Herra Studiawan dan Mulja Hadi Santosa ; Uji Aktivitas Penurun Kadar Glukosa Darah Ekstrak Daun …

Uji Aktivitas Penurun Kadar Glukosa Darah Ekstrak Daun Eugenia polyantha
pada Mencit yang Diinduksi Aloksan
Test Pharmacological Effect of Ethanolic Extract of Eugenia polyantha Leaves as for Decreasing
Glucose Level Activity on Mice Induced by Alloxan

Herra Studiawan dan Mulja Hadi Santosa

Bagian Ilmu Bahan Alam, Fakultas Farmasi , Universitas Airlangga Surabaya

Abstract

The aim of this study was to know the pharmacological effect of salam leaves on mice which
would be focused on the effect in decreasing blood glucose level on mice induced alloxan.
Material use in this research was ethanolic extract of leaves of Eugenia polyantha. Two kg of
powdered dried leaves of Eugenia polyantha was macerated with ethanol. The ethanolic extract obtained
was used to decreasing glucose level activity using alloxan induced mice. Fourty five male mice were
divided into 3 group i.e group I, II, and control. Alloxan was given every 4 days at the dose of 100 mg
mg/kg BW i.p. The ethanolic extract then given orally for 7 consecutive days in the dose 2,62 mg (group
I) and 5,24 mg/20 g BW (group II) from the 9 th day to 15th day. Decrease of glucose levels were calculated
from the 8th day to 15th day. The data were analyzed by ANOVA and LSD tests to compare groups I, II,
and control. Based on the data analysis, there were a significance differences (p = 0,05) between group I
and control, group II and control. But, there was no significance difference between group I and group
II.
The result of this study showed that ethanol ic extract of Eugenia polyantha leaves decreased
glucose level of alloxan mice at the dose 2,62 mg/20 g BW and 5,24 mg/20 g BW.

Keywords: Eugenia polyantha, mice, alloxan, glucose level

Pendahuluan berbagai daerah, baik di pegunungan maupun di

Diabetes melitus atau yang lebih dikenal dengan
penyakit gula atau kencing manis diakibatkan oleh
kekurangan hormon insulin (Tjokroprawiro, 1988).
Hal ini disebabkan oleh pankreas sebagai produsen
insulin tidak memproduksi insulin dalam jumlah yang
cukup besar daripada yang dibutuhkan oleh tubuh,
sehingga pembakaran dan penggunaan karbohidrat
tidak sempurna (Tjokroprawiro, 1986).
Dalam penanggulangan diabetes, obat hanya
merupakan pelengkap dari diet. Obat hanya perlu
diberikan bila pengaturan diet secara maksimal tidak
berkhasiat mengendalikan kadar gula darah.
Obat antidiabetes oral mungkin berguna untuk
penderita yang alergi terhadap insulin atau yang tidak
menggunakan suntikan insulin. Sementara
penggunaannya harus dipahami, agar ada kesesuaian
dosis dengan indikasinya, tanpa menimbul kan
hipoglikemia.
Karena obat antidiabetes oral kebanyakan
memberikan efek samping yang tidak diinginkan,
maka para ahli mengembangkan sistem pengobatan
tradisional untuk diabetes melitus yang relatif aman
(Agoes, 1991).
Tanaman Eugenia polyantha telah banyak dikenal
oleh masyarakat Indonesia. Tanaman ini tersebar di
dataran rendah, dan banyak dikenal dengan nama
pohon salam.
Tanaman ini tumbuh di wilayah iklim tropis dan
subtropis, termasukdi Asia Tenggara dan Cina. Di
Indonesia pohon ini tumbuh di pegunungan, tetapi
ada juga yang ditanam orang untuk pelengkap bumbu
masak atau dimanfaatkan sebagai tempat berteduh
(Mardisiswojo dan Radjakmangunsudarso, 1968;
Heyne, 1987).
Daun salam selain dimanfaatkan untuk pel
engkap bumbu masak, juga dikenal memiliki khasiat
untuk menyembuhkan diare, sakit mag dan mabuk
akibat alkohol. Selain itu, dituliskan juga bahwa daun
tersebut dapat digunakan untuk mengobati kencing
manis atau diabetes melitus (Hembing, 1996; Aliadi,
1996).
