Instituto Politécnico Nacional

Unidad profesional interdisciplinaria de ingeniería

campus Guanajuato
Ingeniería farmacéutica

Práctica 2:
MÉTODOS DE
ESTERILIZACIÓN Y
CONTROLES

Docentes. Asignatura: Microbiología

• Cortés Mendoza Anastasio farmacéutica
• Díaz Sandoval Silvia 4FV1

Alumnos:
• Balderas Salas Diana Lizet Fecha de entrega:
• Hernandez Rangel Angel Jothan Jueves 9 de marzo, 2023
• Portillo Hernandez Luz Ximena
Índice

Tema Página

Objetivos…………………………………………………………………… 3

Introducción …………………………………………………………………… 3

Resultados ……………………………………………………………………… 7

Discusión De resultados ……………………………………………………… 13

Conclusión ..…………………………………………………………………. 14

Cuestionario ……………………………………………………………………. 15

Bibliografía……………..……………..……………..……………..…………….. 18

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Objetivos
Objetivo general:
1.- Esterilizar material de laboratorio por calor seco o calor húmedo.

Objetivos específicos:
1.- Empaquetar el material de laboratorio.
2.- Destinar cada material dependiendo de sus condiciones ya sea a calor
húmedo o calor seco.
3.- Utilizar controles positivos y negativos para corroborar la efectividad de la
esterilización.

Introducción
Para comenzar a hablar de la esterilización comenzaremos por marcar las
diferencias y definir conceptos de: esterilización, sanitizante, desinfectante y
antiséptico.
-Esterilización es el proceso por el cual se logra la destrucción total de los
microorganismos viables presentes en algún instrumental o material.
-Sanitizante es el agente químico el cual tiene por objetivo la reducción de
microorganismos presentes en alguna superficie. a punto que no signifiquen un
riesgo para la salud.
-El desinfectante es el agente antimicrobiano capaz de matar los
microorganismos patógenos del material pueden presentar efectos tóxicos sobre
tejidos vivos por lo que sólo se emplean sobre materiales inertes
-antiséptico es el agente químico de los microorganismos sin causar efectos
importantes y se usan fundamentalmente para disminuir el riesgo de infección en
la piel, mucosa, heridas, etc.

Existen diversos métodos para esterilizar la selección del método aplicar en caso
de que está determinada por el tipo de producto a esterilizar, a continuación
vamos a mencionar los métodos de esterilización clasificados de acuerdo al tipo
de agente que actúa.
Para los agentes físicos usaremos radiaciones o calor ya sea húmedo como
presiona vapor o sea un autoclave o seco por ejemplo aire caliente o
incineración.
Para agentes mecánicos usaremos el método de filtración.

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Para agentes químicos se puede usar el método gaseoso con óxido de etileno y
también no gaseosos como los aldehídos, ácido peracético y peróxido de
hidrógeno.
Agentes físicos el calor es considerado como el método de esterilización por
excelencia siempre y cuando el material esterilizar soporte altas temperaturas sin
sufrir algún tipo de daño para seguir siendo usado de manera óptima. Ahora bien
entrando detalle se dice que el calor húmedo destruyó los microorganismos por
desnaturalización de las proteínas a diferencia del calor seco el cual destruye los
microorganismos por oxidación de sus componentes celulares.
Hablando nuevamente del calor húmedo debemos mencionar que este
funciona mediante agua la cual es una especie química muy reactiva y muchas
estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua por lo
tanto reacciones inversas podrían dañar a la célula a causa de la producción de
productos tóxicos el vapor de agua o sea un coeficiente de transferencia de
calor mucho más elevado que el aire por lo que el material húmedo conduce el
calor mucho más rápido que los materiales Tacos debido a la energía liberada
durante la condensación.
La autoclave (figura 1) es el aparato usado comúnmente en los laboratorios para
esterilizar los cultivos y soluciones que no formen inmunizaciones con agua y que
no se desnaturalice temperaturas mayores así en grados centígrados una
temperatura de 121 °C con un tiempo de exposición mayor a 15 minutos sirve
para destruir organismos formadores de esporas. La ventaja de utilizar una
autoclave es que puede alcanzar temperaturas superiores al agua hirviendo solo,
por lo que puede matar no sólo las bacterias, sino también las esporas
bacterianas, que tienden a ser resistentes. Entre sus desventajas están que no
permite la esterilización de materiales sensibles al calor y materiales no miscibles
con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas.

