无烟小组（无烟倡议）烟草实验室网络（Toblabnet）

WHO 烟草实验室网络
官方方法
标准操作流程 11
电子烟烟液中尼古丁、
丙三醇和丙二醇测定的
标准操作流程
无烟小组（无烟倡议）
烟草实验室网络（TobLabNet）
无烟倡议烟草实验室网络（TobLabNet）
WHO 烟草实验室网络
官方方法
标准操作流程 11
电子烟烟液中尼古丁、
丙三醇和丙二醇测定的
标准操作流程
世界卫生组织烟草实验室网络标准操作流程11
电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程 i
电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程 . WHO TobLabNet官方方法标准操作流

程11 [Standard operating procedure for determination of nicotine, glycerol and propylene glycol in e-liquids.
WHO TobLabNet Official Method SOP11]
ISBN 978-92-4-004214-8（网络版）
ISBN 978-92-4-004215-5（印刷版）
© 世界卫生组织 2022年
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官方方法标准操作流程11 [Standard operating procedure for determination of nicotine, glycerol and
propylene glycol in e-liquids. WHO TobLabNet Official Method SOP11] 。日内瓦：世界卫生组织；2022
年。许可协议：CC BY-NC-SA 3.0 IGO。
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ii 电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程
No.: 标准操作流程11
日期: 2021年3月31日
世界卫生组织
烟草实验室网络
方法的标准操作流程
测定电子烟烟液中尼古丁、
丙三醇和丙二醇
方法：测定电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇
分析物：尼古丁（3-[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-甲基]吡啶）
（CAS#54-11-5）
丙三醇（丙烷-1，2，3-三醇）（CAS #56-81-5）
丙二醇（丙烷-1，2-二醇）（CAS#57-55-6）
基质：电子烟烟液
最新更新： 2021年3月
电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程 iii
iv 电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程
No.: 标准操作流程11
日期: 2021年3月31日
前言
本文件由世界卫生组织（WHO）烟草实验室网络（TobLabNet）成员与欧洲烟
草控制联合行动（JATC）成员实验室合作编写，作为测量电子烟烟液中尼古丁、丙
三醇和丙二醇的分析方法标准操作程序（SOP）。
引言
为了在全球范围内建立测试电子烟烟液可比较的测量方法，测量电子烟烟液
的特定含量需要一致的方法。WHO烟草控制框架公约（WHO FCTC）缔约方会议
（COP）的第六届会议（莫斯科，俄罗斯联邦，2014年10月13-18日）要求公约秘书
处邀请WHO：(a)为缔约方第七届会议（COP7）编写一份关于电子尼古丁发生系统
（ENDS）和电子非尼古丁发生系统（ENNDS）的专家报告，更新ENDS/ENNDS健
康影响的证据，以及它们在戒烟方面的潜在作用和对烟草控制工作的影响；(b)随后
评估政策选择以达到决定FCTC/COP6(9)第2段中所述的目标；(c)考虑检测这些产品
的含量和排放的方法1。
在有些国家或地区，尼古丁含量有一定限制（例如，在欧盟，电子烟烟液中尼
古丁最大浓度为20mg/mL），尼古丁是电子烟烟液检测的优先考虑成分。由于丙三
醇和丙二醇是电子烟烟液的典型成分，可以和尼古丁同时检测，这些成分纳入在
SOP中。
这份SOP将基于ISO 20714[2.1]描述电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇的检
测流程。
1 适用范围
本方法适用于气相色谱分析法（GC）定量测定电子烟烟液中的尼古丁、丙三
醇、丙二醇。该方法的尼古丁测定范围为1-30mg/mL，丙二醇的测定范围为200-
1000mg/mL，丙三醇的测定范围为200-1000mg/mL。
1
FCTC/COP(9)决定
电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程 1
2 参考文献
2.1 ISO 20714（en）电子烟烟液—测定用于尼古丁电子发生装置液体中的尼古

丁、丙二醇和丙三醇—气相色谱法（ISO 20714:2019, IDT）。
2.2 ISO 13276：烟草和烟草制品—尼古丁纯度的测定—钨硅酸重量法。
2.3 ISO 5725-2：测量方法的精确度（正确度和准确度）和结果—第2部分：一种

