Hidrolisis Pati Enzimatis

Raysha Ramadhanti Putri Adam1

Program Studi Ilmu Kelautan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Padjadjaran
Jl. Raya Bandung-Sumedang, KM 21 Jatinangor, Sumedang, Jawa barat, 45363, Indonesia

*Korespondensi: raysha20001@mail.unpad.ac.id

ABSTRACT

Carbohydrate, an important component for our body, can be sourced from flour and can be divided into
three types, monosaccharides, oligosaccharides, and polysaccharides. Monosaccharides are the simplest
carbohydrates consisting and oligosaccharides are polymers consisting of 2 to 10 monosaccharides.
Meanwhile, polysaccharides are carbohydrates consisting of many monosaccharides which can function as
texture boosters and energy sources. Oligosaccharides and monosaccharides can be obtained from the
hydrolysis of polysaccharides with the help of enzymes or acids. Starch is carbohydrate homopolymers
which consists of two fractions, amylose which is dissolved and amylopectin which is insoluble. Glucose
is an aldohexose that included in aldehyde group, which means it has 6 carbon chains and can be obtained
from the hydrolysis of starch through acid hydrolysis or enzyme hydrolysis. Amylase enzyme is used for
enzymatic hydrolysis of starch. Amylase can be divided into 3, α-amylase, β-amylase, and glucoamylase.
The purpose of this experiment is to react the sample containing starch with amylation enzyme and then
calculate the absorbance of reduced sugar using a spectrophotometer and a control reagent. The equipments
used in this experiment were beaker glass, measuring flask, test tube, dropper pipette, analytical balance,
hot plate, spectrophotometer, and incubator. The materials used in this experiment were rice flour, sugar,
wheat flour, amylase enzyme, DNS reagent, iodine, and distilled water. The experiment was carried out in
four stages consisting of preparing the starch solution, preparing the standard solution, using a
spectrophotometer, and testing the amylase enzyme activity. The absorbance of reduced sugar from the 0.1
ml and 0.25 ml flour samples were 0.0258 and 0.0181 and 0.0561 and 0.0410, respectively. Meanwhile,
the absorbance of reduced sugar in the flour samples 0.1 ml and 0.25 ml were 0.0701 and 0.0697 and 0.0703
and 0.0702, respectively. In this experiment, a graph was made using the least squares method to determine
the best a and b parameters.

Key words: Carbohydrate, starch, amylase enzyme

ABSTRAK

Karbohidrat merupakan komponen tubuh yang sangat penting dan salah satunya bersumber pada tepung.
Karbohidrat dapat dibagi menjadi 3, yaitu monosakarida, oligosakarida, dan polisakarida. Monosakarida
merupakan karbohidrat paling sederhana yang hanya terdiri dari 5 atau 6 atom C. Oligosakarida merupakan
polimer yang terdiri dari 2 sampai 10 monosakarida yang bersifat larut dalam air. Polisakarida merupakan
karbohidrat yang terdiri dari banyak monosakarida yang dapat berfungsi sebagai penguat tekstur dan
sumber energi. Oligosakarida dan monosakarida dapat diperoleh dari proses hidrolisis polisakarida dengan
bantuan enzim atau asam. Salah satu contoh homopolimer karbohidrat adalah pati yang terdiri dari dua
fraksi, yaitu amilosa yang bersifat terlarut dan amilopektin yang bersifat tidak larut. Glukosa merupakan
aldoheksosa yang artinya memiliki 6 rantai karbon dan gugus aldehid dan dapat diperoleh dari hasil
hidrolisis pati melalui hidrolisis asam atau hidrolisis enzim. Digunakan enzim amilase untuk hidrolisis pati
secara enzimatis. Amilase dapat dibedakan menjadi 3, yaitu 𝛼 -amilase, 𝛽 -amilase, dan glukoamilase.
Tujuan dari percobaan ini mereaksikan sampel uji yang mengandung pati dengan enzim amilase lalu
dilakukan perhitungan absorbansi dari gula yang tereduksi dengan bantuan spektrofotometer dan reagen
DNS. Alat yang digunakan dalam percobaan ini adalah beaker glass, labu ukur, tabung reaksi, pipet tetes,
neraca analitik, hot plate, spektrofotometer, dan inkubator. Bahan yang digunakan dalam percobaan ini
adalah tepung beras, gula, tepung terigu, enzim amilase, reagen DNS, iodin, dan akuades. Percobaan
dilakukan dengan empat tahap yang terdiri dari penyiapan larutan pati, penyiapan larutan standar,
penggunaan spektrofotometer, dan pengujian aktivitas enzim amilase. Absorbansi dari gula yang tereduksi
dari sampel tepung terigu 0,1 ml dan 0,25 ml beturut-turut adalah 0,00258 dan 0,0181 serta 0,0561 dan
0,0410. Sedangkan, untuk absorbansi gula tereduksi pada sampel tepung terigu 0,1 ml dan 0,25 ml berturut-
turut adalah 0,0701 dan 0,0697 serta 0,0703 dan 0,0702. Pada percobaan ini dibuat grafik dengan
menggunakan metode kuadrat terkecil untuk mengetahui parameter a dan b terbaik.

