Cloroplastos y Peroxisomas

Dr. Alejandro Roth

Depto. Biología. Fac. Ciencias.
Universidad de Chile
2011

Sitios WEB para estudiar

• Sitios para estudiar (castellano): http://www.biologia.arizona.edu/
• Animaciones:
– http://www.cnr.vt.edu/DENDRO/forestbiology/photosynthesis.swf
– http://www.moe.edu.kw/hagybat%20almalem2/edu/biology/flash/
photosynthesis.swf
– http://www.abdn.ac.uk/~clt011/flash/samples/photosyn.swf
– http://www.universitario.com.br/celo/aulas/evolucao.swf
– http://www.wiley.com/legacy/college/boyer/0470003790/animations/
photosynthesis/photosynthesis.swf
– http://www.geneticorigins.org/mito/media1.swf

Libros
– PubMed
• http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/
 3

Cloroplastos y Peroxisomas

Dr. Alejandro Roth

Depto. Biología. Fac. Ciencias.
Universidad de Chile
2011
 Resumen:
Recordar las diferencias entre ellos y las
mitocondrias
– Teorías de origen
– Tamaño y División
– Número de membranas que los separan del citoplasma.
– Estructuras internas.
– ¿Presentan ADN y ribosomas?
– Procesos metabólicos que realizan (a grandes rasgos)

REVIEWS

Box 2 | Endosymbiotic evolution and the tree of genomes

Intracellular endosymbionts that originally descended from free-living prokaryotes have been important in the evolution of eukaryotes by giving
rise to two cytoplasmic organelles. Mitochondria arose from α-proteobacteria and chloroplasts arose from cyanobacteria. Both organelles have made
substantial contributions to the complement of genes that are found in eukaryotic nuclei today. The figure shows a schematic diagram of the
evolution of eukaryotes, highlighting the incorporation of mitochondria and chloroplasts into the eukaryotic lineage through endosymbiosis and
the subsequent co-evolution of the nuclear and organelle genomes. The host that acquired plastids probably possessed two flagella113. The nature of
the host cell that acquired the mitochondrion (lower right) is fiercely debated among cell evolutionists. The host is generally accepted by most to
have an affinity to ARCHAEBACTERIA but beyond that, biologists cannot agree as to the nature of its intracellular organization (prokaryotic, eukaryotic
or intermediate), its age, its biochemical lifestyle or how many and what kind of genes it possessed120. The host is usually assumed to have been
unicellular and to have lacked mitochondria.

Eukaryotes Plants Eucariontes

Plantas

Early diversification of Origin of

algal/plant lineages and plastids
gene transfer to the host
Ancient
protozoon

Early diversification of
eukaryotic lineages and
gene transfer to the host
Ancient
Cianobacterias cyanobacterium
Origin of mitochondria

Arqueobacterias

Ancient The host

proteobacterium that acquired
mitochondria

Protobacterias
Cyanobacteria Proteobacteria Archaebacteria
Timmis et al, 2004, Nature Reviews Genetics. 123-135

ARCHAEBACTERIA
An ancient group of organisms
that have ribosomes and cell
membranes that distinguish
the term ‘NUMTS’ was coined to designate these nuclear
stretches of mtDNA26. Numts have been found in the
nuclear genomes of grasshoppers27, primates28,29 and
shrimps30, and are often mistaken for bona fide
mtDNA31,32.
Eukaryotic genome sequences have more fully
divergence indicates recurrent transfer events, from
ancient to contemporary. The human genome has at
least 296 different numts of between 106 bp and 14,654
bp (90% of the mitochondrial genome) that cover the
entire mtDNA circle34. Other studies tallied 612 mtDNA
insertions in the human genome35, a greater number
 SIMBIOSIS: Paramecios con Chlorella Simbionte

Cloroplastos: Familia Plastidios

1. Específicos para plantas

2. Varios tipos de plastidios, todos con el mismo genoma. Funciones:

1. Acumulación de pigmentos
2. Deposito de Almidón, grasas, aceites
3. Fotosintéticos

4. Geotropismo

4. Reducción de nitrito (NO2-) a amonio (NH3), paso esencial del ciclo del nitrógeno.

5. Remanente de Genoma propio (90% traspasado al núcleo, 120 a 160 kb. 120
genes ). 5 a 10 μm de longitud. (mitocondrias: 1 a 2 μm).

