Professional Documents
Culture Documents
Make It
Make It
:المقدمة
يعتبر هذا القسم من أقسام المختبر األساسية التي يتم الكشف فيها عن العديد من
األمراض التي تسببها الفيروسات والبكتريا والطفيليات والتي تنتقل عن طريق الدم ويتم
الكشف عن هذه األمراض عن طريق وجود األجسام المناعية 605ع 00و اال
المتخصصة لكل مرض وتصل عينات الدم فقط لهذا القسم وتصل في أنابيب ال تحتوي على
١ ٠).ه 7خديجة ؛ ( .مواد مانعة التجلط (6اال1810 1
حيث يتم فصل السيرم ( خالي من عوامل التجلط الموجودة في الدم ) و استخدامه في
االختبارات المناعية والمصلية حيث يكون السيرم محمل باألجسام المناعية التي يراد
.الكشف عنها
ويعتبر قسم السيرولوجي ذو أهمية تشخيصية حيث يحدد للطبيب مسبب المرض ودرجة
.تقدم المرض دون أن يساهم في تحديد العالج الالزم له
ويختص بالخواص الكيميائية و البيوكيميائية لسيرم الدم 01000 56000وهو شديد االرتباط
بعلم المناعة «:ع:007000010ز وقد أصبحت الطرق السيرولوجية ذات أهمية كبيرة في
الميكروبيولوجيا الطبية .ويشمل علم األمصال جميع الدراسات التي أجريت حول التفاعالت
بين مولد الضد والجسم المضاد وبما أن العالقة بينهما عالقة نوعية مطلقة كما الحظنا أعاله
.فإن هذا يعني أن أحد العاملين يجب أن يكون معلوما ً
وبهذه الطريقة يمكننا معرفة ال 2010860عند تفاعله مصليا ً مع جسم مضاد 21011000
١ ٠١١) .ه 67الكبيسي ( .معروف وبالعكس
هي نتيجة اإلصابة والشفاء من المرض حيث تتكون أجسام مضادة تحمي الجسم من
.هجوم الميكروب مرة أخرى
:المناعة المكتسبة الصناعية
.وهى تكوين أجسام مضادة ألنسجة الجسم مثل حالة الحمى الروماتزمية
: :الجسم المضاد()-70100
وهو عبارة عن مجموعة من السكريات البروتينية في الدم وفي سائر سوائل األنسجة
.ويتم إنتاجها عندما يالمس الجهاز الليمفاوي أجساما غريبة ( مستضدات ) أنتيجينات
:-المستضدات (مدتودعت)01
أي مادة أو مركب غريب يجد طريقه لداخل الجسم ويودي إلى إحداث تفاعل مناعي
موجه لنفس مولد المضاد فنتاج ذلك التفاعل من أجسام مضادة تتحد مع نفس المادة والمركب
).الزبيدي ؛ 0٠٠م (
:العينات الواردة للقسم
ال يصل للقسم سوى عينات الدم في أنابيب خالية من موانع التجلط (و 10106صتواط)
للحصول على السيرم ( .خديجة ؛ ١1 476ه).
:مالحظة
طلبات التحاليل الخاصة واختبار التوكسوبالزما يتم حفظ السيرم لها في الثالجة لحين
.اكتمال العدد الالزم لفتح طقم االختبار
هي عبارة عن االختبارات التي تعتمد على ارتباط بجاوواتامخ مع 05عع 011مكون
تالزن أو حبييات ممكن رؤيتها بالعين المجردة أو تسمى باختبارات الالتيكس » 1.816ألن
.الكاشف فيها عبارة عن مادة الالتيكس ( .الزبيدي 05٠7 +م
ومن هذه االختبارات ووم -تتألخ -تلو[ -طفن - 171061 -ملك - 3016بت67 101
1111 136:
-١فحص الحمى المالطية : 13102610555 :
المسبب :بكتيريا 1171266116 7167746115756بر قنا”ممله 117160116
يمثل المسبب األنتيجينات ويتم الكشف عن األجسام المضادة في مصل المريض .
