Jumal Sains& Matematika(JSM) tssN0E54-0675

Volumel8 Nomor 1.Januari2010 I -6

ArtikelPenelitian:

PENENTUAN TOTAL ANTOSIAIIIN I}ARI KSLOPAK BUNGA ROSELA

(Hibiscussabdariffa L) DENGAN METODE MASERASI DAN SOKSHLETASI
MeinySuzery,Sri Lestari, BambangCahyono*
JurusanKimia FakultasMIPA UniversitasDiponegoroSemarang,Jl. Prof. Sudharto,TembalangSemarang50275
(Phone:6244-7 6480824,* E-mul: bambang-cahyono@undip.ac.id)

ABSTRAK-- Rosela (Hibiscas sabdarffi L.) merupakansalah satu tanamanyang mengandungzat

wama antosianin.Tujuandari penelitianini untuk mengetahuipengaruhmetodeekstraksiterhadaptotal antosianin
rosela(I/lbiscas sabdariffa).Dalarnpenelitianini dilakukanekstraksipigmen antosianinmelalui metodemaserasi
5"C, 25oC dan soxhletasi,penentuanpanjang gelombangmaksimum ekstrak hasil isolasi dan penentuantotal
antosianin. Dari penelitian yang sudah dilakukan terhadap ekstrak bunga rosela (Hibiscus sabdarffi L.)
didapatkanrendemendari maserasi5oC sebesar75,1o/o, maserasi25"C sebesar17,7oA,dan soxhletasisebesar
PengukuranImax menuqjukanbahwapanjanggelombangmaksimumeksfak etanolhasil maserasi5oC,
10,4o/o.
25oCdanboxhletasisebesar545 nm. Metodemaserasi5oCmenghasilkan total antosianinsebesar77,26mgll00g,
maserasi25oC sebesarl28,76mgll00g dan soxhletasisebesar86,83mg/100g.Hasil keseluruhanmenunjukan
metodeyang paling efektif untuk mengeksfaksipigmen antosianinrosela adalahdenganmetodemaserasi25oC
karenamemberikanrendemenekstak dantotal antosianinpaling tinggi.

Kato kunci; roselq,pigmen antosianin,maserasi,soxhletasi

ABSTRACT* Roselle(Hibkcas sabdarffi L) is one of the plants that contsin anthocyaninpigment.

Thepurposesof this research is to study influence %traction methodof total anthocyaninsroselle. Extraction
anthocyaninpigment was donewith maceration5"C and 25"C methodfor 24 hours qnd soxhletationfor 8 hours
using ethanol solvent, determination of mmimum wavelengthfrom results of anthocyanin extraction, qnd
measurementof total anthocyanin.Theresultsof this researchwere theyield of produced by mqceration5oCand
25"C methodand soxhletationwere I5.l%, 17.7%and 10.4%o, respectively.Ma)cimunwavelengthof ethanolic
extract from maceration 5"C and 25"C method and soxhletation was 545 nm. The total anthocyaninfrom
maceration5"C and 25"Cmethodandsoxhletationwere77.26mg/1a0g 128.76mg/I00 g, and 86.83mg/100g,
respectively.Therefore, the ffictive methodfor etetractionof anthocyaninfrom roselle callxes roselle was
maceration25"C methodthatgivingyield and total anthocyaninwashighest.

