Tối ưu hóa quy trình chiết xuất và mô tả đặc điểm của Tinh

dầu vỏ bưởi trồng ở Tỉnh Tiền Giang , Việt Nam

Tóm tắt
Quá trình chưng cất hydro được sử dụng để lấy tinh dầu từ vỏ bưởi thu hái ở Việt Nam. Ảnh
hưởng của các biến số chiết xuất bao gồm kích thước của nguyên liệu, nhiệt độ, thời gian chiết
xuất và tỷ lệ nước trên nguyên liệu về sản lượng tinh dầu đã được nghiên cứu. Ngoài ra, để đánh
giá chất lượng của tinh dầu bưởi, người ta đã so sánh thành phần hóa học. Các điều kiện tối ưu
hóa như sau: kích thước vật liệu nghiền, nhiệt độ 120 ° C, tỷ lệ nước trên vật liệu 5 mL / g, và
chiết xuất thời gian 105 phút tương ứng. Thành phần hóa học của dầu bưởi sau đó được xác định
bằng GC-MS, trong đó 5 thành phần đã được xác định, trong đó, limonene là cao nhất (97,1%).
Phương pháp này có thể coi là phương pháp chiết xuất xanh vì nó là quá trình tiêu tốn ít năng
lượng hơn và mang lại hiệu suất cao. Các kết quả được mong đợi sẽ hỗ trợ cho việc biện minh
cho hydrodistillation trong các ứng dụng công nghiệp và tinh chế các thông số khai thác.
Giới thiệu
Tinh dầu được ứng dụng rộng rãi trong các ngành công nghiệp khác nhau như mỹ phẩm, thực
phẩm và dược phẩm và mang ý nghĩa lâm sàng rộng. Để có được tinh dầu từ nguyên liệu thô,
một loạt các phương pháp có thể được áp dụng. Trong khi cũ, truyền thống các phương pháp,
chẳng hạn như chưng cất và biểu hiện bằng hydro, chỉ yêu cầu các dụng cụ đơn giản để sản xuất
tinh dầu với chất lượng phù hợp, các kỹ thuật chiết xuất mới được phát triển (kỹ thuật giảm áp
được kiểm soát tức thì, chất lỏng siêu tới hạn, công nghệ khí hóa lỏng và chiết xuất siêu âm) cho
phép dung môi và năng lượng tốt hơn tiết kiệm và khả năng mua các sản phẩm có chất lượng tốt
hơn và bền vững.
Tuy nhiên, các công nghệ mới hơn thường phức tạp hơn và đòi hỏi các thiết bị đắt tiền như lò vi
sóng máy chiếu xạ, máy tạo hơi nước và máy bơm chân không. Do đó, việc tăng cường các quy
trình đã thiết lập đóng một vai trò quan trọng trong việc cải tiến các sản phẩm chiết xuất từ tinh
dầu và đang thu hút sự chú ý của giới khoa học trong thời gian gần đây. Tinh dầu được phân lập
từ quả bưởi là một tác nhân được sử dụng rộng rãi với nhiều loại ứng dụng và đã được biết đến
như một chất thay thế cho các chất chống vi khuẩn và chất chống oxy hóa. Nó đã được chứng
minh rằng hoạt tính sinh học của các loại tinh dầu phụ thuộc vào hóa chất của chúng các chế
phẩm. Do đó, thành phần hóa học của tinh dầu bưởi khác nhau các quốc gia cũng là một đối
tượng nghiên cứu sâu rộng. Một thành phần quan trọng của tinh dầu bưởi là
limonene, chiếm khoảng 85 đến 96% tổng hàm lượng trong khi myrcene, sabinene, α-pinen và α
terpinene đã được báo cáo ở mức dưới 2,5% .Các thành phần phụ khác bao gồm nootkatone,
octanal, octyl axetat, citronellyl axetat, citral và carvone đã được tìm thấy theo dấu vết nồng độ
trong tinh dầu (<1,0%) và được coi là tác nhân chính của mùi hương. Sự khác biệt như vậy trong
thành phần tinh dầu bưởi có thể là do sự đa dạng của cây bưởi, bộ phận của cây, kỹ thuật và quy
trình chiết được sử dụng thông số. Cho đến nay, nhiều phương pháp chiết xuất bao gồm phương
pháp chưng cất hydro có sự hỗ trợ của vi sóng và
Quá trình chiết xuất CO2 siêu tới hạn đã được cố gắng để cô lập các chất chiết xuất mang tinh
dầu từ cây bưởi vật liệu .Tuy nhiên, các quy trình như vậy thiếu tính ứng dụng trong sản xuất
tinh dầu ở quy mô thương mại do chi phí hoạt động cao, phức tạp và khả năng mở rộng hạn chế.
