jurnal.krbogor.lipi.go.id Buletin Kebun Raya Vol. 22 No.

1, Januari 2019 [13–20]

e-ISSN: 2460-1519 | p-ISSN: 0125-961X
Scientific Article

IRADIASI AKUT DENGAN SINAR GAMMA PADA PROTOKORM ANGGREK

Dendrobium macrophyllum A. Richard DAN Dendrobium undulatum M. A.
Clem & D. L. Jones

Acute Gamma Rays Irradiation in Protocorm of Dendrobium macrophyllum A. Richard and

Dendrobium undulatum M. A. Clem & D. L. Jones

Elizabeth Handini
Pusat Konservasi Tumbuhan Kebun Raya–LIPI,
Jl. Ir. H. Juanda 13, Bogor 16003
Email: lizahandini@yahoo.com

Diterima/Received: 15 Juni 2018 Disetujui/Accepted: 13 Agustus 2018

Abstract

Increasing genetic variation in plants can be done by irradiation technique. The purpose of this study was to
improve genetic variation in Dendrobium macrophyllum and D. undulatum orchids by gamma irradiation to
obtain superior seeds. Accute Irradiation treatment was perfomed using orchid protocorms. Irradiation doses
given: 0, 10, 20, and 25 Gy. The observed parameters were the number of explants, shoots, dead shoots, and
leaves at five months after treatment (MAT) and number of roots in seven MAT. Calculation of Lethal Dosage
(LD) 20 and 50 was carried out on three MAT. The results of Curve Expert analysis showed that different levels
of radiosensitivity in D. macrophyllum were more sensitive than D. undulatum. D. macrophyllum showed LD 20
at an irradiation dose of 13,98 Gy, LD 50 at an irradiation dose 48,42 Gy, while D. undulatum experienced LD 20
at an irradiation dose of 195,67 Gy, LD 50 at an irradiation dose of 490,67 Gy. Acute irradiation effects were seen
in protocorm D. macrophyllum at seven MAT in the presence of inhibition at 10 Gy irradiation doses, which was
a decrease in the number of shoot of 2,66, decrease in leaf number 18,84 and decrease in root number 5,17
compared to control.

Keyword: Dendrobium macrophyllum, Dendrobium undulatum, gamma irradiation, protocorm,

radiosensitivity

Abstrak

Peningkatan variasi genetik pada tumbuhan dapat dilakukan dengan teknik iradiasi. Penelitian ini bertujuan
untuk meningkatkan variasi genetik anggrek Dendrobium macrophyllum dan D. undulatum dengan pemberian
iradiasi gamma untuk mendapatkan bibit yang unggul. Perlakuan iradiasi akut dilakukan menggunakan
protokorm anggrek. Dosis iradiasi yang diberikan: 0, 10, 20, dan 25 Gy. Paramater yang diamati setelah iradiasi
adalah jumlah eksplan yang hidup, jumlah tunas, jumlah tunas yang mati, dan jumlah daun pada lima bulan
setelah perlakuan (BSP) dan jumlah akar pada tujuh BSP. Penghitungan Lethal Dosage (LD) 20 dan 50 dilakukan
pada tiga BSP. Hasil analisis Curve Expert menunjukkan perbedaan tingkat radiosensitivitas D. macrophyllum
lebih peka daripada D. undulatum. D. macrophyllum menunjukkan LD 20 pada dosis iradiasi 13,98 Gy, LD 50 pada
dosis iradiasi 48,42 Gy, sedangkan D. undulatum mengalami LD 20 pada dosis iradiasi 195,67 Gy, dan LD 50 pada
dosis iradiasi 490,67 Gy. Efek iradiasi akut terlihat pada protokorm D. macrophyllum pada tujuh BSP dengan
adanya penghambatan pada dosis iradiasi 10 Gy yaitu penurunan jumlah tunas 2,66, penurunan jumlah daun
18,84, dan penurunan jumlah akar 5,17 dibandingkan dengan kontrol.

