PHAN IV CHU KY TE BAO VA 8U SINH SAN CUA TE BAO Chuong VIII CHU KY TE BAO |- CAC THO! KY CUA CHU KY TE BAO 1.1. Khai niém vé chu ky té bao Mét trong nhiing dac tinh co ban cua co thé séng 1a dac tinh sinh san, tic 1A kha nang tu sinh ra co thé giéng minh. Dac tinh sinh san, cha co thé cé co sé 6 suf phan bao. Ti nim 1855, R. Virchow da khang dinh “ciing giéng nhu dong vat duge sinh ra chi tiv dong vat, thuc vat chi sinh ra thuc vat, té bao chi duige sinh ra tit té bao c6 trudc” (Omnis cellula e cellula), Nam 1882, W. Flemming phat hién ra hién tudng phan bao cé td (mitosis) sau khi té bao da trai qua mét thdi gian sinh trudng. Vé sau cdc nha té bao hoc phat hién ra phan bao duge xen ké véi théi gian sinh trudng theo tiing chu ky. Chu ky té bao (cell cycle) 14 thai gian dién ra ké ti thdi diém té bao duge hinh thanh nhé phan bao ctia té bao me va két thtc bdi su phan bao dé hinh thanh té bao méi. Nhu vay thdi ky phan bao dude xen ké béi thai ky gitta cdc ldn phan bao dude goi IA gian ky. 1.2. Cac thi ky cia chu ky té bao (hinh 8.1) NeuGi ta chia chu ky té bao ra hai thdi ky chinh: - Théi ky gitfa hai lan phn chia duge goi 1A gian ky (hay ky trung gian - interphase) duge ky hiéu 1a I, 1a thdi gian t@ bao trao déi ch&t, sinh truéng va chudin bj cho phan bao. - Thdi gian tiép theo 1a ky phan bao (mitosis) dugc ky hiéu 1a M, 1a théi ky té bao me phan déi cho ra hai t€ bao con. 213Trong co thé da bio, cic © @ té bao sinh dudng (té bao soma) duge biét hod khaéc nhau dé thye hién chite nang khae nhau, cho nén thdi gian kéo dai cia chu ky séng cha ching cé nhiéu thay déi Ky trung glan khéng giéng nhau, dac biét 14 @ gian ky. Vi du, t& bao ruét phan bao hai ldn qua mét Hinh 8.1. Chu ky t€ bao ngay, té bao gan phan bao hai ldn qua mét nam, cdn té bao ndron 6 co thé trudng thanh hdu nhu khéng phan bao ma gian ky kéo dai cho dén khi té bao chét hodc co thé chét. Trung binh chu ky s6ng cita da sé té bao kéo dai ti 8 gid dén 100 ngay, trong dé thdi gian cua gian ky 1 thay déi con théi gian cha phan bao 1a én dinh, chi chiém khoang 1 gid. a) Gian ky Trong gian ky té bao thyc hién cdc chitc nang trao déi ch&t, cdc hoat dong séng khdc nhau, téng hdp ARN, ADN, cac protein, cdc enzim v.v... va chuan bi cho phan bao. Tuy theo dac diém chtic nang, ngwéi ta chia gian ky ra 3 giai doan hay 1a pha lién tiép nhau: giai doan G1 (gap 1), giai doan S (synthesis) va giai doan G2 (gap 2) (hinh 8.1) Thdi gian kéo di cha gian k) tuy thuéc vao thdi gian cla 3 pha G1+S+ G2, dac biét tuy thudc vao G1 vi d cae loki té bao Khac nhau thi thdi gian G1 1a r&t khac nhau, con giai doan S va G2 tuong déi 6n dinh. — Pha G1: Pha G1 dude tiép ngay sau phan bao khi té bao con duge hinh thanh. + Thdi gian cia G1: Thdi gian cha Gi kéo dai ti ngay sau khi té bdo dude tao thanh do phan bao, cho dén khi bat dau pha S 1a pha tong hgp ADN. Théi gian cia Gi tuy thudc vao chtic nang sinh ly ctia té bao, vi du, déi vi té bao phéi thi thdi gian cha G1 = 30 phut - 1gid, déi vdi té bao gan dong vat cd va G1 = 1 nam, cdn déi véi té bao noron G1 c6 thé kéo dai sudt dai sdng cd thé. Déi véi té bao ung thu, thdi gian cha G1 bj rat ng4n rat nhiéu. Ngwdi ta con phan biét pha GO 1a pha trong dé té bao di vo trang thai biét hod lau dai, hoac vinh vién, hoac thoi hoa, 214Khi két thiic G1, té bao cé di vao pha S va G2 dé vao ky phan bao hay khong 1a tuy thudc vao cae diéu kién méi trudng. Vao cuédi pha G1, cé mét théi diém duge goi 1a diém chét (check point), diém R. Néu té bao vugt qua diém R ching tiép tuc di vao pha S. Nhan to diéu chinh dé vugt qua théi diém R vao S 1a phitc hé protein duge goi 18 Cdk - cyclin gém cé cyclin D, cyclin E va enzim kinaza phy thudc cyclin (hinh 8.2), trong d6 cyclin déng vai tré diéu chink, nghia 1a chi khi cyclin lién két v6i kinaza thi enzim kinaza mdi thé hién hoat tinh phat d6ng céc phan ting cua chu ky té bao. Pha G1 1a pha sinh truéng cita té bao vi trong pha nay xay ra suf téng hgp céc ARN va protein. Déi véi cac té bao biét hod thi té bao khéng vugt qua R ma di vao qua trinh biét hoa té bao dé tao nén cdc ding té bao sinh dudng (té bao soma) kh4c nhau, cé chtic nang khéc nhau. + Téng hgp ch&t trong pha G1: Trong pha G1, sé lugng nhiém sac thé chtta ham lugng ADN 1a én dinh (vi dy 6 ngudi 1 2n = 46 nhiém sc thé chita ham lugng ADN la 6 x 10° cAp nucleotit). Méi mot nhiém sAc thé chia mét phan tit ADN lién két véi histon va 4 pha G1 cdc sdi nhiém sac cla nhiém séc thé 4 trang thai hoat dong, nghia 1a tong hgp c&c ARN (phién ma) va téng hap protein (dich m4). Ciing vi vay ngudi ta xem pha G1 1a pha sinh trudng cia té bao va thuc hién hoat déng sinh ly khac nhau. Khi phién mi, thi cac gen chita trong ving ch&t nhiém s&c thuc (euchromatine) (c6 chtta cc codon gém bé ba deoxiribonucleotit) sé, duge phién ma dé téng hdp nén ph4n tit mARN (mang céc codon gém bé ba ribonucleotit) va nhu vay m4 cia mét protein nao dé (trinh tu ede codon) trong ADN da duge “phién” sang mARN. Phan tit mARN sé di ra té bao chat dén riboxom, 6 day cic tARN mang céc axit amin l4p rap thanh chudi polipeptit (protein) cé trinh ty axit amin dting theo trinh ty cdc codon cua mARN. Protein dugc hinh thanh va sé dude té bao chuyén ché dén ndi té bao cdn hoac ché tiét ra ngoai. Cac té bao phéi sém thudng cé chu ky ngdn, chi khoang.30 phit dén 1 gid bdi vi d chting khong cé pha G1. Cac nhan té cia G1 can thiét cho su tai ban ADN 6 pha S da dude chudn bj truée va c6 sin trong té bao chat cla té bao tring. Trong qué trinh phat trién phéi thai, 6 pha G1, cdc gen trong hé gen hoat héa khac nhau va sé téng hgp nén cac protein dac tha, va ty d6 tao nén cdc dong té bao soma biét héa trong céc mé va cd ‘quan 215khac nhau cia cd thé. Trong co thé trudng thanh, trong cdc m6 van tén tai cdc