.أ_. 7271011» 72107/7/270515 -ينتقل عن طريق األغنام والماعز
.ب_ 727106116 »0077205-ينتقل عن طريق األبقار
تنتقل إلى اإلنسان بشكل رئيسي عن طريق الحليب غير المبستر والبيطري والقصاب الذين
٠١يتعاملون مع لحوم هذه الحيوانات ( .الكبيسي 47ه. )١
:الظواهر المرضية
.عز حمى متقطعة وتعرق ليلي مع قشعريرة
.عز وجع الرأس والمفاصل
تتكاثر البكتيريا في العقد اللمفاوية وتنتقل إلى مجرى الدم الذي يحملها إلى الكبد والطحال
متعع تأصط لدعده 1 1056 8
يكون األنتيجين الجاهز مصبوغ بصبغ البنكال الوردية الذي يتحد مع األجسام المضادة في
١1 ١١) .ه 67٠1الكبيسي ( .مصل المريض
:النتيجة
:قبل التخفية
٠١ميكرو "1.0
٠ميكرو 1.160
٠بعد التخفيف
وركيم*1.20 ٠
٠ميكرو 1.640
©وركيم٠
1.1280
).خديجة ١ 75ه (
سلبية :عند عدم حصول التالزن *
.ال يوجد لقاح لتحصين اإلنسان ولكن توجد لقاحات خاصة باألغنام والماعز واألبقار
.والمعالجة تتم بواسطة مضادات حيوية مقل لع 6860101عصة عصنتاعووي«ه0
١ ١) .ه 571الكبيسي (
:طريقة عمل االختبار
.اخلط بساق بالستيكي وتوضع على الهزاز لمدة دقيقتين واقرا ً التالزن خالل دقيقة
07 ٠ .م األنتيجين للكبسولة (األ )أ مودعتأدترط :تتحطم عند درجة حرارة 2
يستخدم عادة فحص فيدال كفحص مسحي للبحث ن حاملي الجرثومة عند عمال المطاعم
.والمصانع الغذائية والعاملين في مشاغل المياه ألنها تنتقل عن طريق الغذاء والماء
:تمتاز باألعراض التالية
ويتم ذلك بطريقة المعايرة --أعلى تخفيف (أقل تركيز) للمصل يمكنه التفاعل مع األنتيجين
١1 ٠١) .ه 47الكبيسي ( .القيمة الطبيعية [ ٠:١) ]48 0 :1ومضاعفاتها 7التخفيف( المستخدم
:طريقة الشريحة
:النتيجة إما
:تجري حسب تعليمات الشركة الصانعة لل . 1009وبشكل عام تجري الفحوصات كما يلي
:أ -بطريقة الشريحة
.تمزج المواد جيدا ً وبعد مرور * دقائق الحظ النتائج ( .الكبيسي ١1٠67١ه) ”-
:النتيجة
يزداد مستوى 180في حاالت اإلصابة الشديدة من قبل الميكروبات فالميكروبات المنتجة
للسموم الداخلية 1200 005تعمل على تحفيز البالعات الكبيرة لتحرير
صتكلنيه 1016 1الذي يحفز الكبد لزيادة إنتاج هذا البروتين والذي قد يصل مستواه (1 -
٠٠٠١ .ضعف عن الحالة الطبيعية ( .الكبيسي 10٠147ه) أكثر من
البروتين الفعال يدل على وجود التهابات في الجسم أو مرض معدي أو حتى أن وجود
هذا البروتين غير موجود في الشخص السليم وأن هذا االختبار أكثر فائدة من السرطان .أن
معدل ترسبات كريات الدم الحمراء ( )2.5.18وأن فوائد هذا االختبار هي :قياس
١ .لنوعية العالية بينما 15518يتأثر بعوامل مثل الحمل-
علية في التشخيص :حيث أن ظهوره يعقب مرضا ً خطرا ً بينما م7- 551 [يعتمد
.يبقى مرتفعا حتى خالل دورة النقاهة ( .الزبيدي ؛ 006٠م
إن الكشف عن البروتين الفعال يتم بواسطة المصل المضاد للمريض عند تفاعله مع
