Research Report

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK BROTOWALI (Tinospora crispa)

TERHADAP SEL LIMFOSIT PADA PERIODONTAL TIKUS WISTAR
YANG DIINDUKSI A. actinomycetemcomitans
(THE EFFECT OF BROTOWALI (Tinospora crispa) EXTRACT ON NUMBER
OF LIMFOSIT CELLS IN THE PERIODONTAL WISTAR RATS INDUCED
BY BACTERIA A. actinomycetemcomitans)

Aji Bagus Prakoso,1 Ira Arundina,2 dan Sidarningsih2

1Mahasiswa Program Sarjana Kedokteran Gigi
2Staf Departemen Biologi Oral FKG UNAIR

Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Airlangga

Surabaya-Indonesia

ABSTRACT

Background: Periodontitis is a periodontal tissue inflammatory disease commonly caused by A.

actinomycetemcomitans bacteria. Brotowali plant (Tinospora crispa) has a flavonoid content that can accelerate
the healing periodontitis. Method: Brotowali extract is taken from dried brotowali plant stems. The dried
specimens were processed into powder and macerated with 80% ethanol. The extraction result was made of three
concentrations ie 25%, 50%, and 100%, then given the addition of 5% CMC. Wistar rats were divided into 4
groups, namely: control group = rat wistar periodontitis; treatment group 1 = mouse wistar periodontitis with
extract brotowali concentration 25% dose given 100 mg; treatment group 2 = mice wistar periodontitis with
extract brotowali concentration 50% dose 100 mg; ; treatment group 3 = rat wistar periodontitis with 100%
concentration of brotowali extract given 100 mg dose. All samples were made of histology preparations to
calculate the number of lymphocyte cells. Result: Comparative test result between group of treatment-Dunn Test
showed between control group to 50% concentration group and 100% concentration group had significant
difference while control group to 25% concentration group did not show any significant difference. Conclusion:
Brotowali extract 50% and 100% can reduce the number of lymphocyte cells in wistar rats induced by bacteria A.
actinomycetemcomitans.

Key words: Brotowali extract, A. actinomycetemcomitans, cell lymphocytes

ABSTRAK
Latar Belakang : Periodontitis merupakan penyakit keradangan jaringan periodontal yang biasa disebabkan oleh
bakteri A. actinomycetemcomitans. Tanaman brotowali (Tinospora crispa) memiliki kandungan flavonoid yang
dapat mempercepat penyembuhan periodontitis. Metode : Ekstrak brotowali diambil dari batang tanaman
brotowali yang dikeringkan. Spesimen kering diolah menjadi serbuk dan dimaserasi dengan etanol 80%. Hasil
ekstraksi dibuat tiga macam konsentrasi yaitu 25%, 50%, dan 100%, kemudian diberi penambahan CMC 5%.
Tikus wistar dibagi menjadi 4 kelompok, yaitu: kelompok kontrol= tikus wistar periodontitis; kelompok
perlakuan 1 = tikus wistar periodontitis dengan ekstrak brotowali konsentrasi 25% yang diberi dosis 100 mg;
kelompok perlakuan 2 = tikus wistar periodontitis dengan ekstrak brotowali konsentrasi 50% yang diberi dosis
100 mg; ; kelompok perlakuan 3 = tikus wistar periodontitis dengan ekstrak brotowali konsentrasi 100% yang
diberi dosis 100 mg. Semua sampel dibuat preparat histologi untuk menghitung jumlah sel limfosit. Hasil: Hasil
uji komparatif antar kelompok perlakuan-Dunn Test menunjukkan antara kelompok kontrol terhadap kelompok
konsentrasi 50% serta kelompok konsentrasi 100% memiliki perbedaan yang bermakna sedangkan kelompok
kontrol terhadap kolompok konsentrasi 25% tidak menunjukkan adanya perbedaan bermakna. Kesimpulan :
Pemberian ekstrak brotowali 50% dan 100% dapat menurunkan jumlah sel limfosit pada tikus wistar yang
diinduksi bakteri A. actinomycetemcomitans.

