Biotecnologia

ACH5525 Microbiologia, Imunologia e Parasitologia

1o semestre 2020

Docente:
Prof. Dr. Felipe S. Chambergo – fscha@usp.br

Data: Quinta-feira 14 – 18 h / Sala: 203 Edifício I1.

USP – 2020
 Biotecnologia
ACH5525 Microbiologia, Imunologia e Parasitologia

1o semestre 2020

Micologia
Morfologia e fisiologia dos fungos; ecologia
dos fungos;
Fungos de importância em saúde humana,
veterinária e vegetal. Micotoxinas e
Micotoxicose
Prova 1
Fungos
 Árvore filogenética

1.5 - 5.1 milhões de espécies de fungos

(Hawksworth et al., 2001; O’Brien et al., 2005).
120 mil espécies de fungos catalogadas (Hibbett et al., 2011).
(Woese, 2000; Mora et al., 2011)
O Reino Fungi
(1300 espécies) 1

(706 espécies) 2

(20 espécies) 3

(179 espécies) 4
Z
( 206 espécies) Y
G
(40 espécies) O
M
Y
(277 espécies) C
O
(1071 espécies) T
A

(169 espécies) 5

(64163 espécies) 6

(31515 espécies) 7

(Hibett et al., 2007)

 Assexuada Sexuada Heterótrofos Primário Secundário

Reprodução Fungos Metabolismo

Parede Celular
Quitina/Glicano Multicelular
Unicelular
(Filamentoso)

Os fungos surgiram na terra ~ mil milhões de anos atrás (na era neoproterozoica).
- Decompositores primários em todos os ecossistemas;
- Essenciais para a sobrevivência de muitos grupos de organismos com os quais se associam;
- Patógenos de humanos, plantas, fungos ou animais (~300 espécies);
- Importantes na agricultura e na produção de alimentos;
- Modelos genéticos com grande potencial para a biotecnologia.

(Baker et al., 2008; Voigt e Kirk, 2011)

 Características
• Representados pelos cogumelos, bolores, mofos, orelhas-de-
pau, leveduras;
• Eucariontes;
• Heterótrofos e aclorofilados;
• Uni ou pluricelulares;
• Nutrem-se de matéria orgânica morta (fungos saprófitas) ou viva
(fungos parasitas);
• Apresentam dois grande grupos: os pluricelulares ou
filamentosos(bolores) e os unicelulares (leveduras).
• Sua reserva energética é formada pelo glicogênio (a mesma
reserva de carboidrato encontrada nos animais).
• Podem apresentar parede celular celulósica, impregnada de
quitina ou apenas com quitina;
Multicelulares

Corpo de frutificação
Parte visível do fungo,
responsável pela reprodução
do mesmo.

Os esporos são as
estruturas de dispersão
dos fungos, são as suas
“sementinhas” .

Micélio
Conjunto de filamentos
(hifas), parte “invisível” do
fungo
 Nutrição
• Partículas de alimento são grandes para
entrarem nas hifas e serem digeridas.
• Desta forma, as hifas liberam enzimas
digestivas para o meio, ocorrendo digestão
extracelular.
• Efetuada a digestão, os produtos são
absorvidos, difundindo-se em todo o fungo.
• As vezes, o micélio libera substâncias
metabólicas (toxinas)  indisposição
intestinal.
Pão mofado Laranja mofada Fruta mofada

Porque fazem
digestão
extracorpórea
 Fungos e Sociedade: Inimigos
Deterioração de alimentos
Aspergillus sp, Penicillium sp, Mucor sp e
Rhizopus sp
Doenças em plantas e degradação de
Madeira
Phythium debaryanum; Phytophthora infestans;
Puccinia sp; Ustilago sp

Doenças em animais e seres humanos Produção de Tóxinas

Mucor sp; Rhizopus sp; Aspergillus sp; Fusarium sp; Amantia phalloides (alfa-amanitina),
Histoplasma sp; Candida sp; Paracoccidioides sp; Claviceps purpurea (ergotamine); Aspergillus
Cryptococcus sp; Trichophyton sp; flavus (aflatoxina)
Pseudogymnoascus sp; Batrachochytrium sp

