Estructura de la membrana Una célula viva es un sistema autorreproductor de moléculas mantenidas en el interior de un recipiente. Ese recipiente es la membrana plasmati- ca: una pelicula adiposa tachonada de proteinas, tan delgada que no puede visualizarse directamente con el mictoscopio Optico, Todas las células de la Tierra utilizan una membrana de este tipo para separar y proteger a sus componentes quimicos del medio extetno. Sin membranas, no habria célu- Jas y, en consecuencia, no habria vida, La estructura de la membrana plasmatica es simple: esta formada por una hoja de dos capas de moléculas lipidicas de alrededor de 5 nm -0 50 ato- ‘mos- de espesor, en cuyo interior se han insertado proteinas, Sin embargo, sus propiedades difieren de las de cualquier hoja de material con la que cstemos familiarizados cn cl mundo cotidiano. Si bien acta como barrera para evitar que el contenido de la célula escape y se mezcle con moléculas del medio circundante ( ), la membrana piasmatica hace mucho mas que eso, Para que una célula sobreviva y crezca, los nuttientes deben pasar sw interior a través de la membrana plasmatica, y los productos de desecho deben salir. Para facilitar este intercambio, la membrana esta atravesada por canales y transportadores altamente selectivos, proteinas que permiten la importacion y exportacién de pequeftas moléculas e iones. Otras proteinas de la membrana actiian como sensores o receptotes que permiten que la célula reciba informacion acerca de los cambios en su entomo y responda Memoria © (a) CELULA BACTERIANA (@)CELULAEUCARIONTE: BICAPA LIPIDICA PROTEINAS DE MEMBRANA Las membranas eelulares actian como barreras selectvas, L2 -brana plasmitica separa a una ila de su entorno, lo que permite lor cifiers Gee de este) En algunas acters, la membrana plastica es la iniea ‘bana. (B) Ademds de una membrana 1 tienen membranes i delimitan organulos individ membranas evtan que es molecules de un lado se meaclen liremente con las del ovo lado, como se incica esquemsticamente mediante los puntos de colores.366 CAFITULOTI_ Estructura de la membrana Figura 11-9 Las membranas internas forman muchos compartimentos diferentes en une eélula euearionte. Acul se muestran algunas de ls principales lrganulas dalimitados por membrana de tuna cella animal tpics. Observe que el nicleo y las mitocondrias estan rodeads, cada uno, por dos membrana. 1 Reopen ‘Se ormacon % 19 capactad ce romeo Sanson > a reony f <5 angen ds roles posuenas Figura 11-2 La membrana plasmitica participa on la comunicacién celular, la importacidn y exportacion de moléculas, y el crecimiento y la motiidad celular. (1) Las proteinas teceptoras de la membrana plesmtica permiten que las eélulasreclban sefales del entomo; (2 los canelesy transportadores de la membrana hacen posible la importacion y exportacion de moléculas pequeras; (3a fexibiidacl de la membrana y ‘sv eapacided de expansion permiten que la cella crezca,cambie de forma y ce mueva, a ellos de maneras apropiadas. Las propiedades mecanicas de la membrana plasmatica son igual de impresionantes. Cuando una célula crece, tambien Johace su membrana: esta estructura notable se agranda en superficie, agre: gando nueva membrana sin siquiera perder su continuidad, y puede defor- arse sin desgarrarse, lo que permite que la célula se mueva o cambie de forma (fig. 11-2). La membrana tambien cicatriza por si sola: si es perfora- da, ni colapsa como un bal6n ni permanece desgarrada; por el contrario, la ‘membrana vuelve a sellarse con rapidez, Como muestra la figura 11-1, muchas bacterias tienen una tinica membrana, Ja membrana plasmética, mientras que las células eucariontes también con- tienen membranas internas que delimitan compartimentos intracelulares, Las ‘membranas internas forman diversos orgdnulos, incluidos el reticulo endo- plasmatico, el aparato de Golgi, los endosomas y las mitocondrias (fig. 11-3) Si bien estas membranas internas se forman sobre los mismos principios que la membrana plasmatica, deren de manera sutil en su composicidn, sobre todo en sus proteinas residentes, Independientemente de su localizacién, todas las membranas celulares es- tan compuestas por lipidos y proteinas, y comparten una estructura general comin (fig. 11-4). Los lipidos estan dispuestos en dos hojas yuxtapuestas, que forman una bicapa lipidica (véase fig. 11-48). Esta bicapa lipidica acta como una bartera de permeabilidad para la mayoria de las moléculas hidro- solubles, mientras que las proteinas incluidas dentro de ella llevan a cabo Jas otras funciones de la membrana y confieren a diferentes membranas sus caractersticas individuales. En este capitulo, considcraremos la estructura de las membranas biologicas yy la organizacién de sus dos componentes principales; lipidos y proteinas. Sibien nos centraremos, sobre todo, en la membrana plasmnatica, la mayo- Tia de los conecptos analizados también son aplicables de las membranas internas. Las funciones de las membranas celulares, incluido su papel en la comunicacién celular, el transporte de pequieias, moléculas-y la generacion de energia, se trataran en capitulos posteriares BICAPA LIPIDICA ‘Como las células estan llenas y rodeadas de agua, la estructura de las mem: branas celulares depende de la manera en la que se comportan los lipidos de ‘membrana en un medio acuoso. Las moléculas lipidicas no son muy hidro-Scapa Tipien (eam a Noecus bien © . solubles, aungue si se disuelven con rapidez en solventes orgénicos, como el benceno, Esta fue Ia propiedad que aprovecharon los cientificos en 1925, cuando comenzaron a investigar como estaban dispuestos los lipidos en las ‘membranas celulares. Utilizando benceno, los investigadores extrajcron todos los lipidos de las ‘membranas plasmaticas de eritrocitos purificados. Luego, estos lipidos se extendieron en tna pelicula sobre la superficie de un canal lleno de agua, como una mancha de aceite en un charco. Mediante una barrera movil, los investigadores empujaron los lipidos flotantes hasta que estos formaron una lamina continua de una molécula de espesor. Cuando los investigadores mi- dieron la superficie de esta monocapa, observaron que ocupaba el doble de la superficie de las células originales intactas. Sobre la base de esta ob- servacién, dedujeron que, en una membrana celular intacta, las moléculas lipidicas deben doblarse para formar una bicapa, un hallazgo que tuvo una profunda influencia sobre la biologia celular: En esta seccién, estudiaremos con mas atencién esta bicapa lipidica, que representa la estructura fundamental de todas las membranas celulares. Consideraremos cémo se forman las bicapas lipidicas, cémo se mantienen {y cOmo sus propiedades establecen las propiedades generales de todas las ‘membranas celulares. Los lipidos de membrana forman bicapas en el agua Los lipids hallados en las membranas celulares combinan dos propiedades muy diferentes en una sola molécula: cada lipido tiene una cabeza hidréfila (‘afin al agua’) y una cola hidrofoba (‘temerosa del agua’). Los lipidos mas abundantes de las membranas celulates son los fosfolipidos, que tienen una cabeza hidrofila, que contiene wn fosfato, unida a un par de colas hidro- carbonadas hidréfobas (fig. 11-5). Por ejemplo, la fosfatidilcolina, uno de los fosfolipidos mas abundantes en las membranas de animales y plantas, tiene la pequena molécula colina unida a un grupo fosfato como su cabeza hidrofila (fig. 11-6) Los fosfolipidos no son los tinicos lipidos de membrana que son anfipati- Cos, un termino empleado para describir moléculas con partes hidrofilas e hidr6fobas. EI colesterol, hallado en las membranas de células animales, y Jos glucolipidos, que tienen azticares como parte de su cabeza hidr6fila, tam- bin son antipaticos (fig. 11-7) Tener partes hidréfilas e hidrofobas resulta crucial para impulsar a las molé- culas lipfdicas a ensamblarse en bicapas en un medio acuoso. Como se co- menté en el capitulo 2 (véase lémina 2-2, pp. 68-69), las moléculas hidrOfilas se disuelven’con Tacifidad en el agua porque contienen grupos con carga 0 grupos polates sin carga que pueden establecer atracciones electrostaticas enlaces de hidrogeno.con las moléculas de agua (fig. 11-8). En cambio, las ‘moléculas hidrotbbas son insolubles en agua porque todos -0 casi todos- sus 4tomos no tienen carga ni Son polates; por consiguiente, no pueden establecer Bicapa lipidica 367 Figura 11-4 Una membrana celular ‘std formadia por una bicapa lipiiea fen la que hay proteinas incluldas. (A) Microfotoorafiaelectrdnica dela ‘membrona plasmatica de un eritrocto humano observado en seccisn transversal, En esta imagen, las proteinas que s@ extienden a un lado u otro de Ia bieapa forman las dos lineas oscuras estrechamente espaciadasindicadas por los corchetes a capa blanca, delgada, entre ellas es la bicapa lipidica. (6) Dibyjo esquematico que muestra una vista tridimensional de una membrana celular. (A, con autonzacion de EL Bearer jee oles ata Figura 11-5 Las membranas celulares ‘estén empaquetadas con fosfolipidos. Una moléeula tpica de un fosfolipido de ‘membrana tiene una cabeza hidrSfilay dos colashidrofobas368 CAPITULOTI_ Estructura dela membrana citer eee mE is bb FeSte i Shi foots, BM oh ‘eke gE Of by. “ « ° Figura 11-6 La fosfatidicolina es el fosfolipido més comiin de las membranas celulares. Sc ls representa e=queméticamente en (Al, como una formula quimica en (8), como un modelo espacial en (C]y como un simbolo en (D). Este fosfolipido particular esta compuesto por cinco pertes la cabeza hidrail,formada por colina urida aun grupe fosfato; des cacienashidkocarbonadas, que forman las cola hidrofobas,y una molécula de giceral, que une la cabeza alas colas. Cada una de las calas es un deido grato: una cadena hidrocarbonada con un grupo earboxilo LCOOH) en un extremo; el glicerol se une a través de este grupo carboxilo, como se muestra en [B). Se produce un acadamiento de una de las eackenas hidrocarbenadas cuando hay un debe enlace entre das stomos de carbone, (La parte "fosfatidi” dal nombre del fsfalpide hace referencia ala porciénfosfate-glicerol-scido graso de la malécula}. @1 cis qe =o bo Fe tes : a Inembrana on totalmente anfipatcor Cd uno oe os tes pos aq mostrados tienen ong ebeza hike yuna dos cols hdrfobes. La cabezs cl es calaitenorade {oslto de sein sombreada en szly amar) enla arate an grupo “OH tah ene coeseoly estar gelactosa més un grupo -OH (ambos azules| en el galactocerebrésido, Vease -—-~Fosfabdeeina Cols castes tambign le imina 2-4 (pp. 72:73) (un fostlipioy inaenn ‘wanEriaces ae