té bao géc (stem cells) 14 nhiing té bao van gift kha nang sinh trudng, phan bao va san sinh ra cdc té bao biét héa cha mé. Vi du, trong ty xudng co ding té bao géc mau cé tiém nang phan bao va cho ra cac té bao mau nhu héng cau, bach cu cac loai. ~ Pha S: Pha S 1a pha tiép theo pha G1 néu té bao vugt qua duge diém han dinh R. Trong pha G1, té@ bao da chudn bi diéu kién cho pha S: vao cudi pha G1 té bao téng hgp mét loai protein dc trung 1a cyclin A va duge tich luy trong nhan té bao. Protein cyclin A cing véi kinaza sé xc tién sy tai ban ADN (hinh 8.1) Duge goi 1a pha $ vi trong pha nay cha yéu xay ra su tong hdp ADN (tai ban ADN) va nhan déi nhiém sc thé. Protein cyclin A (nhan té hoat hoa téng hdp ADN) t4c déng cho t6i cuéi pha S thi bién mat. Thdi gian kéo dai cua pha S tuong déi cé dinh (vi du, di véi dong vat c6 vi kéo dai tix 6 dén 8 gid). Su téng hop ADN méi cé c&u tric VA dc tinh giéng véi ADN ci nén duc goi la su tai ban ADN. Sau pha S, ham lugng ADN va sé lugng nhiém sic thé di dude nhan déi, vi du, déi véi té bdo ngudi sé c6 46 x 2 nhiém sac thé chtta ham lugng ADN 1a 12 x 10° cap nuclectit. — Pha G2: Tiép theo pha S 1a pha G2, thi gian cia G2 ngan tix 4-5 gid (déi véi dong vat cé va). Trong pha G2, cac ARN va protein duge téng hop chuan bj cho phan bao. Cuéi pha G2, mot protein duge téng hop 1a cyclin B va duc tich luy trong nhan cho dén tién ky phan bao. Cyclin B hoat hoa enzim kinaza va déng vai tré quan trong trong viée thuc hién qua trinh phan bao nhu sy tao thanh cdc vi éng tubulin dé tao thanh thoi phan bao. Chat colchisin c6 tac dung tic ché su tao cae vi ong gay ttc ché phan bao. Ngudi ta thudng st dung cdc chat vinblastin va vincristin chiét xu&t tit cAy diva can lam thudc chéng ung thu vi chting ciing cé tac ding tic ché svi tao thanh vi 6ng 4 G2, do 6 khéng tao thanh thoi phan bao 6 M, d4n dén tc ché su phan bao ctia cAc té bao ung thu (hinh 8.2). 6) Phén bao Tiép theo pha G2 1a pha M, la thai ky té bao me phan chia thanh 216 42 t& bao con. Su phan bao 1A phuong thie sinh san cia té bao, déng thdi 1a phudng thie qua do té bao me truyén théng tin di truyén chita trong ADN (da duge nhan déi qua pha S) cho hai t@ bao con, Su phan bao cing vdi sy téng hgp eac ch&t ndi bao va gian bao 1a cd sd cla su tang trudng cla cdc mé, cdc co quan va cd thé da bao. I- SU DIEU CHINH CHU KY TE BAO Chu ky té bao gém nhiéu giai doan dién ra ké tiép nhau theo mét lich trinh thdi gian x4c dinh 6 cdc loai té bao khac nhau cing nhu cac cd thé khac nhau 14 nhd cé sy diéu chinh hoat d6ng cia toan bé chu ky. Nghién cttu co ché diéu chinh chu ky té bao khéng chi cé tdm quan trong trong nghién cttu sinh hoc sinh san ma cdn cé tim quan trong trong nghién citu bénh hoc, dac biét 14 bénh hoc ung thu. Sy diéu chinh chu kj té bao vé nguyén ly chung dién ra theo nhiing cd ché gidng nhau 4 cd thé don bao cing nhu co thé da bao. Nhiing nam gan day, ngudi ta da phat hién duge cd sd phan tt cua cd ché diéu chinh chu ky té bao. 2.1. Mét hé théng trung tam phat déng cdc qua trinh cn thiét cla chu ky Dé hiéu dude cd ché diéu chinh cia chu ky té bao, ta hay xem xét té bao nhu 1A mét chiée may gidt quan 40. Chite nang gi&t quan 4o cua may gém nhiéu cong doan néi tiép nhau: lay rude clung bét giat, vo quan 4o, xa nuée ban, vat khé. Méi cng doan dién ra trong mét thdi gian nh&t dinh va néi tiép nhau. Ciing gidng nhu vay, chu ky té bao cing gdm nhiéu giai doan néi tiép nhau nhu: sinh truéng, nhén di ADN, phan bao. Méi giai doan dién ra trong mét thdi gian nhat dink va néi tiép nhau. Giai doan truéc phai duge hoan thanh méi 6 thé tiép theo giai doan sau va diéu kién cia giai doan sau cing di dude chuan bi trong giai doan truéc. Trong ca hai trudng hep: chu ky té bao vA may gidt déu cé nhan té diéu chinh trung tam khién cho cac qua trinh xy ra lién tiép nhau theo trinh ty, theo thdi gian, trong dé nhan té diéu chinh hoat déng nhu mét chiée dong hé quy dinh nén thdi gian hoat déng mdi qua trinh (giai doan) thong qua caéc diém chét (check points). Diém chét thé hién co ché diéu chinh theo méi lién hé nguge, nghia 14 sy hoan thanh qua trinh truéc 1A diéu kién phat dng cho qué trinh sau. Tuy nhién, co ché diéu chinh ctia chu ky 217té bao phiic tap hon nhiéu bdi vi cdc nh4n té diéu chinh nhu ching ta da biét 14 cdc phic hgp sinh héa phtic tap hoat dong trong méi tuong quan véi nhau, va véi méi trudng ndi bao va ngoai bao. Hé théng diéu chinh chu ky té bao gdm cac phic hé sinh héa tac dong theo chu ky va a6 1A cde phic hé protein hoat dong tudng tac theo kiéu kich thich va ttc ché, phéi hop vdi cdc qua trinh tién than cn thiét cho su nhan déi ADN va phan ly caa ADN. Trong chu ky, hé thong diéu chinh dén lugt minh lai duge kiém tra béi cdc “phanh” c6 tac dong phanh ham chu ky é cdc diém chét dic biét. Nhu vay khi cdc qué trinh tién than da hoan thanh 1a diéu kién can cho su khdi dong qua trinh tiép theo cia chu ky, nhung cing c6 thé bi ach lai 6 cdc diém chét. Hé théng “phanh” rat quan trong, bdi vi né cho phép kiém tra hé théng diéu chinh cia chu ky bdi cae tin higu dén ti méi trudng. C&e tin hiéu cha mdi trudng tac dong lén hé théng diéu chinh béi hai diém chét chi yéu: mét 4 giai doan G1 ngay truéc khi vao giai doan S, va mét diém chét 3 G2 la dim ma 4 dé hé théng didu chinh thuc hién qué trinh c6 tac déng khdi déng su phan bao 6 M. Déi véi cac té bao khéng di vao phan bao thi chu ky bi phanh ngay 6 diém chét 6G1. DGi véi té bao n&m men, diém chét 6 G1 thudng duge goi 1a diém xudt phat-diém S (start point), cén déi vdi té bao dong vat diém chét nay dude goi la diém han dinh-diém R (restriction point). 