Figura 2 . Estufa de esterilización puede

Figura 1. Autoclave comúnmente utilizada en variar modelo o tamaño.
laboratorios puede variar su tamaño.

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Ahora hablando del estufa de esterilización (figura 2) qué es el artefacto más
utilizado en laboratorios para esterilizar por calor seco se requiere una
temperatura y tiempo de exposición mayor que el de la autoclave la
temperatura varía entre 120 y 180 °C requiriéndose distintos tiempos de
exposición a 140° se requieren al menos 5 horas de exposición mientras que a
160° se requieren por al menos 2 horas de exposición según el artículo de equipos
y laboratorio de Colombia el cual vende diferentes marcas de estufas de
esterilización.
Entre las ventajas de este método de esterilización están que no deja residuos, y
es un método rápido y económico. Además permite la esterilización de
materiales no miscibles con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas.
Por otro lado las desventajas son que requieren mayor tiempo de esterilización,
respecto al calor húmedo, debido a la baja penetración del calor. Calor Seco.
Este tipo de esterilización requiere de más tiempo, no por ello es menos efectiva.

Ahora la radiación emisión y propagación de la energía a través del medio

puede ser utilizada como agente para eliminar microorganismos tenemos las
radiaciones ionizantes las cuales se pueden utilizar para esterilizar material
termolábiles cómo plásticos y las radiaciones no ionizantes como la luz
ultravioleta que puede ser empleada en el control de áreas cerradas.
Hablando de los agentes mecánicos como ya mencionamos la filtración que es
la opción para estos nos permite la remoción de todos los microorganismos
presentes en un líquido pongas reteniendo los sobre la superficie de un material.
Ahora bien los agentes químicos en los cuales llevan a cabo por métodos
gaseosos o no gaseosos se llevan a cabo con sustancias químicas que pueden
ser usadas como agentes porque tienen la capacidad de promover una o más
reacciones químicas capaces de dañar los componentes celulares de los
microorganismos Tales como proteínas, membranas, etc.

Control de proceso de esterilización

Los procesos deben ser sometidos de manera rutinaria a controles que

demuestren su eficacia. Estos controles pueden ser de tres tipos: físicos, químicos
o biológicos.

-Físicos

Son elementos incorporados a la maquina esterilizadora que permiten visualizar

si el equipo ha alcanzado los parámetros exigidos en el proceso.

1. Termómetros
2. Barómetros de presión
3. Sensores de carga

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 4. Válvulas y sistemas de registro

-Químicos
En el grupo de agentes químicos encontramos al óxido de etileno. Este gas está
provisto de un potencial muy elevado de esterilización. El óxido de etileno
destruye incluso formas esporuladas mediante la obstaculizacón del
metabolismo proteínico normal y de los procesos reproductivos. Son dispositivos
que contiene sustancias químicas que cambian de color o estado cuando se
exponen a una o mas variables críticas del proceso de esterilización como
temperatura-humedad o temperatura-concentración del agente esterilizante.
No garantizan la calidad del proceso debido a:

1. Cambian de color aun cuando no ha terminado el proceso de esterilización

2. Su lectura no es suficientemente clara.
3. Si el indicador no ira se interpreta como falla de proceso y el paquete no debe
de ser utilizado.
-Biológicos
Los Indicadores biológicos son dispositivos preparados de esporas no patógenas
y altamente resistentes a los procesos de esterilización y por lo tanto son útiles y
eficaces para establecer la capacidad del ciclo de esterilización para destruir
microorganismos específicos, que se sabe que son más resistentes al proceso que
se está probando.
Un indicador biológico será positivo cuando exista un fallo en el proceso de
esterilización. Un fallo en el proceso de esterilización incluye un mal
funcionamiento del esterilizador, la calidad del vapor, si la humedad relativa del
área de procesamiento no es la adecuada, el tipo y método de empaquetado,
la configuración de la carga y si los parámetros del ciclo no son los apropiados
para la carga que estamos esterilizando.