Kandungan kimia yang terdapat dalam Eugenia
polyantha adalah minyak atsiri (0,05%) yang mengan
dung sitral dan eugenol, tannin, dan flavonoid.
Sebagian masyarakat memanfaatkan daun salam
untuk mengobati kencing manis. Penelitian yang
 62
Media Kedokteran Hewan
telah dilakukan terhadap tanaman ini antara lain
adalah pengaruh pemberian infus daunnya terhadap
kadar glukosa darah kelinci. Dilaporkan bahwa infus
daun salam dengan dosis 175 mg/kg BB kelinci dapat
menurunkan kadar glukosa darah kelinci (Limawan,
1998). Dibandingkan dengan infus, maka kandungan
kimia yang ada dalam ekstrak etanol adalah lebih
banyak, maka dalam penelitian ini akan dilakukan uji
antidiabetes ekstrak etanol daun salam dengan induksi
aloksan untuk menaikkan kadar glukosa pada mencit.
Berdasarkan uraian tersebut di atas, maka
dirumuskan permasalahan sebagai berikut : Apakah
ekstrak etanol daun Eugenia polyantha dapat
menurunkan kadar glukosa darah mencit yang
diinduksi dengan aloksan ?
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui
aktivitas ekstrak daun Eugenia polyantha dalam
menurunkan kadar glukosa darah mencit yang
diinduksi dengan aloksan. Manfaat dari penelitian ini
adalah dapat digunakannya daun Eugenia polyantha
sebagai alternatif dalam pengobatan diabetes melitus.
Metode Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini
adalah daun tanaman Eugenia Polyantha Weight yang
diperoleh dari Materia Medika, Batu, Malang. Deter
minasi tanaman dilakukan di Balai Penelitian Kebun
Raya Purwodadi, Pasuruan. Daun tersebut
dikeringkan dengan cara diangin-anginkan, kemudian
dihaluskan dan diayak sampai diperoleh serbuk
kering. Serbuk kering daun salam sebanyak 2 kg
dimaserasi dengan etanol 96% selama 24 jam,
kemudian disaring, lalu residu dimaserasi lagi.
Pekerjaan tersebut diulang, sehingga secara
keseluruhan maserasi dilakukan selama 4 kali 24 jam.
Ekstrak cair yang diperoleh diuapkan dengan
penurunan tekanan memakai alat rotavapor sampai
diperoleh ekstrak kering dan ditimbang.
Dosis yang dipakai pada penelitian dihitung
berdasarkan pemakaian daun salam oleh manusia.
Manusia dewasa di Indonesia (berat badan 50 kg)
mengkonsumsi daun salam untuk pengobatan tra
disional sebanyak 7 gram. Pada tabel konversi dosis,
berat badan manusia adalah 70 kg dan konversi dosis
dari manusia ke mencit 20 gram adalah 0,0026 .
Sedangkan, kadar ekstrak kering dalam serbuk kering
daun salam adalah 10,27%.
Maka perhitungan dosisnya adalah sebagai
berikut: Manusia 50 kg mengkonsumsi serbuk kering
daun salam sebanyak 7 gram. Manusia 70 kg
mengkonsumsi serbuk kering daun salam 70/50 X
7 gram atau 10,27% X 70/50 X 7 gram = 1,006 gram
ekstrak. Dosis untuk mencit 20 gram = 0,0026 X 1,006
Herra Studiawan dan Mulja Hadi Santosa ; Uji Aktivitas Penurun Kadar Glukosa Darah Ekstrak Daun …
gram = 2,62 mg ekstrak
63
Vol. 21, No. 2, Mei 2005
Untuk sediaan uji kelompok I, ditimbang 500 mg
CMC Na kemudian ditaburkan pada akuades panas,
lalu diaduk sampai CMC Na mengembang, lalu
ditambahkan 262 mg ekstrak daun salam dan diaduk
sampai homogen. Setelah itu, ditambah dengan
aquades sampai volumenya 100 ml. Untuk sediaan uji
kelompok II, caranya sama seperti tersebut di atas,
tetapi ekstraknya sebanyak 52 4 mg. Sedangkan untuk
sediaan kelompok kontrol hanya suspensi CMC Na
0,5% tanpa ekstrak daun salam.
