FIGURES 

AND TABLES SECTION: 

 
Figure 1: Growth of methionine auxotroph E.Coli colonies on different medium plates. Five variations of the original auxotrophic E.Coli 
strain and a wild type E.Coli strain were prepared and then plated. The medium plates included minimal medium (mm), mm + 
homoserine, mm + cystathionine, mm + homocysteine, mm + methionine, and LB (complete medium) plates. After incubation, the 
growth was recorded. 
  minimal  minimal  minimal 
minimal  minimal medium +  LB (complete 
medium +  medium +  medium + 
medium (plate  methionine (plate  medium, plate 
homoserine  cystathionine  homocysteine 
#1)  #5)  #6) 
(plate #2)  (plate #3)  (plate #4) 

WT (BW25113)  +  +  +  +  +  + 

Unknown methionine auxotroph #951  ­  ­  ­  ­  +  + 

metA­ methionine auxotroph  ­  ­  +  +  +  + 

metB­ methionine auxotroph  ­  ­  +  +  +  + 

metE­ methionine auxotroph  ­  ­  ­  ­  +  + 

metF­ methionine auxotroph  ­  ­  ­  ­  +  + 
 
Table 1: Results of biochemical pathway experiment as visually depicted in Figure 1. This table describes the media that each plate 
contained, the bacterial strains used, and the resulting growth on each plate. The results gathered indicated that our unknown 
methionine auxotroph #951 was similar to both metE­ and metF­ methionine auxotrophic strains in this experimental situation. This 
lead to the development of a transformation rescue experiment to test which of those two genes specifically was mutated in our 
unknown methionine auxotrophic strain.  
POSITIVE CONTROL        MetF+ and PCA TRANSFORMATION   MetE+ and PCA TRANSFORMATION NEGATIVE CONTROL 
Figure 2: Resulting growth of the bacterial transformation of our strain of E.Coli with a single plasmid onto complete medium. Each 
plate was also transformed in the presence of the antibiotic chloramphenicol. Growth was only recorded after incubation when PCA 
was present in the transformation. From the growth determined in Table 1, we used the plasmids MetE+ and MetF+ in the 
transformation to create two strains that would be used to determine which gene our mutation was located in. We also plated our 
original E.Coli strain with and without PCA for a positive and negative control group. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
       MINIMAL MEDIUM PLATE
                  COMPLETE MEDIUM PLATE 
Figure 3: Growth of transformed E.Coli strains onto a minimal medium plate and a complete medium plate both with chloramphenicol. 
After incubation, growth was recorded on the complete medium plate on all three sections containing PCA. On the minimal medium 
plate, the only growth recorded was where the MetE+ and PCA transformed therefore determining that our unknown mutation was 
located in the MetE gene.