Professional Documents
Culture Documents
BENSASSI Chaima
BENSASSI Chaima
:
امجلهورية اجلزائرية ادلميقراطية الشعبية
رقم التسلسل.......: وزارة التعلمي العايل والبحث العلمي
جامعة قاصدي مرابح ورقلـة
كليـ ــة الرياضيات وعلـ ــوم المـ ــادة
قسـ ـم الكيمياء
رسالة محضرة لنيل شهادة الدكتوراه ل.م.د
تخصص :كيمياء التحاليل الكيميوفيزيائية و فعالية العينات الجزيئية
رئيسا جامعة قاصدي مرباح ورڤـلة أستاذ التعليم العالي أ.د.دنـ ـ ـ ــدوقي حسيـ ـ ـ ــن
مناقشا جامعة عمار ثليجي األغواط أستاذ التعليم العالي أ.د.يوس ـ ـ ـ ــفي محم ـ ـ ـ ـ ــد
مناقشا جامعة قاصدي مرباح ورڤـلة أستاذ التعليم العالي أ.د.حج ـ ـ ـ ـ ــاج محم ـ ـ ـ ـ ــد
مشرفا جامعة قاصدي مرباح ورڤـلة أستاذ التعليم العالي أ.د.سعيـ ـ ـ ـ ــدي مختـ ـ ـ ــار
مساعدا مشرفا جامعة قاصدي مرباح ورڤـلة أستاذ محاض ـ ـ ـ ــر (أ) د.غيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــابة زينب
رئيسا جامعة قاصدي مرباح ورڤـلة أستاذ التعليم العالي أ.د.دنـ ـ ـ ــدوقي حسيـ ـ ـ ــن
مناقشا جامعة عمار ثليجي األغواط أستاذ التعليم العالي أ.د.يوس ـ ـ ـ ــفي محم ـ ـ ـ ـ ــد
مناقشا جامعة قاصدي مرباح ورڤـلة أستاذ التعليم العالي أ.د.حج ـ ـ ـ ـ ــاج محم ـ ـ ـ ـ ــد
مشرفا جامعة قاصدي مرباح ورڤـلة أستاذ التعليم العالي أ.د.سعيـ ـ ـ ـ ــدي مختـ ـ ـ ــار
مساعدا مشرفا جامعة قاصدي مرباح ورڤـلة أستاذ محاض ـ ـ ـ ــر (أ) د.غيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــابة زينب
إلى أبي الذي لم يبخل علي يوماً بشيء و إلى أمي التي زودتني بالحنان و المحبة
أقول لهما :أنتما وهبتماني الحياة و األمل و النشأة على شغف االطالع و المعرفة
إخواني :محمد ياسيـ ـ ـ ـن ،طارق و محمد األحس ـ ـ ـن ،و أخواتي :دليلة ،سعاد و جوي ـ ـدة ،زوج أختي لمي ـ ـ ـن
إلى كل من أضاء بعلمه عقل غيره أو هدى بالجواب الصحيح حيرة سائليه
” كن عالما ..فإن لم تستطع فكن متعلما ،فإن لم تستطع فأحب العلماء ،فإن لم تستطع فال تبغضهم“
من بها
بعد رحلة بحث و جهد و اجتهاد تكللت بإنجاز هذه الرسالة ،نحمد اهلل عز و جل على نعمه التي َ
علينا فهو العلي القدي ـ ـر ،كما ال يسعنا إال أن نخص بأسمى عب ـ ـارات الشكر و التقدي ـ ـر لألست ـ ـاذ الدكت ـ ـور
المشرف "سعيدي مختار" و الدكتورة المساعدة "غيابة زينب" لما قدماه لي من جهد و نصح و معرفة
طيلة إنجاز هذه الرسالة.
كما أشكر كل من ساندني خالل مشواري التعليمي و المهني من أسـ ـ ـ ـاتذة وطلبة أخص بالذكر األست ـ ـاذ
الدكتور حجاج محمد و كل عم ـ ـال مخب ـ ـر تثمين و ترقي ـ ـة الم ـ ـوارد الصحراوية ( )VPRSبج ـ ـامعة قاص ـ ـدي
مرب ـ ـاح بورقلة ،األستاذ الدكت ـ ـور العانز تهامي و كل عمال مخبر ترقية و تكنولوجيا الموارد الصحراويـ ـ ـ ـة
( )VTRSبجامعة حمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة لخض ـ ـر بال ـ ـوادي ،الدكت ـ ـ ـور شـــــــــربي يوسف و كل عم ـ ـال المخب ـ ـر
المرك ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـزي بمستشفى محم ـ ـد بوضياف بورقلة ،السيدة جعفري و كل عمال المعه ـد الوطني الج ـ ـ ـزائري
للبحث الزراعي سيدي مهدي -تقرت ،كما أتوجـ ـ ـ ـ ـه بالشكر الخ ـ ـ ـ ـاص لكل من الدكت ـ ـ ـ ـ ـ ــورة دقمــــوش
مسعــــودة ،الدكتـ ــورة رحمــــاني زهــــــــور ،الدكتـ ــورة سمــــارة ونيســــــــة ،الدكتـ ــورة شربي رقيــــــــة و السيدة
علوي نبيهة ،و الصديقات حبي مريم ،سميحة بضياف و زينب قريشي.
أتوجه بالشكر الجزيل إلى األستاذ الدكتور دندوقي حسين على قبوله رئاسة لجنة المناقشة.
كما أشكر األستاذ الدكتور يوسفي محمد و األستاذ الدكتور حجاج محمد على قبولهما المشاركة في لجنة
المناقشة.
إلى من زرعوا التفـاؤل في دربنا و قدموا لنا المساعدات و التسهيالت و المعلومات ،و كانو نعم اإلخوة،
فـلهم منا كل الشكر ،و أخص منهم زميالي " بلفار أسيا و بالقيدوم مهدي" اللذان أسهما بشكل وفير في
تشجيعي أثناء إنجاز هذه الرسالة.
و قبل و بعد فالشكر هلل و هلل الحمد في الول و الخير
المل ــخص
الملخـص
إن الهدف الرئيسي لهذه الدراسـ ـ ـة هو معرفة و تحديـ ـ ـد الفعاليـة المضادة لألكسدة و المضـ ـ ـادة للبكتيريا
للمستخلصات الفينولية للج ـ ــزء الصالح لألكل لخمس ـ ـ ـة أصنـ ـ ـاف من التمـ ـ ـور) (Phoenix dactylifera L.هي
كالتالي :غــرس Ghو شت ـ ــاية Chtو دقلة بيضـاء DBو تنسي ــن Tnsو تنطبــوشت ،Tnbو لهذا الغرض أجرينا
اختبارات الكشف الكيميائي ألهم المركبات الفعالة ،حيث أظهرت النتائج وجود كل من الفينوالت ،الفالفونويدات،
الكومارينات ،الكربوهيدرات و الصابونينات ،في حين سجل غياب كل من القلويدات ،الفلوباتانين ـ ـ ــات،
الستيروي ـ ــدات ،التيربين ـ ــات و البروتين ـ ــات على مستوى األصن ـ ـ ـ ـ ـ ـاف الخمس ـ ـ ـ ـ ـة ،و انطـ ـ ــالقا من ه ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـذه النتائ ـ ـ ــج
و بالموازاة مع هدف الدراسة قمنـ ـ ــا باستخالص المركبـ ـ ــات الفينولي ـ ــة للحميـ ــة هذه األصناف باستعمـال تقنيتيـ ـ ـن
لالستخالص و باستخـ ـ ـدام أربعة أنظمة للحص ـ ـول على المستخلصات الخام (المستخلصات )Bو مستخلصـ ـ ـات
أسيت ـ ـ ـ ــات اإلثي ـ ـ ـ ــل (المستخلص ـ ـات ،)Fقمن ـ ـ ـا أوال بالتقدي ـ ـ ـر الكمـ ـ ـي للفينـ ـ ـ ـ ـوالت الكلي ـ ـ ـة و الفالفونويدات الكلية
لهذه المستخلصات حيث أظهرت النتائج احتـ ـ ـ ـواء مستخلص الـ ـ Acetone/ H2Oصن ـ ـف Chtأعلى محت ـ ـ ـ ـوى
للفينـ ـ ـ ـوالت الكليـ ـ ـ ـة و بمق ـ ـ ـ ـدار 305.550 mgكما أعطى نفس المستخلص لنفس الصنف أعلى محتوى
للفالفونويدات الكلية و بمقـ ـ ـ ـدار ،19.748 mgبعدها تم تقيي ـ ـ ـم الفعالي ـ ـة المض ـ ـادة لألكسـ ـ ـدة له ـذه المستخلصـ ـ ـات
و باستعمـ ـ ـال طريقتين ،طريقة كيميائيـ ـ ـ ـة (اختبار جذر ال ـ ،DPPH .اختبار الق ـ ـ ــدرة االرجاعية للحدي ــد و اختبــار
إرجـاع الموليب ـ ـ ـ ــدات ) )Mo (VIو طريقة كهروكيميائية .في الطريقة الكيميائية أظهرت النتائج في اختبار جـ ـ ـ ـذر
ال ـ DPPH .القدرة العالية لمستخلص الـ ـ Methanol / H2Oصنف Chtعلى كسح جذر ال ـ DPPH .مقارنة
بالمستخلص ـ ـات األخرى و بقيمة BIC50ق ـدرها ، 0.077 mg/mlكما أظهر مست ــخلص الـ ـ Acetone/ H2O
صنف Chtأفضل قيمة لل ـ AEACBقدرها 11.835 mMفي اختبار القدرة االرجاعية للحديد ،بينما في اختبار
موليبدات الفوسفات أظهر المستـ ـ ـ ـ ــخلص المائي لصنف Tnsأفضل قدرة مضادة لألكسدة و بقيمة TACB
مساوية لـ ـ .348.042 mMالطريقة الكهروكيميائية استعملنا الفلطامتري الحلقي لتحديد القدرة المضادة لألكسدة
،O•−حيث أظهرت النت ـ ـ ـ ـائج الق ـ ـ ـ ـ ـدرة العاليـ ـ ـة لمستخلص
للمستخلصات على كسح جذر أنيون فوق األكسي ـ ـ ـ ـد 2
الفعالية المضادة للبكتيريـا فقـ ـ ـد درسن ـا تأثيـ ـر المستخلص ـات Bو المستخلصت Fلنظام Methanol / H2Oعلى
نمـو ثالث ـ ـة س ـالالت بكتيريـ ـ ـ ـة هـ ـ ـ ـ ــيStaphylococcus aureus (S. aureus)،Escherichia coli (E. coli) :
و) . Pseudomonas aerugino (P. aeruginoحيث أظهرت النتائج ما يلي :لم تبد أي ساللة بكتيرية من
السالالت البكتيرية الثالثة حساسية اتجاه المستخلصات ،Bفي حين أبدت السالالت البكتيرية الثالثة حساسية
اتجاه المستخلصات .F
الكلمــــــــات المفتاحيــــــــة ، (Phoenix dactylifera L.) :واد ريغ ،الفينوالت الكلية ،الفالفونويدات الكلية ،الفعالية
المضادة لألكسدة ،الفعالية المضادة للبكتيريا.
