GLJIVE KAO RESURS

BIOLOŠKI I FARMAKOLOŠKI
AKTIVNIH SUPSTANCI

Maja Karaman, Milan Matavulj

Departman za Biologiju Prirodno-matematički fakultet,

Univerzitet u Novom Sadu
 • 21 vek

Značaj gljiva
“nezelena revolucija”

• Iskorišćenje lignoceluloznog materijala,

koji predstavlja najvažniji izvor za rast i
proizvodnju jestivih i medicinskih gljiva je
od presudnog značaja za okruženje u
recikliranju organskog otpada, čime se
kontrolišu problemi zagađenja okoline
 nutritivna vrednost
Značaj gljiva -hrana
(jestivost, otrovnost)
 kultivacija i komercijalni aspekt gajenja
 EKONOMSKI ASPEKT –medicinski značaj
 producenti sekundarnih metabolita i lekovitih
supstanci (npr. antibiotici, antikancerogeni,
vitamini , hormoni, organske kiseline itd.)
• učestvuju u globalnoj ekonomiji kroz farmaceutske,
biotehnološke procese tj.šumarstvo, poljoprivredu, industriju
hrane (alkoholi, organski rastvarači, boje, biotransformacije,
itd.)
 značaj u ekološkoj sferi
(prirodni ekosistemi-procesi
razgradnje celulozne mase)
 BIOINDIKATORI
integralni deo bioremidijacije
kroz sopstveni metabolizam i
akumulaciju teških metala i
radionuklida (toksičnih
supstanci)
 Nutritivna vrednost gljiva
• Bogate proteinima (19-35% s.m.) i
ugljenim hidratima (46.6-81.8%),
• Grci- daje snagu i jača osrednje u vrednostima količine
• Rimljani- “hrana bogova” vlakana, slabi izvori masti 1.1-8.3%
(energije), bogate su nezasićenim
• Kinezi- “eliksir života” masnim kiselinama npr. linoleinska
• Egipćani kiselina (70%)
• Meksički Indijanci- • Dobri su izvori EAA (9 aa- Lys
religijske i terapeutske svrhevisok, Trp, Met nizak),
• vitamina (taimin-B1, riboflavin-B2,
niacin, biotin, askorbinska kis.- vit.
C, provitamin D2-sterol)
• i minerala (K,P), Na, Ca, Mg, Fe
•Delikatesna hrana sa
• Nukleinske kiseline (8-25%)-
visokom nutritivnom
vrednošću procenjeno je da su sigurne za
svakodnevnu upotrebu kao dnevno
povrće
Lignikolne gljive
Izvori bioaktivnih supstanci gljiva
saprofitska Plodno telo
Potopljena micelijalna
•fakultativni biomasa
saprofit Tečna podloga (medijuma)
fakultativni •G. lucidum, L. edodes, A. blazei
parazit
Bioaktivne supstance gljiva
parazitska
Polisharidi velike molekulske
težine
Protein-polisaharidni kompleksi
male molekulske težine
Glikoproteini (lektini)
mikorizna Triterpenoidi
Imunomodulatorni proteini
 Medicinski značaj
14000-15000 viših gljiva-pečuraka
700 imaju potvrdjen medicinski značaj
1800 verovatno imaju medicinski značaj

Nutritivna sredstva- dodatak ishrani koji se daje u koncentrovanoj formi

bioaktivnog agensa u vidu kapsula ili tableta poreklom iz hrane, ali ne u
formi hrane, radi poboljšanja opšteg stanja zdravlja i u terapetske svrhe
• Oko 3,5 biliona ljudi (više
od polovine čovečanstva) • Supstance ekstrahovane iz
bazira svoje primarno hrane, lekovitih biljaka i
održavanje zdravlja gljiva radi jačanja imunog
primenom lekovitih agenasa sistema
iz biljaka i uz pomoć • imunomodulatori
različitih dodataka ishrani • (engl. “BRM”)=
poreklom iz prirode
• Biological Response
• “dietary supplements” Modefiers
Sinergistički efekat nekoliko biološki
aktivnih komponenata u ekstraktima
gljiva je odgovoran za terapeutske i
profilaktičke karakteristike preparata,
pre nego pojedinačni hemijski
konstituent!!!