Trong nghiên cứu này, tinh dầu bưởi được chiết xuất từ vỏ bưởi được lấy ở Tiền Giang tỉnh, Việt
Nam. Mặc dù vùng này được biết đến là nơi sản xuất bưởi chính, nhưng tinh dầu của quả nguồn
gốc từ khu vực này không được nghiên cứu rộng rãi. Quá trình chưng cất hydro được chọn làm
quá trình chiết xuất phương pháp trong nghiên cứu này do tính dễ vận hành, chi phí thấp và khả
năng thực hiện khai thác triệt để từ nguyên liệu thô. Các thông số chiết xuất cũng được tối ưu
hóa đối với tinh dầu tối đa năng suất và sản phẩm thu được được đặc trưng bằng phương pháp
sắc ký khí-khối phổ (GC-MS) để xác định thành phần dễ bay hơi. Kết quả dự kiến sẽ góp phần
nâng cao giá trị của quả bưởi và biện minh cho việc sử dụng quá trình chưng cất hydro trong các
quy trình sản xuất quy mô lớn hơn.
Nguyên liệu và phương pháp
Vật liệu và hóa chất
Những trái bưởi tươi (Citrus grandis L.) được chọn lọc từ tỉnh Tiền Giang (vĩ độ 10 ° 25’13’’N
và kinh độ 106o17’49’’E) của Việt Nam vào tháng 3 năm 2020, sau đó rửa sạch và bóc vỏ thủ
công. Vỏ đã được cắt thành các miếng có kích thước khoảng 2x2 cm2 và được giữ trong túi nhựa
ở nhiệt độ thấp (4 ° C). Trước chưng cất, mẫu đã được cân chính xác, xử lý và sử dụng ngay để
tránh làm mất chất cần thiết. dầu. Hàm lượng nước của vỏ bưởi tươi là 73,76 ± 0,19, được xác
định sau
Phương pháp của Hiệp hội các nhà hóa học phân tích chính thức (AOAC) 925.10.
Quá trình chưng cất hydro
Kỹ thuật chưng cất hydro được sử dụng để chiết xuất tinh dầu vỏ bưởi. Thủ tục như sau.
Đầu tiên, 100g vỏ được cho vào bình cầu đáy tròn 1L với 500 mL nước cất, khử ion và được kết
nối với thiết bị chưng cất của Clevenger. Tinh dầu được chiết xuất bằng phương pháp chưng cất
thủy thực hiện trong 120 phút. Khoảng thời gian chiết xuất cho phép chiết xuất hết dầu từ các mô
vỏ là được chứng minh bởi các nghiên cứu trước đây (Dao et al., 2019; Thuy et al., 2019). Tinh
dầu thu được, là thu được trong máy thu Clevenger, được tách ra và làm khan bằng Na2SO4.