Cinta testigo

Es un rollo de celulosa autoadhesivo con indicador químico que testifica el paso

de envases y paquetes por los procesos de esterilización en Vapor.
Características:
• No contiene plomo.
• Libre de látex.
• No deja residuos.

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El cambio de color en el indicador permite saber que el envase ha sido
directamente expuesto al proceso de esterilización y para distinguir entre
unidades procesadas y no procesadas, el cambio es de color verde a color
negro.

B. Cereus

Las especies del género Bacillus poseen gran diversidad metabólica y funcional,
propiciando su amplio uso en la agricultura. En este sentido, los grupos de Bacillus
cereus y Bacillus subtilis son los mayormente utilizados.
B. cereus se ha identificado en una gran diversidad de alimentos (productos
lácticos, vegetales frescos, entre otros), provocando crisis epidemiológicas
importantes a nivel mundial, y en algunos casos hasta la muerte, debido a
infecciones eméticas y diarreicas.
El estudio de esta capacidad de Bacilio se inició por el descubrimiento de la
actividad insecticida de las proteínas cry producidas por B. thuringiensis; en la
actualidad son ampliamente estudiadas paramilitar la incidencia de
enfermedades de importancia agrícola. Entre las principales vías por las cual es
ésta se pasa evita en el establecimiento y desarrollo de organismos fitopatogenos
desde diferentes mecanismos.

Resultados y observaciones:
Origen de las muestras: Las muestras microbiológicas para tener los controles de
las técnicas a realizar fueron de B. cereus proporcionadas por el Laboratorio de
Microbiología de la Unidad Profesional Interdisciplinaria de Ingeniería campus
Guanajuato (UPIIG); estos fueron caldos nutritivos inoculados con B. cereus a una
temperatura de 35-37°C durante un tiempo aproximado de 24 horas.

Reactivos, material y equipo: El material y el equipo utilizado fue proporcionado

por el Laboratorio de Microbiología de la UPIIG, refiriéndonos a dos tubos de
ensaye, dos matraces Erlenmeyer, dos pipetas graduadas, 2 cajas Petri de vidrio
y 2 cajas de puntas para micropipeta, para completar las técnicas de
esterilización también se nos proporcionó el papel Kraft. La cinta testigo, el
algodón y la cinta masking fueron de la propiedad del alumnado.
Para realizar la esterilización por calor húmedo el Laboratorio de Microbiología
cuenta con una autoclave vertical cilíndrico al igual que para esterilización con
calor seco un horno esterilizador de aire caliente.
Para efectuar el objetivo específico número uno y aplicar una técnica de
esterilización adecuada cuidando el material proporcionado, primero se
procedió a lavar correctamente, este se deja secar a temperatura ambientes
mientras que junto con el papel Kraft y el algodón se diseñan tapones para

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mantener el interior del material estéril y que no sea contaminado. Las cajas Petri
se envuelven en papel Kraft al igual que las pipetas (colocar un tapón de
algodón) y las cajas de puntas para micropipetas. Mientras que a los matraces
Erlenmeyer se les coloca un tapón de algodón y gasa cubriéndolos con un gorro
echo de papel Kraft. A todo el material protegido y envuelto con el papel Kraft
se le coloca un trozo de cinta testigo, este indicador nos revelara al final de la
esterilización si esta se logró con éxito.
Se procedió a realizar la esterilización de material, mitad se esterilizo por calor
seco y la otra mitad fue esterilización por calor húmedo.

Esterilización por calor húmedo.