Abstract
The main objective of this study is to find and determine the antioxidant and antibacterial
activities of the phenolic extracts of the edible part for five date cultivars (Phoenix dactylifera
L.) from Oued-Righ, namely, Ghars (Gh), Chtaya (Cht), Degla Beida (DB), Tinissine (Tns)
and Tntbouchte (Tnb), and for this purpose we conducted tests of chemical detection of the
most effective compounds. The results showed the presence of phenols, flavonoids,
comarines, carbohydrates and saponin, while the absence of alkaloids, flopanates, steroids,
terpenes and proteins were observed, at the level of the five cultivars. Based on these results
and in accordance with the objective of the study, we extracted the phenolic compounds of the
diet using two extraction techniques and using four systems to obtain the crude extracts (B
extracts) and ethyl acetate extracts (F extracts). First, we quantified the total phenols and
flavonoids of these extracts. The results showed that the Acetone / H2O extract of Cht
contained the highest total phenol contents 305.550mg while the Acetone / H2O extract of Cht
19.748 mg gave the highest total flavonoid contents. Were then effectiveness evaluation
antioxidant extracts whith using two methods, chemical method and electrochemical method,
In the chemical method the results showed at the DPPH radical test the high capacity of the
Methanol / H2O extract of Cht for DPPH radical scavenging whene compared with other
extracts whith BIC50 value 0.077 mg /ml. As well as, Acetone/H2O extract from Cht showed
the best (AEACB) value which was 11.835 mM for ferric reducing power test. While, in the
Molybdate Phosphate Test, the water extract of Tns showed the best antioxidant activity with
TACB value 348.042 mM. In the electrochemical method, we used Cyclic voltammetric for
determine the antioxidant capacity of the extracts on the superoxide anion radical O•−
2 . The
results showed the high capacity of Methanol / H2O extract of Cht in superoxide anion radical
scavigning O2•− with ICB50 value (0.006 mg/ml). As for antibacterial activity we studied the
effect of B extracts and F extracts on the growth of three bacterial strains: Escherichia coli,
Staphylococcus aureus and Pseudomonas aerugino. The results showed the following: None
of the three bacterial strains showed any sensitivity to the B extracts, while the three bacterial
strains were sensitive to the F extracts.
Keywords: (Phoenix dactylifera L.), Oued-Righ, total phenols, total flavonoids, antioxidant
properties, antibacterial properties.
iv | 2018
المل ــخص
Résumé
L'objectif principal de cette étude est de trouver et de déterminer les activités
antioxydantes et antibactériennes des extraits phénoliques de la partie comestible pour cinq
cultivars de dattes (Phoenix dactylifera L.) d'Oued-Righ, à savoir Ghars (Gh), Chtaya (Cht),
Degla Beïda (DB), Tinissine (Tns) et Tntbouchte (Tnb), et à cet effet nous avons effectué des
tests de détection chimique des composés les plus efficaces. Les résultats ont montré la
présence de phénols, de flavonoïdes, de comarines, de glucides et de saponine, tandis que
l'absence d'alcaloïdes, de flopanates, de stéroïdes, de terpènes et de protéines a été observée
au niveau des cinq cultivars. Sur la base de ces résultats et en parallèle de l'objectif de l'étude,
nous avons extrait les composés phénoliques en utilisant deux techniques d'extraction avec
quatre systèmes pour obtenir les extraits bruts (extraits B) et les extraits d'acétate d'éthyle
(extraits F). Tout d'abord, nous avons quantifié les phénols totaux et les flavonoïdes de ces
extraits. Les résultats ont montré que l'extrait d'acétone / H2O de Cht contenait le contenu
phénolique total le plus élevé 305.550 mg tandis que l'extrait d'acétone / H2O de Cht 19.748
mg donnait le contenu flavonoïde total le plus élevé. En suite on a evalué l'efficacité
antioxydante par deux méthodes: une méthode chimique et une méthode électrochimique.
Pour la méthode chimique, les résultats ont montré au test de radicaux DPPH la haute capacité
de l'extrait de méthanol / H2O de Cht pour le radicaux de DPPH par rapport à d'autres extraits
avec une valeur BIC50 de 0.077 mg/ml. En plus, l'extrait d'acétone / H2O de Cht a montré la
meilleure valeur (AEACB) qui était de 11.835 mM pour le test de puissance réducteur
ferrique. Alors que, dans le test de phosphate de molybdate, l'extrait d'eau de Tns présentait la
meilleure activité antioxydante avec une valeur de TACB de 348.042 mM. Pour la méthode
électrochimique, nous avons utilisé la voltamétrie cyclique afin de déterminer la capacité
antioxydante des extraits par l’inhibtion de radical anion superoxyde O•−
2 . Les résultats ont
montré la grande capacité de l'extrait de méthanol / H2O de Cht avec une valeur ICB50 (0,006
mg/ml). En ce qui concerne l'activité antibactérienne, nous avons étudié l'effet des extraits B
et des extraits F sur la croissance de trois souches bactériennes: Escherichia coli,
Staphylococcus aureus et Pseudomonas aerugino. Les résultats ont montré ce qui suit: Aucune
des trois souches bactériennes n'a montré de sensibilité aux extraits B, alors que les trois
souches bactériennes étaient sensibles aux extraits F.
Mots clés: (Phoenix dactylifera L.), Oued-Righ, phénols totaux, flavonoïdes totaux,
propriétés antioxydantes, propriétés antibactériennes.
v | 2018
الفهـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــرس
الصفحة الفهـــــــــــــرس
i اإله ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـداء
ii شكر و تقدي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــر
iii الملخـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــص
vi الفهـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرس
xi قائمة األشك ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــال
xiv قائمة المخططـ ـ ـ ـات
xv قائمة الج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــداول
xvii قائمة الرمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــوز
1 المقدم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة
4 مسـح ببلي ـ ـ ـ ــوغ ـ ــرافي
البـــــــــــاب الول -الدراســــــــــة النظــــــــــــرية
الفصـــــــل الول
9 1 - Iمقدم ـ ــة تاريخي ـ ــة
9 2 - Iالتصنيــف النب ـ ـاتي لنخيــل التـ ـم ــر( ) Phoenix dactylefira L.
10 3 - Iمورفـولـوجي ـ ـ ــا نخي ـ ـ ـ ـ ـ ــل التم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــر
14 4 - Iاألط ـوار و الم ارح ــل التي تمر بــها ثمــار نخيــل التم ـ ـ ــر
16 5 - Iدور اإلانزيـ ــمات فــي نضــج ثمــار نخي ــل التم ـ ـ ــر
17 6 - Iالتركيب الكيميائي لثمار نخيل التمر
18 7 - Iاستعماالت نخيل التمر في الطب و التطبيب التقليدي
الفصـــــــل الثـــــــــــاني
20 1 - IIاإلجه ـ ـ ـ ــاد التأكس ـ ـ ـ ـ ـ ـدي
20 1- 1 - IIما هـ ـ ـ ـ ـ ـو اإلجه ـ ـ ـ ــاد التأكس ـ ـ ـ ـ ـ ـدي؟ و ما عالقتـ ــه باألمـ ـ ـراض؟
20 2- 1 - IIالجزيئات التي تسبب اإلجهاد التأكسدي
20 1 - 2- 1 - IIالج ـ ـ ـ ـ ــذور الحـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرة
23 2 - IIمض ـ ـ ـ ـ ـادات األكس ـ ـ ـ ـ ـدة
23 1- 2 - IIمدخ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــل
2 - 2- 4- 2- IIفولتاموغرام المحاليل المعيارية( تأثيـ ــر المحاليـ ـ ــل المعي ـ ـ ــارية على النظ ـ ـ ــام
117
)(O2 /O•−
) 2
39 صورة موضحة لفحص مجهري لل ـ Esherichia coli ): (1 – III الشكل
صورة موضحة لفحص مجهري للمكــورات العنقوديـة الذهبيـة ): (2 – III الشكل
40
Staphylococcus aureusـ
صورة مجهرية لنمو مستعمرات الزائفة الزنجارية Pseudomonas ): (3 – III الشكل
41 aeruginosa
:aتحت إضاءة عادية :b ،تحت إضاءة األشعة فوق البنفسجية
42 صورة موضحة لرسم تخطيطي لل ـ Salmonilla ): (4 – III الشكل
الباب الثاني
الفصل األول
50 الموقع الجغرافي لألراضي الرطبة الرئيسية في وادي ريـ ـ ـ ـ ـ ــغ ): (1 – I الشكل
الفصل الثاني
85 المنحنى المعياري لالمتصاصية بداللة تركي ـ ـ ـ ـز حمض الغالي ـ ـ ــك Gallic ): (1 – II الشكل
acid
87 مقارنة بين كمية TPCBفي أصناف التمر المدروسة ): (2 – II الشكل
88 مقارنة بين كمية TPCFفي أصناف التمر المدروسة ): (3 – II الشكل
89 المنحنى المعياري لالمتصاصية بداللة تركيز الكرسيتين Quercetin ): (4 – II الشكل
91 مقارنة بين كمية TFCBفي أصناف التمر المدروسة ): (5 – II الشكل
92 مقارنة بين كمية TFCFفي أصناف التمر المدروسة ): (6 – II الشكل
لألصناف الخمسة ومقارنتها مع الـ ـ B أثر القوة االختزالية للمستخلصات ): (7 – II الشكل
94
BHAو ال ـ ـ BHTفي اختبار القدرة االرجاعية للحديد
أثر القوة االختزالية للمستخلصات Fلألصناف الخمسة ومقارنتها مع الـ ـ ): (8 – II الشكل
95
BHAو ال ـ ـ BHTفي اختبار القدرة االرجاعية للحديد
97 مقارنة بين قيم AEACBألصناف التمر المدروسة ): (9 – II الشكل
98 مقارنة بين قيم AEACFألصناف التمر المدروسة ): (10 – II الشكل
.