Kata kunci: Ekstrak brotowali, Actinobacillus actinomycetemcomitans, sel limfosit

Korespondensi (correspondence): Aji Bagus Prakoso, c/o: Departemen Biologi Oral, Fakultas Kedokteran Gigi
Universitas Airlangga. Jl. Mayjend. Prof. Dr. Moestopo 47 Surabaya 60132, Indonesia, E-mail:
ajibagusprakoso14@gmail.com
PENDAHULUAN
Periodontitis merupakan salah satu
penyakit dengan tingkat penyebaran yang luas
dalam masyarakat1. Di Indonesia, penyakit
periodontal menduduki urutan kedua setelah
karies, yaitu mencapai 96,58%. Berdasarkan
Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS) tahun
2007 masalah gigi dan mulut, termasuk
penyakit periodontal mencapai 23,5% dari
keseluruhan penyakit yang ada di Indonesia.
Penderita dengan periodontitis seringkali
memperlihatkan respon imun yang inadekuat
terhadap organisme patogen. Periodontitis juga
memperlihatkan insidens pola riwayat
keluarga. Penyakit ini disebabkan oleh adanya
induksi dari 90% bakteri anaerob fakultatif dan
75% bakteri gram negatif2.
A. actinomycetemcomitans bersifat
patogen opportunistik dan merupakan bagian
flora normal yang berkolonisasi di mukosa
rongga mulut, gigi dan orofaring. Sejumlah
faktor virulensi dari bakteri A.
actinomycetemcomitans diantaranya adalah
lipopolisakarida (endotoksin), leukotoksin
(sebagai yang paling penting), kolagenase,
bakteriosin, faktor penghambat kemotaksis,
faktor sitotoksik, protein pengikat Fc
(Fragment crystallizable), faktor penghambat
fibroblas, faktor imunosupresif serta faktor
penghambat adesif, invasi, dan fungsi dari
leukosit PMN. Bakteri A.
actinomycetemcomitans ini dapat invasi ke
epitel gingiva serta menghasilkan leukotoxin
yang berperan dalam menurunkan respon imun
dalam gingiva serta mendegradasi perlekatan
epitel pada jaringan periodontal sehingga dapat
menyebabkan periodontitis3.
Perawatan penyakit periodontal bisa
dilakukan dengan pemberian obatobatan yang
dapat diberikan secara sistemik, per oral atau
topikal. Adapula penanganan yang sering
dilakukan terhadap penderita periodontitis
selama ini ialah melalui 3 fase, antara lain: fase
terapi inisial, fase terapi korektif, dan fase
terapi pemeliharaan4.
Seiring dengan semakin berkembangnya
ilmu pengetahuan dan teknologi, semakin
banyak pilihan obat diantaranya dengan
menuggunakan bahan alam dalam berbagai
bentuk sediaan farmasi. Penelitian yang
dilakukan oleh Talubmook, membahas tentang
efek brotowali sebagai anti-hiperglikemi,
anti-bakteri, anti-inflamasi, dan anti-oksidan.
Batang tanaman brotowali mengandung
flavonoid yang dapat berfungsi sebagai
anti-inflamasi. Sebagai antiinflamasi, brotowali
dapat menghambat aksi dari mediator inflamasi
dan prostaglandin5.
Sel limfosit merupakan sel radang kronis
yang bersifat spesifik sebagai respon imun host
terhadap adanya suatu jejas saat terjadi
peradangan yang bersifat kronis. Dalam proses
penyembuhan periodontitis dibutuhkan
beberapa hal yang dapat mempercepat proses
penyembuhan. Salah satunya dengan
penurunan jumlah sel limfosit yang dapat
berpengaruh terhadap berkurangnya aktivitas
endotel yang berperan dalam proses
remodelling6.
Dalam hal ini meneliti dari kandungan
yang terdapat pada tanaman brotowali yang
dapat mempengaruhi jumlah sel limfosit.
Pemberian ekstrak brotowali pada tikus wistar
yang terkena gingivitis selama dua kali sehari
selama dua hari dengan konsentrasi 25%, 50%,
dan 100%7. Pada pemeriksaan traumatic ulser
tikus wistar yang terkena Diabetes Mellitus
menunjukkan bahwa jumlah sel limfosit
semakin meningkat pada hari ke lima dan mulai
mengalami penurunan pada hari ketujuh8.
Berdasarkan faktor diatas peneliti ingin
melakukan penelitian “pengaruh pemberian
ekstrak brotowali pada tikus wistar yang
diinduksi A. actinomycetemcomitans”.
BAHAN DAN METODE
Penelitian ini merupakan eksperimental
laboratoris dengan jumlah sampel 19 ekor tikus
Wistar jantan, dengan berat 150-200 gram, usia
2-3 bulan yang dilakukan adaptasi 1 minggu,
terdapat 4 kelompok yang terbagi menjadi
kelompok (K): Tikus wistar diinduksi bakteri
A. actinomycetemcomitans 1 X 109 CFU
2
sebanyak 200 μl 3 kali dengan interval 2 hari;
kelompok perlakuan 1 (P1): Tikus wistar
diinduksi bakteri A. actinomycetemcomitans 1 B
X 109 CFU sebanyak 200 μl 3 kali dengan
interval 2 hari, kemudian diberi ekstrak
brotowali (Tinospora crispa) konsentrasi 25%
sebanyak 0,1 ml 2x1 hari selama 2 hari;
kelompok perlakuan 2 (P2): Tikus wistar
diinduksi bakteri A. actinomycetemcomitans 1
X 109 CFU sebanyak 200 μl 3 kali dengan
interval 2 hari, kemudian diberi ekstrak
brotowali (Tinospora crispa) konsentrasi 50%
dosis 0,1 ml 2x1 hari selama 2 hari; kelompok C
perlakuan 3 (P3): Tikus wistar diinduksi bakteri
A. actinomycetemcomitans 1 X 109 CFU
sebanyak 200 μl 3 kali dengan interval 2 hari,
kemudian diberi ekstrak brotowali (Tinospora
crispa) konsentrasi 100% sebanyak 0,1 ml 2x1
hari selama 2 hari. Masing-masing kelompok
dilakukan pengamatan pada hari ke 17 dengan
cara dilakukan biopsi dan dibuat preparat
histologi. Pengamatan sel makrofag
menggunakan mikroskop cahaya dengan
perbesaran 400 kali 3 sehingga terlihat D
makrofag yang berdiameter antara 10 sampai
30 μm dan memiliki inti berbentuk lonjong atau
bentuk ginjal yang terletak eksentris.