Tinh dầu chiết xuất được bảo quản trong một chai thủy tinh màu hổ phách và được làm lạnh ở 4
° C cho đến khi phân tích thêm. Mỗi lần chiết xuất là thực hiện ba lần trong cùng một điều kiện
Điều tra yếu tố đơn lẻ được sử dụng để khảo sát các điều kiện chiết xuất tối ưu của quá trình
chưng cất hydro quá trình. Bốn yếu tố bao gồm kích thước vật liệu, tỷ lệ nước-vật liệu, nhiệt độ
và thời gian chiết xuất là do đó được phép thay đổi. Sản lượng tinh dầu được chọn là kết quả của
việc tối ưu hóa. Cuộc khảo sát được thực hiện để ước tính các điều kiện tốt nhất cho quá trình
khai thác và nó được lặp lại để tránh sai sót
Sắc ký khí - phân tích khối phổ
Sắc ký khí-Khối phổ (GC-MS) được sử dụng để phân tích thành phần của tinh dầu của tất cả các
phương pháp chiết xuất. 25 µL mẫu tinh dầu trong 1,0 mL n-hexan. Tên thiết bị: GC Agilent
6890N, MS 5973 trơ với cột HP5-MS, áp suất đầu cột 9.3psi. Hệ thống GC-MS là thực hiện giữ
trong các điều kiện sau: khí mang He; tốc độ dòng chảy 1,0 mL / phút; chia 1: 100; mũi tiêm thể
tích 1,0 µL; nhiệt độ tiêm 250 ° C; tiến độ nhiệt độ lò bao gồm giữ ban đầu ở 50 ° C cho 2 phút,
và tăng lên 80 ° C ở 2 ° C / phút, và chúng đến 150 ° C ở 5 ° C / phút, tiếp tục tăng lên 200 ° C ở
10 ° C / phút và tăng lên 300 ° C ở 20 ° C / phút trong 5 phút.
Kết quả và thảo luận
Điều tra yếu tố đơn lẻ
Ảnh hưởng của bốn thông số thí nghiệm đến sản lượng tinh dầu bưởi được thể hiện trong Hình
1.1a đề cập đến sự thay đổi sản lượng tinh dầu thu được khi thay đổi kích thước nguyên liệu. Nói
chung, Hiệu suất khai thác tinh dầu bưởi được cải thiện khi kích thước của nguyên liệu giảm.
Đặc biệt, hiệu suất tăng từ 1% đến 1,8% khi thay đổi kích thước từ kích thước ban đầu sang kích
thước nhuyễn. Điều này có thể là giải thích như sau. Kích thước vật liệu càng nhỏ, nước khuếch
tán vào túi tinh dầu càng nhanh, thúc đẩy sự giải phóng tinh dầu khi tiếp xúc với nhiệt và do đó
gây ra năng suất chiết xuất tốt hơn. Ngược lại, kích thước vỏ lớn sẽ tạo ra ít dầu hơn do diện tích
bề mặt tiếp xúc vớidung môi. Do đó, vỏ xay đã được lựa chọn trong các cuộc điều tra tiếp theo
(Dao et al., 2019b; Tran etal., 2019).
Một trong những yếu tố chính ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất là nhiệt độ chiết. Nó được
quan sát từ Hình 1b rằng khi nhiệt độ tăng từ 100 đến 120 ° C, sản lượng của tinh chất chiết được
dầu tăng dần từ 1,5 đến 1,8%. Tuy nhiên, sản lượng tinh dầu không còn tăng ở mức 1,8% và có
xu hướng giảm khi nhiệt độ tăng lên 130 ° C và 140 ° C. Quan sát này có thể được giải thích từ
thực tế là nhiệt và hơi nước được tạo ra ở 120 ° C gây ra sự đứt gãy mạnh hơn đối với các tế bào
thực vật, do đó làm nổi bật việc đẩy tinh dầu ra môi trường xung quanh. Điều này phù hợp với
kết quả của Tran et al. [2018] nơi hiệu quả của quá trình chiết xuất thực vật được phát hiện là rất
lớn bị ảnh hưởng bởi nhiệt độ. Vì vậy, đối với nguyên liệu vỏ bưởi, nhiệt độ 120 ° C là tối ưu
nhất cho chưng cất bằng hydro và vượt quá nhiệt độ này, tinh dầu có thể bị biến chất, do đó làm
suy giảm quá trình chiết xuất năng suất.
Tương tự, có thể thấy ảnh hưởng của thời gian chiết đến năng suất tinh dầu bưởi trong Hình 1c.