منحنيات بيانية توضح نسب تثبيط جذر ال ـ ـ ـ DPPHإلى مختلف ): (11 – II الشكل
100
تراكيز المستخلصات ،Bالـ ـ BHAو ال ـ ـ BHT
.
منحنيات بيانية توضح نسب تثبيط جذر ال ـ ـ ـ DPPHإلى مختلف ): (12 – II الشكل
101
تراكيز المستخلصات ،Fالـ ـ BHAو ال ـ ـ BHT
103 مقارنة بين قيم BIC50ألصناف التمر المدروسة ): (13 – II الشكل
104 مقارنة بين قيم FIC50ألصناف التمر المدروسة ): (14 – II الشكل
أثر القوة المضادة لألكسدة للمستخلصات Bألصناف التمر المدروسة ): (15 – II الشكل
106
في اختبار إرج ـ ـ ــاع الموليب ـ ـ ــدات
أثر القوة المضادة لألكسدة للمستخلصات Fألصناف التمر المدروسة ): (16 – II الشكل
107
في اختبار إرج ـ ـ ــاع الموليب ـ ـ ــدات
109 مقارنة بين قيم TACBألصناف التمر المدروسة ): (17 – II الشكل
110 مقارنة بين قيم TACFألصناف التمر المدروسة ): (18 – II الشكل
منحنيات االرتباط للمستخلصات Bبين: (: )19 - II الشكل
112 TPCBمعTACB :d ،BIC50 :c ،AEACB :b ،TFCB : a :
TFCBمعTACB :d' ،BIC50 :c' ،AEACB :b' :
األسكوربيك AscA
صورة موضحة للفعالي ـ ـ ـة التثبيطي ـ ـ ـة للمستخلص ـ ـ ـات Bتجـ ـ ـ ـاه بكتيري ـ ـ ـا ): (2 – III الشكل
131
الـ ـ S. aureus
صورة موضحة للفعالي ـ ـ ـة التثبيطي ـ ـ ـة للمستخلص ـ ـ ـات Bتج ـ ـ ـاه بكتيريـ ـ ـا ): (3 – III الشكل
132
ال ـ P. aerugino
صورة موضحة للفعالية التثبيطية للمستخلصات Fلألصناف المستعملة ): (4 – III الشكل
135
بتركيز 500 mg/mlتجاه السالالت البكتيرية المستخدمة في الدراسة
(المستخلصات ))(F
التوالي
102 قيم BIC50و FIC50للمستخلصات Bو المستخلصات Fعلى التوالي (: )6 - II الجدول
108 قيم TACBو TACFللمستخلصات Bو المستخلصات Fعلى التوالي (: )7 - II الجدول
121 قيم ICB50و ICF50للمستخلصات Bو المستخلصات Fعلى التوالي (: )8 - II الجدول
الفصل الثالث
125 المواد و المحاليل الكيميائية المستعملة في الدراسة. (: )1 - III الجدول
126 السـ ـ ـ ـ ــالالت البكتيرية المستخدم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة في الد ارسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة ): (2 – III الجــدول
133 معدالت أقطار التثبيط للمستخلصات Bتجاه السـ ـ ـ ـ ــالالت البكتيرية ): (3 – III الجــدول
135 معدالت أقطار التثبيط للمستخلصات Fتجاه السـ ـ ـ ـ ــالالت البكتيرية ): (4 – III الجــدول
138 قيم MCIللمستخلصات Fمع قطر التثبيط تجاه السـ ـ ـ ـ ــالالت البكتيرية ): (5 – III الج ـدول
المستخدم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة في الد ارسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة
Ghars : غرس : Gh
Chtaya : شتاية : Cht
Degla Beida : دقلة بيضاء : DB
Tinissine : تنسين : Tns
Tantboucht : تنطبوشت : Tnb
Extraction yield of B extracts : B م ـ ــردود االستخالص للمستخلصات : RB
Extraction yield of F extracts : F م ـ ــردود االستخالص للمستخلصات : RF
Extraction yield of lipids : مردود استخالص اللبي ـ ـ ـ ـ ـدات : RL
Total phenolic content : المركبات الفينولية الكلية : TPC
Total flavonoid content : المركبات الفالفونويدية الكلية : TFC
Ascorbic acid : حمض األسكوربيك : AscA
Gallic acid : حمض الغاليك : GA
Butylated hydroxyanisole : بيوتيلتيد هيدروكسي األنيسول : BHA
Butylated hydroxytoluene : بيوتيلتيد هيدروكسي تولوين : BHT
Ascorbic acid equivalent antioxidant الفعالية المضادة لألكسدة المكافئة لحمض
: : AEAC
capacity األسكوربيك
Ascorbic acid equivalent antioxidant الفعالية المضادة لألكسدة المكافئة لحمض
: : AEACB
capacity for B extracts B األسكوربيك للمستخلصات
Ascorbic acid equivalent antioxidant الفعالية المضادة لألكسدة المكافئة لحمض
: : AEACF
capacity for F extracts F األسكوربيك للمستخلصات
The concentration (mg/ml) of the extract ( الذي يثبطmg/ml) تركيز المستخلص بال ـ
that inhibited the formation of radical by : : IC50
50% نصف كمية الجذر المتشكلة
The concentration (mg/ml) of the B ( الذيmg/ml) بال ـB تركيز المستخلصات
extracts that inhibited the formation of : : BIC50
radical by 50% المتشكلةDPPH يثبط نصف كمية جذر ال ـ
The concentration (mg/ml) of the F ( الذيmg/ml) بال ـF تركيز المستخلصات
extracts that inhibited the formation of : : FIC50
radical by 50% المتشكلةDPPH يثبط نصف كمية جذر ال ـ
Total antioxidant capacity : مجموع القدرة المضادة لألكسدة : TAC
Total antioxidant capacity for B extracts : B مجموع القدرة المضادة لألكسدة للمستخلصات : TACB
Total antioxidant capacity for F extracts : F مجموع القدرة المضادة لألكسدة للمستخلصات : TACF
The concentration of the B extracts that 50% الالزم لتثبيـ ــطB تركيـ ــز المستخلصات
inhibited 50% of the Primary quantity of ICB50
𝐎•− اإلبتدائـيO•−
2 من الكمية الج ـ ــذر الحر
𝟐 free radical
The concentration of the F extracts that 50% الالزم لتثبيـ ــطF تركيـ ــز المستخلصات
inhibited 50% of the Primary quantity of ICF50
𝐎•− اإلبتدائـيO•−
2 من الكمية الج ـ ــذر الحر
𝟐 free radical
xvii | 2018
قـ ـ ـ ــائمة الرمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــوز
xviii | 2018
المقدم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة
المقدمــــــــــــــــــــــــة
المقدمــــــــــة
يزداد يوما بعد يوم اهتمام العديد من الباحثين بدور الجذور الحرة حيث يتم توليد هذه األخيرة بشكل
مستمر في جسم اإلنسان بسبب التمثيل الغذائي ( األيض أو االستقالب) وكذا العدوى ،فاألكسجين هو
عنصر مهم و أساسي للكائنات الحية الهوائية ،لكن من ناحية أخرى له تأثير سلبي يرتبط ارتباطا مباش ار
بتشكيل الجذور الحرة [ ،]1و التي تسبب ضر ار تأكسديا في الخاليا و الجزيئات البيولوجية بما في ذلك تلك
التي لها أهمية للحياة ،DNA ،RNAاالنزيمات البروتينية و الدهون غير المشبعة [ ،]3 ,2مما يؤدي إلى
العديد من االضطرابات و التشوهات الفيزيولوجية و المرضية كالتأثير على األعصاب و القلب و األوعية
الدموية و مسبب للسرطان ،و بموازاة ذلك يرتكز االهتمام على دراسة مضادات األكسدة ألنها النظام الذي
يحمي العضوية من أضرار الجذور الحرة [.]5 ,4 ,1
و من هنا بدأ البحث عن المصادر الطبيعية النباتية لمضادات األكسدة و تقييم تأثيرها ،ففي السنوات
األخيرة ،تم إيالء اهتمام متزايد لدور النظام الغذائي في صحة اإلنسان .حيث أظهرت الدراسات الوبائية
أن استهالك الفواكه و الخضار له فوائد صحية تتمثل في الوقاية من األمراض المزمنة -تصلب الشرايين
و السرطان ،أمراض القلب واألوعية الدموية ،إعتام عدسة العين ،و مرض السكري ،وأمراض األعصاب:
باركنسون والزهايمر -و التقليل من مخاطر هذه األمراض وتحسين صحة اإلنسان العامة [.]6
هناك مخاطر ال تقل ضر ار عن األكسدة في التأثير على صحة اإلنسان و هي مخاطر الميكروبات،
ففي العقود الثالثة األخيرة ظهرت مشاكل كبيرة في مجال محاربة الميكروبات ،حيث أظهرت العديد من
السالالت البكتيرية مقاومة متزايدة لألدوية بمعدل ينذر بالخطر ،لذا وجب تطوير هذه األدوية المضادة
للبكتيريا [ ،]8 ,7و هنا لجأ الباحثون إلى الطب البديل ،فقد أشار الكثير من الباحثين في مجال المضادات
الطبيعية لألحياء المجهرية (البكتيريا ،الفطريات ،الفيروسات) إلى استخدام المستخلصات النباتية ألسباب
عديدة منها وفرتها ،سهولة الحصول عليها ،قلة كلفتها و األهم من هذا كله أنها أكثر أمانا لقلة تأثيراتها
الجانبية [.]12-9
تمتلك الجزائر ثروة هائلة من نخيل التمر ،تتوزع معظمها في المناطق الصحراوية على غرار الواحات
و بالتحديد منطقة واد ريغ الغنية بالثروات الطبيعية من بينها نخيل التمر ،فهي تحوي أصناف متعددة من
التمور ،لكن لعدم وجود دراسات متعلقة بتقييم نشاطها المضاد لألكسدة أو المضاد للبكتيريا ،و بناءا على
هذه المعطيات حددنا هدف هذه األطروحة و المتمثل في تقدير الفعالية المضادة لألكسدة و المضادة
للبكتيريا للمستخلصات الفينولية لخمس أصناف من التمور من منطقة واد ريغ و هي كالتالي :غ ـ ـ ــرس Gh
و شت ـ ـ ـ ــاية Chtو دقلة بيض ـ ـ ــاء DBو تنسي ـ ـ ـ ــن Tnsو تنطبـ ـ ـ ــوشت Tnbبمختلف الطرق ،حيث قس ــمت
هـ ــذه األطـ ــروحة إلى مقدمـ ــة عـ ـ ــامة و بـ ــابيـ ـ ــن لتنهى بخـ ـ ــاتمة عـ ــامة.
