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参考资料1

黄曲霉毒素手册
(暂译)

美国农业部 (USDA) 谷物检验、包装和堆场管理局 (GIPSA)


联邦谷物检验局 (FGIS) 美国农业部谷物检验局 联邦谷物检验局

第一章概述_ _

1.1 目的
本手册测量并发布了谷物和加工谷物产品中的黄曲霉毒素。
它建立了证明表达结果的正式程序。

1.2 背景
黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉这两种真菌产生的天然霉菌毒素。 A. lavus在自然界中分布广
泛且常见,
当某些作物在干旱等压力条件下生长时最常见。
霉菌存在于土壤、
垂死的植被、
干草和正在经
历微生物腐败的谷物中,
并在任何有利于其生长的条件下侵入所有类型的有机基质。
有利的条件还包括
高湿度和高温。
自然界至少产生 13 种不同的黄曲霉毒素,
其中黄曲霉毒素B1被认为是毒性最强的。 A.
lavus的存在并不一定意味着黄曲霉毒素达到有害水平,
但它确实

他们当然有可能还活着。
美国谷物检验局 (GIPSA) 监
管美国谷物标准法,
黄曲霉毒素检测服务以玉米、
高粱、
小麦、
大豆为官方标准,
为USGSA指定的官方检验项目。
此外,
还为
《农业营销法》
(AMA) 涵盖的加工商品提供检验服务,
包括大米、
爆米花、
玉米粉、
玉米蛋白粉以及玉米
和大豆混合物。

黄曲霉毒素检测服务可应要求在全国范围内提供,
收费固定。
使用几种不同的 GIPSA 批准的测试套
件提供服务,
并且可以是定性的(筛选高于或低于客户定义的阈值)
或定量的(实际测量值以 ppb 为
单位)。

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此外,
GIPSA 还提供了一种有限但先进的化学测试方法,
即高效液相色谱法 (HPLC),
用于黄曲霉
毒素分析,
以协助谷物行业。 HPLC 方法仅根据要求用于董事会上诉。
根据 GIPSA 指令的规定,
所有
官方黄曲霉毒素测试均由 GIPSA 认证人员或委托/指定实验室的许可人员进行。
那些寻求官方检验
的人应该联系最近的联邦谷物检验局。

(FGIS) 当地办事处或授权/指定机构。

1.3强制检验
1990 年食品、
农业、
保护和贸易法(公法 101‑624)
修订了 USGSA 第 5 条,
规定“⋯⋯买卖双方
签订的出口合同不得进行黄曲霉毒素检测。
除非另有说明,
所有从美国出口的玉米都经过测试,
以确保
黄曲霉毒素水平在可接受的水平。

必须检查是否

1.4污染限度
美国食品和药物管理局 (FDA) 已针对食品或饲料中存在的黄曲霉毒素设定了行动水平。
设定该行
动水平是为了确保足以保护人类和动物健康的安全裕度。

FGIS 和 FDA,
部分是因为他们在履行各自的监管和服务职能方面的相关目标,
已经决定应
对谷物、
大米、
豆类和食品进行黄曲霉毒素污染检测。
已签署协议(谅解备忘录 (MOU))
来识别超过 FDA 行动水平的批次,
以确保最有效的识别系统成为
可能。
根据本谅解备忘录的规定,
FGIS 和官方委托/指定的检验机构应逐批向 FDA 报告在官方抽样
批次测试中超过 20 ppb 的任何批次(谷物、
大米和加工商品)。

下表显示了 FDA 对饲料中黄曲霉毒素的行动水平。

20 ppb 用于幼小动物(包括小鸡) 和奶牛,


或玉米和其他未知用途的谷物。 20 ppb 玉米或棉籽粕以
外的饲料。 100ppb 玉米和其他谷物,
用于小母牛、小母牛或小鸡以外的家禽。 200 ppb
玉米和其他谷物,
用于体重 100 磅或以上的育肥猪。 300ppb 育肥阶段肉牛的玉米、
其他谷物和肉类
(饲养场)

用于牛、
猪或家禽的棉籽粉。

黄曲霉毒素污染的玉米批次必须
可以在某些条件下进行修复(见附件)。

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1.5认可检验方法
FGIS 已批准在现场使用的测试套件。
玉米定性试验
对于“A lacard T20”、
“AgraStrip”、
“Agri‑Screen”、
“QuickTox”、
“QuickTox (2006)”、
“Reveal”、
“ROSA® P/N”
和“Diachemix”
测试套件已获得批准。
「A latest」、
「Fluoroquant」、
「Mycou」、
「RIDASCREEN Fast A latoxin SC」、
「ROSA®
Quantitative、
Veratox 和 Veratox‑AST 测试套件用于定量测试。
但也可用于获得定性结果。
高效液相色谱法 (HPLC)
技术服务部 (TSD) 进行的定量分析
仅用于检查。

FGIS认可的检验方法
认证目标 定 测试套件
测试方法和测试套件
性 定量 定量范围

A lacard T20 – (R‑Biopharm Rhone) X 20 ppb


AgraStrip ‑(罗默) X 10 或 20 ppb
AgriScreen ‑ (Neogen) X 20 ppb
Diachemix® FPA – (Diachemix) X 20 ppb
QuickTox ‑ (Envirologix) X 20 ppb
QuickTox (2006) (Envirologix) X 20 ppb
显示黄曲霉毒素 – (Neogen) X 20 ppb 10 或 20 ppb
ROSA® 黄曲霉毒素 P/N – (Charm Sciences, Inc.) X
A latest – (Vicam) XX 5 ‑ 100 ppb
荧光剂 ‑ (Romer) XX 5 ‑ 100 ppb
Mycou ‑ (Strategic Diagnostics Inc.) XX 5 ‑ 80 ppb
RIDASCREEN 快速黄曲霉毒素 SC ‑ (R‑Biopharm) XX 5 ‑ 100 ppb
ROSA® 黄曲霉毒素定量 – (Charm Sciences, Inc.) XX 5 ‑ 50 ppb
Veratox ‑ Neogen XX 5 ‑ 50 ppb
Veratox AST ‑(Neogen) XX 5 ‑ 300 ppb