2.2. Hé thdng diéu chinh chu ky - phifc hé cdc protein-kinaza Nhiéu nghién ettu trén cdc déi tugng kh4c nhau nhu n&m men, té bao phéi sém, té bao déng vat c6 vu trong nudi c&y.invitro déu ching minh ring, hé thong diéu chinh chu ky té bao 14 gém hai ho protein chi yéu. Ho thi nhat 1A cdc kinaza phu thuée cyclin-Cdk (cyclin dependant kinase) c6 tac dung phat dong cdc qua trinh tién than bang cach gay photphorin héa nhiéu protein dc trung tai géc serin va threonin. Ho protein thit hai 14 cdc protein dc biét duge goi la cyclin (duge goi nhu thé vi chting xudt hién theo chu ky té bao-cell cycle), cdc cyclin déng vai trd kiém tra hoat tinh photphorin héa cha Cdk d6i véi céc protein dich. Khi cyclin lién két véi Cdk thanh mét phic hé thi Cdk & trang thai hoat tinh va khi cyclin tach khéi Cdk thi Cdk khéng cé hoat 218tinh. Nhu vay, bang cd ché tong hgp va phan gidi protein cyclin cing véi cd ché tao phitc hé va giai thé phtic hé cyclin - Cdk té bao diéu chinh chu ky séng cha minh. C6 thé cé nhiéu loai cyclin khéc nhau nhung ngudi ta xép chting vao hai loai chi yéu 1A cac cyclin mitosis 1a cdc cyclin lién két véi Cdk trong giai doan G2 va can thiét dé té bao di vao mitosis, va loai cyclin G1 14 cdc cyclin lién két véi Cdk trong giai doan G1 va can thiét cho té va di vao giai doan S. Neguwdi ta cho rang, d6i véi nim men chi cé mét loai Cdk hoat dong 4 ca 2 diém chét G1 va G2, cdn déi vi déng vat c6 vii cé thé cb nhiéu loai Cdk khac nhau, mai logi tac dong cho mét diém chét. Su hoat hod va khéng hoat hoa cia Cdk trong mdi giai doan cla chu ky thé hién sy chuyén giai doan cia chu ky va cing 1a thé hién hiéu qua cia hé diéu chinh lén chu ky bang cach phat déng cdc phan ting d4n tdi sy chuyén sang giai doan ké tiép sau dé cha chu ky. Su hinh thanh phiic hé cyclin-Cdk 6 G1 cho phép té bao chuyén ti G1 sang S va su hinh thanh phiic hé cyclin-Cdk 6 G2 cho phép té bao chuyén tiy G2 sang giai doan M. Dé higu rd hon co ché diéu chinh trén day ngudi ta da phan tich va ly gidi bang cdc nghién citu trén nhiéu d6i tugng khac nhau. 2.3. Chu ky cia té bao phéi sém va vai tré cia MPF Déi véi cdc té bao c6é chu ky chugn thi té bao phai trai qua G1 1a giai doan sinh truéng dd dai méi chuyén sang giai doan S$ dé nhan déi ham lugng ADN, va chi sau khi qué trinh nhan déi ADN hoan thanh thi té bao mdi buéc vao giai doan G2 va M dé phan bao. Nhu vay chu ky chudn phai kéo dai trong m6t thdi gian da dai dé hoan thanh cae giai doan cn thiét trudc khi phan bao va hé théng diéu chinh cda chu ky hoat déng thich ting véi thai gian 46. Cac té bao cia phéi 6 giai doan phat trién sém cha nhiéu dong vat c6 chu ky bat thudng: chiing phan bao rat nhanh va bé qua giai doan sinh truéng G1 va nhu vay ddi hoi su hoat dong cua hé diéu chinh phai thich tng véi trang thai dé, nghia 1A cho phép té bao trong thdi gian ngén nh&t phai hoan thanh duge céc qué trinh téi uu cdn thiét 1A nhAn doi hé gen vA phan ly hé gen vé 2 t@ bao con. Cac nha nghién cttu da sit dung phéi sém cia éch Chau Phi (Xenopus) dé xem xét hé théng diéu chinh nhu vay. - TE bao tring cha éch 1a mét té bao rat lén, dat dudng, kinh 219khoang 1mm, chia mét nhan bé, nhung chita té bao chat vdi khdi lugng 100.000 lan nhiéu hon té bao binh thudng, bdi vi trong té bao chat ctia tritng chita nhiéu chat dinh dudng can thiét di cho su phat trién cia tring dén giai doan néng noc. No&n bio (ovocyte - tién than cla té bao tring) sau khi d& qua meiosis I trong dé s6 lugng nhiém sac thé da gidm thanh ddn béi (n) va nhu chiing ta da biét dac trung cho meiosis 14 cé mt lan nhan déi ADN nhung trai qua 2 lén meiosis (I va IJ). Su sinh truéng cua noan bao dé tich lay cdc ch&t dinh du@ng trai qua thi gian rat dai, vi vay tién trinh meiosis bi 4ch lai 6 pha G2 caa chu ky chuan. Dé noan bao c6 thé vugt qua diém chét, hoan thanh chu ky va trd thanh tring chin, ddi héi phai cé hoocmon tac déng dén noan bao. Khi tring duge thu tinh, tring nhanh chéng phan bao nguyén nhiém kién tuc cho ra mét phéi cé hang nghin té bao bé ma khong can tang trudng, va diéu kién cdn déc nhét 1a téng hgp va nhan déi ADN qua mét chu ky. Chu ky phan bao dau tién kéo dai khoang 90 phut, nhung 11 chu ky phan bao tiép theo vdi khoang cach chi 30 phut va trong khoang 7 gid da hinh thanh phéi vdi 2” (4096) té bao con. Méi chu ky bao gém giai doan M: 15 phut va gian ky kéo dai 15 phit da dé nhan d6i ADN, nhu vay coi nhu khéng 6 G1 va G2. Nhan té diéu chinh cé trong té bao chat kiém tra cita di vao M: Van dé dat ra 1a tai sao cdc té bao phéi sém lai vudgt qua dude cc diém chét Gi va G2 dé di vao M nhanh nhu vay? Hai thi nghiém cha yéu cho phép ngu@i ta gia thiét 14 cé nhan té tén tai trong té bao chat ca tat ca cdc té bao dang 6 trang thai phan chia va nhan to dé da phat dng cho té bao di vao M. Thi nghiém thit nhét st dung céc nofn bao cia &ch dang bi ach lai 6 G2 cha meiosis I ttte 1A khéng di duge vao M. Newdi ta tiém té bao chat cia tritng éch da chin nhung chua thu tinh vao trong nodn bao dang 6 giai doan G2 cha meiosis J bi ach lai 6 G2, thi noan bao nay sé chuyén vao M dé tiép tuc hoan thanh phan bao va trd thanh t& bao triing chin. Nh4n té cé hoat tinh dé c6 trong té bao chat duge dat tén la nhdn i6 phat déng tritng chin - MPF (Maturation Promoting Factor) cing 1A nhan t6 phat déng mitosis hodc meiosis (Mitosis Promoting Factor - MPF), bdi vi, nhiéu thi nghiém da chting minh: chinh MPF cing 1a nhan té phat déng dé t& bao vugt qua diém chét G2 dé tién vao M (hinh 8.2). 