Trad. Med. J.

, May - August 2017 Submitted : 07-09-2016

Vol. 22(2), p 73-79 Revised : 15-02-2017
ISSN-p : 1410-5918 ISSN-e : 2406-9086 Accepted : 17-04-2017

Anti-inflammatory Activity of Camellia sinensis, l. Extract Cream

Combined with Vitamin C as Antioxidant on Croton Oil-induced
Inflamation in Male Mice Strain BALB/C
Daya Anti-Inflamasi Krim Kombinasi Ekstrak Teh Hijau dan Vitamin C sebagai
Antioksidan pada Mencit Jantan Galur Balb/C yang Diinduksi Croton Oil
Nining Sugihartini1*, Ratih Saridewi2, Ulfa Ramdhani M2, Fitri Rahmawanti2, Sapto Yuliani1, Vivi
Sophia1
1Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta
2Mahasiswa Sarjana, Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta

ABSTRACT
Green tea extract cream contains epigallocatechin gallate (EGCG) as the active ingredient for anti-
inflammatory. Epigallocatechin gallate is easyly oxidized and able to reduce its effectivity as an anti-
inflammatory. Therefore, an addition of antioxidants in order to increase its stability is required. The purpose
of this study was to determine the effect of adding the antioxidant Vitamin C on the effectivity of green tea
extract as an anti-inflammatory. This study uses 6 groups of male mice strain BALB/C which were given
treatment as follows: normal control, negative control, base cream, green tea extract (0.2%), Vitamin C
cream (1%) and green tea extract cream with addition of Vitamin C. The anti-inflammatory activity was
evaluated based on the expression of COX-2, inflammatory cells and the thickness of the epidermis in the skin
tissue of mice after given crotton oil (0.1%) on the back for the induction of inflammation. After treatment
cream for 3 days, mice were sacrificed for histopathological tissue preparations made with hematoxylin eosin
staining and immunohistochemistry COX-2. Data were analyzed statistically with one way Anova followed by
t-test to determine differences between groups at a significance level of 0.05. The test results indicate that
cream of green tea extract is higher in decreasing inflammatory parameters in comparison with cream of
Vitamin C, except in the thickness of epidermal parameter. Green tea extract cream with the addition of
Vitamin C is higher in reducing inflammatory parameters than cream of green tea extract or cream of
Vitamin C. The decline percentage of cells that express COX-2, inflammatory cells and the thickness of the
epidermis in the each of groups were cream of green tea extract:57.95%;53.75%;34.83%, cream of Vitamin
C:48.76%;34.96%;34.27%, cream of green tea extract and Vitamin C:61,89%;65,54%;46.30%, respectively.
Based on the results of this study, it can be concluded that anti-inflammatory activity of green tea extract
cream increased due to the addition of 1% vitamin C as an antioxidant.
Keywords: Green tea extract, vitamin C, cream, anti-inflammatory, COX-2, inflammatory cells, thickness of
the epidermis

ABSTRAK
Krim ekstrak teh hijau mengandung bahan aktif epigalokatekin galat sebagai anti-inflamasi.
Epigalokatekin galat mudah mengalami oksidasi yang dapat menurunkan aktivitasnya sebagai anti-
inflamasi. Oleh karena itu diperlukan penambahan antioksidan untuk meningkatkan stabilitasnya. Tujuan
penelitian ini adalah mengetahui pengaruh penamabhan antioksidan Vitamin C terhadap efektivitas ekstrak
teh hijau sebagai anti-inflamasi. Penelitian ini menggunakan 6 kelompok mencit jantan galur BALB/C yang
mendapatkan perlakuan sebagai berikut : kontrol normal, kontrol negatif, basis krim, krim ekstrak teh hijau
(0,2%), krim Vitamin C (1%) dan krim ekstrak teh hijau dengan penambahan Vitamin C. Aktivitas anti-
inflamasi dievaluasi berdasarkan ekspresi COX-2, sel radang dan ketebalan epidermis pada jaringan kulit
mencit setelah diberi crotton oil (0,1%) pada bagian punggungnya untuk induksi inflamasi. Setelah
perlakuan krim selama 3 hari, mencit dikorbankan untuk dibuat preparat histopatologik jaringan kulit
dengan pengecatan hematoksilin eosin dan imunohistokimia COX-2. Data dianalisis statistik dengan uji
Anova satu jalan kemudian dilanjutkan dengan uji t untuk mengetahui perbedaan antar kelompok pada