注意:
定量范围是为单独分析未稀释的饲料提取物而设置的。
是。当超出定量范围时,
必须进行额外的分析以获得准确的结果。

[用于定性测试的认证套件]
下表列出了黄曲霉毒素官方定性检测中常用的那些。
请参阅此表以确定合适的测试套件。

明信片 AgraStrip 农业 速毒 揭示 ROSA®P/N Diachemix


谷物 T20 ** 焦平面
屏幕

玉米粒 X X X X X X X
*

** 对于玉米,
有两个 QuickTox 测试套件经过认证。一(第13章)
需要甲醇/水作为萃取溶剂, 而另一个(第 20 章)
需要甲醇/水或
可以使用乙醇/水。

注意:
带框的 X 表示在评估测试套件后获得批准的谷物/商品套件
表示带框的 * 表示测试套件目前正在由 TSD 评估谷物/商品和
表示临时授权使用。

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[用于定量测试的认证套件]
下表列出了官方对黄曲霉毒素进行定量检测时常用的那些。
这是可以做到的事情。
使用此表作为指南来确定哪种检查套件适合检查所列谷物/商品。
确定集合。
有关混合谷物测试的信息,
请参阅政策
联系政策和程序处。

检查方法

粮食/商品 A latest氟化物 我的C 瑞达斯克 罗莎® 查看 维拉托


他们要 或者 一间公司 定量的 毒素 x‑AST
黄曲霉毒素SC

玉米 X X X X X XX
高粱 X X X X X X
小麦 X X X X X
大豆 X X X X X
玉米筛选 * 玉米粉 X *
X X X X X XX
玉米胚芽粕 X X X X
玉米蛋白粉 X X X XX
玉米/大豆混合物 X X X X X XX
玉米蛋白饲料 X
压榨碎粒 X 玉米粉 * X *
X X X *
玉米皮 X *
爆米花 X X X X X X
精米 X X X XX*
水稻 X X
玉米粒 * 酒糟可溶物 * * X X *
X
DDG X X
DDGS X X

注:
带框的 X 表示该检测试剂盒经评估后被批准为谷物/商品试剂盒。
表明带框的 * 表示测试套件目前正在由 TSD 评估用于谷物/商品。
表示暂时批准正式使用。

1.6免责声明
本手册中提及的某些公司或产品名称是未提及的其他公司的名称。
表示美国农业部认可或推荐该公司或类似产品
不是。

1.7检验服务
要求进行黄曲霉毒素检测的申请人可以选择定性和定量检测服务。
您必须指定是否要如果要求进行定性测试,
申请人应该
您必须指定所需的水平(例如 20ppb)。
可用黄曲霉氧
检查服务分为三种类型:
提交样品检验服务
本次检测服务申请人提交的样本将被分析。
B 官方抽样检验服务
授权官员采集并分析官方样本。

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(1) 单批检验Individual
carrier(carrier) unit or mixed (composite) sample unit
采集并测试任一样本(每个混合样本最多 5 辆货车或 15 辆卡车)。

(2) 基于CuSum装载计划的机组列车检查
单元序列在玉米和高粱的子批次基础上进行分析,
而在其他谷物的复合基础上进行分析。
如果
指定了“最大”
限制,
则子批次必须符合合同规格才能被接受。

没有。
如果要求检测黄曲霉毒素,
应对单个载体或子批次进行取样和检测。
对于容量小于 200,000 蒲
式耳的单元列车,
黄曲霉毒素测试的最大子批次大小为 5 个车厢或 50 个车厢。
对于容量为
200,000 蒲式耳或更多或 50 辆或更多轨道车的单元列车,
最大子批次大小为 10 辆轨道车。 (3)
出口装运批次 出口装运批次对玉米和高粱按子批次进行分析,
对其他谷物按组合进行分析。
如果指
定了“最大”
限制,
则子批次必须满足合同条款才能被接受。 (4) 附加检查

根据要求,
可以进行如下额外检查:
对于玉米和高粱装运批次或单元列车,
除了印迹研究外,
还可以分析混合样品。
(5) 替代检查
根据要求,
可提供满足最低测试要求的替代测试方法。
能够替代测试的例子包括:
(a) 如果是在综合基础上定期检验的谷物,
则为混合样品;
可以使用子批次检查代替分析。
(b) 可根据谷物检验手册第 3 卷检验程序中规定的成分样品而不是子批次检验谷物货物。
将组
分混合并取平均值以确定子批次结果。
对于合同的“最大”
指定,
可接受的质量将基于子批次
的结果。

C仓样品批验货服务
根据获得许可的仓库采样器采集的官方样本,
授权人员
分析。

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1.8审核检查
USGSA 第 800.125 和 800.135 节指的是官方等级/因素或官方
允许根据任何标准进行审查检查。
如果要求,
可以单独进行针对官方等级或官方因素和官方标准的审查
检查。
但是,
两个测试结果都报告在同一张证书上。

黄曲霉毒素的审查测试服务根据规定使用新的或存档的样品进行。
上诉审查委员会检查服务仅限于
对存档样本的分析。 [注:
以余粮样品为‘新样品’作为检测依据。]

不应被视为]
最多可执行三 (3) 次复查检查(复检、
上诉、
上诉审查委员会检查),
用于对提交的样品(由个别承
运人认证的批次和多个承运人的混合样品代表)
进行初步检验服务。
当以子批次为基础进行检验时,

个装运批次、
单元列车或驳船的每个材料部分只允许进行一次现场审查(重新检验或上诉检验)。

是,
如果申请人要求对整个批次进行审查,
则该批次中包含的每个子批次最多可获得三个级别的审查
服务。
各复审阶段的检查结果代替上一阶段的检查结果。

复检服务
进行初检服务的实验室也提供复检服务。
申请人可以要求进行定性或定量分析。
但是,
如果初始测
试是定量测试,
则重新测试仅限于定量分析。

B 申诉检查服务
FGIS 区域办事处提供黄曲霉毒素上诉检验服务。
没有检查设施的地方办事处将与另一个 FGIS 地
方办事处作出安排,
以便尽可能及时地提供服务。
申请人可以要求定性或定量测试,
但如果初始或重
新测试是定量测试,
则只能进行定量测试。
如果样品要送往区域办事处进行分析,
请在谷物样品票的
“评论”
部分和邮寄标签的背面写上“黄曲霉毒素上诉”。