标准测量方法的重复性和再现性的基本测定方法。
2.4 世界卫生组织。烟草制品含量和排放分析方法验证的标准操作流程。日内
瓦，烟草实验室网络。2017（WHO TobLabNet SOP 02）（https://www.
who.int/tobacco/publications/prod_regulation/standard-operation-
validation-02/en/,访问时间2020年12月10日）。
2.5 联合国毒品与犯罪办公室.代表性毒品抽样指南.维也纳.实验室与科学部
门,2009（http://www.unodc.org/documents/scientific/Drug_Sampling.
pdf，访问时间2020年12月10日）。
3 术语及其定义
3.1 尼古丁含量：指电子烟烟液中尼古丁的总量，以mg/ml表示。
3.2 E-liquid（电子烟烟液）：指用于雾化含有或不含有尼古丁的液体或凝胶，通
过电子发生装置吸入。
3.3 电子烟尼古丁发生装置系统/电子烟非尼古丁发生装置系统：用于吸入的电子
烟烟液雾化装置。
3.4 实验室样本：指用于实验室检测的样本，由在一次或规定时间内被送往实验室
的单个类型的产品组成。
3.5 检测样本：从实验室样本中随机取出的待测产品，其数量应该具有实验室样本
代表性。
3.6 被检部分：来自于检测样本用于单次测定的随机部分，其数量应该具有检测样
本代表性。
3.7 预包装电子烟烟液盒：预装电子烟烟液的容器，可以或直接连接电子尼古丁发
生装置。
2 电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程
4 方法总结
4.1 加热至室温后，电子烟烟液体均质化。
4.2 用丙二醇[7.6]和内标[7.7] [7.8]组成的稀释剂稀释电子烟烟液。
4.3 可通过测量已知浓度的标准溶液中得到分析物（尼古丁、丙三醇、丙二醇）和
相应的内标物峰面积的比率，然后与分析物浓度绘制曲线。线性回归分析得
到用于确定每个测试部分的分析物含量的校准曲线。
5 安全及环境保护
5.1 与任何化学实验一样，必须做好常规的安全和环境保护措施。
5.2 在使用此测试方法对某些产品测量和评估时，有可能使用对环境有害的材料
或者设备；本文不过多阐述其使用的安全问题。所有使用这种方法者有责任
咨询有关机构，并在使用之前结合任何现有适用的法规要求，制定健康和安
全条例及环境保护措施。
5.3 应特别注意避免吸入或皮肤接触有害化学物质。在准备或处理未稀释的材
料、标准溶液、稀释溶液或收集的样品时，应使用化学通风柜并穿戴合适的
实验室工作服、手套和安全护目镜。
6 仪器和设备
使用实验室设备时，尤其是：
6.1 正排量移液器，适用于重复移液100µL（比如，HandyStep电子或Eppendorf继
流器）。
6.2 正排量移液器，适用于重复移液9.9mL（比如，HandyStep电子或Eppendorf继
流器）。
6.3 透明20ml平底样品小瓶或其他合适的烧瓶。
6.4 用于固定烧瓶位置的3D旋转混合机（比如，斯图尔特科学陀螺仪摇
杆，MiuLab RH-18+3D旋转混合机）。
6.5 旋涡混合器。
6.6 气相色谱仪配有火焰电离检测器（GC-FID）。
6.7 能明显分离溶剂峰（内标、尼古丁等成分的峰值）的毛细管气相色谱柱（比
如，Agilent DB-ALC1（30 m x 0.32 mm, 1.8 µm）。
6.8 预包装电子烟烟液盒：螺旋盖离心管，设计转速不小于1500rpm(相对离心力
(RCF)≈315)，可容纳不同类型的预包装电子烟烟液盒。
7 试剂和物资
除非另有说明，所有试剂至少应设置试剂级别，在可能的情况下，试剂可通过其化
学文摘服务（CAS）注册号进行识别。
7.1 所载气体：高纯度氦（CAS号：7440-59-7）（>99.999%）。
7.2 辅助气体：空气和火焰电离检测器用高纯度氢[CAS号:1333-74-0] (> 99.999%)
7.3 尼古丁（(S)-3-[1-Methylpyrrolidin-2-yl]pyridine）；–(–) 已知纯度不低于98%尼古丁