األنتيجينات الخاصة به .ويجري هذا االختبار على شريحة زجاجية مع وجود عامل ضبط
.موجب للمصل وآخر سالب ( .الزبيدي ؛ 7006م
ويتم ذلك بتفاعل الالتيكس المغطى ببروتين /- 81000110قطرة واحدة يضاف إلى مصل
١من محلول © 8170106 3018على شريحة تمزج جيدًآ ثم 7٠0:المريض المخفف بنسبة
.اقرا النتيجة بعد حوالي ثالثة دقائق
:النتيجة
.الفحص موجب في حالة حصول تخثر من التفاعل 10 008100ععة >
1 ٠١) .ه 47الكبيسي ( .يستخدم هذا الفحص في حاالت التهاب المفاصل الروماتيزمي
٠
إن أساس االختبار للعامل ( )7يعتمد على قابليته بأن يسرع من التالزن مع
األنتيجينات ؛ وفي اآلونة األخيرة استخدمت كريات الدم الحمراء ( 83609أو جزيئات
96 99 - ٠في الذي #الالتيكس التي تحمل 180وأن حساسية هذا االختبار هي بين
.يعاني من المرض ( .الزبيدي ؛ 7006م
ويمكن التشخيص بطريقة سهلة مثل استعمال اختبار الالتيكس على الشريحة الزجاجية
ويفضل وجود عامل ضبط مصلي موجب وآخر سالب (. .الزبيدي ؛ 05٠٠م).
.يجري االختبار سوية مع تحريك الشريحة لمدة دقيقة ثم يالحظ وجود التكدمات
.طريقة عمل التحليل تشبه تماما طريقة تحليل (ط)0
:المرحلة األولى
تتمثل في قرحة تناسلية صلبة على العضو الذكري أو على الشفة وقد ال تكون مؤلمة
.أسبوع ١7-76ويمكن العالج بالمضادات الحيوية وتستمر فترة الحضانة في هذا الطور من
:المرحلة الثانية
وهي اشد خطورة حيث يظهر على الجلد حبوب تكاد تغطي الجسم كله بعد فترة حضانة
ال بد أن نجعل األنتيجين والمحاليل المعيارية والعينة تأخذ درجة حرارة الغرفة قبل بدأ *
.االختبار
.؛ -توضع الشريحة على جهاز الهزاز عند سرعة ١٠٠دورة في الدقيقة لمدة 8دقائق
.نالحظ وجود أو عدم وجود تجمعات سوداء في دائرة العينة 8-
*:-إذا كان هناك تجمعات كبيرة سوداء في مركز الدائرة أو األطراف تكتب النتيجة كالتالي
.ه 2051076أي نتيجة ايجابيه1680768 1
* إذا كانت هناك تجمعات سوداء صغيرة في األطراف فهذا يعني عتاعة 17681661نح
إذا لم تظهر أي تجمعات فهذا يعني ع؟تتقعع 11اه 0 1686176و* 1
يمكن الكشف عن الهرمون في الدم بعد مرور ستة أيام من الحمل كما يوجد في البول ويمكن
الكشف عن الحمل مخبريا ً في البول بعد مرور أسبوعين يعتبر فحص هذا الهرمون ليس
مطلقا لتحديد الحمل وذلك ألن مناطق أخرى في الجسم تفرز هذا الهرمون كما في القناة
١ ١) .ه 67٠1الكبيسي ( .المعوية -المعدية وكذلك في حالة حصول األورام عند كال الجنسين
يمكن الكشف عن الهرمون في المختبر حيث يعتبر كمولد للضد 1011860وتضاف كاشف
:األجسام المضادة الجاهزة على عينة البول وتستخدم طريقتين للفحص
وهي أكثر حساسية من األولى وتعطي نتائج أكيدة حتى عندما يكون مستوى الهرمون
.قليل وعادة تعمل هذه الطريقة عندما تكون النتائج غير واضحة