Višestruki značaj
 Proizvodi od gljiva na svetskom tržištu
• CORDYCEPS SINENSIS EXTRACT- CERTIFIED ORGANICPRICE $19.95
• TURKEY TAIL EXTRACT (TRAMETES VERSICOLOR ) - CERTIFIED ORGANIC
PRICE $19.95
• SHIITAKE EXTRACT ( LENTINULA EDODES ) - CERTIFIED ORGANICPRICE $19.95
• REISHI EXTRACT ( GANODERMA LUCIDUM ) - CERTIFIED ORGANICPRICE $19.95
•
• CHAGA EXTRACT ( INONOTUS OBLIQUUS ) - CERTIFIED ORGANIC
• PRICE $19.95
• MAITAKE EXTRACT ( GRIFOLA FRONDOSA ) - CERTIFIED ORGANICPRICE $19.95
HOST DEFENSE® FOR TRAVELERS ™ - CERTIFIED ORGANIC PRICE $19.95
čaj
•

• MYCOSOFT® GOLD EXTRACT- CERTIFIED ORGANIC

• PRICE $34.95
•
• CORDYCHI® EXTRACT- CERTIFIED ORGANIC PRICE $34.95
•
• G5: FIVE GANODERMA FORMULA EXTRACT- CERTIFIED ORGANIC PRICE $34.95

• AGARICUS BRASILIENSIS EXTRACT- CERTIFIED ORGANIC PRICE $19.95

•
• STAMETS 7™ MUSHROOM BLEND EXTRACT- CERTIFIED ORGANIC PRICE $34.95

•
•
LION'S MANE EXTRACT (
PRICE $19.95
HERICIUM ERINACEUS)- CERTIFIED ORGANIC alkoholni ekstrakti
•
 Efekti medicinski značajnih gljiva
•Hematološki efekti
Lektini- proteini ili glikoproteini sa specifičnim mestima za
vezivanje šećera => antitumorske i imunomodulatorne efekte
(A. campestris, F. velutipes, V. volvacea P. ostreatus)
•Antiviralni efekti
•(vodeni ekstrakt L. edodes na Influenza, PSK C. versicolor ,
ganoderiol iz G. lucidum=> anti HIV
•Ekstrakt G. frondosa)
•Antitumorski efekti (polisaharidi iz vodenog ekstrakta, KS2,
L. edodes,PSH veće Mm efikasniji od PSH male MM)
Antitumorske susptance variraju po hem. sastavu (hetero β glukani,
heteroglikani, β glukan proteini, hetreoglika-protein kompleksi)
Polisaharidi Glikoproteini
Proteini Triterpenoidi
 Efekti medicinski značajnih gljiva
• Osnovni izvor polisaharida iz gljiva potiče iz ćelijskog
zida ćelija (celuloza, hitin)
• Ipak, hitin nema nikakvu antitumorsku aktivnost
• Kardiovaskularni efekti i efekti na bubrege
• Prah iz G. frondosa i L. edodes => smanjuje nivo
holesterola kod ljudi (i hipertenziju)
• A. auricula judae i T. fuciformis => smanjuje količinu
LDL a ne utiče na “dobar” holesterol HDL
• Vodeni ekstrakt Pleurotus sajor-caju => smanjuje
hipertenziju utičući na bubrege
• C. comatus => antidijabetogeni efekat
 Negativni efekti
• Toksičnost

