Machine Translated by Google

Công nghệ nguồn sinh học 251 (2018) 358–

363

Danh sách nội dung có sẵn tại ScienceDirect

Công Nghệ Nguyên Liệu Sinh Học

trang chủ tạp chí: www.elsevier.com/locate/biortech

Tăng cường sản xuất cồn sinh học từ lục bình bằng các phương pháp T
tiền xử lý kết hợp mới

Qiuzhuo Zhanga,⁎ , Yan Weia, b, Nhóm làm việc, Chen Weng

một

Phòng thí nghiệm trọng điểm Thượng Hải về các quá trình sinh thái đô thị và phục hồi sinh thái, Trường Khoa học Môi trường và Sinh thái, Đại học Sư phạm Đông Trung Quốc, 200241

Thượng Hải, Trung Quốc

b
Trường Khoa học và Kỹ thuật Môi trường, Đại học Giao thông Thượng Hải, 200240 Thượng Hải, Trung Quốc

TRỪU TƯỢNG ĐỒ HỌA

THÔNG TIN BÀI VIẾT TRỪU TƯỢNG

Từ khóa: Nghiên cứu này khảo sát khả năng tăng cường sản xuất cồn sinh học bằng các phương pháp tiền xử lý kết hợp
Nhiên liê u hoá tha ch
đối với lục bình. Ba loại phương pháp tiền xử lý khác nhau, bao gồm tiền xử lý bằng vi sinh vật, tiền xử
Tiền xử lý
lý bằng axit loãng kết hợp vi sinh vật và tiền xử lý bằng kiềm loãng kết hợp vi sinh vật, đã được nghiên
lục bình cứu để phân hủy lục bình. Kết quả cho thấy phương pháp tiền xử lý bằng axit loãng kết hợp vi sinh vật là
cồn sinh học
phương pháp hiệu quả nhất, mang lại hàm lượng cellulose cao nhất (39,4 ± 2,8%) và sản xuất đường khử
Phanerochaete chrysosporium
(430,66 mg·g 1 ). Phân tích của kính hiển vi điện tử quét và quang phổ kế hồng ngoại biến đổi Fourier
chỉ ra rằng mô cơ bản của lục bình đã bị phá hủy đáng kể. So với các phương pháp tiền xử lý lục bình khác
đã được báo cáo trước đây, không sử dụng thêm xenlulaza và vi khuẩn cho quá trình thủy phân, phương pháp
tiền xử lý bằng axit loãng kết hợp vi sinh vật trong nghiên cứu của chúng tôi có thể đạt được lượng đường
khử cao nhất. Hơn nữa, việc sản xuất etanol sinh học có thể đạt được 1,40 g·L 1 sau quá trình lên men,
điều này có thể mang lại một cách cực kỳ hứa hẹn để sử dụng lục bình.

1. Giới thiệu một ngày nào đó thay thế sự phụ thuộc của con người vào nhiên liệu hóa thạch (Tasnim

et al., 2017). Ethanol sinh học, có thể được tạo ra từ khối sinh học lignocellulosic,

Nhiên liệu hóa thạch đã bị khai thác quá mức và cạn kiệt do quá trình công chắc chắn đang thu hút sự chú ý ngày càng nhiều hiện nay do các ưu điểm sẵn có, chi

nghiệp hóa và đô thị hóa được đẩy mạnh kể từ thế kỷ trước. phí thấp và sạch đối với môi trường (Singh và cộng sự, 2015; Das và cộng sự, 2015).

Năng lượng tái tạo được công nhận là công nghệ tuyệt vời tiếp theo sẽ

⁎ Tác giả tương ứng.

Địa chỉ email: qzhzhang@des.ecnu.edu.cn (Q. Trương).

https://doi.org/10.1016/j.biortech.2017.12.085 Nhận
ngày 7 tháng 11 năm 2017; Đã nhận ở mẫu sửa đổi ngày 23 tháng 12 năm 2017; Được chấp nhận ngày 26 tháng 12 năm 2017
Có sẵn trực tuyến ngày 27 tháng 12 năm 2017 0960-8524 / © 2017 Elsevier Ltd. Mọi quyền được bảo lưu.
Machine Translated by Google

Q. Zhang và cộng sự.

Công nghệ nguồn sinh học 251 (2018) 358–
363

Lục bình (Eichhornia crassipes), được đưa vào Trung Quốc làm cây cảnh
vào những năm 1930, đã trở thành một trong những loài cỏ dại thủy sinh xâm
lấn phổ biến nhất do tốc độ phát triển nhanh và khả năng tái tạo cao trong
thủy vực (Yan et al., 2015; Ismail et cộng sự, 2017; Feng và cộng sự, 2017).
Nó được Bộ Bảo vệ Môi trường Trung Quốc liệt kê là một trong chín loài thực
vật xâm lấn đầu tiên (Zhang et al., 2016a, b). Trong điều kiện khí hậu thích
hợp, tốc độ tăng trưởng của lục bình có thể đạt tới 220 kg/ha/ngày (Bayrakci
và Kocar, 2014).
Sự phát triển nhanh chóng của lục bình đã gây ra một loạt các vấn đề về môi
trường, chẳng hạn như chặn các dòng sông, thảm thực vật bị phá hủy, ô nhiễm
nước, các vấn đề về tưới tiêu, v.v. (Yan và cộng sự, 2015; Das và cộng sự,
2015; Adanikin và cộng sự, 2017). Quan trọng hơn, cho đến nay vẫn chưa có
phương pháp hiệu quả nào để diệt trừ chúng (Singh et al., 2015).
Tuy nhiên, như một chất nền lignocellulosic tiềm năng với hàm lượng
hemi xenlulo cao (44,68 ± 0,39%, w · w-1 ), việc sử dụng cây lục bình để Hình 1. Đường sinh trưởng của Phanerochaete chrysosporium.