Lúc đầu giai đoạn, thời gian chiết xuất và năng suất quá trình tỷ lệ thuận với nhau. Ở phút thứ
105, năng suất đạt giá trị cao nhất ở mức 1,85% và sau đó giảm xuống 1,75% và xuống 1,6% ở
120 phút và ở 135 min, tương ứng. Người ta coi rằng thời gian khai thác càng dài thì lượng dầu
thu được càng nhiều. Như chưng cất thời gian kéo dài đến một giới hạn nhất định, lượng tinh dầu
thu được đạt trạng thái bão hoà và là có khả năng bị biến tính do tiếp xúc với nhiệt kéo dài
(Boukhatem và cộng sự, 2014). Việc xác định thời gian khai thác liên quan đến tiêu thụ năng
lượng và chi phí sản xuất của quá trình. Do đó, 105 phút là được chọn làm khoảng thời gian thích
hợp để tiến hành thử nghiệm tiếp theo. Trong quá trình chưng cất, ở điểm sôi, tinh dầu trong tế
bào thực vật khuếch tán ra bề mặt của vật liệu và bị cuốn đi bởi hơi nước. Đồng thời, nước xâm
nhập vào vật liệu ngược lại hướng và dầu tiếp tục bị cuốn vào nước. Quá trình này xảy ra cho
đến khi tinh dầu trong các mô thoát ra ngoài hoàn toàn. Do đó, việc xác định tỷ lệ nước trên
nguyên liệu là cần thiết để quá trình chiết xuất đạt được năng suất tối đa. Ảnh hưởng của tỷ lệ
nước và vật liệu có thể được nhìn thấy trong Hình 1d.
Khi tỷ lệ thay đổi, hiệu suất của quá trình cũng thay đổi và năng suất cao nhất đạt được là 5: 1
mL / g. Ở tỷ lệ nước thấp 2-3 mL / g, lượng tinh dầu thu được thấp là do không đủ lượng lượng
nước cần thiết để hòa tan các lớp keo bao quanh túi tinh dầu. Điều này để lại một lượng tinh dầu
còn sót lại trong nguyên liệu, làm giảm hiệu quả của quá trình. Mặt khác, ở các tỷ lệ cao hơn như
6-7: 1 mL / g thì lượng tinh dầu thu được cũng không cao, có thể do để làm chậm tốc độ bay hơi
nước và thất thoát dầu trong ống thu gom, làm giảm hiệu quả của quá trình chưng cất. Về mặt
thực tế, lượng nước lớn cũng dẫn đến thời gian chưng cất kéo dài và chi phí vận hành cao hơn.
Lượng tinh dầu thu được cao nhất (1,9%) ở tỷ lệ nguyên liệu nước của 5: 1 mL / g
Kết quả của GC-MS
Thành phần của tinh dầu từ vỏ bưởi được xác định bằng cách so sánh thời gian lưu và khối phổ
của các hợp chất trong tinh dầu với thư viện dữ liệu phổ. Tinh dầu cam quýt là thường được đặc
trưng bởi sự phong phú của một hoặc hai hợp chất chính. Tinh dầu bưởi được báo cáo là có hoạt
tính kháng khuẩn mạnh đối với các chủng vi khuẩn (Gram âm và Vi khuẩn Gram dương), nấm
men và nấm mốc được thử nghiệm bởi Chanthaphon và cộng sự. (2008). Cơ chế của việc này
hoạt tính sinh học được Lis-Balchin (1996) xây dựng, duy trì rằng limonene, α-pinen và sabinene
có thể phá vỡ màng của vi sinh vật và ức chế quá trình vận chuyển ion và hô hấp.
Trong nghiên cứu này, khoảng 100g vỏ bưởi tạo ra khoảng 1,9 mL tinh dầu bằng cách sử dụng
Clevenger’s bộ máy ở điều kiện tối ưu. Thành phần của dầu dễ bay hơi được phân tích bằng GC-
MS (Bảng 1 và Hình 2). Năm thành phần được phát hiện từ vỏ, chiếm gần như 100% thành phần
tinh dầu. limonene, α-pinen và β-myrcene là những thành phần chính trong tinh dầu. Phong phú
nhất thành phần là limonene, một hydrocacbon monoterpene, với tỷ lệ 97,1%. Các thành phần
quan trọng khác là β myrcene (1,3%) và α-Pinene (0,7%). Các kết quả này tương tự với các dữ
liệu tài liệu khác về Citrus chi (Uysal và cộng sự, 2011; Chen & Viljoen, 2010).
