HLA-DRB1 pada pasien …(Sarwo dkk)

HLA-DRB1 on Malaria Patients in Central Kalimantan :

a Premilinary Study
Sarwo Handayani1*, Hadjar Siswantoro1, Tya Triastuti1, Eny Rohmawati2, Emiliana Tjitra1
1
Puslitbang Biomedis dan Teknologi Dasar Kesehatan, Badan Litbang Kesehatan,
Kementerian Kesehatan, Indonesia
2
RS Doris Sylvanus Palangkaraya, Kalimantan Tengah, Indonesia
email: menik25@gmail.com

Abstract

Human Leucocyte Antigen is a genetic marker in nuclear cells that facilitate the presentation of foreign
antigens to be recognized by T lymphocytes. HLA-DRB1 such as HLA-DRB1*10:01 and HLA-DRB1*13:02
are a group of HLA type 2 which related to protection, while HLA-DRB1*04:01 related to susceptibility of
severe malaria. So, it is worthy to identify HLA-DRB1 alleles on malaria patients in Indonesia. A total forty
dried blood spots samples consisted of 7 severe malaria , 22 uncomplicated malaria (11 P falciparum and 11 P
vivax) were collected from Doris Sylvanus Hospital Palangkaraya, and another 11 non malaria were collected
from malaria endemic area in Central Kalimantan. DNA samples were extracted and analyzed for HLA-DRB1
allele type using LABType® SSO DRB1 Typing Test (one Lambda). The fluorescence intensities of
phycoerythrin then were measured by Luminex and analyzed by HLA fusion2 program. The subjects samples
were 3-90 years old and the proportion of men was 62.5%. Only 87.5% samples and 15 HLA-DRB1 allele
variations were performed successfully. The dominant alleles identified on samples were HLA-DRB1*15:02
(23.8%) and HLA-DRB1*15:01(18.7%). Other alleles HLA-DRB1*01:01, HLA-DRB1*08:01 and HLA-
DRB1*12:01 were only detected in severe malaria, but the specific alleles HLA-DRB1*04:01 related to
susceptibility of severe malaria was not. Two of four homozygote allleles HLA-DRB1*07:01 and HLA-
DRB1*15:01 were not found on severe malaria. In conclusion, although using a limited sample and not
figuring a specific allele for each group sample yet, this preliminary study is usefull for further HLA
examination and analysis. More samples and deeper analysis are required for getting completed data.

Keywords: HLADRB1, malaria, Central Kalimantan

Abstrak

Human Leucocyte Antigen merupakan marker genetik yang membantu memfasilitasi presentasi antigen
sehingga dikenali oleh sel limfosit T. HLA-DRB1 seperti HLA-DRB1*10:01 dan HLA-DRB1*13:02
merupakan HLA tipe 2 yang berkaitan dengan proteksi, sedangkan HLA-DRB1*04:01 berkaitan dengan
kerentanan terhadap malaria berat. Oleh karena itu identifikasi alel HLADRB1 pada pasien malaria di Indonesia
perlu dilakukan. Sampel berupa 40 spot darah kering yang berasal dari 7 penderita malaria berat dan 22 malaria
tanpa komplikasi (11 P falciparum dan 11 P vivaks) yang diperoleh dari RS Doris Sylvanus Palangkaraya, serta
11 non malaria yang tinggal di daerah endemik malaria di Kalimantan Tengah. Setelah DNA sampel diekstraksi
kemudian diperiksa tipe alel HLA-DRB1 dengan kit LABType® SSO DRB1 Typing Test (one Lambda).
Intensitas floresens dari phycoerythrin selanjutnya diukur dengan alat Luminex dan data dianalisa dengan
program HLA fusion2. Kisaran umur penderita adalah 3-90 tahun dengan proporsi laki-laki sebesar 62.5%.
Hanya 87.5% sampel and 15 variasi alel HLA-DRB1 yang berhasil diidentifikasi. Dua alel yang paling dominan
adalah HLA-DRB1*15:02 (23.8%) and HLA-DRB1*15:01(18.7%). Alel lain yaitu HLA-DRB1*01:01, HLA-
DRB1*08:01 and HLA-DRB1*12:01 hanya ditemukan pada malaria berat, akan tetapi alel spesifik HLA-
DRB1*04:01 yang berkaitan dengan kerentanan terhadap malaria berat tidak ditemukan. Dua dari empat alel
homozigot yaitu HLA-DRB1*07:01 dan HLA-DRB1*15:01 tidak ditemukan pada malaria berat. Meskipun
dengan sampel yang terbatas dan belum menggambarkan alel spesifik pada kelompok sampel, namun studi
pendahuluan ini cukup bermanfaat untuk pemeriksaan dan anaIisis HLA lebih lanjut. Perlu sampel yang lebih
banyak dan analisis yang lebih mendalam untuk mendapatkan data HLA yang lebih lengkap.