sản xuất cồn sinh học dường như là một giải pháp thay thế khả thi để quản
lý nó và giải quyết ô nhiễm môi trường và khủng hoảng năng lượng ( Das và
kích hoạt nấm, nó được nuôi cấy trong môi trường Potato Dextrose Agar (PDA)
cộng sự, 2016; Sindhu và cộng sự, 2017). Hơn nữa, là sinh khối thủy sinh,
ở 28 ° C trong 7 ngày. Đường cong sinh trưởng của Phanerochaete chry
bèo tây mang lại lợi thế so với sinh khối lignocellulosic trên cạn vì nó
sosporium được thể hiện trong Hình 1. Người ta chỉ ra rằng pha trễ, pha
không cạnh tranh với thức ăn để sử dụng trên đất liền (Biswas et al., 2017).
logarit và pha tĩnh của P. chrysosporium lần lượt thuộc về 0–72 h, 72–108 h
Do tính cứng vật lý và khả năng chống chịu hóa học của bèo tây, nên tiền xử
và 108–132 h. . Hơn nữa, SEM cho thấy P. chrysosporium là nấm sợi (Dữ liệu
lý là một bước quan trọng và không thể thiếu cần được thực hiện để khắc phục
bổ sung điện tử cho công việc này có thể được tìm thấy trong phiên bản điện
những hạn chế này và tăng khả năng tiêu hóa của enzym (Cheng và cộng sự,
tử của bài báo này trực tuyến).
2015; Xu và cộng sự, 2016). Một phương pháp tiền xử lý được thiết kế tốt
Nấm men Saccharomyces cerevisiae cũng được mua từ Trung tâm Bộ sưu tập
cần phải hiệu quả, tiết kiệm chi phí và thân thiện với môi trường. Có một
Văn hóa Công nghiệp Trung Quốc (Số CICC33068). Nó được nuôi cấy trong dung
số phương pháp tiền xử lý được phát triển, bao gồm tiền xử lý cơ học, xử lý
dịch dinh dưỡng ở 30°C, bao gồm 20 g·L 1 glucose, 20 g·L 1 tryptone và 20
trước bằng kiềm hoặc axit, nổ hơi, chiếu xạ, xử lý nước nóng và xử lý CO2
g·L 1 bột chiết xuất men.
siêu quan trọng ( Lin và cộng sự, 2015). Thật không may, những phương pháp
này bị hạn chế bởi một số nhược điểm, chẳng hạn như điều kiện khắc nghiệt,
tiêu thụ năng lượng lớn, độc tính cao và ứng dụng hạn chế (Xu và cộng sự,
2.2. Tiền xử lý lục bình
2016).
Do ưu điểm tiêu thụ năng lượng thấp và hiệu quả thủy phân cao, tiền xử lý
Ba loại phương pháp tiền xử lý khác nhau đã được sử dụng cho lục bình
sinh học, đặc biệt là sử dụng nấm thối trắng, đã thu hút được nhiều sự chú
làm bằng sợi nhỏ, bao gồm tiền xử lý bằng vi sinh vật (MB), tiền xử lý bằng
ý hiện nay so với các phương pháp tiền xử lý khác (Sindhu và cộng sự, 2016;
axit pha loãng vi sinh vật (MB + AC) và tiền xử lý bằng kiềm pha loãng bằng
Machado và Ferraz, 2017).
vi sinh vật (MB + AK).
Phanerochaete chrysosporium, có hoạt tính phân giải lign cao nhất trong
Phanerochaete chrysosporium đã được lựa chọn trong tiền xử lý MB.
số các loại nấm thối trắng, đã được sử dụng thành công để phân hủy lignin
Chín gam lục bình đã đập dập được cho vào bình nón có chứa 180 mL môi trường
và giảm sản xuất đường trong một số nghiên cứu (Ansari et al., 2016; Harada
muối vô cơ. Tỷ lệ rắn-lỏng được duy trì trong 1:20 trong quá trình tiền xử
et al., 2016). Đã có báo cáo rằng Phanerochaete chrysosporium có thể tiết
lý. Môi trường muối vô cơ chứa 0,1 g·L 1 MgSO4·7H2O, 1 g·L 1 KH2PO4, 0,4
ra các peroxidase ngoại bào bao gồm hơn mười peroxidase lignin (Lip), năm
g·L 1 amoni tartrate, 0,1 g·L 1 CaCl2, 0,05% Tween-80 và 1 mL nguyên tố vi
peroxidase mangan (Mnp) và một số oxyase đồng khác trong quá trình chuyển
lượng . Nguyên tố vết được trộn với 0,5 g·L 1 MnSO4, 0,02 g·L 1 KAl
hóa thứ cấp (Ansari et al., 2016). Tuy nhiên, nó được sử dụng rất ít để phân
(SO4)2·12H2O, 0,01 g·L 1 H3BO3, 0,1 g·L 1 FeSO4·7H2O, 0,1 g·L 1
hủy sinh khối lục bình. Ngoài ra, có một số ấn phẩm liên quan đến phân tích
CoCl2·6H2O, 0,1 g·L 1 ZnSO4·7H2O và 0,01 g·L 1 CuSO4·5H2O Sau khi hấp khử
phức tạp monosacarit trong sản phẩm thủy phân và điều tra có hệ thống về các
trùng ở 121 °C trong 20 phút, 4 vòng xốp Phanerochaete chrysos được nuôi
phương pháp tiền xử lý kết hợp hiệu quả để đẩy nhanh quá trình thủy phân
cấy trong 4 ngày (logarit giai đoạn), đã được thêm vào hệ thống. Các tế bào
lục bình.
được phát triển trong điều kiện lắc (150 vòng / phút) ở 30 ° C trong 60 giờ.

Trong nghiên cứu này, Phanerochaete chrysosporium đã được chọn để xử lý

sơ bộ lục bình bằng vi sinh vật. Để tăng cường sản xuất đường khử, axit
Phần còn lại, bị phân hủy bởi Phanerochaete chrysosporium sau 60 giờ,
loãng và kiềm sau đó được bổ sung lần lượt vào hệ thống tiền xử lý bằng vi
được chuyển vào cốc thủy tinh và sau đó được làm khô ở 60 ° C. Sau đó, 1%
sinh vật. Hiệu quả của quá trình thủy phân lục bình và sản xuất cồn sinh
H2SO4 và 4% NaOH được thêm vào hệ thống tiền xử lý trong 1 giờ ngâm ở 100 °
học bằng hệ thống kết hợp mới đã được nghiên cứu và cơ chế tác động kích
C, được xác định là tiền xử lý MB + AC và tiền xử lý MB + AK, tương ứng.
thích của hệ thống tiền xử lý kết hợp đã được khám phá thêm bằng các phân
tích SEM và FTIR.

2.3. Sản xuất cồn sinh học

2. Vật liệu và phương pháp

Bã lục bình khô sau khi tiền xử lý MB + AC trước tiên được điều chỉnh
2.1. Vật liệu và vi sinh vật
về pH trung tính, sau đó được ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong 5 phút.
6 g·L 1 Chất cấy Saccharomyces cerevisiae được thêm vào mẫu chất lỏng nổi
Lục bình được lấy từ sông Hoàng Phố, Thượng Hải, Trung Quốc. Nó được rửa
phía trên cho quá trình lên men. Nitơ được sục khí để loại bỏ không khí
sạch sau khi loại bỏ rễ và sấy khô trong lò ở 60 ° C cho đến khi khối lượng
trong hệ thống. Quá trình lên men được thực hiện ở 30°C trong điều kiện lắc
không đổi, sau đó đập nhỏ bằng máy nghiền dưới 40 me để sử dụng tiếp.
(120 vòng/phút). Sau quá trình lên men, các mẫu lên men được ly tâm ở tốc
độ 5000 vòng / phút trong 8 phút và phần nổi phía trên được sử dụng để xác
Phanerochaete chrysosporium, một loại nấm thối trắng, được thu mua từ
định cồn sinh học.
Trung tâm Sưu tập Văn hóa Công nghiệp Trung Quốc (Số CICC40299). Đến