Kata kunci: Dendrobium macrophyllum, Dendrobium undulatum, iradiasi gamma, protokorm, radiosensitivitas

| 13
E. Handini, Iradiasi Akut dengan Sinar Gamma pada Protokorm Anggrek Dendrobium macrophyllum A. Richard…
PENDAHULUAN
Anggrek alam mempunyai potensi untuk
dimanfaatkan dalam perakitan varietas baru yang
dibutuhkan oleh pasar. Salah satu genus anggrek
yang memiliki potensi besar sebagai bahan
perakitan varietas baru adalah Dendrobium. Spesies
dalam genus ini memiliki keragaman dalam bentuk
dan warna bunga, ukuran perawakan, bentuk umbi
semu, maupun daun (Widiastoety et al., 2010).
Dendrobium merupakan genus kedua terbesar dari
famili Orchidaceae, memiliki anggota sekitar
900−1600 spesies (Lokho, 2013). Dendrobium
macrophyllum dan D. undulatum bukan merupakan
anggrek yang langka karena mudah dalam
perbanyakannya secara in vitro, namun belum
banyak yang membudidayakannya. Kebanyakan
para penjual anggrek spesies hanya mengambil dari
hutan secara langsung, sedangkan anggrek spesies
membutuhkan waktu yang lama untuk mencapai
masa reproduksi, sehingga perbanyakan di alam
tidak dapat mengimbangi kebutuhan pasar.
Pada umumnya anggrek dapat diperbanyak
dengan biji. Biji yang dihasilkan oleh buah anggrek
sangat banyak namun tidak mempunyai
endosperma dan hampir tidak mengandung nutrisi.
Di alam, perkecambahan dan perkembangan awal
anggrek sangat tergantung pada asosiasi dengan
jenis jamur tertentu yang disebut dengan mikoriza.
Bahkan pada anggrek dewasa di alam juga masih
terdapat interaksi dengan mikoriza. Secara umum
jamur mikoriza pada anggrek merupakan anggota
dari Rhizoctonia seperti Basidiomycetes. Penelitian
yang terbaru mengungkapkan bahwa anggota dari
jamur karat seperti Atractiellomycetes dan
Pucciniomycotina juga merupakan mycobiont pada
anggrek (Otero et al., 2013). Perbanyakan anggrek
secara alami menghasilkan kecambah dalam
persentase yang rendah. Penetapan sejumlah
media yang mengandung nutrisi untuk
perkecambahan dan perbanyakan biji anggrek
secara asimbiotik melalui kultur in vitro sangatlah
penting (Sagaya & Divakar, 2015). Perbanyakan
anggrek dengan biji mempunyai tantangan baik dari
segi teknologi maupun budidayanya. Namun
demikian perbanyakan dari biji mempunyai peran
penting dalam mempertahankan keragaman
genetik dalam spesies tersebut.
14 |
Pemuliaan tanaman dilakukan agar
mendapatkan banyak pilihan untuk dijadikan
kandidat bibit unggul. Pemuliaan tanaman dapat
dilakukan dengan cara konvensional (persilangan
antar tanaman) maupun dengan mutasi. Sistem
pemuliaan mutasi sangat ideal untuk tanaman hias
yang bernilai ekonomi, karena memiliki bunga
maupun habitus yang mudah dipantau
perubahannya setelah mendapat perlakuan
mutagen. Iradiasi merupakan salah satu mutagen
fisik. Frekuensi terjadinya mutasi meningkat dengan
meningkatnya dosis sinar X atau gamma, meskipun
vitalitas dan kemampuan regenerasi menjadi
berkurang (Schum, 2003).
Untuk memperkaya plasma nutfah anggrek
dan memperbaiki varietas atau beberapa sifat yang
diinginkan seperti warna bunga dan daun pada
anggrek, dapat dilakukan dengan menggunakan
iradiasi sinar gamma. Satuan dosis iradiasi yang
digunakan adalah Gray (Gy) yang setara dengan
penyerapan satu Joule energi radiasi per kilogram
bahan yang diiradiasi (Abomohra et al., 2016).
Lethal Dosage (LD) merupakan nilai sensitivitas
terhadap iradiasi, diukur pada dosis yang
menyebabkan kematian pada suatu populasi
tanaman (Sari et al., 2015).
Iradiasi dapat dilakukan dengan dua cara
yaitu akut dan kronik. Iradiasi akut merupakan
iradiasi yang menggunakan dosis tertentu dengan
sekali tembakan. Sementara untuk iradiasi kronik
menggunakan dosis tertentu dengan beberapa kali
tembakan dalam selang waktu tertentu. Iradiasi
akut pada tanaman akar wangi (Chrysopogon
zizaninoides) menyebabkan lebih banyak kerusakan
daripada iradiasi kronik (Roongtanakiat et al.,
2012).
Iradiasi dengan dosis lebih dari 50 Gy dapat
menghambat pertumbuhan dan menyebabkan
kematian pada anggrek Phalaenopsis amabilis L.
yang berasal dari Jawa. Iradiasi sinar gamma dengan
dosis 20 Gy merupakan dosis yang paling optimal
tanaman tersebut (Suwarno et al., 2013). Induksi
mutasi dengan iradiasi sinar gamma merupakan
cara yang efektif untuk memperoleh mutan yang
berbeda. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
meningkatkan keragaman genetik dengan induksi
mutasi menggunakan iradiasi sinar gamma
terhadap dua spesies anggrek (D. macrophyllum