يصل عادة معدل مستوى الهرمون في البول بعد انقطاع الدورة الشهرية عند المرأة إلى
٠٠٠٠٠١وحدة /لتر بعد ثالثة شهور ثم يعود ٠وحدة دولية /لتر ويزداد إلى حوالي
٠٠٠٠١وحدة /لتر ويبقى على هذا المستوى على ما قبل الوالدة بثالثة أو إلى مستوى
:أربعة ايام حيث يختفي تماما ً | .إ
يقل إفراز الهرمون 1106في حاالت الحمل خارج الرحم ع1م10عع مما يسبب في
.إعطاء نتانج سلبية ( .الكبيسي 16٠57١1ه)
توضع نقطة (0؛ ميكرون ) من السيرم على الشريحة وتمزج النقطتين جيدا ثم نقوم "-
.بميل الشريحة لألمام والخلف لمدة دقيقتان أو بواسطة جهاز الهزاز
إذا حدث تالزن فإن النتيجة تكون موجبة 00510378وعندها يكون نسبة الجسم المضاد "-
٠٠١وحدة /ملي لتر أكثر من
وال بددمن عمل تخفيف للعينة لمعرفة معدل تركيز الجسم المضاد وذلك يتوقف عل مدى
.إصابة المريض من خالل هذا االختبار
١7١
* وتكون هذه التخفيفات حسب تعليمات الشركة المصنعة للكاشف .
»٠ ٠.وحدة /ملي لتر< ؟ -يحسب تركيز الجسم المضاد بضرب معدل التخفيف
.إذا لم يحدث تالزن بعد دقيقتين تعتبر النتيجة سالبة ©0017ع8؟( . 1النشرة الخاصة باالختبار) ©-
التوكسوبالزما عبارة عن مرض يسببه طفيل وحيد الخلية يسمى 101:001051714 801:0::
والذي يصيب الجهاز العصبي المركزي لإلنسان» وتعتبر القطط العائل األساسي للطفيل
حيث تخرج بويضاته مع برازها لتكمل الدورة الالجنسية في اإلنسان باإلضافة إلى العديد
.من الحيوانات
ه تحدث العدوى لإلنسان عن طريق ابتالع البويضات مباشرة أو تناول لحوم حيوانات
قد ابتلعت هذه البويضات كما قد تنتقل العدوى من األم إلى جنينها عبر البالسنتاء
والحالة األخيرة هي األهم ألثرها البإلغ خصوصا علي الجنين حيث قد تسبب
اإلجهاض والتشوهات الخلقية للجنين .ولذلك فهذا االختبار يجري للنساء في معظم
األحيان وعلي األخص الحوامل مع ضرورة مراعاة مصدر العدوى لهن ( خاصة
القطط ) خالل تلك الفترة ( .الزبيدي متم
:مبدا ً االختبار
في هذا االختبار يعتمد على كشف األجسام المضادة للطفيل» فاستخدمت كريات دم *
مأخوذة من الضأن وأضيفت إليها مستضدات الطفيل المأخوذة من فئران التجارب المحقونة
.مسبقا بالمستضد
إذا وجدت األجسام المضادة للطفيل فأنها تتجلط الخاليا الحمراء المصنعة وستتكون طبقة *
[متجانسة منه تغطي معظم قاع تجاويف ( )»6115طبق المعايرة 1216م 1/100101107:81100
أما في أحالة عدم وجود األجسام المضادة قن الكريات الحمراء ستترسب علي شكل زر أو
٠,٠مل من الخليط إلي التجويف ؛ واخلط المحتويات جيدآ ثم تخلص من ٠,١٠©#مل ©انقل 7-
.من الخليط من ذلك التجويف
١
٠-1
7
1
ٍ
77:١
3
1-1
١.سيستخدم كعينة تحكم بإضافة الخاليا الحمراء الغير مصنعة علي السيرم التجويف *
١اخلط معلق الخاليا الحمراء المصنعة والخاليا الحمراء الغير مصنعة بهدوء إلى أن ال-
.يبقى أي راسب من الخاليا الحمراء في قاع القطارة