359
Machine Translated by Google
Q. Zhang và cộng sự.
2.4. Phương pháp phân tích
2.4.1. Các thành phần của lục bình
Bèo lục bình có thành phần chủ yếu là cellulose, hemicellulose và
lignin. Các thành phần được xác định bằng phương pháp Goering và
Vansoest (1970).
2.4.2. Thành phần đường khử
Sau quá trình tiền xử lý, các mẫu phân hủy của bèo tây được ly tâm với
tốc độ 13.000 vòng/phút trong 6 phút. Phần nổi phía trên, mà
được lọc bằng màng lọc lỗ kim 0,45 µm, dùng để xác định
giảm hàm lượng đường.
Tổng lượng đường khử được đo bằng phương pháp DNS (Miller,
1959).
Bốn monosacarit chính, glucose, arabinose, galactose và
xyloza, được xác định bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao
hệ thống (HPLC, 1515-2414, Waters, USA). Nước khử ion được sử dụng làm
pha động với tốc độ dòng 0,6 mL·min 1 . Nhiệt độ lò
được duy trì ở 80 ° C trong 30 phút. Nhiệt độ đầu dò được giữ
ở 50°C. Người ta đã chứng minh rằng thời gian xuất hiện của glucose, arabinose,
galactose và xylose là 12,103 phút, 15,751 phút, 14,229 phút và
13,177 phút, tương ứng.
Sản xuất cồn sinh học sau quá trình lên men bằng nấm men Saccharomyces
cerevisiae được đo bằng lấy mẫu không gian vũ trụ Sắc ký khí
(GC, Agilent 7890A) theo phương pháp trước đây của chúng tôi (Zhang et al.,
2016a,b).
2.5. Phân tích SEM và FTIR
Khảo sát đặc điểm hình thái lục bình sau các phương pháp tiền xử lý khác
nhau bằng máy Scanning Electron
Kính hiển vi (SEM, S4800, HITACHI, JPN) và Biến đổi Fourier
Máy quang phổ hồng ngoại (FTIR, Nicolet Is5, Thermo Fisher Scientific,
Hoa Kỳ), tương ứng.
3. Kết quả và thảo luận
3.1. Ảnh hưởng của các phương pháp tiền xử lý khác nhau đến quá trình thủy phân lục bình
3.1.1. Thành phần của bèo tây sau khi xử lý sơ bộ
Ba loại phương pháp tiền xử lý khác nhau, bao gồm MB,
MB + AC và MB + AK, đã được áp dụng để khảo sát ảnh hưởng của chúng đối với
thủy phân lục bình. Thành phần của lục bình trước đây
và sau khi tiền xử lý được thể hiện trong Bảng 1.
Mẫu lục bình thu thập ban đầu bao gồm
19,8% cellulose, 49,0% hemiaellulose và 4,8% lignin, tương tự như các báo
cáo trước đây (Das et al., 2016). So với rơm rạ và
sinh khối có nguồn gốc thực vật khác, cellulose tương đối cao hơn và
hàm lượng hemicelluloses của lục bình làm cho nó khả thi hơn và
thích hợp để sản xuất cồn sinh học (Ganguly et al., 2012).
Tổng trọng lượng khô của lục bình đều giảm sau ba
các loại phương pháp tiền xử lý. Nó đã giảm 26,67% sau khi tiền xử lý vi
khuẩn, được cho là do sự đóng góp của
Phanerochaete chrysosporium đã sử dụng lignocellulose làm nguồn carbon.
Bảng 1
Thành phần của lục bình.
Mẫu Xenlulozơ Hemicellulose
(g) (%) (g) (%)
CK 1,78 ± 0,04 19,80 ± 0,40 4,41 ± 0,23 49,00 ± 2,50 0,43 ± 0,03 4,80 ± 0,30 2,38 ± 0,10 26,40 ± 1,10 9,00 ± 0,00
MB 1,71 ± 0,01 25,90 ± 0,10 1,93 ± 0,14 29,20 ± 2,10 0,28 ± 0,05 4,20 ± 0,70 2,69 ± 0,07 40,70 ± 1,00 6,60 ± 0,30
MB + AC 1,10 ± 0,08 39,40 ± 2,80 0,49 ± 0,03 17,60 ± 1,00 0,13 ± 0,06 4,80 ± 0,20 1,07 ± 0,04 38,20 ± 1,30 2,80 ± 0,60
MB + AK 1,17 ± 0,05 29,90 ± 1,20 0,90 ± 0,03 23,00 ± 0,80 0,12 ± 0,03 3,20 ± 0,80 1,71 ± 0,04 43,90 ± 0,90 3,90 ± 0,50
CK: trước khi tiền xử lý; MB: tiền xử lý vi sinh; MB + AC: tiền xử lý vi sinh-axit loãng; MB + AK: tiền xử lý vi sinh-kiềm loãng.
Công nghệ nguồn sinh học 251 (2018) 358–
363
Tổng trọng lượng khô của bèo tây giảm hơn nữa sau khi tiền xử lý bằng axit
loãng và tiền xử lý bằng kiềm loãng, điều này cho thấy rằng cả điều kiện
axit loãng và kiềm loãng đều đóng vai trò quan trọng.
vai trò quan trọng đối với quá trình phân hủy lignocellulose.
Rõ ràng là tỷ lệ cellulose tăng lên sau tất cả các loại
phương pháp tiền xử lý, trong khi độ tage của hemixenluloza và lignin percen
giảm. Người ta báo cáo rằng mặc dù một số loài nấm có thể làm tăng khả năng
tiêu hóa polysaccharide, nhưng chỉ một phần nhỏ các loài có thể
để làm suy giảm một lượng lớn lignin, và bảo quản cellulose và một phần của
hemiaellulose (Machado và Ferraz, 2017). Việc xử lý sơ bộ vi sinh vật duy
nhất đối với kết quả của chúng tôi đã xác minh hậu quả.
MB + AC làm tăng phần trăm khối lượng xenlulozơ là
cao nhất, gấp 1,99 lần so với mẫu chưa xử lý.
MB + AK thể hiện khả năng loại bỏ lignin hiệu quả nhất,
có thể làm cho phần trăm hàm lượng lignin giảm 33,3%. đó là
theo kết quả của Bayrakci và Kocar (2014), trong đó
đã chứng minh rằng cả natri hydroxit và amoniac đều có thể phá vỡ
hàm lượng lignin của lignocelluloses. Lai và cộng sự. (2017) cũng chỉ ra rằng
NaOH có thể loại bỏ lignin hiệu quả hơn và dự trữ phần lớn
hemicellulose, được xác định bởi kết quả của chúng tôi.
3.1.2. Giảm sản xuất đường sau khi tiền xử lý
Việc sản xuất đường khử sau ba loại tiền xử lý khác nhau
phương pháp điều trị được trình bày trong Bảng 2.
So với phương pháp MB đơn lẻ, phương pháp hóa học-vi sinh kết hợp
phương pháp này có thể làm tăng đáng kể việc sản xuất đường khử trong
thủy phân lục bình. Đường khử có thể đạt được
430,66 mg·g 1 và 402,10 mg·g 1 sau khi xử lý trước MB + AC và MB + AK,
tương ứng. Rõ ràng, phương pháp tiền xử lý kết hợp
đã được chứng minh là hiệu quả hơn đối với tiền xử lý lục bình.
Bốn monosacarit (glucose, arabinose, galactose và xy-lose) được công
nhận là thành phần chính của đường khử
trong dịch thủy phân lục bình, được phát hiện thêm về nồng độ của chúng bằng
phân tích HPLC. Nó đã chỉ ra rằng tất cả bốn monosacarit đều tăng sau khi
tiền xử lý kết hợp so với xử lý đơn lẻ.
Tiền xử lý MB, xác nhận lại hiệu quả thuận lợi của phương pháp tiền xử lý
bằng com bined đối với quá trình thủy phân lục bình. Sau
Tiền xử lý MB + AC và MB + AK, việc sản xuất glucose có thể
lần lượt đạt được 164,11 mg·g 1 và 182,35 mg·g 1 . Axit loãng
được tạo điều kiện thuận lợi hơn để sản xuất galactose và xyloza,
ngược lại kiềm loãng có lợi cho việc sản xuất glucose và mũi arabi. Nó đã
được báo cáo rằng hemiaellulose phân hủy và xyloza được
giải phóng vào dung dịch sau khi tiền xử lý axit loãng, trong khi kiềm
tiền xử lý bảo tồn một phần hemicellulose và chủ yếu loại bỏ
hàm lượng lignin (Lin et al., 2016; Aswathy et al., 2010), có thể làm sáng
tỏ kết quả của chúng tôi.
Hàm lượng của bốn monosacarit trong các mẫu tiền xử lý khác nhau có thể
được giải thích thêm bằng kết quả cấu thành của nước
lục bình trong Bảng 1. Nồng độ hexose (glucose) cao hơn ở
MB + AK tiền xử lý thủy phân hơn MB + AC tiền xử lý
thủy phân, do phân hủy hàm lượng cellulose cao trong MB + AK
quá trình. Pentose, chủ yếu bao gồm arabinose, galactose
và xyloza, là sản phẩm thủy phân của hemicellulose. Nó đã được chỉ ra rằng
nồng độ của pentose cao hơn trong MB + AC được xử lý trước
Linh gỗ Khác Tổng trọng lượng khô của sinh khối
(g) (%) (g) (%) (g)
360
Machine Translated by Google