dan D. undulatum), sehingga akan didapatkan
mutan puntatif yang memiliki kriteria agronomis
yang lebih baik untuk dijadikan bibit unggul.
METODOLOGI
Iradiasi sinar gamma dilakukan di Badan
Tenaga Atom Nasional (BATAN) pada bulan Maret
2018. Pengamatan kultur setelah radiasi dilanjutkan
di Laboratorium Kultur Jaringan PKT Kebun Raya-
LIPI, di Bogor.
Bahan tanaman yang digunakan adalah
protokorm D. macrophyllum dengan kode semai
2.x.2017 dan D. undulatum dengan kode semai
3.x.2017, umur lima bulan di media semai yaitu
modifikasi Vacin and Went (VW). Perlakuan dosis
iradiasi yang digunakan adalah 0, 10, 20, dan 25 Gy.
Hasil iradiasi kemudian disubkultur pada media
semai VW. Kultur yang awalnya disebut M0 setelah
diiradiasi menjadi M1 dan setelah disubkultur
menjadi M1V1 dan seterusnya. Pengamatan
dilakukan dengan menghitung jumlah protokorm
awal sebagai eksplan, protokorm yang masih hidup,
jumlah rerata pertambahan protokorm tiap
eksplan, dan jumlah tunas pada pengamatan umur
tiga bulan setelah iradiasi.
Penghitungan radiosensitivitas pada eksplan
yang diiradiasi ditentukan pada dosis yang
menimbulkan reduksi daya hidup atau pada tingkat
kematian eksplan 20% dan 50% (LD 20 dan LD 50)
dalam siklus vegetatif yang pertama (M1V1)
(Indrayanti et al., 2011). Pengukuran
radiosensitivitas dilakukan dengan menggunakan
Curve Expert 1.3. Pengamatan dilanjutkan terhadap
bibit anggrek yang mampu melampaui LD 20.
Subkultur kedua (M1V2) menggunakan
media modifikasi VW dengan penambahan pisang
20 g L-1(T1V). Tiap satuan unit pengamatan (botol)
terdiri atas lima protokorm. Masing-masing
perlakuan terdiri atas enam ulangan. Pengamatan
kultur dilakukan pada lima bulan setelah perlakuan
(BSP), dengan parameter yang diamati adalah
jumlah tunas dan daun. Kemudian dilakukan
pengamatan kultur lagi pada tujuh BSP, dengan
parameter yang diamati adalah jumlah tunas, daun,
dan akar. Analisis sidik ragam antar perlakuan
menggunakan SAS dan jika terjadi beda nyata
dilanjutkan dengan uji beda nyata terkecil (BNT).
Buletin Kebun Raya Vol.22 No. 1, Januari 2019 [13–20]
HASIL DAN PEMBAHASAN
Iradiasi sinar gamma akut pada protokorm
Protokorm merupakan perkembangan
embrio biji anggrek yang pertama sebelum
membentuk planlet. Embrio dalam testa akan
membengkak dan menjadi protokorm ketika
diletakkan dalam media yang tepat (Yeung, 2017).
Protokorm hasil semaian pada uji kecambah
menghasilkan umur semaian yang sama, sehingga
dapat digunakan sebagai eksplan pada percobaan
iradiasi gamma.
Pengaruh iradiasi terlihat nyata pada
protokorm D. macrophyllum dengan adanya
penurunan persentase hidup hingga 20% yaitu pada
dosis 13,98 Gy (LD 20) dan dosis 48,42 Gy (LD 50)
(Gambar 1). Berbeda halnya dengan hasil yang
diperoleh dari iradiasi pada protokorm D.
undulatum, karena persentase hidupnya belum
menunjukkan penurunan meskipun hingga dosis 25
Gy (Gambar 1). Hasil analisis menggunakan Curve
Expert menemukan bahwa LD 20 dari anggrek ini
terletak pada dosis 195,67 Gy dan LD 50 terletak
pada dosis 490,67 Gy (Gambar 1), sehingga untuk D.
undulatum belum didapatkan bibit yang mengalami
perubahan fenotipe karena dosis iradiasi yang
digunakan dalam penelitian ini masih terlalu rendah
bagi spesies ini untuk dapat menyebabkan
kematian 20% populasi (LD 20). Sehingga untuk
pengamatan secara detil pada tahap regenerasi
hanya terpusat pada D. macrophyllum saja yang
telah melampaui LD 20.
Hasil penelitian Soedjono et al. (1996)
tentang iradiasi terhadap protokorm Dendrobium
‘Ekapol Panda’ (hibrida) menyatakan bahwa
pertumbuhan protokorm yang diiradiasi cenderung
lebih cepat pertumbuhannya dibandingkan dengan
tanpa perlakuan, meskipun tidak ada beda nyata.
Dosis iradiasi sinar gamma 40 Gy memberikan hasil
pertumbuhan tunas yang terbaik pada Dendrobium
tersebut. Sementara pertumbuhan protokorm
sekunder terbaik pada dosis iradiasi 80 Gy. Dengan
demikian dapat disimpulkan bahwa masing-masing
spesies anggrek memiliki radiosensitivitas atau nilai
sensitivitas yang berbeda-beda terhadap iradiasi,
meskipun masih dalam satu genus.
| 15
E. Handini, Iradiasi Akut dengan Sinar Gamma pada Protokorm Anggrek Dendrobium macrophyllum A. Richard…