C 上诉审查委员会检查服务
上诉审查委员会检查服务仅限于存档样本,
由堪萨斯城上诉和审查委员会 (BAR) 提供。
申请人可
以要求定性或定量测试,
前提是初始或重新测试是定量的。

仅限于定量测试。
HPLC 方法也可用于量化上诉委员会测试样品中的黄曲霉毒素。
这样做时,
申请人必须将 HPLC
方法指定为首选的量化方法。
否则,
上诉审查委员会将使用加速方法(测试套件)
进行审查。

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如果样品要送到 BAR 进行分析,


谷物样品票的“评论”
部分和
在邮寄标签的背面写上“黄曲霉毒素审查委员会上诉”。

1.9质量保证计划
堪萨斯城 GIPSA 技术中心的技术服务部 (TSD) 为所有提供测试服务的指定测试地点和实验室维护
黄曲霉毒素测试样品程序。 TSD 负责:

准备季度测试样品并将其分发给所有官方黄曲霉毒素测试实验室。
分析测试样品结果,
将任何
有问题的结果通知现场 为所有参与实验室发布季度总结报告。
地方办事处确保其管辖范围内的
所有实验室都提供准确的结果。

并负责定期监督。 TSD 测试样本计划旨在验证官方系统的性能并监控已批准测试方法的准确性。


试样
程序还提供有限的性能信息,
这有助于补充对执行测试服务的授权人员的定期监督。

是。

(附件)
黄曲霉毒素取样和修复程序

1. FDA修复指南
FDA 要求在出口时对大量受黄曲霉毒素污染的玉米进行检测。
在以下条件下允许通过机械筛分进行修复:
如果出口地点在国内,
当地的 FDA 办公室应该使该过程具有成本效益。
可以修改修复程序以实现

A. 只允许一次修复。
翻新批次分析
结果是对整个批次的处置的最终决定。
B 为确保适当的修复,
粮食公司必须
该批次必须经过机械筛选,
容量不超过 50%。
C FGIS 使用潜水器型 (DT) 自动进样器监测筛分过程和样品复原批次(筛分玉米粒),
并分析样品的黄
曲霉毒素浓度。

D FGIS 样本清洁(筛过的玉米粒)/筛选(筛过的面粉部分)
使用最现实的可用程序和

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清洁和/或筛查应检查黄曲霉毒素水平。

2. FGIS职责 如果在
出口点发现阳性批次,
现场办公室经理 (FOM) 应与粮食设施代表合作,
对受黄曲霉毒素污染的玉米
实施标准操作程序 (SOP)。:
标准操作程序)
应发达。

在进行修复之前,
FOM 应与当地 FDA 官员一起审查 SOP。
想一想。
除非 FDA 另有指示。
A 输出地点
在出口点,
FGIS 或官方授权的国家检验机构人员(视情况而定)
负责:

(1) 向当地 FDA 地区办公室报告干预批次; (2)修复前保存干预目标批次


的标识信息; (3) 监控粮食设施的修复过程; (4) 翻新地块(reconditioned lots and

和筛选)
进行取样和测试黄曲霉毒素。
筛选筛查时,
使用最现实的可用方法获取代表性样本。

(5) 保存修复批次和筛选; (放映


不被视为翻新地段。 )
(6) 修复批次和筛选的黄曲霉毒素分析结果
给FDA。
(7) 编制修复过程报告;
在您的报告中包含以下信息:
描述。 1)
修复日期 2) 电梯/设施 3) 样本/载体类型
4) 初始检验结果 5) 修复批次检验结果 6)
清洁/筛选检验结果 7) 用于修复批次的筛子
尺寸 8) 电梯尺寸 操作设备信息

B 国内设施 FOM
负责的国内设施联系对受污染批次所在区域具有管辖权的当地 FDA 办公室,
以讨论和确定修复过
程的管理责任。
鼓励官方机构和受影响的粮食公司参与讨论并促进 SOP 的制定。

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3.样本量和准备
根据本手册第 2 章中的说明收集最小样本量。
应用
可根据个人要求获得更大的尺寸。
研磨用于黄曲霉毒素检测的整个玉米样品,
并从研磨样品中制备三个 500 克的二级样品。
如果根
据 FDA 指南对翻新批次重新取样,
则不需要存档样品。
如果修复批次或筛选玉米的初始 FGIS 测试结
果超过 20 ppb,
则 FDA 样品将用于后续结果验证。

二级样本 用途

检查 储 初始检验服务 审查检
存 验服务 如果结果超过
FDA 用 20 ppb,
则保留用于 FDA 分析

4.处置政策
粮食行业必须遵守 FDA 关于处理修复过程中产生的玉米和筛网的政策。
一般来说,
处置

完成如下:
对于其他具体的
处置相关问题,
请联系您当地的 FDA 办公室。
o 如果黄曲霉毒素水平符合 FDA 指南,
则可对饲料进行清洁/筛选。
筛选后不得以任何方式重新进入
食品通道。

o 可以不受限制地处理黄曲霉毒素含量低于 20 ppb 的复原玉米。


如果修复过程不成功并且玉米继
续超过 200ppb 水平,
则将遵循当前的 FDA 政策。

将根据

第二章实验室安全

2.1概述
黄曲霉毒素检测需要使用易燃液体和疑似致癌物。
建筑物所有者(私人或 GSA)
必须允许在
FGIS 使用的区域使用甲醇。 FGIS 仅在为 FGIS 人员提供充分保护的设施中提供现场检查服务。

下面积要求仅适用于 FGIS 占用的空间。

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2.2批准的FGIS实验区
个别升降机(粮食收储设施)
可提供两类区域供人员进行现场黄曲霉毒素检测。 (1) 在有其他住户
的建筑物中;
或 (2) 在专用于实验区的建筑物中。

在任何一种情况下,
预期实验区域的设计都应在施工前由 FGIS 检查和批准。
安全与健康办公室、

备处和地方办公室经理将审查设计方案并就如何满足要求提出建议。

测试区域的最低要求如下:
A 位置 实
验室应位于距离电梯檩条底部至少 100 英尺的位置。
如果提升机使用室外斗式提升机和/或输
送机代替斗式提升机,
或檩条装有防爆板或檩条框架结构被轻覆盖,
上述距离另行协商。
位于有
其他住户的建筑物内的实验室必须满足以下要求:

