CURSO VIRTUAL Unidad 2: Mitocondria * Mitocondria: estructura y origen * Funciones y caracteristicas de las mitocondrias. Clase dictada por: Prof. Angel Maldonado NEWTONn NEWTON Un componente lipidico de las membranas mitocondrial interna y también de la membrana bacteriana es la card Investiga: éQué es la simbiosis? @Soloocurre entre las células? Unidad 2: Mitocondria Ingreso a Medicina | Carreras cientificas afines Mitocondria Son organulos celulares encargados de suministrar la mayor parte de la energia necesaria para la actividad celular (respiracién celular). Actiian como centrales energéticas de la célula y sintetizan ATP a expensas de los carburantes metabdlicos (glucosa, dcidos grasos y aminodcidos). ORIGEN DE LAS MITOCONDRIAS la cientifica estadounidense Lynn Margulis, junto con otros cientificos, recuperé en torno a 1980 una antigua hipétesis, reformuldndola como teoria endosimbiética. Seguin esta version actualizada, entre unos 2300-1800 millones de afios, una célula procariota capaz de obtener energia de los nutrientes orgdnicos empleando el oxigeno molecular como oxidante, se fusioné en un momento de la evolucién con otra célula procariota o eucariota primitiva al ser fagocitada sin ser inmediatamente digerida, un fenémeno frecuentemente observado. De esta manera se produjo una sim! permanente entre ambos tipos de seres: la procariota fagocitada proporcionaba energia, especialmente en forma de ATP y la célula hospedadora ofrecfa un medio estable y rico en nutrientes a la otra. Este mutuo beneficio hizo que la célula invasora llegara a formar parte del organismo mayor, acabando por convertirse en parte de ella: la mitocondria. Otro factor que apoya esta teoria es que las bacterias y las mitocondrias tienen mucho en comiin, tales como 2(2) Las mitocondrias suelen ser similares en su tamafio yen su forma a las bacterias, aunque estas caracteristicas pueden variar segtin el tipo celular. hipétesis 0 teoria \que explique el origen de Tas mitocondrias? brevemente. el tamafio, la estructura, componentes de su membrana y la forma en que producen energia, etc. membranas internas membrana ats célula procariota derivada de robia la célula eucariota Esta hipétesis tiene entre Sus fundamentos la evidencia de que las mitocondrias poseen su propio ADN y estén recubiertas por su propia membrana. Otra evidencia que sostiene esta hipétesis es que el cédigo genético del ADN mitocondrial no suele ser el mismo que el cédigo genético del ADN nuclear. A lo largo de la historia comin la mayor parte de los genes mitocondriales han sido transferidos al nticleo, de tal manera que la mitocondria no es viable fuera de la célula hospedadora y ésta fio stile s8Hlo sini mitocondrias: ESTRUCTURA Y COMPOSICION La morfologia de la mitocondria es dificil de describir puesto que son estructuras muy plasticas que se deforman, se dividen y fusionan. Normalmente se las representa en forma alargada. Su tamajio oscila entre 0,5 y 1 um de didmetro y hasta 8 um de longitud. Su ntimero depende de las necesidades energéticas de la célula. Al conjunto de las mitocondrias de la célula se le denomina condrioma celular. Las mitocondrias estén rodeadas de dos membranas claramente diferentes en sus funciones y actividades enzimaticas, que separan tres espacios: el citosol (o matriz citoplasmética), el espacio intermembranoso y la matriz mitocondrial.Son orgdnulos con gran movilidad que cambian constantemente de forma y posicién estén presentes en gran numero entre 1000 a 2000 en una célula hepatica por ej. La membrana interna es impermeable al pasaje de lociones y de la mayoriade las moléculas pequefias. dEstaafirmacién es correcta? Justifica tu respuesta. (ee) Las crestas mitocondriales aumentan la superficie donde pueden Ilevarse a cabo la sintesis de ATP. MEMBRANA MITOCONDRIAL EXTERNA Es una bicapa lipidica exterior permeable a iones, metabolitos y muchos polipéptidos: Eso es debido a que contiene proteinas que forman poros, ilamadas porinas 0 VDAC (de canal aniénico dependiente de voltaje), que permiten el paso de grandes moléculas de hasta 5.000 dalton y un didmetro aproximado de 20 A. La membrana externa realiza relativamente pocas funciones enzimaticas o de transporte. Contiene entre un 60 y un 70 % de proteinas. MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA. La membrana interna contiene mas proteinas (80 %), carece de Poros \y 5) altamehte Selectiva; eontien@, muchos complejos €nzimaticos y Sistemas de transporte transmembrana, que estén implicados en la translocacién deimoléculas. CRESTAS MITOCONDRIALES En la mayoria de los eucariontes, las crestas forman tabiques aplanados perpendiculares al eje de la mitocondria, pero en algunos protistas tienen forma tubular o discoidal. Estudios recientes demostraron que la membrana de las crestas no se forma por invaginacién de la membrana interna, sino que conforman un sistema membranoso aparte de la membrana interna y la externa. Se conectan ala membrana interna en puntos concretos que facilitaran el transporte de metabolitos entre los distintos compartimentos de la mitocondria. En la membrana de las crestas se