Kancerogenost gljiva
•A. bisporus komercijalni sadrži supstancu agaritin koja
uzrokuje tumor želuca kod albino miševa (Toth et al, 1982)
•Utvrđena je jako mala toksičnost i kod intenzivne upotrebe
produkata gljiva u poređenju sa drugim sredstvima
Alergološke reakcije na spore gljiva
•(P. ostreatus spore, klobuk ili micelija)
 Industrijska prooizvodnja dodataka
ishrani
Promet ostvaren
poreklom iz gljiva u USA
prodajom različitih
proizvoda Ekspanzija upotrebe proizvoda
iz gljiva
• 1994-3.8$ biliona
1990- 3.3$ biliona
• 1999-6.5$ biliona
1994- 5.9$ biliona
• 2000- 14.0$ biliona
1998-12.0$ biliona
• 2000-14.0$ biliona
• 1 Flammulina velutipes<ENOKITAKE>
2 Hypsizigus marumoreus<BUNASHIMEJI>
3 Pholiota nameko<NAMEKO>
4 Grifola frondosa<MAITAKE>
5 Lentinus edodes<SHIITAKE>
6 Pleurotus eryngii <ERYNGII>
7 Pleurotus ostreatus <HIRATAKE>
8 Agaricus bisporus <MUSHROOM>
9 All of edible mushroom
 GLJIVE KAO RESURS
BIOLOŠKI I FARMAKOLOŠKI
AKTIVNIH SUPSTANCI
OD OKO 30 000 BIOAKTIVNIH
PRIRODNIH PROIZVODA
13% SU ŽIVOTINJSKOG POREKLA,
33% IZ BAKETERIJA,
26% IZ BILJAKA I
27% IZ GLJIVA (Henkel et al., 1999)
 Medicinski značajne gljive
imunomodulatori (engl. “BRM”)
• antitumorska aktivnost
(polisaharidi iz vodenih
ekstrakata)
• antimikrobna aktivnost
(antiviralna, antibakterijska ,
antifungalana)
• hepatoprotektivna aktivnost
• antidijabetogena aktivnost
• KVS, CNS, hiperholesterolemija
• protiv starenja

“Kraljica lekovitih gljiva”

simbol sreće, dobrog zdravlja i dugovečnosti
14 god.
Ganoderma lucidum se upotrebljava u Kini više od 2000
•Aktivne supstance:
Terpenoidi (150 lanostanskog tipa,triterpeni,10
grupa) gorčina=> citotoksičnost,
hepatoprotektivnost, hipolipidemičnost
•ganoderična kiselina (A-Z), C30
•ganodermična kiselina (A-I),
•ganolucidična kiselina (A-E)- C27
Polisaharidi (heteroploisaharidi, glikoproteidi)
-(1–3) D-glukan (sporokarpi, micelijalna biomasa, produkti
medijuma) =>Imuni sistem (makrofage, NK ćelije, citotoksične
T-ćelije zajedno sa njihovim sekretornim produktim (tumoro-
nekrozni faktor, interleukini itd.)
Fungalni imunomodulatorni proteini (FIPs) => na
slezinu
• LZ 8 (Ling-Zhi 8)
•FIP gts (G. tsugae)

Steroidi
•ergosteroli
•holesteroli Ganoderma lucidum (Curt. ex Fr.) Karst.; Rei-Shi
Ganoderma applanatum (Pers. ex Wallr.) Pat

 lignikolna
 parazitska
 antitumorska,
antiviralna
(anti-HIV),
antibaktericidna,
antiparazitska i
imunomodulativna
 nema komercijalnog
preparata
Coriolus versicolor (L. ex Fr.) Quel.
 lignikolna
 saprofitska
 antitumorska
 (corielan, PSK= krestin,
 krestin--¸glukan-protein),
iz micelijalne biomase;
antiviralna
(anti-HIV),
antibaktericidna,
antiparazitska,
hepatoprotektivna
 ima komercijalni preparat
  lignikolna (rizomorfi)
 saprofitska
 antitumorska (EA6, proflamin-
glikoprotein), antiinflamatorna,
imunomodulativna - ima
komercijalni preparat
 antifungalna i antiviralna - nema
komercijalni preparat
Flammulina velutipes (Curtis) Karst.

lignikolna
parazitska
otrovna
antitumorska aktivnost
(seskviterpeni:
iludin S=lamterol, iludin M)
insekticidni i nematocidni efekti
(ciklični peptid omfalotin) Omphalotus olearius (D.C. ex Fr.) Sing
 lignikolna
parazitska
antitumorska aktivnost
(acidna polisaharidna frakcija,
HA- ß-glukan)
antiinflamatorno
antioksidantno (fenoli)

Pleurotus ostreatus (Jacq ex Fr.)Kummer

lignikolna
saprofitska
antitumorska aktivnost (sonifilin,
SPG ili šizofilan- ß-glukan u
sporokarpima i u potopljenoj
kulturi)

Schizophyllum commune Fr.