必须。
(1) 实验室应采用耐火性能至少为一小时的防火墙在实验室外进行占用。
远离人群。
(2)准备由地板、
天花板和内墙组成的防火墙。 (3) 所有通向相邻
室内空间的走廊和其他开口均应安装耐火等级为一小时的自闭式防火门。
不要阻止这些门打开

不是。
(4)在靠近防火墙的采暖、
通风、
空调管道上安装自闭式防火阀。
将实验室区域与集中供暖、
通风和空调分开,
或者为实验室提供单独的供暖、
通风和空调系统。

B尺寸
确保该区域专门用于实验。
为化学分析提供足够的区域(至少 100 平方英尺),
并为样品制备
和研磨操作提供单独的区域。
样品的研磨应在与检查区域分开的区域进行。

C 电气系统
实验区应配备符合国家电气规范标准的电源和照明。
不需要 I 类接线。
由电压线、
中性线和地线
组成的三线系统就足够了。

通过天花板安装高架照明装置以充当防火墙。
情分
天花板下方的悬挂装置是可以接受的。
D 排气系统
排气系统应将甲醇蒸气排除在工作区域之外。

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没有。
在专门用于实验区域的建筑物中执行实验室程序时,
正常的空调和暖气可以提供足够的通风。

地附带责任安全与健康官员和华盛顿特区健康与安全部将根据具体情况帮助评估是否需要额外的通
风设备,
例如通风橱。
如有必要,
定位实验室空间,
使通风罩(由 FGIS 提供)
与建筑物外部通风。
通风
柜通风需要一个直径为 6 或 8 英寸的开口,
垂直穿过天花板和屋顶或水平穿过外墙

成为。
在某些情况下,
活动罩可能就足够了。
E 管道 在
实验区提供冷热饮用水盆和下水道连接。
有关这些要求的更多信息,
请联系 FGIS 健康与安全人
员。

F 洗眼和安全淋浴设施
实验区应设置洗眼设施(洗眼瓶或连接水龙头的固定式洗眼器)。
强烈建议在水龙头上安装固
定式洗眼器。
使用基于乙腈的萃取溶剂(Rohmer Fluoroquant 测试方法)
进行实验。

测试室必须配备安全淋浴。

2.3 FGIS实验室工作
在实验室工作时,
FGIS 人员必须遵守为进行测试的实验室制定的化学卫生计划。
为此,
请将以下要求作
为整个 FGIS 实验室 SOP 的一部分。
在每个实验室中完成 SOP、
本手册和最新的材料安全数据表 (MSDS)
和化学品卫生计划。

A 根据危险沟通计划为所有瓶子和容器贴上标签。
此外,
在制备混合溶液时,
用永久性墨水贴上带有溶液名
称、
制备日期和制备者姓名首字母的安全标签。

B 不要在实验室内吸烟、
进食、
饮水或嚼口香糖或烟草。
C 在实验室区域外进食、
饮水和吸烟前后立即洗手。
D 工作时穿戴一次性阻燃实验服和一次性防渗手套。
E 根据本章中描述的程序清洁实验室设备并处理污染物。
当压碎 F 样品或以其他方式暴露于空气中的谷物粉尘时,
FGIS
佩戴经批准的一次性口罩和发帽。
G 如果检查过程涉及除甲醇以外的化学品(例如乙腈)
不要在实验室戴隐形眼镜。
H 在实验室佩戴 FGIS 认可的安全眼镜或防溅护目镜
(实验室访客也佩戴)。

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I 不要在实验室冰箱中存放食物或饮料。
试剂盒和其他需要冷藏的物品
只储存物品
J 不要在实验室外穿防护服。
将废化学品转移到外部存储设施或将多余化学品从外部存储柜带入实验
室时除外。

K 打磨区域应佩戴口罩和发帽,
因为它们可能会被灰尘污染。
不要存储。

2.4化学品和溶剂的储存
A 将化学品和设备存放在通风橱外。
B 将化学品存放在不会弄乱工作表面或干扰移动的地方。
不要将溶液存放在眼睛水平以上。
将大瓶子
存放在离地面不超过 2 英尺的地方。

C 所有溶液制备和分析均在通风橱打开的情况下进行。
D 将实验室中的化学废物总量限制在 1 液体加仑以内。
E 完成实验室中每种化学品的最新 MSDS。
收到的每种化学品的可用性;
如果货物不包含 MSDS,
请联系公司并要求立即发送。

F 将实验室中易燃溶剂的总量限制在 2 加仑以内。
G 将易燃溶剂储存在认可的溶剂储存柜中。

2.5实验室器具的清洗
A 阴性测试 (≤20ppb) (1)
Labware
制作洗洁精和水的溶液。
将用过的玻璃器皿、
漏斗、
烧杯等完全浸入溶液中,
彻底清洗并用清水冲
净后再使用。

(2) 一次性设备 将设
备放入垃圾袋中进行日常垃圾处理。
B 阳性测试 (>20 ppb) (1)
实验室器具 用漂白剂和
水按 1:10 的比例配制漂白剂溶液(例如 100ml 漂白剂对水)。
1,000 毫升)。
将用过的玻璃器皿、
漏斗、
烧杯等完全浸入溶液中,
浸泡至少 5 分钟。
将器具从漂白
液中取出,
浸泡在洗洁精和水溶液中,
彻底清洗并用清水冲净后再使用。

(二)一次性用品
在标有“漂白剂溶液”
的塑料桶中,
配制漂白剂与水的比例为 1:10 的漂白剂溶液。
使用的色谱
柱、
比色杯、
小瓶、
测试套件

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将清洁组件等一次性物品浸泡在漂白剂溶液中至少 5 分钟。
将液体倒入下水道并将设备放入垃
圾袋中。

2.6清洗溢出的黄曲霉毒素溶液
在以下过程中必须佩戴一次性防渗手套和化学防溅护目镜。
如果手被污染,
立即用未稀释的漂白剂
清洗,
然后用肥皂和水清洗。

清洁被黄曲霉毒素溶液污染的区域和设备或漂白剂溢出的阳性(>20 ppb)
提取溶液。
将塑料清洗
液或喷雾瓶中的 5‑6% 次氯酸钠(家用漂白剂)
涂抹在受影响的区域。