Kata kunci: Karbohidrat, pati, amilase

1. Pendahuluan pati akan bersifat kering, kurang lekat, dan

Karbohidrat merupakan komponen selain
lemak dan protein yang dibutuhkan tubuh.
Karbohidrat ini bersumber pada berbagai bahan
pangan seperti gula, madu, tepung, biji-bijian,
dan lain-lain. Karbohidrat memiliki rumus
empiris (CH2O)n yang di alam diperoleh dari
reaksi fotosintesis antara karbon dioksida dan air
yang dibantu dengan cahaya matahari
(Risnoyatiningsih, 2011). Karbohidrat dapat
dibagi menjadi 3, yaitu monosakarida,
oligosakarida, dan polisakarida. Monosakarida
merupakan karbohidrat paling sederhana yang
hanya terdiri dari 5 atau 6 atom C. Jika suatu
monosakarida memiliki satu gugus aldehid,
disebut aldose dan jika suatu monosakarida
memiliki satu gugus keton, disebut ketosa.
Oligosakarida merupakan polimer yang terdiri
dari 2 sampai 10 monosakarida yang bersifat
larut dalam air. Polisakarida merupakan
karbohidrat yang terdiri dari banyak
monosakarida yang dapat berfungsi sebagai
penguat tekstur dan sumber energi
(Risnoyatiningsih, 2011). Oligosakarida dan
monosakarida dapat diperoleh dari proses
hidrolisis polisakarida dengan bantuan enzim
atau asam.
Salah satu contoh homopolimer karbohidrat
adalah pati, yaitu homopolimer glukosa yang
memiliki ikatan α-glikosidik (Risnoyatiningsih,
2011). Pati terdiri dari dua fraksi yang dapat
dipisahkan dengan air panas. Fraksi pertama
yaitu amilosa yang bersifat terlarut dan fraksi
kedua merupakan amilopektin yang bersifat tidak
larut. Jika kandungan amilosa pada pati banyak,
bersifat higroskopis atau mudah berikatan
dengan molekul air (Risnoyatiningsih, 2011).
Amilosa dapat dihidrolisis dan akan
menghasilkan maltosa, glukosa, dan
oligosakarida lainnya. Amilopektin memiliki
rantai molekul glukosa yang sulit diputus dan
biasanya dihidrolisis menggunakan asam
(Risnoyatiningsih, 2011).
Glukosa merupakan aldoheksosa yang artinya
memiliki 6 rantai karbon dan gugus aldehid
(Risnoyatiningsih, 2011). Seperti yang telah
dijelaskan, glukosa dapat diperoleh dari hasil
hidrolisis pati melalui hidrolisis asam atau
hidrolisis enzim. Hidrolisis pati secara enzimatis
merupakan pemecahan molekul amilum menjadi
lebih sederhana seperti dekstrin, maltotriosa,
maltosa, dan glukosa dengan enzim amilase.
Enzim lebih sering digunakan untuk hidrolisis
karena bersifat spesifik sehingga terjadinya
kerusakan warna dan sisa residu akan sedikit.
Amilase dapat dibedakan menjadi 3, yaitu 𝛼 -
amilase, 𝛽 -amilase, dan glukoamilase. 𝛼 -
amilase atau α-1,4- glukan 4-glukanohidrolase
(E.C 3.2.1.1) memecah ikatan α-(1,4)-glikosida
pati secara acak dan berkerja secara endo atau
pemutusan dari tengah sehingga disebut
endoamilase (Rahmawati & Sutrisno, 2015). 𝛽-
amilase merupakan enzim penghidrolisis pati
yang menghidrolisis unit gula dari ujung atau
ekso sehingga disebut eksoamilase. Sedangkan,
glukoamilase atau amiloglukosidase atau α-
(1,4)-D-glukan glukohidrolase (EC 3.2.1.3)
merupakan enzim untuk memisahkan glukosa
dari gula non pereduksi pati. 𝛼 -amilase dan
glukoamilase dipengaruhi oleh faktor suhu dan
pH, glukoamilase juga dipengaruhi oleh waktu.