حيث يعالج الباب األول الدراس ـ ـة النظريـ ـ ـة و التي تلخص تاريخ التمور ،تصنيفها ،تركيبها الكيميـ ـ ـ ـائي
و استعماالتها في التطبيب التقليدي ،و اإلجهـ ـ ـاد التأكسـ ـ ـدي ،الجزيئـ ـ ـات التي تسببه ،مض ـ ـادات األكس ـ ـدة
و تصنيفها ،و البكتيريا ،تاريخها ،أنواعها و طرق دراسة حساسيتها ،يشمل هذا الباب ثالثة فصول:
األول نتناول فيه عموميات حول نخيل التمر ، Phoenix dactylifera L.بينما الفصل الثاني فسنتطرق
فيه إلى اإلجهاد التأكسدي و مضادات األكسدة ،أما الثالث فنعرض فيه البكتيريا و المضادات الحيوية.
بينما يعالج الباب الثاني الجانب التجريبي و الذي يشمل بدوره ثالثة فصول:
األول يقدم تقدير كمية الرطوبة ،وزن النوى ،كمية المادة العضوية و غير العضوية و الكشف الكيميائي
للمواد الفعالة للتمر و الذي يقسم إلى جزئين جزء طرق و مواد الدراسة و جزء النتائج و المناقشة ،الفصل
الثاني و الذي ندرس فيه الفعالية المضادة لألكسدة للمستخلصات الفينولية لفاكهة التمر بطريقتين كيميائية
و كهروكيميائية و ينقسم بدوره إلى جزئين جزء طرق و مواد الدراسة و جزء النتائج و المناقشة ،أما
الفصل الثالث فسندرس فيه الفعالية المضادة للبكتيريا للمستخلصات الفينولية لفاكهة التمر تجاه ثالث
سالالت بكتيرية Staphylococcus aureus ،Escherichia coli :و Pseudomonas aeruginoو الذي
ينقسم إلى جزئين جزء طرق و مواد الدراسة و جزء النتائج و المناقشة.
مســـــــــــــــح ببليـوغـــــــــــــرافي
نخلة التمر سيدة الشجر عرفت زراعتها في عصور ما قبل التاريخ وورد ذكرها في بعض النصوص
األثرية أنها الشجرة التي يناطح سعفها السماء ،و ما يثبت قدم زراعة النخيل في المنطقة العربية هو
ظهور كتابات و نقوش في واد الرافدين و النيل تعود إلى عدة آالف من السنين 4000سنة قبل ميالد
عيسى عليه السالم ،فهي شجرة مقدسة عند قدماء السوماريين و البابليين و األشوريين و الفراعنة ،و لعل
أهم األدلة على قدسية شجرة نخلة التمر ورود ذكرها في الكتب السماوية ،فقد قدر اإلسالم نخلة التمر،
حيث ذكرت في العديد من اآليات في القرآن الكريم و األحاديث النبوية [.]13
تزرع أشج ـ ـ ـار نخي ـ ـ ـل التم ـ ـ ـر بصورة واس ـ ـ ـعة في شم ـ ـ ـال إفريقي ـ ـ ـا و جن ـ ـ ـوب شرق أسي ـ ـ ـا و الوالي ـ ـ ـات
المتحدة األمريكية و أستراليا ،فهي تغطي حوالي 800 000هكتار ،و هي مهمة بشك ـ ـ ـ ـل مباشر أو غير
مباشر لما يقارب 100مليون نسمة [ ،]14إذ تعتبر مصدر غذاء لعدد كبير من السكان الذين يقطنون
المناطق النائية ،و توفر فرص عمل كثيرة لسكان هذه المناطق [ ،]15فالتمر مفيد في التغذية البشرية لغناه
بالكربوهيدرات (السكريات مثل سكر الفواكه ،الجلوكوز ،السكروز) و األلياف الغذائية و األمالح والمعادن
(الكالسيوم ،المغنيسيوم ،الفوسفور ،البوتاسيوم ،الحديد ،الزنك ،النحاس ،المنغنيز ،السيلينيوم) والفيتامينات
( ،)C ،B6 ،B5 ،B3 ،B2 ،B1 ،B ،A1 ، Aواألحماض الدهنية واألحماض األمينية والبروتينات [ ،]17 ,16كما
تعتبر فاكهة التمر مصد ار جيدا لمض ـ ـادات األكسـ ـ ـدة مثلها مثل الفواكه األخرى الحتوائها على الفين ـ ـ ـوالت،
و قد أثبتت هذه الخاصية في العدي ـ ـ ـد من الدراسـ ـ ـات منها دراسة على أصناف من التمور العمانيـ ـ ـة [،]18
و دراسة أخرى على صنفين من التمور اإليرانية [ ،]19أما في الجزائر فقد أثبت أيضا توفر فاكهة نخيل
و دراسة []20
التمر على مواد مضادة لألكسدة منها دراسة على خمسة أصناف من تمور مدينة ورقلة
لعشرة أصناف من تمور منطقة طولقة بمدينة بسكرة [.]21
باإلضافة للفاعلية المضادة لألكسدة أثبتت في العديد من الدراسات فعالية التمور المضادة للبكتيريا
،دراسة ألوراق []22
منها دراسة لثالث أصناف ( أوراق ،ثمار ،بذور و لحاء) من نخيل التمر السعودية
نخيل التمر (جريد) ضد العديد من السالالت البكتيرية (الكوفة) العراق[ ،]8 ,7دراسة لصنف واحد من
و دراسة []24
التمور المصرية على خمسة سالالت بكتيرية [ ،]23و دراسة لصنف واحد من التمور الهندية
أخرى ألربعة أصناف من التمور الماليزية [.]25
منطقـ ـ ـ ـة واد ريـ ـ ـ ـ ـغ من أهم المن ـ ـ ـ ـاطق التي تزرع فيها أشج ـ ـ ـ ـ ـار نخيل التمر في الج ـ ـ ـ ـ ـزائر ،لكن
فاكهة هذه األشج ـ ـ ـ ـار لم يتم تثمينها خاص ـ ـ ـ ـة في مج ـ ـ ـ ـ ـال الفعالي ـ ـ ـ ـة المض ـ ـ ـ ـادة لألكس ـ ـ ـ ـدة أو المض ـ ـ ـ ـادة
للبكتيري ـ ـ ـ ـ ـا لذا وقـ ـ ـ ـ ـ ـع االختي ـ ـ ـ ـار عليها إلج ـ ـ ـ ـراء ه ـ ـ ـ ـذه الدراسـ ـ ـة ،لنبي ـ ـ ـ ـن أهمي ـة ه ـذه األشج ـ ـار و نس ـاعد
في الحث على زراعـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة أصن ـ ـ ـ ـاف لها أهمي ـ ـ ـ ـة غذائيـ ـ ـ ـ ـ ـة و صحية على حياة اإلنس ـ ـ ـ ـان وفق أسس
علمي ـ ـ ـ ـة ،مع العل ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم أن األصن ـ ـ ـ ـ ـاف التي ت ـ ـ ـ ـ ـم تحدي ـ ـ ـ ـ ـدها له ـ ـ ـ ـ ـذه الدراس ـ ـ ـ ـة أصن ـ ـ ـ ـ ـاف نقية (غي ـ ـ ـ ـ ـر
هجين ـ ـ ـ ـ ـة) مأخ ـ ـ ـ ـ ـوذة من المعهـ ـ ـ ـ ـد الوطني الج ـ ـ ـ ـزائري للبحث الزراع ـ ـ ـ ـ ـي سي ـ ـ ـ ـ ـدي مهدي – تق ـرت Institut
مقدمـــــة 1-I
حظيت شجرة نخيل التمر بمكانة خاصة في جميع الديانات السماوية ،يقول أبو حاتم سهل بن محمد
السجستاني المتوفي سنة 255ه في كتابه الذي سماه كتاب النخلة [ ،]26أن شجرة نخـ ــلة التمر هي سيدة
طيِّ َب ٍة
ش َج َرٍة َ ض َر َب اللَّ ُه َمثَاال َكلِ َم اة َ
طيِّ َب اة َك َ فقد ذكرها اهلل في كتابه القرآن الكريم ﴿ أََل ْم تََر َك ْي َ
ف َ
[]27 ,26
الشجر
اء) ﴾(24سورة إبراهيم اآلية24: السم ِ ِ َصلُ َها ثَا ِب ٌ
ت َوفَ ْر ُع َها في َّ َ أ ْ
إن االسم العلمي لنخيل التمر هو Phoenix dactylefira L.و الذي يفترض أنه مشتق من االسم
الفينيقي ) (phoenixطائر الفينيق و ) ( dactyliferaمشتقة من الكلمة اليونانية ) (daktulosبمعنى
،و يعتب ـ ـ ـ ـ ـر نخيل التم ـ ـ ـر من النباتات ذات الفلق ـ ـ ـ ـ ـة []15
أصبع وهذا ما يوضح ـ ـ ـ ـه شكل الفاكهة (التمر)
و []28
الواح ـ ـ ـدة [ ،]28 ,20ثنائية المسكن أي أن هناك نخلة تحمل أزها ار ذكرية تسمى النخلة الذكر (الذكار)
،و التصنيف النباتي لنخي ـ ـ ـل التمـ ـ ـ ـ ـر موضح في []28
نخلة أخرى تحمل أزها ار أنثوية و هي المثمرة
الجدول (.)1 – I
[]27 ,15
الجدول ( :)1 – Iالتصنيف النباتي لنخيل التمر Phoenix dactylefira L.