 Lentinus edodes (Shi-take)

• Lentinan je 1. antitumorski polisaharid

izolovan iz toplog ekstrakta plodnog tela gljive
antitumorska aktivnost
antidijabetogena
antiinflamatorna
imunomodulativna
 Agaricus blazei • Grifola frondosa

• Poreklom iz Brazila
• Stimuliše imunitet, • Antitumorska aktivnost
• Atidijabetogeni efekat • Jačanje imunog sistema
• Smanjuje osteoporozu • Anti HIV
• Antikancerogena • smanjuje nivo holesterola
svojstva • antidijabetogeni
• Smanjuje pojavu čira • smanjuje hipertenziju
na želudcu
 ANTITUMORSKE SUPSTANCE U GLJIVAMA
-(1,3)-D-GLUKOPIRANANI, M (500-2000)

CH2OH

O
OH O
CH2OH
Šizofilan, Sch. commune
OH CH2
CH2OH
OIH O
O
O (Lorenzen&Anke, 1998). Inhibira
O
O
O rast tumora i metastazu raka
OH OH
pluća, posle radioterapije.
OH OH
OH
OH
n

• Lentinan (C6H10O5), najjači imunomodulator oz gljiva. Deluje na Sarcom 180 i

sprečava pojavu hemijske i viralne onkogeneze ( Suga et al., 1989)
•Krestin-PKS, izolovan iz C.versicolor, glikoproteinm antitumorska aktivnost na
karcinom želudca, debelog creva i pluća (Kobayashi et al., 1993)
•Heteroplisaharidi i glikoproteini.: -D-glukani, glukuronoglukani, ksiloglukani,
ksilomanoglukani iz G.lucidum ( Wasser&Weis, 1999)
•Lektini iz gljiva roda Polyporales: G. frondosa (GFL), F. fomentaris (FFL), G.
lucidum (GLLS). Citotoksični , inhibiraju agregaciju ćelija (Wasser&Weis, 1999)
•Triterpeni i steroli iz gljiva redova Polyporales i Ganodermatales. G.applanatum i
G. Lucidum: oko 100 različiti visokooksidoanih triterpene lanosatnskog tipa:
ganoderična kiselina, ganoderenična kiselina, ganolucidična kiselina, lucidenična
kiselina.

DELOVANJE NA KARDIOVASKULARNI
SISTEM I HIPERHOLESTEROLEMIJU
• LOVASTIN (mevinoloin) iz gljive roda Pleurotus u terapiji
hiperholesterolemije( Gunde-Cimerman, 1995)
•Eritadenin (lentinacin) iz etanolnog ekstrakta gljive L.edodes, stimuliše
razgradnju i ekskreciju hranom unetog holesterola (Wasser&Weis, 1999)

ANTIMIKROBNA AKTIVNOST

• Šizofilan iz Sch. Commune (Cochran, 1978)

• Kariolin iz vrsta roda Trametes (Yong et al., 1987)
• Vrste roda Ganoderma, antimikrobna aktivnost kao posledica delovanja na
produkciju interferona.
 OH
Pleuromutilin iz gljiva Basidiomycotina
(Kavanagh, 1951) iz koga je sintetisan
polusintetski antibiotik tiamulin, u lečenju
H infekcija mikoplazmom
O OCOCH2OH

OH
Terpenoidi (Lorenzen&Anke, 1998,
R2 R1 Obuchi et al., 1990)
H 2C
H3CO
• Meleolidi B,C,D izolovani iz vrste
O A.mellea, antibiotska i antifungalna
OH H
OH aktivnost
OR3 O H
•Armilarična kiselina
meleolidi
•Armilarin
R2
•armilaridin
R1

H3CO

Derivati armilarične kiseline

OH O
 HEPATOPROTEKTIVNA AKTIVNOST
• Šizofilan iz Sch. commune stimuliše produkciju interferona i pojačava
imuni odgovor prema hepatovirusima (Kakumu et al., 1991)
•Polisaharidi iz C.versicolor, sprečavaju nastanak karcinoma jetre ( Wang,
1989). Deluju antiviralno na hepatitis B (wasser&Weis, 1999)