La esterilización por calor húmedo en autoclave lleva 3 indicaciones específicas
y obligatorias para llevar a cabo la técnica 121°C/15´/15psi (121 grados
centígrados por 15 minutos a 15 Pound-force per-Square Inch o libras por pulgada
cuadrada que es una unidad para medir la presión). Las cajas Petri son cubiertas
con papel Kraft y aseguradas con cinta masking, las buretas son envueltas con
papel Kraft pero con anterioridad se les coloca un tapón de algodón en la
boquilla (se señala de qué lado queda la punta), a los matraces se les coloca un
tapón de algodón con gasa y un gorro de papel Kraft y para la caja de puntas
para micropipeta únicamente se envuelve en papel Kraft (figura 3). A todo el
material de laboratorio que entra a la autoclave se le colocan datos de
identificación (Equipo, fecha, grupo, y de que material se trata). (figura 3, se
resalta en un círculo de color rojo).

Adicional al material dentro del autoclave antes de esterilizar se coloca un tubo

de ensaye con caldo nutritivo inoculado con B. cereus que será utilizado como
bio-indicador (figura 4)

Figura 3. Caja de puntas para micropipetas, Figura 4. Bio-indicador

esterilizada con calor húmedo, se resalta la etiquetado con datos, contiene
etiqueta para identificar el material 8 caldo nutritivo, inoculado con B.
esterilizado. cereus antes de esterilizar.
Una vez que el material paso por 121°C/15´/15psi se observa que la cinta testigo
cambio su aspecto, se logra identificar que tiene unas líneas diagonales de color
negro (figura 5) lo cual es un indicador de que la esterilización se llevó a las
condiciones adecuadas, de igual forma se aprecia el papel Kraft húmedo en
todo el material esterilizado (figura 6).

Figura 6. Material esterilizado por calor

Figura 5. Material después del humeado se aprecia el papel Kraft
proceso de esterilización por calor humedecido en todo el material.
húmedo, se aprecia la cinta testigo
con líneas negras.

Esterilización por calor seco.

Siguiendo la metodología se esterilizó por calor seco la mitad del material
restante (1 caja Petri, 1 matraz Erlenmeyer, 1 pipeta graduada y 1 caja de puntas
para micropipeta). Las condiciones en este tipo de esterilización son 160°C
durante 1 hora en el horno eléctrico (figura 7). El material se metió igual que la
esterilización por calor húmedo (protegido con papel Kraft) sin embargo la
metodología indicaba que este material debió haberse esterilizado con papel
aluminio.
Una vez esterilizado el material por calor seco a 160°C y durante una hora se
aprecia un cambio en la cinta testigo y contrario a la esterilización por calor
húmedo el papel Kraft salió seco. (figura 8)

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 Figura 7. Material dentro del horno Figura 8. Material después de
preparado para la esterilización por calor estilización por calor seco, se
seco. observa el papel Kraft
completamente seco.

Adicional se agregó junto con el material un tubo de ensaye con caldo nutritivo
inoculado con B. cereus que servirá como testigo negativo.
Desarrollo de controles analizados.
Los tubos de ensaye que contenían los controles que servirán como testigo
positivo, testigo negativo y bio-indicador se inocularon a una temperatura de
37°C durante 24 y 48 horas.
Para cumplir con el objetivo específico número tres la esterilización por calor
húmedo se obtuvieron dos controles el primero un bio-indicador que funciono
como un tubo con caldo nutritivo inoculado con B. cereus y se sometió a
esterilización, y un segundo que funciono como testigo positivo, sin embargo este
no fue sometido a esterilización para observar lo que sucedía.
El bio-indicador a las 24 horas posteriores a su
esterilización y en incubación no mostro presencia
de turbidez ni de crecimiento dentro del tubo lo cual
indica que la esterilización se realizó de manera
correcta. En cuanto al testigo positivo se logró A B
observar presencia de turbidez con desarrollo de
crecimiento en el fondo del tubo, esto debido a que
se incubo el tubo sin esterilizar. (figura 9)

Figura 9. Bio-indicador (tubo A)

sin presencia de turbidez, testigo
positivo (tubo B) con presencia
de turbidez. Con un tiempo de
incubación de 24 horas a 37°C

10
48 horas después de iniciar la incubación del bio-indicador y del testigo positivo
las observaciones permanecieron iguales a las obtenidas 24 horas después de la
esterilización, en el tubo A (bio-indicador) no mostraba presencia de turbidez
(figura 10), mientras que en el tubo B (testigo positivo) seguía la presencia de
turbidez con desarrollo de crecimiento en el fondo del tubo. (figura 11)