220Tiém té bao chat cua tring chin Noan bao 6 G2 Noan bao di vao M Hinh 8.2. Thi nghiém tiém 16 bao ch&t cia tring &ch d& chin cb chita MPF vao noan bao éch 6 giai doan G2 cia meiosis 1 Thi nghiém thi hai duge tién hanh véi cdc té bao dong vat cé va in vitro. Vi té bao déng vat cd va r&t bé (tt 10-30um), khé sti dung phugng php tiém, cho nén théng thudng ngudi ta nuéi cy in vitro chung nhau cac té bao 6 cae giai doan khac nhau cua chu ky, tao diéu kién cho ching héa hgp An nhau (bing phugng phap lai té bao soma). Vi du, dem cc té bao dang 6 giai doan M (giai doan phan bao) nuéi chung véi té bao 4 giai doan G1, hoc giai doan S, hoac giai doan G2 thi cc té bao nay (du 6 giai doan nao cia G) cing sé di vao giai doan M, thé hién 6 ché nh4n cia chting c6 xu thé c6 dac, xodn ngdn lai gidng nhu nhiém sac thé cia cc té bao dang d giai doan phan bao. Nhu vay, nhan té MPF khéng chi cé tac dung phat dong dé vugt qua diém chét G2 va cé thé cing 14 nhan t6 phat déng vugt qua diém chét 4 G1 cho phép té bao di vao S. ' Nhiéu thi nghiém da ching minh ring, d6i vdi té bao phéi &ch sém, hoat tinh cia MPF duge tang cao 6 giai doan phan bao va giam bét 6 giai doan gian ky theo chu ky dinh cao 30 phut, nhu vay hoat tinh phan bao 1a tay thuéc vao hoat tinh caa MPF. Nhiéu thi nghiém loai bé nhan cing chitng minh rang, hoat tinh cha MPF 1a dén tix té bao chat va khéng phu thuéc vao su c6 hay khéng cua qua trinh nhan ddi ADN trong nhan. Nhung khi qua trinh téng hgp protein 6 G1 bi ttc ché thi hoat tinh cla MPF va ca tién trinh phan bao cing bi tte ché, nhu vay hoat tinh caa MPF 1a cé lién quan mat thiét dén su tong hgp protein dac trung trong gian ky. Dé ching minh, ngudi ta thi nghiém véi phéi sém cua cdu gai cé chu ky té bao giéng phéi sém cha &ch. Si dung phudng phap danh dau bing phéng xa (S* methionin) dé theo ddi sy téng hgp protein qua céc chu ky té bao, ngudi ta chitng minh rang, mét loai protein dac biét duge tich lay theo tién trinh cia 221chu ky: trong giai doan gian ky ching duge tich lay nhiéu cho tdi giai doan phan bao 4 buéc chuyén trung ky - hau ky va sau dé giam di dt ng6t, va vi vay ngudi ta dat tén cho loai protein nay 1a cyclin. Nhu vay tén tai mOt sd cyclin, khi ham lugng cia chting dat téi ngudng nao dé sé tac déng hoat hod MPF va khi chting bi phan hay sé lam bat hoat MPF va ttc ché phan bao. Tuy nhién, hoat tinh cla MPF khong chi phy thuéc vao cyclin ma cén phu thuéc vao sy tac dong cha mét sé protein kh4c nifa, va cyclin chi dugc xem 14 mét phan cia phitc hé, déng vai tré diéu chinh hoat tinh cua protein kinaza (Cdk) trong phitc hé MPF. Cé nhiéu loai (c6 thé cé 5 foai) cyclin tac déng qua chu ky té bao khi lién két véi Cdk. Nhu chting ta da néu 6 trén, phic hé MPF gém 2 cau thanh 1a cyclin déng vai tré diéu chinh, c&u thanh kia 14 Cdk (protein kinase) dng vai trd 14 enzim kinaza 1a phdn mang hoat tinh. Cdk sé thé hién hoat tinh photphorin héa cac protein khac can thiét cho chu ky té bao bao gém céc protein - enzim cé vai tré tai ban mA, cac protein lam-cé dac nhiém sac thé, lam phan hiy mang nhén (tac dong dén tém lamina), tao thoi phan bao... Mét qua trinh quan trong nhat déi hdi phai cé du thdi gian xay ra truéc khi mitosis 14 sy tai ban ADN phai duge hoan thanh, nhu vay phai cé cd ché kiém tra ngude dén tiv ADN dang duge tai ban nham ngan hé théng kiém tra tich cue lam cho té bao tién vao M, va nhu vay ngan chan khéng cho té bao roi vao tinh trang nguy hiém “phan bao tu diét” (vi khong da lugng ADN dé phan cho 2 té bao con). Thé ma 6 phéi éch sém, trong cdc chu ky té bao ddu tién dién ra trong khoang 30 phut dau hau nhu bé qua G1 va G2, nhu vay khéng cé tin hiéu kiém tra ngugc. Ngudi ta cho rang é day, cdc diéu kién cho su tai ban ADN da c6 d4y da tit méi trudng dinh dudng trong té bao tring, di dé thyc hién 12 chu ky phan bao ma khéng cdn chu&n bi trudc, va sau thii gian dé, cd ché kiém tra nguge sé hoat déng giéng nhu 4 chu ky té bao chudn. Ngoai ra, cdn tén tai co ché kiém tra tac dong tic ché tai ban ADN xay ra nhiéu ldn néu nhu ADN d6 da duge tai ban qua mét chu ky truéc khi vao M. 2.4. Diéu chinh chu ky té bao déng vat cé va @) Diéu chinh chu ky dién phite tap va da dang Déi vdi dong vat cé vii cing nhu cdc cd thé da bao phic tap khac 222duge dic trung béi su phat trién c4 thé (ontogenesis) 14 qua trinh da giai doan dian ra theo thdi gian, theo d6 tu hgp tt thong qua su tang sinh té bao va biét hoa té bao sé hinh thanh cac mG, cdc ed quan va co thé toan ven dac trung cho loai vé kiéu hinh va kiéu gen. Su sinh san va biét héa té bao dude kiém soat bdi mét mang ludi tin hiéu dén tir cdc té bao cha mé, cia céc cd quan trong co thé, tit méi truéng va phéi hop véi cac tin hiéu ndi bao dé diéu chinh su tang truéng va phat trién theo dting chugng trinh phat trién kiéu gen. Nhu vay chu ky t& bao va cd ché diéu chinh chu ky 1a khéng nhu nhau déi vdi cdc té bao biét hoa khac nhau cua co thé. Cae té bao phéi sém sinh san rat nhanh, chu ky té bao ngdn, trong lic dé cdc té bao biét héa eda eo thé trudng thanh rat khéc nhau vé théi gian kéo dai cla chu ky, cua tiing giai doan cha chu ky. Déi véi t& bao géc trong mé luén duge déi mdi nhu biéu mé rudt, da, m6 tuy xudng dd, chiing luén phan bao dé thay thé cc té bao bi mat di. Déi véi té bao cha cdc m6 da truéng thanh thi chung thudng ding lai d giai doan G1 dé biét hoa thanh cae té bao dc trung cho mé, nhu m6 gan, mé than, mé co, mé than kinh va ngudi ta bao chting 6 giai doan GO. Trong diéu kién nao dé, cdc té bao d& biét hoa cha cc m6 (vi du t& bao gan, t& bao limpho, nguyén sdi bao...) cé thé tr vé G1, hoan thanh chu ky va di vao sinh san va sau dé lai di vao biét hoa khi 6 giai doan G1. Vi du, té bao gan é phan gan bi cat sé tré vé GL va sé phan bao cho ra céc té bao gan mdi dé tai sinh lai phdn gan bi c&t. Hoac nhu té bao limpho khi cé kich thich cua kh4ng nguyén sé tré vé G1 va sé phan bao, sau dé biét hod cho ra cac té bao cé thm quyén mién dich (té bao limpho B, té bao limpho T). C6 loai té bao nhu té bao noron sau khi duge biét hod chuyén vao GO thi chting é trang thai dé dé thuc hién chitc nang dn truyén than kinh suét adi. Cé loai t& bao nhu héng cu 4 dong vat c6 vu, sau khi