bartlett JM, Going JJ, Mallon EA, Watters AD, Reeves JR, Stanton P,
Richmond J, Donald B, Ferrier R, Cooke TG (2001) Đánh giá sự khuếch đại
và biểu hiện quá mức của HER2 trong ung thư vú. J Pathol 195:422–428
Cobleigh MA, Vogel CL, Tripathy D, Robert NJ, Scholl S, Fehrenbacher L,
Wolter JM, Paton V, Shak S, Lieberman G, Slamon DJ. J Clin Oncol 17:
2639–2648
Couturier J, Vincent-Salomon A, Nicolas A, Beuzeboc P, Mouret E, Zafrani
B, Sastre-Garau X (2000) Mối tương quan chặt chẽ giữa các kết quả
của huỳnh quang tại chỗ lai và hóa mô miễn dịch để đánh giá tình
trạng gen ERBB2 (HER-2 / neu) trong ung thư biểu mô vú.Mod
Pathol 13: 1238–1243
Diaz NM (2001) Xét nghiệm trong phòng thí nghiệm cho HER2 / neu trong ung thư biểu mô vú: an
chiến lược phát triển để dự đoán phản ứng với liệu pháp nhắm mục tiêu. Kiểm soát ung thư
số 8: 415–418
Fitzgibbons PL, Trang DL, Weaver D, Thor AD, Allred DC, Clark GM,
Ruby SG, O'Malley F, Simpson JF, Connolly JL, Hayes DF, Edge SB,
Lichter A, Schnitt SJ (2000) Các yếu tố tiên lượng trong ung thư vú. Tuyên
bố đồng thuận của Đại học Hoa Kỳ năm 1999.Arch Pathol Lab Med 124:
966–978
Hoang MP, Sahin AA, Ordonez NG, Sneige N (2000) gen HER-2 / neu
sự khuếch đại so với sự biểu hiện quá mức của protein HER-2 / neu và khả
năng tái tạo máy chủ liên kết trong ung thư biểu mô vú xâm lấn. Am J Clin
Pathol 113: 852–859
Hortobagyi GN, Perez EA (2001) Tích hợp trastuzumab vào tá dược
liệu pháp toàn thân của bệnh ung thư vú: các thử nghiệm lâm sàng đang diễn ra và có kế
hoạch.Semin Oncol 28: 41–46
So sánh Jacobs TW, Gown AM, Yaziji H, Barnes MJ, Schnitt SJ (1999)
huỳnh quang tại chỗ lai và hóa mô miễn dịch để đánh giá HER-2 /
neu trong ung thư vú. J Clin Oncol 17: 1974–1982 Jacobs TW, Gown
AM, Yaziji H, Barnes MJ, Schnitt SJ (2000) HER-2 / neu
biểu hiện protein trong ung thư vú được đánh giá bằng hóa mô miễn dịch. Một
nghiên cứu về thỏa thuận liên phòng thí nghiệm.Am J Clin Pathol 113: 251–258
Jimenez RE, Wallis T, Tabasczka P, Visscher DW (2000) Xác định
Tình trạng Her-2 / Neu trong ung thư biểu mô vú: phân tích so sánh
hóa mô miễn dịch và huỳnh quang tại chỗ sự lai tạo. Mod Pathol13:
37–45

Tạp chí Ung thư Anh (2003) 88 (10), 1587 - 1591 & 2003 Nghiên cứu Ung thư Vương quốc Anh

Kallioniemi OP, Kallioniemi A, Kurisu W, Thor A, Chen LC, Smith HS,
Khuếch đại ERBB2 của Waldman FM, Pinkel D, Grey JW (1992) trong ung thư vú được
phân tích bằng phương pháp huỳnh quang tại chỗ sự lai tạo. Proc Natl Acad Sci Hoa
Kỳ 89: 5321–5325
Lebeau A, Deimling D, Kaltz C, Sendelhofert A, Iff A, Luthardt B, Untch M,
Lohrs U (2001) Phân tích Her-2 / neu trong các mẫu mô lưu trữ của bệnh
ung thư vú ở người: so sánh hóa mô miễn dịch và huỳnh quang tại chỗ
sự lai tạo. J Clin Oncol 19: 354–363
Lehr HA, Jacobs TW, Yaziji H, Schnitt SJ, Gown AM (2001) Định lượng
đánh giá tình trạng HER-2 / neu trong ung thư vú bằng phương pháp huỳnh
quang tại chỗlai và bằng hóa mô miễn dịch với phân tích hình ảnh. Am J Clin
Pathol 115: 814–822
Moasser MM, Basso A, Averbuch SD, Rosen N (2001) The tyrosine kinase
chất ức chế ZD1839 ('Iressa') ức chế tín hiệu do HER2 điều khiển và ngăn chặn
sự phát triển của các tế bào khối u biểu hiện quá mức HER2. Res ung thư 61:
7184–7188
Paik S, Bryant J, Tan-Chiu E, Romond E, Hiller W, Park K, Brown A,
Yothers G, Anderson S, Smith R, Wickerham DL, Wolmark N (2002)
Hiệu suất thực tế của thử nghiệm HER2-Kinh nghiệm dự án về ruột
và vú hỗ trợ phẫu thuật quốc gia. J Natl Cancer Inst94: 852–854
Pauletti G, Dandekar S, Rong H, Ramos L, Peng H, Seshadri R, Slamon DJ
(2000) Đánh giá các phương pháp phát hiện dựa trên mô của sự
thay đổi HER-2 / neu trong ung thư vú ở người: so sánh trực tiếp của
huỳnh quang tại chỗ lai và hóa mô miễn dịch. J Clin Oncol 18: 3651–
3664
Pegram MD, Lipton A, Hayes DF, Weber BL, Baselga JM, Tripathy D, Baly
D, Baughman SA, Twaddell T, Glaspy JA, Slamon DJ (1998) Nghiên cứu giai
đoạn II về hóa trị tăng cường thụ thể bằng cách sử dụng kháng thể đơn
dòng tái tổ hợp nhân tính kháng p185HER2 / neu cộng với cisplatin ở
bệnh nhân ung thư vú di căn HER2 / neu biểu hiện quá mức, khó hóa trị.