A B

Figura 10. Bio-indicador (tubo A) Figura 11. Testigo positivo (tubo

sin presencia de turbidez B) con presencia de turbidez
después de 48 horas en después de 48 horas en
incubación a 37°C incubación a 37°C

En la esterilización por calor seco se obtuivieron de igual manera dos testigos, el

primero testigo postivo fue un tubo de ensaye con caldo nutritivo inoculado con
B. cereus que no se sometio a esterilizacion por calor seco, mientras que el
segundo testigo negativo fue un un tubo de ensaye con caldo nutritivo inoculado
con B. cereus que si se sometio a esterilización por calor seco.

Posterior a las 24 de incubacion a 37°C el tubo marcado como testigo positivo

presento turbidez y desarrollo de crecimiento bacteriano (figura 12), mientras que
el tubo marcado como testigo negativo no se aprecia presencia de turbidez y
por lo tanto no hubo crecimiento. (figura 13)

11
 Figura 12. Testigo positivo se Figura 13. Testigo negativo sin
señala la presencia de turbidez presencia de turbidez después
después de 24 horas en de 24 horas en incubación a
incubación a 37°C 37°C

Posterior a 48 horas de iniciar la incubación del testigo positivo y testigo negativo

de la esterilización por calor seco las observaciones permanecieron iguales a las
analizadas a las 24 horas, el tubo marcado como testigo positivo tenía aún más
presencia de turbidez (figura 15), mientras que el tubo marcado como testigo
negativo se mantenía sin crecimiento ni presencia de turbidez. (figura 16)

Figura 15. Testigo positivo se Figura 16. Testigo negativo sin

mantiene señalada la presencia presencia de turbidez después
de turbidez después de 48 horas de 48 horas en incubación a
en incubación a 37°C 37°C

12
Discusión de resultados.
Esterilización por calor húmedo.
Los controles utilizados para verificar la eficiencia de la esterilización por calor
húmedo fueron de utilidad pues el bio-indicador no desarrollo crecimiento ni
presencia de turbidez al meter a esterilizar (figura 9 y 10) mientras que el testigo
positivo presento turbidez y crecimiento (figura 9 y 11). Es decir la esterilización
inhibió la reproducción de microorganismos dentro del bio-indicador.
La UNE 556 estableció la definición de estéril como la probabilidad de
supervivencia de un microorganismo no es mayor que una entre un millón (menor
que 1×106, esta expresión es lo que internacionalmente se conoce como Nivel
SAL “Security Assurance Level” de 10-6).
Criado Álvarez indico en una investigación realizada en enero de 2019 que
“Un indicador biológico será positivo cuando exista un fallo en el proceso de
esterilización.” En la figura numero 17 podemos apreciar un control negativo, este
tiene un cambio de coloración con respecto a los demás tubos, lo que indica
que el tubo fue esterilizado correctamente. Mientras que en el tubo esterilizado
en el Laboratorio de Microbiología no presento crecimiento de microorganismos.

Figura 17. Testigo sin procesar. Control positivo y testigo

procesado. Para indicar la viabilidad de la esterilización
realizada.

La esterilización de material por calor húmedo sirve para eliminar cualquier carga
microbiana, ya sea patógena o no, de los productos que por su uso lo requieran
(L. Pasteur, Koch y Wolffhugel, 1876).

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El equipo más utilizado en los laboratorios para la esterilización por calor húmedo
es la autoclave pues el vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de
calor mucho más elevado que el del aire. (Charles Chamberland, 1879)
Esterilización por calor seco.