Correspondence author: Nining Sugihartini

Email : nining.sugihartini@pharm.uad.ac.id

Traditional Medicine Journal, 22(2), 2017 73

tingkat signifikansi 0,05. Hasil uji menunjukkan bahwa krim ekstrak teh hijau lebih tinggi dalam
menurunkan parameter inflamasi dibandingkan dengan krim Vitamin C, kecuali pada parameter tebal
epidermis. Krim ekstrak teh hijau dengan penambahan Vitamin C paling tinggi dalam menurunkan
parameter inflamasi dibandingkan krim ekstrak teh hijau atau krim Vitamin C. Persentase penurunan
jumlah sel dengan ekspresi COX-2, sel radang dan ketebalan epidermis secara berturut-turut untuk tiap
kelompok adalah sebagai berikut krim ekstrak teh hijau:57,95%;53,75%;34,83%, krim Vitamin
C:48,76%;34,96%;34,27%, Krim ekstrak teh hijau dan Vitamin C:61,89%;65,54%;46.30%. Berdasarkan hasil
uji dapat disimpulkan bahwa aktivitas antiinflamasi krim ekstrak teh hijau meningkat dengan penambahan
Vitamin C 1% sebagai antioksidan.
Kata kunci: ekstrak teh hijau, vitamin C, krim, anti-inflamasi, COX-2, sel radang, ketebalan epidermis

PENDAHULUAN dengan parameter ketebalan epidermis, jumlah

Senyawa polifenol khususnya EGCG
diketahui memiliki aktivitas sebagai antioksidan
dan antiinflamasi. Sebagai senyawa antioksidan
dan antiinflamasi, salah satu aktivitas EGCG
adalah menghambat ekspresi COX-2 di tingkat
transkripsi (Shimizu dkk., 2005; Kumar dkk.,
2007). COX-2 sendiri merupakan suatu mediator
nyeri berupa enzim yang terinduksi pada sel yang
mengalami inflamasi (Simmons dan Moore,
2000). Mekanisme EGCG dalam menghambat
inflamasi adalah dengan menghambat aktivitas
NF-kB5 (Butt dan Sultan, 2009), MMP-2, MMP-9,
MMP-12 (Dona dkk., 2003) dan AP-1 (Tippoe dkk.,
2007).
Bioavaibilitas EGCG secara peroral cukup
rendah yaitu kurang dari 5% (Fang dkk., 2007).
Aplikasi langsung pada tempat yang mengalami
inflamasi diharapkan akan mempercepat proses
penyembuhan (Sugihartini dkk., 2013a).
Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa EGCG
memiliki bioavabilitas dan stabilitas yang rendah
(Fang dkk., 2007). Berdasarkan hal tersebut maka
telah dilakukan pengembangan formulasi ekstrak
teh hijau dalam bentuk sediaan krim untuk
menghindari efek lintas pertama dan penambahan
enhancer untuk meningkatkan kemampuan
penetrasi EGCG menembus lapisan kulit
(Sugihartini dkk., 2011). Selain itu untuk
meningkatkan stabilitasnya maka dalam formulasi
krim ditambahkan antioksidan Vitamin C
(Sugihartini dkk., 2013b).
Hasil penelitian sebelumnya menunjukkan
bahwa penambahan vitamin C sebesar 1%
mampu meningkatkan stabilitas EGCG dalam krim
ekstrak teh hijau (Sugihartini dkk., 2013b).
Penambahan vitamin C juga diharapkan mampu
meningkatkan kualitas sediaan krim ekstrak teh
hijau sebagai antiinflamasi, terutama karena
keduanya memiliki mekanisme yang sama yaitu
menghambat aktivitas NF-kB dan menghambat
ekspresi COX-2 (Telang, 2013; Lee dkk., 2008).
Formulasi baru ini memerlukan berbagai evaluasi
untuk menentukan pengaruh penambahan
Vitamin C ke dalam formula. Kemampuan EGCG
dan Vitamin C sebagai anti-inflamasi dievaluasi
sel radang dan jumlah sel dengan ekspresi COX-2
pada jaringan kulit inflamasi mencit yang
diinduksi crotton oil.
METODOLOGI
Bahan dan alat
Bahan yang digunakan adalah daun teh
hijau (diperoleh dari PT. Pagilaran Yogyakarta
yang berasal dari kebun teh di daerah Batang
Jawa Tengah pada ketinggian 700-1600 m dari
tanaman teh dengan umur 5-25 tahun yang
diidentifikasi secara makroskopik dan
mikroskopik di Laboratorium Biologi F MIPA
UAD), akuades, dan etil asetat pa. Sedangkan
bahan yang digunakan dalam pembuatan krim
dengan kualitas farmasetis adalah asam stearat,
setil alkohol, stearil alkohol, trietanol amin,
gliserin, asam sitrat, metil paraben, asam oleat,
propilen glikol, tween 80, span 80, Vitamin C dan
minyak atsiri temulawak (Sigma). Peralatan yang
digunakan adalah seperangkat alat destilasi, infus,
alat gelas, Rotaevaporator (Buchi), mikroskop
(Olympus).
Hewan Uji
Sebanyak 36 ekor mencit jantan dewasa,
galur BALB/C (25-30 g) diperoleh dari
Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu
(LPPT), UGM. Mencit diadaptasikan selama 6 hari
sebelum perlakuan. Mencit dipelihara dalam
kandang plastik berukuran 30x40 cm (satu
kandang untuk 6 ekor), dengan suhu kamar 24–26
°C, kelembaban 60–65%, dan mendapatkan siklus
cahaya terang gelap 12 jam. Pakan dan minum
tersedia ad libitum.
Cara Kerja
Pembuatan ekstrak teh hijau
Ekstrak teh hijau diperoleh dengan
metode infundasi dan dilanjutkan fraksinasi
menggunakan etil asetat sebanyak 3 kali.
Fraksi kemudian dikentalkan dan diuapkan
sampai kering sehingga diperoleh ekstrak kering
teh hijau (Row and Jin, 2006; Sugihartini dkk.,
2013a).