Kata kunci: HLADRB1, malaria, Kalimantan Tengah

85
Pendahuluan diujikan. HLA-DRB1*01 berkaitan
dengan tingginya frekuensi non responder
Human Leucocyte Antigen
terhadap repetitive region PvMSP-9, dan
(HLA)merupakan marker genetik yang
HLA-DRB1*11 berkaitan dengan
berfungsi mempresentasikan antigen oleh
rendahnya frekuensi responder terhadap
Antigen Presenting Cell (APC) sehingga
Pv MSP3 full length recombinant protein
dapat dikenali oleh sistem kekebalan yaitu 14
.
limfosit T. Gen HLA terletak pada lengan
Untuk mengetahui hubungan alel
pendek kromosom 6, yang dibagi menjadi
HLADRB1 dengan jenis malaria dan
2 tipe yaitu tipe 1 terdiri dari lokus HLA-
tingkat keparahan, maka dilakukan
A, HLA-B dan HLA-C, dan tipe 2 terdiri
penelitian yang merupakan studi
dari lokus HLA-DP, HLA-DQ dan HLA-
pendahuluan untuk mengidentifikasi alel
DR. Pada manusia, kedua tipe HLA
HLADRB1 pada pasien malaria di
tersebut mempunyai tingkat keragaman
Kalimantan Tengah.
alel yang sangat tinggi pada populasi1.
Penelitian menunjukkan adanya
hubungan keragaman alel HLA type 2 Metode
dengan beberapa penyakit antara lain;
tuberkulosis 2, diabetes melitus type 13, Sampel
Subyek sampel penelitian
systemic Lupus Erithematosus/SLE 4),
merupakan bagian dari studi malaria yang
multiple sclerosis/ MS 5, hepatitis C 6,
dilakukan di RS Doris Sylvanus,
dengue 7, lepra 8) dan malaria 9-11.
Palangkaraya dan subyek Mass Blood
Meskipun demikian, mekanisme terjadinya
Survey (MBS) di daerah endemis malaria
fenomena tersebut belum diketahui dengan
yaitu di desa Tumbang Kalemei,
pasti sampai saat ini 1,12.
Kabupaten Kasongan, Kalimantan Tengah
Beberapa penelitian malaria falsiparum
yang dilaksanakan pada tahun 2010.
memperlihatkan adanya hubungan alel
Persetujuan etik penelitian tersebut telah
HLA dengan tingkat keparahan penyakit,
diperoleh dari Badan Litbangkes no no
khususnya HLADRB1. Penelitian di
LB.03.02/KE/1498/2010tanggal 9 April
Thailand menunjukkan bahwa frekuensi
2010. Spesimen berupa apus darah dan
alel HLA-DRB1*10:01 lebih tinggi secara
spot darah jari yang diteteskan pada kertas
bermakna pada subyek dengan malaria
filter (Wattman no 3). Kasus malaria di RS
ringan daripada malaria cerebral atau berat
10 ditentukan berdasarkan catatan medis
. Demikian juga dengan alel lain yaitu
pasien yang dikonfirmasi dengan
HLA-DRB1*13:02 dan HLA-
pemeriksan mikroskopis dan Polymerase
DQB1*05:01 yang ternyata berkaitan
Chain Reaction (PCR) oleh tenaga
dengan proteksi terhadap malaria berat
laboratorium Badan Litbangkes,
pada anak di Gambia 13. Namun
bersamaan dengan hasil MBS. Penelitian
sebaliknya dengan alel HLA-DRB1*04,
ini merupakan studi pendahuluan, dengan
merupakan faktor resiko malaria berat
jumlah sampel sebanyak 40 subyek, terdiri
pada anak di Gabon dan Ghana 11 .
dari 7 subyek dengan malaria berat
Kaitan alel HLADRB1 dengan malaria
(falciparum malaria), 22 subyek malaria
berat pada vivaks belum banyak
tanpa komplikasi (11 falciparum dan 11
dilakukan. Penelitian yang dilakukan di
vivaks) dan 11 subyek non malaria.
Brasilia menyatakan bahwa alel HLA-
DRB1*04 dan HLA-DRB1*03 ternyata
berkaitan dengan tingginya respon imun Pemeriksaan tipe alel HLA-DRB1
Tipe alel HL-DRB1 diperiksa
IgG terhadap lima dari 9 antigen
menggunakan teknik PCR- sequence-
permukaan Plasmodium vivax yang