llevaran a cabo funciones relacionadas con el metabolismo oxidativo como la cadena respiratoria o la fosforilacién oxidativa.Ef Marca V o F: El espacio intermembrana es quimicamente equivalente al citosol. Just tu respuesta. (=) la beta oxidacién, es un proceso de catélisis de las grasas (dcidos grasos) el cual se transforma en Acetil-Coa y se libera NADH y FADH. alas membranas de las mitocondrias son quimicamente —_iguales? Justifica tu respuesta Particuas de ATP-sintasa Espacio intermembrana Rlbosoma Grinulos Membrana interna ‘Membrana externa ESPACIO INTERMEMBRANOSO Entre mbas membranas queda delimitado un espacio termembranoso que esté compuesto de un liquido similar al hialoplasma; tienen una alta concentracién de protones como resultado del bombeo de los mismos por los complejos enzimaticos de la cadena respiratoria. En él se localizan diversas enzimas que intervienen en la transferencia del enlace de alta energia del ATP, como la adenilato quinasa o la creatina quinasa. También se localiza la carnitina, una molécula implicada en el transporte de dcidos grasos desde el ‘itosol hasta la/matriz'mitocondrialh yy 'serdin oxidados (beta- -s=oxidati6n). rs . MATRIZ MITOCONDRIAL La matriz mitocondrial o mitosol contiene menos moléculas que el citosol, aunque contiene iones, metabolitos a oxidar, ADN circular bicatenario muy parecido al de las bacterias, ribosomas tipo 55S (70S en vegetales), llamados mitorribosomas, que realizan la sintesis de algunas proteinas mitocondriales, y contiene ARN mitocondrial; es decir, tienen los orgdnulos que tendrfa una célula procariota de vida libre. En la matriz mitocondrial tienen lugar diversas rutas metabélicas clave para la vida, como el ciclo de Krebs y la beta-oxidacién de los acidos grasos; también se oxidan los aminodcidos y se localizan algunas reacciones de la sintesis de urea y grupos hemo.El adenosin trifosfato (ATP) es un nucledtido fundamental en la obtencién de energia celular, Formado por 3 grupos fosfato, una base nitrogenada y un azticar pentosa ribosa. Reflexiona: dlos fosfolipidos de. la membrana _mitocondrial son iguales o diferentes a los de la membrana celular? —— Ss FUNCION DE LA MITOCONDRIA la principal funcién de_las mitocondrias es la oxidacién de metabolitos (ciclo de‘Krebs, beta-oxidacién de dcidos grasos) y la obtencién de ATP. mediante la fosforilacién oxidativa, que es dependiente de la cadena transportadora de electrones; el ATP producido en la mitocondtia supone un porcentaje muy alto del ATP |sintetizado por la célula. También sirve de almacén de sustancias como iones, agua y algunas particulas como restos de virus'y protefna. GLUCOLISIS Es la_ruta_metabélica_encargada_de oxidar la glucosa con la finalidad de obtener energia para la ¢élula, Consiste en reacciones enziméticas consecutivas que convierten ala glucosa en dos “"Moléculas de dcido pirtivico, el cUal es capaz de seguir otras vias metabélicas y asi continuar entregando energia al organismo. Esta ruta se realiza tanto en ausencia como presencia de oxigeno, definido como proceso anaerébico. GENERALIDADES DE LA GLUCOLISIS Durante la glucélisis se obtiene un rendimiento neto de dos moléculas de ATP; el ATP puede ser usado como fuente de energia para realizar trabajo metabélico, mientras que el NADH puede tener diferentes destinos. Puede usarse como fuente de poder reductor en reacciones anabélicas; si hay oxigeno, puede oxidarse en la cadena respiratoria, obteniéndose 5 ATP (2.5 por cada NADH); si no hay oxigeno, se usa para reducir el piruvato a lactato (fermentacién ldctica), 0 a CO2y etanol (fermentacién alcohdlica), sin obtencién adicional de energia.=> NaoN la alco es también ©, Se ca co, conocida como via de Embden-Meyerhof, explicada inicialmente por Gustav Embden y Otto Fritz NADH + Meyerhof. mK nant Further oxidation isTOP! Es un buen La glucdlisis es la forma més répida de conseguir energia para una momento para realizar una célula y, en el metabolismo de carbohidratos, generalmente es la pausa, descansar un poco y primera via a la cual se recurre. Se encuentra estructurada en recargar pilas para seguir reacciones enzimaticas que permiten la transformacién de una molécula de glucosa a dos moléculas de piruvato mediante un aprendiendo. proceso catabélico. La glucélisis es una de las vias mas estudiadas, y generalmente se encuentra dividida en dos fases: la primera, de gasto de energfa y la segunda fase, de obtencién de energis 1) La primera fase consiste en transformar una molécula de glucosa-en-dos moléculas de gliceraldehido (una molécula q de baja energia) mediante el uso de 2 ATP. Esto permite | duplicarslos resultados de:la segunda fase de obtencién energética. f \ _____ 2) ‘En la segunda fase, el gliceraldehic ant ansforma en un compuesto de alta energia, cuya hidrdlisis genera una molécula de ATP, y como se generaron 2 moléculas de gliceraldehido, se obtienen en realidad dos moléculas de ATP. Esta obtencién de energia se logra mediante el acoplamiento de una reaccién fuertemente exergénica después de una levemente endergénica. Este Existen bacterias que son acoplamiento ocurre una vez mas en esta fase, generando capaces de realizar la dos moléculas de piruvato. De esta manera, en la segunda fase se obtienen 4 moléculas de ATP. fermentacién léctica, muy das en la industria limenticia.