nisrogeno a ee” 2 : 3 & ~~ Mw, “Pe-6 Figura 11-8 Una molécula hidréfila atrae moléculas de agua. Tanto la acetona coro elagua son moléculas polares: por consiguient, la acetone se dsuelve con faciided fen aque. Los étomos polares se muestran en r9j0 azul, y &- indica una carga negative pateial,y8", una carga postiva parcial. Se forman enlaces de hideégene (roj08) una straccién electrosttics (amarils) ante la sestona y at molécula ge agua crcundantes, Los grupos no polares se muestran en ars. interacciones favorables con las moléculas de agua, sino que fuerzan a las moléculas de agua adyacentes a reorganizarse en una estructura semejante a una jaula a su alrededor (fig. 11-9). Como esta estructura similar a una jaula esta mejor ordenada que el resto del agua, su formacién requiere energia libre. Este coste energético se minimiza cuando las moléculas hidréfobas se agrupan, lo que limita sus contactos con las moléculas de agua circundantes. En consecuencia, las moléculas puramente hidrofobas, como las grasas ha: lladas en los aceites de semillas vegetales y los adipocitos (células adiposas) de los animales (fig. 11-10), se unen para formar gotitas de grasa grandes cuando se dispersan en agua. Las moléculas anfipaticas, como los lipides de membrana (véasc fig. 11-7), estan sujetas a dos fuerzas opuestas: la cabeza hidrOfila es atraida hacia el agua, mientras que las colas hidrofobas evitan el agua y buscan agregar- se con otras moléculas hidrofobas, Este confficto se tesuclve muy bien me~ diante la formacion de una bicapa lipidica, una disposicion que satisface a todas las partes y es energéticamente mas favorable. Las cabezas hidrofilas cnfrentan cl agua en ambas supetficies de la bicapa, mientras que las colas hidrofobas estan protegidas del agua en el interior de la bicapa, como el te- leno de un emparedado (fig. 11-11) ro e a on CH eo a -e tn, o : ia canis Bicapalipidica 369 et ael0)) tr Se dice que las moléculas de agua *se reorganizan en una estructura similar a una jaula” alrededor de los componentes hidrofobos (p. j, véase fig. 11-9). Esto parece paradéjico porque las moléculas de agua no interactian con ‘el compuesto hidrefobo. Por consiguiente, ;e6mo podrian “advertir® su presencia y cambiar Us comportamientos para interactuar en forma diferente tente si? Analice este ergumento y, al hacerlo, elabore un concepto claro acerca de qué signfice una ‘estructura “similar a una jaula” 2Por qué esta estructura similar @ Una jaula seria energéticamente destavorable? Figure 11-9 Una molécula hidréfoba tiende 2 evitar el agua. Como la molécula de 2metipropano es por completo hidrofobs, no puede establecer interacciones favarables con el gu. Esto causa que las moléculas de agua adyacentes te eorganicen en una estructura semejante @ une jaula a su alrededor, pare maximizar sus enlaces de hidrogano entre si.370 CAPITULO “Tracigicea Cola nocaronada c=0 { Figura 11-10 Las moléculas de grasa son completamente hidréfobat. 4 dferen: de los fosfolip son les princ ids, os tri yiceroles que 5 componentes de las dgrasas animales y los aceites vegetales- fon completamente hidrotabos. cu, se dibuj latercera cals hidrafoba elo arriba para compara ula de triaclglicerol mirando hacia ‘con i estructura de un fosfolpide (véase fig. 11-6), aunque sea representa mirando hacia abajo (xéase lamina 2-5, pp. 74-75) w Nog i ‘ Estructura de la membrana Las mismas fuerzas que impulsan a las moléculas anfipaticas a formar una bicapa ayuudan a que esta sea autosellante. Cualquier desgarto de la hoja creara un borde libre expuesto al agua. Como esta situaci6n cs desfavorable, desde el punto de vista energético, las moléculas de la bicapa se reordenaran en forma espontanea para eliminar el borde libre. Siel desgarro es pequeno, este reordenamiento espontaneo excluird a las moléculas de agua e indu- cit la reparacién de la bicapa, lo que restablece una sola hoja continua. Si el desgarro es grande, la hoja puede comenzar a plegarse sobre si misma y fragmentarse en vesiculas cerradas independientes. En cualquier caso, él principio primordial es que se eliminan con rapidez los bordes libres. La prohibicién sobre bordes libres tiene una consecuencia importante: la dinica manera en la que una hoja anfipatica puede evitar tener bordes libres cs doblarse y sellarse formando un limite alrededor de un espacio cerrado (fig. 11-12). Por consiguiente, las moléculas anfipaticas, como los fosfolipi dos, necesariamente se ensamblan en recipientes autosellantes que definen compartimentos cerrados: de vesiculas y organulos a células completas. Este notable comportamiento, fundamental para la creacién de una célula viva, es, en esencia, un derivado de la naturaleza de los lipidos de membrana hidréfilos en un extremo ¢ hidréfobos en cl otro. La bicapa lipidica es un liquide flexible bidimensional EI medio acuoso del interior y cl exterior de una célula evita que los lipidos de membrana escapen de la bicapa, pero nada impide que estas moléculas se muevan e intercambien lugares entre si dentro del plano de la membrana Por lo tanto, la bicapa lipidica se comporta como un liquido bidimensional, un hecho crucial para la funcion y la integridad de la membrana, ‘Al mismo tiempo, la bicapa también es flexible: es decir, puede doblarse. Al igual que la fluidez, la flexibilidad es importante para la funcién de la mem: brana y fija un limite inferior de alrededor de 25 nm para el didmetro de las vesiculas que puede formar la membrana celular. La fluidez de las bicapas lipidicas puede estudiarse con bicapas lipidicas sin- teticas, que son faciles de producir mediante Ia agregacion espontanea de ‘moléculas lipidicas anfipaticas en agua. Por ejemplo, los fosfolipidos puros formardn vesiculas esféricas cerradas, denominadas liposomas, cuando se agregan al agua; estas vesiculas varian de alrededor de 25 nm a | mm de diametto (fig. 1-3). Al utilizar estas bicapas sintéticas simples, los investigadores pueden me- dir los movimientos de las moléculas lipidicas en una bicapa lipidica, Estas Bape ee ® = Figura 11-1 Los fosfolipidos anfipsticos forman una bicapa en agua. (A) Dibujo esquemtico de una bicapafosfolpidica en agua (B) simul circundantes( n computarizada que muestra las moléculasfosfolipidas (Cabezas rojas ycolas anaranjades)y les moléculas de equa zules} en una seccion transversal de una bicepa lipicica, (8, adaptads de RIM. Venable eta, Science 262:223-228, 1993),‘ediciones revelan que algunos tipos de movimientos son raros, mientras que otros son frecuentes y rapidos. Asi en las bicapas lipidicas sintéticas, las moléculas fosfolipidicas tara vez cacn de una mitad de la bicapa, 0 mono- capa, a la otra. Sin proteinas para facilitar este proceso, se estima que este fenomeno de inversion 0 basculacidn, conocido como flip-flop se produce ‘menos de una vez por mes para cualquier molécula lipidica individual en condiciones similares a las de una célula. Por el contrario, como resultado de los movimientos térmicos aleatorios, las moléculas lipidicas intercambian lugares continuamente con sus vecinas dentro de la misma monocapa. Este intercambio induce una difusion lateral répida de moléculas lipidicas dentro del plano de cada monocapa, de manera que, por ejemplo, un lipido de una bicapa artificial pucde difundir a Io largo de una longitud equivalente a toda una célula bacteriana (- 2 ym) en alrededor de un segundo. Estudios similares muestran que las moléculas lipidicas individuales no soto flexionan suis colas hidrocarbonadas, sino que también rotan con rapidez al- rededor de su eje largo, y algunas alcanzan velocidades de 500 revoluciones por segundo, Estudios de células enteras -en lugar de membranas aisladas- indican que las moléculas lipidicas de las membranas celulares presentan Jos mismos movimitentos que los obscrvados en las bicapas sintéticas, En la figura 11-14 se resumen los movimientos de las moléculas fosfolipidicas de membrana. Lo fluidez de una bicapa lipidica depende de su composicién La fluidez de una membrana celular ~la facilidad con la que sus moléculas lipidicas se mueven dentro det plano de la bicapa- es importante para la funcién de la membrana y debe ser mantenida dentro de ciertos limites. El grado de fluidez de una bicapa lipidica a una temperatura dada depende de la composicién de sus fosfolipidos y, en particular, de la naturaleza de sus colas hidrocarhonadas: cuanto mas cercano y mas regular es el empaqueta: miento de las colas, mas viscosa y menos fluida sera la bicapa, Dos propiedades importantes de las colas hidrocarbonadas inciden en cuan estrechamente se empaquetan en la bicapa: su longitud y el niimeto de enla- ces dobles que contienen. Una cadena mas corta teduce la tendencia de las Colas hidrocarbonadas a interactuar entre sty, por consiguiente, aumenta la fluidez de Ia bicapa. Las colas hidrocarbonadas de los fosfolipidos de mem- brana varian entre 14 y 24 atomos de carbono de longitud, con 18 0 20 ato- mos como longitud mas frecuente. En la mayoria de los fosfolipidos, una de estas colas hidrocarbonadas conticne solo enlaces simples entre sus atomos de carbono adyacentes, mientras que la otra cola incluye uno o mas enlaces dobles (vease fig. 11-6). La cadena que alberga un enlace doble no contiene el naimcro maximo de étomos de hidrogeno gue podrian, cn principio, unir- se a su esqueleto de carbono: por lo tanto, se dice que estén insaturados respecto del hidrdgeno. La cola hidrocarbonada sin enlaces dobles tiene un complemento completo de étomos de hidrogeno y se dice que est satura- da. Cada enlace doble de una cola insaturada crea un pequeno acodamiento de la cola (véase fig. 11-6), que hace mas dificil que las colas se empaqueten una contra otra. Por esta raz6n, las bicapas lipidicas que contienen una gran proporcién de colas hidrocarbonadas insaturadas son mas fluidas que aque- llas con proporciones mas bajas En las células bacterianas y de levaduras, que tienen que adaptarse a distin tas temperaturas, tanto la longitud como el grado de saturacion de las colas Figura 11-13 Los fosfolipides puros pueden formar liposomas ‘eféricos, cerrados. (A) Microfotografia elect’onica de vesiculae fosfoipiicas, oliposomas. (8) Dibujo de un pequeto liposoma esferico observado en seccion transversal, (A, cortesia de Jean Lepaul) Bicapalipidica = 371 [ENERGETICAMENTE DESFAVORABLE: Enna boapa foi pan, ne ‘ots Hefefets capa bine) estan ‘puesta a agua ao large color Sass ae etawe Tg Latoracn de un ‘Serpe sed petage ‘ar oleemdlbes de ape [ENERGETICAVENTE FAVORABLE: Figura 11-12 Las bicapas fosfoipidicas se