Q. Zhang và cộng sự. Công nghệ nguồn sinh học 251 (2018) 358–
363

ban 2

Thành phần đường khử trong dịch thủy phân lục bình đã qua xử lý.

Mẫu giảm đường Đường glucoza arabinose Galactose Xylose

(mg·g 1 ) (mg · g 1 ) (mg·g 1 ) (mg·g 1 ) (mg·g 1 )

MB 208,32 ± 0,80 108,26 ± 8,34 94,24 ± 0,49 22,64 ± 5,09 18,40 ± 2,15
MB + AC 430,66 ± 2,32 164,11 ± 5,60 99,45 ± 8,64 119,18 ± 6,67 43,10 ± 3,20
MB + AK 402,10 ± 1,32 182,35 ± 8,67 141,64 ± 7,52 43,98 ± 6,62 27,84 ± 6,70

MB: vi sinh vật tiền xử lý; MB + AC: tiền xử lý axit pha loãng vi sinh vật; MB + AK: tiền xử lý kiềm pha loãng vi sinh vật.

chất thủy phân hơn so với chất thủy phân đã xử lý trước MB + AK, là các chiến lược, bao gồm sàng lọc các vi khuẩn sản xuất cellulase cao hơn,

sự trùng hợp với kết quả về sự phân huỷ cao của hemixenluloza tăng hiệu quả của enzyme, áp dụng quy trình xử lý sinh học rẻ hơn

sau khi tiền xử lý MB + AC. Hơn nữa, người ta thấy rằng kiềm công nghệ và tái sử dụng các enzym (Singhania và cộng sự, 2015).

môi trường có thể tạo điều kiện thuận lợi cho việc sản xuất arabinose, trong khi Tuy nhiên, chi phí của cellulase không thể đẩy xuống nhiều hơn nữa,

môi trường axit tạo điều kiện thuận lợi cho việc sản xuất galactose và xyloza. làm phức tạp việc sản xuất cồn sinh học ở quy mô lớn (Gomes và cộng sự,

Hơn nữa, mặc dù glucose có thể được sử dụng tốt hơn bởi nấm men cho 2016). Trong nghiên cứu hiện tại của chúng tôi, không cần thêm cellulase trong

quá trình lên men tiếp theo thành cồn sinh học, việc sử dụng pentose bằng quá trình giảm sản xuất đường, có thể là do

vi khuẩn biến đổi gen trở thành một hướng nghiên cứu nóng và tác dụng đầy hứa hẹn của Phanerochaete chrysosporium (Li et al., 2017; Han

đã được chứng minh là khả thi trong những năm gần đây (Lopez-Hidalgo và cộng sự, 2017; Farias và cộng sự, và cộng sự, 2017).

2017; Lin và cộng sự, 2016). Trong khi đó, người ta chỉ ra rằng MB + AC So với nghiên cứu không bổ sung thêm cellulase

thúc đẩy thu hồi hemiaellulose dưới dạng monome trong phần chất lỏng và vi sinh vật cho quá trình thủy phân (Awasthi et al., 2013; Thi et al.,

và hàm lượng cellulose cao trong phần rắn (Dagnino et al., 2013). 2017), việc sản xuất 430,66 mg·g 1 đường khử ở thời điểm hiện tại

Do đó, MB + AC được khuyên dùng để xử lý sơ bộ lục bình hơn MB + AK vì sản lượng học là cao nhất. Cần phải chỉ ra rằng việc sản xuất

đường khử cao hơn và chi phí thấp hơn (Baral và Shah, 2017). đường khử trong nghiên cứu hiện tại thậm chí còn cao hơn một số

nghiên cứu ứng dụng quá trình thủy phân. Trong khi đó, đối với thành phần

lignocellulose sau khi tiền xử lý, hàm lượng cellulose trong

nghiên cứu hiện tại là cao nhất (39,4 ± 2,8%).