86 Jurnal Biotek Medisiana Indonesia . Vol.5.2.2016:85-93

 HLA-DRB1 pada pasien …(Sarwo dkk)

specific oligonucleotides (SSO) (one Lambda Inc), dan berdasarkan nilai

dilanjutkan dengan deteksi micro bead
dengan teknologi Luminex XMAP.
Tahapan pemeriksaan HLA meliputi
ektraksi DNA, amplifikasi DNA,
netralisasi dan hibridisasi. Ekstraksi DNA
dari spot darah kering menggunakan kit
ekstraksi komersial (Qiamp mini kit)
sesuai dengan prosedur yang ditetapkan.
Amplifikasi sampai hibridisasi
menggunakan kit LabType SSO typing test
15
. Pada tahap amplifikasi, sampel DNA
diperbanyak dengan 1 set primer HLA-DR
dengan suhu amplifikasi sebagai berikut:
tahap 1 (960C-3 menit, 1 siklus); tahap 2
(960C-20 detik, 600C-30 detik, 720C-30
detik, sebanyak 5 siklus); tahap 3(960C-10
detik, 600C-25 detik, 720C-30 detik,
sebanyak 30 siklus) dan tahap 4 (720C-10
menit dan 40C). Kemudian dilakukan
elektroforesis dan visualiasi untuk melihat
hasil amplifikasi DNA. Tahap selanjutnya
adalah menambahkan buffer denaturasi
dan buffer netralisasi, yang dilanjutkan
dengan hibridisasi yaitu menambahkan
bead/ microsphere yang telah dilapisi
probe berupa biotin. Setelah pencucian
dengan buffer pencuci sebanyak 2 kali,
kemudian ditambahkan larutan R-
picoeritrin yang telah dikonjugasikan
dengan streptavidin (SAPE). Hasil akhir
yang berupa Mean Fluorecense Intensity
(MFI) dari phycoerythrin kemudian dibaca
dengan mesin luminex XMAP. Analisis
MFI mengunakan program HLA Fussion 2
cutoff maka dapat diketahui variasi alel
HLA dari sampel. Data alel selanjutnya
ditampilkan secara deskriptif yaitu
frekuensi alel pada masing masing
kelompok sampel. Alel HLA diturunkan
dari kedua orang tua, maka jumlah alel
yang dianalisis dari 40 sampel sebanyak
80 alel.
Hasil
Karakteristik subyek dari sampel yang
diperiksa menunjukkan kisaran umur
antara 3 – 90 tahun, proporsi laki-laki
(62,5%) hampir dua kali lipat
dibandingkan perempuan, proporsi subyek
dengan malaria tanpa komplikasi
(falsiparum atau vivaks) lebih banyak
(55%) daripada subyek yang tidak
menderita malaria (27,5%) dan malaria
berat (17,5), seperti tampak pada Tabel 1.
Hasil amplifikasi DNA dengan 1 set
primer HLADRB1 menunjukkan satu pita
DNA pada exon 2 dengan panjang basa
sekitar 300 bp, seperti tampak pada
gambar 1. Visualisasi produk DNA ini
digunakan untuk mengecek hasil
amplifikasi sebelum dilanjutkan dengan
tahap berikutnya yaitu hibridisasi. Semua
DNA sampel berhasil diamplifikasi
dengan panjang pita yang sama yaitu
sekitar 300 bp, meskipun dengan
intensitas ketebalan pita yang berbeda.