duge biét h6a mat nhan chita Hb thi ching chi hoat déng mét théi gian va sé bj chét di. Cae nha nghién cttu rét kh6 quan sat cy thé sy sinh trudng va sinh san cia té bao déng vat invivo (trong cd thé). Da sé céc nghién ctu vé su diéu chinh su sinh san cia té bao dong vat c6 vi va ngudi due tién hanh véi cdc té bao nudi c&y in vitro. Nhu vay co mot sé khé khan nhat dinh, cdc té bao duge tach ra ttt cac mé dem nuéi cy in 223vitro, do trong diéu kién thuan Igi ching chi phan bao trong mot sé lén nh&t dinh (vf dy té bao ngudi 14 khoang 50 chu ky), sau d6 ching ngiing phan bao di vao thoai héa va chét. Diéu ly thu 1a cé mot sd té bao (dac biét 14 6 Gam nh&m) khéng di vao thoai hoa ma sé phan bao vé han dinh tré thanh cdc té bao bat tt va tao thanh mét ding té bao riéng. D6 1a nhiing té bao dét bién, chang cing giéng nhu cdc té bao dot bién duge tach ra tit céc m6 ung thu (vi du té bao Hela-té bao tach ra tit mé ung thu da con cla chi Henrietta Lack bi ung thu da con chét tt¥ nam 1950). Nhiing dong té bao bat tt nay dude nudi c&y in vitro trong tat ca cdc phéng thi nghiém sinh hoc va y té duge hee, cung c&p cho cdc nha nghién ctfu mét mé hinh thuyc nghiém r4t cé fch cho sinh hoe, y duge néi chung va cho cée nghién ettu vé chu ky té bao ndi riéng. b) Nhiéu loai Cdk tham gia diéu chinh chu ky Nhiéu nghién cttu da chting minh rang, khc véi nédm men 1a bon chi sinh san mét loai Cdk tham gia diéu chinh chu ky, thi 6 té bao dong vat c6 vi cé nhiéu loai Cdk tham gia diéu chinh chu ky. Theo nguyén tac hoat déng cia cac Cdk G trong té bao déng vat c6 vu, c6 thé phan ra céc loai.Cdk1, Cdk2, Cdk3, Cdk4, Cdk5 va Cdk6 (theo tht tu phat kién ra ching). Cing gidéng nhu n&m men S. cereusiae, té bao déng vat cd vi cing sti dung nhiéu loai cyclin tham gia diéu chinh hoat tinh Cdk, trong dé cyclin A va B cé tac dong trong giai.doan S va G2, 3 loai cyclin D.(D1, D2, D8) va cyclin E cé tac déng 6 giai doan G1 tudng tu nhu 6 ném men S.cerevsiae (hinh 8.3). Cac loai cyclin khac nhau lién két véi cc loai Cdk khac nhau tao thanh cac phic hé c6 tac dung diéu chinh chu ky 6 cdc giai doan khac nhau. Vi du, phitc hé Cdk4-cyclin D va Cdk6-cyclin D véi Cdk2-cyclin E tac dong g G1. Phiic hé Cdk2-cyclin A tac déng 6 giai doan S. Cac phitc hé Cdk1-cyclinA va phiic hé Cdk1-cyclinB tac dgng 6 giai doan G2 va M (hinh 8.3). Khi c6 nhan té sinh truéng, cdc phttc hé Cdk- cyclin sé kich thich cac té bao dang é giai doan GO tré lai G1 va vugt qua G1 dé hoan thanh chu ky. Trong méi trudng nuéi edly invitro, khi thiéu nh4n té sinh trudng thi té bao 6 giai doan GO khong san xuat Cdk va cyclin. 224Cdk1-cyclin B Cdk1-cyclinA Cdk2-cyclin & : Cdk4-cyclin D Diém chot Cdk6-cyclin D R Cdk2-cyclin A Cak-cyclin Hinh 8.3. Tac dong cia phite hgp Cdk - cyclin diéu chinh chu ky té bao dong vat c6 va c) NhGn té sinh trudng va vai tré cia ching Trong nhiéu nam cac nha nghién cttu da khong thanh c6ng nudi cay cdc té bao déng vat in vitro mac dd ngudi ta tao dude méi trudng nudi cay vé tring cé chita day da cdc chat dinh dudng can thiét. Chting sé khéng sinh truéng va khong sinh san néu nhu ngudi ta khéng cho thém vao mdi trudng nudi cay “chat huyét thanh" (serum), 1a dich duge chiét xudt ti mau sau khi dé mau ngung két. Cac té bao séng trong méi trudng khéng cé serum thi ching sé khéng phan bao ma chuyén sang trang thai GO. Ngudi ta da chitng minh chat can thiét c6 trong serum la nhiing protein rat dac trung duge goi la nhan t6'sinh truéng (Growth factor) va ching tac dong véi mét néng dé rat nhé (vao khoang 10° dén 107'M). Mét trong nhiing nh4n té sinh trudng ddu tién duge xdc dinh 1a nhan té sinh truéng tit tiéu cdu, duge goi 1a PDGF (Platelet-Derived Growth Factor). Lic ddu ngwdi ta si dung huyét tudng (plasma) cho vao méi trudng thi té bao khéng sinh trudng, sinh san; nhung néu ta thay thé bing serum thi ching nhanh chong sinh san, béi vi khi ngudi ta ché tao huyét tugng bang cach tach bé cac té bao mau trude 225khi ching chua kip ngung két. Khi mau ngung két,' cdc tiéu cdu sé tiét ra nan té PDGF vao serum. Khi ngudi ta tach chiét cac chat PDGF truc tiép ti tiéu cdu thi ching cing c6 tac dung kich thich sinh san té bao. PDGF 1a mot loai protein duge tiét ra tl cac béng tiét c6 trong tiéu cdu, ching c6 tac dung kich thich su sinh san cha té bao dé tai sinh cac mé bi héng trong co thé, vi du, su han gn va tao seo vét thudng trong co thé. Hién nay ngudi ta biét dude trén 50 chat c6 tae dong nhu nhan to sinh trudng va ching cdn dude goi 1A chat mitogen vi chting kich thich phan bao (mitosis). Cac té bao dap ting lai véi cdc nhan t6 sinh truéng théng qua cac thu quan mang dac trung (membrane receptor). Ngoai cdc nhan té sinh truéng 1a protein thi mét sé loai phan tu khac cing cé vai trd nhu thé, vi du, hoocmon steroid. Chiing tac déng bang cach lién két vdi cdc thu quan ndi bao (trong t€ bao chat hodc trong nhan). Ngu@i ta thudng chia cdc nhan té sinh trudng thanh hai loai: loai dc trung rng va loai dac trung hep. Loai dac trung réng, vi du, nhu PDGF va EPGR (nhan té sinh trudng biéu bi - epidermal growth factor) 1a loai tac déng lén nhiéu dang té bao: than kinh giao, té bao biéu mé v.v... Trong hic d6, loai dic trung hep, vi du nhu erythropoietin chi tac dong kich thich sinh san ding héng cu. Cac nhan té sinh trudng tac déng lén té bao theo nhém va rat da dang cé thé 1a kich thich hoac tc ché sy sinh san cla té bao tuy thuéc theo néng dé va tuy trudng hgp, ching c6 thé tae déng lén sinh san, biét héa hod di cu cha té bao trong co thé da bao. Déi véi chu ky té bao dong vat cé va, diém chét 4 G1 (duge goi la diém R-restriction point) tuong ty diém S 3 n&im men 1a diém chét quan trong ma té bao c4n vugt qua dé vao giai doan S va hoan thanh chu ky (G1 kéo dai ti 14 -16 gid, S kéo dai