申请。
将 10 份漂白剂涂在 1 份溢出的设备上,
并静置至少 5 分钟。
用吸水布或纸巾擦去漂白剂。
将洗
涤剂和清洁材料放入塑料垃圾袋中,
盖紧并丢弃。

2.7处理多余的样品提取物 A 阴性样
品 (≤20 ppb) 将多余的样品提
取物溶液丢弃在认可的废物容器中。
常规样品浆料
放入垃圾袋中进行垃圾处理。
B 阳性样品 (>20 ppb) 完成
测试程序后留下的样品提取物和浆液必须先净化,
然后再放入废物桶中处置。
样品分析完成后,
使用塑料洗瓶将漂白剂添加到浆液中并过滤。
过滤后,
将泥浆丢弃在垃圾袋中。

要净化样品提取溶液,
添加等于试管中剩余体积 1/2 的漂白剂。
将去污后的提取液倒入经批准的
废物容器中。

2.8废物处理
法律和美国环境保护署要求妥善处置危险废物
(EPA) 制定了具体的指导方针。
但是,
在某些地方还有其他地方和州法律。
用于处理废弃化学品的程序
必须符合每个地点要求的法律,
这一点很重要。

有关当地处置信息和经批准的废物处置公司的名称,
请联系您当地的
请联系 EPA
A 化学品和溶剂
(1) 根据现行地方、
州和联邦法律处理废物; (2) 选择您所在地区的 EPA
批准或认证的废物处理公司。
公司确定所需废桶的类型,
提供有关样品概况和废弃物清单要求的信
息,
并根据样品/概况结果,

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并能够提供收集成本的估计。
(3) 将废弃物存放在实验区外符合当地消防法规和 EPA 法规的地点。
放置鼓。
正确标记废物桶并注明日期。 (4) 各实验室现场后处理程序。 (5) 收集垃圾桶并送往垃
圾处理场的处理公司提交的文件

保持准确的记录。
B 去污设备
将净化后的设备(例如过滤器、
测试套件组件和一次性实验室器具)
放入垃圾袋中,
然后丢弃在垃
圾箱或垃圾填埋场中。
只能运输经过净化处理的设备。 (不要运输易燃物或受污染的设备。)

C 其他
黄曲霉毒素测试后剩余的玉米粉/其他谷物
代表大于 20 ppb 的谷物的官方黄曲霉毒素储存样品中的磨碎的玉米/其他谷物应标记为“仅供实
验室使用,
不得用于食品或饲料”,
并弃置于垃圾箱或垃圾填埋场。

2.9当地办事处经理的职责
使用每个执行 A 测试的实验室的某些 SOP 来补充本手册。
补充 SOP 应根据每个设施的个别吞吐量和情况量身定制。
首选。
B 为执行涉及危险物质的检查的工人制定危险沟通计划,
并确保所有工人都遵守该计划。

C 联系 EPA 批准或 EPA 认证的废物处理公司,


安排清除化学废物,
或者根据现行法律,
不会对社区造
成危害的废物。
使用其他适当的废物处理方法。
D 提供密封不透水的金属容器,
该容器符合美国保险商实验室对 I 类液体的批准要求,
用于储存废化
学品(例如甲醇、
乙腈)
和要清除的溶液;
标记为“易燃”
或“生物危害”
或两者兼而有之,
因为合适
的。

E 丢弃去污设备,
如滤纸、
实验室外套、
一次性移液器吸头和手套。
准备一个塑料垃圾袋
F 提供用于处理剩余粮食的容器和标签。
标签上写着:
“仅供实验室使用。
USE NOT FOR FOOD OR FEED”
并在处置前贴在容器上。
G 为实验室门口准备以下标牌。
(1) “含有生物危害性物质”
(2) “禁止吸烟、
饮食” (3)
“含有易燃物质”

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(4)
“穿防护服”
(5)
“非授权人员不得进入”
H 如果有一台冰箱,
为下一台冰箱准备一个标签。
(1) “含有生物危害性物质”
(2) “请勿将食物或饮料放入冰箱中”
I 在执行实验室职能之前为实验室人员提供充分的培训,
包括: (1) 传达可能导致接触黄曲霉毒素的
操作和条件的信息; (2) 相关化学品的材料安全数据表的内容和可用性; (3) 处理受黄曲霉毒素污
染的产品时应采取的预防措施;

包括个人卫生、
个人防护装备和去污方法。
(4) 防尘口罩等防护用品的用途、
适当措施和限制条件; (5) 工程和商业实践
控制,
包括清洁方法; (6) 熟悉实验室SOP。 (7) 妥善处理和处置废物。

J 维护以下方面的健康和安全记录:
(1) 涉及过度接触化学品的任何员工疾病或伤害记录(29 CFR
1904; 29 CFR 1960.66~77b)
(二)
完成培训并被指派进行黄曲霉毒素检测的人员名单。 (3) 与实验室有关的任何健康
和安全调查的副本。

第3章样品制备

3.1概述
在测试黄曲霉毒素时,
如何收集和处理样本是一个重要的考虑因素。
为确保测试结果准确地表明给
定批次中存在的黄曲霉毒素浓度,
样品应能代表该批次,
且样本量应足以补偿污染物的不均匀分布。

一定有。
如果玉米样品的水分含量过高(大于 20%),
黄曲霉毒素的研磨和检测程序就会出现问题。
水分含
量高的玉米不能磨成合适的粒度,
影响检测结果的准确性。
因此,
授权官员必须在研磨和检查之前始终
将高水分玉米样品风干至水分含量为 20% 或更低。

3.2样本量
按照谷物检验手册第 1 卷谷物抽样中的说明进行操作。
样本。

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最小样本量取决于批次类型。
申请人必须有最低底池
您可以请求大于样本量的样本量。

批次类型 最小样本量(磅)/克
卡车 2磅/约908克

货车 3 磅 / 约 1,362 克
驳船/子批次 10 磅/~4,540 克 10 磅/~4,540
提交样本 克(推荐)

