FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

INFORME DE LABORATORIO 3

CURSO: MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA APLICADA A LA NUTRICIÓN

SEMESTRE: 2023-2

DOCENTE:
FLOREZ FLORES, MARTHA VIRGINIA

BLOQUE:
FC-PRENUT03B01M(H)

TEMA: MEDIOS DE CULTIVOS

INTEGRANTE:

- MELANIE LUCERO MENDOZA CHAPARRO

La Molina, Lima, Perú

Agosto 2023
 ÍNDICE

I. INTRODUCCIÓN

II. OBJETIVOS

III. FUNDAMENTO DE MEDIOS DE CULTIVO

IV. EQUIPOS, MATERIALES, REACTIVOS E INSUMOS

V. PROCEDIMIENTOS DE LA PRÁCTICA

VI. RESULTADOS Y DISCUSIONES

VII. CONCLUSIÓN

VIII. CUESTIONARIO

IX. BIBLIOGRAFÍA
 I. INTRODUCCIÓN

Los microorganismos en general pueden vivir y multiplicarse sobre substratos nutritivos

preparados en el laboratorio, denominados medios de cultivo. Los Medios de Cultivo son

preparados estériles que contienen sustancias necesarias para el desarrollo de los

microorganismos.

Todos los microorganismos requieren agua, carbono, nitrógeno, hidrógeno, calcio, fósforo y

hierro como elementos vitales. Los microorganismos exigentes requieren además factores

de crecimiento como aminoácidos, vitaminas, purinas y otras sustancias que no son

capaces de sintetizar.

II. OBJETIVOS

- Identificar los principales medios de cultivo según su composición y consistencia.

- Reconocer la utilidad de estos en el trabajo microbiológico y adquirir destreza en la
separación de microorganismos como colonias individuales a partir de mezclas
microbianas mediante técnicas de aislamiento.
- Conocer las distintas técnicas de aislamiento de medios de cultivos solidos para la
obtención de colonias aisladas.
- Aprender sobre los distintos medios de cultivos existentes.

III. FUNDAMENTO DE MEDIOS DE CULTIVO

• Los medios de cultivo contienen sustancias nutritivas necesarias para el desarrollo de los

microorganismos, debiendo ser parecidos o mejores, en lo posible, al medio natural en los

que viven y se reproducen. Sus componentes básicos deben satisfacer las mínimas
exigencias

nutricionales para el crecimiento microbiano y varían según el tipo de bacteria.

• Condiciones generales de un medio de cultivo:

✓ Presentar todos los elementos constituyentes en proporciones y/o cantidades necesarias.

✓ pH adecuado.

✓ Condiciones osmóticas adecuadas.

✓ Estéril y preservado de cualquier contaminación.

✓ Medio fresco (ya que se desecan y pierden humedad).

• Componentes de los medios de cultivo:

• Agua (destilada o deionizada).

• Extracto de levadura.

• Peptonas.

• Infusiones y extractos.

• Azúcares.

• Sales minerales.

• Indicadores de pH.

• Indicadores rédox.

• Agentes selectivos: colorantes, sales biliares, detergentes, NaCl, antimicrobianos.

• Suplementos o factores de crecimiento: aminoácidos, vitaminas.

• Agentes solidificantes: agar-agar, geles poliacrílicos.

• Agentes reductores: tioglicolato sódico.

• Clasificación

• Por su consistencia

✓ Medios de cultivo líquidos.

o Ejm.: Caldo nutritivo, caldo selenito, caldo peptonado.

✓ Medios de cultivo semisólidos.

o Ejm.: Agar SIM, agar MIO.

✓ Medios de cultivo sólidos.

o Ejm.: Agar sangre, agar MacConkey, agar manitol salado.

• Por su función o fines especiales

✓ Medios nutritivos de aislamiento: con nutrientes mínimos para que bacterias poco
exigentes

desarrollen.

o Ejm.: Caldo y agar nutritivo.

✓ Medios nutritivos enriquecidos: son medios simples a los que se añaden ciertos productos
a

manera de suplemento nutritivo que permiten el aporte de factores de crecimiento.

o Ejm.: Agar sangre, agar chocolate.

✓ Medios de enriquecimiento: son medios líquidos que por su composición química

favorecen

o permiten la multiplicación de unos microorganismos, inhibiendo parcialmente la de otros.

o Ejm.: Caldo selenito, caldo peptonado.

✓ Medios selectivos: permiten el crecimiento solo de la especie que se desea aislar, para lo
cual

se les agrega colorantes bacteriostáticos (azul de metileno, verde de malaquita, verde

brillante, etc.).

o Ejm.: Agar Mac Conkey, agar Salmonella-Shigella (SS), agar manitol salado.

✓ Medios diferenciales: contienen sustancias nutritivas y un indicador de pH que permite

detectar las reacciones bioquímicas específicas de los microorganismos.

o Ejm.: Agar TSI, agar urea, agar citrato.