tir 6-8 gid, G2 tit 1-2 gid va M kéo dai khoang 1 gid). Tat nhién nhu ta da biét, trong cd thé cdc quan thé té bao biét hod khéc nhau cé thdi gian chu ky khac nhau. Da sé bi dimng lai 6 G1 va chuyén sang trang thai GO tam thdi (nhu té bao gan, té bao biéu mé, biéu mé ruét, té bao impho v.v...), hode vinh. vién (nhu té bao ngron, té bao cd). Ngudi ta thudng goi GO 1a giai doan nghi - giai doan “nga déng” hoac di vao thoai héa cha té bao, thuc chat té bao khéng nghi hoan toAn ma gidm cuing 46 hoat dong tong hgp protein, nhiéu khi chi cn 20% va thuc hién cdc chttc ae cua mé, cd quan ma té bao dé 1a thanh vién. 226Tae dong cia nh&n té sinh trudng 1 gay cho té bao cé hai dap ting: dap ang sém va dap ting cham. —Trong dap ting sdm: Nh4n té sinh trudng c6 tac dong kich thich su phién m& cia nhiéu gen, chi yéu 1a cdc gen m& héa cho cac nhan t6@ phién ma nhu c-Fos va c-Jun. Ngudi ta ching minh dude rang cdc dang d6t bién céa cdc gen c-Fos va c-Jun do tac dong cia retrovirus da din dén tao nén protein (v.Fos va v.Jun) c6 tae dong chuyén héa té bao lanh thanh té bao ung thu. Nhu vay, céc nhan to phién ma trén cé vai trd tham gia diéu chinh chu ky té bao. Cac protein dude téng hgp trong giai doan dap tng sém (nhén té phién m4) 1a nhiing protein khéng bén viing cho nén néng dé cha ching giam dan. — Trong dap ting cham: Cac protein duge tong hgp trong giai doan dap ting sém cé tac dong hoat héa cac gen d giai doan dap ting cham. M6t s6 gen nay 1a cdc gen ma héa cho cdc nhan té phién ma nhu E2F. MO6t s6 gen khac trong dap ting cham 14 cac gen mA héa cho cac loai cyclin D, A, E, céc gen ma héa cho céc loai Cdk2, Cdk4 va Cdk6 cing dude hoat héa va biéu hién. Cho dén khi nao néng dé cdc protein nay tich lay dé thi té bao méi vugt qua diém R dé vao S va tai ban ADN. Mét sé nhan té phién m4 E2F 14 cén thiét cho sy phién ma cac gen trén day, ciing nhu cdc gen m4 héa cho nhiéu protein tham gia vao su téng hgp ADN va nhan té E2F cing kich thich su phién ma cac gen ma héa cho ban than ching. Kha nang kich thich phién ma cia E2F lai bj ttc ché bdi protein lién két vdi ching 14 Rb va bdi 2 protein than thudc khéc 14 p107 va p130. Protein Rb dau tién duge xAc dinh nhu Ja san phdm cia gen tic ché, do dé din dén suf hoat héa cée gen cAn thiét bdi E2F dé di vao giai doan S. Ta hay hinh dung mét cd ché phiic tap nhu sau: Sy photphorin héa protein Rb gay bdi cae phttc hé Cdk4-cyclin D va Cdk6-cyclin D 6 gitia G1 va khi Cdk2 va cyclin E duge san xudt thi phttc hé Cdk2-cyclin E lai photphorin héa protein Rb d cudi G2. Dén luot minh, khi E2F c6 hoat tinh sé kich thich su phién m4 cia minh (theo méi lién hé nguge duong) va déng théi din dén san sinh Cdk2-cyclin E, dén Iugt minh phttc hé nay sé tang cudng photphorin héa Rb. Dén thdi diém nay chu ky dién ra khong cdn phy thuéc vao hoat tinh cha Cdk4/6-cyclin D, béi vi cing véi tién trinh, khi cdc nhan to sinh trudng khéng dugc tang thém thi mtic cyclin D ciing giam di va khi dé té bao vugt qua diém R cia G1 dé di vao S. 227Nhu vay su photphorin héa cia protein Rb cé tac déng diéu chinh dé té bao vugt qua diém R dé di vao S 1a ro rang va ngudi ta cing thay rang cac té bao cé mang gen Rb-/- sé bi gitt lai 6 G1 khong phy thuéc vao nhan té sinh truéng. Protein Rb duge duy tri 6 trang thai photphorin héa suét giai doan S, G2 va M bdi phite hé Cdk2/1 - cyclin. Sau khi té bao hoan tat phn bao va di vao G1 sém hoac GO thi mtte Cdk - cyclin giam sé din tdi lam giai photphoprotein Rb bdi céc proteinphotphataza. Protein Rb lai tac dong we ché hoat tinh cha E2F 6 giai doan sém cia G1 cha chu ky tiép theo. Cyclin A dude téng hgp 4 cudi giai doan G1 va G1 sé chuyén sang S. Thiéu cyclin A thi téng hgp ADN bj tic ché. Phite hé Cdk2 - cyclin A 6 déng vat c6 vii cé vai tré phat déng sy tai ban ADN. Hoat tinh cua Cdk2-cyclin A cé thé bj tte ché béi loai protein tte ché dac trung, duge goi 18 CKI (xem ph&n sau). 6 dong vat c6 vu, loai Cdk tac déng trong G2 1a Cdk1. Hoat tinh MPF cia phic hé Cdk1 - cyclin A va Cdk1 - cyclin B cia dong vat cé vii c6 vai trd chuyén chu ky tit G2 vao M cing dude diéu chinh bdi cae protein cé tac déng tte ché hoat tinh cua Cdk bang cach photphorin héa ching va ching sé dude hoat héa bdi cdc photphataza bang cach giai phéng nh6om photphat tte ché. Déi vdi cdc té bao cé chu ky déi méi thudng xuyén (vi du phéi sém) thi cyclin B bat du duge tong hgp 4 S va tang cao ham lugng qua G2, dat dinh cao 3 M va gidm manh sau hau ky phan bao. 6 té bao ngudi, cyclin B du tién dude tich luy trong té bao cht va sau dé duge chuyén vao nhan 4 tién ky sém ngay khi mang nhan bat ddu phan ra. Nhu vay, hoat tinh cha MPF khong chi diéu chinh bdi su photphorin héa (gin photphat) va giai photphat (tach photphat) ma cén do su van chuyén cyclin B vao nhan. Cyclin A va cyclin B sé bj phan huy trong proteaxom bang con duéng ubiquytin héa nhd phttc hé APC (Anaphase Promoting Complex) dan téi giam hoat tinh cia MPF, che phép té bao hoan thanh mitosis dé di vao chu ky mdi. d) Cac protein tte ché va vai tré cia ching 6 dong vat 6 va cing cé cic nhan té tte ché hoat tinh caa phite hé cyclin-kinaza va ching cing tham gia vao diéu chinh chu ky té 228bao géng nhu 6 ném men. Nguéi ta di phat hién cdc protein c6 tac dung tec ché hoat tinh cia cae cyclin-kinaza, duge goi 1a CKI (Cyclin- Kinase Inhibitor) va ching cé hai lép: — M6t lép duge goi 14 CIP (Cdk Inhibitor Protein), chiang lién két va tic ché t&t ca cfc phttc hé Cdk1-, Cdk2-, Cdk4- va Cdk6-cyclin. — Mét lép khac duge goi 1A INK4 (kinase-4-inhibitor) lién két va tic ché chi véi phtte hé Cdk4-cyclin D va Cdk6-cyclin D. Ngudi ta da biét duge mét loai protein INK4 14 p16 c6 tac déng nhu mét chat tte ché ung thu (tumor suppressor). Ngudi ta cing da biét dude 4 déng vAt 6 vii cé 