74 Traditional Medicine Journal, 22(2), 2017

Tabel I. Formula Basis Krim, Krim Ekstrak Teh Hijau, Krim Vitamin C dan Krim Teh Hijau dengan
Penambahan Vitamin C

Nama Bahan F I (g) F II (g) F III (g) F IV (g)

Ekstrak teh hijau 0 0 0,20 0,20
Asam stearat 5,14 5,14 5,14 5,14
Setil alkohol 2,75 2,75 2,75 2,75
Steril alkohol 5,14 5,14 5,14 5,14
Trietanolamin 1,28 1,28 1,28 1,28
Gliserin 7,72 7,72 7,72 7,72
Asam sitrat 0,64 0,64 0,64 0,64
Metil paraben 0,25 0,25 0,25 0,25
Asam oleat 6,04 6,04 6,04 6,04
Propilen glikol 7,17 7,17 7,17 7,17
Minyak atsiri Temulawak 6,79 6,79 6,79 6,79
Tween 80 10 10 10 10
Span 80 1 1 1 1
Vitamin C 0 1 0 1
Air Ad 100 mL Ad 100 mL Ad 100 mL Ad 100 mL

Keterangan: a. Formula 1 : Sediaan krim yang terdiri atas basis; b. Formula II : Sediaan krim yang terdiri atas basis
dan vitamin C; c. Formula III : Sediaan krim yang terdiri atas basis dan Ekstrak Teh Hijau; d. Formula IV: Krim optimal
dengan antioksidan dan vitamin C serta Ekstrak Teh Hijau