Limonene là một hợp chất được nghiên cứu kỹ lưỡng với các hoạt tính sinh học đa dạng và được
tìm thấy nhiều ứng dụng trong mỹ phẩm, thực phẩm và các ngành công nghiệp đồ uống. Trong
các ứng dụng nông nghiệp, limonene là một thành phần phổ biến trong thuốc trừ sâu, thuốc diệt
cỏ và các sản phẩm chống hư hỏng. Trong lĩnh vực y học, limonene cũng có liên quan đến lâm
sàng do chất chống oxy hóa của nó hoạt động. Tuy nhiên, sự không ổn định của limonene và tính
nhạy cảm với các điều kiện bên ngoài đã khiến phát triển các quy trình bảo quản như vi bao,
đông tụ và nhũ hóa nano và thúc giục đổi mới hơn nữa trong việc nâng cao tính tương thích sinh
học của các sản phẩm tạo thành (Ibanez và cộng sự, 2020; Mahato và cộng sự, 2019)
Các loài cam quýt đã được biết đến như một nguồn dồi dào cho limonene, có hàm lượng được
báo cáo nằm trong khoảng từ 30,1 đến 75,5% (Patil và cộng sự, 2009; Kamal và cộng sự, 2011).
Nội dung của limonene trong tinh dầu vỏ bưởi cũng rất đa dạng tùy thuộc vào nguồn gốc nguyên
liệu và cách chiết xuất. kĩ thuật. Kết quả của chúng tôi chỉ ra rằng quá trình chưng cất hydro có
thể hợp lý khi nói đến chiết xuất hiệu suất liên quan đến hàm lượng limonene trong dầu vỏ bưởi
thu được. Khan và cộng sự. (2007) chỉ ra rằng limonene trong tinh dầu được chưng cất từ vỏ
bưởi Pakistan đóng góp vào khoảng 72,3% trong tổng số nội dung. Trong khi đó, tinh dầu thu
được bằng cách ép từ vỏ Nhật Bản và Kenya cho thấy hàm lượng limonene tương ứng là 87,1%
và 94,8% (Sawamura và cộng sự, 2001; Njoroge và cộng sự, 2005). Trên ngược lại, hàm lượng
limonene rất thấp (3,7%) được xác định trong chất bay hơi bưởi Hàn Quốc được chiết xuất bằng
chất lỏng siêu tới hạn, có thể được giải thích bằng thành phần phức tạp hơn của các chất chiết
xuất siêu tới hạn (Gyawali và cộng sự, 2012). Những khác biệt này cho thấy rằng cả nguồn gốc
vật liệu và kỹ thuật chiết xuất phần lớn có thể xác định thành phần của các sản phẩm tinh dầu và
hợp lý hóa cho kỹ thuật chiết xuất nên được làm riêng cho từng mục đích sử dụng
Sự kết luận
Việc chiết xuất tinh dầu từ vỏ bưởi đã được thử nghiệm bằng phương pháp chưng cất thủy. Các
quá trình được tối ưu hóa bằng cách thay đổi một số thông số bao gồm tỷ lệ nước trên nguyên
liệu, nhiệt độ và thời gian chiết xuất. Các điều kiện tối ưu cho quá trình chiết xuất như sau: nhiệt
độ 120 ° C, tỷ lệ 5: 1 mL / g, và thời gian chiết 105 phút. Sản lượng tinh dầu bưởi là 1,9% trong
các các điều kiện. Bên cạnh đó, phân tích GC-MS chỉ ra rằng thành phần dầu bưởi ở Việt Nam
thu được khi sử dụng phương pháp chưng cất hydro chứa khoảng 97% limonene. Do đó, chưng
cất thủy được coi là một phương pháp chiết xuất xanh vì nó là một quá trình năng lượng thấp và
không yêu cầu giai đoạn tách dung môi tiếp theo. Các nghiên cứu sâu hơn nên xem xét việc đánh
giá các hoạt tính sinh học của tinh dầu bưởi đối với các thành phần dễ bay hơi khác nhau.
Nhìn nhận
Nghiên cứu này được tài trợ bởi Chương trình Khoa học và Công nghệ của Bộ Giáo dục và Đào
tạo (Việt Nam): "Ứng dụng và phát triển công nghệ tiên tiến trong bảo quản và chế biến thủy sản
và nông nghiệp. Sản phẩm tại Đồng bằng sông Cửu Long ”(Mã số: CT2020.01.TCT-07).