Amatoxina Aflatoxina B1
 CLASSIFICAÇÃO DAS MICOSES

Superficiais e Cutâneas

1. As micoses superficiais e cutâneas estão entre as doenças transmissíveis mais

comuns.
2. A maioria das infecções fúngicas cutâneas e superficiais é causada pelas
espécies de malassézias, dermatófitos ou Candida (discutido adiante).
3. O crescimento dos dermatófitos é favorecido pela presença de soro e pela
temperatura corporal. Esses fungos raramente estão envolvidos em infecções
invasivas.
4. Os dermatófitos zoofílicos e geofílicos causam inflamação aguda, que
respondem a tratamento tópico dentro de algumas semanas e raramente há
recidiva.
5. Os dermatófitos antropofílicos causam lesões crônicas e relativamente
brandas, que podem necessitar de meses ou anos de tratamento e
frequentemente há recidiva.
 Micoses subcutâneas

1. As micoses subcutâneas podem ser causadas por dezenas de fungos

filamentosos (bolores) ambientais associados a vegetais e ao solo.
2. Essas infecções são geralmente adquiridas após pequenos cortes ou arranhões,
introduzindo solo ou debris de plantas (p. ex. lascas e espinhos) contendo o fungo
patogênico. A infecção subsequente é crônica e raramente se dissemina
para tecidos mais profundos.
3. O Sporothrix schenckii, o agente etiológico da esportotricose, é um fungo
dimórfico que apresenta crescimento hifal, mas no hospedeiro adquire um
crescimento leveduriforme.
4. O diagnóstico das cromoblastomicoses se dá por observação microscópica dos
tecidos, exibindo aspecto semelhante e produzindo células de coloração dos
corpúsculos escleróticos esféricos e amarronzados (melanizados) no
interior das lesões.
5. O diagnóstico das feoifomicoses é a presença de hifas septadas amarronzadas
(melanizadas) no interior das lesões.
6. A característica típica de um micetona é o edema localizado e a formação de
fístulas que contêm grânulos compostos por hifas e tecido inflamatório
(macrófagos, fibrina)
 MICOSES ENDÊMICAS

1. As micoses endêmicas (coccidioidomicoses, histoplasmoses, blastomicoses e paracoccidioidomicoses)

são caracterizadas por apresentarem áreas geográficas distintas de distribuição e por serem causadas por
fungos filamentosos dimórficos ambientais.
2. Mais de 90% das micoses endêmicas são iniciadas pela inalação das conídias do agente etiológico
fúngico. Uma vez nos pulmões, as conídias se diferenciam em células leveduriformes (Histoplasma
capsulatum, Blastomyces dermatitidis e Paracoccidioides brasiliensis) ou esferular ( Coccidioides).
3. Em áreas endêmicas, as taxas de infecções por Coccidioides, H. capsulatum e P. brasiliensis são muito
altas, porém aproximadamente 90% dos casos ocorrem em indivíduos imunossuprimidos, sendo infecções
geralmente assintomáticas ou autolimitadas.
4. Indíviduos com comprometimento da imunidade de base celular têm risco significativamente maior de
desenvolver infecções disseminadas (p. ex., pacientes que são imunodeficientes ou imunossuprimidos,
soropositivos para HIV, com predisposição congênita, desnutridos, muito novos ou idosos)
5. Para todas as infecções endêmicas, a incidência de infecções disseminadas é significativamente maior em
indivíduos do sexo masculino.
6. Testes sorológicos para pesquisa de anticorpos contra os fungos endêmicos apresentam valor de
diagnóstico e de prognóstico.
 Ferrugem do café Micose de unha

Micose de pele ou pé-de-atleta Pé-de-atleta

 Paciente com HIV e com a
candidíase (doença
Recém-nascido com candidíase oportunista)

18
 Estrutura da parede celular de fungos

http://dx.doi.org/10.1016/j.micres.2013.02.005 - 2013
 Reconhecimento de Fungos

Signalling pathways in innate recognition of fungi. Pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) and damage-associated
molecular patterns (DAMPs) that are present during fungal infections are recognized by pattern recognition receptors (PRRs).
The major PRRs are Toll-like receptors (TLRs); C-type lectin receptors (CLRs; such as dectin 1 (also known as CLEC7A), dectin
2 (also known as CLEC6A), DC-specific ICAM3-grabbing non-integrin (DC-SIGN), mincle and the mannose receptor); galectin
family proteins (such as galectin 3) and receptor for advanced glycation end-products (RAGE). TLRs and CLRs activate multiple
intracellular pathways upon binding to specific fungal PAMPs, including β-glucans (especially β-(1,3)-glucans with varying
numbers of β-(1,6) branches), chitin, mannans linked to proteins through N-or O-linkages, β-(1,2)-linked oligomannosides and
fungal nucleic acids.
doi:10.1038/nri2939 - 2011
doi.org/10.1016/j.biopha.2018.10.075
 Mecanismos de evasão
do sistema Imune

