Professional Documents
Culture Documents
Copyright Taylor and Francis Group, LLC Published online: 31 Mar 2010.
Compuestos fenólicos y actividad antioxidante de cáscara de uva (Vitis vinifera L.) de mesa
cultivada en el noroeste de México
Phenolic compounds and antioxidant activity of table grape (Vitis vinifera L.) skin from
northwest Mexico
D.M.A. Molina-Quijadaa, L.A. Medina-Juáreza, G.A. González-Aguilarb, R.M. Robles-Sánchezb and
N. Gámez-Mezaa*
a
Departamento de Investigaciones Cientı´ficas y Tecnológicas de la Universidad de Sonora, Blvd. Rosales y Niños He´roes s/n. Colonia
Centro, C.P. 83000, Hermosillo, Sonora, Me´xico; bTecnologı´a de Alimentos de Origen Vegetal, Centro de Investigación en
Alimentación y Desarrollo, A.C. Carretera a La Victoria km 0.6, La Victoria, Hermosillo, Sonora (83000), Me´xico
(Received 22 October 2008; final version received 18 June 2009)
The evaluation of the antioxidant capacity of table grape cultivars is important, because it varies according to the
production area. In this work, the content of phenolic compounds and total antioxidant capacity (TAC) of skin of 4
table grapes (Vitis vinifera L.) cultivars, two green (Perlette and Sugra One) and two red (Flame and Red Globe) and
one industrial variety (Carignane) was evaluated. The total phenol content was determined by Folin-Ciocalteau
and TAC of the grape skin extracts by the methods of radicals scavenging ABTS þ and DPPH . The TAC (ABTS þ)
. . .
of extracts was increased (P 5 0.05) in the following order: Sugra One 5 Flame 5 Perlette and Red
Globe 5 Carignane. The higher contents of gallic acid, resveratrol and rutin were found in the extracts with the
higher TAC, which correspond to the cultivars Carignane, Red Globe and Perlette.
Keywords: table grapes; phenolic compounds; flavonoids; natural antioxidants; antioxidant capacity
La evaluación de la capacidad antioxidante de cultivares de uva de mesa es importante porque ésta varı́a de acuerdo
a la zona de producción. En este trabajo, se evaluó el contenido de compuestos fenólicos y la capacidad antioxidante
total (CAT) de la cáscara de 4 cultivares de uva (Vitis vinifera L.) de mesa, dos verdes (Perlette y Sugra One) y dos
rojas (Flame y Red Globe) y la cáscara de una variedad industrial roja (Carignane). El contenido de fenoles totales se
determinó por el método de Folin-Ciocalteau y la CAT de los extractos de cáscara de uva por los métodos de
estabilización de los radicales ABTS þ y DPPH . La CAT (ABTS þ) en los extractos se incrementó (P 5 0,05) en el
. . .
orden siguiente: Sugra One 5 Flame 5 Perlette y Red Globe 5 Carignane. Los contenidos más altos de ácido
gálico, resveratrol y rutina se encontraron en los extractos que presentaron la mayor CAT, los cuales
correspondieron a los cultivares de Carignane, Red Globe y Perlette.
Palabras clave: uvas de mesa; compuestos fenólicos; flavonoides; antioxidantes naturales; capacidad antioxidante
Garcı́a, 2003; Marinova, Ribarova, & Atanassova, evitar la absorción de humedad y se almacenaron a una
2005). temperatura de – 20 8C.
