Eno Reflotron® Amylase ~ AMYL — AMYL — AMYL — AMYL - AMYL — AMYL — AMYL = AMYL — AMYL — AMYL — AMYL — Aspectos clinicos'? La a-amilasa (EC 3.211) es formada principalmente en las gléndu. las salivales y en el pancreas, Pequefas cantidades de la enzima se Presentan también en la mucosa del intestino delgado, en la secre- cidn de las glandulas lagrimales y de la mama, en el sistema ovario, en la placenta y en varios tumores. Las diferentes isoamilasas se dividen normalmente sélo en la llamada “amilasa salival" y la “amilasa pancredtica’. Bajo condicio- nes fisiol6gicas, la amilasa sérica esta compuesta hasta un 40% por amilasa pancreatica y hasta un 60% por amilasa salival La a-amilasa se determina ante la sospecha de pancreatitis aguda o brotes agudos de pancreatitis crénica, asi como para la vigilancia del curso de la enfermedad Entre los frecuentes factores etiolégicos de la pancreatitis aguda figura en primer lugar la colecisto-coledocolitiasis y en segundo lugar la intoxicacion alcohdlica aguda. La pancreatitis aguda apa- rece con menor frecuencia como consecuencia de una influencia mecanica directa. Ademas se describen causas de origen metab6- lico, hormonal, medicamentoso y hereditario. En una pancreatitis aguda o un brote agudo de pancreatitis erénica, la actividad de |a a-amilasa sérica aumenta de 3 hasta 12 horas después del inicio de la enfermedad. Los valores suelen ser de 3 a 5 veces mas altos que el valor guia en el individuo sano. Los valores maximos son alcanzados a las 20 a 30 horas. La normalizacién de los valores puede esperarse a partir del 1° al 4° dia. La a-amilasa se excreta a través de los rifiones. El aumento de la a-amilasa en la orina empieza con un retraso de 6 a 10 horas frente al suero. La excrecién de la a-amilasa correlaciona estrechamente con el aclaramiento de creatinina. Hay que tener en cuenta que causas extrapanoredticas pueden originar igualmente un aumento de la a-amilasa. Elevaciones de la amilasa sérica se observan también en parctitis, insuficiencia renal ‘© macroamilasemia, siendo la ultima sin efecto patolégico,Valores normales® Fundamento del test’ AMYL 2 Gracias al sistema de separacién de plasma incorporado en la zona do test, se aplican para Roflotron® Amylase, 108 mismos valores normales para sangre, suero y plasma: 37°C 30°C 25°C hasta 220 U/l hasta 160 U/| hasta 120 U/I La a-amilasa contenida en la muestra y la enzima a-glucosidasa contenida en el test, desdoblan el substrato indolil-a,0-maltohep- tadsido en indoxilo y glucosa. EI indoxilo liberado es acoplado con 2-metoxi-4-morfolino-fenil- diazoniotetraclorocincato a un colorante rojo violeta CHO CHO HOH CHLOH CHLOH CH.OH CH.OH : ‘ OH Sank y. +h ON - NGA H on S- nen N jo N ee OCH, La formacion del colorante es medida mediante fotometria de refle- xion a 567 nm. La actividad de la a-amilasa se calcula a partir de la velocidad de la reacci6n. El resultado es indicado al cabo de aprox 170 segundos en U/| La actividad enzimatica es medida a 37°C. El resultado para 25°C. 6 30°C puede calcularse como sigue UA (25°C) = 0,58 x U/l (37°C) U/l (80°C) = 0,74 x U/ (87°C) Estos factores estan almacenados en el cédigo magnético y son activados mediante el selector de temperaturasIdentificacién Portarreactivos Intervalo de medicion Método de referencia Material de muestra Cada portarreactivos Reflotron® Amylase lleva “AMYL’ impreso en a llaminilla portadora, La zona de test de Reflotron® Amylase contiene: Indolil-a,0-maltoheptadsido: 81 yg; a-glucosidasa = 3,1 U; 2-me- toxi-4-morfolino-fenildiazoniotetraclorocincato: 6,8 ig; tampon 60 — aprox. 