(a) Increased cell size is an effective deterrent to

phagocytosis. C. neoformans accomplishes this by
both the polysaccharide capsule, pictured as the blue
halo around the cell, and the formation of Titan or
Giant cells. The multinucleate hyphae of C. albicans
can grow too large to be ingested by a single
phagocyte.
(b) Both species bind to complement regulators and
inhibit the formation of C3b. Host-derived proteins
are shown with a grey interior; fungal-derived
proteins are in solid colors.
(c) Both species have unique mechanisms for escaping
after phagocytosis. C. neoformans canbe expelled
from the macrophage (‘vomocytosis’) without
apparent damage to either cell, while C. albicans
hyphal growth ruptures the macrophage.
(d) Phagolysosomal function is impaired by a C.
neoformans-directed transient permeabilization,
stabilized by a flash of actin polymerization around
the organelle. C. albicans-containing organelles are
aberrantly trafficked, often resulting in an association
with the ER membrane

DOI 10.1016/j.mib.2011.09.007
Mecanismos de evasão do sistema Imune

doi:10.1016/j.it.2007.10.001
Relação entre genes humanos e susceptibilidade a fungos

doi:10.1128/microbiolspec .FUNK-0050-2016. -2017

Antifungal Therapy: Treatment of Mycosis

https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.00036
 Local de ação dos
agentes Anti-fúngicos
- Echinocandins (caspofungin) cause
disruption of cell wall, allowing other
antifungals (polyenes, azoles, and 5-FC) to
enter.

-Azoles (itraconazole (ITZ), fluconazole,

voriconazole (VRZ), posaconazole (PCZ),
ketoconazole, and miconazole ) and
polyenes (amphotericin B (AmB) and
nystatin), can inhibit or bind to ergosterol,
leading to cell lysis

- 5FC to enter the cell and inhibit nucleic

acid synthesis.

Dashed arrows indicate the site of action for

each antifungal class.

DOI: 10.1128/CMR.18.1.163-194.2005
 Tratamento

Targets and mechanisms of action of systemic antifungal drugs.

Maubon, D., Garnaud, C., Calandra, T., Sanglard, D. & Cornet, M. Resistance of Candida spp. to antifungal drugs in the ICU:
Where are we now? Intensive Care Med. 40, 1241–1255 (2014).
Vacinas contra Fungos

doi.org/10.1016/j.biopha.2018.10.075
Vacinas contra Fungos

doi.org/10.1016/j.biopha.2018.10.075-2019
Aspergillus fumigatus

DOI 10.1007/978-1-4939-7104-6_2
 Vídeos

IHARA
https://protejaseucultivo.com.br/home

Ferrugem e Mancha alvo

https://www.youtube.com/watch?v=w40-TisM-s8

Controle biológico
https://www.youtube.com/watch?v=OKtvOKMtNRc&feature=emb_rel_end

Manejo Integrado de Pragas MIP

https://www.youtube.com/watch?v=1pzYfprNHlU
 Fungos comestíveis
Fungos e Sociedade: Amigos
Proteína microbiana
Bebidas alcoólicas Micoremediação
Produtos fermentados Enzimas Industriais Tratamento de efluentes
Antioxidantes Biocatalisadores

ALIMENTOS AMBIENTE
ATIVIDADE
ENZIMÁTICA
Micorrizas
Controle biológico
Biopesticidas Antibióticos
Resistência a FUNGOS Anticâncer
pragas Antivirais
-Células Fungicidas
AGRICULTURA FÁRMACOS
- Metabolismo Antiparasitários
Primário Imunossupressores
Inibidores enzimáticos
e Secundário Bloqueadores de
receptores
Protetor solar
BIOFÁBRICA

Alcoóis, Ácidos graxos

Proteínas recombinantes GENÉTICA
Biocombustíveis Genes
Corantes Vias Metabólicas
Ácidos orgânicos
Moléculas intermediárias
 FungoFUNGO Produto/Uso Características Potencial Ref