Tabel 1. Karakteristik subyek dari sampel yang diperiksa

Karakteristik n %
Umur (kisaran th) 3 - 90
Laki-laki 25 62.5
Perempuan 15 37.5
Malaria tanpa komplikasi (Pf/Pv) 22 55
Malaria berat 7 17.5
Non malaria 11 27.5
Total 40 100

87
 Gambar 1. Hasil amplifikasi DNA lokus HLA-DRB1
(M: marker 100 bp, sampel no: 37-42, panjang pita DNA: 300 bp)

Hasil pemeriksaan alel HLADRB1 tidak malaria, alel yang teridentifikasi

menunjukkan bahwa hanya 87,5% (70/80)
alel yang terdeteksi dan dapat dianalisis,
sedangkan 12,5% (10/80) sisanya tidak
dapat dianalisis karena tidak menunjukkan
alel yang spesifik. Berdasarkan kelompok
malaria maka variasi alel HLADRB1 yang
terindentifikasi dapat dilihat pada Tabel 1.
Pada malaria berat semua alel berhasil
teridentifikasi, sementara pada kelompok
lain yaitu malaria tanpa komplikasi dan
hanya 82 – 86%, dengan variasi alel
HLADRB1 terbanyak pada malaria tanpa
komplikasi. Berdasarkan tipe alel terdapat
15 variasi alel HLA-DRB1 yaitu HLA-
DRB1*15:02 sebanyak 23,8% (19/80),
HLA-DRB1*15:01 sebanyak 18,7%
(14/80) dan HLA-DRB1*12:02 sebanyak
17,5% (14/80). Proporsi alel yang lain
dibawah 7%, seperti tampak pada Tabel 2.

Tabel 2.Variasi alel HLADRB1yang terdeteksi berdasarkan kelompok malaria.

Kelompok malaria Jumlah alel Alel yang Jumlah variasi

(2n=80) teridentifikasi (%) alel
Malaria tanpa komplikasi (Pf/Pv) 44 86,4 8
Malaria berat 14 100 7
Non malaria 22 81.8 7
Total 80 87.5 15*

88 Jurnal Biotek Medisiana Indonesia . Vol.5.2.2016:85-93

 HLA-DRB1 pada pasien …(Sarwo dkk)

Tabel 2.Frekuensi alel HLA-DRB1 yang terdeteksi berdasarkan

kelompok malaria (2n = 80)

No Alel alel terdeteksi Malaria tanpa Malaria Non malaria

HLADRB1 (n,%) komplikasi (44) berat (14) (22)
1 DRB1*01:01 1 (1,3) - 1 -
2 DRB1*03:01 1 (1,3) 1 - -
3 DRB1*04:03 2 (2,5) 3 - -
4 DRB1*04:05 3 (3,7) - - 3
5 DRB1*07:01 5 (6,3) 1 1 3
6 DRB1*08:01 1(1,3) - 1 -
7 DRB1*09:01 1(1,3) 1 - -
8 DRB1*11:01 1(1,3) - - 1
9 DRB1*12:01 1(1,3) - 1 -
10 DRB1*12:02 14(17,5) 11 2 1
11 DRB1*13:02 2(2,5) 1 - 1
12 DRB1*14:04 1(1,3) 1 - -
13 DRB1*15:01 15(18,7) 6 4 5
14 DRB1*15:02 19(23,8) 11 4 4
15 DRB1*15:11 1(1,3) 1 - -
16 Tidak terdeteksi 10(12,5) 6 - 4

Alel HLA-DRB1 yang dijumpai pada HLA-DRB1*07.01, HLA-DRB1*12:02,

ketiga kelompok sampel adalah HLA-
DRB1*12:02, DRB1*15:02 dan
DRB1*15:01 dengan jumlah paling
banyak adalah alel HLA-DRB1*15.02.
Sedangkan alel yang lain hanya ditemukan
pada 1 atau 2 kelompok malaria.
Diantara alel yang teridentifikasi,
sebanyak 20% (8/40) sampel merupakan
alel homozigot (jenis alel sama yang
diturunkan dari kedua orangtua), yaitu
HLA-DRB1*15:01 dan HLA-
DRB1*15:02 dengan frekuensi alel
homozigot terbanyak pada malaria tanpa
komplikasi sebanyak 10%. Alel HLA-
DRB1*07.01 dan HLA-DRB1*15:01 tidak
dijumpai pada malaria berat tetapi
dijumpai pada malaria tanpa komplikasi
atau non malaria , seperti tampak pada
Tabel 3.