México es productor y exportador importante de
algunos cultivares de uva para consumo en fresco. Los
cultivares mas comúnmente comercializados son: Perl- Extractos metanólicos
ette, Flame, Sugra One y Red Globe entre otros Se colocaron 2 g de muestra en 20 mL de metanol
(INFOCIR, 2005). En estos cultivares, son pocos los acuoso (60:40 v/v) y se homogenizaron en un Ultra-
estudios sobre componentes bioactivos particular- Turrax T 25 basic S1 (IKA-Works Inc. Wilmington,
mente fenoles y su potencial antioxidante. Conside- NC, USA). Posteriormente el homogenizado fue
rando las tendencias actuales por parte de los sometido a ultasonidos por 30 min y centrifugado
consumidores acerca de alimentos saludables, se (3000 g) a 4 8C por 15 min. Las muestras fueron
requiere de mayor información que pueda considerar filtradas en papel Whatman No. 2. La extracción
a estos frutos como parte importante de una dieta metanólica se repitió dos veces para asegurar la
saludable. Debido a lo anterior, el objetivo del presente máxima extracción de los compuestos. Los extractos
estudio fue determinar e identificar los componentes fueron congelados a 720 8C (Chitindingu, Ndhlala,
fenólicos de estos cultivares de uva y evaluar su Chapano, Benhyura, & Muchuweti, 2006).
actividad antioxidante mediante 2 métodos quı́micos
(ABTS þ y DPPH ) que utilizan los radicales ácido 2,2-
. .
identificados. El ácido gálico, catequina y epicatequina EAG/g peso seco (ps) de cáscara de uva industrial roja
fueron cuantificados a 280 nm (longitud de onda a la Carignane a 7,18 + 0,27 mg EAG/g de cáscara seca de
cual presentan su absorbancia máxima), el resveratrol uva de mesa verde Sugra One (Figura 1). De acuerdo a
y el ácido clorogénico a 320 nm y el quercetin-3- la literatura el contenido de fenoles totales encontrados
rutinosido conocido como rutina (flavonol) a 360 nm en cáscara de uva roja puede variar desde 0,55 hasta
(Garcı́a-Alonso et al., 2003). Los compuestos fenólicos 51,29 mg/g ps y en uva verde de 0,28 hasta 37,94 mg/g
de los extractos fueron analizados por triplicado. ps (Pinelo, Rubilar, Jerez, Sineiro, & Nuñez, 2005;
Duda-Chodak & Tarko, 2007). Kuskoski, Asuero,
Troncoso, Mancini-Filho, & Fett (2005) encontraron
Evaluación de la actividad antioxidante niveles de fenoles totales bajos (1,17 mg EAG/g) en
El método de TEAC se basa en la reducción de la pulpa de uva roja. Sin embargo, al incluir la cáscara los
coloración verde/azul producida por la reacción del niveles de fenoles se pueden incrementar hasta aproxi-
ABTS þ con el antioxidante presente en la muestra.
.
madamente 50,00 mg EAG/g (Meyer, Yi, Pearson,
Para generar el radical catión ABTS þ se pesaron 19,2
.
Waterhouse, & Frankel, 1997).
mg de ABTS þ y se disolvieron en 5 mL de agua
.
No se encontraron diferencias significativas (P 4
destilada. Posteriormente se agregaron 88 mL de una 0,05) en el contenido de fenoles de la variedad de uva
solución de persulfato de potasio (0,0378 mg/mL), la verde Perlette y los valores de los cultivares de uvas
solución se homogenizó y se incubó en oscuridad a rojas Red Globe y Flame (Figura 1). Baydar, Özkan, &
temperatura ambiente (25 + 1 8C) durante 16 h. Una Yasar (2007) reportaron una cantidad de fenoles
vez formado el radical ABTS þ, éste se diluyó con
.
totales presentes en uvas verdes (variedad Narince)
etanol hasta obtener un valor de absorbancia alrededor de 7,04 mg/g, valor que coincide con el encontrado en
de 0,70 + 0,1 a 734 nm. Las muestras filtradas la variedad verde de Sugra One en el presente estudio.
(0,1 mL de extracto) se colocaron en una celda y se Alonso, Zorro, Guillén, & Garcı́a, (2003) observaron
mezclaron con 3,9 mL del radical. Se midió la que los cultivares de uvas rojas (Cavernet Sauvignon,
absorbancia al inicio (Absi) y durante 7 minutos de Syrah y Tempranillo) presentaron niveles mayores de
reacción (Absf). El diferencial de absorbancia (absi – polifenoles que los cultivares verdes (Palomino Fino,
abf) se transformó a porcentaje de inhibición y se Pedro Ximenez y Moscatel) cultivadas en la región de
calculó la actividad antioxidante en mg equivalente Jeréz de la Frontera, España.