1800 U/| (37°C) 44,4 — aprox. 1330 U/\ (30°C) 84,8 — aprox. 1050 U/l (25°C) Una eventual falta de linealidad de la curva de reaccién es indicada en el display por un asterisco que precede el resultado del test. La curva funcional para Reflotron® Amylase se construye para cada lote de produccién con 2-amilasa, método PNP de Boehringer Mannheim a 37°C, empleandose muestras clinicas idénticas. La curva sirve para la conversion de los valores de reflexion en activi- dades enzimaticas de amilasa Sangre capilar o venosa fresca: emplear en el plazo de 2 a 3 minutos. mplear solamente la heparina (preferiblemente heparinato de litic) como anticoagulante. No utilizar otros anticoagulantes ni aditivos. Sangre heparinizada: conservar en recipiente cerrado y emplear en el plazo de 8 horas. Después de la sedimentacion de los compo nentes celulares se puede emplear el plasma sobrenadante si la muestra no es agitada, En caso del empleo de capilares heparinizados se deben observar las indicaciones del fabricante sobre la estabilidad del material de muestra. Disminucién de la actividad de a-amilasa en suero y plasma al cabo de cinco dias: at 4°C:0% a +20°C ~ 25°C: 0% AMYL 3.Precisién y exactitu 4, Precision en la serie Sueros de contro} OV = 2,4-4,0% Plasmas heparinizados CV = 2,6~4,2% 2. Precisién de dia a dia Sueros de contro! ov ,2-4,0% La comparacién con el método de referencia a-Amilasa PNP (37°C) ha confirmado la exactitud de Reflotron® Amylase: 5 x = 1200 2 1000 | o > 600 € < ‘e 5 “0 s B 204 of . x ee 0260 400 +680. +—€00 1000-1000 1a00uUn Amilasa PNP (suero), 37°C [U/l], manual Datos de regresion: y = 00x 4.99; r= 0,996; n = 137 AMYL 4 Ene 9)Especificidad La hemélisis no interfiere en ol test. Valores de acido ascérbico superiores a 100 mg/l pueden dar lugar a una recuperacién de valores demasiado altos, Hasta ahora no se han observado interferencias por otras sustan- clas endégenas, valores hematécritos hasta el 55% o las siguientes sustancias exégenas: Acido acetilsalictlico Fenprocumona Acido nicotinico Glibenclamida Ampicilina Indometacina Bezafibrato a-Metildopa Cafeina Metacualona Cofalexina Nitrofurantoina Cloranfenicol Noramidopirina Clordiazepéxido Oxazepam Cromonar Oxitetraciclina Dipiridamol Piritinol Dobesilato Probenecida Dopamina Procaina Etaverina Quinidina Fenazopindina Sultametoxazol Fenitoina Teofilina Fenobarbital Trimetoprim Concentraciones toxicas de paracetamol pueden originar valores demasiado bajos de la a-amilasa. Dilucion Si el valor de a-amilasa medido en suero o plasma es superior al intervalo de medicién de Reflotron® Amylase (en el display aparece un asterisco adicional o la indicacién: DILUIR AMYL), las muestras pueden diluirse 1 + 2 con solucién NaC! al 0,9%. La actividad real de a-amilasa A se calcula a partir de la actividad de a-amilasa medida A, segtin la formula siguiente’ A=3A, Control de calidad Suero de control: Reflotron® Precinorm® U (4 x 2,ml, No. 745 154) Presentacion Envase con 15 portarreactivos Reflotron® Amylase No. 1200658 AMYLS Mor 93Bibliografia 1. Adolph, L. y R, Lorenz: “Diagnéstico enzimatico en enfermeda- des de corazén, higado y pancreas", S. Karger Verlag, Basilea, 1978 2, Pott, G.: "Krankheiten des exokrinen Pankreas’, Schattauer Verlag Stuttgart-New York, 1984 3, Hohenwaliner, W. y cols., Ber Osterr. Ges Klin. Chem. 6 (1983) 101 4, Rothe, A. y. cols., Clin. Chem. 33 (1987) 996 5, Resultados de la evaluacion interna y externa (Boehringer Mannheim)