3 lép protein CIP duge goi 1a p21, p27 va p57. Cac protein tte ché nh INK4 va cac CIP nhu p21, p27 va p57 dong vai tré tic ché hé MPF, tu dé tie ché chu kj té bao. Vai trd cua CIP p21 1a dap ting lai su hu héng cha ADN 6 té bao d6ng vat cé vi. Ching cing ¢é vai trd tte ché su tang sinh té bao trong phat trién phéi sinh. Vi du, trong phéi cua radi qua cé cae té bao mam sé biét héa cho ra biéu bi, ngudi ta tach chiét dude protein Dacape tuong ty nhu CIP duge san sinh ra 4 du G2 cia chu ky phan bao lan thit 16, chung lién két va tte ch phic hé Cdk2-cyclin E lam té bao phéi bi Ach lai 6 G1 cla chu ky l4n thi 17, nham han ché sy tang sinh cha té bao mdm biéu bi. Céc thé dét bién Dacapo vi khong san sinh Dacapo (protein tuong tu p21) cho nén té bao vugt qua G1 va phan bao, tao ra nhiing chu ky bat binh thusng. Vai trd cla cac CIP p27 va p57 cing da duge xe dinh bang phuang phdp loai triv gen 4 chudt. Cac chuét déng hdp p27-/ -, c6 phéi phat trién binh thudng va sinh ra chudt con binh thuéng, nhung qua mot vai tudn tudi, chudt dét bién Ién vudt lén so véi chudt binh thudng hon 30%, vi ngudi ta thAy cé su tang sinh vudt trdi cha té bao trong da sé co quan. Nhu vay, protein CIP p27 ré rang 1a cé6 vai trd tte ché chu ky té bao va diéu chinh su tang sinh té bao trong co thé 4 giai doan phéi va thai. Protein CIP p57 duge biéu hién trong cdc té bao duge biét hoa cia da sé m6 cia co thé trudng thanh. Cac con chuét bi loai bé gen khéng san sinh ra p57 sé bi chét sau khi sinh véi nhiéu di dang do su tang sinh qua tai ctia cac m6 trong qua trinh biét héa. e) Cae diém chét cia chu kj va co ché tac déng diéu chinh cua MPF Nhu trén da trinh bay su diéu chinh chu ky té bao theo théi gian 229chuyén tit giai doan truéc sang giai doan sau xay ra cac diém kiém tra (control points), hay cén goi 14 diém chét (check points). Co ché kiém tra 4 diém chét la co ché kiém tra theo méi lién hé ngud¢e, nghia 1a céng viéc 6 giai doan sau chi dude bat dau khi cong viée cia giai doan truéc d6 da hoan thanh, cting cé nghia 1a cong viéc sé xay 6 giai doan sau d& duge chudn bj day du, tién dé can thiét dién ra 3 giai doan trudéc d6. Néu nhu céng viée cla giai doan truéc chua hoan thanh thi din dén dinh chi su chuyén sang giai doan sau va té bao phai kéo dai, va d lai giai doan truée a6 cho dén khi cong viée giai doan dude hoan tat. ‘Tac dong lén diém chét c6 cc tin higu ndi bao va cac tin higu dén tit cde t& bdo vA cdc mé khac trong cd thé, cing nhu tin hiéu dén tit méi trudng. Negudi ta thudng phan biét ba diém chét quan trong: dé 1a diém chét tit G1 sang S @ néim men dude goi 1A diém xu&t phat S (start), con 6 dong vat bac cao duge goi 1a diém han dinh R (restriction)), khi té bao vugt qua duge diém chét G1 ching sé di vao S dé téng hop ADN. Diém chét thi hai la diém chét G2 dé kiém tra cita vao M cha té bao, va diém chét tht 3 1a diém chét M 4 thdi ky tit trung ky chuyén sang hau ky phan bao, thtfing dude goi 1a diém cia ra cha phan bao, nghia la khi t@ bao vugt qua diém nay s@ ho&n tat phan bao va di vao G1 tiép tuc chu k} mdi (binh 8.4). Biém chét G2 (vac M) Diém chét M (ra M) Diém chdt R (vao S) Hinh 8.4. Chu ky (é bo vd céc diém chét — Diém chét G1 bao hiéu rang qua trinh tang trudng, qua trinh chuan bj cho sy tai ban ADN 4 G1 da dude hoan tat. Nhu vay digém 230chét G1 rat quan trong va déi véi céc té bao cé chu ky chudn va lién tuc thi diém chét G1 1 diém kiém tra cae qua trinh dién ra 6 G1 ma khi hoan tat s@ phat dong su tai ban ADN va tiép tue chu ky dé vao 8. Déi véi cae té bao bi Ach lai 6 G1, céc nhan t6 sinh truéng GF (Growth Factor) cing nhu cdc ch&t kich thich phan bao (mitogen) thudng tac dong lén diém chét G1. Ching phat dong su hoat héa cha cac gen ma hoa cho nhiéu protein, nhiéu enzim cé tac dong dap ting sdém cla té bao, trong dé cé cae gen ma héa cho cae nhan té phién ma, vi du, nhu c-Fos, c-Jun. Cac protein va enzim cla dap ting sém sé kich thich hoat héa cdc gen cia giai doan dép tng ch4m, trong dé quan trong nhat 1a cdc gen ma héa cho cc nhan t6 phién ma B2F. M6t s6 gen khae trong dap ting cham 1A cdc gen m4 héa cho cac dang cyclin cua G1 va mét phan cia S nhu cyclin D, E va A, cac gen ma hda cho céc dang Cdk tac déng trong G1 va S nhu Cdk2, Cdk4 va Cadké. Nhan t6 phién ma E2F co tac déng kich thich su phién ma cac gen m4 héa cho cdc protein va enzim cén thiét cho sy tai ban ADN. Khi té bao chua vugt qua diém chét G1 thi E2F bj tte ché do lién két vi cdc protein tic ché, vi du, protein Rb. Khi protein Rb bi photphorin héa nhé cdc phtic hé kinaza (tite MPF) nhu Cdk4/6-cyclinD va Cdk2- cyclinE thi E2F duge giai phéng, chung sé tac déng cing véi Cdk2- cyclinA 1én hé tai ban ADN, va nhu vay G1 dude chuyén vao 8. Nhiéu nguyén nhan gay tac dong 1am té bao bi ach lai 6 G1. Vi du, khi phan tt ADN bij hu hong do cac tac nhan phéng xa hod&c hoa chat thi té bao bj Ach lai & G1 cho tdi khi cdc hu héng 46 dude sita chia. Sy ach lai 6 G1 1a dé phong ngia su tai ban cc ADN bi dot bién sé din dén dét bién trong cac té bao con. Ngudi ta da phat hién ra protein p53 (goi nhu vay vi khéi lugng 53kDa) cé vai tro tie ché té bao ngudi 4 G1 khi c6 su hu héng ADN. Khi protein khéng hoat déng, cdc té bao véi hu hong ADN sé vugt qua G1 vao S dé tai ban ADN, hoan thanh chu kj va sé cho ra cac té bao con e6 thé chuyén dang thanh té bao ung thu. Vi vay ngudi ta goi gen ma héa cho protein p53 1a gen tic ché ung thu (tumor suppressor gene). Trong trudng hgp binh thudng, protein p53 14 mét nhan t6 phién mA, ching r&t khong bén viing, vi vay, chting tén tai vdi lugng rat ft vita di dé bam vao yéu té kiém tra tung ting cha ADN va hoat héa su phién ma. Su hu héng ADN 1Am bén vitng hod protein p53 va do 231dé néng dé cla chung tang cao, chung sé tich cuc kich thich