Pembuatan sediaan kelompok yang tidak mendapatkan perlakuan

Krim ekstrak teh hijau dibuat dengan
mengacu pada hasil penelitian sebelumnya (Tabel
I) (Sugihartini dkk., 2013a). Krim dibuat dengan
metode peleburan yang diawali dengan
melelehkan bahan yang bersifat larut dalam
minyak (lelehan 1), yaitu asam stearat, setil
alkohol, stearil alkohol, asam sitrat, span 80 dan
asam oleat, di atas waterbath pada suhu 75o C.
Sementara itu untuk bahan yang bersifat larut
dalam air (lelehan 2) juga dilelehkan dengan suhu
yang sama dalam wadah yang berbeda, yaitu
vitamin C, trietanolamin, gliserin, metil paraben,
tween 80, dan propilen glikol di atas waterbath.
Selanjutnya kedua lelehan dicampurkan di atas
mortir hangat dan diaduk sampai homogen.
Terakhir ditambahkan ekstrak teh hijau dan
minyak atsiri temulawak ketika krim sudah
terbentuk dan sudah dalam keadaan dingin.
Uji anti-inflamasi
Penelitian ini menggunakan 6 kelompok
perlakuan yang masing-masing terdiri dari 6 ekor
mencit. Enam kelompok tersebut meliputi
kelompok kontrol normal yaitu kelompok yang
tidak mendapat perlakuan apapun dan 5
kelompok yang pada awalnya diberi induksi
inflamasi dengan croton oil serta mendapat
perlakuan basis krim (F1), krim ekstrak teh hijau
(F2), krim Vitamin C (F3) dan krim ekstrak teh
hijau dengan penambahan Vitamin C (F4) serta
sediaan (kontrol negatif)
Kelompok yang mendapat induksi inflamasi
sebelumnya dicukur rambut bagian punggung dan
diolesi perontok rambut (Veet). Setelah 24 jam,
pada bagian punggung tersebut ditetesi dengan
0,1 ml croton oil (4%) dan 30 menit kemudian
dilakukan pengolesan basis krim, krim ekstrak teh
hijau, krim Vitamin C dan krim ekstrak teh hijau
dengan penambahan Vitamin C sebanyak 100 mg
setiap hari selama 3 hari. Selanjutnya mencit
dikorbankan dengan dislokasi servik. Jaringan
kulit kemudian diambil dan direndam dalam
formalin 10% untuk pembuatan preparat
histopatologik dengan pengecatan hematoksilin
eosin (HE) dan imunohistokimia COX-2 yang
dilakukan sesuai metode standar di Laboratorium
Patologi, Fakultas Kedokteran, UGM dan
Laboratorium Patologi Anatomi, RS. Dr. Sardjito,
Yogyakarta (Sugihartini dkk., 2013a).
Penghitungan jumlah sel radang dilakukan
terhadap preparat histopatologik yang dicat
dengan HE. Jumlah sel radang dihitung pada
tiga bidang pandang dari tiap irisan jaringan
kulit tiap hewan uji. Perhitungan sel radang
dapat diketahui dengan adanya bercak
berwarna coklat kehitaman. Ketebalan epidermis
diukur berdasarkan rerata jarak antara
lapisan epidermis terdalam dengan terluar
yang diukur dari tiga bidang pandang dari
tiap irisan jaringan kulit tiap hewan uji.

Traditional Medicine Journal, 22(2), 2017 75

Gambar 1. Gambaran mikroskopis jaringan kulit dengan pengecatan hematoksilin eosin (HE) (A) sel
radang, (B) ketebalan epidermis dan (C) sel yang mengekspresikan COX-2 dengan pengecatan
imunohistokimia

Tabel II. Hasil Uji Daya Anti-inflamasi Krim Ekstral Teh Hijau, Krim Vitamin C dan Krim Ekstrak Teh Hijau
dengan Penambahan Vitamin C pada Hewan Uji Mencit Jantan Galur BALB/C (N=6)

Ketebalan Jumlah Sel Jumlah Sel

Kelompok
Epidermis (µm) Radang ekspresi COX-2
Kontrol normal 38,75 ± 14,21 33,78 ± 6,20 22,78±1,32
Kontrol negatif 126 ± 4,82 178,00 ± 22,64 82,33±1,64
Kontrol basis 95,58 ± 8,35 119,33 ± 35,61 68,63±3,08
Krim Ekstrak Teh Hijau 0,2% 128± 4,39 82,33 ± 9,67 34,62±2,94
Krim Vitamin C 1% 117 ± 5,81 115,78 ± 9,44 42,19±6,17
Krim Ekstrak Teh Hijau (0,2%)+ Vitamin C
116 ± 7,86 59,56 ± 15,06 31,38±2,57
(1%)