cierran esponténeamente sobre si mmizmas para format compartimentot sellados. La estructura certada es estable porque evita la expesicion de ls colas, Fichocarbonadas hidrofobas al qu, Jo ue seria energéticamente desfavorable ttt aS DES372 CAPITULOTI Estructura de la membrane iN hy a resin Fl / te Figure 11-14 Los fosfolipidos de membrana se mueven dentro de Ia bicapa lipidiea. Debio 3 estor movimientos, la bicapa se comporta ‘come un liquide bidimensional, en el que rmoléculas iquides indvicuales pueden moverse en su propia manocapa, Observe que les moléculaslipicicas no se mueven en forma espontanea de una monocepa a Inova. eit iS Cinco estudiantes de su clase siempre se sientan juntos en la primera fla. Esto podria deberse ‘aque (A) en realidad se llevan bien 0 (8) que nacie mas de su clase desea sentarse junto a ellos. Qué explicacin es valida para el Snsamblado de una bicapa pica? Explique. Suponga, en cambio, que la otra explicacion fue valida para las ‘moléculas lipidicas. .En qué podrian diferr las propiedades de la bicapa lipidica? hidrocarbonadas de la bicapa se ajustan de manera constante para mante- ner una fluide2 relativamente uniforme de la membrana: por ejemplo, a tem- peraturas més altas, la célula sintetiza ipidos de membrana con colas ms Jargas y que contienen menos enlaces dobles. Se emplea un truco similar en la elaboracion de margarina a partir de aceites vegetales. Las grasas pro- ducidas por las plantas, por lo general, son insaturadas y, en consecuencia, liquidas a temperatura ambiente; a diferencia de las grasas animales, como la manteca 0 el tocino, que suelen ser saturadas y, por lo tanto, son solidas a temperatura ambiente. Para producir margarina, los aceites vegetales se “hidrogenan’: esta adicién de hidrogeno elimina sus enlaces dobles, lo que toma a los aceites mas s6lidos y mas parecidos a la manteca a temperatura ambiente En las células animales, la Muidez de la membrana es modulada por la inclu- sion del estcrol colesterol, Esta molécula esta presente en cantidades espc~ cialmente altas en la membrana plasmitica, donde representa alrededor del 20% de los ipidos de membrana por peso. Con su estructura anular esteroide corta y rigida, el colesterol puede llenar los espacios entre moléculas fosfoli- pidicas adyacentes dejados por los acodamientos de sus colas hidrocarbona- das insaturadas (fig. 11-15). De esta manera, el colesterol tiende a endurecer Ja bicapa, yla torna menos flexible y menos permeable. Pata todas las células, la fluidez de la membrana es importante por una serie de razones, Permite que muchas proteinas de membrana difundan con rapi- dez en el plano de la bicapa y que interactuien entre si, lo que resulta crucial por ejemplo, cn la sefializacion celular (se analiza en cl eap. 16). Hace posi: ble que los lipidos y las proteinas de membrana difundait deste sitios donde estan insertados hacia la bicapa después de su sintesis en otros lugares de la célula, Asegura que las moléculas de la membrana sc distribuyan de manera uniforme entre las células hijas cuando se divide la célula. Y, en condiciones adecuadas, permite que las membranas se fusionen entre si y mezclen sus ‘moléculas (Sc analiza cn cl cap. 45). Si las membranas biologicas no fueran fluidas, es dificil imaginar de qué manera las células podrian vivir, crecer y reproducirse. Fesoliieo |] Suppor [ Cobstrt / suctura cael / plane "gi 7 nop region nae ° tea a ° Figura 11-15 El colesterol tiende a volver mas rigidas las membranas celulares (4) Forma de |a nolécula de colesterol Le formula quimica del calesterol se presenta en la figura 11-7.) era en que el colesteralencsja en los histor entre las moléculas fosfolipidcas de una bicapalipicica.(C) Modelo espacial de la bicape, con las moléculas de colesteral lustradas en verde. Si bien la cola hidrocarbonada no polar de colesterol se muestra en verde para dstinguia viualmente de las calas hidracarbonadas de los fesfelipidos de membrans~en realidad, la cola hidrsfoba del lesterol es equivalente, desde el punto de vista quimico, 9 las colae hidhofobss de los fesfolipidos. C, reproducida de H.L Scott, Curr Opin. Struct Bio, 12:495-502, 2002)Figura 11-16 Se agregan fosfolipidos recién sintetizados al lado citosslico, de la membrana del RE, y despuss, se los redistribuye mediante ‘ransportadores que los transfieren desde una mitad de la bicapa lipiiea ala otra. Las enzimas biosintéticas unides ala monocapa citoséliea dela membrana del RE (no mostradas) producen nuevos fosfolipidos @ partir de écidos grasos libres ylosinsertan en la monocapa citosdlica. Luego, ‘ronsportaderes denominados escramblasas traseen alestoramente moleculas fosfolipidcas de una monocapa als cir, lo que permite que la membrana crezca como une bicaps en la que las dos hojac se igualan conlinuamente en termings de tamafia y concentracion de lipides, El ensamblado de la membrana comienza en el reficulo endoplasmatico En las células eucariontes, enzimas unidas a la superficie citosolica del ret culo endoplasmético (RE) sintetizan nuevos fosfolipidos, Estas enzimas, que utilizan dcidos grasos como sustratos (véase lamina 2-8, pp. 74-75), deposi tan los fosfolipidos recién sintetizados exclusivamente en la mitad citosolica de la bicapa. Pese ala adicion desequilibrada de Fosfolipidos recien sintetizados, las mem- branas celulares logran crecer de manera uniforme. Por consiguiente, cémo forman los fosfolipidos la monocapa opuesta? Como hemos visto en la figura 11-14, la basculacién que mueve lipidos de una monocapa a otra rara vez se produce en forma esponténea. En cambio, las transferencias de fosfolipidos son catalizadas por wna escramblasa, un tipo de proteina transportadora que elimina fosfolipidos seleccionados en forma aleatoria de una mitad de la bicapa lipidica y los inserta en la otra, (En el eap. 12, se analizan en detalle los transportadores y sus funciones). Como consecuencia de este desplaza- miento, los fosfolipidos recién sintetizados se redistribuyen por igual entre cada monocapa de la membrana del RE (fig. 14-16), Parte de esta membrana recién ensamblada permanecerd en el RE; el resto sera utilizado para proveer membrana fresca a otros compartimentos de la Célula, incluidos el aparato de Golgi y la membrana plasmatica (véase fig. 11- 3). En el eapitule 15, se explicard en detalle este proceso dinmico, en el que jas membratias Brotan de un organulo se fusionan con otro Ciertos fosfolipidos estan confinados a un lado de la membrana, ‘La mayoria de las membranas cehulares son asimétricas: las dos mitades de labicapa, a menudo, incluyen conjuntos de fosfolipidos muy diferentes, Pero silas membranas emergen del RE con un conjunto uniformemente distribui- do de fostolipidos, zdonde surge esta asimetria? Esta comienza en el aparato de Golgi La membrana de Golgi contiene otra familia de transportadores que mane- jan fosfolipidos, denominados fipasas. A diferencia de las escramblasas, que mueven fosfolipidos aleatorios desde una mitad de la bicapa a la otra, las flipasas eliminan fosfolipidos especiticos del lado de la bicapa que enfrenta cl espacio exterior, y los llevan a la monocapa que enfrenta al citosol (fig. 11-17). Figura 11-17 Las flipasas ayudan a establecer y mantener la distribuci6n _asimétrica de los fosfolipidos earacteristica de las membranas celulares ‘animales. Cuando las membranas abandonan el RE y se incorporsn fen el aparato de Gola), estas encuentran un conjunto diferente de ‘warsportadores denominades fipasas, que eliminan selectvamente la fosfatidiserina (verde claro) y la fosfaticiletanolamina (amarial de a ‘menecapa no ctosélicay las dan vuelta hacia el lado citasdlico. Esta transferencia dei a fosfaticicoline (oly la esfingomielina marron) cconcentradas en la monacapa ne citosliea, La curvature resultante de la membrana puede ayudar a impulsar la gemacion posterior de vesiculas, Bicopa lipidica 373. ARNT capaipcca eiretco Syuyyuyy ‘ndooiasmatio WZ DEL RE fm LasinTEsis SESUMAALAMTAD LCATALIZA LA TRANSFERENCIA yuuuyuy ‘aicapa w= MEWERANA DESDE EL AE IM exrsan wy ATES ua FosroulPins ESPECIFICOS ALA, MONOGRPA CITOSOLICA itt378 CAPITULO ‘car eosotca asia ‘Vesicle anspor ‘ucoprotina ce menbrara Mombrana de apaato ce Gol i aelU i UE Me) Parece paradéjico que una bieapa lipidce puede ser liquide, pero, oun 238i, asimstrca. Explique. Figura 11-19 Los fosfolipidos y los glucolipidos estan distribuidos de manera asimétrica en le bieape lipidica de la membrana plasmatica de una eélula animal. L>foststidilcolina roa) y esfingomielina (marron) se concentran nla monocapa no citosdlica, mientras, {que le fosfatidserina (verde claro y la fosfaticletanolamina (amarila) se encuentran princpalmente del lado tosdlice. Ademas de estos fosfoipides, se muestra los forfatidlinositales (grupo de la cabeza verde oscuro, un componente menor de la membrana plasmatica en la monocapa citosdlica, donde partcipan en la seralizacion celular Los glucolipidos se dibujan con grupos dela cabeza hexagonales azules para representar azcares estos se haan exclusivomente en la monocapa no citosdlica de la membrana, Dentro de la biceps, el colesterol (verde) se distriuye casi por igual en ambas monocapas Estructura de la membrana Figura 17-18 Las membranas conservan su orientacion durante la transferencia entre compartimentos celulares, Las membranas son ‘rensportadas por un proceso de gemacion y fusion de vesiculas, Aqui se muestra una vesicula brotando del aparata de Golgi yfusiondndose con la membrene plasmética, Observe que las orientaciones tanto de los lipides como de las proteinas de memibrana se corservan durante el proceso: la superficie citosdlicaeriginal dela bicapalipidica rosa) sigue enftentando el ctosal la supericie no ctosélica (oj contin orientada en direccion opuesta a citoso, hacia la luz del aparato de Golg'y la vesicua de transporte, o hacia el Fquido extracelular De modo similar, la glucaprateina aqui mostrade (azuly verde) petmanece en la misma ofientacién, con su azicar Unido enfrentando el lado ro citasdlico. La accién de estas flipasas -y de transportadores similares de la membrana plasmatica—inicia y mantiene la disposicién asimétrica de los fosfolipidos que es caracteristica de las membranas de las células animales. Esta asimetria se conserva a medida que las membranas brotan de un orgénulo y se fusionan con otro 0 con la membrana plasmatica. Esto implica que todas las mem- branas celulares tienen caras “internas” y “externas” distintas: la monocapa citosélica siempre enfrenta al citosol, mientras que la monocapa no citosélica