89
Tabel 3. Identifikasi alel homozigot HLA-DRB1 berdasarkan kelompok malaria (n=40)

Alel Malariatanpa Malaria Non Total

homozigot komplikasi (22) berat (7) malaria (11) (40)
DRB1*07:01 - - 1 1
DRB1*12:02 1 1 - 2
DRB1*15:01 1 - 1 2
DRB1*15:02 2 1 - 3
Jumlah 4 2 2 8 (20%)

kurang, faktor pencucian yang kurang

Pembahasan
HLA merupakan antigen dengan
polimorfisme yang sangat tinggi dan
identifikasi HLA sering digunakan dalam
studi antropologi, forensik, transplantasi
jaringan, transfusi platelet serta deteksi
kerentanan dan resistensi suatu penyakit
1,16
. Di Indonesia penelitian tentang HLA
masih terbatas. Studi yang dilakukan pada
etnis Jawa Barat menunjukkan bahwa
polimorfisme HLA pada etnis tersebut erat
hubungannya dengan populasi di Asia
Tenggara, dan alel yang ditemukan adalah
HLA-A*24:07 (21,6%), HLAB*15:02
(11,6%), HLA-B*15:13 (11.2%) dan
HLA-DRB1*12:02 (37,8%) 16. Selain erat
hubungannya dengan etnis tertentu, alel
HLA juga berkaitan dengan beberapa
10,11,14
penyakit termasuk malaria
Metode pemeriksaan tipe HLA
beragam. Pada awalnya secara serologi
menggunakan antiserum dan secara
sitologi menggunakan kultur limfosit.
Selanjutnya berkembang ke arah
pemeriksaan molekuler yang hasilnya
lebih akurat dengan metode PCR-
Sequence Specific Primer (SSP), PCR-
SSO, sekuensing dan reference strand-
based conformation analysis (RSCA) yang
sekarang telah berkembang dan banyak
digunakan 17-19. Metode PCR-SSO dipilih
karena mempunyai akurasi yang tinggi,
bersifat spesifik, dan dapat digunakan
untuk pemeriksaan dengan banyak sampel
17
. Hasil penelitian menunjuk kan
tidak semua alel HLA-DRB1 (82,5%)
berhasil diidentifikasi, masih terdapat
12,5% alel yang tidak teridentifikasi
karena beberapa sebab antara lain;
konsentrasi DNA yang kemungkinan
sempurna atau primer yang kurang spesifik
terhadap alel yang diidentiikasi. Meskipun
untuk kemungkinan yang terakhir, kit
HLA yang digunakan pada penelitian ini
bersifat universal terhadap populasi di
seluruh dunia. Polimorfisme alel yang
sangat tinggi, memungkinkan munculnya
alel yang tidak spesifik (possibility allele).
Untuk memberikan hasil yang
optimal, konsentrasi DNA yang digunakan
sebaiknya 20 ng/ul 15. Spot darah kering
dapat digunakan untuk identifikasi alel
HLA, namun seringkali konsentrasi DNA
yang diperoleh tidak sebanyak whole
blood atau limfosit. Hal tersebut telah
diatasi dengan mengurangi volume pelarut
akhir pada saat isolasi DNA atau membuat
pengenceran bila konsentrasi DNA cukup
. tinggi. Pencucian, suhu dan waktu
inkubasi merupakan tahap yang penting
dalam proses hibridisasi. Pencucian yang
tidak sempurna/ terlalu keras saat
membuang cairan dapat menyebabkan
bead yang telah dilapisi probe di dalam
sumuran akan terbuang sehingga tidak
dapat dibaca oleh alat luminex. Kit ini
sensitif terhadap cahaya sehingga harus
dihindari paparan cahaya langsung15 (Lab
Type SSO-oneLambda Inc manual kit Rev
12). Metode SSO menggunakan prinsip
dasar teknologi luminex yang mempunyai
resolusi tinggi (mampu mendeteksi
minimal 4 digit alel HLA), volume sampel
yang digunakan sedikit dan mampu
mendeteksi semua alel HLA 20. Namun
karena variasi alel sangat banyak,maka
pemilihan kit HLA yang spesifik dengan
populasi yang diperiksa sangatlah penting .