[CAS号：54-11-5]。可能会用到已知纯度不低于98%的水杨酸尼古丁[29790-52-1]。
7.4 已知纯度不低于98%的丙三醇（丙烷-1,2,3-三醇）[CAS编号:56-81-5]。
7.5 已知纯度不低于98%丙二醇（丙烷-1,2-二醇）[CAS编号:57-55-6]。
7.6 最大含水量为1.0g/L的丙醇[CAS号：67-63-0]。
7.7 气相色谱分析内部标准：
尼古丁测定：
正十七烷（纯度>质量分数的98%）[CAS号：629-78-7]。
喹那啶（纯度>质量分数的98%）[CAS编号：91-63-4]或其他合适替代品也可使用。
7.8 丙三醇和丙二醇内部标准：1,3-丁二醇（纯度>质量分数的99%）[CAS号:107-88-0]。
8 玻璃器皿
采用避免污染的方式清洁和干燥玻璃器皿。
9 溶液
9.1 稀释液
稀释液由含适量内标物（0.5 mL/L正十七烷/2ml/L 1,3-丁二醇）的丙醇组成。利用移

液管将0.50 mL正十七烷和2.0 mL 1,3-丁二醇移入1升的容量瓶中。将2-丙醇稀释至1
升，充分混合后转移到具有防止污染功能的储存容器中。
注：内标的浓度和/或类型可以调整，记住内部标准可能对灵敏度、选择性及方
法的线性范围产生影响。
10 标准溶液
以下所述的标准溶液制备方法仅供参考。如有必要，可对标准溶液的配制进行
调整。
10.1 尼古丁标准储备液（5g/L）
称取尼古丁500mg [7.3]（或尼古丁水杨酸盐925mg），称取精度0.1mg，放入
100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度[9.1]。
充分混合，0°C-4°C避光储存（最多储存4周）。
低温储存的溶剂和溶液在使用前应使其调至（22±5）°C。
10.2 丙三醇和丙二醇标准储备液（50 g/L）
称取丙三醇5000mg和丙二醇5000mg，称取精度0.1mg，放入100ml容量瓶中，用
稀释液稀释至刻度[9.1]。
充分混合，0°C-4°C避光储存（最多储存4周）。
低温储存的溶剂和溶液在使用前应将其调至（22±5）°C。
10.3 制作标准溶液
10.3.1 用移液管将10.1中为配制特定标准溶液准备的尼古丁标准储备液按指定
量移至100ml容量瓶中，如表1所示。
10.3.2 将10.2配制的丙三醇和丙二醇组合标准储备液按指定量加入到相同的
100ml容量瓶中[10.3.1]如表2所示。
用稀释溶液装满容量瓶（100ml）[9.1]。
避光，4-8°C保存标准溶液（最多保存一周）。
10.3.3 测定校准标准溶液中尼古丁、丙三醇和丙二醇的最终浓度:
最终浓度（mg/L）=x*y/10000
x是在10.1或10.2中称量的分析物的原始重量（以毫克计），y为10.3.1和
10.3.2移液时标准原液的体积（以mL为单位）。
尼古丁校准标准溶液浓度见表1，丙三醇和丙二醇浓度见表2。
表1. 校准标准溶液中尼古丁的浓度
标准尼古丁标准内部标准总体积最终混合标准电子烟烟液中
储备液体积液体积溶液中尼古丁的相应尼古丁浓
(5 g/L) (µL) 近似浓度度(mg/mL)
(mL) (mg/mL)
1 0.2 100 0.01 1.0
2 1.0 不适用， 100 0.05 5.0
3 2.0 包括在稀释 100 0.10 10.0
4 4.0 溶液中 100 0.20 20.0
5 6.0 100 0.30 30.0
表2. 校准标准溶液中丙三醇和丙二醇的浓度
标准丙三醇/丙二醇内部标准总体积最终混合标准电子烟烟液中