Penghitungan jumlah sel yang mengekspresikan
COX-2 dilakukan dengan perbesaran 400x pada
tiga bidang pandang pada tiap irisan jaringan kulit
tiap hewan uji, berdasarkan jumlah sel yang
menunjukkan warna coklat pada sitoplasma atau
intinya. Perhitungan tersebut dilakukan setelah
preparat jaringan kulit diberi pewarnaan
imunohistokimia menggunakan antibodi
polyclonal COX-2. Pengamatan dan pengukuran
mikroskopik semua dilakukan dengan
menggunakan mikroskop yang telah dihubungkan
dengan optilab.
Analisis data dan statistik
Data sel yang mengekspresikan COX-2
dihitung persentase ekspresinya dengan
menggunakan rumus :
Hasil persentase pengamatan terhadap
preparat IHC, jumlah sel radang dan ketebalan
epidermis pada kelompok kontrol dan kelompok
perlakuan dianalisis dengan menggunakan
program statistika ver.16. Beda nyata antar
perlakuan diuji dengan one way ANOVA. Jika dari
hasil uji ANOVA ditemukan adanya perbedaan
yang signifikan antar kelompok perlakuan maka
dilanjutkan dengan Post Hoc Test LSD untuk
melihat perbedaan antar kelompok perlakuan.
Signifikansi hasil ditetapkan dengan p < 0,05.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Data hasil uji daya anti-inflamasi (Tabel II).
Hasil pengecatan preparat dengan HE dan
imunohistokimia COX-2 (Gambar 1). Data
menunjukkan bahwa ketebalan epidermis, jumlah
sel radang dan jumlah sel dengan ekspresi COX-2
pada kontrol normal adalah yang paling sedikit.
Hal ini berlawanan dengan data pada kelompok
kontrol negatif yang menerima perlakuan
menggunakan senyawa penginduksi 0,1 ml croton
oil dengan konsentrasi larutan 4%. Croton oil
diketahui memiliki sifat irritant dan mampu
menyebabkan inflamasi, sehingga minyak ini
dipilih sebagai induktor inflamasi (Lan dkk.,
2012). Croton oil memiliki mekanisme
mengaktivasi fosfolipase A2 yang selanjutnya
mengeluarkan asam arakidonat dari membran sel.
Asam arakidonat ini kemudian dimetabolisme
menjadi prostaglandin dan leukotrin (Shah dkk.,