Almacén de grasas, aceites,

almidón.
Protoplasmidio

Concentración de pigmentos

Fotosíntesis
 Cloroplastos: Resumen
1. Fotosíntesis: H2O y CO2 -> HCOH + O2

2. Síntesis de amino ácidos, lípidos y componentes de membrana

3. Reducción de nitrito (NO2-) a amonio (NH3), paso esencial del

ciclo del nitrógeno.

4. Uno de varios tipos de plastidios (todos con el mismo genoma)

5. Remanente de Genoma propio (90% traspasado al núcleo, 120 a

160 kb. 120 genes ). 5 a 10 μm de longitud. (mitocondrias: 1 a
2 μm).

Protoplasmidio

Hipótesis Endosimbiotica

¿Qué evidencia tenemos de esto?

Mitocondrias:
1.
2.
3.
4.

Cloroplastos:
5.
6.
 11

Cianobacteria

12
http://www.biologie.uni-hamburg.de/b-online/library/webb/BOT311/Cyanobacteria/Cyanobacteria.htm
 Morfología de los cloroplastos
• Espacios delimitados
por 3 membranas:
– Membrana externa,
altamente permeable
– Membrana Interna,
impermeable
– Membrana Tilacoidal,
impermeable a iones.

• Efectos metabólicos
ocurren entre el espacio
tilacoidal y estroma
(medio interno).

Fotosíntesis:
• Proceso de conversión de energía luminosa
en energía química.
• Tiene lugar en estructuras especializadas
en bacterias fotosintéticas, algas y plantas. Grana

Los cloroplastos capturan energía luminosa (hν) (fase clara) y la utilizan para
sintetizar compuestos orgánicos, en una serie de reacciones, a partir de CO2
atmosférico (fijación del carbono o fase oscura).

Características de los Cloroplastos:

• Al igual que las mitocondrias, poseen una membrana externa y una interna con un espacio
intermembranas.
• La membrana interna rodea al estroma, un compartimiento, análogo a la matriz mitocondrial.
• En el estroma hay estructuras membranosas en forma de sacos planos denominados
tilacoides que se apilan formando los grana. Diferentes granas se unen a través de regiones de
la membrana tilacoide llamados láminas estromales.
 Tres membranas: externa, interna y tilacoide y tres espacios separados: intermembranas,
estroma, y lumen del tilacoide.

La membrana tilacoide constituye el sitio de la fotosíntesis y es análoga a las

crestas mitocondriales. Allí ocurren las reacciones acopladas de oxido-reducción que
generan la fuerza protón-motriz (FP-M).

La membrana tilacoide contiene varias proteínas integrales (fotosistemas II y I, el complejo

citocromo b6-f), compuestos transportadores de e- (plastoquinona compuesto liposoluble),
plastocianina (proteína pequeña con un centro Fe-S), pigmentos que absorben luz, (clorofila el
más importante) y el complejo F0F1 o ATPasa F0F1.

estroma
clorofila
luz
hν

luz
hν

FS-II
FS-I lumen
H+ H+

http://www.fw.vt.edu/dendro/forestbiology/photosynthesis.swf

Captura de Energía Lumínica

• La Clorfila A absorbe la energía a las

longitudes de ondas del órden Violeta-
Azul y naranja-rojizo-Rojo. Aprovecha
muy poco la energía intermedia (Verde-
Amarillo-Naranja).

• La Clorofila A es el principal pigmento

fotosintético de todos los organismos
excepto bacterias.