Gambar 1. Penentuan LD 20 dan LD 50 pada protokorm anggrek Dendrobium macrophyllum (A) dan D. undulatum (B) dengan
menggunakan analisis Curve Expert. Hasil iradiasi sinar Gamma dengan dosis iradiasi 0-25 Gy

Efek iradiasi sinar gamma pada tahap regenerasi mendapat perlakuan iradiasi dengan dosis iradiasi
Pada tahap regenerasi ini terlihat 0−25 Gy pada umur lima BSP dalam siklus vegetatif
pertumbuhan D. macrophyllum makin terhambat yang kedua (Gambar 2).
jika dibandingkan dengan D. undulatum setelah

Gambar 2. Keragaan Dendrobium macrophyllum dan D. undulatum hasil iradiasi sinar gamma dengan dosis
iradiasi 0−25 Gy pada umur lima BSP dalam siklus vegetatif yang kedua (M1V2) setelah iradiasi.

16 |
 Buletin Kebun Raya Vol.22 No. 1, Januari 2019 [13–20]

Efek iradiasi pada tahap regenerasi
protokorm D. macrophyllum di media modifikasi
VW dengan penambahan pisang 20 g L-1 (T1V)
selama lima BSP terlihat adanya reduksi jumlah
tunas dan daun (Tabel 1). Penurunan jumlah tunas
maupun daun ini menunjukkan adanya kerusakan
akibat iradiasi sehingga sel tidak berkembang atau
bahkan mengakibatkan kematian sel. Jumlah tunas
yang tumbuh dari eksplan dengan perlakuan dosis
iradiasi 10 Gy adalah 4,33 tunas, belum
menunjukkan adanya beda nyata dengan kontrol
saat lima BSP.