Trolox (ET)/mL mediante una curva de calibración de
Trolox (análogo soluble de la vitamina E) (Pellegrini
et al., 2003). Flavonoides totales
.
DPPH . El radical 2,2-difenil-1-picrilhidracilo El contenido de flavonoides totales fue mayor en los
.
(DPPH ) se reduce en presencia de antioxidantes extractos de las uvas rojas que en los obtenidos de las
manifestándose un cambio de color en la solución. uvas verdes, siendo significativamente mayor
.
3,9 mL del radical DPPH (0,025 mg/mL metanol) se (P 5 0,05) en la uva roja Carignane (8,81 + 0,22 mg
mezclaron con 0,1 mL de cada uno de los extractos EQ/g muestra ps) (Figura 2). Tanto las cáscaras de
metanólicos. La reacción se llevó a cabo por 30 min y
posteriormente se leyó espectrofotométricamente a
515 nm (Materska & Perucka, 2005). Los cambios en
la absorbancia al inicio y final de la reacción fueron
transformados a porcentaje de inhibición. Los resulta-
dos fueron expresados como la concentración de los
.
extractos en la cual se inhibe el 50% del radical DPPH
(EC50).
Análisis estadı´stico
Los datos fueron analizados por un análisis de
varianza y comparación de medias por la prueba de
Tukey (P 5 0,05) utilizando Sigmastat 3,5 (Point
Richmond, CA, USA).
uvas rojas como las de uvas verdes mostraron tener Estudios previos de uva de mesa roja cultivada en
niveles de flavonoides mayores a los reportados para la región de Pesqueira, Sonora, México, señalan que la
uva roja (6,00 mg/g) (Mané et al., 2007). Se ha intensidad de luz y las horas luz de exposición de las
observado que los niveles de flavonoides pueden variar uvas aumentan el contenido de flavonoides y en
en diferente magnitud durante la maduración del fruto, consecuencia su capacidad antioxidante (Rivera-
independientemente de la variedad. El estado de Pastrana, Gardea-Béjar, Martı́nez-Téllez, Rivera-
madurez de los cultivares de uva evaluados en el Domı́nguez, & González-Aguilar, 2007). Esta técnica
presente estudio fue similar. ha demostrado que puede incrementar la actividad de
la enzima fenilalanina amonio-liasa (PAL), en la ruta
de los fenilpropanoides (González-Aguilar, Villegas-
Ochoa, Martı́nez-Tellez, Gardea, & Ayala-Zavala,
2007).
Figura 3. Cromatograma de la mezcla de estándares a 216 nm (A) conteniendo ácido gálico (1), catequina (2), ácido clorogénico
(3), epicatequina (4), resveratrol (5) y rutina (6). Cromatogramas B (280 nm), C (320 nm) y D (360 nm) corresponden a extractos
de cáscara de uva Carignane.
Figure 3. Chromatograms of standard mixture at 216 nm (A) containing gallic acid (1), catechin (2), chlorogenic acid (3),
epicatechin (4), resveratrol (5), and rutin (6). B (280 nm), C (320 nm) y D (360 nm) are chromatograms of skin extract from
Carignane grape.
CyTA – Journal of Food 61
Tabla 1. Principales compuestos fenólicos en los extractos de cáscara de uva (mg/kg ps). Los valores son la media
y + desviación estándar de triplicados. Los valores en cada columna con diferentes letras (a–d) indican una diferencia
significativa (P 5 0,05).
Table 1. Main phenolic compounds in grape skin extracts (mg/kg dw). Values are mean + standard deviation of triplicates.
The values in each column with different letters (a–d) show a significant difference (P 5 0.05).