Hewan coba yang digunakan dalam penelitian
adalah mencit jantan galur Wistar, berumur 2 – 3
bulan, dengan berat badan 20 – 30 gram. Hewan coba
dibagi menjadi 3 kelompok masing-masing 15 ekor
sebagai berikut: 1) Kelompok kontrol: Hewan coba
diberi perlakuan dengan suspensi CMC Na ; 2)
Kelompok I: Hewan coba diberi perlakuan dengan
ekstrak daun salam setara dengan 1 kali dosis manusia
atau 2,62 mg/ 20 g BB mencit; 3) Kelompok II: Hewan
coba diberi perlakuan dengan ekstrak daun salam
setara dengan 2 kali dosis manusia atau 5,24 mg/ 20 g
BB mencit.
Pada uji ini, semua hewan coba dari ketiga
kelompok percobaan diberi aloksan 100 mg/kg berat
badan setiap 4 hari sekali untuk menaikkan kadar
glukosa darahnya. Pengukuran kadar glukosa darah
dilakukan pada hari ke-1 , 4 , 8 , dan 15. Sebelum
dilakukan pengukuran kadar glukosa darah, hewan
coba dipuasakan selama 16 jam. Selama dipuasakan,
sekam dikeluarkan dari kandang, agar tidak dimakan
oleh hewan coba. Pengukuran kadar glukosa
dilakukan dengan menggunakan alat Mini Accutrend.
Pengukuran kadar glukosa darah pada hari ke -4 dan
hari ke-8 dimaksudkan untuk mengetahui apakah
kadar glukosa darah sudah naik. Pengambilan darah
dilakukan pada pembuluh darah ekor hewan coba.
Pemberian sediaan uji pada hewan coba dilakukan
pada hari ke-9 sampai dengan hari ke-15.
Untuk analisis data, parameter yang digunakan
adalah penurunan kadar glukosa darah puasa dari
hari ke-8 sampai hari ke-15 dari kelompok I dan
kelompok II. Penurunan kadar glukosa darah puasa
dari kelompok kontrol, kelompok I dan kelompok II
dianalisis dengan uji ANAVA pada tingkat
kepercayaan 95%. Apabila hasil uji ANAVA
menunjukkan adanya perbedaan bermakna, maka
dilanjutkan dengan uji LSD untuk mengetahui
kelompok mana saja yang mempunyai perbedaan
bermakna (Sudjana, 1982).
Hasil dan Pembahasan
Dari 2 kg serbuk kering daun Eugenia polyantha,
setelah dilakukan maserasi menggunakan etanol 96%
selama 4 kali 24 jam diperoleh ekstrak cair.
Kemudian, setelah ekstrak cair ini dipekatkan dengan Tabel 2. Harga Rerata Penurunan Kadar Glukosa
rotavapor dihasilkan ekstrak kering sebanyak 205,46 Darah Puasa Hewan Coba dari Hari Ke-8
gram atau 10,27% dari daun keringnya. sampai dengan Hari Ke-15 Tiap Kelompok
Pada percobaan ini dilakukan pengukuran kadar Rerata penurunan
glukosa pada hari ke-1, 4, 8 dan 15. Penentuan hari Simpangan
Kelompok N kadar glukosa
dihitung sejak pemberian aloksan pertama kali. Jadi, baku
darah (mg%)
hari ke-1 adalah hari pertama pemberian aloksan. Kontrol 15 -14,8667 9,03854
Pada hari ke-4 , ternyata kadar glukosa darah puasa
Kel. I 15 26,6000 18,52334
hewan coba belum naik cukup banyak. Oleh karena itu
Kel. II 15 34,2000 17,68454
pada hari ke-4 semua hewan coba diinduksi aloksan
lagi. Pada hari ke-8 perlakuan, kadar glukosa darah Tabel 7. Ringkasan Anava Penurunan Kadar Glukosa
hewan coba sudah menunjuk kan kenaikan yang Darah Puasa Hewan Coba dari Hari Ke-8
berarti, oleh sebab itu pemberian bahan uji dilakukan sampai dengan Hari Ke-15
sejak hari ke-9 sampai dengan hari ke-15. Sumber Jumlah Derajad Kuadrat F Probabilitas
variasi kuadrat bebas rerata hitung
Harga rerata kadar glukosa darah puasa hewan
Antar
coba pada hari ke-1, 4, 8, dan 15 tiap kelompok dapat 20923,911 2 10461,956 42,554 0.000
kelompok
dilihat pada Tabel 1. Pada tabel tersebut tampak
bahwa rerata kadar glukosa darah puasa hewan coba Dalam
10325,733 42 245,851
kelompok
pada hari ke-4 untuk semua kelompok belum
menunjukkan kenaikan yang berarti, sedangkan pada Total 31429,644 44
hari ke-8 sudah menunjukkan adanya kenaikan yang
Tabel 8. Perbedaan Harga Rerata Penurunan Kadar
dapat digunakan untuk uji penurun kadar glukosa.