76 Traditional Medicine Journal, 22(2), 2017

Tabel III. Persentase Penurunan Tebal Epidermis, Jumlah Sel radang dan Jumlah Sel Ekspresi COX-2 pada
Hewan Uji Mencit Jantan Galur BALB/C (N=6) yang Diinduksi Inflamasi setelah Perlakuan Krim Ekstrak
Teh Hijau, Krim Vitamin C dan Krim Ekstrak Teh Hijau dengan Penambahan Vitamin C
Krim Ekstrak
Teh Hijau 0,2%
Tebal Epidermis (µm) -0,02 ± 4,6%
Jumlah Sel Radang 52,68 ± 10,64%
Jumlah Sel Ekspresi COX-2 58,06 ± 4,76%
2011). Berdasarkan hasil uji statistik terdapat
perbedaan ketebalan epidermis, jumlah sel
radang dan jumlah sel dengan ekspresi COX-2
yang bermakna antara kelompok kontrol normal
dengan kontrol negatif (mendapatkan induksi
inflamasi saja tanpa pemberian sediaan) (p<0,05).
Dengan adanya perbedaan yang bermakna ini
maka metode induksi tersebut dapat digunakan
untuk mengevaluasi aktivitas anti-inflamasi
formula krim yang dibuat.
Kelompok kontrol basis berfungsi untuk
mengevaluasi potensi basis krim sebagai anti-
inflamasi. Gambaran mikroskopik dari kelompok
kontrol basis krim menunjukkan ketebalan
epidermis, jumlah sel radang dan jumlah sel
ekspresi COX-2 lebih tinggi dibandingkan dengan
kelompok kontrol normal dengan perbedaan yang
bermakna (p<0,05). Hal ini menunjukkan bahwa
kandungan yang terdapat di dalam basis krim
tidak memberikan aktivitas antiinflamasi yang
optimal terhadap jaringan kulit mencit BALB/C.
Hal ini didukung pula oleh hasil perbandingan
dengan kontrol negatif di mana kelompok basis
memberikan perbedaan yang tidak bermakna
pada parameter ketebalan epidermis dan jumlah
sel dengan ekspresi COX-2.
Kelompok perlakuan yang pertama adalah
kelompok hewan uji yang diberi perlakuan
induksi inflamasi dengan croton oil dilanjutkan
dengan perlakuan pengolesan krim dengan
penambahan Vitamin C 1%. Dalam formulasi krim
anti-inflamasi ekstrak teh hijau ini, tujuan
penambahan vitamin C adalah sebagai
antioksidan untuk menjaga stabilitas krim dalam
penyimpanan (Zieve, 2009). Penambahan Vitamin
C pada basis krim ternyata mampu menurunkan
tebal epidermis, jumlah sel radang dan jumlah sel
dengan ekspresi COX-2 apabila dibandingkan
dengan kontrol negatif (p<0,05). Penurunan yang
bermakna tersebut menunjukkan bahwa Vitamin
C memiliki aktivitas sebagai anti-inflamasi.
Namun demikian penurunan tersebut masih
belum mampu memberikan kondisi yang sama
dengan kontrol normal karena masih ada
perbedaan yang bermakna (p<0,05).
Traditional Medicine Journal, 22(2), 2017
Krim Vitamin C Krim Ekstrak Teh Hijau
1% (0,2%)+ Vitamin C (1%)
34,27 ± 5,92% 46,30 ± 6,34%
20,52 ± 12,51% 66,43 ± 7,24%
47,64 ± 13,60% 61,76 ± 6,55%
Kelompok perlakuan yang kedua adalah
kelompok hewan uji yang diinduksi dengan croton
oil kemudian dilanjutkan dengan pengolesan
menggunakan krim ekstrak teh hijau. Pemberian
krim ternyata mampu menurunkan secara
bermakna jumlah sel radang dan jumlah sel
dengan ekspresi COX-2 di bandingkan kontrol
negatif. Kandungan polifenol EGCG yang terdapat
dalam teh hijau dimanfaatkan sebagai komponen
utama yang memberikan aktivitas antiinflamasi
dalam formulasi krim (Saryono, 2013). EGCG
merupakan komponen katekin yang terbanyak
dalam tanaman teh hijau yaitu sekitar 48%-55%
dari total katekin (Cabrera dan Gimenez, 2006).
EGCG mampu menghambat ekspresi COX-2
(Shimizu dkk., 2005). Kemampuan menghambat
ekspresi COX-2 ini disebabkan adanya
kemampuan menekan aktivitas NF-kB dan sinyal
ekstraseluler yang diatur oleh protein kinase
(ERK). EGCG juga dapat menekan ekspresi dari
inducible nitric oxide synthase (iNOS) dan nitric
oxide (NO) sehingga dapat memperbaiki
kerusakan sel akibat inflamasi (Tipoe dkk., 2007).
Namun demikian hasil uji statistik menunjukkan