HASIL
Gambaran mikroskopis sel limfosit dengan
perbesaran 400x pada preparat gingiva regio
molar kiri rahang atas tikus wistar yang
mengalami periodontitis dengan pengecatan
HE ditunjukkan pada gambar 1. Sel limfosit
ditunjukkan oleh tanda panah, memiliki bentuk
bulat.
A C. Kelompok perlakuan 2, D. Kelompok
Gambar 1. Gambaran Histologi sel limfosit
gingiva tikus wistar dengan pengecatan HE dan
perbesaran mikroskop 400x pada hari ke 7
setelah terbentuk periodontitis A.
Kelompok kontrol, B. Kelompok perlakuan 1 ,
perlakuan 3. Pada gambar 2 ditampilkan
gambaran jumlah sel limfosit hari ke 7. Pada
kelompok kontrol dapat dilihat jumlah sel
limfosit paling banyak dibanding kelompok
perlakuan 1,2, dan 3. Pada kelompok perlakuan
1 yaitu kelompok perlakuan ekstrak brotowali
dengan konsentrasi 25% menunjukkan jumlah
sel limfosit paling tinggi dibandingkan dengan
kelompok perlakuan lainnya. Sedangkan,
kelompok perlakuan 3 dengan konsentrasi
100% menunjukkan jumlah sel limfosit yang
paling rendah.