Suhu optimum dari kedua enzim berturt-turut
adalah 90-105°C dan 40-60°C. Sedangkan, pH
optimumnya adalah 5,6-6 dan 4,5 dengan
glukoamilase perlu waktu 48-96 jam untuk
menghidrolisis pati (Rahmawati & Sutrisno,
2015). Tujuan dari percobaan ini mereaksikan
sampel uji yang mengandung pati dengan enzim
amilasi lalu dilakukan perhitungan absorbansi
dari gula yang tereduksi dengan bantuan
spektrofotometer dan reagen DNS.
2. Bahan dan Metode
2.1 Alat Percobaan
Alat yang digunakan dalam percobaan ini
adalah beaker glass, labu ukur, tabung reaksi,
pipet tetes, neraca analitik, hot plate,
spektrofotometer, dan inkubator. Beaker glass
dan labu ukur berfungsi untuk melarutkan
sampel dengan akuades. Tabung reaksi untuk
mereaksikan sampel dengan enzim amilase dan
neraca analitik untuk menimbang sampel
sebelum percobaan. Pipet tetes digunakan untuk
memindahkan sampet atau zat lain dalam jumlah
kecil dan hot plate untuk memanaskan sampel.
Spektrofotometer digunakan untuk melihat kadar
gula pereduksi melalui absorbansi dan inkubator
untuk menginkubasi sampel.
2.2 Bahan Percobaan
Bahan yang digunakan dalam percobaan ini
adalah tepung beras, gula, dan tepung terigu
sebagai sampel, enzim amilase sebagai enzim
pengkatalis hidrolisis pati, reagen DNS sebagai
pendeteksi gula pereduksi pada sampel, iodin
sebagai pengidentifikasi amilum yang
terhidrolisis, dan akuades sebagai pelarut.
Reagen DNS sendiri yang merupakan senyawa
aromatik yang bereaksi dengan gula dan
mereduksi. Hasil reduksinya akan membentuk
komponen 3-amino-5-nitrosalisilat yang yang
dapat menyerap gelombang elektromagnetik
sekitar 550 nm
2.3 Penyiapan larutan pati
Pertama, ditimbang 0,2 gram sampel tepung
kemudian masukkan ke dalam beaker glass dan
ditambahkan 10 ml akuades. Kemudian
dipanaskan hingga mendidih dan setelah
mendidih, dipisahkan pati 0,1 ml untuk tabung
reaksi 1 & 3 dan dipisahkan pati 0,25 ml untuk
tabung reaksi 2 & 4. Sampel tepung terigu dan
tepung beras yang telah dilarutkan perlu
dipanaskan terlebih dahulu untuk memutus
ikatan hidrogen dari ikatan glikosidik pati. Tahap
ini disebut gelatinisasi dan bersifat irreversible
atau tidak bisa kembali ke kondisi semula.
2.4 Penyiapan larutan standar
Untuk penyiapan larutan standar dan
pembuatan kurva standar, perlu ditimbang
terlebih dahulu 0,5 gr gula lalu dimasukkan ke
dalam labu ukur dan ditambahkan 10 ml akuades.
Selanjutnya, larutan standar glukosa dibuat
variasi konsentrasi 0,01 gr/ml, 0,02 gr/ml. 0,03
gr/ml, 0,04 gr/ml. Terakhir adalah digunakan
rumus pengenceran (dibuat dalam 3 ml) dan
diukur absorbansinya dengan panjang
gelombang 600 nm. Rumus pengenceran dapat
ditulis sebagai berikut:
𝑉1 𝑀1 = 𝑉2 𝑀2 …(1)
Keterangan:
𝑉1 = Volume larutan pertama (ml)
𝑀1 = Konsentrasi larutan pertama (gr/ml)
𝑉2 = Volume larutan kedua (ml)
𝑀2 = Konsentrasi larutan kedua (gr/ml)
Pembuatan kurva standar dapat dihitung
sebagai berikut:
1. Larutan standar berkonsentrasi 0,01 gr/ml
𝑉1 𝑀1 = 𝑉2 𝑀2
𝑉1 (0,05) = 3(0,01)
0,05𝑉1 = 0,03
𝑉1 = 0,06 ml
2. Larutan standar berkonsentrasi 0,02 gr/ml dan diukur absorbansinya pada panjang
gelombang 600 nm.
𝑉1 𝑀1 = 𝑉2 𝑀2
3. Hasil dan Pembahasan
𝑉1 (0,05) = 3(0,02)