est expuesta al exterior de la célula -en el caso de la membrana plasmatica- al espacio interior (lz) de un organulo. Esta conservacion de la orientacion s€ aplica no solo a los fosfolipidos que componen la membrana, sino tambien a cualquier proteina que pudiera insertarse en la membrana (fig. 11-18). Esta posicidn es muy importante porque la orientacion de las proteinas dentro de Ja bicapa lipidica es crucial para su funcion (véase fig. 11-20) Entre lo lipidos, aquellos que muestran la distribucion sustancialmente mas desequilibrada en las membranas celulares son los ghicolipidos que se loca- lizan, sobre todo, en la membrana plasmatica y solo en la mitad no citos6l- ca de la bicapa (fig. 11-19). Los grupos azticar de estos lipidos de membrana enfrentan el exterior celular, donde forman parte de una cubierta continua de hidratos de carbono que todea y protege a las células animales. Las molécu- Jas glucolipidicas adguieren sus grupos azticar en el aparato de Golgi, donde estén conlinadas las enzimas que realizan esta modificacion quimica. Estas enzimas estan orientadas de manera que solo se agregan azticares a las molé- culas lipidicas de la mitad no citosolica de la bicapa. Una vez que se ha creado tuna molécula glucolipidica de esta manera, esta permanece atrapada en esta monocapa, dado que no hay flipasas que transfieran glucolipidos al lado cito- sélico. Por consiguiente, cuando finalmente se entrega a la membrana plas- matica una molécula glucolipidica, esta presenta sus azticares al exterior de la célula. Ciras moléculas lipfdicas muestran diferentes tipos de distribuciones asi- ‘méiticas, que se relacionan con sus funciones especificas. Por ejemplo, los fosfolipidos inositol -un componente menor de la membrana plasmatica- desempefian un papel especial en la transmisién de senales de la superficie cclular al interior de la celula (sc analiza cn cl cap. 16); por consiguiente, 5c Concentra en a mitad citoslica de la bicapa lip, ESPACIO EXTRACELULAR NIM ARENA RAYS AAW Mombrana‘TRANSPORTADORES ANCLAS RECEPTORES) —ENZIMAS! YCANALES, qa PROTEINAS DE MEMBRANA, Si bien la bicapa lipidica proporciona la estructura basica de todas las mem- branas celulares y acta como barrera de permeabilidad para las moléculas hidrofilas a cada lado de ella, la mayoria de las funciones de la membrana son llevadas a cabo por las proteinas de membrana, En los aniniales, las proteinas representan alrededor del 50% de la masa de la mayoria de las ‘membranas plasmaticas, el resto corresponde a lipidos mas las cantidades relativamente pequentas de hidratos de carbono hallados en algunos de los lipidos (glucotipidos) y muchas de las proteinas (glicoproteinas). Como las ‘moléculas lipidicas son mucho mas pequefias que las proteinas, una mem- brana celular suele contener un numero alrededor de 50 veces mayor de moléculas lipidicas que de moléculas proteicas (véase fig. 11-48). Las proteinas de membrana cumplen muchas funciones. Algunas transpor- tan nutrientes particulares, metabolitos ¢ iones a través de la bicapa lipidi- ca. Otras anclan la membrana a macromoléculas de uno u otto lado. Otras actian como receptores que detectan scales quimicas en el entorno de la célula y las transmiten al interior de ella 0 actian como enzimas para catali zat determinadas reacciones en la membrana (fig. 1-20 y cuadro 11-1). Cada tipo de membrana celular contiene un conjunto diferente de proteinas, que reflejan las funciones especializadas de esa membrana en particular. En esta seccion, analizamos la estructura de las proteinas de membrana y como se asocian’ con la bicapa lipidica, CUADRO 11-1 ALGUNOS EJEMPLOS DE PROTEINAS DE LA MEMBRANA eu eceetee erent CS ce Transportadores. Bombs de Na” Bombea activamente Na hacia el exterior de la célula y K* hacia el interior (ee analiza en el eap. 12) Conalesiénicos Canale fitaciin de” Permite quelosiones k* abandanen las Célula, lo que influys en la excitabiicad celular ge analiza en el cap. 12) Proteingede _Integrinas Consctan flamantas de actina anclaje Intracelulares con proteinas de la matriz cextrcelular (ee analiza en ol cap. 20) Reveptores Receptor delfoctorde Se une al PDGF extracelula y, crecimiento derivado de en consecuencia, genera sefiales plaquetas (PDGF) intracelulares que llevan ala célula a crecery divide (ge analiza en los cape. 16/18) a Enzimas Adenilicilasa Cataliza la produccion de la pequeta rmolécula de cefalizacion intracelular AMP ciclico en respuesta a senales cextracelulares (e analiza en el eap. 16) Proteinas demembrana 375 Figure 11-20 Las proteinas de la membrana plasmatica cumplen dlversas funciones. Tensportan rmoldeulas eiones, actuan como anclajes y detecton sefales o catalzan376 CAPITULOT_ Estructura dela membrane Las proteinas de membrana se asocian con la bicapa lipidica de diferentes maneras ‘Aunque la estructura de la bicapa lipidica es uniforme, las proteinas pueden interactuar con una membrana celular en una serie de maneras diferentes: ‘+ Muchas proteinas de membrana se extienden a través de la bicapa, con parte de su masa a cada lado ifig. 11-214), Al igual que los lipidos vecinos, estas proteinas transmembrana son anfipaticas, con regiones tanto hidro- fobas como hidrdfilas. Sus regiones hidrofobas residen en el interior de la bicapa, enclavadas contra las colas hidrofobas de las moléculas lipidicas. Sus regiones hidrofilas estan expuestas al medio acuoso a cada lado de la membrana, + Otras proteinas de membrana se localizan casi por entero en el citosol y se asocian con la mitad citosblica de la bicapa lipidica mediante una hélice a anfipatica expuesta sobre la superficie de la proteina (fig. 11-218). + Algunas protcinas sc ubican completamente por fuera de la bicapa, de un lado o del otro, fijadas a la membrana por uno o mas grupos lipidicos uni: dos en forma covalente (fig. 11-21). + Otras proteinas se unen en forma indirecta a una cara u otra de la mem- brana, mantenidas en el lugar por sus interacciones con otras proteinas de ‘membrana (fig. 11-210). Las proteinas directamente unidas a la bicapa lipidica -ya sean transmem- brana, asociadas con la monocapa lipidica © conectadas por ipidos- solo pueden ser eliminadas al romper la bicapa con detergentes, como se expli- card en breve. Estas proteinas se conocen como proteinas de membrana inte- sgraies. Las proteinas de membrana restantes se clasifican como proteinas de ‘membrana perifricas; pueden ser liberadas de la membrana mediante pro- cedimientos de extraccion mas delicados que interfieren en las interacciones proteina-proteina, pero dejan intacta la bicapa lipidica. ” ° © © “FANSHENERANK ZSQEROASA, unions ALibos ‘UNGAS APROTEINAS ESPACIO EXTRACELULAR p es s : & ‘cITOSOL, Q) Protease arora leg as Frosh de rena perteas Figura 11.21 Las proteinas de membrana pueden asociarse con Ia bicaps lipidica de diferentes maneras. A Las proteinas transmembrana pueden extenderse a través de la bape como una sola helice a, como miltiples helices ao enrallades come una hoje Bilo que se denomina bari. (B) Algunas proteinas de membrana estan ancladks ala mitadcitosdica de labcapa lipidica mediante tuna helice @ anfipstica, (C) Otras estan conectadas a cad lado de a bicapa, Uricamente mediante una molecua ipa unid en forma covalente (ineas en zigzag rojas). (0) Muchas proteinas estan unides ala membrana solo por interacciones no covalentes, relatvamente debiles, con otras proteines de membrane, (A-C] son ejemplos de proteinas de membrana integrales; las proteinas mostrads en (D) consideran proteinas de membrana perifaricasUna cadena polipepfidica suele cruzor la bicapa lipidica como una hélice & Todas las proteinas de membrana tienen una tinica orientacién en la bicapa lipidica, lo que resulta esencial para su funcion. Por ejemplo, para una pro- teina transmembrana receptora, la parte de la proteina que recibe la seital del entorno debe estar en la parte extema de la célula, mientras que la parte que transmit la senal debe estar en el citosol (véase fig. 11-20). Esta otien- tacién cs una consccuencia de la manera en la que se sintctizan las protei- nas de membrana (se analiza en el cap. 18). Las porciones de una proteina {ransmembrana localizadas a cada lado de la bicapa lipidica estan conecta~ das por segmentos especializados de la cadena polipeptidica que abarcan la ‘membrana (véase fig. 11-214) Estos segmentos, que transcurren a través del medio hidr6fobo del interior de la bicapa lipidica, estan compuestos, en gran ‘medida, por aminodcidos con cadenas laterales hidrdfobas. Como estas ca- denas laterales no pueden establecer interacciones favorables con molécu- Jas de agua, prefieren interactuar con las colas hidrofobas de las moléculas lipidicas, donde no hay agua presente. En cambio, a diferencia de las cadenas laterales hidrofobas, los enlaces peptidicos que unen los aminoacidos sucesivos de una proteina suelen ser polares, lo que toma hidrofilo al esqueleto polipeptidico en si mismo (fig. 411-22). Como en el interior de la bicapa lipidica no hay agua, los étomos que forman parte del esqueleto polipeptidico son impulsados a formar enlaces de hidrogeno entre si. La formacion de enlaces de hidrogeno se maximiza sila cadena polipeptidica forma una hélice regular y, en consecuencia, la gran mayoria de los segmentos de cadenas polipeptidicas que abarcan la mem~ brana atraviesan la bicapa como helices « (Véase fig. 4-12), En estas helices a que abarcan la membrana, las cadenas laterales hidrofobas estan expuestas del lado externo de la hélice, donde entran en contacto con las colas liptdi- cas hidrofobas, mientras que los atomos del esqueleto polipeptidico hidr filo forman enlaces de hidrogeno entre si dentro de la hélice (fig. 11-23), En muchas proteinas transmembrana, la cadena polipeptidica cruza la me brana solo una vez (véase fig. 11-214, izquierda). Muchas de estas protei- nas transmembrana unipaso son receptoras de senales extracelulares. Otras proteinas transmembrana actiian como canales y forman poros acuosos a través de la bicapa lipidica para permitir que pequefias moléculas hidrosolu- bles si atraviesen la membrana. Estos canales no pueden ser formados por protcinas con una sola hélice a transmembrana, En cambio, suclen consis- tir en una serie de hélices « que atraviesan la bicapa un nimero de veces (véase fig. 11-214, centro). En muchas de estas proteinas transmembrana :muttipaso, una 0 mas de las regiones que abarcan la membrana son antipati cas, formadas por hélices « que contienen cadenas laterales de aminoacidos tanto hidrofobas como hidrofilas. Estos aminoacids