€} 2am alimenticia. Ej. de estas es a el Lactobacillus bulgaricus. ree Gs 7a Marca V o F: El dcido lactico se reutiliza en higado para la obtencién de glucosa. Ju respuesta ica tu En la actualidad ha empezado a sintetizarse también etanol mediante la fermentacién a nivel industrial a gran escala para ser empleado como biocombustible. a RENDIMIENTO NETO DE LA GLUCOLISIS Elrendimiento total de la glucélisis de una sola glucosa (6C) es de 2 ATP y no 4 (dos por cada gliceraldehido-3-fosfato (3C)), ya que se consumen 2 ATP en la primera fase, y 2 NADH (que dejaran los electrones en la cadena de transporte de electrones para formar 3 ATP por cada electrén). Con la molécula de pirtivico, mediante un paso de oxidacién intermedio llamado descarboxilacién oxidativa, mediante el cual el pirtivico pasa al interior de la mitocondria, perdiendo COz y un electrén que oxida el NAD*, que pasa a ser NADH més H* y ganando un CoA-SH (coenzima A), formandose en acetil-CoA gracias a la enzima_pirtivico deshidrogenasa, se puede entrar al ciclo de Krebs (que, junto con la cadena de transporte de electrones, se denomina respiracién). DESTINO DEL PIRUVATO. Segiin las condiciones de aerobi piruvato puied@ seguir las vias de la fermentacién (léctica 0 alcohélica) 0 la descarboxilacién oxidativa, esta ultima ocurre en la matriz mitocondrial. FERMENTACION LACTICA Es una ruta metabélica anaerébica que ocurre en la matriz citoplasmica-de la célula, en la cual se fermenta la glucosa (se oxida parcialmente) para obtener energia metabélica y un producto de desecho que principalmente es el dcido lactico. En este proceso el Acido pirivico Se transforma en acido lactico por Accién del lactato deshidrogenasa enzima que utilizan NAD (se Una NADH en la formacién de lactato) como coenzima, este es un proceso reversible. eo 2 |NAD*} Lactato La fermentacién lactica también se verifica en el tejido muscular cuando, a causa de una intensa actividad motora anaerébica, no se produce una aportacién adecuada de oxigeno que permita el 8Marca Vo F: la fermentacién _alcohélica solo ocurre en organismo fermentativos como las levaduras y algunas células intestinales. El Acetil-Coa también es producto directo dela beta oxidacién y — produtto indirecto del catabolismo de proteinas. desarrollo de la respiracién aerébica. Cuando el dcido lac acumula en las células musculares produce sintomas asociados con la fatiga muscular. Algunas células, como son los eritrocitos, carecen de mitocondrias de manera que se ven obligadas a obtener energia por medio de la fermentacién léctica; por el contrario, el parénquima muere répidamente ya que no fermenta, su tinica fuente de energia es la respiracién aerébica. FERMENTACION ALCOHOLICA Es un proceso bioldgico de fermentacién en plena ausencia de oxigeno , originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los hidratos de carbono (por regla general, azticares: por ejemplo, la glucosa, la fructosa, la sacarosa, es decir, cualquier sustancia que tenga la forma empirica de la glucosa, es decir, una hexosa) para obtener como productos finales: un alcohol en forma de etanol (cuya formula quimica es: CH3-CH2-OH), diéxido de carbono (C03) en forma de gas y moléculas de adenosin trifosfato (ATP) que consuménmlos propios microorganismos en su metabolismo celular energético anaerobio. El etanol resultante se emplea en la elaboracién de algunas bebidas alcohdlicas, tales como el vino, la cerveza, la sidra, el cava, etc. GLUCOLISIS. Acetakiehido la fermentacién alcohdlica tiene como finalidad biolégica proporcionar energia anaerébica a los microorganismos unicelulares (levaduras) en ausencia de oxigeno a partir de la glucosa. En el proceso, las levaduras obtienen energia indo las moléculas de glucosa y generan como desechos alcohol y CO2. las levaduras y bacterias causantes de este fenémeno son microorganismos muy habituales en las frutas y cereales y contribuyen en gran medida al sabor de los productos fermentados.Investiga: éEn qué consiste la beta Describe brevemente. jacién? (2) Aunque el ciclo del acido 0/Krebs es considerado como una parte del metabolisiio aerobio no utiliza oxigeno molecular en Sus reac nes. Maraca Vo F: La fosforilacién a nivel de sustrato se da en la 22 etapa de la glucolisis y en el ciclo del Acido citrico. Justifica tu respuesta. DESCARBOXILACION DEL PIRUVATO la oxidacién del piruvato es un conjunto de reacciones bioquimicas catalizado por un complejo enzimético (piruvato deshidrogenasa) localizado en la matriz mitocondrial. Se trata de una descarboxilacién oxidativa y es la etapa previa al ciclo de Krebs y posterior a la glucélisis en el proceso de respiracién celular, levado a cabo en células aerobias y facultativas en presencia de oxigeno. El piruvato (que posee tres dtomos de carbono) generado en la etapa de glucélisis sale del citoplasma y atraviesa la membrana externa mitocondrial de forma pasiva debido a la alta permeabilidad de la