sự đối xử. J Clin Oncol 16: 2659–2671
Người DL, Borelli KA, Hsu PH (1997) Định lượng HER-2 / neu và c-
khuếch đại gen myc trong ung thư biểu mô vú bằng cách sử dụng huỳnh quang tại
chỗsự lai tạo. Mod Pathol 10: 720–727
Nhấn phím MF, Hung G, Godolphin W, Slamon DJ (1994) Độ nhạy của HER-2 /
kháng thể neu trong các mẫu mô lưu trữ: nguồn tiềm ẩn của sai sót trong các
nghiên cứu hóa mô miễn dịch về biểu hiện gen ung thư. Res ung thư 54:2771–
2777
& 2003 Nghiên cứu Ung thư Vương quốc Anh
CISH trong việc xác định tình trạng gen HER2L
Arnould et al
1591
Thử nghiệm Ridolfi RL, Jamehdor MR, Arber JM (2000) HER-2 / neu ở vú
ung thư biểu mô: kết hợp hóa mô miễn dịch và huỳnh quang tại chỗ
phương pháp lai hóa. Mod Pathol 13: 866–873
Roche PC, Ingle JN (1999) Tăng HER2 với Thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ
Kháng thể được cơ quan quản lý chấp thuận. J Clin Oncol 17: 434
Roche PC, Suman VJ, Jenkins RB, Davidson NE, Martino S, Kaufman PA,
Addo FK, Murphy B, Ingle JN, Perez EA (2002) Sự phù hợp giữa Thử nghiệm
HER2 của Phòng thí nghiệm Địa phương và Trung tâm trong Thử nghiệm Liên
nhóm Vú N9831. J Natl Cancer Inst 94: 855–857
Slamon DJ, Leyland-Jones B, Shak S, Fuchs H, Paton V, Bajamonde A,
Fleming T, Eiermann W, Wolter J, Pegram M, Baselga J, Norton L
(2001) Sử dụng hóa trị cộng với kháng thể đơn dòng chống lại HER2
cho ung thư vú di căn biểu hiện quá mức HER2. N Engl J Med 344:
783–792
Tanner M, Gancberg D, Di Leo A, Larsimont D, Rouas G, Piccart MJ, Isola J
(2000) Chromogenic tại chỗ hybridization: một sự thay thế thiết thực cho
huỳnh quang tại chỗ lai để phát hiện sự khuếch đại gen sinh ung thư
HER-2 / neu trong các mẫu ung thư vú lưu trữ. Am J Pathol 157:1467–
1472
Thor A (2001) HER2 – một cuộc thảo luận về các phương pháp thử nghiệm ở Hoa Kỳ. Ann
Oncol 12 (Suppl 1): S101 – S107
Tubbs RR, Pettay JD, Roche PC, Stoler MH, Jenkins RB, Grogan TM (2001)
Sự khác biệt trong thử nghiệm lâm sàng trong phòng thí nghiệm về tính đủ điều kiện
cho liệu pháp trastuzumab: dương tính giả hóa mô miễn dịch rõ ràng không nhận
được thông báo. J Clin Oncol 19: 2714–2721
Vincent-Salomon A, Mac Grogan G, Couturier J, Arnould L, Denoux Y,
Fiche M, Jacquemier J, Mathieu MC, Penault-Llorca F, Rigaud C, Roger P,
Treilleux I, Vilain MO, Mathoulin-Pélissier S, Le Doussal V (2003) Hiệu
chỉnh hóa mô miễn dịch để đánh giá HER2 trong ung thư vú: kết quả của
nghiên cứu gefpics đa trung tâm của Pháp. Mô bệnh học42: 337–347
Vogel CL, Cobleigh MA, Tripathy D, Gutheil JC, Harris LN, Fehrenbacher L,
Slamon DJ, Murphy M, Novotny WF, Burchmore M, Shak S, Stewart SJ, Press M
(2002) Tính hiệu quả và an toàn của trastuzumab như một tác nhân duy nhất
trong điều trị đầu tay ung thư vú di căn biểu hiện quá mức HER2.J Clin Oncol
20: 719–726
Zhao J, Wu R, Au A, Marquez A, Yu Y, Shi Z (2002) Xác định HER2
khuếch đại gen bằng chromogenic tại chỗ lai (CISH) trong ung thư
biểu mô vú lưu trữ. Mod Pathol 15: 657–665
Di truyền và gen
Tạp chí Ung thư Anh (2003) 88 (10), 1587 - 1591