Phoenix
Phoenix Coryphyoideae Palmaceae Phoeniceae Palmea Spadiciflora Plantae
dactylifera L.
مع العلم أن جنس النخيل Phoenixيشمل 1503نوع [ ،]29و الجدول ( )2 - Iيوضح إثني عشر
نوعا من جنس ، Phoenixجنبا إلى جنب مع التوزيع الجغرافي [.]15
جزر الكناري وجزر الرأس األخضر النخيل الكنارية P. canariensis chabeaud.
إفريقيا المدارية (السنغال واوغندا) واليمن (آسيا) النخيل القزم P. reclinata Jacq.
بنغالديش ،تانشريم ،اندمان ،نيكوبان و تايالندا نخيل جوليانا P. paludosa Roxb.
ثانيا -الجــــــــــــــــــذع
وهو عبارة عن ساق طويل قاتم غليظ أسطواني الشكل غير متفرع خشن السطح مكسي باألعقاب
أو الكرب (قواعد السعف) وينتهي بتاج كثيف السعف كبير الحجم ،يبلغ متوسط ارتفاع الجذع في النخلة
البالغة حوالي ( ، )15 mوقد يصل االرتفاع إلى ( )25 mفي بعض المناطق.
وتختلف جذوع النخيل باختالف األصناف حيث تتراوح من ( 40 cmإلى ، )90 cmو يكون القطر متساويا
في الشجرة الواحدة ،و ينحصر نمو النخلة فـي البرعمة الطرفية (القمية) الضخمة الموجودة في قمة الجذع
(Phyllorhore) Apical Budو الذي يعرف بالجمارة و هي المسؤولة عن نمو الشجرة طوليا و نمو
السعف .أما النمو الطولي للنخلة فيتراوح من ( 30 cmإلى )90 cmسنتيمت ار سنويا[.]27
ثالثــــــا -الجمـــــــــــــــارة
وهي أهم جزء في النخلة فبين لفائفها يوجد البرعم الطرفي الوحيد الضخم في قلب رأس النخلة،
وحول البرعم تلتف األوراق الحديثة في أعمارها وأطوالها وألوانها المختلفة .وهي محمية من العوامل
الخارجية بالليف و صفائح الكرناف .و خاليا الجمارة المرستيمية ال تكبر و ال تنشط إال في الليل بعد
انغالق الثغور و توقف النتح [.]29
رابـعـــا -الســـــــــــــــــعف
السعف مفردها السعفة هي عبارة عن ورقة مركبة ريشية كبيرة يتفاوت طولها في الشجرة البالغة
( )2.20 mإلى ( ، )6 mومعدل طول السعفة نحو ( .)4 mمن المالحظ أن السعف يترتب على أرس
النخلة بصفوف أرسية تميل يمينا أو يسا ار يبلغ عددها ( )13صفا ،بالذكر أن ترتيب صفوف السعف على
جذع النخلة يأخذ ثالثة اتجاهات حسب انحدار الخطوط المعينة في:
الرسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـي
االتجاه أو الخط أ
االتجاه أو الخط إلى اليمين
االتجاه أو الخط إلى اليس ـ ـار
و يالحظ أن اتجاهات ترتيب السعف تختلف باختالف الصنف .تتكون السعفة الواحدة من األجزاء التالية
كما هي موضحة:
تحمل األزهار على أعواد رفيعة جزؤها السفلي غير مستقيم بل متعرج و العلوي مستقيم و تسمى
هذه األعواد (الشماريخ) و هذه الشماريخ تحمل على نهاية ساق طويل يسمى العرجون[ ،]29عندما تكون
شماريخه في بداية نموها منتصبة ولكن عندما يتقوس الساق بفضل استمرار نمو الثمار وزيادة ثقلها على
الشماريخ يعرف عندئذ بالعنق [ .]27و يحمل العرجون الواحد من 20إلى 100شمراخا و تكون األزهار
المذكرة متالصقة و قريبة من بعضها البعض أما األزهار المؤنثة فتكون بعيدة عن بعضها البعض[.]29 ,15
النورة في نخلة التمر إما أن تكون من األزهار الذكرية وتنمو على شجرة يطلق عليها بالفحل
(الذكار) أو تتكون من األزهار األنثوية وتنمو على شجرة منفصلة تسمى باألنثى أي بعبارة أخرى فإن
نخلة التمر ثنائية المسكن إال أنه أحيانا وهي حالة نادرة تتواجد األزهار الذكرية واألنثوية على نفس النخلة
وتعرف هذه الحالة أحادية المسكن وفي حالة أخرى وأيضا نادرة تحتوي الزهرة في الطلعة الواحدة وفي
نخلة واحدة األعضاء الذكرية واألنثوية في آن واحد وتسمى باألزهار الخنثية [.]27
عادة تظهر النورة في النخلة في إباط السعف الكامل والذي انفرج خوصه في السنة األسبق وأصبح نشطا
في صيف تلك السنة .ويقدر عدد النورات من ثلث إلى ثلثي عدد السعف المتكون في السنة السابقة.
ويأخذ الطلع في ظهوره نفس ترتيب السعف وبشكل حلزوني و لولبي و متباعد عن قمة الشجرة باالتجاه
األسفل [.]27
الثمرة الناضجة في نخلة التمر هي عبارة عن ثمرة لبية أحادية البذور وهي من الثمار البسيطة
الطرية غير منتفخة الجدران ،يختلف شكلها باختالف األصناف .وهي على العموم بيضاوية الشكل
يتفاوت طولها من ( 20 mmإلى )110 mmو قطرها من ( 8 mmإلى .)30 mmتتركب ثمرة النخلة من
األجزاء التالية:
-1جدار الثمرة
ويتكون من ثالث مناطق هي:
الجـ ـ ـدار الخ ـ ـارجي :عبارة عن ج ـدار جـلدي رقيـق.
الج ـ ـدار الوس ـ ـ ـطي :يمـث ـ ـ ـ ـل لحـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم الثم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرة.
الج ـ ـدار الداخـ ـ ـ ـلي :القطمير وهو عب ـ ـارة عـ ـ ـن ج ـ ـدار غشـ ـ ـ ـائي رقي ـ ـ ـق يحي ـط بالب ـ ـذرة أو الن ـ ـ ـواة
مبـ ـ ـاشرة ،و يفصـل بينها و بي ـ ـن لحـ ـ ـ ـم الثمـ ـ ـ ـ ـرة.
-2الب ـ ـ ـذرة أو النـ ـ ـ ـ ـ ـواة
-3قمـ ـ ـ ـ ـع الثمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرة :وهو عبارة عن بقايا غالف الزهرة (الكأس و التويج) المتيبس الصلب الذي يربط
الثمرة بشمراخ العنق الثمري .وتجدر اإلشارة هنا بأن ثمرة نخلة التمر تختلف عن ثمرة جوز الهند (ثمرة
[]27
حسلية) حيث أن الجدار الخارجي جلدي والوسطي ليفي والداخلي صلب يحيط بالبذرة مباشرة
الشكل).(1 – I
قمع الثمرة
لحمة النـــــــــــــواة
الثمرة
الجدار الداخلي الجدار الخارجي
الشكل ) :(1 – Iصورة موضحة ألجزاء ثمرة نخيل التمر (صنف غرس) ملتقطة من قبلنا
السعفة
شمراخ مغلق
عرجون
الجمارة
الجذع الثمرة ( التمر)
ت حتوي الزهرة المؤنثة على ثالثة مبايض وال يظهر منها إال رؤوسها الثالث يتم تلقيح أحد هذه
المبايض و يترك اآلخران من دون تلقيح فيضمحالن ويتساقط غطاؤهما وهنا ينمو المبيض الملقح وبعد
هذه المرحلة تمر ثمرة التمر بخمس أطوار (مراحل) نمو أساسية كما هو موضح في الجدول (.)3 - I
تبدأ هذه المرحلة مباشرة بعد عملية اإلخصاب أو التلقيح وتستمر من أربع الي خمس أسابيع ،في هذه
المرحلة الثمار غير ناضجة و بشكل البازالء وتزن حوالي .]33-31[ 1g
تتطور الثمرة في هذه المرحلة من حيث الطول ،وتستمر هذه المرحلة من 9إلى 14أسبوعا ،تتميز الثمرة
في هذه المرحلة باللون األخضر كما أن نسبة الرطوبة تصل الي %80ونسبة السكر (غلوكوز وفركتوز)
إلى ،%50عادة ما يميز الطعم المر هذه المرحلة فتكون غير صالحة لألكل [.]34 ,31
في هذه المرحلة و اعتمادا على مجموعة متنوعة من الثمار يتغير لون هذه األخيرة من األخضر إلى
األصفر المخضر ،األصفر ،الوردي ،القرمزي أو األحمر بمعنى كل نوع من التمر يأخذ لونه الخاص
الذي يميزه على األنواع األخرى ،و تستمر هذه المرحلة مدة 6أسابيع ،و تعتبر الثمرة ناضجة من الناحية
الفيزيولوجية ،و يبلغ أقصى وزن و حجم لها في نهاية هذه المرحلة ،كما يالحظ زيادة سريعة في تركيز
السكريات و انخفاض في محتوى الماء (معدل الرطوبة ينخفض إلى .]32 ,31[ )% 50
