Evaluasi khlorofil

Pengertian khlorofil
Manfaat khlorofil
Mengukur kadar khlorofil
 Pengertian khlorofil
• The basic structure of a chlorophyll molecule
is a porphyrin ring, co-ordinated to a central
atom
• It is found in the chloroplasts of green plants,
and is what makes green plants, green
Seen through a microscope, chlorophyll
is concentrated within organisms in
structures called chloroplasts.
 Manfaat khlorofil untuk tanaman
• Chlorophyll is the molecule that absorbs
sunlight and uses its energy to synthesise
carbohydrates from CO2 and water. This
process is known as photosynthesis

• Coba tulis reaksi ringkas fotosintesnya !

Penyerapan chy oleh khlorofil
Pentingnya mengevaluasi khlorofil
Khlorofil asimilat

pertumbuhan dan perkembangan tanaman

produksi
 Cara Mengukur
kadar chloropil

1. Secara langsung dengan chlorophyl meter

2. Secara tidak langsung dengan colorimeter
atau spectrophotometer
• The leaf chlorophyll concentration is usually
determined by extraction from leaf samples and
subsequent spectrophotometric measurements
• Such in vitro determinations are destructive,
expensive, and time consuming

• There are also more rapid methods for

estimating the leaf non-destructively, in vivo.
• These methods exploit the optical properties of
leaves and are based on the reflectance and/or
absorbance of radiation by chlorophyll
• In the 1980s, a hand-held absorbance-based
dualwavelength chlorophyll meter was
developed by Minolta (SPAD models 501 and,
later, 502; Minolta corporation, Ltd., Osaka,
Japan)
 1. Dengan chlorophyl meter
• Misal dengan SPAD chlorophyl meter

• Enables quick, easy measurement of the chlorophyll content of

plant leaves without damaging the leaf.

• The SPAD-502 meter measures the transmittance of red (650

nm) and infrared (940 nm) radiation through the leaf, and
calculates a relative SPAD meter value that should ‘‘correspond
to the amount of chlorophyll present in the sample leaf’’

• Satuan pengukuran; unit SPAD

 2. Dengan spectrophotometer
1. Metode Arnon (1949), menggunakan palarut
aceton 85 % dan mengukur nilai absorbansi
larutan klorofil pada panjang gelombang (λ) =
663 dan 645 nm.
2. Metode Wintermans and De Mots (1965),
menggunakan palarut ethanol (ethyl
alchohol) 96 % dan mengukur absorbansi (A)
larutan klorofil pada panjang gelombang (λ) =
649 dan 665 nm
 A. Penyiapan larutan klorofil
1. Timbanglah 0,5 - 1 gram daun lalu diekstrak
(digerus sampai halus pada cawan porselin)
dengan sedikit (10 ml) pelarut aceton 85 % atau
ethanol 96 %, tergantung metode yang digunakan.
2. Saring atau disentrifuge 10 menit pada 1000 rpm,
lalu ambil filtratnya (cairanya)
3. Masukkan filtrat ke labu takar 100 ml. Kemudian
tambahkan dengan pelarut yang sama sehingga
larutan menjadi 100 ml
 B. Pengukuran klorofil
1. Tuangkan larutan klorofil ke CUVET sampai
garis batas
2. Bersihkan permukaan CUVET dengan tissue,
dan masukkan ke spektro-fotometer.
3. Atur panjang gelombang yang digunakan
a. Dengan aceton : 645 dan 663 nm
b. Dengan ethanol : 649 dan 665 nm
4. Catat nilai absorbansi A = OD=optical density=D
density untuk setiap panjang gelombangnya
 prinsip
• Larutan yang berwarna akan menyerap sinar
pada panjang gelombang tertentu
• Besarnya sinar yang diserap larutan disebut
“Optical density (OD) atau nilai Absorbansi
• Semakin banyak zat terlarut akan semakin
banyak menyerap sinar atau semakin besar
nilai Absorbansinya
Pengukuran kadar klorofil secara spektrofotometrik
didasarkan pada Hukum Lamber – Beer.

• A = k. b. c
• k = konstanta
• b = tebal larutan dilalui
• c = konsentrasi

• Metode untuk menghitung kadar klorofil total,

klorofil a dan kolrofil b telah dirumuskan
 C. MENGHITUNG
KADAR KLOROFIL
a. Pelarut aceton 80 % (Arnon : 1949)
• Klo. a = 12,7 x D-663 - 2,69 x D-645 (mg/ l)
• Klo. b = 22,9 x D-645 - 4,68 x D-663 (mg/ l)
• Klo. Total = 20,2 x D-645 + 8,02 x D-663 (mg/l)

b. Pelarut ethanol 96 % (Wintermans & de Mots: 1965)

• Klo. a = 13,7 x D-665 - 5,76 x D-649 (mg/ l)
• Klo. b = 25,8 x D-649 - 7,60 x D-665 (mg/ l)
• Total klorofil = 20,0 x D-649 + 6,10 x D-665 (mg/ l)
 sekian
• terimakasih