• Existen pigmentos accesorios que atrapan

energía en las longitudes de onda que no
son aprovechadas por la Clorofila A:
Clorofila B, C, D y E (en algas y protistas).
Xantofillas y Carotenoides.
 Fotosíntesis
En la fotosíntesis se pueden distinguir dos procesos:
1.- La fase luminosa, constituida por reacciones fotosintéticas de transferencia de
electrones.
Energía derivada de la luz solar energiza electrones en las moléculas de clorofila asociadas a los
complejos multiprotéicos llamados fotosistemas I y II, que forman parte de una cadena
transportadora de electrones ubicada en la membrana del tilacoide. En el FSII la clorofila a+ es
muy oxidante y captura los electrones de un dador: el H20, que se rompe en reacciones
catalizadas por un complejo proteico y como subproducto se produce O2:

2H2O + 4 h! 4H+ + 4e- + O2

LUMEN

4 hν hν

reaction center

Fotosíntesis

Durante el transporte de electrones en la cadena se bombean protones a través de la

membrana tilacoide hacia el lumen del tilacoide y el gradiente de potencial electroquímico de
H+s generado, se utiliza para sintetizar ATP vía la ATPasa F0F1.

Como etapa final se reduce el NADP+ a NADPH.

LUMEN

4 hν hν

reaction center
 Comparación de la fotosíntesis con la
fosforilación oxidativa. hν

En la fotosíntesis, la transferencia de 4 hν

electrones inducida por la luz impulsa el

transporte de protones al lumen o espacio
tilacoide. Los protones fluyen fuera del
lumen impulsados por su gradiente de
potencial químico a través de la ATP H+ H+
sintetasa para generar ATP en el
estroma.
También la energía derivada de la luz solar es H
utilizada para producir NADPH requerido +

para la subsiguiente conversión de CO2 a

carbohidratos.

En la fosforilación oxidativa el flujo de

electrones a lo largo de la cadena respiratoria
impulsa el bombeo de protones fuera de la
matriz mitocondrial. El gradiente de protones
creado impulsa su flujo hacia a través de la
ATP sintetasa para generar ATP en la ¿qué es la fotofosforilación?
matriz.
 Orientación de la membrana y sentido del movimiento de protones a través
de la F0F1 ATP-sintetasa en bacterias, mitocondrias y cloroplastos

hν

Fotosíntesis II

2.- La fase de las reacciones de

fijación de carbono o reacciones
oscuras.
rubisco

ATP y NADPH producidos en las

reacciones fotosintéticas de transferencia
de electrones son utilizados para
impulsar la conversión del CO2 a hidratos
de carbono (fijación del carbono)
comenzando en un ciclo de reacciones
(ciclo de Calvin).

Cada molécula de CO2 es agregada a una

de ribulosa-1,5 difosfato para dar 2
moléculas de 3-fosfoglicerato.

Estas reacciones que producen azúcares y

otros compuestos orgánicos en las hojas
de las plantas, comienzan en el
cloroplasto (almidón) y continúan en el
citosol (sacarosa) 2 gliceraldehído 3-fosfato 1 glucosa
 Cloroplastos: preguntas
1. Defina: Fase clara y Fase oscura de la
fotosíntesis.

2. ¿Donde ocurre cada una?

3. En que se diferencia un fotosistema

de un sistema antena?

4. ¿Qué y cuáles son los pigmentos

fotosintéticos?

5. ¿qué diferencias poseen los

cloroplastos de las mitocondrias?
¿Provienen del mismo evento
endosimbiótico?

6. ¿Qué es un plastido?

7. ¿Qué función cumple la gradiente de

protones en la fotosíntesis? ¿Entre
que espacios se establece?

8. ¿Cuál es la función de la enzima

Rubisco? ¿Por qué se necesita tanta?
 Peroxisomas

•Pe q u e ñ o sorganelos que contienen enzimas

involucradas en una diversidad de reacciones
metabólicas, incluyendo varios aspectos del metabolismo
energético.