١وتجنب ضع قطرة من معلق الخاليا الغير مصنعة ( حوالي ٠,+©5مل)_ في التجويف 6-
الفقاقيع
1م ( 5-١١9حرارة الغرفة لمدة -7؟ ساعات مع تجنب تعريض الطبق للهز أثناء هذه )
.الفترة
١يجب معرفة تركيز األجسام المضادة 74:1تقرا ً النتائج» والعينة اإليجابية حتى التركيز *
:-بها وذلك كما سيلي
١ضع 075١٠مل ( #الميكروليتر ) من المحلول المخفف في التجويف عو ...مل-
.منه في التجاويف ( 7-7راجع الشكل ؟ المرفق)
٠١٠٠ ١مل في التجويف ١و©07١٠مل في التجويف * ١ضع من السيرم المخفف-
١ ).لعينة التحكم التجويف(
:-التالية
١
1-1
7
1-1
ٍَ
١17/01
1
761
2
17-1
7
٠١7-1١
7
1أ
١٠اخلط معلق الخاليا الحمراء المصنعة والغير مصنعة بهدوء إلى أال يبقى أي راسب من-
.الخاليا الحمراء في قاع القطارة
لمدة 7-3ساعات مع تجنب تعريض الطبق للهز أثناء هذه ) 1م ( 5-١9حرارة الغرفة
.الفترة( .النشرة الخاصة باالختبار)
:التجاويف [آ *
العينة اإليجابية تعرف بتكون حصيرة من الخاليا الحمراء المتلزنة تغطي كل أو معظم
مساحة القاع؛ وقد تحاط بحلقة خفيفة من الخاليا الحمراء .أما العينة السلبية فتعرف بتكون
969 ٠من مساحة القاع أو أقل وتحاط بحلقة كثيفة من طبقة كثيفة من الراسب تغطي
:التجاويف ؟ *
مساحة القاع (كامل قطر التجويف ) وقد العينة اإليجابية تعرف بتكون حصيرة تغطي كامل
العينة السلبية فتعرف بالتجمع الواضح في يظهر تجمع بسيط جدا من الخاليا بالمركز .أما
أي انتشار للخاليا وتظهر فقط نقطة سوداء المركز مع انتشار بسيط للخالياء وقد ال يوجد
قاع التجويف( .النشرة الخاصة باالختبار) .في مركز
نتيجة إيجابية والنتيجة تكتب مثال كالتالي :-يؤخذ على أعلى تخفيف ظهرت به
هذا االختبار يعتمد على نظام إنزيمي للكشف عن ارتباط معين بين المستضد (مععنت01ح)
:اإلنزيم *
هذا األنزيم يتم ربطه صناعيا ً على جسم مضاد محدد أو مستضد محدد بحسب نوع
االختبار (الجسم المضاد أو المستضد يصنعا معمليا بحيث يكون له نفس التركيب الحقيقي
أو يتم الحصول علية من دم إنسان أو حيوان) وهذا المركب من الجسم المضاد أو المستضد
.مع اإلنزيم يسمى ع81ع101[2010
: :ع*21-50050
وهو يحمل كاشف حيث يظهر لون ) مصطلح يطلق علي أي مادة يعمل عليها اإلنزيم (
تحت تأثير اإلنزيم وتختلف درجة اللون بحسب تركيز الميكروب او األجسام المضادة في
كما أن من ضمن محتويات أي ) 167اختبار ( لل ) 2119/8طبق للمعايرة *
تبطين هذه التجاويف أيضا ً بأجسام مضادة أو مستضدات وأحيانا بدال من تبطين التجاويف
"9
باألجسام المضادة أو المستضدات يلجا ً إلى تغليف تلك األجسام المضادة أو المستضدات
.علي خرزات ثم توضع هذه الخرزات في التجاويف
ذكاباط
يعامل بنفس معاملة أي عينة سيرم وتقرا ً نتيجته والتي يجب أن تكون إيجابية وإال فهناك