ANTIDIJABETOGENA AKTIVNOST
prah plodnog tela Grifola frondosa; glukani (ganoderan A i B) iz plodnog tela
vrste G. lucidum (Hikino et al., 1985); koreolan (-D-glukan-protein) iz
micelijalne kulture C. versicolor (Ikuzawa et al., 1985)

Delovanje na CNS i kardiocelebralnu cirkulaciju

• vodeni ekstrakt G.lucidum terapeutski efekat na kardiocelebralne vaskulare
bolesti (hipertenzija, angina pektoris, hiperlipemija) inhibicija tromboze i
smannjenje vodenih edema (Liu, 1999)

Efekti na starenje
D-galaktoza iz ćelija G. lucidum (Pan et al., 1998, Liu, 1999)
Oksidativni stres Antioksidanti
• radionuklidi Primarni:
• teški metali Toksični oblici O2 • SOD
• zagađivači vazduha Redukovani: • CAT
(oksidi N, ozon) • superoksid anjon • GSH-PX
• dim cigarete radikal O 2- • GST
• peroksidni jon O 2-, • GSH
• lekovi 2
• Ceruloplazmin
• pesticidi • hidroksil radikal OH 
• Mokraćna kiselina
• oksidativni enzimi Sekundarni:
• respiracija Aktivisani:
• vit C
• singletni oblici
• fagociti • vit E
1
g
• zračenje • vit A
1
g
• Co Q10
Antioksidanti biljaka:
Molekulski • fenolna jedinjenja (lignin)
ANTIOKSIDANTI GLJIVA ? • azotna jedinjenja
• steroidi, saponini
 Fitohemijski skrining i
antioksidativna aktivnost

Ganoderma lucidum
 CILJ ISTRAŽIVANJA

ISPITIVANJE ANTIOKSIDANTNIH AKTIVNOSTI

RAZLIČITIH EKSTRAKATA PLODNIH TELA
ODABRANIH LIGNIKOLNIH GLJIVA FRUŠKE
GORE:
• ISPITIVANJE UTICAJA NA LIPIDNU
PEROKSIDACIJU U LIPOZOMIMA
•ISPITIVANJE UTICAJA NA PRODUKCIJU OH.
RADIKALA
•ISPITIVANJE “SKEVINDĐER” AKTIVNOSTI NA
1,1-difenil-2-pikrilhidrazil radikal (DPPH. RADIKAL)
METODE

ISPITIVANJA ANTIOKSIDANTNE AKTIVNOSTI:

•Lipidna peroksidacija u lipozomima (Pro-LIPO S, pH
5.7), TBA-test (Afanasev i sar., )
•Odredjivanje OH radikala: metoda praćenja degradacije
2-deoksiriboze, indukovna OH radikalom, nastalim u
Fentonovoj reakcijai (Cheesman et al., 1988):
Fe2* + H2O2 Fe3* + OH- + OH.

• Odredjivanje DPPH radikala (Soler-Rivas et al., 2000):

DPPH. + SH DPPH-H + S
ljubičasto ( max 525 nm) bledo-žuto
METODE

EKSTRAKCIJA: iz osušenog, samlevenog sporokarpa

gljiva maceracijom sa rastvaračima (1:5, 24 h)
pripremljeni su:

• hloroformski ekstrakti
• metanolni ekstrakti
•TLC analiza:
 TL- hromatografija M. giganteus

1. F. velutipes 10% MeOH MeOH CHCl3

2. G. applanatum 1%MeOH
3. G. lucidum 10% MeOH
4. G. lucidum 0,1% CHCl3

1. 2. 3. 4. 1. 2. 3. 4.
366 254 nm 366 nm
 DPPH test
IC 50 (g/ml)
0,1% MeOH ekstrakti
• Ganoderma applanatum
10,25
• Ganoderma lucidum 7,5
• Lentinus edodes
Uticaj MeOH ekstrakata na 181
produkciju OH • Meripilus giganteus 250
• Flammulina
0,1% CHCl velutipes 300
ekstrakti
degradacija 2-dezoksiriboze, 3
indukovane • Ganoderma applanatum
Fentonovom reakcijom 19,00
- Fe2+/ H2O2 • Ganoderma lucidum
16,25
• Meripilus giganteus