Glukosa Darah Puasa Hewan Coba antar
Tabel 1. Harga Rerata Kadar Glukosa Darah Puasa Kelompok dari Hasil Uji LSD
Hewan Coba Tiap Kelompok pada Bebera Kontrol Kelompok I Kelompok
pa Waktu Pengambilan II
Kontrol - -41,4667* -49,0667* -
Rerata kadar glukosa darah puasa hewan Kel. I - 7,6000
Kelompok coba (mg%) Kel. II
Hari ke-1 Hari ke-4 Hari ke-8 Hari ke-15 *Ada perbedaan bermakna penurunan kadar glukosa
Kontrol 146,87 154,80 199,13 212,67
Namun, dari hasil uji LSD tersebut menunjukkan
Kel. I 147,73 155,40 205,13 178,53 tidak adanya perbedaan bermakna penurunan kadar
glukosa darah puasa antara kelompok I dan kelompok
Kel. II 145,33 150,67 209,67 175,47
II, meskipun dari harga reratanya terlihat ada
Untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun salam perbedaan sedikit. Jadi, pemberian ekstrak daun salam
terhadap penurunan kadar glukosa darah puasa dengan dosis 2,62 mg/kg BB memberikan pengaruh
hewan coba, maka data yang akan disbandingkan yang tidak berbeda dengan dosis 5,24/kg BB terhadap
adalah penurunan kadar glukosa dari hari ke -8 penurunan kadar glukosa darah mencit jantan yang
sampai dengan hari ke-15 pada setiap kelompok. Uji diinduksi dengan aloksan.
Anava pada tingkat kepercayaan 95% member ikan Aloksan adalah suatu senyawa yang sering
harga probabilitas = 0,000, berarti ada perbedaan digunakan untuk penelitian diabetes menggunakan
bermakna penurunan kadar glukosa darah puasa hewan coba. Aloksan dapat menghasilkan radikal
hewan coba (Tabel 2). Untuk mengetahui kelompok hidroksil yang sangat reaktif dan dapat menyebabkan
mana yang mempunyai perbedaan bermakna, maka diabetes pada hewan coba. Efek diabetogenik aloksan
dilanjutkan dengan uji LSD. Ringkasan Anava dan uji ini dapat dicegah oleh senyawa penangkap radikal
LSD dapat dilihat pada Tabel 3 dan 4. hidroksil.
Hasil uji LSD menunjukkan bahwa antara Amygdalin adalah salah satu senyawa yang
kelompok I dan kontrol ada perbedaan bermakna dapat bertindak sebagai penangkap radikal hidroksil.
penurunan kadar glukosa darah puasa dari hari ke -8 Struktur kimia senyawa ini mempunyai sebuah cincin
sampai dengan hari ke-15. Demikian pula halnya
dengan kelompok II dan kontrol. Dari hasil ini dapat
disimpulkan bahwa pemberian ekstrak etanol daun 64
Eugenia polyantha dosis 2,62 mg/kg BB dan 5,24 mg/kg
Media Kedokteran Hewan Vol. 21, No. 2, Mei 2005
BB dapat menurunkan kadar glukosa darah puasa bezena dan gugus gula yang menyebabkan sangat
mencit jantan yang diinduksi dengan aloksan. reaktif terhadap radikal hidroksil dan dikatakan
sebagai penangkap radikal hidroksil (Dorfman dan
Adam, 1973).
Salah satu kandungan daun salam adalah
senyawa golongan flavonoid. Golongan senyawa ini,
terutama yang berada dalam bentuk glikosidanya
mempunyai gugus-gugus gula. Dalam penelitian ini,
diduga glikosida flavonoid yang terkandung dalam
daun salam tersebut bertindak sebagai penangkap
radikal hidroksil seperti halnya amygdalin, sehingga
dapat mencegah aksi diabetogenik dari aloksan.