3.1.3. So sánh các phương pháp tiền xử lý khác nhau trên lục bình
Hơn nữa, mặc dù 402,93 mg · g-1 đường khử đã đạt được
thủy phân
sau khi tiền xử lý axit sulfuric và thủy phân cellulase trong phần trước của chúng tôi
Một số nghiên cứu đang thực hiện theo hướng chuyển đổi
nghiên cứu (Zhang và cộng sự, 2016a,b), 750 U cellulase được thêm vào trong 96 giờ ở
lục bình thải ra sản xuất cồn sinh học. Sự so sánh của
45°C trong quá trình này. Điều này một lần nữa có thể xác minh lợi thế của phương pháp
phương pháp tiền xử lý khác nhau về thủy phân lục bình đã được liệt kê
tiền xử lý gửi trước của chúng tôi.
trong Bảng 3. Aswathy et al. (2010) sử dụng NaOH 2% để phản ứng với nước

mẫu lục bình (tải 10% sinh khối) trong 1 giờ ở 95 ° C, sau đó là

thủy phân mẫu bằng 8 FPU·g 1 cellulase sau khi thêm 0,15% Tween 3.2. Phân tích cấu trúc của lục bình sau khi tiền xử lý

trong 48 giờ ở 45 ° C, có thể đạt được lượng đường khử cao nhất

(731 mg · g 1 ) trong các tài liệu tham khảo được liệt kê. Tuy nhiên, chi phí đắt đỏ của 3.2.1. phân tích SEM

cellulase đại diện cho một trong những trở ngại lớn nhất đối với khả năng cạnh tranh của Vì tiền xử lý có thể tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình thủy phân lục bình
etanol xenlulô (Narra et al., 2017). Các nhà nghiên cứu trên khắp , nó trở nên quan tâm khi kiểm tra những thay đổi hình thái bằng cách

thế giới đang cố gắng cắt giảm chi phí cellulase bằng nhiều cách khác nhau SEM (Dữ liệu bổ sung điện tử cho công việc này có thể được tìm thấy trong phiên bản điện tử của

bàn số 3

So sánh các phương pháp tiền xử lý thủy phân lục bình khác nhau.

Người giới thiệu Phương pháp tiền xử lý Điều kiện thủy phân giảm đường Thành phần của lignocellulose sau khi tiền xử lý
(mg·g 1 )
Cellulose (%) Hemicellulose (%) Lignin (%)

Sukumaran và cộng sự. NaOH T. reesei trong 96 giờ và A. niger trong 72 giờ ở 30°C, sau đó 710 / / /
(2009) thủy phân ở 45°C
Aswathy và cộng sự. NaOH 8 FPU/g cellulase sau khi thêm 0,15% Tween trong 48 giờ 731 / / /
(2010) ở 45 ° C

Guragain và cộng sự. Glycerol thô 210 U cellulase trong 2,5 giờ ở 50 °C 451 / / 10,1 ± 0,5

(2011)
Awasthi và cộng sự. (2013) H2SO4 Không bị thủy phân bổ 12,63 / / /
Yan et al. (2015) NaOH / H2O2 sung 17,43 FP / mL cellulase trong 3 ngày 223,53 36,33 17,72 6.17

Cheng và cộng sự. (2015) CaO2 ở 50 ° C 0,2 mL cellulase và 0,05 mL beta-glucosidase mỗi 325 / / /

sinh khối khô gam trong 72 giờ ở 50 ° C

Das et al. (2015) NaOH 49,56 U/g xenlulaza, 280,33 U/g xylanase và 0,13% 567.2 31.027 17,71 2,834
Tween trong 60 giờ ở 50°C

Zhang và cộng sự. H2SO4 750U cellulase trong 96 giờ ở 45°C 402,93

(2016a,b)
Xu et al. (2016) ILM 0,05 mL/g Cellulase và 0,05 mL/g beta-D 563.7 / / /
Glucosidase trong 48 giờ ở 50 °C

Chang và cộng sự. (2017) US-IL-SDS 50 FPU / g Enzyme phức hợp cellulose và 320 CBU / 233,9 38,20 ± 1,02 30,80 ± 1,01 16,20 ± 1,40

mL enzyme β-glucosidase trong 48 giờ ở 50 ° C

Xiao và cộng sự. (2017) Đại lý Fenton 30 FPU/g cellulase ở 50 °C 35,65 50,92 7.28

Thị và cộng sự. (2017) H2SO4/Hạ tới hạn Không thủy phân bổ sung / 264,4 69,4 / /
nước

hiện đang học MB + AC Không có thủy phân bổ sung 430.66 39,4 ± 2,8 17,6 ± 1,0 4,8 ± 0,2

ILM: vi nhũ tương chất lỏng ion không có chất hoạt động bề mặt; US-IL-SDS: tiền xử lý chất lỏng ion siêu âm được hỗ trợ bởi natri dodecyl sulfat; MB + AC: tiền xử lý axit pha loãng vi sinh vật.