✓ Medios de transporte: permite mantener viables a los microorganismos durante el traslado

al laboratorio.

o Ejm.: Caldo Hafna, caldo Cary Blair, caldo Stuard

IV. EQUIPOS, MATERIALES, REACTIVOS E INSUMOS

 Placas Agar MacConkey

 Placas Agar Manitol Salado
 Placas Agar Sangre
 Placas Agar Nutritivo
 Tubos de caldo nutritivo
 Tubos de pruebas bioquímicas (TSI, LIA, Citrato, SIM
V. PROCEDIMIENTOS DE LA PRÁCTICA

1. Leer cuidadosamente las instrucciones de preparación del medio de cultivo asignado.

2. Pesar la cantidad exacta del medio deshidratado o las porciones correctas de cada uno
de los ingredientes. Cerrar inmediatamente el frasco de medio de cultivo.
3. Disolver la porción pesada de acuerdo con las indicaciones del fabricante.
Si es necesario calentar se debe tener cuidado de no sobrecalentar.
4. Ajustar el pH final de cada lote de medio preparado, preferiblemente a temperatura
ambiente (25°C).
Para ello se debe tomar una alícuota de 50 mL, medir el pH y de ser necesario
ajustar al pH indicado utilizando HCl 0,1N o NaOH 0,1N. Luego hacer el ajuste de
pH al resto del medio de cultivo utilizando la solución correspondiente, pero 1 N.
5. Distribuir el medio de cultivo de acuerdo con las indicaciones señaladas por el profesor.
6. Identificar el lote de medio de cultivo preparado indicando su nombre, distribución
y fecha de preparación.
7. Esterilizar de inmediato el medio de cultivo siguiendo las instrucciones señaladas.
Si se presenta algún inconveniente que impida su inmediata esterilización, el medio de
cultivo se puede almacenar por un periodo máximo de 12 horas bajo refrigeración.

VI. RESULTADOS Y DISCUSIONES

En el Agar McConkey se observó claramente que hubo crecimiento de microorganismos y

que se lograron aislar varias colonias, que se identifican como pequeñas manchas en la
placa de Petri.
En el Agar Manitol Sal se produjo crecimiento de microbios y se lograron aislar unas
cuantas colonias. Esta poca cantidad se puede deber a que no se tomó suficiente muestra
con el asa.

VII. CONCLUSIÓN

Para concluir podemos decir que los medios de cultivo son prácticas muy importantes que
se hacen en las industrias de alimentos, ya que son muy útiles para poder observar y crecer
nuevos microorganismos en los que queremos ver cómo actúan e incluso encontrar nuevos
microorganismos.
Los medios de cultivo son uno de los métodos mas usados para el análisis de
microorganismos con varios fines, como el de multiplicación, identificación, antibiograma,
entre algunos otros y puede ofrecer información valiosa sobre los mismos si se realiza de
manera adecuada e higiénica para evitar la contaminación del medio y la alteración de los
resultados.
Mediante el desarrollo de esta practica definimos y aplicamos los procedimientos que se
deben realizar para la elaboración de un medio de cultivo y a su vez aprendimos la
importancia de preparar medio de cultivo que nos van a servir para identificar diferentes
microorganismos.
Concluyendo que es de gran importancia preparar adecuadamente los medios de cultivo,
tomando en cuenta todos los puntos necesarios para llegar al resultado esperado en el
laboratorio.
VIII. CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es la finalidad del uso de los medios de cultivo en el trabajo microbiológico?

Los medios de cultivo constituyen el micromundo de los microorganismos en

condiciones de laboratorio, inten- tando simular su hábitat natural en relación con la
satisfacción de sus más vitales necesidades como ser vivo.

2. Menciona que medios de cultivo se usan para aislar enterobacterias

El microorganismo para identificar debe ser previamente aislado en un medio de cultivo

que favorezca el crecimiento de las enterobacterias, como el MacConkey Agar, Eosin
Methylene Blue Agar, Salmonella y Shigella Agar, Hektoen Enteric Agar, o un agar
sangre no selectivo (ej. Tryptic Soy Agar con 5% sangre de oveja).

3. ¿Qué cultivos sirve para el transporte de muestras biológicas?

Los medios de cultivo microbiológico pueden prepararse como un líquido (caldo), un sólido
(placas de agar) o un semisólido (en profundidad). Los medios sólidos y semisólidos
contienen un agente solidificante como el agar o la gelatina.

VIIII. BIBLIOGRAFÍA

Bou, G., Fernández-Olmos, A., García, C., Sáez-Nieto, J. A., & Valdezate,
S. (2011). Métodos de identificación bacteriana en el Laboratorio de
Microbiología. Enfermedades Infecciosas Y Microbiologia Clinica.

Cristina. (2023, 20 julio). Medios de cultivo: qué son, usos y tipos -

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