Keywotd: rcselle, dfihocydnittptgnew, mdcerafion,soxhlekilio

PEIIDAITULUAN mengandungpigmen merah empat antosianin,

Rosela (Hibiscus sabdarifa L.)
termasuk famili Malvaceae yang merupakan
tanarnan tropis yang banyak tumbuh di
Indonesia.Kelopak bunganyabiasa digunakan
pada pengobatan tradisional, seperti
pengobatan penyakit batuk, gangguan
pencernaan, menurunkan tekanan darah,
merangsang gerak peristaltik usus serta
berpengaruhterhadap fungsi diuretik Telah
dilaporkan bahwa bunga ini mengandung
gossipetin, glukosida, bibiscin, antosianin
hibiscus,dan asam protocatechuichibiscustrl.
Warna merah yang bagus dan rasa yang unik
menjadikan rosela sebagai produk makanan
yang berhargal2l.Se3at awal 1970-an,rosela
mendapatbanyak perhatian karena berpotensi
sebagai sumber pewarna makanan alami,
farmasi dan kosmetik. Kelopak bunganya
yakni delphinidin 3-sambubiosida,siiuiidiit 3-
sambubiosidq delphinidin 3-glukosida dan
sianidin3-glukosidapJ.
Antosianin termasuk golongan
senyawa flavonoid, merupakan kelompok
terbesar pigmen alami pada tumbuhan yang
larut dalam ak yang bertanggungjawab untuk
memberikan warna pada bunga, buah dan
sa5ruran. Antosianin rosela dapat juga
bermanfaat bagl kesehatan sebagai sumber
antioksidan. Hal ini disebabkan senyawa
polifenolik ini merupakan glikosida turunan
polihidroksi dan polimetoksi dari,., 2-
phenilbenzopirilium ataugaramflavilium t"r.
Metode untuk memperoleh senyawa
antosianinyang pemah dilakukan sebelumnya
antaralain dengansupercriticalfluid, eksttaksi

Metny Suzery, Sri Lestari, Bambang Calryono:penentuan total antosianin..

'ArtikelPenelitian
air, ekstraksipelarut organik, dan lain-lainlrl,
Cara tersebut memiliki kelebihan dan
kekuranganmasing-masingsupercriticalfluid
diketahui lebih ramah lingkungan,selekfif dan
cepat dalam proses ekstraksi tetapi
membutuhkantekanan yang tinggi sehingga
biaya ekstraksi lebih mahal dibandingkan
denganekstraksipelarutbiasa.Oleh karenaitu,
ekstraksi antosianin dari rosela dilakukan
dengancarayang sederhana, yakni dengancara
maserasit'I dansoxhletasil'I.
Percobaanini sangatpenting dilakukan
mengingatstruktufkimia antosinnincendetun g
kurang stabil dan mudahmengalamidegradasi,
stabilitas antosianin diantaranya dipengaruhi
oldh pH dirn ten'iperatuf61.Aritosianin lebih
stabil pada larutan asamdengannilai pH yang
rendahdibandinglarutanbasadenganpH yang
tinggi. Disampingitu, laju degradasiantosianin
meningkat selama proses ekstraksi seiring
denganmeningkatnyatemperatur.
Hingga saat ini, suatu penelitian yang
mencoba membandingkan metode ekstraksi
pigmen antosianinkelopakbungarosela,belum
pernah dilaporkan. Hasil penelitian ini
diharapkandapat digunakan dalam penemuan
metode ekstraksi yang lebih tepat terhadap
kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.)
dalam usaha untuk mendapatkan total
antosianinpaling tinggi.
METODOLOGI
Bahan dan alat
Bahan baku yang digunakan yaitu kelopak
bungarosela kering diperoleh dari perkebunan
rosela di Mijen, KabupatenSemarang.Bahan
kimia yang digunakanetanol 96%, HCI 0,2N,
KCl, (CH3COOH)K,akuades.
Peralatanyang utama adalahSpektrofotometer
UV-Vis. waterbatchdanalat-alateelas.
Metode
A. Ekstraksi pigmenantosianin
Isolasi pigmen antosianindari bunga rosela
dilakukandengan3 metodeyaitu maserasipada
suhu 5oC dan 25"C, serta dengan metode
soklet.
Maserasi 5oC. Maserasi sampel dengan cara
merendam 100 gram serbuk kelopak bunga
rosela dengan 30U mL pelarut etanol pada
J. Sains& Mat. Irol. 18Na. I, &m. 2010
temperefur 5oe selama 24 ianrtll, Kemudian
disaringdandiambil filtratnya.
Maserasi 25oC. Maserasisampeldengancara
merendam100 gram serbuk kelopak bunga
roseladimaserasidengan300 mL pelarutetanol
pad4.temperaturkamar atau 25"C selanta24
jamt't. Kemudian disaring dan diambil
filtratnya.
Sohshletasi. Sebanyak 100 gram serbuk
kelopak bungaroseladiekstraksimenggunakan
soxhlet dalam pelarut etanol pada temperatur
78"C selama 8 jamtsl, kemudian diambil
filtratrya.
B. Penentuanlmnlaimum Ekrtrak
Penentuanl" maksimumekstrakkelopak bunga
rosela dilakukan denganmetode spektroskopi
UV-Vis. Sekitar 1 mL dari masing-masing
ekstrak hasil maserasi5oC dan 25"C, serta
ekstrak hasil soxhletasi dilarutkan dalam
pelarut etanol menjadi 10 mL, selanjutnya
absorbansi diukur pada pa4iang gelombang
400-800nm.
C. Penentuan Total Antosianin dengan
Metode pI{ Differensiall7l
Penetapan antosianindilakukandenganmetode
perbedaanpH yaitu pH 1,0 dan pH 4,5. Pada
pH 1,0 antosianinberbentuksenyawaoxonium
dan pada pH 4,5 berbentuk karbinol tak
berwarna.Hal tersebutdapatdilakukan dengan
membuatsuatualikuot larutanantosianindalam
air yang pH-nya 1,0 dan 4,5 untuk kemudian
diukur absorbansinya.
a Pembaatanluratan pH 1,0 danpH 4,5
Larutan pH 1,0. Sekitar 1,490 gram KCI
dilarutkan dengan akuades dalam tabung
volumetrik 100 ml sampai batas. Kemudian
campurkan.25 ml larutan KCI dengan67 ml
HCI 0,2 N. TambahkanHCI kembalijika perlu
sampaipH mencapai1,0+ 0,1.
Larutan pH 4,5. Sekitar 1,640gram potasium
asetatdilarutkandenganakuadesdalamtabung
volumetrik 100 ml sampaibatas.Tambahkan
larutanHCI 0,2N sampaipH 4,5* 0,1.
b. Pengukuran dan Perhitungan konsentrasi
antosianin total
 . ^" Arttkel Penelitian