tienden a disponerse de ‘manera tal que las cadenas laterales hidrofobas caen a un lado de la hélice, ‘mientras que las cadenas laterales hidrétilas se concentran al otro lado. En el ‘medio hidrofobo de la bicapa lipidica, las hélices a de este tipo se empaque- tan una al lado de la otra en un anillo, con las cadenas laterales hidréfobas expuestas a las colas lipidicas hidrofobas, en tanto que las cadenas laterales hidrofilas forman el revestimiento de un poro hidrdilo a través de la mem- Figura 11-23 Una cadena polipeptidica transmembrana suele atravesar la bicapa lipiiea como una hélice «. Fn este Segmento de una proteins transmeribrana, las cadens aterales hidrofobas (verde caro) de los aminoacidos que forman la helice a tentran en contacto con las olas hidrocarbonadas de ls mi fosfolipidicas, mientras que las partes hidraflas del esqueleto ppolipeptidica forman enlaces de hidrSgeno ante ines rojas interrumpides) alo largo del interior dela hele, Se necesita una hélice « que contenga alrededor de 20 amincdcides para stravesar por completo una membrana celular Proteinas de membrana 377 Entces peptions :/@\s : ® \2 di ALAR Ales as h ies oa ° a 8 8 Figura 11.22 €1 eequeleto de una ‘cadena polipeptidica es hidréflo, Los atomos a cada lado de un enlace peptidico (lines rja) son polates y twensportan cargas positvas onegativas Parciales (8° 0 8), Estas cargas permiten fue estos atoms formen enlaces de bidrégeno entre sicuando el pelipeptide se pliega en una helice @.que abarca la capa ipidica vease fig. 1-23) cadena ata eto ‘ieammnoaci Enlace ce ncogeno ‘oetipdor te mombrana378 CAPITULOTI Estructura dela membrana aimee panes / / Dt Laseatenaentals herstoas mtrscuan con (ola ostipicions a aelO NI Mod eye ipeptidica do la mayoria de las Proteastransmembrana cra a Bicapalipdica como una helice «0 un bari. Figura 11-25 Las proteinas porina forman liens de agua en la membrana externa de una bacteria. La proteins ilustrada es de E; col'y consste en una hoje B de 16 hebras curvada sobre si misma para formar un canal transmembrana leno de aque La estructura tridimensional se determing mediante crstalogratia de rayos X.Sibienno se muestra en el dibujo, tres proteinas porina se asocian pars formar Un ‘wimero con tres eanalesindependientes, Figura 11-24 Multiples helices « anfipsticas pueden formar un poro transmembrana hidréfilo. En esto aj2mplo, cies helices forman un canal lleno de agua a través dela bicapa lipidica, Las cadenas laterals hicrofobas de los aminoacidos de un lado de la hice (verdes) entran en contacto con las Colas lipidics hidrdfobas de la bicapa lipicco, mientras que las cadenaslaterales hidrafils del lado opuesto de las helices (rojas) forman un poro leno de agua, brana (fig. 11-24). En el capitulo 12, se analiza la funcién de estos canales en el transporte selective de pequerias moléculas hidrosolubles, en especial iones inorganicos. Sibien Ia hélice «es, por lejos, la forma mas frecuente en que la cadena po- lipeptidica cruza una bicapa lipidica, la cadcna polipeptidica de algunas pro- teinas transmembrana cruza la bicapa lipidica como una hoja p enrollada en un cilindro, que forma una estructura semejante a un bartil denominado ba- rril B (véase fig. 14-214, derecha). Como era esperable, las cadenas laterales de los aminodcidos que enfrentan el interior del barrl y, en consecuencia, re- visten el canal acwoso, en sui mayor parte son hidrdfilas, mientras que aque~ llas en el exterior del bartil, que estan en contacto con el centro hidrofobo de la bicapa lipidica, son exclusivamente hidrofobas. Se observa un ejemplo asombroso de una estructura en bartil fen las proteinas porinas, que forman grandes poros llenos de agua en las membranas externas mitocondriales y bacterianas (fig. 11-25). Las mitocondrias y algunas bacterias estan rodea- das por una doble membrana, y las porinas permiten el pasaje de pequenios nutrientes, metabolitos e iones inorganicos a través de sus membranas ex- ternas, a la ver. que evitan el cruce de moléculas mas grandes no deseadas, Las proteinas de membrana pueden ser solubilizadas en detergentes Para conocer por completo a una proteina, se debe conocer en detalle su es- tructura. En las proteinas de membrana, esto plantea problemas especiales. La mayoria de los procedimientos bioquimicos estan destinados a estudiar ‘moléculas en solucién acuosa. Sin embargo, las proteinas de membrana se sintetizan para operar en un medio que es en parte acuoso y en parte lipidi co, y extraerlas de su entomo a fin de estudiarias en aislamiento -pero con preservacion, a la vez, de su estructura esencial-; no es una tarea facil Antes de poder examinar en detalle a una proteina individual, se la debe separar de todas las otras proteinas celulares. En la mayoria de las proteinas de membrana, el primer paso de este proceso de purificacién implica la so- lubilizacion de la membrana con agentes que destruyen la bicapa lipidica al romper asociaciones hidrofobas. Los agentes disruptivos mas ampliamente empleados son los detergentes. Estas pequefias moléculas anfipaticas si- ‘ilares a lipides se diferencian de los fosfolipidos de membrana tinicamente {en que aquellas ticnen solo una cola hidrofoba (fig. 11-26) Como tienen una cola, las moléculas detergentes tienen forma de cono; en agua, estas molé- clas cénicas tienden a agregarse en pequeftos grupos denominados mice: Jas, en lugar de formar una bicapa como los fosfolipidos, que -con sus dos colas- tienen una forma mas cilindrica Cuando se mezclan excesivamente con membranas, los extremos hidrdfo- bos de las moléculas detergentes interacttian con las regiones hidrofobas que abarcan la membrana de las proteinas transmembrana, asi como con Jas colas hidréfobas de las moléculas fosfolipidicas, lo que rompe la bicapa lipidica y separa las proteinas de la mayoria de los fosfolipidas. Como el otro cextremo de la molécula detergente es hidrofilo, estas interacciones arrastranFigura 11-26 El SDS y el Trtén X-100 son dos detergentes utlizados con frecuencia. Eldodecilsulfato de sadio (SDS] es un detergente idnieo fuerte; es deci, tiene un grupo ‘onizado (con carga) en su extrem hidiofilo (azub El Tite X-100 es un detergenteno ‘Snico suave, es decir, tiene un grupo no ionizado, pero estructura polar, en su extremo hidesfilo (az) La porcién hidtéfoba de cada detergente se muestta en rojo. La porcion entre corchetes de Triton X-100 se repite alrededor de ocho veces. Los detergentes iénicos fuertes, como el SDS, ne solo desplazan moléculas lipidicas de las proteinas, sino que tambien despliegan las proteinas (vease lamina 4-5, p. 167), a las proteinas de membrana a la solucion acuosa como complejos protei- na-detergente; al mismo tiempo, el detergente también solubiliza los fos- folipidos (fig. 11-27). Luego, los complejos proteina-detergente pueden ser separados entre si y de los complejos lipido-detergente para mayor anélisis. Conocemos la estructura completa de relativamente pocas proteinas de membrana Durante muchos afios, gran parte de los conocimientos acerca de la estruc- tura de las proteinas de membrana se obtuvieron por medios indirectos, El ‘metodo convencional para determinar directamente la estructura tridimen- sional de una proteina ha sido la cristalografia de rayos X, pero este abor- daje requiere disposiciones cristalinas ordenadas de la moiécula. Como las proteinas de membrana deben ser purificadas en micelas detergentes que. ‘4 menudo, son heterogéneas en cuanto a tamafio, son mas dificiles de cris- talizar que las proteinas solubles que habitan el citosol celular o los liquidos extracelulares, No obstante, gracias a los avances recientes en cristalografia de rayos X, junto con nuevos abordajes poderosos, como la criomicroscopia electronica, se han determinado con alta resolucion las estructuras de un niimero cada vez mayor de protcinas de membrana (véase lamina 4-6, pp. 168-169) Un ejemplo es la bacteriorrodopsina, cuya estructura revel6 por primera vez como cruzan la bicapa lipidica las hélices «, La bacteriorrodopsina es una proteina pequena hallada en grandes cantidades en la membrana plasmatica de Halobacterium halobium, una arquea que Vive en marismas salinas. Acta como una proteina de membrana transportadora que bombea atomos de H™ Iprotones) fuera de la célula, Cada molécula de bacteriorrodopsina contiene ‘Regen rao de e poten que stare a mint Sia, Va ee wy 7 Kix sift, Ae ANG ay Complos hictostble de Nvocllses macs lena meribrins 78. 4 cro-4 ore te by die Hg * eH bet de 4 i rs fa de it ie 4 by ie dhe due de 4 ove; te o=3-0 4 dome aicaad sim iin = a ael OU Ns) Para los des detergentes mostrados ‘nla figura 11-26, explique por ‘qué las porciones azules de les ‘moléculas son hideoflas y las pporciones rojas, hidréfobas, Dibuje ‘un segmento corto de una cadena polipeptidica compuesta por tres aminodcides con cadenas laterales bidrSfobas (véase lami PP. 76-77) y aplique urvesquema de color similar. Indique qué porciones de su polipéptido formarian enlaces de hidrégeno con el agua. Figura 11-27 Las proteinas de membrana pueden ser solubilizadas por un Setergente suave, como el Titsn X-100. Las moliculas de detergente (dorado se ‘musttran coma monémeros y mela, la forma en la que estas moléculastienden ‘gruparse en el aqua. El detergente rompe le bicaps lipidia e interactia con la porcion hidtéfoba de la proteina que abarca la membrana (verde oscuro). Estas acciones Solubilzan las proteinas come complejos proteina-detergente. Seguin se usta, lox etergentes también solubilzanfosfoipidos {dela memirana, que forman micelas lipid: etergente380 cAPITULOTI Figura 11-20 La bacteriorrodopsina fctUa como una bomba de protones. US cadene poipepticica de este peavera proteins altededor de 250 aminadcidos de Fengitud) stoves bicapa lipcics como siete hélices a. Se destacan[aocalzacién del retinal (purpura yla probable va tomada pot los protones durante el clo de bombeo sctvado por uz fechas oj). Cadenaslaterales de eminoscidos polars estrategicamente ubicadas~mostradasen to) amaila yar guan cl monmiento Gat proton ("a través de fa bicapa, fa {ue le permite evitarel contacto cone trtoreliekco, Luego, se regener tein mediante [a captacion de un stro deletes fo que restablece lo canformacin orignal dela prateina. E tetnal tambien se utlea pare detectar la luzen nuestros propos ojos, donde esté Unido unaprotelna con une estrvtura mmuy snl ala dela bacterortodopsina (Adaptada de H, Lscke etl, Science 2065498 255-260, 1999). Estructura de la membrane etna) — Sica Tie “CITOSOL un unico cromoforo, una molécula