خطأ كبير إما لعيب في التجربة أو فساد لمحاليل الطقم كسوء تخزين أو انتهاء فترة
.الصالحية أو إجراء االختبار قبل أن تصل المحاليل لدرجة حرارة الغرفة
يعامل كعينة أيضا ً والنتيجة يجب أن تكون سالبة .قد يزود الطقم بمجموعة من المحاليل
علي عبواتها مع قيمها المقروءة من الجهاز وهي تفيد كذلك في رسم منحنى بياني ومقارنة
.النتائج
:مبدأ االختبار
يجري لتحديد وجود األجسام المضادة لفيروس االلتهاب الكبدي © في سيرم أو بالزما
المريض تجاويف طبق المعايرة مبطنة بمستضدات الفيروس؛ األجسام المضادة من :سيرم
أو بالزما المريض أو من عينة التحكم الموجبة؛ ال ع8ع 0[000عبارة عن أجسام من
في العينة ( إن وجدت ) سترتبط بالمستضدات في إذا ..األجسام المضادة للفيروس
مضادة لمستضدات أخرى بعد عملية الغسيل ثم عند التجاويف» وستنزل بعد ذلك أي أجسام
سيرتبط باألجسام المضادة للفيروس | وسيكون تركيزه إضافة المع 000
عملية الغسل بنفس مقدار تركيز األجسام المضادة©1 مع )08[(00في التجويف بعد
.فيروس الموجود
( لون ( شفاف في حالته األصلية ) "م«عع " 0101188 »0:000بحيث لو وجد األنزيم
المرتبط بالع81ع0[000سيتغير لونه من الشفاف إلي لون يمكن قياسه بعد ذلك بطريقة
.الطيف الضوني 101011616:
نيد
" -خفف عينات السيرم وعينات التحكم باستخدام مخفف العينات المرفق ( عبارة عن
*ميكروليتر من المخفف مع ٠٠0محلول بروتيني» مطهر و حافظ ) وذلك بخلط
٠.ميكروليتر من العينة
خصص التجويف 1ه/العتباره 318016يقرأ امتصاص هذا التجويف فيما بعد وتطرح -
قيمته من باقي التجاويف؛ ويالحظ أنه من المفتقرض أن ال يحدث به أي تغير لوني لعدم
).وضع العينة به أصال
-/غطي الطبق بالغطاء البالستيكي المرفق لمنع تبخر المحتويات( أو بأي غطاء مناسب 1
.ورج المحتويات قليال لطرد أي فقاقيع هوائية قد تكون في التجاويف
* يتم تحديد عدد مرات الغسل تحت عنوان 16©09؛ وفي هذا االختبار ندخل دمرات
.ليكررها ذاتيا
.هذا الجهاز يقوم بضخ محلول الغسيل في التجاويف ثم يسحبها وهذه تعد غسله واحدة
٠؛مل منه (كامل ومحلول الغسيل (عادة ما يرفق مع مثل هذه االختبارات ) يحضر بأضافة
.العبوة ) إلى لتر كامل من الماء المقطر ثم ينقل إلى المكان المخصص له في جهاز الغسل
"١بعد الغسل نقلب الطبق وندقه علي ورق ترشيح موضوع على الطاولة إلزالة أي-
.سوائل في التجاويف قد تكون بقيت بعد عملية الغسيل
-١قبل نهاية هذه الفترة نحضر الع)01502ن 5بإضافة العبوة المسجل عليها
نحضن الطبق عند درجة حرارة الغرفة العادية لمدة-١8 * ٠دقيقة بعيدا عن أي مصدر
.ضوني قوي
4-7 ٠٠نانوميتر ٠٠نضع الطبق في جهاز القراءة؛ ونضبط الطول الموجي على-
.ويشغل لقياس االمتصاص وإصدار النتيجة مطبوعة على ورقة
:مالحظة
يجب التأكد من العينة اإليجابية بإعادة االختبار باستخدام عينة أخرى تطلب من المريض
) .النشرة الخاصة باالختبار(