注意:
对于混合样本(例如, 代表多个运营商的单个样本),
需要至少 10 磅的样本量。
对于提交的样品,
还建
议但不要求使用 10 磅的样品量。

实验室收到小于 10 磅推荐样本量的提交材料时,
必须研磨整个提交材料。
对于重量为 10 磅或以上的
提交样品,
必须至少研磨 10 磅以供检查。

3.3工作记录
每个执行检查的实验室都应为每次检查准备和保存工作记录。
记录应包括申请人的姓名、
进行测试
的日期、
样本或载体的身份、
测试结果、
执行测试的授权官员的姓名首字母以及适当证明测试结果和发
票所需的任何其他信息申请人。
包括任何必要的信息。
根据实际情况,
实验结果的记录可以以“性能报
告(FGIS‑992)”,
“谷物样品票(FGIS‑920)”,

或者使用现有的表格,
例如“检查日志 (FGIS‑921)”。
将样品发送至 TSD(包括上诉委员会)
进行黄曲霉毒素检测或监测时,
请确保包含有助于样品处理
和检测的必要信息。

3.4样品体积
A. 二级样品 将
用于黄曲霉毒素检测的整个样品粉碎,
并从粉碎的样品中制备两个 500 g 二级样品。
准备 500g 的
工作部分用于初检服务和 500g 的库存样品用于复检。
对于提交的样品,
尽可能多地保留样品。

对于出口点的玉米子批次检验,
如适用:
保留额外的 500 克储备样品用于 FDA 对“干预批次”
的分析(三个总计 500 克的二级样品)。
从 500g 的工作部分中取出 50g 的测试部分,
并使用 FGIS 认可的最小秤量为 0.1g 的秤。

用卡尺称重。
在这种情况下,
请使用以下任一方法。
(1) 收集 500g 样品并(使用认可的分液器)
分出 50g 测试部分用于分析。
搁置。
其余的作为档案样本保留。

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或者,
(2) 在干净的容器中收集 500g 样品,
用抹刀或勺子搅拌/混合约 30 秒,
以确保均匀混合(从低到高)。
使用抹刀或勺子舀取 50 g 样品进行分析。
其余的作为档案样本保留。

B 保护存储样本
满足以下条件的所有批次/样本的存储样本(如果适用):
(包括 FDA 档案样本)。
未能满足检验服务申请
人合同规范。
黄曲霉毒素监测计划所需。

或者

超过 FDA 的行动水平 20 ppb。


检查的批次、
子批次或复合材料(如果适用)。
为每个批次或提交的样品保留一个有代表性的存档样品。
提交的样品小于500g的,
尽量保留样品。
存储 有关标本保留期的信息,
请参阅 FGIS 指令 9170.13,

一存档和保留系统。

C 存档样本的保存
如果需要存档样本,
则每个样本的存储方式应保持样本的代表性并防止可能的操纵或替换。
样品应放
在纸袋或信封中,
并标明每个储存样品的检查日期和身份。
应采取预防措施以确保储存样品容器足够坚
固,
以便样品的完整性不会在储存过程中丢失。
不要将样品存放在靠近热源、
窗户或阳光直射的地方。

(如果可能,
将样品保存在冰箱中。)
D 储存样品的处置
在储存期结束时,
将储存的样品标记为“仅供实验室使用,
不得用于食品或饲料”,
并将储存的样品丢
弃在垃圾箱或垃圾填埋场。

E 样品运输 如果需
要将样品送到其他实验室,
请采取预防措施,
通过安全包装样品来保持样品的完整性。
运输容器应标有
“不可食用”
字样。

3.5破碎机操作
应将样品磨细至足以获得均匀混合物的粒度。
避免过度研磨或粉碎样品,
因为太细的粒径会减慢过滤
过程。

研磨必须在与检查现场分开的地方进行。
使用 Romer Model 2A Mill、
Byrne Grinder 或等同物研磨
样品。

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使用。
FGIS 人员在操作研磨机和研磨样品时必须遵循制造商的安全程序。
这样做时必须穿戴防护设备(实验室外套、
口罩、
手套、
发网)。

罗默磨坊
(1) 一般操作方法
Romer 磨粉机以大约每分钟 1 磅的速度同时研磨和二次取样玉米。
位于收集槽上方的可调节限流门
会改变进入收集槽的粉碎样品量。
授权官员应调整该研磨机,
以从样品中获取必要的子样品进行检查和
储存。

[注意:
不要舀出用于工作和储存样品的 500 g 样品。 ] 找到刻在限流门上的第一条线(最左边)
并调
整研磨机。
将门定位在第一条线和第二条线之间大约三分之一的位置。
每 10 磅样品通过收集槽收集约
500 克。

调整研磨机取 500 g 样品后,


标记其设定位置。
踢。
将限流器门向左移动以增加样本量。
如果除了逐个子批次分析之外还需要复合样本,
请根据需要调整子样本大小以获得足够大小的复合
样本,
并仍然保持单个存档样本。
混合样本取自磨碎的子批次样本。

(2) 研磨样品研磨整
个 10 磅样品,
将粒度控制杆设置为最精细的设置。
如果研磨机出现故障(过热、
因堵塞而失速
等),
而在更精细的研磨设置下,
请将研磨器杆更改为最粗糙的设置。
在最粗糙的设置上研磨剩余的
样品,
然后切换到精细设置。
收集完整的 10 磅并在精细设置上重新研磨。 [注意:
如果研磨机电机过热,
断路器将跳闸,
切断研磨机的电源。]如果发生这种情况,
请在电机冷却后将砂砾调节杆移至粗略设置。
不要研磨水分含量为 20% 或更高的样品。 ]

B 烧伤研磨机
(1)
一般操作方法
Bunn‑O‑Matic 以每分钟约 2 磅的速度研磨玉米,
并保持盖子完全关闭。
关闭时它可容纳约 3‑4 磅。
授权人员必须研磨整个样品(参见第 3.2 节)
并将其分开(使用 FGIS 批准
的分隔器),
以从官方样品中获得所需的工作和储存二级样品 500g。 [注意:
不要舀出用于工作和储

存样品的 500 g 样品。 ]

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(2) 研磨样品 用粒
度调节杆的精细研磨设置研磨整个 10 磅样品。
一次将 3‑4 磅研磨到料斗中并重复,
直到研磨
所有 10 磅。