Agaricus bisporus Alimentação Aroma, textura e sabor. Fonte rica de O mercado global de cogumelos foi
Lentinula edodes nutrientes, com baixo conteúdo de avaliado em US $ 29.427,92 milhões
Pleurotus sp gordura e colesterol, sem glúten, e em 2013. Este mercado deverá crescer
Volvariella volvaceae baixo teor de sódio. em 9,5% a partir de 2014, chegando a
US $ 50,034.12 milhões até 2019.
Fusarium graminearum Quorn-mycoproteina Proteína de células simples ~ £550 m em 2019
Aspergillus oryzae, A. tamari or A. Molho de soja, Condimentos ~ US$23.29 bn em 2020, no mercado
sojae. Soja fermentada (miso_ de molhos como condimentos
Penicillium camemberti Queijo Aroma e sabor ~ US$ 100 bn em 2019, para queijos
P. roqueforti em geral
Penicillium chrysogenum, Antibióticos: Aproximadamente 22% Penicilina G e Penicilina V
Cephalosporium sp produzidos por fungos filamentosos biossintética, tem um mercado
combinado de $ 4,4 bilhões, e
penicilina e cefalosporina
semisintéticas, tem um mercado de US
$ 11 bilhões.
Tolypocladium Ciclosporina A/Immnunosupresor Transplante de órgãos ~US $ 1.5 bilhões
inflatum
Aspergillus terreus Penicillium Lovastatin Inibem a 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA ~US $ 15 bilhões
citrinum Monascus ruber. Compactin redutase, a enzima importante na
biossintese de colesterol no fígado. A
diminuição de colesterol intracelular
induz um aumento da síntese de
receptores hepáticos de LDL,
Taxomyces andreanae Taxol (paclitaxel) Anti-tumor. Tratamento de câncer de ~US $ 3.7 bilhões
mama e ovário, age bloqueando a
despolimerização de microtúbulos
Claviceps purpúrea Ergot alkaloides e outros relacionados Medicina (antimigranha, ~US $ 3.7 bilhões
vasoconstrição, vasodilatação,
antihipertensão, anti-parkinson,
desordens psiquiátricos)
Gibberella zeae Zearelanona (estrogênio) Agente anabólico em gado e ovelha,
aumentando o crescimento e eficiência
alimentar.
Gibberella fujikuroi Giberelinas Hormônio de plantas O mercado global de reguladores do 10
crescimento das plantas deverá atingir
aproximadamente US $ 6,4 bilhões em
2020
 Metabolismo secundário.
Fungi produce a multitude of low-molecular-mass compounds known as
secondary metabolites, which have roles in a range of cellular processes
such as transcription, development and intercellular communication. In
addition, many of these compounds now have important applications, for
instance, as antibiotics or immunosuppressants.

Immunosuppressants
Compounds that reduce the activity of the immune system by inhibiting essential processes.

Cholesterol-lowering compound
A compound that leads to a reduction of the cholesterol level in human blood (for example, by
inhibition of the 3-hydroxy-3′-methyl glutaryl coenzyme A reductase activity involved in
cholesterol biosynthesis).

Terpenes
Organic molecules formed of an isoprene (C5H8) unit backbone to give, for example, C10
(monoterpene), C15 (sesquiterpene) and C20 (diterpene) compounds.

Antibiotic compounds
Antibiotics are low-molecular weight organic natural products (secondary metabolites) made by
microorganisms at low concentration.
 Metabolismo secundário.

Light grey indicates non-ribosomal peptide derivatives; dark grey represents a non-ribosomal peptide derivative that requires a tryptophan
dimethylallyltransferase for synthesis; red represents polyketide derivatives; blue represents a mixed polyketide–non-ribosomal peptide
compound; green represents a gibberellin, for which synthesis involves terpene cyclase but no non-ribosomal peptide synthetase or polyketide
synthase. Brakhage, A. Nature Reviews/Microbiology. 2013, (11):21
 Micotoxinas
Metabólitos tóxicos produzidos por fungos comuns.
As aflatoxinas, produzidas por Aspergillus flavus e espécies relacionadas em grãos e nozes, causam câncer de fígado,
A ocratoxina A produzida por espécies de Aspergillus e Penicillium em vários alimentos, incluindo grãos (em climas frios),
café, uvas secas e vinhos. Causa danos nos rins e também é cancerígeno.
As fumonisinas são produzidas por Fusarium verticillioides e espécies relacionadas no milho. Eles causam câncer de fígado
em ratos e talvez câncer de esôfago em humanos.
O desoxinivalenol de um grupo de micotoxinas chamadas tricotecenos, que são tóxicos porque interferem na síntese de
proteínas.
O desoxinivalenol e a zearalenona, que é uma micotoxina estrogênica, são produzidos por Fusarium graminearum e
espécies relacionadas em grãos pequenos, principalmente trigo
https://www2.biomin.net/
Antibióticos

Tormo, J.R. Manipulating Filamentous Fungus Chemical Phenotypes

by Growth on Nutritional Arrays. IN: Fungal Secondary Metabolism,
Edited by Nancy P. Keller and Geoffrey Turner, Humana Press, Springer New York, USA, 2012.
2004
Ácidos orgânicos de importância econômica, produzidos por fungos

Cosméticos, medicina,
alimentos, indústria química,
agricultura

Indústrias alimentar,
farmacêutica, têxtil, de
couro e outras.