misma. Posteriormente, ingresa a la matriz mitocondrial mediante un mecanismo de simporte con protones que le permite atravesar la membrana interna de la mitocondria (utilizando la fuerza protonmotriz generada por la cadena respiratoria). Dentro de la matriz mitocondrial, el piruvato sufre una descarboxilacién oxidativa en la que interviene el complejo de tres enzimaS que forman la piruvato deshidrogenasa. Este complejo enzimatico pose varios cofactores (pirofostato de tiamina, dcido lipéico, coehzima A, FAD y NAD*) y es el encargado de catalizar la conversién del piruvato a acetil-CoA. Acido pirivico Acetil CoA BO) ae) Durante este proceso el grupo carboxilo del piruvato se libera como diéxido de carbono (C02). El resto de la molécula de piruvato termina conformando el grupo acetilo (de dos dtomos de carbono) el cual se une con la Coenzima A y genera acetil-CoA. El aceptor Ultimo de electrones de esta secuencia de reacciones es el NAD’, que se reduce generando NADH y H’. Cuando concluye esta etapa, el acetil-CoA ingresa al ciclo de Krebs. Al final, la descarboxilacién oxidativa es generar 2 moléculas de NADH, lo que seria igual a 6 moléculas de ATP, esto se obtiene cuando el NADH lleva sus equivalentes de reduccién a la cadena transportadora de electrones. Ciclo de Krebs ST El ciclo de Krebs tiene lugar en la matriz mitocondrial en la célula eucariota. El acetil-CoA (Acetil Coenzima A) es el principal 10En el ciclo de Krebs se utiliza H2O en diferentes reacciones una de ellas es formar COz, En cada ciclo se escinden 3 moléculas de 20. a Marca V 0 F: EI NADH solo se libera en las reacciones de lisis de azucares y lipidos. Justifica la respuesta. precursor del ciclo. El écido citrico (6 carbonos) o citrato se obtiene en cada ciclo por condensacién de un acetil-CoA (2 carbonos) con una molécula de oxalacetato (4 carbonos). Los dos carbonos del acetil-CoA son oxidados a CO:, y la energia que tenia acumulada es liberada en forma de energfa quimica: GTP y poder reductor (electrones de alto potencial) como el NADH y FADH2. NADH y FADH2 son coenzimas (moléculas que se unen a enzimas) capaces de acumular la energia en forma de poder reductor para su conversién en energia quimica en la fosforilacién oxidativa. (Acetil-CoA| [Oxalacetato Citrato| & RESUMEN DEL CICLO DEL KREBS a) El paso final es la oxidacién del ciclo de Krebs, produciendo un oxalacetato y dos CO2. b) Elacetil-CoA reacciona con una molécula de oxalacetato (4 carbonos) para formar citrato (6 carbonos), mediante una in de condensacién. ©) Através de una serie de reacciones, el citrato se convierte de nuevo en oxalacetato. d) Durante estas reacciones, se substraen 2 dtomos de carbono del citrato (6C) para dar oxalacetato (4C}; dichos 4tomos de carbono se liberan en forma de CO2. e) Elciclo consume netamente 1 acetil-CoA y produce 2 CO2. ‘También consume 3 NAD‘ y 1 FAD, produciendo 3 NADH* 3H" y 1 FADH2. f) Elrendimiento de un ciclo es por cada molécula de Ac Coa es de: 1 GTP, 3 NADH + 3H*, 1 FADH2, 2COz. #) Cada NADH, cuando se oxide en la cadena respiratoria, originaré 3 moléculas de ATP (3 x 3 = 9), mientras que el FADH: dard lugar a2 ATP. Por tanto, 9+2+1GTP = 12 ATP, por cada acetil-CoA que ingresa en el ciclo de Krebs. 1(=) El NAD’ puede ser sintetizado por aa triptéfano 0 —dcido aspartico. También se puede obtener de la vitamina niacina (B3) sustratos para. su formacién. Investig: Qué es una coenzima? ‘Ademés del FAD* y NAD*, éExisten otras coenzimas? FORMACION DE ATP APARTIR DEL NADH Y FADH2 La energia disponible proviene de la degradacién de los hidratos de carbono, las grasas y otros nutrientes consumidos en las primeras etapas de su oxidacién se almacena inicialmente en forma de moléculas transportadoras activadas conocidas como NADH Y FADH2 NICOTINAMIDA ADENINA DINUCLEOTIDO El dinucledtido de nicotinamida y adenina, también conocido como nicotin adenin dinucledtido o nicotinamida adenina dinucleétido (abreviado NAD* en su forma oxidada y NADH en su forma reducida), es una coenzima que se halla en las células vivas y que esta compuesta por un dinucledtido, es decir, por dos nucledtidos, unidos a través de grupos fosfatos: uno de ellos es una base de adenina y_el,otro, una nicotinamida. Su funcion principal es el intercambio de electrones y protones y la producciém de energia de todas las células. ° free Lean» oo Oo En el metabolismo, el NAD*/@sta \implidado eh reacciones de Teductién-oxidacién, llevando los ‘electrones de una a otra. Debido'a esto, la coenzima se enéuientra en dos formas: como un agente oxidante, que acepta electrones de otras moléculas. ‘Actuando de ese modo da como resultado la segunda forma de la coenzima, el NADH, la especie reducida del NAD* y puede ser usado como agente reductor para donar electrones. Ribo “APP Ribo“APP Reduccién ts Oxidacién H NH3 NH2 NAD’ +H'+2e- ——» NADH Las reacciones de transferencia de electrones son la p funcién del NAD* que también se emplea en otros procesos celulares, siendo el mas notable su actuacién como sustrato de 12La vitamina B2 es necesaria para la integridad de la piel, las mucosas y de forma especial para la cOrnea, por su