如果研磨机状况不佳(过热、
堵塞、
等),
将粒度调节杆改为粗调。
在最粗设置下研磨剩余样品后,
切换到精细设置。
收集完整的 10 磅并在精细设置上重新研
磨。 [注意:
如果研磨机电机过热,
断路器将跳闸,
切断研磨机的电源。]如果发生这种情况,
请在
电机冷却后将砂砾调节杆移至粗略设置。
不要粉碎水分含量为 20% 或更高的样品]。

混合样本取自磨碎的子批次样本。
授权官员使用批准的分隔器将研磨的尺寸减小到规定的
500 克工作和
并且必须获得档案样品。

3.6清洗破碎机
研磨整个样品后,
少量研磨样品留在研磨机中。
随后的样品污染
为防止这种情况,
请使用以下清洁程序之一清洁研磨机。
A 如果有吸尘器
粉碎和收集样品后,
打开粉碎机,
使用带有适合滑槽口的附件的真空吸尘器。
将附件应用到每个
滑槽的底部大约 30 秒。
清洁完所有滑槽后,
关闭电源。

关闭源并准备下一个样本。
B 没有吸尘器时
通过丢弃下一个要测试的样品的少量(前 10‑15 克)
来去除粉末。
清洁破碎机。 (1) 将样
品倒入研磨机中,
打开电源运行,
直至回收第一个10‑15g。
借。
(2)接下来,
关闭电源并丢弃10‑15g粉碎的样品。 (3)重新打
开电源,
将样品研磨到底,
收集剩余的二次样品进行分析。
是。

3.7粒度检查
A 破碎机性能检验程序
对于对粗粮(如玉米)
和小颗粒进行霉菌毒素检测的设施,
应按照以下程序检测 100 克玉米样
品。 (1) 研磨约 100 克水分含量为 14.0% 或以下的玉米。

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(2) 称量整个地面样品。 (3) 用标准20号丝


网筛筛分样品。 (4)称量筛分后的样品。 (5)根据下式确定细颗粒的重量比。

罚款 = 步骤 (4) 的重量 ÷ 步骤 (2) 的重量 x 100


B 最适粒度
粗小颗粒通过20号筛的最佳细度范围为60%~75%。
如果磨出的颗粒显得太粗,
或者如果磨机检
查结果显示磨碎的样品只有不到 50% 通过 20 号筛,
则调整或修理磨机以满足最佳范围要求。

应定期检查研磨设备以确定设备的最终产品是否满足上述粒度要求。
授权官员将根据几个项目确
定检查频率,
包括研磨产品的目视观察、
自上次检查以来研磨的样品数量以及自上次检查以来的时间
(以天为单位)。
将所有粒子检查结果记录在方便的位置以供将来参考。

第四章认证

4.1 背景
标准谷物(如玉米、
小麦)
的测试是在 USGSA 的授权下作为官方标准因素进行的。
对加工谷物产品
(如玉米面)
和其他商品的检查是在 AMA 的授权下进行的。

黄曲霉毒素检测结果可在盘单、
工作表或装载日志和证书上找到。
记录在备注栏中。
USGSA/AMA(视情况而定)
规定谷物的黄曲霉毒素测试结果
认证依据
同一批次同时测定品级和黄曲霉毒素的,
可根据申请人要求分别出具品级和黄曲霉毒素证书。

USGSA 第 800.125 和 800.135 节允许对官方等级/因素或官方标准进行审查检查。


如果要求,

以单独进行针对官方等级或官方因素和官方标准的审查检查。
但是,
两个测试结果都报告在同一张证
书上。
如果官方等级或官方因素和官方标准在同一证书上报告,
则在复查检验证书中,
复查结果为官方
等级、
官方因素或官方标准,
所有其他结果均为初始,
声明表明重新测试或上诉测试结果是适用的。

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4.2基本程序
根据请求的服务类型和使用的测试方法,
黄曲霉毒素测试结果可能会有所不同。
它决定了如何记录和验证结果。
A. 定性检测 (1)
在盘票和检验日志中记录定性检测服务的结果是低于还是高于阈值(例如,
20 ppb)。 (2) 如果采
用定量方法提供定性检测服务,
在工作记录中记录检测结果作为定量指标(如10 ppb)
或定性指
标(如≤20 ppb)。

(3) 证明结果低于阈值。
B 定量检验
在盘票和检查日志上以最接近的整数 ppb 值记录结果。
如果测试结果表明
黄曲霉毒素水平低于 5 ppb,
则“黄曲霉毒素
将结果证明为“稀薄不超过 5 ppb”。
使用最接近的整数 ppb 值证明测试范围下限 (5 ppb) 和测试范围上限(例如 80 ppb)
之间的
测试结果。
如果不进行补充分析,
超过检测试剂盒检测上限的检测结果将被认定为超出检测试剂盒
范围。
例如,
如果使用测试范围为 5‑80 ppb 的黄曲霉毒素检测试剂盒获得的黄曲霉毒素检测结
果为 110 ppb,
则认证声明为“大于 80 ppb 黄曲霉毒素”。

C 单个和混合批次、
单元列车和装运批次的检验结果证明
(1) 卡车和货车的单批检验
在单独的证书中验证每个测试结果。 (二)
货车、
货车混
合陆运检验认证
如果申请者要求对黄曲霉毒素进行复合检测(最多5辆货车和15辆货车)
和对个别承运人进行
等级检测,
则发给黄曲霉毒素检测单因素证书,
对每个承运人单独签发等级证书。 (3) 出货批混
样检验

使用适当的描述验证混合测试结果。
(4) 提交样品的检验
使用适当的描述验证结果。 (5) 基于CuSum
装载计划的单元列车和装运批次的检查

(a) 装运批次的子批次大小 装运谷物的检验频率与等


级分析饲料相同。
除非申请人特别要求根据混合样品进行黄曲霉毒素分析。

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(b) 单元列车的子批次大小
对于容量小于 200,000 蒲式耳或少于 50 节车厢的单元列车,
黄曲霉毒素测试的最大子批
次大小为 5 节车厢。
对于容量为 200,000 蒲式耳或更多或 50 辆或更多轨道车的单元列车,

大子批次大小为 10 辆轨道车。

对于单元序列,
黄曲霉毒素测试和分级分析之间的子批次大小可能不同。
例如,
申请人可能
要求根据包含 2 个轨道车的子批次进行分级分析,
并根据 5 个轨道车进行黄曲霉毒素分析。