bahwa kelompok krim yang diberi penambahan
ekstrak teh hijau berbeda bermakna dengan
kontrol normal (p<0,05). Hal ini kemungkinan
disebabkan masa pengolesan krim baru selama 3
hari sehingga efek penyembuhan inflamasinya
belum maksimal. Apabila dibandingkan antara
kelompok krim teh hijau dan kelompok krim
Vitamin C maka penurunan jumlah sel radang dan
jumlah sel dengan ekspresi COX-2 lebih besar
pada kelompok krim teh hijau. Hal ini terutama
terlihat pada parameter jumlah sel radang yang
memberikan perbedaan yang bermakna. Ini
berarti aktivitas anti-inflamasi ekstrak teh hijau
masih lebih tinggi dibandingkan Vitamin C.
Kelompok perlakuan terakhir adalah
kelompok hewan uji yang diberikan induksi
inflamasi dengan croton oil dan dilanjutkan
pengolesan krim ekstrak teh hijau dengan
penambahan Vitamin C 1%. Gambaran
mikroskopis kelompok ini memperlihatkan
penurunan ketebalan epidermis, jumlah sel
77
radang dan ekspresi COX-2 yang lebih tinggi
dibandingkan dengan kelompok krim teh hijau
dan kelompok Vitamin C seperti disajikan pada
tabel III. Hasil uji statistik antara kelompok ini
dengan kontrol normal pada parameter jumlah sel
dengan ekspresi COX-2 menunjukan hasil berbeda
tidak signifikan (p>0,05). Sedangkan hasil uji
statistik dengan kontrol negatif memberikan hasil
berbeda bermakna (p<0,05). Berdasarkan hal
tersebut dapat dikatakan bahwa krim ekstrak teh
hijau dengan penambahan Vitamin C 1%
memberikan aktivitas antiinflamasi yang lebih
optimal karena mampu menurunkan jumlah sel
dengan ekspresi COX-2 sampai pada kondisi yang
tidak berbeda bermakna dengan kontrol normal.
Kombinasi keduanya ternyata mampu
meningkatkan aktivitas anti-inflamasi karena
pada komposisi krim yang hanya mengandung
salah satu saja antara ekstrak teh hijau dan
Vitamin C masih memberikan perbedaan yang
bermakna dengan kontrol normal.
Hasil statistik antara kelompok krim
ekstrak teh hijau dengan penambahan Vitamin C
dengan kelompok krim Vitamin C saja
menunjukkan hasil berbeda bermakna (p<0,05)
pada parameter jumlah sel dengan ekspresi COX-2
dan ketebalan epidermis sedangkan pada sel
radang tidak berbeda signifikan (p>0,05). Apabila
dibandingkan dengan kelompok krim ekstrak teh
hijau (tanpa penambahan Vitamin C)
menunjukkan perbedaan tidak bermakna
(p>0,05) pada parameter jumlah sel dengan
ekspresi COX-2 namun berbeda bermakna pada
parameter ketebalan epidermis dan sel radang.
Hal tersebut semakin memperkuat bahwa
penambahan komponen Vitamin C dalam krim
ekstrak teh hijau memberikan efek sinergisitas
yang mengakibatkan terjadinya penurunan
ketebalan epidermis, jumlah sel radang dan
jumlah sel dengan ekspresi COX-2 lebih optimal.
Peran Vitamin C dalam formulasi ini adalah
mampu meningkatkan stabilitas EGCG dalam
ekstrak teh hijau (Sugihartini dkk., 2016).
Kecepatan degradasi EGCG dalam krim dengan
adanya antioksidan Vitamin C menurun sehingga
mampu memberikan efek antiinflamasi yang lebih
baik dibandingkan jika tidak ada Vitamin C.
KESIMPULAN
Penambahan Vitamin C konsentrasi 1%
pada krim ekstrak teh hijau mampu
meningkatkan kemampuan anti inflamasi ekstrak
teh hijau, nampak dengan terjadinya penurunan
jumlah sel radang (p<0,05), tebal epidermis
(p<0,05) dan sel dengan ekspresi COX-2 (p>0,05)
pada inflamasi mencit jantan galur BALB/C yang
diinduksi dengan Croton Oil.
78
UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian ini terselenggara dengan dana
Hibah Bersaing DIKTI pada tahun 2014.
DAFTAR PUSTAKA
Butt, M.S dan Sultan, M.T., 2009, Green Tea:
Nature’s Defense against Malignancies,
Critical Reviews in Food Science and
Nutrition, 49:463–473.
Cabrera, A.R., dan Gimenez, R., 2006, Beneficial
Effect of Green Tea-a Review, Journal of