phién ma. Mot trong cdc gen duge ching kich thich phién ma 1a gen ma héa cho protein tte ché CIP p21, 1A protein tte ché hoat tinh cla phite hé cyclin-kinaza. CIP p21 lién két va ttc ché tat ca Cdk-cyclin 6 déng vat c6 vi va két qua 1a cdc té bao bj ach lai 6 G1 (hode GO) cho tdi khi ADN hu héng d& duge stta chita va néng dé p53 va CIP p21 gidam xudng. Néu ADN bi hu hai qua nang thi protein p53 sé hoat héa cac gen dan dén qué trinh tu chét cua té bao (apoptosis). Qua trinh apoptosis 1a qua trinh ty chét cla té bao theo chugng trinh xay ra mot céch binh thudng trong qua trinh phat trién ca thé 4 dong vat da bao. Déi vdi dong vat cd xudng, s6 protein p53 c6 vai trd dap ting lai céc hu héng nang cua ADN bang cach tu chét 14 dé ngan ngiia su dot bién ADN, cé thé sé dan dén phat trién cac té bao ung thu. Nhing té bao chita d6t bién gen p53 d ca hai alen (p53) sé vugt qua G1 dé vao S khi ADN bi hu héng nhe, va sé khéng tu chét di khi ADN bi hu héng nang, va nhu vay khi cdc té bao dé bi hu héng ADN, ching van vudt qua G1 vao S va ADN bij hu hong van tai ban tao ra dét bién va tai sdp xép lai ADN, din dén phat trién ung thu. Hau qua cha dét bién trong gen p53 1a vi du dién hinh trong ¥ nghia cua diém chét cla chu ky té@ bao déi véi sttc khoé cua déng vat va con ngudi ching ta. — Diém chét G2 bao hiéu 1a céc qua trinh can thiét cho sy phan bao phai duge hoan tat nhu sy tai ban ADN, su dong dac va tang xodn ca sgi nhiém sdc, sy tao thanh cae vi 6ng chuan bj cho su tao thanh thoi phan bao, thi t@ bao mdi vust qua chét dé vao tién ky cha phan bao. Néu cdc qué trinh dé chua duge hoan tat hodc cé xay ra su hu héng ADN thi té bao ciing bi ach lai 6 G2 va khong vao duge M, nhu vay ngiin chan khéng dé xay ra su hu hong trong hé gen ca thé hé té bao con chau. Phite hé Cdk1-cyclin A va Cdk1-cyclin B phat huy tac dung trong G2 va ca 6 trong M. Hoat tinh caa chung cing duge diéu chinh bdi cdc protein tte ché va bdi sy photphorin héa nhé cdc kinaza va giai photpho nhé cac photphataza. Phiic hé Cdk1-cyclin (A va cha yéu 14 B) cua G2 khi dude hoat héa sé photphorin héa cdc protein, déng vai trd chi: yéu trong su Cc dac va tang xoadn soi nhiém sac (nhu protein condensin), cc protein 232c6 vai trd tao nén cae vi ong cda thoi phan bao (nhu cde tubulin), eae protein c6 vai trd trong su phan giai va tai tao mang nhan (nhu céc lamin), ... ~Diém chét cda giai doan M 6 vao trung ky chuyén sang hau kj: Néu cc qua trinh nhu tan ré mang nhan, tao thoi phan bao va cae trung tiét (tic tam dong) bam gin nhiém sac thé vao soi cada thoi... chua hoan tat thi té bao bi ach lai d trung ky. Chait colchicin c6 tac dung tic ché su trang hop hoa vi éng tubulin din dén khéng tao duge thoi phan bao, do dé té bao bi ach lai é trung ky tao nén cac té bao da béi va hau ky, mat ky khdng xy ra. Phite hé Cdk-cyclin cdn c6 tac déng hoat héa phite hé APC (Anaphase Promoting Complex) 1a phtic hé cé tac dng 1am cho hau ky, mat ky dude tiép dién, déng thdi cing c6 tac déng lam phan giai cyclin dé té bao con ra khdi M vao G1. Khi APG duge photphorin héa nhé phite hé Cdk-cyclin, chting sé cé hoat tinh va sé tac déng lam ubiquytin héa dé cdc protein tte ché hau ky (vi du protein cohesin cé vai trd gan hai nhiém sc tt véi nhau 6 tam dong) bi phan giai bdi proteaxom, do dé cc nhiém sac tit tach khéi nhau va van chuyén vé hai cc nhi su giai trang hgp cdc vi ng cla sgi thoi. Khi cde cyclin chua bi phan hiy thi phic hé Cdk- cyclin sé tac dong dé tai tao lai mang nhAn, cing nhu tac dong gay co that eo phan bao (do tac dong photphorin héa protein miozin-actin) lam cho té bao bi phan thanh hai. ' Vao mat ky, APC sé tac déng 1am ubiquytin héa cyclin va cyclin bi phan gidi nhd proteaxom. Néng dé cyclin giam, Cdk mat hoat tinh va té bao ra khdi mitosis. cAU HOI KIEM TRA KIEN THUC (DUNG, SAD (Chuong VIII. Chu ky té bao) 1. Chu ky té bao gém cac pha tiép theo nhau 1a G2-G1 -M va S. 2. Cac pha G1-S-G2 tao nén gian ky (interphase), cdn M 1a pha té bao phan chia, 3. Pha G1 1a pha tai ban ADN va nhan déi nhiém sac thé. 4. Su sinh truéng, su biét hoa té bao dién ra trong pha G1. 2335. Pha G1 cia té bao phéi dang phat trién kéo dai hang nam. 6. Pha GO cla té bao noron kéo dai theo tudi tho con ngudi. 7. Cé su phién ma va dich ma xay ra trong pha G1. 8. Sau pha S ham lugng ADN va sé lugng nhiém sc thé tang gap déi. 9. Cac enzim ADN polimeraza hoat déng trong pha G2. 10. Cac vi éng tubulin duge tao thanh trong G2. 11. Ch&t cochicin kich thich tao thanh vi ng, do dé kich thich su phan chia té bao. 12. Pha M cé thi gian giao déng va kéo dai nhat. 13. Sy phan bao amitosis din dén tao té bao da béi. 14. Su phan bao endomitosis tao nén céc thé nhiém sdc da sgi. 15. Da béi cing nguén 1a do endomitosis tao nén. 16. Té bao héng cdu ngudi cé pha S kéo dai nhat. 17. Khi té bao biéu bi da sinh san thi chting c6 pha G1 kéo dai hdn cde té bao biéu bi da da biét hoa thanh té bao sing. 18. Té bao noron 2 thang sinh san mét lan. 19. Cac ching quan té bao trong co thé ngudi c6 pha G1 khong nhu nhau 1a do co ché diéu chinh chu ky. 20. Gitta pha G1 va pha S cé diém chét R dé kiém tra su chuyén ti G1 sang S. 21. Phitc hé protein diéu chinh chu ky 14 MPF dude céu tao gém protein cyclin va protein kinaza. : 22. Cyclin 14 phan cé hoat tinh enzim cén kinaza 1A phan diéu chinh. 23. M6i mét pha cla chu ky c6 phitc hé cyclin - kinaza riéng. 24, Trong pha GO té bao téng hop nhiéu cyclin va kinaza. 25, Méi mét pha déu tao tién dé cho su thyc hién cae qua trinh cha pha tiép. 26. Néu su tai ban ADN chua xong, té bao vn di vao phan bao. 21. Néu sy chua hinh thanh thoi phan bao va nhiém sac thé chua xoin va déng dc thi té bao khéng vugt qua G2 vao M. 28. Néu té bao gan trudng thanh luén luén phan bao sé dan tdi ung thu gan. 234