Tabel 1. Pengaruh dosis iradiasi sinar gamma terhadap jumlah tunas dan daun Dendrobium macrophyllum
setelah regenerasi di media modifikasi VW dengan penambahan pisang 20 g L-1 (T1V) selama lima BSP

Dosis (Gy) Jumlah tunas Perbedaan Jumlah daun Perbedaan dengan

per botol dengan kontrol per botol kontrol
0 6,17 0 33,50 0
10 4,33 -1,84tn 15,67 -17,83*
20 1,67 -4,50* 2,50 -31,00*
25 1,50 -4,67* 3,83 -29,67*
Keterangan: * = berbeda nyata dibandingkan kontrol pada taraf 5 % berdasarkan uji BNT;
tn = tidak berbeda nyata dibandingkan kontrol berdasarkan uji BNT

Pengaruh dosis iradiasi terhadap jumlah
tunas, daun, dan akar D. macrophyllum setelah
regenerasi di media modifikasi VW dengan
penambahan pisang 20 gL-1 (T1V) terjadi
penghambatan setelah 7 BSP. Penghambatan
pertumbuhan tunas akibat iradiasi mulai terlihat
sehingga ada beda nyata dengan kontrol (Tabel 2).
Penurunan jumlah tunas dan daun menyebabkan
pertumbuhan akar juga menurun. Hal ini
kemungkinan disebabkan karena adanya kompetisi
antar sel-sel mutan dan sel-sel normal dalam
jaringan somatik, yang disebut diplontic selection
(van Harten, 1998).
Pemberian iradiasi sinar gamma berkorelasi
negatif terhadap jumlah akar D. macrophyllum.
Pengaruh penghambatan terhadap pertumbuhan
akar semakin kuat dengan semakin besarnya
perlakuan dosis sinar gamma (r2 = 96%).
Penghambatan akar dimulai pada dosis terkecil
yang diberikan yaitu 10 Gy (Gambar 3). Semakin
tinggi dosis iradiasi yang diberikan maka
kemampuan untuk membentuk organ tanaman
juga semakin menurun (Tabel 1 dan 2).

Tabel 2. Pengaruh dosis iradiasi sinar gamma terhadap jumlah tunas, daun, dan akar Dendrobium macrophyllum
setelah regenerasi di media modifikasi VW dengan penambahan pisang 20 g L-1 (T1V) selama tujuh BSP

Dosis Jumlah Perbedaan Jumlah Perbedaan Jumlah akar Perbedaan

(Gy) tunas dengan daun dengan per botol dengan
per botol control per botol kontrol kontrol
0 7,33 0 40,67 0 16,00 0
10 4,67 -2,66* 21,83 -18,84* 10,83 -5,17*
20 2,00 -5,33* 5,33 -35,34* 1,67 -14,33*
25 1,33 -6,00* 3,00 -37,67* 1,17 -14,83*
Keterangan: * = berbeda nyata dibandingkan kontrol pada taraf 5 % berdasarkan uji BNT;
tn = tidak berbeda nyata dibandingkan kontrol berdasarkan uji BNT