𝑉1 = 1,2 ml Untuk perhitungan, digunakan metode kuadrat

terkecil dengan menentukan parameter a dan b
3. Larutan standar berkonsentrasi 0,03 gr/ml terbaik beserta grafik fungsi linearnya. Berikut
𝑉1 𝑀1 = 𝑉2 𝑀2 adalah persamaan metode kuadrat terkecil yang
digunakan untuk membuat grafik absorbansi
𝑉1 (0,05) = 3(0,03) glukosa terhadap konsentrai glukosa pada sampel
tepung terigu dan tepung beras:
𝑉1 = 1,8 ml
𝑁 𝑁 𝑁
𝑁 ∑𝑖 𝑥𝑖 𝑦𝑖 −∑ 𝑥𝑖 ∑𝑖 𝑦𝑖
4. Larutan standar berkonsentrasi 0,04 gr/ml
𝑎= 𝑁
𝑖
𝑁 2 …(2)
𝑁 ∑ 𝑥𝑖2 −(∑𝑖 𝑥𝑖 )
𝑉1 𝑀1 = 𝑉2 𝑀2 𝑖
𝑁 𝑁 𝑁 𝑁
𝑉1 (0,03) = 3(0,04) ∑ 𝑥𝑖2 ∑𝑖 𝑦𝑖 −∑ 𝑥𝑖 𝑦𝑖 ∑𝑖 𝑥𝑖
𝑏= 𝑖
𝑁
𝑖
𝑁 2 …(3)
𝑁 ∑ 𝑥𝑖2 −(∑𝑖 𝑥𝑖 )
𝑉1 = 2,4 ml 𝑖

2.5 Penggunaan spektrofotometri Keterangan:

𝑁 = jumlah data
Spektrofotometer dinyalakan dengam
ⅈ = indeks mulainya dari data keberapa sampe
ditekan tombol power dan tunggu hingga
berubah menjadi warna kuning. Setelah itu, berapa
ditekan tombol power pada CPU komputer. 𝑥𝑖 𝑦𝑖 = data pertama
Setelah menyala, buka software Simple Reads.
Sebelum digunakan, spektrofotometer harus 𝛴 = penjumlahan data
dikalibrasi hingga menunjukkan angka 0. Untuk Untuk menentukan persamaan fungsi y pada
mengkalibrasi, masukkan akuades ke dalam
grafik, digunakan persamaah berikut:
kuvet hingga batas baris, lalu lap kuvet dan
masukkan ke spektrofotometer. Lakukan hal 𝑦 = 𝑎𝑥 + 𝑏…(4)
yang dilakukan pada akuades terhadap sampel
glukosa yang dibuat bervariasi. 3.1 Sampel tepung terigu