Referencias
Alonso, B.A.M., Zorro, L., Guillén, D.A., & Garcı́a, B.C.
(2003). Study of the polyphenol content of red and white
grape varieties by liquid chromatography–mass spectro-
Figura 5. Actividad antioxidante de los extractos fenólicos metry and its relationship to antioxidant power. Journal
de cáscara de uva medida por la inhibición del 50% del of Chromatography Acta, 1012, 31–38.
.
radical DPPH (EC50). Letras diferentes en las barras (a–d) Borowska, J. (2003). Fruits and vegetables as source of natural
indican una diferencia significativa (P 5 0,05). antioxidants. Przemysl Fermentacyjny i Owocowo-
Warzywny, 1, 11–12.
Figure 5. Antioxidant activity of skin grapes phenol Baydar, N.G., Özkan, G., & Yasar, S. (2007). Evaluation of
extracts, measured by the inhibition of 50% of radical the antiradical and antioxidant potential of grape
.
DPPH (EC50). Different letters in each bar (a–d) show a extracts. Food Control, 18, 1131–1136.
significant difference (P 5 0.05). Cano, M.P., Sánchez-Moreno, C., Pascual-Teresa, S., &
Ancos, B. (2005). Procesado mı́nimo y valor nutricional.
En G.A. González-Aguilar, A.A. Gardea, & F. Cuamea-
presente trabajo, para extractos de orujo de uva verde y Navarro (Eds.), Nuevas tecnologı´as de conservación de
roja, respectivamente (Pérez-Jiménez & Saura-Calixto, productos vegetales frescos cortados. Editorial: CIAD,
CYTED CONACYT. Mexico: Logiprint Digital S. de
2008). Para el caso de los cultivares de uva de mesa e R.L. de C.V.
industrial la actividad antioxidante se ha atribuido al Cantos, E., Garcı́a-Viguera, C., Pascual-Teresa, S., &
contenido alto de compuestos fenólicos (Shimada, Tomás-Barberán, F.A. (2000). Effect of postharvest
Fujikawa, & Nakamura, 1992). ultraviolet irradiation on resveratrol and other
phenolics of Cv. Napoleon table grapes. Journal of
Agricultural and Food Chemistry, 48, 4606–4612.
Cantos, E., Espı́n, J.C., & Tomás-Barberán, F.A. (2002a).
Concentración equivalente al 50% de inhibición (EC50)
Varietal differences among the polyphenol profiles of
Se encontraron diferencias significativas en la inhibi- seven table grape cultivars studied by LC-DAD-MS-MS.
ción del radical entre los extractos de la cáscara de uvas Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50, 5691–
rojas, siendo la uva industrial Carignane la que mostró 5696.
Cantos, E., Espı́n, J.C., & Tomás-Barberán, F.A. (2002b).
tener la mayor (P 5 0,05) CAT. La EC50 para el Postharvest stilbene-enrichment of red and white table
extracto de uva Carignane fue de 151,22 mg de grape varieties using UV-C irradiation pulses. Journal of
extracto/L, seguida de Red Globe (237,84 mg/L). En Agricultural and Food Chemistry, 50, 6322–6329.
el caso de los cultivares verdes (Perlette y Sugra One), Chitindingu, K., Ndhlala, A.R., Chapano, C., Benhyura,
no se encontraron diferencias significativas (P 4 0,05) M.A., & Muchuweti, M. (2006). Phenolic compound
content, profiles and antioxidant activities of amaranthus
entre los valores EC50 (327,68 y 370,82 mg/L, respecti- hybridus (pigweed), brachiaria brizantha (upright bra-
vamente) (Figura 5). Rubilar, Pinelo, Shene, Sineiro, & chiaria) and panicum máximum (guinea grass). Journal of
Nuñez, (2007) obtuvieron una concentración equi- Food Biochemistry, 31, 206–216.