-4مرحــلة الـرطــب
تستمر هذه المرحلة من أسبوعين إلى 4أسابيع و يبدو على الثمار النضج و تصبح لينة ،كما تبدأ
باكتساب اللون البني أو األسود بسبب فقدان نسبة من الرطوبة و بالتالي يقل الوزن و منه زيادة نسبة
السكريات و يصاحب ذلك زيادة في معدل تحويل السكروز الي سكريات بسيطة [.]15
-5مرحـــلة التمــــــر
هي المرحلة األخيرة من النضج ،و تظهر الثمار جافة أو شبه جافة وهذا على حسب كل صنف ،تحتوي
الثمار ما يقارب % 50من السكروز والسكريات المرجعة ،هذه المرحلة تختلف من صنف إلى آخر فال
تنضج في وقت واحد في معظم األصناف ،و نالحظ انكماش اللحم الداخلي [.]33 ,31
الجدول ( :)3 - Iصـ ــور م ارحـ ــل تطـ ــور ثمار النخيـ ــل لصنف الغرس
الثمار في مرحلة الثمار في مرحلة الثمار في مرحلة الثمار في مرحلة الثمار في مرحلة
التمر الرطب الخالل الكمري الحبابوك
اإلنزيمات التالية تلعب دو ار في عملية نضوج الفاكهة و التغييرات الفيزيولوجية التي تط أر على
الثمار و أن هذا الدور يختلف باختالف نوع التمر و كذا فترة اإللقاح [.]35
تتنوع اإلنزيمات الموجودة في ثمار نخيل التمر و التي تؤدي دو ار كبي ار في التأثير على عامل
الجودة والقوام ،ففي مرحلة الحبابوك يوجد اإلنزيم بصورة غير ذائبة ،و تزداد فعالية اإلنزيم كلما تقدمت
الثمار من مرحلة الحبابوك إلى مرحلة الخالل لتصل إلى 12.5وحدة في الثمرة عند نهاية مرحلة الخالل،
ثم تنخفض تدريجيا عند مرحلة الرطب لتصل إلى أقل قيمة لها عند مرحلة التمر[ .]37 ,36إن التغيرات في
فعالية إنزيم االنفرتيز تظهر خالل النمو ،فتراكم السكريات في نهاية مرحلة البسر وبداية الرطب تفسر
فعالية هذا اإلنزيم من أجل تحويل السكروز إلى سكريات أحادية [.]36
أما إنزيم السليوليز المعروف بنشاطه في إذابة الجدار الخلوي للخاليا ،فهو بهذا الفعل يساعد
على طراوة ونضج الثمار[ ،]37 ,36إذ ال تظهر أي فعالية لهاذا اإلنزيم حتى نهاية مرحلة الحبابوك ،و التي
تبدأ عندها فعالية هذا اإلنزيم و تزداد هذه الفعالية كلما تقدمت الثمار بالنضج إلى أن تبلغ أعلى مستوى
لها عند مرحلة الرطب [.]36
تبدأ فعالية هذا اإلنزيم عند األسبوع التاسع من التلقيح ومن ثم تبدأ باالرتفاع حتى تصل إلى
أقصى قيمة له في األسبوع الخامس عشر ،كما أن زيادة نشاط اإلنزيم عند دخول الثمرة في مرحلة النضج
( األسبوع الخامس والسادس عشر) له عالقة بدوره الفزيولوجي في زيادة ليونة الثمرة إذ أن هذا اإلنزيم
يعمـ ـ ـ ـل على تكسيـ ـ ـ ـر الروابط الكاليكوسيديـ ـ ـة Glycoside linkageفي األنسج ـ ـ ـة وتكوين عـ ـ ـدد من
البروتينـ ـ ـات [.]38 ,35
توجد عالقة توافق بين إنزيمي البولي كالكتورونيز و البكتين استيريز ،إذ يكون إنزيم البكتين
استيريز نشطًا في المراحل الخضراء إلزالة مجاميع الميثوكسيك الموجودة على سالسل المواد البكتينيـ ـ ـة
و التي تعيق عمل إنزيم البولي كالكتورونيز و الذي يكون مفقودا في هذه المرحلة .في حين أن فعالية كال
اإلنزيمين موجودة في مرحلة البسر ،أما في مرحلة الرطب فإن نشاط إنزيم البولي كالكتورونيز يصل إلى
أقصاه مع تسجيل تدني نشاط إنزيم البكتين استيريز في هذه المرحلة والتي تعد من مراحل النضج النهائية،
دور غير مباشر في طراوة ونضج التمور ،في حين أن إلنزيم
وعليه يمكن القول أن إلنزيم البكتين استريــز ًا
البولي كالكتورونيز دو ار مباش ار في ذلك [.]35
إن فعالية هذا اإلنزيم تختلف باختالف نوع مادة التفاعل من الفينوالت الموجودة في أنسجة الثمرة
وصورها السائدة ،فالتانينات في مرحله الخالل تبدأ في التحول من الصورة الذائبة إلى الصورة غير الذائبة
وبذلك يختفي الطعم القابض للثمار و يعتمد هذا التغير على صنف الثمار ،كما أن لهذا االنزيم عالقة
بتكوين اللون في الثمار في المراحل النهائية للنمو و بذلك يالحظ زيادة فعاليته في هذه المراحل [.]39 ,35
و البروتينات [ ،]42-40و إلى جانب القيمة الغذائية لفاكهة التمر فإنها غنية أيضا بالمركبات الفينولية ،والتي
لها نشاط مضاد لألكسدة [.]42
تحتوي ثمار نخيل التمر على العديد من الفيتامينات و المعادن و المضادات الحيوية و األليـ ـ ـ ـاف
و الخمائر و السوائل التي تفيـ ـ ـ ـ ـد في شفاء الكثير من األمراض بإذن اهلل و التي أثبتتها التجارب الطبي ـ ـة
و المخبرية و يمكن سرد بعض الح ـ ـ ـاالت التي ت ـ ـم عالجها بواسطة التم ـ ـ ـر و مشتقاته ،و شجر نخيل
التمـ ـ ـر و أجزائها[.]26
يحتوي التمـ ـ ـر على نسبـ ـ ـة عالي ـ ـة من س ـكر الفـ ـواكه ( الفركتوز) مم ـ ـا يساع ـ ـ ـد فـ ـي عـ ـ ـالج اإلمس ـ ـاك.
يحتوي التمر على فيتامينات ،سكر و مع ـ ـ ـادن ،تسـ ـ ـ ـ ـاعد على التقوي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة التن ـ ـ ـ ـاسلي ـ ـ ـة ،الوقاية من
الفشل الكلـ ـ ـ ـوي ،عـ ـ ـ ــالج أمـ ـ ـ ـراض القلب و فق ـ ـ ـ ـ ـ ـر ال ـ ـ ـ ـ ـ ـدم و الحس ـ ـ ـ ـ ـ ـاسية و وقف تكاثر الخاليا
السرطانية.
المسـ ـ ـ ـاعدة فـ ـ ـي وقف نزي ـ ـ ـ ـ ـف الحمـ ـ ـ ـ ـل لتواف ـ ـ ـ ـ ـر Vitamin Kو م ـ ـ ـ ـ ـ ـادة التناينيـ ـ ـ ـ ـ ـن القابض ـ ـ ـ ـ ـ ـة.
يعالج الحموضـ ـ ـ ـة الحتـ ـ ـ ـ ـواء التمـ ـ ـ ـ ـ ـر على األمـ ـ ـ ـ ـ ـالح المعدنيـ ـ ـ ـ ـة القلويـ ـ ـ ـ ـ ـة.
يعمل على منـ ـع الدوخـ ـ ـة الحت ـ ـواء التمر على عناص ـ ـر مض ـ ـادة كالكاروتي ـ ـ ـن.
يستعمل التمـر المطحون و جمار شجـ ـرة النخيـ ـل لعالج الربـ ـو و السعـال الديكي.
نوى التمر المحمص المطح ـ ـ ـ ـون يعمل على تفتيـ ـ ـ ـ ـت الحص ـ ـ ـ ـى في الكلـ ـ ـ ـ ـى.
1 - IIاإلجهـــــــــاد التأكســــــــــــدي
اإلجهاد التأكسدي هو اختـ ـ ـالل التوازن بين معدل إنتـ ـ ـاج األكسدة و معدل تحللها [ ،]43وبمعنى
فالعديد من []44
آخر هو اختـ ـ ـالل التوازن بين إنتـ ـ ـاج العناصر الفعالة و أنظمة الدفاع المضادة لألكسدة
األمراض المزمنة بما في ذلك األعصاب و أمراض القلب واألوعية الدموية السبب فيها هو الضرر
التأكسدي في الخاليا بسبب هجوم أنواع من األكسجين التفاعلية ROSو نقص في مضادات األكسدة
و للجسم البشري عدة آليات لمواجهة اإلجهاد التأكسدي من خالل إنتاج المواد []46 ,45
داخل خاليا الدفاع
المض ـ ـادة لألكسـ ـ ـدة ،و التي تنت ـ ـج إما بشكل طبيعي داخلي ـ ـا أو خارجيـ ـ ـا (توفيـ ـ ـرها من خـ ـ ـالل األطعم ـ ـة
أو المكمالت الغذائية) فالمواد المضادة لألكسـ ـ ـدة تزيل الجـ ـ ـذور الحرة و بالت ـ ـ ـالي تمنع الض ـ ـ ـرر
التأكسـ ـ ـدي أي تنقص اإلجه ـ ـ ـاد التأكسدي [.]49-47
هناك جزيئات وسيطة تؤدي إلى اإلجهاد التأكسدي و هي أنواع األكسجين التفاعلية ROSوالتي
و الجزيئات الفعالة و األيونات المشتقة من األكسجين ،]50[ O2حيث يتم إنتاج []43
تشمل الجذور الحرة
ROSفي الحاالت المرضية ( السرطان ،األمراض العصبية و القلبية ،أمراض المناعة الذاتي ـ ـة الخ ،)...