(c) 测试结果记录 装载过


程中收集的子批次样品的黄曲霉毒素测试结果记录在装载日志中。
如果子批次检验结果超过
装载订单中指定的限制,
则出现材料部分。 (d) 检验结果证明 基于接受的子批次检验结果的
数学/加权平均值(如适用)。

并证明该批次。
材料药水单独认证。
(e) 材料药水
如果出现材料部分,
申请人可以选择请求复查检查。
在确定是否存在材料药水时,
审查测试
结果将取代之前的结果。

如果审查检验过程没有取消黄曲霉毒素引起的材料部分指定,
申请人可以将材料部分留在
船上或货车上并获得单独的证书或将谷物退回电梯。,
或者该材料部分可以是卸载在一个普
通的装载容器中,
额外的谷物等于其数量的 1/2。

4.3标准认证声明
黄曲霉毒素使用以下任何适用的声明进行认证。
A 定性测试 如
果黄曲霉毒素测试结果等于或低于指定阈值(例如,
20 ppb),
“黄曲霉毒素 20 ppb
或更少” B 定量测试 (1) 如果黄曲霉毒素测试结果小于 5 ppb,
使用以下声明.

“A latoxin does not exceed 5 ppb”


(2) 黄曲霉毒素检测结果在5 ppb和检测试剂盒检测范围上限之间

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(例如 80ppb),
四舍五入到小数点后 1 位以获得整数 ppb。 “黄曲霉毒素(整
数值四舍五入到小数点后一位)
ppb” (3)
当黄曲霉毒素检测结果超过检测试剂盒
的上限范围时(如300ppb)。 “黄曲霉毒素(插入测试上限)
大于 ppb” C HPLC 测试

TSD 对总黄曲霉毒素进行 HPLC 测试,


并且应申请人的要求,
还可以进行测试以确定样品中的单
个黄曲霉毒素异构体(B1、
B2、
G1、
G2) 。
黄曲霉毒素B1 或B2的单个黄曲霉毒素测量的定量限度为
1 ppb,
黄曲霉毒素G1 或G2 的定量限度为 2 ppb。

以下语言用于总黄曲霉毒素认证:
“黄曲霉毒素(实际测量结果以最接近的整数值输入)
ppb。
高效液相色谱法测量结果”

以下语言用于样品中特定黄曲霉毒素的认证。
“黄曲霉毒素(酌情填写B1、
B2、
G1或G2 )
(近期结果
下一个整数值)
ppb。
测量结果通过高效液相色谱法获得。”
样品中单个黄曲霉毒素
和总黄曲霉毒素浓度的认证要求如下:
使用措辞。
“黄曲霉毒素(根据需要输入B1、
B2、
G1或G2 )
(以最接近的整数形式插入结果)
ppb,
总黄
曲霉毒素(以最接近的整数形式输入实际结果)
ppb。
液相色谱法可快速得出结果”

4.4可选措辞
A 未检出黄曲霉毒素
应申请人要求,
如果未检出黄曲霉毒素(0 ppb)
使用以下措辞: “未
检测到黄曲霉毒素” 注意:
即使
将子批次测试结果合并并取平均值得到 0 ppb 的批次平均值,
如果单个子批次结果超过
0.0 ppb,
则不能使用此声明。

B 转换为百万分率 (ppm) 应申
请人的要求,
将 ppb 结果转换为 ppm 并使用认可的语言。
认证。
要将 ppb 转换为 ppm,
请将得到的 ppb 值除以 1000。 “(实际结果ppb值)
ppb等于(ppm换算)
ppm” C换算成毫克(mg)
每千克(kg)
或微克(μg)

千克(kg)

应申请人要求,
将结果换算成毫克每千克(mg/kg)
或微克每千克(μg/kg)
并出具证明。
毫克/千
克或

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使用以下等价物来确定 µg/kg: ppm =


mg/kg “(实际结果 ppb 值)ppb 等
ppb=μg/kg
于(mg/kg 或 μg/kg 转换)” D 同一证书上的多个结果

当同一张证书对多个黄曲霉毒素检测结果进行认证,
且结果基于不同的样品类型时,
证书必须显示差
异。
作为指导原则,
可以提供如下几个结果。

“子批次样本结果:
黄曲霉毒素≤20 ppb” “合并样本结果:
黄曲霉毒
素 14 ppb”
E 阴性结果声明 如果测试结
果为 20 ppb 或更低,
应申请人的要求,
适用的标准声明。
可以在单词前添加以下短语之一: “黄曲霉毒素检测阴性”
或“黄
曲霉毒素阴性”
F 测试类型描述 应申请人要
求,
提供以下内容以表明所使用的黄曲霉毒素测试类型:
使用的措辞
“按(插入使用的测试类型)
方法得出的结果”
注意:
这些证书的措辞可能会根据需要进行更改。

4.5审查检查语言 对于重新检
查、
上诉检查和上诉审查委员会检查:
使用合适的东西。
A 检查结果应记录在与初次检查服务签发的同一类型的证书中。
报告并取代以前签发的检验证书。
“本证书取代日期为(日期)
的证书编号(编号)”
B 被吊销的证书在后续(复检/申诉/申诉复审委员会)
证书签发时被吊销。
失效。 “优先
权证书尚未交出。”

填写。 “结果
基于存档样本” D 如果在同一份
证书上报告了多个官方结果,
并且它们具有不同的测试级别,
请使用以下适用的陈述之一描述情况:

是。 “(等级、
因素或官方标准)
结果基于(新的/存档的)
样本。
所有其他结果均来自初始检查服务。 ”
“(成绩、
因素或官方标准)
结果基于上诉审查。
所有结果均来自(第一次测试/重新测试)
服务。 ”

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“(等级、
因素或官方标准)
结果基于上诉审查委员会审查。
所有其他结果均为(初审/复审/上
诉审查)
服务结果。”

注)
本手册由第 1 章到第 20 章组成,
但第 5 章以后省略了对每个测试套件的解释。

省略。
本手册的全文可从 GIPSA 网站获取。

(http://www.gipsa.usda.gov/GIPSA/webapp?area=home&subject=lr&topic=hb‑a l)。

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