3

Gambar 2. Grafik rata-rata hasil penelitian
Berdasarkan grafik tersebut dapat dilihat
bahwa rata - rata jumlah sel limfosit kelompok
kontrol menunjukkan jumlah limfosit yang
paling banyak dibandingkan dengan jumlah sel
limfosit dari kelompok perlakuan. Jumlah sel
limfosit tikus wistar yang diinduksi A.
actinomycetemcomitans setelah diberi ekstrak
brotowali (Tinospora crispa) dengan
konsentrasi 25%, 50%, serta 100% mengalami
penurunan jumlah sel limfosit secara
berturut-turut.
PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui
pengaruh pemberian ekstrak brotowali
(Tinospora crispa) terhadap jumlah sel limfosit
pada tikus Wistar yang diinduksi A.
actinomycetemcomitans. Kelompok kontrol, di
induksi bakteri A. actinomycetemcomitans 200
μl selama 3kali dengan interval 2 hari.
Berdasarkan dari penelitian tentang ekstrak
brotowali, kelompok perlakuan diinduksi
bakteri A. actinomycetemcomitans 200 μl
selama 3kali dengan interval 2 hari, kemudian
diberi ekstrak brotowali (Tinospora crispa)
dengan konsentrasi ekstrak 25%, 50%,dan
100% sebanyak 2kali dalam satu hari selama
2hari9.
Hasil penelitian menunjukkan adanya efek
pemberian ekstrak brotowali terhadap jumlah
sel limfosit gingiva tikus wistar jantan yang
telah diinduksi bakteri A.
actinomycetemcomitans. Pada pemberian
brotowali 25% belum memberikan efek untuk
menurunkan jumlah sel limfosit. Berdasarkan
penelitian yang telah dilakukan bahwa
penurunan jumlah sel limfosit sebanding
dengan peningkatan konsentrasi pemberian
ekstrak brotowali. Semakin tinggi konsentrasi
ekstrak brotowali, maka semakin rendah
jumlah sel limfosit karena migrasi dari
mediator pro inflamatori dapat ditekan10.
4
Ekstrak brotowali mengandung flavonoid
yang diduga berkhasiat sebagai anti inflamasi.
Flavonoid merupakan salah satu senyawa
golongan fenol alam yang terbesar. Pada
umumnya flavonoid larut dalam pelarut polar
seperti, metanol, aseton, air dan etanol.
Senyawa flavonoid mampu menghentikan
peradangan11. Ekstrak brotowali diambil dari
batang tanaman brotowali yang memiliki
kandungan flavonoid. Flavonoid bekerja
menurunkan mediator inflamasi dengan
menghambat jalur NF-kB yang berakibat pada
turunnya produksi sitokin pro-inflamasi12.
Guyton & Hall mengatakan bahwa jumlah sel
limfosit pada kelompok perlakuan lebih sedikit
jika dibandingkan dengan kelompok kontrol.
Jumlah sel limfosit kelompok perlakuan hari
ke-7 mengalami penurunan jika dibandingkan
dengan kelompok perlakuan hari ke-3 dan ke-5.
Hari ke 7 jumlah limfosit semakin menurun
yang menandakan antigen sudah tidak ada lagi,
fase inflamasi sudah berakhir,dan luka mulai
memasuki fase proliferasi. Penurunan jumlah
sel limfosit menandakan bahwa penyembuhan
masuk ke tahap berikutnya, sehingga dapat
mempercepat proses penyembuhan13.
Uji perbandingan rata-rata jumlah sel
limfosit antar kelompok menunjukkan
kelompok perlakuan 1 dan kelompok perlakuan
2 tidak memiliki perbedaan yang bermakna.
Perbedaan yang tidak bermakna pada hasil
penelitian dapat disebabkan oleh faktor lokal
dan sistemik dari individu tikus wistar. Faktor
lokal yang dapat mempengaruhi hasil terapi
penyembuhan jaringan periodontal adalah
terkontaminasinya daerah luka oleh
mikroorganisme plak, adanya benda asing pada
daerah luka, dan terganggunya aliran darah ke
daerah luka. Agar aktivitas seluler meningkat
selama penyembuhan dibutuhkan darah yang
adekuat. Bila aliran darah terganggu atau
berkurang, akan terjadi daerah-daerah nekrosis
dan penyembuhan akan terhambat. Faktor
sistemik yang dapat mempengaruhi
penyembuhan jaringan periodontal adalah
penyakit infeksi, diabetes melitus, gangguan
nutrisi, stress, dan hormon14.
Data hasil penelitian telah menunjukkan
bahwa pemberian ekstrak brotowali yang
diambil dari batang tanaman brotowali dapat
digunakan sebagai anti inflamasi untuk terapi
penyembuhan periodontitis dengan
menurunkan jumlah limfosit.
 14. Klokkevold, P.R., Carranza, F.A., Newman, M.,
Takei, H.H. 2015. Clinical Periodontology. 11th.
DAFTAR PUSTAKA Missouri: Elsevier Saunders. 28(3):242.