•Carecen de DNA y sus proteínas son codificadas por

genes nucleares. Se replican por división.

•Contienen enzimas que oxidan varios sustratos

orgánicos, generando peróxido de hidrógeno (H2O2).

•La oxidación de los ácido grasos en peroxisomas

produce grupos acetilo (CH3-CO-), usados en reacciones
biosintéticas, pero no ATP.

•Junto a las mitocondrias, son los principales sitios de

utilización de oxígeno.

•Una hipótesis es que los peroxisomas son un vestigio

de un antiguo organelo que llevaba a cabo todo el
metabolismo de oxígeno en células eucarióticas
ancestrales. Las inclusiones paracristalinas electro-densas
están compuestas de la enzima urato oxidasa.

Microfotografías de dos tipos de peroxisomas encontrados en células vegetales

A) Peroxisoma con un núcleo de estructura paracristalina en células de hoja

de tabaco
B) Peroxisomas (glioxisomas) en células almacenadoras de grasa en
cotiledones de tomate .
 Funciones Peroxisomales
•50 Enzimas diferentes
•Metabolismo Lipídico:
•ß-oxidación de ácidos grasos de Cadena muy larga
Very Long Chain Fatty Acids (VLCFA)
Corresponde a una importante fuente de energía
celular
•Formación y ruptura de Peróxido de Hidrógeno: catalasa
•Biosíntesis Lipídica (colesterol y plasmalógenos)
•Síntesis de aminas y de ácidos biliares
•Catabolismo de Purinas (urato oxidasa)

Peroxisomas

En los peroxisomas, varios sustratos son

degradados en las reacciones oxidativas,
incluyendo aminoácidos y ácidos grasos. La
oxidación de éstos últimos es particularmente
importante ya que constituye la principal
fuente de energía metabólica.

En las células animales, los ácidos grasos son

oxidados en los peroxisomas y mitocondrias,
pero en levaduras y plantas su oxidación está
restringida a los peroxisomas.

Los ácidos grasos con más de 12 átomos de

carbono se degradan en una serie de
reacciones similares a las que ocurren en
mitocondrias.

Acil CoA acortado en dos

átomos de carbono
Reciclaje de FAD y NAD+, Generación de H2O2 y función de la catalasa

Durante la oxidación de los ácidos grasos en los peroxisomas, los electrones

transferidos a FAD y NAD+ durante las reacciones de oxidación son posteriormente
transferidos al O2, formando H2O2.

El agua oxigenada es una sustancia tóxica para la célula (genera radicales libres,
compuestos con electrones desapareados) que es convertida en agua y oxígeno por
una catalasa, enzima presente en grandes cantidades en este organelo. Esta enzima
cataliza la descomposición del H2O2 en H2O y O2.

catalasa

2 H2O2 2 H2O + O2

En contraste con las mitocondrias, donde la oxidación de los ácidos grasos está
acoplada a la formación de ATP, en los peroxisomas la energía liberada es
convertida en calor.

Síntesis de proteínas en la célula

¿cómo se
incorporan
proteínas a
estos
organelos?

RUTA SECRETORA
Lodish et al, 2004
 Biogénesis Peroxisomal
-Sus proteínas son traducidas en en citoplasma
y luego son dirigidas al organelo mediante señales
carboxilo-terminales de su secuencia.

-PTS1, señal de proteínas de matríz peroxisomal (Ser-

Lys-Leu) que es reconocida por receptores solubles
que dirigen la proteína al peroxisoma.

Pex11 está involucrada en la proliferación de los peroxisomas

Biogénesis Peroxisomal

-Las proteínas integrales de membrana PEX10/12/2

forma un sistema de canal y receptor
 Peroxisomas

Además de proporcionar un compartimiento

para las reacciones de oxidación, los
peroxisomas están, involucrados en la
biosíntesis de lípidos.