90 Jurnal Biotek Medisiana Indonesia . Vol.5.2.2016:85-93


Alel HLA-DRB1 dominan yang
ditemukan adalah HLA-DRB1*15:02,
HLA-DRB1*15:01 dan HLA-
DRB1*12:02 dengan frekuensi sebanyak
17-23%. Ketiga alel tersebut ditemukan
pada semua kelompok sampel baik malaria
maupun non malaria. Alel lain yaitu HLA-
DRB1*01:01, HLA-DRB1*08:01 and
HLA-DRB1*12:01 hanya ditemukan pada
malaria berat, akan tetapi alel spesifik
HLA-DRB1*04:01 yang berkaitan dengan
kerentanan terhadap malaria berat tidak
ditemukan. Penelitian terdahulu
menunjukkan bahwa alel HLA-
DRB1*12:02 dan DRB1*15:02 juga
merupakan alel dominan yang ditemukan
pada etnis Jawa Barat, yang erat
hubungannya dengan populasi di Asia
Tenggara 16. Namun penelitian tersebut
tidak mengkaitkan tipe HLA dengan suatu
penyakit tertentu.
Empat alel homozigot (alel sama
yang diturunkan oleh kedua orangtua)
telah ditemukan, tiga diantaranya sama
dengan alel dominan di atas, ditambah
satu alel HLA-DRB1*07:01. Namun alel
homozigot HLA-DRB1*07:01 dan HLA-
DRB1*15:01 tidak ditemukan pada
malaria berat. Keuntungan dan kerugian
alel homozigot atau heterozigot terhadap
suatu penyakit masih diperdebatkan.
Doherty dan Zinkernagel (1975)
mengemukakan hipotesisnya bahwa
individu dengan alel HLA heterozigot
lebih resisten terhadap suatu penyakit
karena mampu mempresentasikan antigen
lebih banyak daripada alel homozigot 21-22,
yang selanjutnya antigen tersebut akan
dikenali oleh sistem kekebalan untuk
dimusnahkan.
Dalam penelitian ini ditemukan alel
HLA-DRB1*13:02 pada malaria tanpa
komplikasi (P vivax) dan non malaria.
Penelitian sebelumnya di Gambia
diketahui bahwa alel haplotype HLA-
DRB1*13:02 - DQB1*05:01 ternyata
berkaitan dengan proteksi terhadap malaria
berat 13. Penelitian serupa di Thailand
menunjukkan bahwa alel lain yaitu HLA-
HLA-DRB1 pada pasien …(Sarwo dkk)
DRB1*01:01 ternyata juga menunjukkan
hasil yang berbeda bermakna antara
malaria ringan dan malaria cerebral atau
berat 10. Namun sebaliknya dengan alel
HLA-DRB1*04 yang ternyata merupakan
faktor resiko malaria berat pada anak di
Ghana dan Gabon 11,23. Meskipun pada
penelitian ini ditemukan juga alel HLA-
DRB1*04, namun satu alel yaitu HLA-
DRB1*04:03 ditemukan pada malaria
tanpa komplikasi dan alel lainnya HLA-
DRB1*04:05 ditemukan pada non malaria.
Mengingat jumlah sampel dan frekuensi
alel HLA-DRB1 yang teridentifikasi relatif
kecil, maka hasil penelitian belum dapat
menggambarkan alel spesifik pada
masing- masing kelompok sampel malaria.
Tingkat keparahan malaria selain
ditentukan oleh faktor genetik manusia,
dapat dipengaruhi oleh faktor lainnya
seperti tingkat kekebalan dan pengobatan
yang adekuat serta faktor internal dari
parasit yaitu jenis spesies, densitas dan
sifat resistensi parasit 24-26.
Hasil penelitian pendahuluan ini belum
memberi gambaran yang spesifik alel
HLADRB1 pada tiap kelompok sampel
malaria. Namun data ini bermanfaat untuk
pemeriksaan dan analisis HLA selanjutnya
Kesimpulan
Dua tipe alel HLA-DRB1 yang paling
banyak ditemukan adalah HLA-
DRB1*15:02 (23.8%) and HLA-
DRB1*15:01(18.7%). Alel lain yaitu
HLA-DRB1*01:01, HLA-DRB1*08:01
and HLA-DRB1*12:01 hanya ditemukan
pada malaria berat, akan tetapi alel spesifik
HLA-DRB1*04:01 yang berkaitan dengan
kerentanan terhadap malaria berat tidak
ditemukan. Alel homozigot HLA-
DRB1*15:02 juga hanya ditemukan pada
malaria berat.
Meskipun menggunakan sampel
yang terbatas, hasil penelitian pendahuluan
ini belum memberi gambaran yang
spesifik alel HLADRB1 pada tiap
kelompok sampel malaria, namun studi
pendahuluan ini cukup bermanfaat untuk
pemeriksaan dan anaIisis HLA lebih lanjut
91
Saran
Untuk mendapatkan gambaran alel
HLA pada pasien malaria yang lebih
lengkap di Indonesia maka perlu dilakukan
penelitian dengan jumlah sampel yang
lebih besar dengan jenis alel HLA yang
lebih banyak. Pemilihan metode juga
perlu dipertimbangkan untuk memberikan
hasil yang lebih baik, lengkap dan cost