Pada percobaan ini, dosis 5,24 mg/kg BB tidak
memberikan perbedaan penurunan kadar glukosa
yang bermakna dengan dosis 2,62 mg/kg BB. Hal ini
mungkin disebabkan oleh jumlah flavonoid yang ada
dalam dosis tersebut belum cukup untuk menghasil
kan penurunan kadar glukosa yang berbeda dengan
dosis 2,62 mg/kg BB.
Kesimpulan
Dari hasil penelitian dan analisis data yang telah
dilakukan, dapat ditarik kesimpulan bahwa ekstrak
etanol daun Eugenia polyantha dengan dosis 2,62
mg/20 g BB dan 5,24 mg/20 g BB dapat menurun kan
secara bermakna kadar glukosa darah mencit jantan
yang diinduksi dengan aloksan (p<0,05).
Karena sampai saat ini masih belum diketahui
kandungan daun salam yang berkhasiat menur unkan
kadar glukosa darah mencit, maka disarankan untuk
melakukan penelitian isolasi kandungan Eugenia
polyantha dan menguji khasiat hipoglikemianya.
Ucapan Terima Kasih
Pada kesempatan ini, kami ingin menyam paikan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ketua
Lembaga Penelitian Universitas Airlangga atas
kebijaksanaannya sehingga penelitian ini dapat
didanai.
Daftar Pustaka
Agoes A., 1991, Pengobatan Tradisional di Indonesia,
Medika No. 8, Thn 17, hal.632
Brachmacari, H.D., K.T. Augusti, 1962, Effect of Oral
Effectivity Hypoglycaemic Agent, Journal of
Pharm. Pharmacol., vol 14, hal. 167
65
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1980,
Materia Medika Indonesia, Jilid IV, hal. 109.
Dorfman, L.M. and Adams, G.E., 1973, National
Standard Reference Data System, NBS, vol 4, hal.
1-59
Heyne, K., 1987, Tumbuhan Berguna Indonesia, Jilid III,
Badan Penelitian dan Pengembangan
Kehutanan,
Departemen Kesehatan Republik Indonesia,
Jakarta, hal 1521, 1522.
Hembing, H.M., 1996, Tanaman Berkhasiat Obat di
Indonesia, Jilid IV, cetakan pertama, Penerbit
Pustaka Kartini, hal. Vii, 137 – 138.
Hidayati Tanti, 1995, Pengaruh Pemberian Fase Air dari
Ekstrak Metanol Umbi Dioscorea hispida Denst
terhadap Kadar Glukosa Darah Kelinci dengan Cara
Uji Toleransi Glukosa Oral, Skripsi, Fakultas
Farmasi Universitas Airlangga, Surabaya
Iwu, M.M., 1990, Hypoglycaemic Activity of
Dioscoretine in Normal and Alloxan Diabetic
Rabbits, Planta Medica, vol 56, hal. 265 - 267
Limawan, P.H., 1998, Pemberian Infus Daun Syzygium
Polyanthum (Weight) Walp Secara Oral Terhadap
Kadar Glukosa Darah Kelinci Dengan Cara Uji
Toleransi Gula, Skripsi, Fakultas FArmasi
Universitas Airlangga, Surabaya.
Mardisiswojo, S., Radjakmangunsudarso, H., 1968,
Cabe Puyang Warisan Nenek Moyang, Jil;id I,
Cetakan kedua, PT Karya wreda, hal 94,95.
Martin, DW., et al, Darmawan I (Terjemahan), 1987,
Biokimia, Edisi XX, CV ECE, Jakarta, hal. 295 -
298
Sudjana, 1982, Metode Statistika, Penerbit Tarsito,
Bandung.
Syamsuhidayat, S.S., Hutapea, J.R., 1991, Inventaris
Tanaman Obat Indonesia, Jilid I, Badan Penelitian
dan Pengembangan Kesehatan, Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, hal 54, 55.
Tjokroprawiro A., 1986, Diabetes Melitus Aspek Klinik
dan Epidemiologi, Airlangga University Press,
Surabaya
Tjokroprawiro A., 1980, Prevalensi Diabetes Melitus
Dewasa di Kodya Suarabaya, Lembaga Penelitian
Universitas Airlangga, Surabaya.