AKTIVITAS BIOKIMIA 1 PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FARMASI

TAHUN 2021

S E N I N PA G I : RABU SIANG: K A MI S PA G I :
• Nirmayanti, S.Si. • Christopher Petra Purnomo • Jessica Theodor Usman
• A. Sitti Fahriza Mahardhika • Khairah Rizki Guntur • Mufliha Khaerani N
• Aizia Risty Rizal • Gimas Fatir Bijaksana • Isti Muria Suharman
 Urgensi Praktikum
Tubuh mikroorganisme memiliki aktivitas biokimia yang unik dan berbeda untuk tiap-tiap mikroorganisme.

Oleh Karena itu, untuk memahami dan memperdalam pemahaman mengenai aktivitas biokima yang terjadi

pada mikroorganisme dilakukan praktikum ini sebab hal ini berperan sangat penting dalam identifikasi

mikroorganisme
 UJI FERMENTASI KARBOHIDRAT
Tujuan: Uji ini bertujuan untuk mengatahui bakteri mana yang memiliki

kemampuan memfermentasikan karbohidrat yaitu gula menjadi asam-asam

Prinsip: Karbohidrat yang berupa monosakarida akan diferementasi oleh

bakteri menghasilkan asam-asam organik dan gas, sehingga terjadi perubahan
warna pada indikator pH akibat adanya penurunan pH ketika terbentuk asam
dan adanya gelembung gas pada tabung durham

Media yang digunakan LB, GB dan SB dengan Indikator BTB

(+) = terjadi perubahan warna media menjadi kuning dan ada

gelembung gas pada tabung durham
(-) = hanya salah satu tanda yang terbentuk
 SKEMA KERJA
Terdapat tabung durham di
dalam tabung reaksi

kontrol I II III Biakan MO

Media laktosa broth, glukosa
broth, sukrosa broth, dan
indikator BTB Inkubasi pada suhu 37oC
selama 1x24 jam

(+) Perubahan warna media menjadi kuning dan

terbentuknya gas dalam tabung durham
(-) apabila hanya menunjukkan salah satu tanda
 UJI TRIPLE SUGAR IRON AGAR

TSIA agar miring ini mengandung

Tujuan: Uji ini bertujuan untuk mengidentifikasi Enterobacteriaceae yang
sukrosa, laktosa sebanyak 1% dan glukosa akan menunjukkan karakteristik tertentu melalui kemampuan bakteri dalam
sebanyak 0,1% . Dalam media ini fermentasi jenis karbohidrat tertentu

digunakan pula indikator pH dan fenol

Prinsip: Bakteri Enterobacter yang ditumbuhkan pada media TSIA yang
merah yang berperan dalam mendeteksi
mengandung karbohidrat (glucose, sukrosa dan lactose) akan difermentasi
adanya produksi asam dari karbohidrat
menghasilkan asam, memproduksi H2S dan menghasilkan gas.
yang terfermentasikan
• Butt (kuning) dan Slant (merah) = fermentasi glukosa
• Butt (kuning) dan Slant (kuning) = fermentasi
laktosa/sukrosa atau fermentasi keduanya
• Butt (merah) dan Slant (merah) = tidak dapat mem-
fermentasi ketiga gulanya
• Ada bagian agar yang terangkat = terbentuk gas
• Adanya warna hitam di bagian inokulasi = terbentuk H2S
SKEMA KERJA

Pada uji ini media yang digunakan ialah

media TSIA agar miring. Medium TSIA I I
I
Biakan MO
Pengujian ini dilakukan dengan
menggunakan kombinasi teknik goresan di
Inkubasi pada suhu
agar miring dan agar tegak dalam sekali 37oC selama 1 x 24 jam
uji. dimana, dilakukan gores sinambung
terlebih dahulu mulai dari bagian bawah ke
atas lalu di tusuk 2/3 media

(-) tidak terjadi perubahan

 UJI HIDROLISIS POLISAKARIDA

Tujuan: Mengidentifikasi mikroorganisme yang dapat menghidrolisis Prinsip: Pati merupakan polisakarida yang tersusun atas banyak
polisakarida menjadi monosakarida karena adanya enzim hidrolase/ sakarida. Bila pati dihidrolisis dengan bantuan enzim amilase,
amilase, yang kemudian dijadikan sebagai sumber energi atau pati (polisakarida) akan diurai menjadi disakarida atau
senyawa pemula dalam sintesis komponen sel monosakarida (misal maltosa dan glukosa). Hasil positif ditandai
dengan terbentuknya zona bening. Sebaliknya bila masih berupa
polisakarida maka akan membentuk kompleks biru.
(+) : Bacillus subtilis
(-) : Escherichia coli
 UJI HIDROLISIS POLISAKARIDA
REAKSI

+ iod + iod + iod

kompleks biru tidak terbentuk kompleks biru

(zona bening)
SKEMA
KERJA Medium
Starch Agar
I II
Biakan MO
Uji Hidrolisis Polisakarida

Inkubasi pada suhu 37oC

selama 1 x 24 jam

1-2 tetes reagen iod

(+) Zona bening

(-) tidak terbentuk zona
bening
 UJI PENGENCERAN GELATIN
Tujuan: Uji ini bertujuan untuk mengidentifikasi bakteri
yang memiliki kemampuan menghasilkan gelatinase yang
akan menguraikan gelatin

Prinsip: Mikroorganisme yang memiliki enzim gelatinase

akan menguraikan gelatin menjadi polipeptida yang lebih
sederhana dan akan diuraikan lagi dengan gelatinase
menghasilkan asam amino. Gelatin yang telah
dicerna/diuraikan oleh mikroorganisme setelah
didinginkan akan mencair.
 SKEMA KERJA
Medium I I
NB+gelatin I
Biakan MO
I
Kontrol
II
Gelatin pada media berfungsi untuk
memadatkan, sehingga hasil dari uji ini:
Inkubasi pada suhu 37 C
o

selama 1 x 24 jam
(+) = setelah didinginkan akan mencair
(-) = setelah didinginkan tetap memadat

Masukkan ke dalam kulkas

selama 10-15 menit

Amatipencairan gelatin
TERIMA KASIH