valente al 50% de inhibición similar a las encontradas Duda-Chodak, A., & Tarko, T. (2007). Antioxidant proper-
en el presente estudio (200 mg/L de extracto crudo de ties of different fruit seeds and peels. Acta Scientiarum
Polonorum Technology Alimentary, 6, 29–36.
bagazo de uva roja Cabernet Sauvignon). Sanchez- Gámez-Meza, N., Noriega-Rodrı́guez, J.A., Medina-Juárez,
Moreno, Larrauri, & Saura-Calixto (1999) reportaron L.A., Ortega-Garcı́a, J., Cázarez-Casanova, R., &
una EC50 de 320,20 mg/L de jugo de uva roja y 2539 Angulo-Guerrero, O. (1999). Antioxidant activity in
mg/L de jugo de uva blanca, con niveles menores de soybean oil of extracts from Thompson grape bagasse.
fenoles totales a los encontrados en el presente trabajo Journal of American Oil Chemists’ Society, 76, 1445–
1447.
(1728 y 519 mg/L, respectivamente). Garcı́a-Alonso, F.J., Periago, M.J., Vidal-Guevara, M.L.,
Los resultados obtenidos confirman que la cáscara Cantos, E., Ros, G., Ferreres, F., & Abellán, P. (2003).
de las uvas de mesa rojas y verdes presentaron una Assessment of the antioxidant properties during storage
importante capacidad antioxidante, atribuida princi- of a dessert made from grape, cherry, and berries. Journal
palmente al contenido alto de compuestos fenólicos, of Food Science, 68, 1525–1530.
Giovanelli, G., & Brenna, O.V. (2007). Evolution of some
los cuales correlacionaron sobre todo en la estabiliza- phenolic components, carotenoids and chlorophylls
ción del radical libre ABTS þ (r ¼ 0,994). Por lo tanto,
.
during ripening of three Italian grape varieties. European
es necesario considerar los beneficios del consumo de Food Research and Technology, 225, 145–150.
CyTA – Journal of Food 63
González-Aguilar, G.A., Villegas-Ochoa, M.A., Martı́nez- Pérez-Jiménez, J., & Saura-Calixto, F. (2008). Anti-oxidant
Tellez, M.A., Gardea, A.A., & Ayala-Zavala, J.F. (2007). capacity of dietary polyphenols determined by
Improving antioxidant capacity of fresh-cut mangoes ABTS assay: a kinetic expression of the results.
treated with UV-C. Journal of Food Science, 72, S197–S202. International Journal of Food Science & Technology,
Hodges, D.M., & Forney, C.F. (2003). Postharvest ascorbate 43, 185–191.
metabolism in two cultivars of spinach differing in their Pinelo, M., Rubilar, M., Jerez, M., Sineiro, J., & Nuñez, M.J.
senescence rates. Journal of the American Society for (2005). Effect of solvent, temperature, and solvent-to-
Horticultural Science, 128, 930–935. solid ratio on the total phenolic content and antiradical
Horubala, A. (1999). Antioxidant capacity and their changes activity of extracts from different components of Grape
in fruit and vegetables processing. Przemysl Fermenta- Pomace. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 53,
cyjny i Owocowo-Warzywny, 3, 30–31. 2111–2117.
INFOCIR. (2005). Boletı´n Quincenal de Inteligencia Agro- Rivera-Pastrana, D.M., Gardea-Béjar, A.A., Martı́nez-
industrial, 10, 1–5. Téllez, M.A., Rivera-Domı́nguez, M., & González-
Kuskoski, M.E., Asuero, A.G., Troncoso, A.M., Mancini- Aguilar, G.A. (2007). Efectos bioquı́micos postcosecha
Filho, J., & Fett, R. (2005). Aplicación de diversos de la irradiación UV-C en frutas y hortalizas. Revista
métodos quı́micos para determinar actividad antioxi- Fitotecnia Mexicana, 30, 361–372.
dante en pulpa de frutos. Revista Brasileña Ciencia y Rubilar, M., Pinelo, M., Shene, C., Sineiro, J., & Nuñez, M.J.