361
Machine Translated by Google
Q. Zhang và cộng sự.
báo này trực tuyến).
Nó đã được chỉ ra rằng rơm lúa không được xử lý thể hiện một liên tục
bề mặt và các sợi cứng và có trật tự cao, trong khi các sợi sau khi xử lý sơ
bộ mi cro khuẩn bị biến dạng. Các vi sợi đã được tách ra
từ cấu trúc được kết nối ban đầu và tiếp xúc hoàn toàn, do đó làm tăng
diện tích bề mặt bên ngoài và độ xốp của lục bình, trong đó
đồng ý với nghiên cứu trước đây của chúng tôi trong đó rơm rạ được sử dụng làm
chiến lược phụ (Zhang và cộng sự, 2017; Hou và cộng sự, 2017). Trong khi đó,
người ta nghi ngờ rằng sự tiết ra cellulase của Phanerochaete chrysosporium
có thể đóng một vai trò quan trọng đối với quá trình thủy phân lục bình. Quá
trình sản xuất cel lulase của Phanerochaete chrysosporium sẽ được nghiên cứu trong
Tương lai.
Sau khi phân hủy bằng thuốc thử hóa học ở cả MB + AC và
Hệ thống MB + AK, mô cơ bản của lục bình tiếp tục bị tàn phá nặng nề
bị phá hủy; ngay cả những lỗ nhỏ đã bị phá vỡ trong lục bình
mặt. Đã có báo cáo rằng NaOH có thể dẫn đến sự gia tăng nội
diện tích bề mặt, giảm mức độ trùng hợp và kết tinh
cấu trúc (Bayrakci và Kocar, 2014). Một số nghiên cứu tiết lộ rằng
H2SO4 có hiệu quả trong việc thu hồi hầu hết các loại đường đặc biệt là từ
thân cây ngô cũng như các loại sinh khối khác (Hafid et al., 2017). Những điều trên
các nghiên cứu được đề cập đã xác minh nghiên cứu hiện tại của chúng tôi.
3.2.2. phân tích FTIR
Các đỉnh đặc trưng trong phổ FTIR được thể hiện trong Bảng 4 (Dữ liệu bổ
sung E cho công việc này có thể được tìm thấy trong phiên bản điện tử của bài báo này
Trực tuyến). Người ta chỉ ra rằng các đỉnh đặc trưng chính về cơ bản là giống
nhau, xuất hiện ở 3323 cm 1 , 2922 cm
1410 cm 1 liên kết sau khi tiền xử lý có thể thúc đẩy rất nhiều hiệu quả của
, 1162 cm 1 , 1058 cm 1 và 896 cm 1 , tương ứng. Ở đó
không có đỉnh đặc trưng mới xuất hiện sau khi tiền xử lý. Tuy nhiên,
cường độ hấp phụ khác nhau, biểu hiện rằng
tiền xử lý thực sự đã thay đổi cấu trúc hình thái của nước
lục bình.
Các đỉnh xung quanh 3323 cm 1 là viết tắt của dao động kéo dài và
chồng chéo của OeH, được công nhận là nhạy cảm hồng ngoại chính
nhóm lignocellulose. Ban nhạc tăng cường sau khi tiền xử lý,
trong đó minh họa rằng cấu trúc cellulose đã bị phá vỡ sau khi hiệu quả
phương pháp tiền xử lý. Các đỉnh xung quanh 2922 cm 1 , mà minh họa
dao động kéo dài đối xứng hoặc không đối xứng của nhóm CeH, là
một trong những đỉnh đặc trưng của cellulose (Zhang và cộng sự, 2017). Các
hình dạng của đỉnh này đã thay đổi sau khi tiền xử lý MB + AK, có thể
là do phản ứng giữa vi khuẩn và các nhóm phân tử khác.
Các đỉnh xung quanh 1515 cm 1 và 1162 cm 1 , được công nhận
là nhóm lignocellulose nhạy cảm với tia hồng ngoại chính, đại diện cho benzen
dao động vòng và dao động kéo giãn của CO-OR tương ứng. Các
dải ở 1515 cm 1 được tăng cường rất nhiều sau khi xử lý trước bằng MB + AK,
cho thấy rằng chất kiềm đóng vai trò chính trong quá trình phân hủy lignin.
Kết quả phù hợp với Bảng 1, cho thấy rằng
hàm lượng lignin của lục bình giảm đi rất nhiều sau khi xử lý sơ bộ.
Trong khi đó, một số nghiên cứu trước đây đã mô tả rằng phenol là một trong những
các hợp chất phong phú nhất trong sinh khối lignocellulose sau khi tiền xử lý
dòng kiềm, điều này trùng hợp với kết quả của chúng tôi.
Đỉnh xung quanh 1058 cm 1 , viết tắt của CeO kéo dài của
hemicellulose và cellulose, đã bị thay đổi rất nhiều sau MB + AC
tiền xử lý. Có thông tin cho rằng MB + AC có thể thúc đẩy quá trình thủy phân
Bảng 4
Các pic đặc trưng trong phổ FTIR của lục bình.
Đỉnh hấp phụ (cm 1 ) Cường độ
3323 Mạnh
2922 Ở giữa
1635 tương đối mạnh
1515 Ở giữa
1162 Tương đối yếu
1058 Mạnh
896 Yếu đuối
Công nghệ nguồn sinh học 251 (2018) 358–
363
Hình 2. Sản xuất cồn sinh học sau khi lên men bởi nấm men Saccharomyces cerevisiae.
của hemicelluloses và một phần của cellulose vô định hình dẫn đến
khả năng thu hồi cao của hemicelluloses, làm cho loại tiền xử lý này trở thành một
phương pháp đầy hứa hẹn để sản xuất cồn sinh học lignocellulosic
(Dagnino và cộng sự, 2013).
Đỉnh xung quanh 896 cm 1 là viết tắt của biến dạng CeH của bộ xương
rung động của sacarit và cellulose, và đó là đỉnh đặc trưng
của các liên kết β-glucosid giữa các đơn vị monosacarit. đỉnh điểm là
yếu hơn sau khi tiền xử lý, biểu hiện rằng các sợi nước
lục bình lộ ra và liên kết β-glucoside bị phá vỡ.
Bởi vì sự phá vỡ liên kết β-glucoside là một bước giới hạn tốc độ trong
quá trình phân hủy sinh khối lignocellulose, β-glucoside bị suy yếu
1 , 1635 cm 1 ,
thủy phân lục bình.
3.3. Sản xuất cồn sinh học từ nấm men Saccharomyces cerevisiae
Quá trình sản xuất cồn sinh học từ nấm men Saccharomyces cerevisiae đã
thể hiện trong Hình 2. Do có nhiều đường khử và sự nhân lên hàng loạt của S.
cerevisiae, quá trình lên men nhanh chóng xảy ra ngay từ đầu
24 giờ. Việc sản xuất cồn sinh học có thể đạt được giá trị tối đa
(1,40 g · L 1 ) ở 24 giờ. Tuy nhiên, việc sản xuất cồn sinh học đã ổn định sau khi
24 giờ, có thể là do tác dụng ức chế của cồn sinh học đối với
sự phát triển của S. cerevisiae (Xue et al., 2016).
Trong nghiên cứu trước đây của chúng tôi, 1,289 g·L 1 cồn sinh học được sản xuất bởi
toàn bộ cây lục bình ở điều kiện tối ưu trong quá trình lên men (Zhang et al.,
2016a, b). Người ta thấy rằng cao hơn 8,61%
cồn sinh học có thể đạt được trong nghiên cứu hiện tại cùng với không
cellulase đã được thêm vào hệ thống, có thể cung cấp một
cách đầy hứa hẹn cho việc sử dụng lục bình.
4. Kết luận
Sử dụng lục bình để sản xuất cồn sinh học dường như là một cách quản lý
bền vững loài cỏ dại khét tiếng này. Kết quả cho thấy