و الحاالت الطبيعة أثناء العمليات الفزيولوجية مثل األيض الخلوي حيث تلعب ال ـ ROSأدوا ار مهمة في
العديد من العمليات الخلوية منها االنتشار و تنشيط الخاليا ،لكن يمكن أن تكون ضارة عندما تنتج
بكميات عالية [.]51
1 - 2- 1 - IIالجـــــــــــذور الحـــــــــــــــــرة
-1تعريف
الجذور الحرة هي أصنـ ـ ـاف أو أفراد كيميائية ذرية أو جزيئية متعادلة أو مشحونة بشحنة سالب ـ ـة
يكون معظمها شديد الفعالية إذ []53 ,52 ,44
أو موجبة تحتوي على إلكترون أعزب على األقل غير مزدوج
تقترب قيمة طاقة تنشيط تفاعالتها من الصفر في أغلب األحيان ،تتولد هذه األصناف خالل التفاعالت
الكيميائية كمركبات وسطية شديدة الفعالية و تنتهي بنهايتها و تتكون هذه األصناف خاصة بالتفاعالت
السلسليـ ـ ـة و بعض التفاعـ ـ ـالت األخـ ـ ـرى مثـ ـ ـل التفاعالت الضوئيـ ـ ـة و تلك المحثة بتسليـ ـ ـط األشعـ ـ ـة
الكهرومغناطيسية و الدقائق اإلشعاعية األخرى و تأثير التيار الكهربائي على المواد الكيميائية ،كما يمكن
أن تكون متفاعالت في بعض التفاعالت مثل البلمرة [.]53
-2أقســـــــــــامهـا
تنقسم الجذور الحرة من حيث استقرارها إلى نوعين:
الجذور الحرة التي لها أعمار حياة قصيرة
أي غير مستقرة بالظروف االعتيادية ،يشمل هذا النوع من الجذور الحرة ذرات العناصر مثل:
الهيدروجين و النيتروجين و الكلور و الفلور و الجذور التي لها وزن جزيئي منخفض بصورة عامة ،تتراوح
أعمار حياة هذه الجـ ـذور بالمايكرو ثانية و أقل حتى تصـ ـل إلى البيكوثانيـ ـة .تتابع تفاعالت هذه الج ـ ـ ـذور
و تشخيصها و حركية تفاعالتها بالطرق الطيفية الحديثة مثل :الطرق الضوئية السريعة و أطياف رنين
البرم اإللكتروني و أطياف تجزؤ الكتلة [.]53
يكون ذو لون أصفر و مستق ار بدرجة ح اررة الغرفة لبضع ساعات ،أما الجذر الثاني فيكون مادة صلبة
ذات لون بنفسجي -مسود ويكون مستق ار لعدة أيام ويستخدم لتعيير أجهزة قياس أطياف رنين البرم
اإللكتروني ،وهناك جذور حرة صلبة أخرى مثل جذر الداي فنيل أوكسيد النتريك و مشتقاته [.]53
و نستطيع القول بأ ن معظم الجذور األروماتية التي تشمل على تراكيب رنينية متعددة في تركيبها الجزئي
تكون مستقرة .و يعزى استقرار هذا النوع من الجذور لعدم تمركز اإللكترون الحر بموقع معين في تركيب
الجذر ،أي ينتقل من موقع آلخر على طول تركيب الجذر .و خير أمثلة على هذه الحال هي عدم تمركز
اإللكترون الحر بجذور الـ ـ Triphenylmethylوجذر الـ ـ .]53[ DPPH
.
تفاعالت البداية :هي التي تنشأ عنها زيادة في عدد الجذور الحرة ،و قد تتضمن تكوين جذور حرة من
فئات ثابتة ،أو قد تتضمن تفاعل الجذور الحرة مع فئات ثابتة لتكوين مزيد من الجذور الحرة [.]54
تفاعالت االنتشار :في هذه المرحلة الجذور الحرة تجدد سلسلة من تفاعالت [ ،]55بحيث أن العدد النهائي
للجذور الحرة يظل كما هو[.]54
تفاعالت االنتهاء :وهي التي ينشأ عنها قلة عدد الجذور الحرة ،وغالبا ما تتضمن اتحاد جذرين لتكوين
فئات أكثر ثباتا[ ،]54فمثال:
و األغذية التي تحتوي على المواد الكيميائية الزراعية ،مثل األسمدة و المبيدات الحشرية ،كلها مولد
قوي للجذور الحرة.
عوامل عامة :مثل الشيخوخة و الضغط.
العوامل الغذائية :المكمالت ،الكحول ،القهوة ،و األطعمة ذات األصل الحيواني ،و األطعمة المشوية
و المقليـ ـة أو المطبوخـ ـة بطريقـ ـ ـة أخرى على درجات حـ ـ ـ اررة مرتفع ـ ـ ـة ،و األطعم ـ ـ ـة التي تم تحمي ـ ـ ـرها
أو حرقها بالزيوت النباتية المهدرجة و السكر.
السموم :مثل )(Carbon tetrachloride, Paraquat, Benzo [a] pyrene, Aniline dyes Toluene
المخذرات :مثل )(Adriamycin, Bleomycin, Mitomycin C, Nitrofurantoin, Chlorpromazine
2 - IIمضــــــــــادات ال كســــــــــدة
1- 2 - IIمدخـــــــــــل
إن جزيئات األكسجين التفاعلية ROSتنتج طبيعيا خالل التمثيل الغذائي ،وقد وضعت الخاليا
عدة آليات وقائية لمنع تشكيل ROSأو إلزالة السموم من .ROSهذه اآلليات تستخدم جزيئات تسمى
مضادات األكسدة [ ،]52هذه األخيرة هي المادة التي تمنع أو تؤخر و بتراكيز منخفضة جدا أكسدة الركيزة
كما تتصف بقدرتها و قابليتها على أن تتأكسد و لذلك تساهم في إيقاف سلسلة التفاعالت الناتجة من []44
الجذور الحرة و بالتالي الحد من تدهور الخاليا و ضعفها و لذلك فإن لمضادات األكسدة فوائد عديدة منها
الحد من انتشار و زيادة استمرار بعض األمراض ،ألن الجذور الحرة تنتج داخلياً و زيادتها في الجسم
تساهم في تدهور الخاليا و حدوث األمراض[.]56
تقسم األنظمة المضادة لألكسدة إلى أنظمة إنزيمية و أخرى غير إنزيمية.
يعتبر إنزيم SODمن اإلنزيمات التي تدخل في تحليل النواتج السامة للميتابوليزم الخلوي ،فهو
يق ـ ـ ـوم بإزالة الج ـ ـ ـذر O•2وذلك بتسريـ ـع مع ـ ـ ـدل تح ـ ـ ـوله إلى H2O2بمس ـ ـ ـاعدة بعض المع ـ ـ ـادن مثل زنـ ـ ـ ـ ـك
و النحاس[.]58
[]58
الشكل ) :(1 – IIآلية التخلص من جذر O•2بواسطة اإلنزيمات المضادة لألكسدة
يوجد ثالث نظائر إنزيمية لـ SODعند الثدييات و التي تختلف حسب توزعها الخلوي و المعادن
المرتبطة ،إذ نميـ ـز الشك ـ ـ ـل Cu/Zn-SODالذي يتواجد أساسا في السيتـ ـ ـ ـ ـوزول و النـ ـ ـ ـ ـ ـواة ،و الشك ـ ـ ـل
Mn-SODالذي يتواجد في المتكوندري ،أما الشكل Ec-SODفيتواجد خارج الخلية [.]59
إنزيــــــــــــــم )Catalase (CAT
يتكون إنزيم ) (CATمن أربع تحت وحدات ،تحتوي كل تحت وحدة على مجموعة هيم مرتبطة
بالموقع النشط ] ،[60يوجد إنزيم CATفي أغلب الكائنات الحية وفي كل أعضاء الجسم ويتركز خاصة في
الكبد و كريات الدم الحمراء و الكلى وبكميات قليلة في المخ والقلب و العضالت الهيكلية ،كما يتواجد في
المتكوندري و السيتوزول و البيروكسيزومات [ ،]61يعمل CATعلى التخلص من H2O2و ذلك بتحويله
إلى H2Oو .[60] O2
ONOO - ،و ذلك بفضل النشاطية .[65] peroxidaseرغم فعاليتها الضعيفة مقارنة ب ـ ـ ـ CATو GPx
إال أن هذه البروتينات تلعب دو ار مهما في التخلص من الهيدروبيروكسيدات و ذلك لكميتها المعتبرة ،إذ
تمثل % 0.8-0.1من البروتينات الحرة الخلوية [.]66
ثانيـــــــا :مضــــــــــادات ال كســــــــــدة غيــــــــــــر اإل نزيميـــــة
على عكس مضادات األكسدة اإلنزيميـ ـة ،معظـ ـم المركبـ ـات ال تنتج من طرف العضوية و قد
تأتي من األغذية و تشمل هذه المركبـات كل من الجزيئـ ـات الصغي ـ ـرة مثـ ـل :الفيتامين ـ ـ ـات Vit.Eو Vit.C
و Gutathionو ،]67[ Ubiquinoneو المركبات الفينولية ذات األصل النباتي (خضر ،فواكه ،حبوب،
نباتات طبية )...أثبتت فعاليتها المضادة لألكسدة في عدة دراسات على غرار كل من الفواكه والخضروات
و الرمان [ ،]70البقوليات [ ،]71النباتات الطبية [ ،]73 ,72كما يمكنها أن []69
و الحبوب [ ،]68فاكهة الخوخ
تكون داخلية المنشأ مثل coenzyme Qو الميالنونين و حمض اليوريا [.]74
عديــــــدات الفينـــــــــول
-1تعــــــــــريفها
معظمها من أصل []75
عديدات الفينول من أكثر مركبات األيض الثانوي في الطبيعة انتشا ار
مشترك من األحماض األمينية و Phenylalanineو ،]76[ Tyrosineتتميز بنيتها األساسية بوجود حلقة
عطرية أو أكثر مرتبطة بعدة مجاميع هيدروكسيل [ .]77هذه الميزة تشمل أيضا مجموعات كيميائية نباتية
مختلفة مثل بعض القلويدات (كالمورفين (Morphinوبعض التربينات (كالتيمول (Thymolالتي تضم في
بنائها حلقة بنزينية و مجموعة هيدروكسل فينولية مما يستوجب إدخال شرط االصطناع الحيوي لحصر
حدود هذه المجموعة [ ،]78و عليه ليكون تعريف المركبات الفينولية أكثر ضبطا ،يستوجب أن يكون على
النحو التالي :
مشتق غير آزوتي حاوي على حلقة بنزين أو أكثر تحمل مجموعة هدروكسيل حرة أو مرتبطة بوظيفة
أخرى تكونت حلقاتها العطرية إما من حمض شيكيميك أو عديد األستات[.]79
مجاميع الهيدروكسيل الفينولية من أحسن مضادات األكسدة التي تثبط أنواع األكسجين التفاعلية ،و تعمل
على تكسير حلقة توليد الجذور الحرة [ ،]81 ,80كما تضفي هذه المركبات طعم و نكهة فريدة من نوعها
للفواكه و الخضر[.]82
أقســـــــــــامها -2
يمكن تقسيم عديدات الفينول إلى ثالثة أقسام :أحماض فينولية ،فالفونويدات ( تمثل القسم األكبر
منها ) و تانينـ ـ ــات ،و هذا حسب درجة عدم تشبعها و أكسدتها [.]83
األحماض الفينولية مركبات أيضية ثانوية تنتشر على نطاق واسع في المملكة النباتية [،]82
مصطلح "األحماض الفينـ ـ ـولية" بشكل عـ ـ ـام يعين الفين ـ ـ ـ ـوالت التي تمتلك وظيفة حمضي ـ ـة كربوكسيلي ـ ـة
رسـ ــات مكثف ــة ،حيث قـ ـ ـ ـ ـ ـ ــام Mansouri et al.