American College Nutrition, 25:79-99.
Dona, M., Dell’Aica, I., Calabrase, F., Benelli, R.,
Morini, M., Albini, A., Garbisa, S.,
2003,Neutrophil Restraint by Green Tea :
Inhibitor of Inflammation, associated
angiogenesis, and pulmonary fibrosis.,
Journal Immunology, 15;170(8):4335-41.
Fang J.Y., Tsai T.H., Lin Y.Y., Wong W.W., Wang
M.N., Huang J.F., 2007,Transdermal delivery
of tea cathecins and theophylline enhanced
by terpenes, A mechanistic studyBiological
Pharmacy, 30:343-349.
Kumar, N., Shibata, D., Helm, J., Coppola, D., Malata,
M., 2007, Green Tea Polyphenols in The
Prevention of Colon Cancer, Frontiers in
Bioscience, 12:2309-2315.
Lan, M., Wan, P., Wang, Z.Y., Huang, X.L., 2012,
Analisis GC-MS Komponen Kimia dalam
Minyak Biji Croton Tiglium, Zhong Yao Cai
Journal, 35 (7) : 1105-8.
Lee, S.K., Kang, J.S., Jung, D.J., Hur, D.Y., Kim, J.E.,
Hahm, E., Bae, S., Kim, H.W., Kim, D., Cho,
B.J., Cho, D., Shin, D.H., Hwang, Y.I., dan Lee,
W.J., 2008, Vitamin C suppresses
proliferation of the human melanoma, cell
SK-MEL-2 through the inhibition of
cyclooxygenase-2 (COX-2) Expression and
the Modulation of insulin-like growth factor
II (IGF-II) production, Journal of cellular
physiology, 216 (1) : 180-188.
Row K and Jin Y., 2006, Recovery of Cathecin
Compound From Korean Tea by Solvent
Extraction. Bioresource Technology,
97:790–793
Saryono, 2013, Potensi Teh Hijau dalam
Penyembuhan Luka : Sistematic Review,
Prosiding, Hal 202-205.
Shah, B., Seth, A., and Maheshwari, K., 2011, A
Review on Medicinal Plants as A Resource
of Anti-Inflammatory Agents, Research
Journal of Medicinal Plant, 5(2): 101–115
Shimizu, M., Deguchi, A., Joe, A.K., Mickoy, J.F.,
Moriwaki, H., Weinstein, I.B., 2005, EGCG
Inhibits Activation of HER3 and expression
of Cyclooxigenase-2 in Human Colon
Traditional Medicine Journal, 22(2), 2017
 Cancer Cells, Journal Experimental
Theraupetic Oncology, 5(1),69-78
Simmons, D.L., dan Moore, 2000, COX-2 Inhibition,
Apoptosis and Chemoprevention by
Nonsteroidal Anti-inflammatory Drugs,
Current Medicinal Chemistry, 7, 1131-1144.
Sugihartini, N., Fudholi, A., Pramono, S., dan
Sismindari, 2011, Optimation Composition
of Oleic acid, Propylene glycol and Volatile
Oil of Curcuma xanthorrhiza as Enhancer of
Transport of Epigalocathecin gallat in
Green Tea Extract with Simplex Lattice
Design Methode, Jurnal Bahan Alam
Indonesia, 7(7) 393-395.
Sugihartini, N., 2013a, Optimasi Komposisi
Enhancer dan Emulgator pada Formulasi
Krim Fraksi Etil Asetat Ekstrak Teh Hijau
(Camellia sinensis, L) sebagai Sediaan
Topikal Antiinflamasi, Disertasi, Program
Pascasarjana Fakultas Farmasi UGM,
Yogyakarta, 78-79
Sugihartini, N., Zainab, Sophia, V., 2013b,
Peningkatan Efektivitas Krim ekstrak Teh
Hijau sebagai Sediaan Anti-inflamasi
Traditional Medicine Journal, 22(2), 2017
dengan Penambahan Antioksidan, Laporan
Penelitian Hibah Bersaing, Fakultas
Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan,
Yogyakarta
Sugihartini, N., Susanti, H., Zaenab, Hanifah, H.,
Marlina, S.A, 2016, Stabilitas Epigalokatekin
galat dalam Krim Ekstrak Teh Hijau dengan
Variasi Konsentrasi Antioksidan Vitamin C
1% dan Vitamin E 1%, Jurnal Farmasi Sains
dan Komunitas, 13(2), 52-56
Telang, Pumori Saukar, 2013, Vitamin C in
Dermatology, IDOJ, 4(2) : 143-146.
Tipoe, G.L., Leung, T.M., Hung, M.W., Fung, M.L.,
2007, Green Tea Polyphenols as an Anti-
oxidant and Anti-inflammatory Agent for
Cardiovascular Protection., Cardiovasculer
Hematological Disorder Drug Targets, 7 (2) :
135-44.
Zieve, D., 2009, In Vitamin C: MedlinePlus Medical
Encyclopedia, diakses dari
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/enc
y/article/002404.htm pada tanggal 28
Desember 2014.
79