Para corroborar la eficacia de esterilización por calor seco se utilizaron dos

controles, un testigo positivo y uno negativo, fueron de utilidad debido a que al
observar la presencia o no de turbidez esta solo se desarrolló en el testigo positivo
(figura 12 y 15) por lo que en el testigo negativo no se vio ningún desarrollo de
crecimiento ni de turbidez (figura 13 y 16) es decir la esterilización se desarrolló
con las condiciones adecuadas.
Además un control que se tiene al momento de esterilizar en ambos calores ya
sea seco o húmedo es la cinta testigo pues al sacar el material después de la
esterilización esta salió con rayas diagonales negras.
Los fundamentos de la esterilización por calor seco y calor húmedo: 30 minutos a
110° - 120° C de exposición al vapor eran equivalentes a una hora de calor seco
a 130° - 150° C. (L. Pasteur, Koch y Wolffhugel, 1876).
La cinta testigo para esterilización en vapor a presión la cinta elaborada con
papel crepé, una de cuyas caras está impregnada con un material adhesivo y
la otra con pigmentos indicadores sensibles a la temperatura y humedad. Se usa
en las salas de esterilización para verificar si en este proceso se alcanza la
temperatura adecuada. (Diario oficial de la federación, 1987)

Conclusiones

Se obtuvo material esterilizado lo cual se demuestra por falta de presencia de

turbidez en el bio-indicador tanto para calor húmedo y calor seco.

14
Cuestionario

1.- Con los resultados obtenidos, completar la siguiente tabla en cuanto a

desarrollo de turbidez en los controles analizados.

Método Calor húmedo Calor seco

121°C/15/´15lb 170°C/1 h
Tubo 1(testigo +) Con presencia de Con presencia de
turbidez, desarrollo de turbidez, desarrollo de
crecimiento. crecimiento.
Tubo 2(bioindicador) Sin presencia de
turbidez, no hay X
crecimiento.
Tubo 3 (testigo -) Sin presencia de
X turbidez, no hay
crecimiento.
Tabla 1. Resultados de turbidez en control analizado.

Resultados esperados:
Tubo 1: testigo positivo (se aprecia turbidez, desarrollo de crecimiento).
Tubo 2: bio-indicador de esterilidad (no se aprecia turbidez, no hay crecimiento).
Tubo 3: testigo negativo (no se aprecia turbidez, no hay crecimiento)

2. Argumentar cual es la finalidad de utilizar agua destilada en el enjuagado del

material.
Sirve para retirar residuos que hubieran quedado en el material al momento de
lavar, y cómo está se puede encontrar libre de microorganismos hay seguridad
de que el material fue lavado correctamente.
3. Explicar por qué utilizamos un tapón de algodón en las pipetas, en matraces y
tubos de ensaye.
Para evitar la entrada o salida de los microorganismos. Además, cuando se usa
algodón se tiene que envolver con gasa. En caso de las pipetas, se les coloca en
la boquilla un trocito de algodón que actuara como filtro, evitando la
contaminación del operario con los microorganismos de muestra y que este a su
vez contamine la muestra. También utilizamos los tapones para proporcionar un
sello seguro no hermético al instrumento para que se lleve a cabo la desecación
en su interior.

15
4. Que ventajas podemos obtener en los sistemas de filtración a través de
membranas.

• Estos sistemas permiten la remoción de microorganismos presentes en un

gas o un líquido.
• Sirven para esterilizar sustancias que no soportan el calor.
• Pueden esterilizar organismos dependiendo de su tamaño con un alto
grado de eficacia.
• Puede esterilizar medios de cultivo o soluciones acuosas.
• La filtración en este tipo de medio proporciona un mejor control sobre la
calidad del filtrado ya que el tamaño de partículas retenidas es más
uniforme y eficiente en las paredes del material filtrante.
• A igual capacidad o área de filtración, el costo de inversión es mucho
menor en un filtro de membranas que en un filtro de grava y arena.
• En un filtro de membrana es posible cambiar estas de un tamaño de poro
a otro diferente en una forma rápida y sencilla. Esto es sumamente
conveniente cuando se desea mejorar la calidad del filtrado, prolongar la
vida útil de los cartuchos, etc.

5. Discutir cuales son los inconvenientes o riesgos de preparar el material con

papel aluminio para su esterilización por calor seco.

• El papel aluminio por sus características de fabricación no es un producto

estéril, por lo cual no es recomendado usarlo.
• Si el material que se va a esterilizar por este método no es el adecuado, el
uso del papel aluminio causará mayor daño a este.