no proteica que absorbe luz denomi- nada retinal, que confiere a la proteina -y a todo el organismo- un color purpura oscuro, Cuando el retinal, que esta unido covalentemente a una de las helices « transmembrana de la bactetiorrodopsina, absorbe un foton de luz, cambia de forma. Este cambio de forma determina que las hélices cir- cundantes presenten una serie de pequefios cambios de conformacion, que bombean un proton del retinal al exterior del organismo (fig. 11-28), En presencia de luz solar, miles de moléculas de bacteriorrodopsina bom- bean Ht" fuera de la célula, lo quc crea un gradicnte de concentracion de Ha través de la membrana plasmatica, La célula utiliza este gradiente de protones para almacenar energia y convertirla en ATP, como analizaremos en detalle en el capitulo 14. La bacteriorrodopsina es una bomba, una clase de proteina transmembrania que mueve activamente pequeftas moléculas organicas e iones inorganicos hacia el interior y el exterior de las células. Enel capitulo 12, estudiaremos la accion de otfas bombas transmembrana importantes, La membrana plasmatica es reforzada por la corteza celular subyacente ‘Una membrana celular por si misma es extremadamente delgada y fragil. Se necesitarian casi 10 000 membranas celulates colocadas una encima de la otra para lograr el espesor de este papel, Por consiguiente, la mayoria de las ‘membranas celulares son reforzadas y sostenidas por un marco de protei- nas, unidas a la membrana por proteinas transmembrana. En las plantas, las levaduras y las bacterias, la forma y las propiedades mecdnicas de la oélula dependen de una pared celular rigida, una capa fibrosa de proteinas, aztica- ey olras macromoléculas que reviste la membrana plasmatica, En cambio, Ja membrana plasmatica de las células animales es estabilizada por una ma- lla de proteinas filamentosas, denominada corteza celular, que esta unida al lado inferior de la membrana. La corteza de los eritrocitos humanos tiene una estructura relativamente simple y regular, y ha sido muy bien estudiada. Los eritrocitos son pequefios yy tienen una fornia aplanada caracteristica (fig. 11-29A). El principal compo- hente de su corteza es la proteina dimerica espectrina, un baston largo, del- gado y flexible de alrededor de 100 nim de longitud, La espectrina forma un entramado que brinda soporte a la membrana plasmatica y mantiene la for-w Sum (8) Protenss transmembrane Proteines detain Proteinas de membrana «381 —) Toon Figura 11-29 Una corteza compuesta en gran medida por espectrina confiere a los eritrocitos humanos su forma caracteristica, carecen de nucleo y otras orginulos int terminoterminal para formar tetame Mierafotagfatia electronica de barrda que muestra entrocits humancs, que tisnen una forma bicsneava aplanada. Estas eeluas julares. (8) En la corteza de un ertrcita, dimeros de espectina (rojas) se unen en forme mas lagos. Los tetiimeros de espectrna, junto con un numero mas pequerio de moléculas de ‘acting, estén unidos entre sien una malo, Este ted est fijada ala membrana plesmtica por la unin de, por lo menos, des tipos de proteinas de facien (mostradas aqui en amarillo y azul a dos clases de proteina transmembrana (mostredas aqui en verde y marrcn).(& ortesia de Bemaderte Chailey ma biconcava de la célula. La ted de espectrina se conecta con la membrana a través de proteinas de lijacidn intracelulares que conectan a la espectrina con proteinas transmembrana especificas (fig. 11-298). La importancia de esta malla se observa en ratones'y seres humanos que, debido a alteraciones genéticas, ptoduicen unai forma de espectrina con una estructura anomala. Estos indivicuos son anémicos: tienen menos eritrocitos que lo normal. De hecho, los eritrocitos son esféricos, en lugar de aplanados, y muestran fra gilidad anormal Enlla corteza de la mayoria de las células animales hay proteinas semejantes ala espectrina y a sus proteinas de fijacion asociadas. Pero la corteza de estas céltilas es especialmente rica en actina y la proteina motora miosing, y es mucho mas compleja que la de los eritrocitos. Mientras que los eritrocitos necesitan su corteza, principalmente, para conseguir resistencia mecanica a medida que son bombeados a través de los vasos sanguineos, otras células, la utilizan para captar, en forma selectiva, materiales de su entomo, modifi cat sulfortha y moverse, como se explica en e! capitulo 17, Ademas, las cel las tambien usan su corteza para restringir la difusion de proteinas dentro de Ja membrana plasmatica, como veremos a continuacion. Una célula puede restringir el movimiento de sus proteinas de membrana Como una membrana es un liquido bidimensional, muchas de sus proteinas, al igual quc sus lipidos, pueden moversc con libertad dentro del plano de la bicapa. inicialmente, esta difusion lateral fue demostrada mediante la fusion experimental de una célula de raton con una célula humana para formar una célula hibrida del doble del tamano y, después, controlar la distribucion de ciertas proteinas de la membrana plasmatica del raton y el ser humano. Al principio, las proteinas de ratén y de ser humano estan confinadas a sus propias mitades de la célula hibrida recién formada; pero, en el término de alrededor de media hora, ambos conjuntos de proteinas se mezclan en for- ‘ma unifotme por toda la superficie celular (fig. 11-30). En Como sabemos (pp. 384-385) describimos algunas de las técnicas para estudiar e€ movimiento de las proteinas de membrana, sin embargo, el cuadro de una membrana celular como un mar de lipidos en el que flotan con libertad todas las proteinas es demasiado simple. Las célu- las ticnen mancras de confinar determinadas protcinas a zonas localizadas ele NMS ‘Observe detalladamente las proteinas transmembrana mostrades ena figura 11-298. ,Qué puede decir acerca de su moviidad en la membrana?382 CAPITULOTI_ Estructura dela membrane Figura 11-30 La formacién de célulae hibridas ratén-ser humano revela que algunas proteinas de la membrana plasmatica pueden moverse en direccién lateral, en fo bicapa lipidica. Cuando se fusionan por primers vez cellos humanas y de Faton, sus proteinas estan lmitadas @ {us propiat mitades de la membrana plasmtica de la cella brid Tormads, Sin embargo, en un periodo de temoo corto es proteinas ~y los lipides de la membrana se entremezclan por completo. Para conirolar el movimiento de ura muestra seleccionada de proteines, s€ marcan las células con anticuerpos (que se unen a prateinas humanas © de raton; los anticuerpos se acoplan ‘a dos matcadores fuorescentes, diferentes -por ejemplo, rodamina (roja)y fuoresceina (aqui mostrada fn azu)- de manara que puadan ser dlstinguidos en un microscopio de fluorescencia (vase lamina 4.2, pp 140-141), (Basado en observaciones de LD. Fiye and. Edidin, Cell Sci. 7319-335, 1970) Protein de — hremere Iarada on tessa, cola neta on ceLULAR orcad on Cétua human dentto de la bicapa, lo que crea regiones funcionalmente especializadas, 0 dominios de membrana, en la superficie de la célula o el organulo. Como ilustra la figura 11-31, las proteinas de la membrana plasmatica pue- den estar fijadas a estructuras fuera de la célula -por ejemplo, a méléculas de Ja matriz extracelular o de una célula adyacente (se analiza en ¢] eap. 20)- 0 a estructuras relativamente inmoviles del interior de la célula, et especial a la corteza celular (véase fig. 11-298). Ademés, las células pueden crear ba- ‘eras que limitan a componentes particulates de la membrana aun dominio de membrana. Por ejemplo, en las células epiteliales que revisten el intesti ‘no, por ejemplo, es importante que las proteinas de transporte involucradas en la captacion de nutrientes del intestino estén confinadas a la superficie apical de las células (que enfrenta el contenido intestinal) y que otras protei- tas de transporte -inluidas las que partiipan en la exportacion de slutos de la célula epitelial a los tejidos y al torrente sanguineo- estén confinadas a las superficies basal y lateral (véase fig, 12-17), Esta distribucion asimétrica de las proteinas de membrana se mantiene mediante una barrera formada a lo largo de la linea donde la céiula se sella a células adyacentes mediante una asf llamada unién esirecha (fig. 11-32). En este sitio, proteinas de union especializadas forman un cinturon continuo alrededor de la célula, donde esta entra en contacto con sus vecinas, lo que ctea un sello entre membranas, plasmaticas adyacentes (véase fig. 20-22). Las proteinas de membrana no pueden difundira través de esta union La superficie celular esta cubierta de hidratos de carbono Ya hemos comentado que algunos de os lipides de la capa externa de la ‘membrana plasmatica estan unidos en forma covalente a azticarcs. Lo mis- ‘mo es vAlido para la mayoria de las proteinas de la membrana plasmatica. La gran mayoria de estas proteinas tienen cadenas cortas de azticares, deno- © @ fs} Figura 11-31 La movilidad lateral de las proteinas de la membrana plasmética puede limitarse de variae maneras. Las proteinas pusden estar fads (A) sls carteza feluar en el interior de la célua, (B) a moléculas de a mari extracelular en el exterior de la célula 0 (C)aproteinas de la supericie de otra célula. (0) Las bareras de difusicn (mmostrades como barras negras| pueden confnar las proteinas 2 un dominio de membrana particular_- Protein ae one externa plnsmates spel Membrana Protea B Pisomatea ners Plasmas bess Lina sa minados oligosaciirides, unidas a ellas; s¢ las denomina glucoprotcinas, Otras proteinas de membrana, los proteglucanos, contienen una 0 mas cadenas polisacairidas largas. Todos los hidratos de carbono de las glucoproteinas, Jos protcoglucanos y los glucolipidos sc localizan cn la parte externa de la membrana plasmatica, donde forman una cubierta de azticar denominada capa de hidratos de carbono 0 ghacocéliz (fig. 11-33) Esta capa de hidratos de carbono ayuda a proteger a la superficie celular del dafio mecanico. Y, como los oligosacaridos y los polisacaridos atraen molé- cculas de agua, también le confieren a la célula una superficie limosa que ayu- da alas células méviles, como los leucocitos, a atravesar espacios angostos yevita que las células sanguineas se adhieran entre si, o alas paredes de los vasos sanguineos, ‘in embargo, los hidratos de carbono de la superficie celular hacen mas que solo proteger y lubricar a la célula. Desempenan un papel importante en el reconocimiento y la adhesion intercelular. Proteinas transmembrana de- nominadas lectinas estan especializadas en unirse a determinadas cadenas laterales