标准溶液体积液体积溶液中丙三醇/ 对应的丙三醇/
(50 g/L) (µL) 丙二醇的丙二醇浓度
(mL) 近似浓度 (mg/mL)
(mg/mL)
1 4.0 100 2.0 200
2 8.0 不适用， 100 4.0 400
3 12.0 包括在稀释 100 6.0 600
4 16.0 溶液中 100 8.0 800
5 20.0 100 10.0 1000
根据所使用的设备和被测试的样品，可以调整校准标准溶液的范围，但要记
住可能对方法灵敏度产生影响。
使用前，所有溶剂和溶液应调至室温（22±5°C）。
11 取样
11.1 收集样品
应根据适用的法律或国际标准对电子烟液进行取样，以获得代表性样品，同
时应考虑样品的可获得性。
11.2 测试样本的组成
如果适用，将实验室样品分割为单独的单元。
对于每个测试样品，从实验室样品中提取具有代表性的产品数量。
每个测试部分应至少包含一个待测试产品单元。
12 样本制备
由于电子烟烟液粘度高，移液时必须特别小心。对于高粘度液体的移液，只
能使用容积式移液器。内部实验室证明移液程序对结果有很大影响，因此
SOP中包含了一个专门的移液程序。
如果没有容积式移液管可用，则电子烟烟液称重可作为一种替代方法。但
是，为了能够以mg/mL单位报告结果，需要确定电子烟烟液的密度，并且电
子烟烟液的质量必须转换为体积单位(mL)。
电子烟烟液移液的具体步骤见12.1，从预包装电子烟烟液盒中提取电子烟烟
液见12.2。
12.1 定容
12.1.1 为避免形成气泡，在打开容器前将电子烟烟液均质。如果电子烟烟
液中有气泡，待气泡全部消失后再使用（电子烟烟液的超声波处理
有助于消除气泡，但需避免声波作用引起的温度升高）。
12.1.2 用容积式移液管吸出1mL电子烟烟液，不含气泡，每次100µL分10
次。
12.1.3 用移液管尖端外侧撞击样品容器边缘，以去除多余的液体。
12.1.4 将100µL的溶液分两次倒入垃圾桶，注意移液管尖端不要接触垃圾
桶。
12.1.5 检查移液管尖端外侧是否有电子烟烟液残留，如果有，重复步骤
12.1.3。
12.1.6 同样，在不接触垃圾桶的情况下，将100µL的吸管分两次倒入垃圾
桶。
12.1.7 检查移液管尖端外侧是否有电子烟烟液残留。
12.1.8 用移液管移100µL电子烟烟液(V电子烟烟液)至20ml样品瓶[6.3]。
12.1.9 用吸管将剩余的电子烟烟液移到垃圾桶中。
12.1.10 尽快关闭电子烟烟液容器，以防止样品蒸发或污染。
12.2 预包装电子烟烟液盒
为了能够分析预包装液体盒中的电子烟烟液，需要从液体盒中提取液体。为
了避免电子烟烟液被部分盒子或用于打开液体盒的工具污染，本文描述了一
种使用离心机从液体盒中提取全部电子烟烟液的程序。
考虑到从液体盒中提取的电子液体应是液体盒的代表性样品，也可以使用其
他方法。
12.2.1 切下一块一次性移液管尖端（100-1000µL)，
并将其放入合适的离心管中[6.8]。
12.2.2 移除电子烟烟液盒的上盖。
12.2.3 将烟液盒自上而下扣入离心机管中，置于移
液管尖端的顶部。
12.2.4 用螺旋盖关闭离心管。
12.2.5 在1500rpm（相对离心力（RCF）≈315）条件
下离心至少5分钟。
12.2.6 从离心管上取下烟液盒和移液管尖端（如有
需要，可使用镊子以避免污染）。
12.2.7 按12.1的方法移液。
注：当可用于移液的电子烟烟液少于1ml时，可以采用另一种移液方法。
例如，如果只有600µL电子烟烟液可用，则在第一次分配到垃圾桶后，将
400µL（而不是1mL）的电子烟烟液抽吸并用移液管将100µL的电子烟烟液移
到样品瓶中。
如果可用的电子烟烟少于500µL，尽可能地多抽吸电子烟烟液并用移液管将
100µL的电子烟烟液移到样品瓶中，不将电子液分配到垃圾桶中。
如果使用不同的方法（可用的电子液小于1毫升），则在分析报告中详细说
明移液程序。
13 气溶胶发生器的研制
此方法不适用。
14 样本生成
此方法不适用。
15 样品制备
15.1 使用容积式移液管[6.2]将9.9 mL稀释液[9.1]添加到含有100µL电子烟烟液的
20 mL样品瓶中，并闭合样品瓶。
15.2 使用旋涡混合机[6.5]至少30秒，使样品瓶中的液体混匀。将旋涡混合机的速
度设置为在液体均质过程中产生涡流的水平。
15.3 将一份混匀液体（试验溶液）转移到与GC-FID仪器兼容的自动进样瓶中。
15.4 如果样品需要保存，请在4-8℃温度下且避光保存（最长保存一周）。
注：液体混匀后，目视确保无不均匀现象。如果仍然可见不均匀，则需要重
复混匀[15.2]，直到没有不均匀。
16 样品分析
使用带有火焰离子化检测器的气相色谱对电子烟烟液中的尼古丁、丙三醇和
丙二醇进行定量。分析物与所用的色谱柱上的其他潜在干扰物分离。测试样
品的分析物浓度是通过比较测试溶液中分析物和内标物峰值的面积比与已知
分析物浓度的校准标准液中的分析物的面积比得出。
16.1 气相色谱操作条件：示例
气相色谱柱：Agilent DB-ALC1（30 m x 0.32 mm, 1.8µm），或同等品