tiền xử lý axit loãng kết hợp vi sinh vật là một phương pháp xử lý sơ bộ đầy
hứa hẹn cho quá trình thủy phân lục bình, có thể đạt được
430,66 mg·g 1 đường khử và 1,40 g·L 1 cồn sinh học không có bất kỳ
xenlulaza bổ sung. Quá trình tiền xử lý bằng vi sinh vật có thể giúp ích trong việc
Liên kết của các đỉnh đặc trưng
Rung động kéo dài và chồng chéo của OeH
Dao động kéo dài đối xứng hoặc không đối xứng của nhóm CeH
Dao động kéo dãn của C]O (lignin)
Rung động nhóm đặc trưng của vòng benzen (lignin)
Độ rung kéo dài của CO-OR (hemicellulose)
Kéo dài CeO của hemicellulose và cellulose
Biến dạng CeH của rung động khung xương của saccharide và cellulose
362
Machine Translated by Google
Q. Zhang và cộng sự.
phân lớp và axit loãng có thể phá vỡ thêm phần hemiaellulose. Do đó,
rất nên xử lý sơ bộ lục bình trong sản xuất cồn sinh học vì chi phí cực
thấp và sản lượng đường khử và cồn sinh học cao.
Sự nhìn nhận
Dự án này được tài trợ bởi Quỹ Khoa học Tự nhiên Quốc gia Trung Quốc
(NSFC, số 31400513) và Ủy ban Khoa học và Công nghệ Thượng Hải (Số
17295810603, 17DZ1202804). Các tác giả xin cảm ơn họ đã tài trợ cho
công việc này. Các tác giả xin cảm ơn TS.
Varenyam Achal để cải thiện ngôn ngữ của bản thảo.
Phụ lục A. Dữ liệu bổ sung
Dữ liệu bổ sung liên quan đến bài viết này có thể được tìm thấy trong phiên bản trực tuyến tại http://
dx.doi.org/10.1016/j.biortech.2017.12.085.
Người giới thiệu
Adanikin, BA, Ogunwande, GA, Adesanwo, OO, 2017. Đánh giá và động học của
năng suất khí sinh học từ rau muống (Ipomoea Aquas) đồng tiêu hóa với lục bình (Eichhornia crassipes).
sinh thái. Tiếng Anh 98, 98–
104.
Ansari, Z., Karimi, A., Ebrahimi, S., Emami, E., 2016. Cải thiện hoạt tính phân giải chất béo của nuôi cấy
Phanerochaete chrysosporium bằng glucose oxidase. Hóa sinh. Tiếng Anh J. 105, 332–
338.
Aswathy, US, Sukumaran, RK, Devi, GL, Rajasree, KP, Singhania, RR, Pandey, A., 2010. Ethanol sinh học từ
sinh khối lục bình: Đánh giá chiến lược hóa than túi bằng enzym. nguồn sinh học. Technol. 101, 925–
930.
Awasthi, M., Kaur, J., Rana, S., 2013. Sản xuất cồn sinh học thông qua lục bình,
Eichhornia crassipes thông qua việc tối ưu hóa các điều kiện tiền xử lý. quốc tế J. Nổi lên.
Technol. Tiến lên Tiếng Anh 3, 42–
46.
Baral, NR, Shah, A., 2017. Phân tích so sánh kinh tế kỹ thuật của nổ hơi nước, axit sunfuric loãng, nổ
sợi amoniac và tiền xử lý sinh học. nguồn sinh học.
Technol. 232, 331–343.
Bayrakci, AG, Kocar, G., 2014. Sản xuất cồn sinh học thế hệ thứ hai từ lục bình và bèo tấm ở Inmir: một
nghiên cứu điển hình. Thay mới. Duy trì. Năng lượng Rev. 30, 306–
316.
Biswas, B., Singh, R., Krishna, BB, Kumar, J., Bhaskar, T., 2017. Nhiệt phân azolla, sargassum
tenerrimum và lục bình để sản xuất dầu sinh học. nguồn sinh học.
Technol. 242, 139–145.
Chang, KL, Han, YJ, Wang, XQ, Chen, XM, Leu, SY, Liu, J., Peng, YP, Liao, YL, Potprommanee, L., 2017. Tác
dụng của chất lỏng ion siêu âm được hỗ trợ bởi chất hoạt động bề mặt tiền xử lý về cấu trúc và sản
xuất đường có thể lên men của lục bình.
nguồn sinh học. Technol. 237, 27–
30.
Cheng, Y., Chen, KY, Chou, TH, 2015. Đồng thời tiền xử lý canxi peroxit và bảo quản ướt lục bình để sản
xuất đường lên men. nguồn sinh học. Technol. 176, 267–
272.
Dagninoa, EP, Chamorroa, ER, Romano, SD, Felissia, FE, Khu vực, MC, 2013.
Tối ưu hóa quá trình xử lý trước bằng axit của vỏ trấu để thu được đường có thể lên men cho sản xuất
cồn sinh học. Ind. Sản phẩm cây trồng. 42, 363–
368.
Das, S., Bhattacharya, A., Haldar, S., Ganguly, A., Gu, S., Ting, YP, Chatterjee, PK,
2015. Tối ưu hóa quá trình đường hóa bằng enzym của sinh khối lục bình cho ethanol sinh học: so sánh
giữa mạng lưới thần kinh nhân tạo và phương pháp đo m bề mặt phản ứng . Mater.Technol bền vững. 3,
17–
28.
Das, SP, Gupta, A., Das, D., Goyal, A., 2016. Tăng cường sản xuất cồn sinh học từ lục bình (Eichhornia
crassipes) bằng cách tối ưu hóa thống kê các tham số quy trình lên men bằng cách sử dụng thiết kế
mảng trực giao Taguchi. quốc tế chất khử độc sinh học. phân hủy sinh học. 109, 174–
184.
Farias, D., Atala, DIP, Maugeri, F., 2017. Cải thiện sản xuất cồn sinh học bằng cách
Scheffersomyces stipitis sử dụng quá trình lên men chiết xuất retentostat ở nồng độ xyloza cao. Hóa
sinh. Tiếng Anh J. 121, 171–180.
Feng, W., Xiao, K., Zhou, W., Zhu, D., Zhou, Y., Yuan, Y., Xiao, N., Wan, X., Hua, Y., Zhao, J., 2017.
Phân tích các công nghệ sử dụng sinh khối Eichhornia crassipes được cấp sau khi phục hồi nước thải.
nguồn sinh học. Technol. 223, 287–
295.
Ganguly, A., Chatterjeea, PK, Dey, A., 2012. Các nghiên cứu về sản xuất etanol từ bèo tây — một đánh giá.
Thay mới. Duy trì. Năng lượng Rev. 16, 966–
972.
Goering, HK, Vansoest, PJ, 1970. Phân tích sợi thức ăn gia súc. Sổ tay Nông nghiệp.
Dịch vụ Nghiên cứu Nông nghiệp, Bộ Nông nghiệp Hoa Kỳ, Washington, DC.
Gomes, D., Domingues, L., Gama, M., 2016. Định giá bùn giấy tái chế bằng cách
quy trình sản xuất cồn sinh học có tái chế xenlulaza. nguồn sinh học. Technol. 216, 637–
644.
Guragain, YN, Coninck, JD, Husson, F., Durand, A., Rakshit, SK, 2011. So sánh một số phương pháp tiền
xử lý mới để sản xuất cồn sinh học thế hệ thứ hai từ rơm lúa mì và lục bình. nguồn sinh học.
Technol. 102, 4416–4424.
363
Công nghệ nguồn sinh học 251 (2018) 358–
363
Hafid, HS, Rahman, NAA, Mokhtar, MN, Talib, AT, Baharuddin, AS, Shah, UKM, 2017. Sản xuất quá mức đường có
thể lên men để sản xuất cồn sinh học từ rác thải thực phẩm giàu carbo hydrat của Malaysia thông qua
quá trình tiền xử lý tiền thủy phân bằng axit liên tiếp . Quản lý chất thải. (Oxford) 67, 95–105.
Han, X., Liu, G., Song, W., Qu, Y., 2017. Sản xuất natri gluconat từ bã ngô đã được phân tách bằng cách