Dua lar+rtansampel disiapkan dari masing- mula distandardisasimelalui pengukurankadar

masingfiltrat, pada sampelpertamadigunakan air sehinggadapatdiketahuiberat sampelbebas
larutan pH 1,0 dan untuk sampel kedua kandunganair yang diekshaksi.Dari penelitian
digunakanlarutanpH 4,5, kemudianabsorbansi yang dilalrukan diperoleh kadar air sebesar
dari setiap larutan diukur pada panjang 13,63Yo.
gelombang510 dan 700 nm. Absorbansidari Sampel berupa serbuk bunga rosela
sampel yang telah dilarutkan (A) ditentukan sebanyak+ i00 g diekstraksi dengan etanol
denganrumus: menggunakan3 metode yang berbeda yakni
maserasi pada 5oC dan temperatur kamar
A : (Arto- Azoo)es
rp - (Asro- Azoo)pHq,s (25"C) selama24 jam serta denganmetode
soxhletasiselama 8 jam. Hal ini bertujuan
Kandungan pigmen antosianin pada sampel
untuk mengetahuiefektivitas metodeekstraksi
dihitung denganrumus: pada anrcsiiiniri dengarnkondisi tenipefatui
yang berbeda.Antosianin merupakanmolekul
Absorbansi Vd yang tidak stabil. Stabilitas antosianin
% Antosianin = xMW* *
exL Wd diaritaranya dipenganihi oleh pH dm
I temperaturt6l.Sedangkan,pertimbanganlama
xl00%
1000 waktu ekstraksi dikarenakan waktu, tenaga
Keterangan: maupunekstak yang diperoleh.
8 = absorptivitasmolar Sanidin-3-glukosida Hasil ekstraksi dipekatkan dengan
=26900Ll (mol.cm) water batch, sehinggadiperoleh cairan kental
L : lebarkuvet: I cm dan bebas pelarut. Penggunaan metode
M/{ : beratmolekulSianidin-3-elukosida ekstraksi yang berbedamemberikanpengaruh
(449,2g/mol) yang berbeda nyata pada terhadap rendemen
Vd = volumeakhir pengenceran ekstrakpekat pigmen bunga rosela.Hasil rata-
Wd : beratekstrakkering (g) rata rendemen disajikan pada Tabel 4.1.
Berdasarkan hasil perhitungan dapat dilihat
IIASIL DAI\TPEMBAIIASAIY bahwa ekstraksi dengan maserasi pada
temperatur kamar (25"C) menghasilkan
Sampelbunga rosela kering (Hibiscus rendemen yang lebih besar dibandingkan
sabdariffa L.) yafuedipefolch dad pcfkeburian dengan maserasi 5oC dan soxhletasi.
rosela di Mijen, Kabupaten Semarang,mula-