气相色谱柱项目：
初始温度：140oC
保持时间：5 min
温度速率：40oC/min
结束温度：250oC
保持时间：4 min
进样温度：225oC
检测器温度：260oC
载气：氦气，流速为1.5 mL/min
进样体积：1.0 µL
进样方式：分流进样（比值1:50）
注：根据仪器和色谱柱条件以及色谱峰的分辨率，可能需要调整操作参数。
附件2提供了气相色谱-质谱法（GC-MS）设置示例，如果GC-MS用作GC-
FID的替代品，则将使用GC-MS设置。
16.2 预期保留时间
对于此处描述的条件，预期的洗脱顺序将是丙二醇、1,3-丁二醇、丙三醇、
尼古丁和正十七烷。
注1：例如温度、气体流速和柱龄的差异可能会改变保留时间。
注2：洗脱顺序和保留时间必须在开始分析前进行核实。
注3：在上述条件下，预计总分析时间为11分钟，分析时间可能会延长以优
化性能。
16.3 尼古丁、丙三醇、丙二醇含量的测定
测试样品的测量顺序应与适用的实验室质量体系相一致。本节举例说明了电
子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇的测定方法。
在相同的条件下注入等份校准标准溶液和测试溶液。
16.3.1 在运行序列之前，通过注入两份1-µL等份试样作为引物来调节系
统。
16.3.2 在与样品相同的条件下，注入1µL稀释液[9.1]和试验校准标准溶液，
以
核实气相色谱系统的性能和所用试剂的成分污染物。
16.3.3 将每种溶液（尼古丁、丙三醇和丙二醇校准标准溶液）等份注入气
相色谱系统中。
16.3.4 评估标准的保留时间和响应（面积计数）。如果保留时间与前一次
注射的保留时间相似（±0.2分钟），且响应在前一次注射的典型响
应的20%以内，则系统可以进行分析。如果保留时间和/或响应超出
了标准，根据你们的实验室政策寻求纠正措施。
16.3.5 记录尼古丁、丙三醇、丙二醇及内标物成分的峰面积。
16.3.6 计算校准标准液（包括溶剂空白）中每个分析物的分析物峰（Aana-
lyte）与内标物峰（AIS）（RF = Aanalyte/AIS）的相对响应比（RF）。
16.3.7 绘制相对响应比（Y轴）与分析物浓度（X轴）的曲线图。
16.3.8 校准曲线的线性度应覆盖整个校准范围。
16.3.9 对这些数据进行线性回归（Y=a+bx），并使用线性回归方程的斜率
(b)和截距(a)计算结果。如果决定系数R2小于0.99，则应重复校准。根
据实验室程序检查个别异常值。
16.3.10 分别注入1µL质控样品和测试样品，并用适当的软件测定峰面积。
16.3.11 针对所有试验溶液获得的分析物标志（峰面积）必须在校准曲线的
范围内；否则，溶液应根据需要用稀释液(9.1)稀释。
注：代表性色谱图见附件1。
17 数据分析与计算
17.1
对于每个测试溶液，计算分析物峰面积与内标物峰面积的比值（Yt）。
17.2 使用线性回归系数计算每个测试溶液的分析物浓度，CTP单位为mg/mL：
Yt �
–a
CTP =
b
17.3 计算电子烟烟液样品的分析物浓度（Ce-liquid），单位为毫克/毫升，使用以下
公式：
Vtot
Ce -� liquid =CTP �x
Ve �- liquid
其中：
Ce-liquid 是电子烟烟液中的分析物浓度，单位是mg/mL
CTP 测试溶液中分析物的浓度，单位是mg/mL
Vtot 为电子液稀释后的测试溶液总体积，单位为mL
（默认值为10 mL）
Ve-liquid 为所使用的电子烟烟液的体积（12.1.8），单位为mL。
18 特殊的预防措施
18.1 安装新柱后，在描述的气相色谱条件下注入电子烟烟液样品溶液来调节它。
应重复进样，直到成分和内标物的峰面积（或高度）可重复。这大约需要四
次注射。
18.2 将色谱柱温度升高至220 oC，持续30分钟，建议在每个样品组（系列）之