actividad oxigenadora, siendo imprescindible para la buena vi Marca Vo F: En las mitocondi syenlas bacterias aerobias los e proviene de! metabolismo de glucosa 0 dcidos grasos. Justifica tu respuesta. enzimas que adicionan o eliminan grupos quimicos de las protefnas en las modificaciones postraduccionales. FLAVIN ADENIN DINUCLEOTIDO El flavin adenin dinuclestido o dinuclestido de flavina y adenina (abreviado FAD en su forma oxidada y FADH2 en su forma reducida) es una coenzima que interviene en las reacciones metabélicas de oxidacién-reduccién. EI FAD es una molécula compuesta por una unidad de riboflavina (vitamina 62), unida a un pirofosfato (Pi), éste unido a una ribosa y ésta unida a una adenina. Por tanto, la molécula es en realidad ADP unido a riboflavina; o también AMP unido ala coenzima FMN (flavin mononuclestido). E! FAD es una coenzima que interviene como dador o aceptor de electrones y protones (poder reductor) en reacciones metabélicas redox; su estado oxidado (FAD+) se reduce a FADH? al aceptar.dos étomos de hidrégeno (cada uno formado por un electrén y un protén). Por tanto,al reducirse capta dos protones y dos electrones, lo que lo capacita para intetvenir como dador de energia o de poder reductor en el metabolismo. Por ejemplo, el FAD (y también el NAD) se reduce en el ciclo de Krebs y se oxida en la cadena respiratoria (respiracién aerdbica). NAD redox action man é ND NaDes NAO" 2H" 426= NADH HE Estas moléculas transportadoras (NADH y FADH:) donan sus electrones de alta energia a la cadena transportadora de e" de la membrana mitocondrial y por lo tanto se oxidan a NAD* y FAD*. Los electrones, pasan rdpidamente a lo largo de la cadena al oxigeno molecular y forman agua. La energia que se libera durante el paso de los electrones a lo largo de la cadena transportadora es aprovechada para bombear H* a través de la membrana mitocondrial interna y este gradiente de protones resultante a su vez impulsa la sintesis de ATP. En consecuencia, la membrana mitocondrial interna acta como dispositivo que convierte la energia contenida en los electrones de alta energia del NADH reducido en enlaces de fosfato de alta 13En la fotosintesis los e° son provistos por la luz solar y son captados por los cloroplastos. Hay bacterias que usan __sustancias inorgénicas como el H*, Fe el Scomo fuente de e. Marca Vo F: las reacciones de oxidacién consisten en la pérdida o ganancia de O2, HY ye. Justifica tu respuesta energia de ATP. Este mecanismo quimiosmético de sintesis de ATP se denomina fosforilacién oxidativa porque implica tanto el consumo de oxigeno como al agregado de un grupo fosfato al ADP lo que forma ATP. Cadena transportadora de electrones Es una serie de transportadores de electrones que se encuentran en la membrana interna de bacterias, en la membrana interna mitocondrial o en las membranas tilacoidales, que mediante reacciones bioquimicas producen trifosfato de adenosina (ATP), que es el compuesto energético que utilizan los seres vivos. Solo dos fuentes de energia'son utilizadas por los organismos vivos: reacciones de reduccién-oxidacién y la luz solar (fotosintesis). Los organismos que utilizan las reacciones redox para producir ATP se les conoce con el nombre de quimioautétrofos, mientras que los que utilizan la luz solar para tal evento se les conoce por el nombre de fotoautétrofos. Ambos tipos de organismos utilizan sus cadenas de transporte de electrones para convertir la energia en ATP. a, = CHLOROPLAST >. [CELL RESPIRATION | iccnonnmn GENERALIDADES La misién de la cadena transportadora de electrones es la de crear un gradiente electroquimico que se utiliza para la sintesis de ATP. Dicho gradiente electroquimico se consigue mediante el flujo de electrones entre diversas sustancias de esta cadena que favorecen en Ultimo caso Ia translocacién de protones que generan el gradiente anteriormente mencionado. De esta forma podemos deducir la existencia de tres procesos totalmente dependientes: 14Las sustancias liposolubles son aquellas que se pueden disolver en grasa 0 aceites, como algunas vitaminas (A, D, Ey K) 0 la misma ubiquinona (imagen). ° c ne? ie HENo. yn ol lee Marca V o F: Las sustancias liposolubles como, el alcohol, la urea y laglucosa atraviesan la célula por transporte pasi tu respuesta. A) Un flujo de electrones desde sustancias individuales y uso de la energia desprendida de ese flujo de electrones que se utiliza para la translocacién de protones en contra de gradiente, por lo que energéticamente estamos hablando de un proceso desfavorable. B) Uso de ese gradiente electroquimico para la formacién de ATP mediante un proceso favorable desde un punto de vista energético. la cadena de transporte de electrones produce energia para la formacién de un gradiente electroquimico, es decir se utiliza ese flujo para el transporte de sustancias a través de membrana. Este gradiente se utiliza para realizar, posteriormente un trabajo mecénico, como puede ser la rotacién de un flagelo bacteriano o la sintesis de ATP, que es imprescindible para un organismo. Esta cadena también consiste en una serie de transportadores que actian secuencialmente, los cuales son generalmente proteinas integrales de membrana con grupos prostét aceptar y/o donar 1 0 2 electrones. ey ‘Deane arigeta |Qritcomarenget Fb pins) | Geuceimetstn Evsayighernie Odi aryiguemieses Transportadores mitocondriales Se han identificado cuatro complejos enzimaticos unidos a membrana interna mitocondrial. Tres de ellos son complejos ‘transmembrana, que estén embebidos en la membrana interna, mientras que el otro esté asociado a membrana. Los tres complejos transmembrana tienen la capacidad de actuar como bombas de protones. 