Tbbel I Hasil ekstaksi deneanmetodemaserasi5"C,25"C dansoxhletasi

Metode Waktu Sebelum Sesudah Berat Rendemen
fiam) pemekatan pemekatan Ekstrak
I Maserasi5oC 24 MerahTua Cairankental t 5 , lt 7 2 g 15,IOA
merahpekat
2 Maserasi25oC 24 MerahTua Cairankental 17,6884g 17,7y6
merahpekat
Soxhletasi MerahTua Cairankental 10,4242g l0,4yo
merahpekat

Pada data I dan 2 terjadi kenaikan kelarutan semakin meningkat dan mobilitas
rendemen.Hal ini menunjukanbahwadengan partikel meningkat, sehinggainteraksi antara
meningkatnya temperatur maka rendemen pelarut denganzat yang akan diekstrak lebih
ekstrak yang dihasilkan lebih besar, karena mudah dan sering terjadi. Tetapi pada data 2

Meiny Suzery, Sri Lestari, Bambang Calryono: penentuan total mttosianin...

. Artikel Penelitian
dan 3 tidak terjadi kenaikan rendemen
meskipun ada kenaikan temperatur, hal ini
karena pada soxhletasiwaktu ekstraksi yang
digunakan lcbih singkat, Dimungkinkan jika
waktu ekstraksi lebih lama maka rendemen
yang dihasilkan lebih besar, karena
terpenuhinya waktu kontak antera pelarut
untuk berinteraksi dengan zat yang akan
diekstrak. Namun hal ini tidak dilakukan
mengingat struktur antssianin yang tidak
stabil, karena dengan memanaskanlarutan
antosianin terlalu lama menyebabkan
kesetimbangan akan bergeser ke bentuk
kalkon sehinggamenurunkankuantitasbentuk
kation flavilium yang berwarnatul.
Tabel? Data penentuan panians gelombang maksimum ekstrak
Panjang gelombang (nm)
Ekstrak
{nrserasi SoC)
665 0.035
65s
545 0,471
Berdasarkan data di atas, panjang
gelombang maksimum yang diperoleh pada
pengukuran ekstrak etanol rosela hasil
maserasi5"C,25"C dansoxhletasisebesar545
nm. MenurutHarbornet8l, antosianinmemiliki
rangedaerahspektrumtampakpada475-550
nm. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak
etanol rosela hasil maserasi5oC, 25"C dan
soxhletasi mengandung antosianin. Panjang
gelombang yang terukur adalah panjang
gelombang dari empat antosianin yang
terdapat dalam rosela yakni delphinidin-3
sambubiosid4 sianidin-3 sambubiosida,
delphinidin-3 glukosid4 dan sianidin-3
glukosida.
Antosianin berada dalam beberapa
bentuk kesetimbangan.Studi kinbtika dan
termodinamikayang dipelajari secaraumum
menerima susunan perbedaan tranformasi
(transferproton,isomerisasidantautomerisasi)
J. Sains& Mat. Yol. t8 No. l, Jm. 20lA
Struktur molekul kalkon (R' = glikosil dan R"
: H ataugula. Rl dan& = H, OH atauOCH:).
Penentuan l, maksimum ekstrak
kelopak bunga rosela dilakukan dengan
metode spektroskopi UV-Vis. Sampel
diencerkan dalam pelarut etanol dan diukur
absorbansinya pada panjanggelombang400-
800 nm. Adapun data yang dihasilkan dari
standardisasi antosianin masing-masing
ekstrakdapatdilihat padaTabelZ.
Absorbansi
Ekstrak Ekstrak
(maserasi25eC) (Sokletast)
0,085
0,477
0.671 0,360
kation flavilium dari antosianin sederhana
pada berbagai kondisi pH. Pada larutan asam
kuat (di bawah pH 2) kation flavilium lebih
dominan dan memberikan larutan antosianin
yang berwarna merahl61.
dilakukan
Penetapan antosianin
dengan metode perbedaanpH yaitu pH 1,0 dan
pH 4,5. Pada pH 1,0 antosianin berbentuk
senyawa oxonium. Keadaan yang semakin
asarn apalagi mendekati pH I akan
menyebabkan semakin banyaknya pigmen
antosianin berada dalam bentuk kation
flavilium atau oxonium yang berwarna dan
pengukuran absorbansi akan menunjukkan
jumlah antosianin yang semakin besale'l0l.
Pada pH 4,5 yak,ai pada asam yang lemah
kation flavilium berubah ke bentuk yang lebih
stabil hemiketal yang tak berwama dan bentuk
kalkont6l. Perbedaan absorbansi antara dua