En células animales , el colesterol es

sintetizado en estos organelos así como en
el RE.
En el hígado los peroxisomas participan en
la síntesis de ácidos biliares que derivan del
colesterol.

En plantas los peroxisomas juegan dos

papeles importantes :

En semillas participan en la conversión de

ácidos grasos almacenados a hidratos de
carbono, que es crítica para la germinación
de la planta.

En las hojas metabolizan glicolato (CH2OH-

COO-), un producto lateral formado
durante en ciclo de Calvin en la fotosíntesis.

Enfermedades Peroxisomales

Falla en la formación del Peroxisoma Fallas en la ß-oxidación

Falla en una o más de las proteínas que
incorporan proteínas al lúmen o la la membrana
peroxisomal
•Espectro Zellweger:
•Síndrome Zellweyer: sin peroxisomas
•Adrenoleucodistrofia infantil
• Refsum's infantil
•Condrodisplasia punctata rizomélica: daños a la
epífisis de los huesos.
•Adrenoleucodistrofia: Aparece entre los 5 y los 7
años. Desmielinización asociada con insuficiencia
adrenal. Falla en la proteína de transporte de tipo
ABC que lleva a una falla en el procesamiento de
los ácidos grasos de cadena muy larga.
•Adrenomieloneuropatía: Aparece a los 27 años
(media), de mecanismos similar a la
adrenoleucodistrofia, el daño ocurre ppalmente
en la médula espina y lleva a paraplejia.
•Enfermedad de Refsum's de Adultos: elevadas
concentraciones de ácido fitánico, producto
metilado de la clorofila. Comienza como ceguera
nocturna y avanza a retinosis pigmentaria atípica
y posteriores daños al SNC. Dieta libre de
Clorofila libera de la enfermedad
 Síntesis de proteínas en la célula

Transporte hacia la Matriz

Mitocondrial:

•Hay un péptido señal de entre 20 a

80 residuos de aminoácidos en el
extremo amino terminal (con carga +
y apolares) ->hélice anfifílica.
•Las proteínas cruzan ambas
membranas mitocondriales a la vez
(a través de proteínas
transportadoras, o complejos
proteicos, se le denomina también
“lugar de contacto”).
•Cuando se ha producido la
importación el péptido señal es
degradado en la matriz (por enzimas
Lodish et al, 2004
conocidas como peptidasas).

Transporte de Proteínas hasta la Matriz de la Mitocondria

-Canal de Traslocación

El transporte requiere ATP y un gradiente electroquímico de la membrana interna.

Chaperonas: proteínas que ayudan al cruce de la proteína en su estado

desplegado y ayudan a su posterior plegamiento.
Chaperonas hsp70 se requieren para Translocación a Matriz

Hsp60 mitocondrial = facilita el plegamiento

Las proteínas cruzan en estado desplegado.

Transporte hacia el Espacio Intermembrana (EI) o hacia la

Membrana Interna (MI).

El traslocador reconoce una señal hidrofóbica e impide que la

proteína viaje hasta la matriz (señal de detención de la
transferencia).
Los traslocadores se desacoplan y la proteína queda en el EI.

a EI a MI
La señal hidrofóbica hace que la proteína se
inserte en la membrana. 38
 Transporte a luz del Tilacoide (Cloroplasto)

Se requieren dos señales

1º Señal contiene Ser y Thr, además de aá hidrofóbicos y se halla en el extremo

N terminal.
2° Señal tilacoidal hidrofóbica.

Transporte hacia Cloroplastos

Semejanzas con Transporte a Mitocondrias:
1. Es post-traduccional 2. Requieren energía 3. Requieren señales hidrofóbicas en su
extremo amino terminal que luego serán eliminadas.
Diferencia:
En los cloroplastos no se usa la energía del gradiente electroquímico para el transporte.
Se requiere ATP y GTPTransporte a Peroxisomas

Organelos delimitados por una sola membrana.

Péptido Señal: 3 aminoácidos ubicados en el extremo carboxilo terminal