15Una enzima son moléculas orgénicas proteicas que actin como catalizadores de reacciones quimicas acelerando la velocidad de reaccién sin formar parte de los sustratos ni de los productos. 2 A a beets sslaeas ‘adit Chieti Ed Ef Marcar V 0 : La bomba de protones es una estructura exclusiva de la membrana mitocondrial_ interna en células euca tu respuesta. COMPLEIO! El complejo | 0 NADH deshidrogenasa o NADH ubiquinona oxidorreductasa capta dos electrones del NADH y los transfiere a un transportador liposoluble denominado ubiquinona (Q). El iol producto reducido, que se conoce con el nombre de ubi (QH:) puede difundir libremente por la membrana. COMPLEJO II El complejo Il o succinato deshidrogenasa; no es una bomba de protones. Ademés, es la Gnica enzima del ciclo de Krebs asociado amembrana. Este complejo acta oxidando el FADH2 que se forma durante la conversién de succinato en fumarato en el ciclo del Acido citrico. A continuacién, los electrones son transferidos por medio de una serie de centros FeS (sulfoférricos) hacia Q. Espacio intermembranal Matriz mitocondtrial Memisrana mitocondrial intema COMPLELO III El complejo Ill o complejo citocromo be1; obtiene dos electrones desde QH2 y los transfiere a dos moléculas de citocromo c, que es un transportador de electrones hidrosoluble que se encuentra en elespa intermembrana de la mitocondria. COMPLEJO IV El complejo IV o citocromo ¢ oxidasa; capta cuatro electrones de las cuatro moléculas de citocromo c y se transfieren al oxigeno (02), para producir dos moléculas de agua (H:0). Al mismo tiempo, 16(=) Una coenzima es un componente _ inorgéi presente en las enzimas y necesario para__—el funcionamiento de las mismas. Ej.: el NADP, FAD, Coenzima A, coenzima Q, etc. ‘O- ‘coenzima apoenzima holoenzima las as estén formadas por coenzimas? Una coenzima y un cofactor son lo mismo? Marca V0 F: La fosforilacién a nivel de sustrato se tiene que dar siempre en presencia de oxigeno. Ju respuesta. tu se translocan cuatro protones al espa: cuatro electrones. ytermembrana, por los Transportadores Moviles ciTocROMO C Es una proteina pequefia, que funciona como transportador electrénico mitocondrial entre los complejos respiratorios Ill y IV. Se trata de una proteina monomérica, es decir con un solo polipéptido. Es un transportador de electrones hidrosoluble, el mismo es una proteina periférica ubicada del lado externo de la membrana mitocondrial interna, asociada por atracciones electroestaticas ala cabeza de los fosfolipidos UBIQUINONA Esta sustancia soluble en aceite, similar a las vitaminas, esta presente en la mayoria de las células eucariotas, principalmente en la mitocondria. Es un componente de la cadena de transporte de electrones. Hay tres estados redox de la CoQ10: totalmente oxidado (ubiquinona), semiquinona (ubisemiquinona), totalmente reducida (ubiquinol). La capacidad de esta molécula para existir en una forma completamente oxidada y una forma completamente reducida permite que pueda desempefiar sus funciones en la cadena de transporte de electrones, y como idante, respectivamente. FUNCIONAMIENTO DE LA CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES 1) EI. NADH cede 2 een la cara interna del complejo NADH ubiquinona oxidorreductasa, gracias a esto se produce el bombeo de 4 H*, desde la matriz hacia el espacio intermembrana. 7Se necesita de 2 e,, 2H" y % 2 para formar una molécula de 20. Si contamos los 2e° cedidos por el FADH2 y tomamos 2H" y % O2el redito seria de 2moléculas de H20. El pH es una medida de acidez 0 alcalinidad que ica la cantidad de iones de hidrégeno presentes en una solucién o sustancia. 2) Luego del bombeo de los H* en el complejo I la coenzima Q (ubiquinona) capta los 2e" del complejo | y Io transporta hacia el complejo citocromo bel (complejo III). 3) Allllegar los 2e* al complejo Ill permitiré el bombeo de 4H* desde la matriz hacia el espacio intermembrana. Luego de que esto sucede estos electrones seran transportados al complejo IV grat 4) Al llegar los 2e° al citocromo ¢ oxidasa este conduce los electrones hacia la superficie interna y alli los dona al O2, donde formara agua. En este complejo también se bombean 2H* desde la matriz al espacio intermembrana. al citocromo c. He gg ML En elicasojdel FADH#/'SUS'electfonies pasah,pof|todo el proceso fencionado anteriormente, la gran diferenciajes que el complejo Succinato deshidrogenasa (coiplejo Il} no acta como una bomba de H*. Los 2e° que son cedidos por el FADH2 son transportados por la ubiquinona la complejo Ill, estos también permiten el pasaje de 4H* desde