后，从气相色谱柱中清除高沸点组分。
18.3 当内标物的峰面积（或高度）明显高于预期值时，建议在稀释液中稀释无内
标物的电子烟烟液样品，并按照本程序所述分析该样品。使确定是否有任何
组分与内标物共洗脱成为可能，这将导致人为降低特定分析物的结果。
19 数据报告
19.1 报告每个评估样品的单独测量值。
19.2 按照方法规范的规定报告结果。
注：更多相关的信息，请参见WHO TobLabNet SOP 02 [2.4]
20 质量控制
20.1 控制参数
注1：如果质量控制测量值超出预期值的公差限值，则必须根据实验室质量
程序进行适当的调查，并采取适当的措施。
注2：其他的实验室质量保证程序应按照单个实验室的政策执行。
20.2 实验室试剂空白
为了检测样品制备和分析过程中的潜在污染，包括稀释液（9.1）的程序空白
测定，如16.3.2所述。结果应小于相应分析物的检测限值。
20.3 质量控制样品
根据各个实验室的规范分析参照物或质量控制电子烟烟液，以便验证整个分
析过程的一致性。
21 方法性能规范
21.1 检测限（LOD）和定量限（LOQ）
LOD的定义是，当测量到高于所使用仪器噪音三倍的信号时，软件识别出该
成分的最低水平。LOQ设置为LOD的两倍。如表3所示（内部实验室验证提
供的数据）。
表3.电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇的LOD和LOQ
成分 LOD（mg/mL） LOQ（mg/mL）
尼古丁 0.1 0.2

丙三醇 1.0 2.0
丙二醇 0.5 1.0
21.2 实验室强化基质回收
添加到基质中的分析物的回收率被用作真实度的替代测量。这些成分的回收
率是由内部实验室验证以及国际合作研究确定的。
称不同重量的尼古丁、丙三醇和丙二醇并放入1L烧瓶中，制备回收样品，在
内部实验室验证中确定回收率。用3D旋转混合机将回收样品混匀2小时[6.4]
后，将回收样品转移到2ml小瓶中。在每个回收样品中测定尼古丁、丙三醇
和丙二醇，并在一天内对每个小瓶进行五次分析。还分析了天然（无添加
的）电子烟烟液。根据以下公式计算回收率，表4总结了尼古丁的回收率，
表5总结了丙三醇和丙二醇的回收率。
(回收样品的分析物浓度-本地样品的分析物浓度)
回收率（%）=100×
回收样品的标称分析物浓度
表4.内部实验室验证的尼古丁平均值和回收率
尼古丁
峰值（mg/mL）研究样品均值回收率