2.6 Pengujian aktivitas amilase
Untuk memulai tahap likuifikasi, perlu
ditambahkan 0,1 ml enzim amilase pada tabung
1 dan 3 serta ditambahkan 0,2 ml enzim amilase
pada tabung 2 dan 4. Lalu, sampel dimasukkan
ke inkubator dan diinkubasi selama 10 menit
dengan suhu 55⁰C. Setelah 10 menit, sampel
dikeluarkan. Ditekan tombol power untuk
menyalakan inkubator dan atur suhu sesuai
dengan kebutuhan. Setelah menjalani inkubasi,
sampel ditambahkan iodin sebanyak 2 tetes agar
terjadi perubahan warna merah bata pada larutan.
Sampel kemudian dipanaskan selama 3 menit
Hasil pembuatan larutan standar glukosa dan
perhitungan absorbansi glukosa tereduksi oleh
spektrofotometer pada sampel tepung terigu
dapat dilihat pada Tabel 1. Pada pengujian gula
tereduksi dengan menggunakan enzim amilase
dan reagen DNS menunjukkan bahwa kandungan
gula tereduksi pada sampel tepung terigu sesuai
dengan kurva standar dari gula. Pada konsentrasi
glukosa 0,03 gr/mol menunjukkan nilai
absorbansi terbesar, yaitu 0,0561 dan absorbansi
terendah ada pada konsentrasi 0,02 gr/mol. Pada
Tabel 1 terlihat bahwa glukosa berkonsentrasi
0,04 gr/mol memiliki absorbansi gula terduksi
lebih kecil daripada konsentrasi 0,03 gr/mol. Hal
ini dapat disebabkan oleh penggabungan glukosa oleh adanya hambatan pada molekul substrat
dan isomaltosa yang memiliki daya pereduksi sehingga enzim mengalami penurunan aktivitas
sangat rendah. Selain itu, dapat juga disebabkan untuk menghidrolisisnya.

Tabel 1. Konsentrasi glukosa, absorbansi glukosa, dan absorbansi pati dari tepung terigu yang telah
dilakukan pengukuran
Konsentrasi glukosa (tabung ke) Absorbansi glukosa (tabung ke) Absorbansi pati (tabung ke)
1 = 0,01 gr/mol 1 = 0,0258 1 = 5,2875
2 = 0,02 gr/mol 2 = 0,0181 2 = 2,367
3 = 0,03 gr/mol 3 = 0,0561 3 = 6,9317
4 = 0,04 gr/mol 4 = 0,0410 4 = 3,8713

Untuk membuat grafik menggunakan metode perhitungan. Nilai x pada Tabel 2 menunjukkan
kuadrat terkecil, perlu dibuat tabel sebagai konsentrasi glukosa dan nilai y menunjukkan
berikut agar memudahkan dalam proses absorbansi glukosa.

Tabel 2. Tabel metode kuadrat terkecil konsentrasi dan absorbansi glukosa tepung terigu
No x y x2 y2 x.y
1 0,01 0,0258 0,0001 0,0006656 0,000258
2 0,02 0,0181 0,0004 0,00032761 0,000362
3 0,03 0,0561 0,0009 0,0031472 0,001683
4 0,04 0,0410 0,0016 0,001681 0,00164
𝛴 0,1 0,141 0,003 0,0058214 0,003943

Parameter a terbaik untuk membuat grafik

0,003(0,141) − 0,003943(0,1)
dapat ditentukan sebagai berikut dengan 𝑏=
4(0,003) − 0,01
menggunakan nilai yang telah ada di Tabel 2.
𝑁
𝑁 ∑𝑁 𝑁
𝑖 𝑥𝑖 𝑦𝑖 − ∑𝑖 𝑥𝑖 ∑𝑖 𝑦𝑖 0,000423 − 0,0003943
𝑎= 𝑏= = 0,01435
𝑁 ∑𝑁 (∑𝑁 2 0,002
𝑖 𝑥𝑖 2 − 𝑖 𝑥𝑖 )