Tecnologı´a Alimentaria, 25, 726–732. (2007). Separation and HPLC-MS identification of
Manach, C., Williamson, G., Morand, C., Scalbert, A., & phenolic antioxidants from agricultural residues:
Rémésy, C. (2005). Bioavailability and bioefficacy of almond hulls and grape pomace. Journal of Agricultural
polyphenols in humans. I. Review of 97 bioavailability and Food Chemistry, 55, 10101–10109.
studies. American Journal of Clinical Nutrition, 81, 230S– Sánchez-Moreno, C., Larrauri, J.A., & Saura-Calixto, F.
242S. (1999). Free radical scavenging capacity and inhibition of
Mané, C., Souquet, J.M., Ollé, D., Verriés, C., Véran, F., lipid oxidation of wines, grape juice and reloated
Mazerolles, G., Cheynier, V., & Fulcrand, H. (2007). polyphenolic constituents. Food Research International,
Optimization of simultaneous flavanol, phenolic acid, 32, 407–412.
and anthocyanin extraction from grapes using an Sato, M., Bagchi, D., Tosaki, A., & Das, D.K. (2001). Grape
experimental eesign: application to the characterization seed proanthocyanidin reduces cardiomyocyte apoptosis
of champagne grape varieties. Journal of Agricultural and by inhibithing ischemia/reperfusion-induced activacion
Food Chemistry, 55, 7224–7233. of JNK-1 and C-JUN. Free Radical Biology & Medicine,
Marinova, D., Ribarova, F., & Atanassova, M. (2005). Total 31, 729–737.
phenolics and total flavonoids in bulgarian fruits and Shimada, K.K., Fujikawa, K.Y., & Nakamura, T. (1992).
vegetables. Journal of the University of Chemical Technol- Antioxidative properties of xanthan on autoxidation of
ogy and Metallurgy, 40, 255–260. soybean oil in cyclodextrin. Journal of Agricultural and
Materska, M., & Perucka, I. (2005). Antioxidant activity of Food Chemistry, 40, 945–948.
the main phenolic compounds isolated from hot pepper Siddhuraju, P., & Becker, K. (2003). Antioxidant properties
fruit (Capsicum annuum L). Journal of Agricultural and of various solvent extracts of total phenolic constitu-
Food Chemistry, 53, 1750–1756. ents from three different agroclimatic origins of
Meyer, A.S., Yi, O.S., Pearson, D.A., Waterhouse, A.L., & drumstick tree (Moringa oleifera Lam.) Leaves.
Frankel, E.N. (1997). Inhibition of human low-density Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51, 2144–
lipoprotein oxidation in relation to composition of 2155.
phenolic antioxidants in grape (Vitis Vinifera). Journal Souquet, J.M., Labarbe, B., Le Guerneve, C., Cheynier, V.,
of Agricultural and Food Chemistry, 45, 1638–1643. & Moutounet, M. (2000). Phenolic composition of grape
Monagas, M., Gómez-Cordovés, C., Bartolomé, B., stems. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 48,
Laureano, O., & Da Silva, J.M.R. (2003). Monomeric, 1076–1080.
oligomeric, and polymeric flavan-3-ol composition of Uhlig, B.A., & Clingeleffer, P. (1998). Ripening character-
wines and grapes from Vitis Vinifera L. Cv. Graciano, istics of the fruit from Vitis vinifera L. drying cultivars
Tempranillo, and Cavernet Sauvignon. Journal of Agri- Sultana and Merbein seedless under furrow irrigation.
cultural and Food Chemistry, 51, 6475–6481. American Journal Enology Viticultura, 49, 375–382.
Pellegrini, N., Serafini, M., Colombi, B., Del Rio, D.,
Salvatore, S., Bianchi, M., & Brighenti, F. (2003). Total
antioxidant capacity of plant foods, beverages and oils
consumed in Italy assessed by three different in vitro
assays. Journal of Nutrition, 133, 2812–2819.