oligosacaridas. Las cadenas laterales oligosacaridas de las gluco- proteinas y los glucolipidos, aunque cortas (por lo general, de menos de 15 unidades de azticar), son enormemente diversas. A diferencia de las protei- nas, cuyos aminoacidos estén unidos en una cadena lineal por enlaces pep- tidicos idénticos, los azticares pueden estar unidos en muchas disposiciones diferentes que, a menudo, forman estructuras ramificadas elaboradas (vase lémina 2-4, pp. 72-73). Mediante una variedad de enlaces covalentes, incluso tes aziicares diferentes pueden formar cientos de trisacaridos distintos. ucoproteina Ghcoprotena ‘ranememorana vf Proteoglueano secon ra ‘ransmemrana wreenaal\ Capa rica \ cen ication de carbone ESPACIO EXTRACE lciucotie (UD Fuan Bleapa Ties crosoL Proteinas de membrana 383 Figura 11-32 Las proteinas de membrana ‘tin limitadae a determinados dominios de la membrana plasmatica de células, ‘epiteliales del intestino. La proteins Awerde)y la proteina B (raj) pueden ddfundi lateralmerte en sus propios dominios de membrana, pero se evita que Ingresen en el otro dominio mediante una Lunién celular especilizada denominads Unién estrecha, La mina basal (sail) es un entramado de matria extracelular {que sostiene todas ls liminas epiteiales (Ge analiza en el eap. 20) estan recubiertas de azucares. Esto ‘apa riea en hidratos de carbono esta compuesta por cadenas lterales de ligosacéridos unidas a glucolipidos y glucoproteinas de membrana, por las cadenas polisacaridas de los proteoglucanos de membrone, Come Se muestra, también pueden contribuir glucoproteinas que han sido secretadas porla célula y luego adsorbidas de nuevo Eobre au superficie. Observe que todos los hidratos de carbono se encuentran en la superficie externa ino ctasslica) dela membrana plasmatica,*™ COMO SABEMOS MEDICION DEL FLUJO DE MEMBRANA UUna caracteristica esencial de la bicapa lipidica es su flui- dez, que resulta crucial para la integridad y la funcion de la membrana celular. Esta propiedad permite que nume- rosas proteinas incluidas en la membrana se muevan en direccion lateral, en el plano de la bicapa, de manera que pueden establecer las diversas interacciones proteina-pro- teinas de las que depende la célula, El cardcter fluido de las membranas celulares es tan central para su correcta fun- cion, que puede parecer sorprendente que esta propiedad no se reconociera hasta principios de la década de 1970, Dada su importancia para la estructura y funcién de la membrana, écémo medimos y estudiamos la fluidez de las membranas celulares? Los métodas mas frecuentes son vi- sales: simplemente se marcan algunas de las moléculas nativas de las membranas y, luego, se observa adonde se dirigen, Un abordaje de este tipo demostro por primera vez el movimiento lateral de las proteinas de membrana que habian sido etiquetadas con anticuerpos marcados (véase fig. 1-30). Este experimento parecio indicar que las protei- nas de membrana difunden libremente, sin restriccién, en tun mar abierto de lipidos, Ahora, sabemos que esta ima- gen no es del todo exacta. Para investigar de modo mas exhaustivo la fluidez de las membranas, los investigado- res debieron inventar métodos mas precisos para seguir el movimiento de las proteinas dentro de una membrana, por ejemplo, la membrana plasmatica de una eélula viva, ‘taque mediante FRAP Una de estas técnicas, denominada recuperacién de la fluo- rescencia después de Ia fotodecoloracién (FRAP, fluorescence rap Prolinas de manbrana rit . an DECOLORE UN PARCHE face ‘CONUN HAZDELASER ucrescec en onaceenerasa LAS PROTEINAS MARCADAS DIFUNDEN ALEXTORIAMENTE POR Figura 11-34 Se pue recovery after photobleaching), implica marcar, de manera ‘uniforme, los componentes de la membrana celular -sus lipidos 0, mas a menudo, sus proteinas~ con alguna cla- se de marcador fluorescente. Las proteinas de membrana pueden marcarse incubando células con un anticuerpo flyotescente 0 uniendo en forma covalente una protetna flyorescente, como la proteina fluorescente verde (GFP), a ‘una proteina de membrana mediante las técnicas de DNA analizadas en el capitulo 10. Una ve. que se ha marcado una proteina, se irradia una pequefia zona de la membrana con un pulso de luz inten- so procedente de un haz de laser enfocado con precision, Este tratamiento “decolora’ de manera irreversible la fiuo- rescencia de las protcinas marcadas de esa pequefia zona de la membrana, por lo general una superficie de alrededor de 1 m2, Se controla la fluorescencia de esta membrana imadiada con un microscopio de fluorescencia y se mide el tiempo que tardan las proteinas fluorescentes no decolo- radas vecinas en migrar hacia la region decolorada de la ‘membrana (fig. 11-34) Esta velocidad de “recuperacion de la luorescencia” es un parametro directo de la velocidad a la que pueden difundir las moléculas proteicas dentro de la membrana, Estos experimentos han revelado que, en términos generales, las membranes celulares tienen una viscosidad parecida a la del aceite de oliva Una por una Una desventaja del abordaje por FRAP es que la técnica controla el movimiento de poblaciones bastante grandes de proteinas -cientos y miles- a través de una superficie | season ergo n emplear técnicas de fotodecoloracién, RECUPERACION DE LA ea ‘como FRAP, para medir la velocidad de difusin lateral de una proteina de membrana. Se pusde marca’ un tipo espectfca de proteina con un anticuerpo fluorescente (como se muestra aqui ® etiquetaria con una proteina luorescente, como GFP. Luego, 5° docolora una pequeha zone dela membrana que cortione estas, moléculasfluorescentes mediante un haz de laser. A medida que {2 alejon por cifusion las molaculae desoloraca, Ise moléculas flucrescentes no decoloradas cifunden hacia la zona, se recupera a intensidad de la fluorescencia (e muestra aqui en vistas laterals y Ssupetiores). Después, se calcula el coeficiente de difusion a partir de ln grafico dela velocidad de recuperacion de a fluorescencia: cuanto mayer es el coeficiente de dfusion de la preteina de membrana, mas rapida esa recuperacinie ® + “ © ura 11-35 Las proteins muestran diferentes patrones de dlfusién, Estudios de sequimiento de particilas incvelutes rereln slgunas de as vis que sguen proteins incites pe Rid rier ated a alee eae de las rayectorias representatives de diferentes cases de proteines da membrenarlesmatien. (A) Recordosrelzedos oruna protena ave eslibre par diundir, de mane leat, rls bicapnipicies (8) Recoridosrealzades por una protein jue ets acotlacls dentro de un pequeto dominic membrane pot otras proteinas (C} Recordosrealzedos por una protein quo esta jada al ctoeequelet y, en consecuenci, ex Esencalmente nmenil Se sigue el movmlert de lasprotenas Grant un period de segundoe relativamente grande de la membrana. Con esta técnica, «es imposible seguir el movimiento de moléculas individua- les, lo que puede dificultar el andlisis de los resultados. Por «ejemplo, si las proteinas marcadas no migran hacia la zona decolotada durante el curso de un estudio de FRAP, 2se debe a que son inméviles, en esencia ancladas en un Iu- gat de la membrana? O, alternativamente, :su movimiento esta restringido a una region muy pequefa -cercada por proteinas citoesqueléticas- y, en Consecuencia, solo pare- cen inmoviles? Para eludir este problema, os investigadores han desarro- lado métodos para marcar y observar cl movimiento de ‘moléculas individuales 0 de pequerios grupos de molécu- las, Una de estas técnicas, llamada microscopia de segui- ‘iento de partculas individuales (SPT), se basa en marcar ‘moléculas proteicas con nanoparticulas de oro cubiertas de anticuerpos. Las particulas de oro se visualizan como puntos negros cuando se las observa con un microscopio 6ptico, y mediante videomicroscopia se puede seguir su ‘movimiento y, por consiguiente, el de las moléculas protei- ‘cas marcadas individualmente, ‘Apattir de los estudios llevados a cabo hasta la fecha, pare ‘ce que las proteinas de membrana pueden presentar diver- sos patrones de movimiento, de difusion aleatoria a inmo- vilidad completa fig. 11-35). Algunas proteinas cambian con rapidez entre estos diferentes tipos de movimiento, Libres de células En muchos casos, los investigadores desean estudiar el omportamiento de un po particular de protina deen brana en una bicapa lipidica sintética, en ausencia de otras proteinas que podrian limitar su movimiento 0 modifica su actividad. Para esos estudios, se pueden aislar protei- nas de membrana de las células, y purificar y reconstituir Proteinas de membrana 385 la proteina de interés en vesiculas fosfolipidicas artificiales (fig. 1-36), Los lipidos permiten que la proteina purificada ‘mantenga st estructura y funcion apropiadas, de manera ue se puedan analizar en detalle su actividad y compor- tamiento. Estos estudios ponen en evidencia que las proteinas de ‘membrana difunden con mayor libertad y rapidez en las bicapas lipidicas artiiciales que en las membranas celula- tes. El hecho de que la mayoria de las proteinas mucstren ‘menor movilidad en una membrana celular tiene sentido porque estas membranas estan superpobladas con mu: cchos tipos de proteinas y contienen una mayor variedad de lipidos que una bicapa lipidica artificial. Mas aun, numero- sas proteinas de membrana de una célula estan fijadas a protcinas dc la matriz extracciular 0 ancladas a la corteza Celular inmediatamente por debajo de la membrana plas- matica, oa ambas (como se ilustra en la figura 11-31), En conjunto, estos estudios han revolucionado nuestro ¢o- nnocimitento Sobre las proteinas de membrana, y sobre la arquitectura y organizacion de las membranas celulares. a ests egte TaProTEnADE WTeRES We: UMMA, silt %& so ap(oi be FosFouiPIcos e: (meets con eae) thy oo te oes Proton inona noes Figura 11-36 Se pueden utilizar detergentes suaves para solubilizary reconsttuir proteinas de membrana funcionales. Por lo general, las proteinas difunden con mayor ibertad y tapidez cuando estén incarporadas en bicapas lpidieasarifieales que cuando se encuentran en membranas celulares.CAPITULO T Estructura de la membrana Figura 1.37 El reconocimiento de hidrotos de earbone de a superficie Celular do le neutrlo permite que estas ealulsinmunitariascomiencen, 1 'hlgrar fuera dela sangre y hacia lon tells infectadon Erevesiniento trdtel de lo=vasos sanguneos sintetza Protcnasrnamombrane ezpecilzadas Edenominadesectnasenreapuesta 9 tefole quimicas que emanan deun sto de infeccon Estos preteinesrecanocen upon ans pee resets stpnricede ez seurdon tun tips de dldbul benco, enominedotembién