efektif.
Ucapan Terima Kasih
Terima kasih kami ucapkan kepada
Kepala Dinas Provinsi Kaliman Tengah
dan Direktur RS Doris Sylvanus,
Palangkaraya yang telah mengijinkan
pengambilan sampel di RS tersebut,
Kepala Dinas Kabupaten Katingan dan
Kepala Puskesmas Tumbang Samba
beserta staf yang telah mengijinkan dan
membantu pelaksanaan MBS di wilayah
desa Tumbang Kalemei, Kabupaten
Katingan.
Daftar Rujukan
1. Choo, SY., The HLA System: Genetics,
Immunology, Clinical Testing and Clinical
Implication. Yonsey Med J, 2007, 48 (01):
11-23.
2. Bothamley GH., Beck JS., Schreuder
GM., D'Amaro J., de Vries RR., Kardjito
T., Ivanyi J., Association of Tuberculosis and
M. tuberculosis-specific Antibody Levels with
HLA.J Infect Dis.1989; 159 (3): 549-555.
3. Vehic K., Hamman RF., Lezotte D.Norris
JM., Klingesmith GJ., Rewers M. and
Dabelea D., Trends in High-Risk HLA
Susceptibility Genes Among Colorado Youth
With Type 1 Diabetes. Diabetes Care, 2008,
31:1392–1396.
4. Kong NC., Nasruruddin BA., Murad S., Ong
KJ., Sukumaran KD., HLA Antigens in Malay
Patients with Systemic Lupus Erythematosus.
Lupus, 1994, 3 (5):393-5.
5. Ghabaee M., Bayati A., Amri Saroukolaei S,
Sahraian MA., Sanaati MH., Karimi P.,
Houshmand M., Sadeghian H., Hashemi
Chelavi L., Analysis of HLA DR2&DQ6
(DRB1*1501, DQA1*0102, DQB1*0602)
haplotypes in Iranian patients with multiple
sclerosis. Cell Mol Neurobiol. 2009 ,
29(1):109-14.
6. Yu RB., Hong X., Ding WL., Tan YF., Zhang
YX., Sun NX., Wu GL., Zhan SW., Ge DF.,
The Association Between the Genetic
Polymorphism of HLA-DQA1, DQB1, and
92
DRB1 and Serum Alanine Aminotransferase
Levels in Chronic Hepatitis C in the Chinese
Population, J GastroenterolHepatol, 2008 ,23
(9):1394-402.
7. Lan NTP., Kikuchi M., Vu TQ., Do
QH., Tran TT., Vo DT., Ha MT., Vo
VT., Cao TP., Tran VD., Oyama T., Morita
K., Yasunami M., Hirayama K., Protective
and Enhancing HLA Alleles, HLA-
DRB1*0901and HLA-A*24, for Severe
Forms of Dengue Virus Infection, Dengue
Hemorrhagic Fever and Dengue Shock
Syndrome, Plosntds, 2008, 2 (10).
8. Hsieha NK., Chuck CC., Leed NS., Leec HL.
and Linc M., Association of HLA-
DRB1*0405 with Resistance to Multibacillary
Leprosy in Taiwanese. Human Immunology,
2010, 71(7): 712-716.
9. Seesod N., Lindqvist AK., Allen M.,
Sueblinvong T., Perlmann H., Blomberg MT.,
Thaiting S., Perlmann P. and Gyllensten,
HLA Class 1 Loci and Malaria Infection in
Thailand, Hereditas, 2000,132:119- 127.
10. Hananantachai H., Patarapotikul J., Ohashi J.,
Naka I., Looareesuwan S. andTakunaga K.,
Polymorphism of the HLA-B and HLA-DRB1
Genes in Thai Malaria Patients. Jpn J Infect
Dis, 2005, 58:25-28.
11. Osafo-Addo AD., Koram KA., Oduro AR.,
Wilson M., Hodgson A., and Rogers WO.,
*HLA-DRB1*04 Allele Is Associated with
Severe Malaria in Northern Ghana. Am. J.
Trop. Med. Hyg, 2008, 78(2):251–255.
12. Hirayama K. Genetic Factors Associated with
Development of Cerebral Malaria and Fibrotic
Schistosomiasis. The Korean J of
Parasitology, 2002, 40 (4): 165-172.
13. Hill AVS., Allsopp CEM., Kwiatkowki D.,
Anstey NM., Twumasi P., Rowe PA., Bennett
S., Brewster D., McMichael A., Greenwood
BM., Common West African HLA Antigens
are Associated with Protection from Severe
Malaria, Nature, 1991, 352 : 595–600.
14. Lima-Junior JC., Rodrigues-da-Silva RN.,
Banic DM., Jiang J., Sing B., Fabrı´cio-Silva
GM., Porto LCS., Meyer EVS., Moreno
AMM., Barnwell JW., Galinski MR., de
Oliveira-Ferreira J., Influence of HLA-DRB1
and HLA-DQB1 Alleles on IgG Antibody
Response to the P. vivax MSP-1, MSP-3a and
MSP-9 in Individuals from Brazilian Endemic
Area. , Plos One, 2012, 7(5).
15. Product insert LABType® SSO Typing Tests
kit. One Lambda.
16. Yuliwulandari R., Kashiwase K., Nakajima
H., Uddin J., Susmiarsih TP., Sofro ASM. and
Tokunaga K. Polymorphisms of HLA Genes
in Western Javanese (Indonesia): Close
Jurnal Biotek Medisiana Indonesia . Vol.5.2.2016:85-93
 HLA-DRB1 pada pasien …(Sarwo dkk)