tạo cellulase tại chỗ và đồng cố định glucose oxidase và catalase. Nước sinh học. Technol. http://
dx.doi.org/10.1016/j.biortech.2017.06.109.
Harada, A., Sasaki, K., Kaneta, T., 2016. Xác định trực tiếp lignin peroxidase tái
được thuê từ Phanerochaete chrysosporium bằng xét nghiệm enzyme trong mao quản sử dụng sắc ký điện
động micellar. J. Chromatogr. A 1440, 145–
149.
Hou, J., Zhang, S., Qiu, Z., Han, H., Zhang, Q., 2017. Hiệu ứng kích thích và hành vi hấp phụ của
rhamnolipid trên hệ thống phân giải lignocelluloses. nguồn sinh học. Technol. 224, 465–472.
Ismail, M., Compton, SG, Brooks, M., 2017. Sự tương tác giữa nhiệt độ và mức độ dinh dưỡng của nước đối
với sức khỏe của Eccritotarsus catarinensis (Hemiptera: Miridae), một tác nhân kiểm soát sinh học của
lục bình. sinh học. Kiểm soát 106, 83–
88.
Lai, C., Tang, S., Yang, B., Gao, Z., Li, X., Yong, Q., 2017. Tăng cường quá trình đường hóa bằng enzym
của thân cây ngô bằng cách biến đổi tại chỗ lignin bằng poly (ethylene glycol ) ether trong quá trình
tiền xử lý bằng kiềm ở nhiệt độ thấp. nguồn sinh học. Technol. 244, 92–
99.
Li, Y., Zhang, X., Xiong, L., Mehmood, MA, Zhao, X., Bai, F., 2017. Sản xuất cellulase tại chỗ và đường
hóa hiệu quả thân cây ngô sử dụng cbh2 thay vì biểu hiện Trichoderma reesei bằng tiểu thuyết hệ
thống cảm ứng. nguồn sinh học. Technol. 238, 643–
649.
Lin, R., Cheng, J., Song, W., Ding, L., Xie, B., Zhou, J., Cen, K., 2015. Đặc điểm của bèo tây với xử lý
trước bằng kiềm được làm nóng bằng vi sóng để tăng cường enzym khả năng tiêu hóa và lên men hydro /
mêtan. nguồn sinh học. Technol. 182, 1–
7.
Lin, TH, Guo, GL, Hwang, WS, Huang, SL, 2016. Bổ sung gạo thủy phân
rơm rạ trong quá trình lên men xyloza bằng nấm mốc Pichia để tăng sản xuất cồn sinh học ở quy mô
thí điểm. Năng lượng sinh học Biomass 91, 204–
209.
Lopez-Hidalgo, AM, Sánchez, A., León-Rodríguez, AD, 2017. Sản xuất đồng thời cồn sinh học và hydro sinh học
bởi Escherichia coli WDHL bằng cách sử dụng hydro lysate rơm rạ làm chất nền. Nhiên liệu 188, 19–27.
Machado, AS, Ferraz, A., 2017. Tiền xử lý sinh học bã mía bằng ba sidiomycetes tạo ra các kiểu phân hủy
sinh học khác nhau. nguồn sinh học. Technol. 225, 17–
22.
Miller, GL, 1959. Sử dụng thuốc thử axit dinitrosalicylic để xác định su
ga. hậu môn. hóa học. 31, 426–
428.
Narra, M., Divecha, J., Shah, D., Balasubramanian, V., Vyas, B., Harijan, M., Macwan, K., 2017. Sản xuất
cellulose, đường hóa và lên men đồng thời trong một bình duy nhất: a phương pháp mới để sản xuất cồn
sinh học từ lục bình đã qua xử lý bằng kiềm nhẹ. J. Môi trường. Chèm. Tiếng Anh 5, 2176–2181.
Sindhu, R., Binod, P., Pandey, A., 2016. Tiền xử lý sinh học khối lượng sinh học lignocellulose – tổng
quan. nguồn sinh học. Technol. 199, 76–
82.
Sindhu , R. , Binod , P. , Pandey , A. , Madhavan , A. , Alphonsa , JA , Vivek , N. , Gnansounou , E. ,
Castro , E. , Faraco , V. , 2017 nguồn giá trị gia tăng: một cái nhìn tổng quan. nguồn sinh học. công
nghệ. 230 , 152–
162 .
Singh, R., Balagurumurthy, B., Prakash, A., Bhaskar, T., 2015. Hóa lỏng thủy nhiệt xúc tác của lục bình.
nguồn sinh học. Technol. 178, 157–
165.
Singhania, RR, Saini, R., Adsul, M., Saini, JK, Mathur, A., Tuli, D., 2015. Một quy trình tích hợp để sản
xuất etanol sinh học sử dụng SSF sản xuất xenlulaza mà không cần chiết xuất . Hóa sinh. Tiếng Anh J.
102, 45–
48.
Sukumaran, RK, Singhania, RR, Mathew, GM, Pandey, A., 2009. Sản xuất cellulase bằng cách sử dụng nguồn
thức ăn sinh khối và ứng dụng của nó trong quá trình đường hóa lignocellulose để sản xuất ethanol
sinh học. Thay mới. Năng lượng 34, 421–
424.
Tasnim, F., Iqbal, DSA, Chowdhury, AR, 2017. Sản xuất khí sinh học từ quá trình đồng phân hủy kỵ khí của
phân bò với chất thải nhà bếp và Lục bình. Năng lượng tái tạo 109, 434–
439.
Thi, BTN, Ong, LK, Thi, DTN, Ju, YH, 2017. Ảnh hưởng của tiền xử lý nước dưới tới hạn đối với việc thu hồi
xenlulo của bèo tây (Eichhornia crassipe). J. Đài Loan Inst. Chèm.
Tiếng Anh 71, 55–
61.
Xiao, K., Yuan, Y., Xiao, N., Zhou, W., Yang, Q., Fenga, W., Zhu, D., 2017. Enzymatic
phản ứng đường hóa của Eichhornia crassipes, bã mía và Metasequoia glyptostroboides đối với hai quá
trình xử lý trước quá trình oxy hóa để sản xuất nhiên liệu sinh học. Ind. Sản phẩm cây trồng . 107,
22–
29.
Xu, F., Chen, L., Wang, A., Yan, Z., 2016. Ảnh hưởng của chất lỏng ion không chứa chất hoạt động bề mặt
tiền xử lý croemulsions về thành phần, cấu trúc và quá trình thủy phân lục bình bằng enzym. nguồn sinh
học. Technol. 208, 19–
23.
Xue, C., Wang, ZX, Du, GQ, Fan, LH, Mu, Y., Ren, JG, Bai, FW, 2016. Tích hợp loại bỏ etanol bằng cách sử
dụng màng trộn ống nano cacbon (CNT) và lên men etanol bằng cách men tự keo tụ để thu hồi etanol chống
hà. Quy trình sinh hóa. 51, 1140–
1146.
Yan, J., Wei, Z., Wang, Q., He, M., Li, S., Irbis, C., 2015. Sản xuất cồn sinh học từ lục bình đã
xử lý trước bằng natri hydroxit/hydro peroxide thông qua quá trình đường hóa và lên men đồng
thời với một chủng Kluyveromyces marxianu chịu nhiệt mới được phân lập . nguồn sinh học.
Technol. 193, 103–
109.
Zhang, F., Wang, X., Ji, X., Ma, L., 2016a. Loại bỏ arsenat hiệu quả bằng than sinh học lục
bình biến đổi từ tính. môi trường. Ô nhiễm. 216, 575–583.
Zhang, Q., Weng, C., Huang, H., Achal, V., Wang, D., 2016b. Tối ưu hóa sản xuất cồn sinh học bằng
cách sử dụng toàn bộ cây Lục bình làm chất nền trong quá trình đường hóa và lên men đồng thời.
Đổi diện. Vi sinh. 66 (4), 633–
652.
Zhang, Q., Huang, H., Han, H., Qiu, Z., Achal, V., 2017. Tác dụng kích thích của quá trình khử
độc tại chỗ đối với quá trình sản xuất cồn sinh học bằng rơm rạ. Năng lượng 135, 32–
39.