larutan buffer sepadan dengan
Katio flryiliun: mmge-mgu
pH l,o
Struktur kation flavilium dan bentuk hemiketal. R: H atau subtituen glikosidalTl
Sampel diukur pada panjang
gelombang510 dan 700 nm, meskipunpada
penentuanl. maksimum ekstrak diperoleh ?t
maksimum sebesar 545 nm tetapi pada
perhitungan total antosianin digunakan
panjang gelombang510 nm. Karena dalam
pengukuranabsorbansipH 1,0 pada panjang
gelombang 510 nm memberikan absorbansi
yang lebih tinggi dibanding pada panjang
gelombang545 nm. Hal ini sesuaidengandata
yang disajikan pada Tabel 4.3. Menurut
Tensiskadkkt101padapanjanggelombang510
Tabel4 Total antosianin rosela dengan menggunakan metode ekstraksi yang berbeda
Metode ekstraksi Total Antosianin (mg/100g)
Rosela
Maserasi5oC
Maserasi25"C
Soxhletasi
Hasil percobaanmenu4jukanmetode
maserasi25oC menghasilkantotal antosianin
tertinggi dibandingkandenganmaserasi5oC.
Hal ini disebabkan adarrya kenaikan
temperatur sehingga antosianin yang
terekstrak lebih banyak sedangkankenaikan
temperaturyang terjadi pada soxhletasitidak
mengakibatkannaiknya total antosianinpada
ekstrak. Hal ini disebabkanwaktu ekstraksi
yang digunakan lebih singkat mengingat
struktur antosianin yang cenderung tidak
stabil. Dari penelitianChumsril'r didapatkan
total antosianin dari kelopak bunga kering
rosela*502,33 mg/100gram,lebih besardari
total antosianin yang didapatkan dari hasil
penentuantatal mtasianin...
MeinySwery, SriLestizri,BambangCahyana:
-" Artikel Penelitian
pigmen antosianin monomeri.
oH-
Batuk hffiiketd : tid*bemama
pH 4,5
nm adalah panjang gelombang maksimum
untuk sianidin-3-glikosida sedangkanpanjang
gelombang 700 nm untuk mengoreksi endapan
yang masih terdapat dalam sampel. Jika
sampel benar-benar jernih maka absorbansi
pada 700 nm adalah 0. Tetapi, pada penelitian
ini nilai absorbansi pada panjang gelombang
700 nm tidak memberikan nilai 0, hal ini
disebabkan masih adanya partikel-partikel
kecil dalam sampel.
Total Antosianin (mg/100g)
setelahdikoreksi dengankadar air
66,72 77,26
III,21 128,76
74 86,83
maserasi 23"C. Dengan demikian, kelopak
bunga rosela yang diperoleh dari perkebunan
rosela di Mijen, KabupatenSemaranghanya
murgandung25% totzl antosianindari rosela
yangberasalProvinsiSongkhla,Thailand.Hal
ini dipengaruhi oleh beberapa faktor
diantaranya bibit, tempat tumbuh, i\l!tn,
kondisi(umurdancarapanen)dari sampellru.
Dari penelitian ini dapat disimpulkan
bahwa metode yang paling efektif untuk
mengekstraksi pigmen antosianin rosela
adalahdenganmetodemaserasi25"C karena
memberikan rendemen ekstrak l7,7oh dan
total antosiann128,76mg/l00 g.
Artikel Peneltttim

