CONTROLUL MICROBIOLOGIC AL AERULUI

Are drept scop îndeplinirea şi realizarea criteriilor de igienă şi a criteriilor de

siguranţă a alimentelor din diverse spaţii de procesare, transport şi comercializare,
destinate industriei alimentare, farmaceutice, localurilor publice și mediului
spitalicesc.
O metodă clasică cu minimum de dotare o reprezintă metoda Koch. Această
metodă constă în expunerea la aer, timp de 10 minute, a unor cutii Petri conținând
mediu nutritiv (geloză simplă și Potato Dextroso Agar) și astfel, colectarea, pe
suprafața acestuia, a particulelor microbiene, care se depun gravitațional, urmată de
incubarea materialului. În funcție de dimensiunile încăperii, numărul cutiilor Petri
utilizate poate să varieze între 7 și 12. Plăcile se aşază astfel:
- repartizarea lor în încăpere trebuie să fie cât mai uniformă;
- la o distanță de 1 - 1,5 m față de pereți și de 2 m unele față de altele;
- în încăperile de lucru, la nivelul suprafeţelor de lucru;
- în depozite: la înălţimea de 0,8 - 1,0 m.
După 10 minute, plăcile se acoperă cu capacele lor și se incubează la 37°C,
timp de 48 de ore.

Raportarea rezultatelor
După perioada de incubare se numără coloniile bacteriene crescute pe
suprafața gelozei simple, respectiv coloniile de fungi filamentoși (mucegai crescute)
pe mediul potato dextroso agar.

CONTROLUL BACTERIOLOGIC AL MÂINILOR

Fiecare deget se tamponează ușor pe suprafața mediului Mannitol Salt Agar repartizat
în plăci Petri. Plăcile se incubează la 37°C, timp de 48 de ore.

Raportarea rezultatelor

După perioada de incubare se examinează plăcile pentru detectarea prezenței S.

aureus (colonii galbene cu zone galbene).
 CONTROLUL MICROBIOLOGIC AL APEI

Principiul metodei
Metoda prevede filtrarea unui volum de apă și incubarea membranelor pe
mediul de cultură adecvat.

Materiale necesare
 Baloane Erlenmeyer de diferite volume, sterile (100 cm3, 200 cm3)
 Membrane filtrante din celuloză ester cu diametrul cuprins între 47-50 mm,
având pori cu diametrul de 0,22 µm, prevăzute cu grile
 Plăci Petri sterile, cu diametre diferite (55mm, 90mm)
 Pense

Medii de cultură
 Nutrient Agar (VWR, Franța): 40 g pentru 1 litru de apă distilată mediul a fost
suplimentat cu antibiotic (cicloheximidă: 0,5 mg.mL-1 în etanol de 65°) pentru
inhibarea fungilor;

Echipamente
 Sistem de filtrare

Protocol de lucru
Prelevarea probelor de apă:
 Din rețeaua de apă potabilă (de la robinet):
- se folosesc sticle de 100 - 150 mL, cu dop rodat sau de cauciuc, sterile;
- se deschide robinetul şi se lasă să curgă apa în jet puternic, timp de 5 - 10
minute, după care se închide robinetul şi se flambează;
- se deschide din nou robinetul şi se reglează debitul apei, astfel încât să se
formeze o coloană de apă continuă cu diametrul de maximum 1 cm;
- se scoate dopul flaconului, se aşază vertical sub coloana de apă, se umple
şi se acoperă cu dopul
Filtrarea probelor cu ajutorul sistemului de filtrare (fig. 1)
Se conectează sistemul de filtrare, se așează membranele filtrante pe suport
având grijă să se respecte condițiile sterile de manipulare.
Se filtrează un volum din probă, utilizând membranele filtrante cu diametru
0,22 µm.
După filtrarea rapidă a probei de analizat, cu ajutorul vidului, filtrul încărcat
cu microorganisme se depune în condiții aseptice pe mediu de cultură Geloză simplă
și se incubează în condiții optime: 37°C , timp de 24 - 96 ore (fig.1).
Cuantificarea numărului de germeni viabili din probă se determină prin
numărarea coloniilor dezvoltate pe filtru și raportarea acestora la volumul inițial al
probei din care provin (fig. 1).
Rezultatele se exprimă în U.F.C./mL probă, după tehnica de calcul cunoscută.
Pentru o determinare corectă, pe o membrană filtrantă, cu un diametru de 47 mm, nu
trebuie să se depășească o încărcătură de 60 - 80 colonii. În cazul probelor prea bogate
în microorganisme, care determină apariția unui număr prea mare de colonii pentru a
putea fi numărate, se notează rezultatul cu T.N.T.C (Too Numerous To Count),
conform sistemului de notare U.E.
Fig. 1. Determinarea numărului de microorganisme viabile
dintr-o probă lichidă, cu ajutorul membranelor filtrante