4(0,003943) − 0,1(0,141) ≈ 0,0144

𝑎=
4(0,003) − 0,01 Setelah mendapatkan nilai a dan b terbaik,
0,015772 − 0,0141 nilai tersebut dapat dimasukkan ke dalam
𝑎= = 0,836
0,012 − 0,01 persamaan fungsi y yaitu persamaan fungsi
Sedangkan, parameter b terbaik untuk grafik absorbansi terhadap konsentrasi glukosa
membuat grafik dapat ditentukan sebagai berikut sampel tepung terigu. Dari nilai x dan y dapat
dengan menggunakan nilai yang telah ada di diperoleh grafik linear seperti Gambar 1.
Tabel 2. 𝑦 = 𝑎𝑥 + 𝑏
𝑁 𝑁
∑𝑖 𝑥 ∑𝑁 𝑁
𝑖 𝑦𝑖 − ∑𝑖 𝑥𝑖 𝑦𝑖 ∑𝑖 𝑥𝑖
𝑖2
𝑏= 𝑦 = 0,836𝑥 + 0,0144
𝑁 ∑𝑁 𝑁
𝑖 𝑥𝑖 2 − (∑𝑖 𝑥𝑖 )
2
 Grafik absorbansi terhadap konsentrasi
0.06
0.05 Series1
Absorbansi 0.04
0.03 Linear
0.02 (Series1)
0.01
y = 0.836x + 0.0144
0
R² = 0.4105
0 0.02 0.04 0.06
Konsentrasi

Gambar 1. Grafik metode kuadrat terkecil absorbansi terhadap konsentrasi glukosa pada tepung terigu

3.2 Sampel tepung beras
Pembuatan larutan dan kurva standar glukosa
dengan konsentrasi bervariasi menunjukkan hasil
absorbansi gula tereduksi yang lebih tersebar
daripada sampel tepung terigu. Dapat dilihat
pada Tabel 3 konsentrasi 0,01 gr/mol memiliki
absorbansi glukosa lebih besar dari pada glukosa
berkonsentrasi 0,02 gr/mol yaitu 0,0701. Selain
itu juga larutan glukosa berkonsentrasi 0,04
gr/mol memiliki absorbansi lebih rendah
dibandingkan glukosa berkonsentrasi 0,03
gr/mol dengan absorbansi 0,0702. Hal ini dapat
disebabkan oleh kandungan penggabungan
glukosa dan isomaltosa pada sampel tepung
beras lebih banyak sehingga enzim mengalami
kesulitan untuk memecah substrat menjadi lebih
sederhana.

Tabel 3. Konsentrasi glukosa, absorbansi glukosa, dan absorbansi pati dari tepung beras hasil pengukuran
Konsentrasi glukosa (tabung ke) Absorbansi glukosa (tabung ke) Absorbansi pati (tabung ke)
1 = 0,01 gr/mol 1 = 0,0701 1 = 0,2490
2 = 0,02 gr/mol 2 = 0,0697 2 = 0,8820
3 = 0,03 gr/mol 3 = 0,0703 3 = 0,5873
4 = 0,04 gr/mol 4 = 0,0702 4 = 0,3981

Untuk membuat grafik dengan metode dan x.y. Nilai x mewakili konsentrasi glukosa
kuadrat terkecil, dapat dibuat tabel seperti Tabel dan nilai y mewakiliki absorbansi glukosa
4 agar lebih mudah saat proses perhitungan. sebagai gula tereduksi.
Untuk perhitungan, diperlukan nilai x, y, x2, y2,

Tabel 4. Tabel metode kuadrat terkecil konsentrasi dan absorbansi glukosa tepung terigu
No x y x2 y2 x.y
1 0,01 0,0701 0,0001 0,004914 0,000701
2 0,02 0,0697 0,0004 0,004858 0,001394
3 0,03 0,0703 0,0009 0,004942 0,002109
4 0,04 0,0702 0,0016 0,004928 0,002808
𝛴 0,1 0,2803 0,003 0,019642 0,007012
 𝑦 = 𝑎𝑥 + 𝑏
Parameter a terbaik untuk membuat grafik
dapat ditentukan sebagai berikut dengan 𝑦 = 0,009𝑥 + 0,06985