SIMPULAFI
5 . Dahiru, D., Obi, O. J. dan Umaru, H.,
Dari penelitian yang sudahdilakukan
2003,Effect of Hibiscussabdarffi calyx
terhadap ekstrak kelopak bunga rosela
exhact on carbon tetrachloride induced
(Hibiscus sabdarffi L.) menunjukkanbahwa
liver damage, Biokemistri,Vol 15 (1), pp
metode ekstraksi dengan maserasi pada
27-33
temperatur kamar (25"C) memberikan
rendemen ekstrak yang paling tinggi yakni 6' Jordheim; Monica,; 2007; "Isolation;
l7,7yodibandingmaserasi5"C dan soxhletasi. Identification and Properties of
Di samping itu, metode maserasi pada Pyranaoanthocyanins and Athocyanin
temperatur kamar (25"C) juga memberikan Forms";Universi-tyof Bergen,Norway
total antosianintertinggiyalni 128,76mg/I00 7. Worlstad ,Ronald E., Durst, Robert W.,
g dibandingkanmetode maserasi 5"C dan
and Leeb, Jungmin., 2005, "Tracking
soxhlctasi, color andpigmentchangesin anthocyanin
products", Trends in Food Science &
DAFTAR PUSTAKA
Technolory,l6,423428
1. kg, Chau-jong, 2008, 'oHibiscus
8. Harborne,J.8., 1987,MetodeFitokimia:
Anthocyanins for Inhibiting Cancers",
Penentuan cara modern menganalisis
UnitedStatesPatent,20080113050
tumbuhan, terbitan kedua, ab. K.
2. Halimatul,S.M.N.,Amin, I., Mohd.-Esa, Padmawinata dan I. Soediro. Penerbit
N., Nawalyatt,A.G.dan Muskinah,S.M., ITB, Bandung
2007, Protein Qualrty of Roselle
9. Glusti,M.M., diui Worlstail,R. E., 2001,
(Hibiscns sabdarffi L.) Seeds,ASEAN
"Charactenzation and Measurement of
FoodJournal,Yol 14(2),pp 131-140
Anthocyanins by UV-Visible
3. Chumsri,P., $irichoteoA., dan ltharat,A., Spectroscopy'',OregonStat€Ufliversity.
2007, Studiesof the optimumconditions
10. Tensiska.,Sukarminah,Een.,danNatalia,
for the extraction and concentrationof
Dita., 2006, 'oEkstraksiPewarna Alami
roselle (Hibiscus sabdarffi Linn.)
dari Buah Arben (Rubus idaeus (Linn.))
extract, SongklanakarinJ. Sci. Technol.,
danAplikasrnyapadaSistemPangan"
Vol30 (Suppl.l), pp 133-139
11. Paulose TT., 1970, Development of
4. Margo, P.H., Levi, M.A.B., Scarminio,
ginger in lndia, India Spices,Vol 7 (2),
I.S., Poppi,R.J.danTrevisan,M.G, 2005,
hal2
Exploratory Analysis of Simultaneous
Degradation of Anthocyanins in the
Calyces of Flowers of the Hibiscus
sabdarffi Speciesby PARAFACModel,
Analytical Sciences,Vol 2 1

J. Sains & Mat. VaL lE Na. 1, Jan. 2010