isucoeto} ee eelen por a sanre. En consecueel, os neither aos cbulasendoteoles que revisor pared delvaso sanguneo, Eta ascii noesimuy tere pero nde otra Inereccen protthaprtena cho mis lene no mosteds} que ayida a nevtahlo a desire entre ls cts endetelles, 2 fn de poder migra fer del ore Sangunesy hassel interior el edo en el Ste de infact La capa de hidratos de carbono de la superficie de las células de un organis~ ‘mo multicelular acttia como una clase de indumentaria distintiva, como el ‘uniforme de los oficiales de policta. Es caracteristica de cada tipo celular y es reconocida por otros tipos Celulares que interactiian con este, Por cjemplo, determinados oligosacarridos de la capa de hidratos de carbono participan en el reconocimiento de un dvulo por el espermatozoide (se analiza en el cap. 19). De modo similar, en los primeros estadios de la infeccién bacteria- na, los hidratos de carbono de la superficie de los leucocitos, denominados neutrofilos, son reconocidos por una lectina del revestimiento celular de los vvasos sanguineos en el sitio de infeccién; este reconocimitento causa que los neutr6filos se adhieran a la pared del vaso sanguineo y, luego, migren desde el torrente sanguineo al tejido infectado, donde ayudan a destruir a las bac terias invasoras (ig. 11-37), CONCEPTOS ESENCIALES + Las membranas permiten que las células creen barreras que confinan de- terminadas moléculas a compartimentos especificos. Estan formadas por una doble capa continua -una bicapa- de moléculas lipidicas en las que estan incluldas las proteinas. La bicapa lipidica proporciona la estructura basica y la funcion de barrera de todas las membranas celulares. + Las moléculas lipidicas de las membranas son anfipaticas, con regiones tanto hidréfobas como hidréfllas. Esta propiedad promueve su ensambla- do espontineo en bicapas cuando se las coloca en agua y forman compar- timentos cerrados que vuelven a ser sellados en caso de desgarros. Existen tres clases principales de moléculas lipidicas de membrana: fosfo- lipidos, esteroles y glucolipidos. La Dicapa lipidica es liquida, y moléculas lipidicas individuales pueden difundir dentro de su propla monocapa; sin embargo, no pasan esponta- neamente de una monocapa a la otra. + Las dos monocapas de una membrana celular tienen diferentes composi- clones lipidicas, lo que refleja las distintas funciones de las dos caras de la membrana celular. Las células que viven a diferentes temperaturas mantienen la fluidez de sus membranas al modificar su composicion lipfdica. Las protefnas de membrana son responsables de la mayoria de las fun- ciones de las membranas celulares, incluido el transporte de pequenias moléculas hidrosolubles a través de la bicapa lipidica. as proteinas transmembrana se extlnden a través de la bicapa lipdica, por lo general como una 0 mas hélices a, pero, a veces, como una hoja f, enrollada en forma de bartil. tras proteinas de membrana no atraviesan la bicapa lipidica, sino que estan fijadas a uno u otro lado de la membrana, ya sea mediante asocla- clon no covalente con otras proteinas de membrana, por fijacion covalen-te de lipidos o por asociacién de una hélice « anfipatica expuesta con una sola monocapa lipidica. + La mayoria de las membranas celulares estan sostenidas por un marco de proteinas unidas. Un ejemplo de especial importancia es la malla de pro- teinas fibrosas que forma la corteza celular por debajo de la membrana plasmatica. + Si bien muchas proteinas de membrana pueden difundir con rapidez en el plano de la membrana, las células tienen maneras de confinar a las pro- teinas a dominios de membrana especificos. Asimismo, pueden inmovili- zar determinadas proteinas de membrana uniéndolas a macromoléculas intracelulares o extracelulares. + Muchas de las proteinas y algunos de los lipidos expuestos sobre la su- perficie de las células tienen eadenas de azicar unidas, que forman una capa de hidratos de carbonos que ayuda a proteger y Iubricar Ia superficie Celular, mientras que, al mismo tiempo, intervienen en el reconocimiento intercelular especifico. Preguntas 387 —- = fosfolipido rodepsina glucocaliz bicapa lipidica= gotita de grasa colesterol insaturado corteza celular membrana plasmética detergente proteina de membrana dominio de membrana saturado fosfatidileolina PREGUNTAS PREGUNTA 1-7 Describa los eiferentes métodos que utilizan las células para restringir a las proteinas a regionas especificas de la ‘membrana plasmatica. {Puede una membrana con muchas de sus proteinas restringidas ser, aun asi, liquide? PREGUNTA 11-8 {{Cudles de las siguientes afirmaciones son correctas? Explique sus respuesta. Los lipids de una bicapa lipidica giran répidamente alrededor de su ee largo. 8. Los lipides de une bicape lipiics intercambian posiciones entre si con rapidez en su propia monocapa . Los lipides de una bicaps lipidica no pasan con faclided de tuna monocane a la otra, D. Los enlaces de hidrégeno que se forman entre los grupes de [a cabeza del lipid giren con rapider alrededor de su eje largo. E.Los glucolipidos se mueven entre diferentes compartimentos delimitados por membranas durante su sintesis, pero permanecen restringidos @ un lado de la bicapa lipidica F. La margarina contiene més lipidos saturados que el aceite vegetal a partir del cual se elabora. G. Algunas proteinas de membrana son enzimas. H. La capa de aziicar que rodea alas células las torna mas resbaladizas PREGUNTA 11-9 Qué signifiea el términe “liquide bidimensional”? PREGUNTA 11-10 La estructura de una bicapa lipidica depende de las propiedades particulares de sus moléculaslipiicas. ;Qué sucederia s: {los fosfolipdos tuvieran una sola cola hidrocerbonada en lugar de dos? B. las colas hidrocarbonades fueran mas cortas que lo normal, ppor ejemplo, de alrededor de 10 étomos de carbono de longitud? . todas las colas hidrocarbonadas estuvieran saturadas? . todas las colas hidrocarbonadas estuvieran insaturadas? E la bicapa contuviera una mezcla de dos clases de moléculas fosfolipidicas, una con dos colas hidrocarbonadas saturadas y Je otra con dos colas hidrocarbonadas insaturades? F cade molécula fosfolipidica estuviera unida covalentemente 8 través del étomo de carbono terminal de una de sus colas hidrocarbonadas a una cola fosfolipicica de la monocapa puesta?CAPITULO TI Estructura de la membrana PREGUNTA 11-11 {Cuéles son las diferencias entre una molécula de fosfolipido yuna molécula de detergente? {Cémo tendria que cambiar la estructura de una meléculafosfolipidica para convertrse en un detergente? PREGUNTA 11-12 ‘A. Las moléculas de los lipidos de membrana intereambian lugares con los lipidos vecinos cada 10°? segundos. Una moléculalipiica difunde desde un extremo de una célula bacteriana de 2 jm de largo al otro en alrededor de 0,2 segundos. :Coinciden estas dos cifras? (asuma que el digmetro del grupo de la cabeza del lipid es de alrededor de 0,5 nm). De no ser asi, gpuede pensar en una razén para la diferencia? B. Para apreciar la gran velocidad de difusién molecular, fasuma que un grupo de la cabeze del lipide tiene el ‘tamafio aproximado de una pelota de ping-pong (4 em de ddidmetro) y que el suelo de su sala (6 mx 6 m) est8 cubierto, de pared a pared por estas pelotas. Si dos pelotas vecinas intereambiaran posiciones una ver cada 10-7 segundos, geudl seria la velocidad en kilémetros por hora? {Cuanto tiempo demanderia que una pelota se moviera de un lado de la habitacién al lado opuesto? PREGUNTA 11-13 {Por qué la membrana plasmitica de un eritracito necesita proteinas transmembrana? PREGUNTA 116 Considere una protaina transmembrana que forma un poco hidr6filo a través de la membrana plasmatica de una celula eucarionte, Cuando esta proteina ee activada por unién a un ligando especfico en su lado extracelular, permite que ingrese Na* en la célula. La proteina esta compuesta por cinco subunidades transmembrana similares, cada una de las cuales contiene una hélice a que abarca la membrana, con cadenas laterales hidréfilas de aminodcidos en una superficie de la hélice y cadenas laterales hidr6fobas de aminoscidos en la superficie opuesta. Teniendo en cuenta le funcion de la proteina como canal de ingreso de iones Na* en la célula, proponga una disposicién posible en la membrana de las 5 helices a que abarcan la membrana, PREGUNTA 11-15 En la membrana de un ertrocito humano, la proporcién entre la masa de proteina (peso molecular promedio 50 000), el fosflipido (peso molecular 800) y el colestero! (peso. molecular 386) es de alrededor de 2:1:1. ;Cudntas moléculas lipidicas hay por cada molécula proteica? PREGUNTA 116 Dibuje un diagrama esquemstico que muestra una vista en primer plano de dos membranas plasméticas cuando s€ unen durante la fusin celular, como muestra la figura 11- 30, Mvestre las proteinas de membrana de ambas células ue fueron marcadas desde el exterior mediante la unién de moléculas de anticuerpos fluorescentes de diferentes colores. En su dibujo, indique el destino de estos marcadores dle colores cuando se fusionan las células.gLos marcadores fluorescentes permanecerén en el exterior de la célula hibvida ‘ras a fusion y todavia estardn ahi después de la mezcla de proteinas de membrana que se produce durante la incubacion 837°C? ,Cémo diferria el resultado del experimento sila incubacin se realizara a 0°C? PREGUNTA 1-17 ‘Compare las fuerzas hidréfobas que mantienen una proteina cde membrana en la bicapa lipidica con las que ayudan a las pproteinas a plegarse en una estructura tridimensional nica (Ge describe en el cap. 4, pp. 121-122 y pp. 127-128). PREGUNTA N-18 Prediga cual de los siguientes organismos tendré el porcentaje mis alto de fesfolipides ineaturados en sus ‘membranas. Explique su respuesta A Pez antartico. B, Serpionte del desierto, Ser humane. 1. Oso polar, E. Bacteria termafila que vive en manantiales cides a 100°C, PREGUNTA 1-19 {Cual de las tres secuencias de 20 aminodcidos enumeradas ‘a continuacién en el cédigo de aminodcidos de una sola letra es la candidata més probable para formar una regisn transmembrana (hélice a) de una proteina transmembrana? Explique su respuesta, AITLIVFGNMSSVTOTILLIS. B.LLLIFFGVMALVIVVILLIA C.LLKKFFROMAAVHETILEES PREGUNTA 11-20 La figura P11-20 muestra la 7 estructura del triaclgliceral LEsporaris que esta molécula fuera incorporads en la bicapa lipidica? De ser asi, gqué parte | de la molécula enfrentaria el interior de a bicapa y cusl, e! ‘agua a cada lado de la bicapa? C=O tstuctraformaran eta ‘moléculas en el medio acuoso . Galintenor de una cola? Tian Figura P1120