la matriz hacia el espacio intermembrana. Desde el complejo Ill los electrones seran recaptados por el citocromo c y serén donados al complejo IV este conduce los electrones hacia la superficie interna y alli los dona al O2, donde formara agua. En este complejo también se bombean 2H’ desde la matriz al espacio intermembrana. EL BOMBEO DE H' Y EL GRADIENTE ELECTROQUIMICO El bombero activo de H’ genera un gradiente de concentracién de protones es decir un gradiente de pH a través de la membrana mitocondrial interna, en el que pH es casi 0,5 unidades mas elevado dentro de la matriz (es decir un pH de aproximadamente 7,5) que en el espacio intermembrana, donde tiene un valor 18Marca Vo F: El espacio intermembrana mitocondrial es. sumamente acido con respecto. a la matriz. tu respuesta. Conforme la energia suministrada por los e transfiere los H* al espacio. intermembranoso, esta es absorbida por los propios H*, que la retienen, la cual se transforma en energia protonmotriz. cercano a 7 igual que en el protones genera un poten membrana mitocondrial interna, en el interior (lado de la matriz es negativo) y el exterior (lado del espacio mitocondrial es positive) como resultado de un flujo neto de hidrégeno ha fuera. sol. Por otra parte, este bombeo de de membrana a través de la Espacio intermembranas ovent tp Matiz pH=7.674. \ En resumen, alexistir un gradiente de concentracién de H* entre ambos lados de la membrana mitocondrial interna se establece un gradiente de PH (mas alto én la matriz mitocondrial) y se afirma el potencial de membrana que se hace més positive en el espacio intermembranoso. Ambos (el gradiente de PH y el potencial de membrana) componen un gradiente electroquimico que se traduce en una energia potencial singular llamada protonmotriz 0 protén motora que impulsa a los hidrégenos a regresar a la matriz mitocondrial ahora por transporte pasivo. FOSFORILACION OXIDATIVA Es un proceso metabélico que utiliza energia liberada por la oxidacién de nutrientes para producir adenosina trifosfato (ATP). Se le llama asi para distinguirla de otras rutas que producen ATP con menor rendimiento, llamadas "a nivel de sustrato". El mecanismo que hace esto posible es una gran enzi denominada ATP sintasa que esté incluida en la membrana mitocondrial interna. Est genera una via hidréfila a través de la membrana mitocondrial interna que le permite a los protones fluir a favor de su gradiente electroquimico. Estos iones encuentran su camino mediante la enzima, se impulsa la reaccién desfavorable desde el punto de vista energético, entre el Pi y el ADP que forman el ATP. 19Marca Vo F: La fosforilacién oxidativa solo ‘ocurre en cloroplastos y en mitocondrias. Justifica tu respuesta La ATPsintasa se encuentra en las mitocondrias dé las células animales en los cloroplastos de las plantas y las algas y en las membranas _plasmaticas de las bacter Ss. La ATPsintasa es una proteina de gran tamajio formado por varias unidades una porcién enzimatica grande en forma de cabezuela (regién F1) se proyecta hacia la cara de la matriz de la membrana mitocondrial interna y se adhiere por medio de una subunidad més delgada en forma de tallo (FO), el cual es un transportador de protones transmembrana _..Cémo 0g protones pasan a/través)de unbestrecho canal del _transpottadot, su desplazamiento” >} tallo gire répidamente dentro de la cabeza y la induzca formada ATP. La sintasa actia esencialmente como un motor molecular que genera energia ya que convierte la energia del flujo proténico a favor de un gradiente la energia mecdnica de dos grupos de protefnas que chocan entre si, esto se debe a que las proteinas de! tallo cam! cabeza. Esta deformacién mecénica se convierte en energia quimica de enlace a medida que las unidades producen ATP. Este mecanismo es capaz de generar més de 100 moléculas de ATP por segundo y es necesario que pasen aproximadamente 3 protones a través de la sintasa para constituir cada molécula de ATP. La ATP sintasa es un mecanismo con un acoplamiento reversible puede aprovechar tanto el flujo de protones a favor de su gradiente electroquimico y generar ATP, como también emplean la energia de la hidrélisis del ATP para bombear los protones a través de la membrana. n la conformacién de las subunidades dentro de la 20Investig eExistirn férmacos/agentes patégenos que funcionamiento de la ATPsintasa? ban el (2) El ingreso del Pi y el simporte de ADP se da_al mismo tiempo, 10. que permite la formacién efectiva de ATP y su posterior salida. * aor + @®) * [ory Extor El hecho de que la ATP sintasa genere o consuma ATP depende de la magnitud del gradiénte electroquimico de protones a través de la membrana enla que se encuentra. En muchas bacterias que crecen/én forma aerobia‘o anaerobia la direccién a la que trabaja la ATP sintasa se invierte habitualmente cuando el oxigeno desaparece del medio. En ese momento la ATP sintasa utiliza parte del ATP generado dentro de la célula por glucolisis para bombear protones hacia el exterior celular y se crea el gradiente de protones que la célula bacteriana necesita para importar sus nutrientes esenciales por transporte acoplado. La sintesis.del ATP no.es el.tnico proceso diri = el gradiente -esglectroquimicd de H*. En las mitocondtias muchas moléculas cargadas, como el piruvato el ADP.y el P; 50n bombeadas dentro de la matriz desde el citosol, mientras que otras como el ATP deben ser desplazadas en la direccién opuesta. Las proteinas transportadoras que se unen a estas moléculas pueden acoplar su transporte con el flujo energéticamente favorable de H* hacia el interior de la matriz mitocondrial. En el caso piruvato y el Pi inorgénico estos son cotransportados al interior de la matriz al mismo tiempo que lo hace el H’ cuando éste se desplaza a favor de su gradiente electroquimico. 