6. Discutir cuales son los inconvenientes o riegos de preparar material con papel
Kraft para su esterilización por calor húmedo.

• El papel kraft al estar en contacto con el vapor de agua dentro del

autoclave se humedecerá y puede romperse.
• El papel kraft no cuenta con una porosidad controlada, lo que no
garantiza la esterilidad de los materiales en su interior.
• El papel kraft por sus características de fabricación es un producto estéril.
• En caso de que la autoclave se quede sin agua esto hará que el papel se
queme, causando daño al material que se intentaba esterilizar.

7. Discutir los fundamentos y aplicaciones de cada uno de los métodos de

esterilización utilizados en la práctica.

• El calor húmedo es un método que utiliza la exposición de los materiales a

vapor de agua y presión, por medio de aparatos especializados como

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 autoclaves. Usualmente se utilizan a una temperatura y presión de
121°C/6.8 Kg durante 30 minutos o a 121°C/15lb/pg2 durante 15 minutos.
Sólo se utiliza en material que no soporta el calor seco, se puede utilizar en
material simple o volumétrico de cristal se puede usar en medios de cultivo
y en una solución acuosa. Es un método térmico de esterilización que mata
microorganismos por la coagulación de proteínas (desnaturalización), lo
que es causado por la ruptura de los puentes de hidrogeno que son los que
mantienen a las proteínas en su forma tridimensional de las proteínas por lo
tanto regresan a su estructura secundaria se coagulan y se convierten en
proteínas no funcionales.
• El calor seco es un método térmico de esterilización y su efecto en los
microorganismos es equivalente al horneado ya que conlleva la exposición
de materiales a altas temperaturas, por medio de aparatos especializados
como hornos en los cuales el aire caliente promueve la esterilización. El
calor seco penetra lentamente a los materiales por lo que se necesita
largos periodos de exposición. Se usan generalmente a 170°C durante 60
minutos o a 150°C durante 150 minutos. El calor cambia las proteínas
microbianas por las reacciones de oxidación y crea un medio interno árido
así quema los microorganismos lentamente.

8. Discutir el uso de bio-indicadores y controles de esterilización.

Todos los procesos de esterilización se deben controlar para poder asegurar que
han sido efectivos. Para ellos se pueden utilizar indicadores físicos, químicos o
biológicos que deben ser colocados en cada carga de esterilización. Los bio-
indicadores son preparaciones de una población específica de esporas de
microorganismos, las cuales son altamente resistentes a un proceso de
esterilización en particular. Estos indicadores se deben colocar junto con la carga
de esterilización en el sitio que se considera que es más difícil que llegue el vapor
y después del proceso se debe incubar durante 24 horas. En condiciones
adecuadas si después de este periodo hay evidencia de crecimiento microbiano
por ejemplo cambio de color del medio de cultivo el proceso de esterilización no
fue satisfactorio con este tipo de indicadores controla la esterilización por vapor
a presión, por calor seco y la esterilización con óxido de etileno.

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Bibliografía

-Criado-Alvarez, D. E. L. T. V. J. J. (2019, 1 abril). Indicadores biológicos para el

control de la esterilización. El
autoclave. https://elautoclave.wordpress.com/2019/01/21/indicadores-
biologicos-para-el-control-de-la-esterilizacion/
-Garcia, K. (s. f.). HORNO Y AUTOCLAVE. prezi.com.
https://prezi.com/4k3ptdimcygx/horno-y-autoclave/

-FUNDAMENTOS Y TÉCNICAS DE ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS (Vol. 1). (2012). M.

Paz Merino. https://file:///C:/Users/angel/Downloads/fundamentos-y-tecnicas-
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-Microbiología médica (5.a ed.). (2005). Patríck R. Murray.

https://parabolasdocotidiano.files.wordpress.com/2011/10/microbiologia_murra
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-TÉCNICAS ACTUALES DE DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO (Vol. 1). (2011). Luis

Montes. https://file:///C:/Users/angel/Downloads/T%C3%89CNICAS-ACTUALES-
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-Tuttnauer. (s. f.). Autoclaves para laboratorios.
https://tuttnauer.com/es/autoclaves-para-
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