Agente acidulante, Resinas sintéticas, fibras

conservante, emulsionante, sintéticas, plásticos,
saborizante, sequestrante e borrachas e aditivos de óleo
tampão, utilizado em
indústrias de alimentos,
bebidas, armacêuticos,
nutracêuticos e cosméticos
 IA is an important intermediate in polymer production. It is extremely useful in the industrial production of synthetic resins,
synthetic fibers, pesticides, plastic, rubbers, surfac-tants, ion-exchange agents, and lubricating oil additives.

Okabe, M. Appl Microbiol Biotechnol (2009) 84:597-606

 2014

A identificação de uma série completa de derivados de alcano de cadeia linear de menor massa sendo
produzida por um fungo endofítico sugeriu, pela primeira vez, que os micróbios possam ter a capacidade de
produzir os esqueletos de carbono básicos que compõem o combustível para motores diesel e a mistura de
VOC deste fungo foi denominada: Mycodiesel. Gliocladium roseum (NRRL 50072)

this organism produced an extensive series of the acetic acid esters of straight-chained alkanes including those of pentyl, hexyl,
heptyl, octyl, sec-octyl and decyl alcohols. Other hydrocarbons: undecane, 2,6-dimethyl; decane, 3,3,5-trimethyl; cyclohexene, 4-
methyl; decane, 3,3,6-trimethyl; and undecane, 4,4-dimethyl.
 Mycoprotein
Mycoprotein is made from Fusarium venenatum, an ascomycete, which is a type of fungus that naturally
occurs in the soil. Once harvested, the organism is fed with carbohydrate in large air-lift fermenters before
being separated by centrifugation to form the mycoprotein ‘dough’, that can be used in a variety of ways to
make Quorn products.

is a nutritious protein source

is high in fiber
is low in sodium, sugar,
cholesterol, and fat
is rich in essential amino acids
has a meat-like texture
has a low carbon and water
footprint, in comparison with
chicken and beef

www.quorn.com
 Terpenoides
Despite this diversity, all terpenoids are derived from the simple five carbon precursor molecules dimethylallyl
diphosphate (DMAPP) 1 and isopentenyl diphosphate (IPP). In fungi, these two isomers are produced from
acetyl-CoA via the mevalonate pathway. Fungi represent an incredible resource for the discovery of new
biosynthetic pathways.

DOI 10.1007/10_2014_283
 Fungi bioluminescence
Desjardin, Oliveira and Stevani
Photochem. Photobiol. Sci., 2008, 7, 170–182
 Número
.........................................................................22
................................................................................01: TAXOL - Paclitaxel
................................................................................07
196
compostos ....................................................................19
......................................................................04
......................................36
................................................................................06
................................................................................52
.................................................................22
...................................................................17
..........................................................10
 Fungos e Arte

Star: Talaromyces stipitatus; Tree: Aspergillus nidulans Hat, Eyes, Mouth, Buttons: Aspergillus niger; Arms: Aspergillus
Ornaments: Penicillium marneffei; Trunk: Aspergillus nidulans; Nose: Aspergillus terreus with Penicillium marneffei;
terreus. Body: Neosartorya fischeri.

Photograph: Stephanie Mounaud, J. Craig Venter Institute (http://blogs.jcvi.org/author/smounaud/)

 Referências
ABBAS, Abul K.; LICHTMAN, Andrew H.; PILLAI, Shiv.. Imunologia celular e
molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2015.
BROOKS, Geo. F. et al. Microbiologia médica de Jawetz, Melnick e Adelberg. 26.
ed. Porto Alegre: AMGH, 2014.
BURMESTER & Antonio Pezzutto, Color Atlas of Immunology 2003.
HALL, John Edward; GUYTON, Arthur C. Guyton & Hall tratado de fisiologia
médica. 13. ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2017.
LEVINSON, Warren. Microbiologia médica e imunologia. 10. ed. Porto Alegre:
AMGH, 2010.
SILVERTHORN, Dee Unglaub. Fisiologia humana: uma abordagem integrada. 7.
ed. Porto Alegre: Artmed, 2017.
TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE, Christine L. Microbiologia. 12.
ed. Porto Alegre: Artmed, 2017.
Apostila de Parasitologia: https://www.fernandosantiago.com.br/fic_papo.pdf