Affinities to Southeast Asian Populations. Allele-specific Measures. BMC Medical

Tissue Antigens, 2008, 73: 46–53. Genetics, 2003, 4. Diunduh dari
17. Ng J., Nurlay CK., Baxter-Lowe LA., Chepak http://www.biomedcentral.com/1471-
M., Cappe PA., et al., Large-scale 2350/4/2. PadaTanggal 12 Mei 2016.
Oligonucleotide Typing for HLA-DRB1/3/4 23. May J, Meyer CG., Kun JF, Lell B., Luckner
and HLA-DQB1 is Highly Accurate, Specific, D., Dippmann AK., Bienzle U., Kremsner
and Reliable. Tissue Antigens, 1993, 42: 473- PG., HLA Class II Factors Associated with
479. Plasmodium falciparum Merozoite Surface
18. Erlich HA., Opelz G. and Hansen J., HLA Antigen Allele Families, J Infect Dis, 1999,
DNA Typing Review and Transplantation. 179: 1042–1045.
Immunity, 2001, 14: 347–356. 24. WHO., Clinical, Behavioral and Economical
19. Mahdi BM., A Glow of HLA Typing in Factors Related to Severe Malaria (a
Organ Transplantation, Clinical and Multicenter Study in Africa Region). WHO
Translational Medicine, 2013, 2:6. Report. 2002.
20. Heinemann NM., HLA Genotyping and 25. Phillips A., Bassett P., Zeki S., Newman S.,
Antibody Characterization using the and Pasvol G.. Risk Factors for Severe
Luminex™ Multiplex Technology. Transfus Disease in Adults with Falciparum Malaria,
Med Hemother. 2009. 36:000–000. DOI: CID, 2009, 8: 871-878.
10.1159/ 000228834. 26. Schwartz E., Sadetzki S., Murad H. and
21. Doherty PC. and Zinkernagel RM., A Raveh D. ,Age as a Risk Factor for Severe
Biological Role for the Major Plasmodium falciparum Malaria in
Histocompatibility Antigens. Lancet, 1975, Nonimmune Patients, CID, 2001,33:1771-
1:1406-1409. 1777
22. Lipsitch M., Bergstrom CT., Antia R., Effect
of Human Leukocyte Antigen Heterozygosity
on Infectious Disease Outcome: The Need for
27. .

93