Professional Documents
Culture Documents
生物农药纹曲宁规模化生产及其市场销售策略
沈素文1 , 李建伟1 , 陆 凡1 , 陈志谊2 , 刘永峰2 , 许忠俊1
(1. 江苏省苏科农化有限责任公司 ,江苏南京 210014 ; 2. 江苏省农业科学院植物保护研究所 ,江苏南京 210014)
关键调控措施及其在市场推广应用的策略作一些探 用 ,准备放罐 。
索 ,为纹曲宁的大规模产业化开发提供理论和实践 115 复配产品
依据 。 将在发酵罐中培养好的发酵液过滤后与 5 %井
冈霉素水剂复配 。
1 纹曲宁规模化生产的工艺流程
2 纹曲宁规模化生产的关键调控技术
纹曲宁规模化生产的工艺流程包括以下 6 个方
面 ( 图 1) 。 211 无菌控制
111 菌种准备 在规模化生产前 , 必须确保设备 、
罐体 、
管道等
将枯草芽孢杆菌原种 B - 916 ( 江苏省农业科学 外围环境彻底灭菌 。必要时 ,在蒸气灭菌的基础上 ,
院植物保护研究所提供) 转接试管斜面 ,3~5 d 后转 再进行化学灭菌 。这是保证菌种活力 、 纯度和浓度
接摇瓶 ,在摇床上振荡培养 ( 28 ℃,48 h) 。下摇床检 的基础 。
查无杂菌后供车间使用 。 212 温度控制
112 一级种子罐培养 确保一级种子罐 、二级种子罐和发酵罐的工作
一级种子罐灭菌 ( 121 ℃,30 min ) 后降温至 30 温度 28~32 ℃。这个温度稍低于一般抗生素的发
℃左右 ,接入摇瓶菌种 ,于 28~30 ℃条件下培养 18 酵温度 ( 如井冈霉素为 40 ℃左右 ) 。实验室和工业
~24 h 。 化生产的试验结果都表明 : 高于或低于此温度 ,菌种
的长势就差 ,活力减弱 ,产孢量也少 。
213 通风量控制
由于 B - 916 是较好气的 , 所以在制种 、
发酵时
通气量要大 , 一般调控至 1 ∶ 1 即可 。如果通风量不
足 ,菌种的长势和产孢量就会受影响 。
214 气压控制
与常规微生物发酵的工作气压无明显差异 , 一
般调控至 0. 5 kg/ mm2 。
215 时间控制
在整个生产发酵流程中 , 有两个时期为控制的
关键时期 。一是二级种子罐的培养时间 。一般为
20 h 。时间太长 , 则菌种老化 , 生活力下降 , 产孢能
力也下降 ; 时间太短 , 则菌量可能不足 , 总菌量基数
偏低 。二是发酵罐中的培养时间 。一般为 18 ~ 24
h 。但由于培养液 、
气压或温度等方面的外界因素 ,
113 二级种子罐培养
发酵时间可能稍有差异 。在临近发酵结束时要随时
镜检一级种子罐中培养的菌种 , 若无杂菌且长
镜检 ,一旦发现大部分芽孢形成空孢时 ,即可停止发
势良好即可移入二级种子罐 ,于 25~30 ℃下培养 20
酵 ,准备放罐 。
h。
216 pH 值控制
114 发酵罐培养
有关的试验结果表明 ,拮抗菌 B - 916 的生长最
先将发酵培养基经搅拌池打浆后均匀抽至发酵
适 pH 值为 8~9. 5 。在一、
二级种子罐培养时 ,要调
罐 ( 玉米浆必须经高温溶化后抽入 ) , 定容 75 % , 经
节 pH 值达 8. 5 左右。转入发酵罐时 ,由于蛋白质分
灭菌 ( 121 ℃,30 min) 后降温至 30 ℃左右 ,移入二级
解 ,铵基游离 ,发酵液的 pH 值已稍增大 ,可不再调节
种子 ,于 28~32 ℃下培养 24~28 h 。此期间每 4 h
pH 值 。
镜检一次 。如有特殊情况 , 则必须随时观察 。特别
217 培养基控制
是临近发酵结束时 ,要随时观察芽孢数量 ,等到多数
培养基一定要经搅拌池打浆均匀抽入 。特别是
芽孢菌形成空孢时 , 即加入 0. 1 %苯甲酸钠作防腐
玉米浆必须经高温溶化后抽入 。否则就很容易吸水
— 58 — 江苏农业科学 2004 年第 6 期