21Marca Vo F: Las proteinas simportadoras y antiportadoras mitocondriales son funcionalmente similares a las que se encuentran en la membrana _plasmatica. a tu respuesta. (=) La beta oxidacién genera mucho mas ATP que la oxidacién de la glucosa. Un Acido graso de 8C (acido caprilico) puede generar 61 ATP y uno de 16C (4tido palmitico) hasta 129 ATP. Ww Ae Marca V 0 F: El retorno de los protones a la matriz es un ejemplo claro de transporte activo. Justifica tu respuesta. ua espacio matriz Intermembrana rmitocondrial Due : p , OP ADP ATP aH 3H : ATP i ADI ‘ATP ATP i ADP , voac ADP ADP -* porns fico Fe Meo tena incr Existen otros transportadores que aprovechan el gradiente electroquimico de protones el cual genera un potencial de membrana. Una proteina transportadora _antiportadoras, aprovecha este gradiénte de voltaje para expulsar ATP de la matriz e importaf ADP aella, como una molécula de ATP tiene una carga negativa mas que el ADP) el intercambi comg resultado el desplazamiento en total de una carga negativa hacia el exterior de la mitocondria. Este intercambio de nuclestidos (que envia ATP al citosol) esté en consecuencia impulsado por la diferencia de carga a través de la membrana mitocondrial interna. En las células eucariotas el gradiente de protones impulsa la formacién de ATP y el transporte de ciertos metabolitos a través de lamembrana mitacondrial interna. de estos nuclestidos da REDITO DE ATP DE LA FOSFORILACION OXIDATIVA Los electrones cedidos NADH’ permite el bombeo de 10 H* en total desde la matriz hacia el espacio intermembrana y el FADH2 permite el bombeo de 6 H’. Se necesita el pasaje de 3H* por la ATPsintasa para generar un ATP (permitir la unién del ADP y el grupo Pi) y se requiere de un H* adicional para la entrada del grupo Pien la matriz mitocondrial gracias a un simportador Pi /H’. Por cada NADH* que entrega sus electrones se genera 2,5 ATP y por cada FADH2 que entrega sus electrones se genera 1,5 ATP. REDITO DE LA OXIDACION DE LA GLUCOSA Durante la glucolisis se genera 4 moléculas de ATP, debido a que se gastan 2, en esta etapa hay una ganancia neta de 2 ATP. También se generan 2 NADH que al ser citosélico generan 2ATP cada uno (4 en total), asi que el aporte de la glucolisis es de 6 ATP, 2son generados directamente en el citosol y 4 en las mitocondrias gracias a los electrones suministrados por el NADH obtenido en 22la hipétesis quimiosmeética fue enunciada por Peter Mitchel, bioquimico inglés galardonado con el Premio Nobel de Quimica del afio 1978. ~ Investiga: dExisten enfermedades que afecten a los seres humanos relacionadas con las mitocondrias? las etapas de lisis de glticidos. Los 2 piruvatos que se forman a partir de la glucol descarboxilacién oxidativa generando 2 acetil CoA. Este proceso genera 2 NADH, uno por cada piruvato, estos NADH generan gracias a la fosforilacién oxidativa un total de 6 ATP. Respitacion , al entran en la mitocondria sufren la on aor +8) ‘io. ‘Gtucoss ‘piriavico, aac Cada uno de los acetil CoA, en el ciclo de Krebs genera 1 GTP, 3NADH y 1 FADH2, de modo que al cabo de las dos vueltas que se necesitan para metabolizar los dos acetil CoA, surge 2 GTP, 6 NADH y 2 FADH2. Dado que la fosforilacién oxidativa de cada NADH genera 3 ATP y la de cada FADH>, a los 2 GTP formados en el Ciclo de Krebs deben sumérseles 18 ATP aportados por los 6 NADH ms 4 ATP aportados por los 2 FADH2, lo que hace un total ‘de 24ATP/Sumados'a'los’6 ATP dé laglucolisis mids los 6 ATP dela ‘escarboxilacién oxidativa, la ganancia neta por molécula de Plucosa es de 36 ATP. ACOPLAMIENTO QUIMIOSMOTICO Es la vinculacién entre el transporte de electrones, el bombeo de protones y la sintesis de ATP, fue propuesta por p década de 1960 y se denominé hipétesis quimiosmética y en la actualidad se conoce como acoplamiento quimiosmético. Los mecanismos quimiosméticos permiten que las células aprovechan la energia de las transferencias de electrones de una manera muy similar a la que pueden aprovecharse la energia almacenada. El acoplamiento quimiosmético se desarrollé por primera vez en las bacterias. Quizés por esa razén no sea sorprendente que las células eucariontes aerobias hayan adoptado integramente el mecanismo quimiosmético, en un comienzo al englobar bacterias aerobias que formaron las mitocondrias y més adelante (en los linajes que dieron lugar a las algas y vegetales superiores) al englobar a las cianobacterias y formar los cloroplastos. era vez en la 23