（mg/mL）（%）
0.195 0.235 120.6
3.098 3.117 96.5
12.388 12.410 101.1
20.209 20.232 98.9
表5.通过内部实验室验证得出的丙三醇和丙二醇的平均值和回收率
丙三醇丙二醇
峰值(mg/mL) 研究样品均值回收率峰值(mg/mL) 研究样品均回收率
(mg/mL) (%) 值(mg/mL) (%)
378.7 377.7 99.7 727.4 723.1 99.4
630.5 636.5 101.0 519.6 515.1 99.1
883.0 898.2 101.7 311.2 307.3 98.7
在一项国际合作研究中，通过称量烧瓶中四种不同量的尼古丁、丙三醇和丙
二醇来确定回收率。使用3D旋转混合机[6.4]混匀后，将回收样品转移到10毫
升烧瓶中。在一项国际合作研究（于2020年进行）中，对单个烧瓶进行两次
分析，对四种加标样品中的每一种测定尼古丁、丙三醇和丙二醇。回收率由
下列公式计算得出，表6总结了尼古丁的回收率，表7总结了丙三醇和丙二醇
的回收率。
(回收样品的分析物浓度-本地样品的分析物浓度)
回收率（%）=100×
回收样品的标称分析物浓度
表6.国际合作研究中获得的尼古丁平均值和回收率
尼古丁
样品
样品理论浓度研究样品均值回收率
(mg/mL) (mg/mL) (%)
A 0.25 0.326 130.4%

B 5.08 5.08 100.0%
C 8.03 7.91 98.5%
D 21.27 22.06 103.7%
表7.国际合作研究中获得的丙三醇和丙二醇均值与回收率
丙三醇（mg/mL）丙二醇（mg/mL）
样本
理论浓度平均浓度回收率理论浓度平均浓度回收率
（mg/mL）（mg/mL）（%）（mg/mL）（mg/mL）（%）
A 568.0 567.5 99.9% 568.7 563.1 99.0%
B 213.9 211.5 98.9% 855.0 843.2 98.6%
C 772.5 738.0 95.5% 278.3 268.4 96.4%
D 321.5 316.7 98.5% 749.9 736.8 98.2%
21.3 分析的特异性
所关注的分析物品的保留时间常用于验证分析特异性。建立分析物质量控制
电子烟烟液内部标准反应的比值范围，用于验证未知样品结果的特异性。
21.4 线性
建立的尼古丁校正曲线在0.01-0.30 mg/mL（电子烟烟液1.0-30 mg/mL）标准

浓度范围内呈线性关系。
丙二醇和丙三醇校正曲线在2.0-10.0mg/mL（电子烟烟液200-1000mg/mL）标
准浓度范围内呈线性关系。
21.5 可能的干扰
由于内部标准成分或成分中的一种保留时间相近，香料的存在会造成干扰。
22 重复性和再现性
国际合作研究[23.4]在2020年开展，涉及23个实验室和5个样本（4个加标的
电子烟烟液和1个商用电子烟烟液），得出了该方法的以下值。
在最短的可行时间内，同一操作人员使用同一仪器在匹配的电子烟烟液样品
上发现的两个单独结果之间的差异将超过重复性极限（r），在正常、正确应
用该方法的情况下，平均20例中不超过一次。
由两所实验室报告匹配电子烟烟液样品的单次结果差异将超过再现性限值
（R），在正常、正确应用该方法的情况下，平均20例中不超过一次。
根据ISO 5725-1[23.1]和ISO 5725-2[2.3]对检测结果进行统计学分析，得出的

精确结果展示在表格8-10。
表8. 电子烟烟液中尼古丁（mg/mL）测定的精确度限制
电子烟烟液 n m 可重复性限制再现性限制

样本A 15 0.326 0.079 0.277
样本B 22 5.08 0.52 1.06
样本C 21 7.91 0.26 1.49
样本D 21 22.06 0.66 3.74
样本E 22 11.38 1.30 1.93
n 参与的实验室数量
电子烟烟液尼古丁含量的均值
m
可重复性限制电子烟烟液尼古丁含量可重复性限值
再现性限制电子烟烟液尼古丁含量再现性限值
表9. 电子烟烟液中丙三醇（mg/mL）测定的精确度限制

样本A 20 567.5 13.5 48.1
样本B 21 211.5 8.5 43.6
样本C 21 738.0 49.3 69.9
样本D 20 316.7 17.2 32.1
样本E 21 365.5 16.1 40.7
m 电子烟烟液丙三醇含量的均值
可重复性限制电子烟烟液丙三醇含量可重复性限值
再现性限制电子烟烟液丙三醇含量再现性限值
表10. 电子烟烟液中丙二醇（mg/mL）测定的精确度限制