1. Levine L, V Baev, R Lev, A Stabholz and M

Ashkenazi. 2006. Aggressive Periodontitis
Among Young Israeli Army Personnel. J
Periodontol 77:1392- 6
2. [RISKESDAS] Riset Kesehatan Dasar. 2007.
Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan
Kesehatan, Departemen Kesehatan, Republik
Indonesia.
3. Newman, M.G., Takei, H.H., Klokkevold, P.R.,
2012, Carranza’s Clinical Periodontology, 11th
ed, Saunders Elsevier, China. 26(4):138
4. Velnar T, Bailey T, Smrkolj V. 2009. The
Wound Healing Process: an Overview of the
Cellular and Molecular Mechanisms. The
Journal of International Medical
Research.37(5):1528
5. Newman, M.G., Takei, H.H., Klokkevold, P.R.,
2012, Carranza’s Clinical Periodontology, 11th
ed, Saunders Elsevier, China. 26(4):138
6. Velnar T, Bailey T, Smrkolj V. 2009. The
Wound Healing Process: an Overview of the
Cellular and Molecular Mechanisms. The
Journal of International Medical
Research.37(5):1528
7. Amom ZBH, Isemaail S, Ismail NA, Shah ZM,
Arsyad MS. 2009. Nutritional Composition,
Antioxidant Ability and Flavonoid Content of
Tinospora crispa stem. Adv. in Nat. Appl. Sci..
3(1):92-93.
8. Velnar T, Bailey T, Smrkolj V. 2009. The
Wound Healing Process: an Overview of the
Cellular and Molecular Mechanisms. The
Journal of International Medical
Research.37(5):1528
9. Eka F., Ratnawati H., Rochman M. 2015.
Ekstrak cymbopogon citratus dan eugenia
aromaticum efektif untuk penyembuhan
gingivitis. ODONTO Dental Journal. 2(2): 48
10. Bramanto D, Yuliana Mahdiyah DA., M.Nurul
Amin. 2014. Pengaruh Ekstrak Daun Pepaya
Terhadap Jumlah Sel Limfosit Pada Gingiva
Tikus Wistar Jantan Yang Mengalami
Periodontitis. 2(5): 40
11. Pramitaningastuti, A. S. 2017. Uji Efektivitas
Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Srikaya
(Annona Squamosa. L) Terhadap Edema Kaki
Tikus Putih Jantan Galur Wistar. Jurnal Ilmiah
Farmasi UII, 13(1).
12. Malik MM. 2015. The Potential Of Brotowali
Stem Extract (Tinospora Crispa) As
Analternative Antimalarial Drug. J Majority.
4(5): 46.
13. Guyton, AC. dan Hall, JE., 2007. Buku Ajar
Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGG.p.89.