| 17
E. Handini, Iradiasi Akut dengan Sinar Gamma pada Protokorm Anggrek Dendrobium macrophyllum A. Richard…
Gambar 3. Hubungan antara dosis iradiasi sinar gamma dengan jumlah akar Dendrobium macrophyllum pada tahap
regenerasi pada tujuh BSP
Hasil yang sama juga dijumpai pada anggrek
D. lasianthera, dimana terjadi kerusakan sel yang
semakin besar dengan semakin tinggi dosis iradiasi
yang diberikan kepada protokorm, sehingga
protokorm tidak mampu melakukan pemulihan dan
akhirnya mati (Cahyo & Dinarti, 2015). Planlet yang
mampu tumbuh pada perlakuan iradiasi gamma ini
dapat disebut sebagai mutan putatif (M1).
KESIMPULAN
Pemberian perlakuan iradiasi akut untuk
meningkatkan keragaman genetik pada D.
undulatum belum tercapai, karena sampai dosis 25
Gy belum melampaui LD 20 sehingga harus
dilakukan penelitian ulang dengan dosis iradiasi
yang lebih tinggi. Pada D. macrophyllum sudah
terjadi penurunan persentase hidup protokorm
hingga 20% yaitu pada dosis 13,98 Gy (LD 20) dan
mulai terhambat pertumbuhannya pada 10 Gy. Efek
iradiasi akut terlihat pada dosis iradiasi 10 Gy pada
D. macrophyllum tujuh BSP dengan adanya
penghambatan pertumbuhan yaitu penurunan
jumlah tunas 2,66, penurunan jumlah daun 18,84,
dan penurunan jumlah akar 5,17 dibandingkan
dengan kontrol. Keragaman telah terbentuk pada D.
macrophyllum namun masih dibutuhkan waktu
yang lebih lama untuk seleksi bibit yang unggul.
18 |
DAFTAR PUSTAKA
Abomohra, A.E.F., W. El-Shouny, M. Sharaf & M.
Abo-Eleneen. 2016. Effect of gamma
radiation on growth and metabolic activities
of Arthrospira platensis. Brazilian Archives of
Biology and Technology 59:1−12.
Cahyo, F.A. & D. Dinarti. 2015. Pengaruh iradiasi
sinar gamma terhadap pertumbuhan
protocorm like bodies anggrek Dendrobium
lasianthera (JJ. Smith) secara in vitro. Jurnal
Hortikultura Indonesia 6(3):177−186.
Indrayanti, R., A.M. Nurhajati, S. Asep & Sudarsono.
2011. Radiosensivitas pisang cv. ampyang
dan potensi penggunaan iradiasi gamma
untuk induksi varian. Jurnal Agronomi
Indonesia 39(2):112−118.
Lokho, A. 2013. Diversity of Dendrobium Sw. its
distributional patterns and present status in
the Northeast India. International Journal of
Scientific and Research Publications 3 (5): 9p.
Otero, J.T., A. T. Mosquera, & N. S. Flanagan. 2013.
Tropical orchid mycorrhizae: potential
application in orchid conservation,
commercialization, and beyond.
Lankesteriana 13(1−2):57−63.
Roongtanakiat, N., P. Jompuk, T.
Rattanawongwiboon & R. Puingam. 2012.
Radiosensitivity of vetiver to acute and
chronic gamma irradiation. Kasetsart Journal
(National Science), 46: 383−393.

Sagaya, Sr. M.B. & K.M. Divakar. 2015. In vitro seed
germination studies and flowering in
micropropagated plantlets of Dendrobium
ovatum Lindl. IOSR Journal of Biotechnology
and Biochemistry (IOSR-JBB) 1(3):04−09.
Sari, L., A. Purwito, D. Soepandie, R.
Purnamaningsih & E. Soedarmonowati.
2015.Pengaruh iradiasi sinar gamma pada
pertumbuhan kalus dan tunas tanaman
gandum (Triticum aestivum L.). Ilmu
Pertanian 18(1): 44−50.
Schum A. 2003. Mutation breeding in ornamental:
an efficient breeding method. Proceeding
21st IS on Classical/Molecular Breeding. Ed:
G. Forkmann et al. Acta hortuculturae 612,
ISHS 2003: 47−60.
Soedjono, S., N. Solvia & Suskandari. 1996.
Tanggapan pertumbuhan protokorm
anggrek Dendrobium terhadap dosis iradiasi
Buletin Kebun Raya Vol.22 No. 1, Januari 2019 [13–20]
sinar gamma. Aplikasi Isotop dan Radiasi
1993: 83−87.
Suwarno, A., N.A. Habibah & L. Herlina. 2013.
Respon pertumbuhan planlet anggrek
Phalaenopsis amabilis L. var. Jawa
Candiorchid akibat radiasi sinar gamma.
Unnes Juornal of Life Science 2(2): 78−84.
van Harten, A.M. 1998. Mutation Breeding: Theory
and Practical Application. Cambridge
University Press., Cambridge.
Widiastoety, D., N. Solvia & M. Soedarjo. 2010.
Potensi anggrek Dendrobium dalam
meningkatkan variasi dan kualitas anggrek
bunga potong. Jurnal Litbang Pertanian
29(3): 101−106.
Yeung, E.C. 2017. A perspective on orchid seed and
protocorm development. Botanical Studies
58(33): 14 p. DOI 10.1186/s40529-017-0188-
4.
| 19
E. Handini, Iradiasi Akut dengan Sinar Gamma pada Protokorm Anggrek Dendrobium macrophyllum A. Richard…

20 |