menggunakan nilai yang telah ada di Tabel 4. Setelah mendapatkan nilai a dan b terbaik,
4(0,007012) − 0,1(0,2803)
𝑎= nilai tersebut dapat dimasukkan ke dalam
4(0,003) − 0,01
persamaan fungsi y yaitu persamaan fungsi
0,028048 − 0,02803
𝑎= = 0,009 grafik absorbansi terhadap konsentrasi glukosa
0,012 − 0,01
Sedangkan, parameter b terbaik untuk sampel tepung beras. Dari nilai x dan y dapat

membuat grafik dapat ditentukan sebagai berikut diperoleh grafik linear seperti Gambar 2. Pada

dengan menggunakan nilai yang telah ada di Gambar 2 terlihat bahwa titik lebih menyebar

Tabel 4. yang membuktikan nilai koefisien korelasi atau

𝑁 𝑁 R mendekati 0 dan lebih kecil dibandingkan nilai
∑𝑖 𝑥𝑖 2 ∑𝑁 𝑁
𝑖 𝑦𝑖 − ∑𝑖 𝑥𝑖 𝑦𝑖 ∑𝑖 𝑥𝑖
𝑏= koefisien korelasi grafik pada Gambar 1. Hal ini
𝑁 ∑𝑁 𝑁
𝑖 𝑥𝑖 2 − (∑𝑖 𝑥𝑖 )
2

dikarenakan semakin dekat koefisien korelasi

0,003(0,2803) − 0,007012(0,1) dengan titik 0, semakin tidak berhubungan titik
𝑏=
0,012 − 0,01 yang ada pada grafik.

0,0008409 − 0,0007012
𝑏= = 0,06985
0,002

Grafik absorbansi terhadap konsentrasi

0.0704
Series1
Absrobansi

0.0702
0.07 Linear
(Series1)
0.0698
y = 0.009x + 0.0699
0.0696
0 0.02 0.04 0.06 R² = 0.1952
Konsentrasi

Gambar 1. Grafik metode kuadrat terkecil absorbansi terhadap konsentrasi glukosa pada tepung terigu

4. Kesimpulan aktivitas amilase yang terdiri dari pemberian

Kesimpulan dari percobaan ini adalah sebagai
berikut:
1. Hidrolisis pati dalam percobaan ini dilakukan
secara enzimatis melalui beberapa tahap, mulai
dari penyiapan larutan pati, pembuatan larutan
standar glukosa, pengukuran absorbansi
menggunakan spektrofotometer, dan pengujian
enzim, inkubasi, pemanasan, dan penambahan
iodin.
2. Absorbansi dari gula yang tereduksi dari
sampel tepung terigu 0,1 ml dan 0,25 ml beturut-
turut adalah 0,0258 dan 0,0181 serta 0,0561 dan
0,0410. Sedangkan, untuk absorbansi gula
tereduksi pada sampel tepung terigu 0,1 ml dan
0,25 ml berturut-turut adalah 0,0701 dan 0,0697
serta 0,0703 dan 0,0702.
Daftar Pustaka
Permanasari, A. R. & Yulistiani, F. (2015).
Pembuatan Gula Cair dari Pati
Singkong dengan Menggunakan
Hidrolisis Enzimatis. Jurnal Fluida,
11(2), 9-14.
https://doi.org/10.35313/fluida.v11i2.8
1 http://ejournal.upnjatim.ac.id/index.php
Rahmawati, A. Y. & Sutrisno, A. (2015).
Hidrolisis Tepung Ubi Jalar Ungu
(Ipomea batatas L.) Secara Enzimatis
Menjadi Sirup Glukosa Fungsional:
Kajian Pustaka. Jurnal Pangan dan
Agroindustri, 3(3), 1152-1159.
https://jpa.ub.ac.id/index.php/jpa/articl
e/view/238
Risnoyatiningsih, S. (2011). Hidrolisis Pati Ubi
Jalar Kuning Menjadi Glukosa Secara
Enzimatis. Jurnal Teknik Kimia, 5(2),
417-424.
/tekkim/article/download/146/120