样本A 22 563.1 13.1 23.2
样本B 22 843.2 37.6 60.7
样本C 22 268.4 15.5 18.3
样本D 22 736.8 21.5 38.6
样本E 23 570.1 58.3 58.3
m 电子烟烟液丙二醇含量的均值
可重复性限制电子烟烟液丙二醇含量可重复性限值
再现性限制电子烟烟液丙二醇含量再现性限值
23 参考书目
23.1 ISO5725-1。测量方法的精确度（正确度和准确度）和结果—第1部分：一般
原则与定义。
23.2 ISO5725-4。测量方法的精确度（正确度和准确度）和结果—第4部分:基本方
法测定标准检测方法的准确度。
23.3 ISO标准-产品由TC: ISO/TC 126（http://www.iso.org/iso/home/store/catalogue_

tc/catal
ogue_tc/catalogue_tc_browse.htm?commid=52158）
23.4 验证测定电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇分析方法合作研究报告（出
版中）。
附件1
在分析电子烟烟液尼古丁、丙二醇和丙三醇含量时获得的典型色谱图
图.A1.1.尼古丁浓度0.30mg/mL，丙二醇和丙三醇浓度10.0mg/mL标准溶液的色谱图例子
图.A2.2.样本溶液色谱图例子
附件2
GC-MS选择性的测量技术设置
质谱分析法（MS）操作条件
气象色谱法（GC）的特殊条件，如运载气体，流速和总运行时间，能适用于确定的
MS需求。
输送管路温度：>=180oC
停留时间： 50毫秒
电离模式：电子电离（电子能量70eV）
检测：丙二醇：m/z（质子数/电荷数）61（定量）45（定性）
丙三醇：m/z 61（定量离子）43（确认离子）
尼古丁：m/z 162（定量离子）133（确认离子）
喹那啶：m/z 143（量化离子）128（确认离子
n-十七烷：m/z 240（量化离子）85（确认离子）。
这些内部标准不建议用于GC-MS检测，因为其低特异性质谱
本文件由世界卫生组织（WHO）健康促进部无烟小组和WHO烟草
实验室网络（TobLabNet）成员，与欧洲烟草控制联合行动（JATC）成
员实验室合作编写，作为测量电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇的
分析方法标准操作程序（SOP）。

无烟小组（无烟倡议） 烟草实验室网络（Toblabnet）

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电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程 . WHO TobLabNet官方方法标准操作流

建议的引用格式。电子烟烟液中尼古丁、丙三醇和丙二醇测定的标准操作流程 . WHO TobLabNet

2.1 ISO 20714（en）电子烟烟液—测定用于尼古丁电子发生装置液体中的尼古

2.2 ISO 13276：烟草和烟草制品—尼古丁纯度的测定—钨硅酸重量法。

2.3 ISO 5725-2：测量方法的精确度（正确度和准确度）和结果—第2部分：一种

4.2 用丙二醇[7.6]和内标[7.7] [7.8]组成的稀释剂稀释电子烟烟液。

7.2 辅助气体：空气和火焰电离检测器用高纯度氢[CAS号:1333-74-0] (> 99.999%)

7.3 尼古丁（(S)-3-[1-Methylpyrrolidin-2-yl]pyridine）；–(–) 已知纯度不低于98%尼古丁

稀释液由含适量内标物（0.5 mL/L正十七烷/2ml/L 1,3-丁二醇）的丙醇组成。利用移

10.2 丙三醇和丙二醇标准储备液（50 g/L）

标准 丙三醇/丙二醇 内部标准 总体积 最终混合标准 电子烟烟液中

气相色谱柱：Agilent DB-ALC1（30 m x 0.32 mm, 1.8µm），或同等品

18.2 将色谱柱温度升高至220 oC，持续30分钟，建议在每个样品组（系列）之

尼古丁 0.1 0.2

峰值（mg/mL） 研究样品均值 回收率

A 0.25 0.326 130.4%

建立的尼古丁校正曲线在0.01-0.30 mg/mL（电子烟烟液1.0-30 mg/mL）标准

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