واحدة [ ،]84و في السنوات األخيرة أصبحت موضوعـ ــا لد ا
بتحليـ ـ ـ ـ ــل مستخلص ـ ـ ــات الفينوليـ ـ ــة لسبعـ ـ ـ ــة أصن ـ ـ ـ ــاف تمور جزائري ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة فوج ـ ـ ـ ــد أنها تحتـ ـ ــوي على ك ـ ـ ــل
م ـ ـ ـ ــن:
p-coumaric acidو ferulic acidو ، sinapic acidو بعض مشتقـ ـات ،cinnamic acidو ثالث أشكـال
إيزوميريـ ـ ــة لـ .[85] 5-o-caffeoyl shikimic acidالجدوالن ( )1 - IIو ( )2 - IIيمثالن أهم هياكل
األحماض الفينولية (أحماض الهيدروكسي بنزويك و أحماض الهيدروكسي سيناميك) على التوالي [:]84
H
R4 COOH
R3 R1
R2
COOH
R3
R2
R1
ب -الفالفونويـــــــدات:
ب 1 -تعريف
شأنها كشأن األحماض الفينولية ،فالفالفونويدات مركبات أيضية ثانوية [ ،]84وقد سميت بهذا االسم
سنة 1952م من طرف " "Geissmanإشارة إلى جميع الصفات التي تملك الهيكل القاعدي C6-C3-C6
فكلها تملك نفس الهيكل القاعدي بخمسة عشرة ذرة كربون ،مكونة من وحدتين عطريتين تعرف إحداهما
بالنواة Aواألخرى بالنواة Bترتبطان بسلسلة من 3ذرات كربون قد تبقى مفتوحة وقد تشكل الحلقة ()C
التي تمثل حلقة ( Chromaneحلقة البيران المركزية) و يعطي الهيكل القاعدي للفالفونويدات التي تنحدر
من الوحدة األساسية المسماة ،2- phenylchromaneأهم المصادر الغذائية الرئيسية لها والتي تكون في
شكل مركبات الفالفونول أو فالفون أو ايزو فالفون أو فالفونون هي :الشاي ،الطماطم ،الكرز ،البصل،
الزعتر ،البقدونس ،فول الصويا وغيرها من البقوليات والفواكه مثل العنب البرتقال الليمون و التفاح [.]86 ,84
'3
'2 '4
1 B
8 '1
9 O
2 '5
7
A '6
C
6 3
10
5 4
6 3
10
5
الفالفونــــــــــــــول Flavonols
OH O R1
'3
R2
'2
'4
8 '1
H 7 9 O 2 '5
O
الوضعية
'6 R2 R1
OH OH Quercetin
6 OH OH H Kaempferol
5
H H Galangin
OH O
R1 Flavanone الفالفانـــــــــــون
3'
R2
2'
4'
7 8 1'
H 9 O 2 5'
O
6'
3
6 R2 R1 الوضعية
5
OH H Naringenin
OH O OCH3 OH Hesperetin
8 Isoflavones ايزوفالفــــــــون
HO 7 9 O 2
2' R الوضعية
6 3 OH Ganistein
5 3' H Daidzein
R O 6' 4'
OH
5'
Flavanol الفالفانــــــــول
OH
3'
OH
2'
4'
8 1'
الوضعية
H 7 O R2 R1
O 9 2
5' R2
6' H βOH (+)-Catechin
3 H αOH (-)-Epicatechin
6
R1
OH αOH (-)-Epigallocatechin
5 4
OH
30 | 2018
اإلجهاد التأكسدي ومضادات األكسدة الفصـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل الث ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــاني
الفالفونويـ ـ ـ ـدات الموجـ ـ ـ ـودة في النبات ـ ـات تمتلك فوائد صحيـ ـ ـ ـة متنوع ـ ـ ـ ـة ،و تشمل األنشطة
المضادة لألكس ـ ـ ـدة و كس ـ ـ ـ ــح الجـ ـ ـ ــذور الح ـ ـ ـرة ،و الح ـ ـ ـد من بعض األمراض المزمن ـ ـ ـة ،و الوقاي ـ ـ ـة من
االضطرابات القلبي ـ ـ ـة الوعـ ـ ـ ــائية ،و أن ـ ـ ـواع معين ـ ـ ـة من السرطان ـ ـ ـات وفيما يلي أه ـ ـ ـم الخصائص
البيولوجي ـ ـ ـة التي تمي ـ ـ ـ ـ ـ ـز الفالفونويدات [.]87
النشاطيـــة المضــــــادة لألكســـــــدة
يعود التأثير الوقائي للفالفونويدات من األمراض أساسا إلى تأثي ارتها المضادة لألكسدة ،إذ بإمكانها
أن تمنع اإلصابات الناتجة عن الجذور الحرة بعدة طرق منها :إزاحة الجذور الحرة ،استخالب األيونات
المعدنية المسـ ـ ـؤولة عن إنتاج ،[88] ROSتثبيـ ـ ـط اإلنزيمات المس ـ ـ ـؤولة عن تشكيل هذه الجذور ،تنشي ـ ـ ـ ـط
و تجديد األنظمة المضادة لألكسدة [ .]89فقد ركزت دراسات عديدة حول العالقة الموجودة بين بنية
الفالفونويد و النشاط المضاد لألكسدة [.]91 ,90
فالمركبات التي تمتلك مجموعات هيدروكسيلية في الوضعية 3' ،3و ' ،4و رابطة ثنائية بين
الكربونين 2و 3تمتاز بنشاطية مضادة لألكسدة كبيرة [.]90
النشاطيـــة المضــــــادة للحساسية
الفالفونويدات بتأثيرها المضاد للحساسية .تثبط اإلنزيمات التي تساعد على تحرير الهستامين
ابتداءا من Mastocyteو basophyleوهي AMPC phosphodiestérase :و .]93 ,92[ Ca++ATPase
النشاطيـــة المضــــــادة للقرحـــــة المعديــــة
الفالفونويدات قادرة على حماية الغشاء المخاطي ضد عدة عوامل محرضة للقرحة المعدية،
فالفالفونويد hypolaeline-8-glucoseالمستخلص من أنواع sideritisيمتلك نشاطية عالية ضد القرحة
المعدية [.]94
كما أن كال من naringinineو quercetineيملكان نشاطية مضادة للقرحة المعدية ،اختبرت على
الجرذان التي تم تحريض القرحة فيها بفعل اإليثانول .ووجد أن quercetineيملك تأثيرات واقية للخاليا
ويثبط إنتاج Leucotriènesو ذلك بإنتاج مخاط ذو خصائص مضادة لألكسدة [ ،]95من جهة أخرى وجد
31 | 2018
اإلجهاد التأكسدي ومضادات األكسدة الفصـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل الث ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــاني
أن quercitineيثبط نمو Helicobacterpoliiو كذلك إنتاج األحماض عن طريق الخاليا الجدارية ردا
على التحفيز من الهستامين و .]96[ AMPC dibutyrique
منذ العصور القديمة كان معروف أن هناك بعض المواد العضوية تمتلك خصائص الدباغة
وتكون قادرة على دبغ جلود الحيوانات ،و التانينات كلمة مشتقة من االسم الفرنسي ( Taninمادة تستخدم
في الدباغة) ينتمي إلى مجموعة عديدات الفينول الطبيعية [ ،]97و هي نوعان:
-1التانينــــــات المتحللة
وهي جزيئـ ـ ـات معقـ ـ ـدة من أستـ ـ ـرات لسكر(عديد الهيدروكسي) وعـ ـ ـدد متغيـ ـ ـر من الجزيئـ ـ ـات
لحمض فين ـ ـ ـولي ،تحللها ينتج شقا سكري ـ ـ ـا في أغلب األحيـ ـ ـان يكون الغلوك ـ ــوز وشقا فين ـ ــوليا مشكال
أساسـ ـ ـا من Gallic acidو ،Ellagic acidوتتميز بذوبانيتها في الماء [.]98
-2التانينـــــات المتراكمة
ال تذوب في الماء وهي األكثر انتشا ار تنتج من البلمرة لجزيئات أولية تمتلك البنية العامة
للفالفونويدات وتعد ال ـ (Flavan-3-ols) Catechinesأو (Flavan-3,4-diols) Coanthoocyanidineاألكثر
أهمية ،وترتبط فيما بينها بروابط كربونية في أغلب األحيان تكون بين المواقع ( )4،8أو (.]99[ )6،4
تصنف مضـ ـ ـادات األكسـ ـ ـدة حسب مصدرها إلى مضـ ـ ـادات أكس ـ ــدة طبيعي ـ ــة (ذاتي ـ ــة في جس ـ ــم اإلنسـ ـ ـان
أو غذائية ( مصدر نباتـ ــي أو حي ـ ـ ـواني)) وصن ــاعية.
-1مضــــادات ال كســــــدة الطبيعيـــــــــــة
مضـــادات أكســـــــــــدة ذاتيـــــــــــــة ( فــــي جســــم اإل نســــــان)
توجد مضادات األكسدة في جسم الكائن الحي على صورة إنزيمات أو مرافقات إنزيمية أو مركبات
تحتوي على عنصر الكبريت ،ينتج اإلنسان أربعة إنزيمات:
باإلض ـ ـافة إلى ه ـ ـذه اإلنزيمـ ـ ـ ـات ه ـنـ ـ ـاك هورم ـ ـ ـون Melatoninالـ ـ ـ ـ ـذي تفـ ـ ـرزه الغـ ـ ـ ـ ـ ـ ـدة الصنوبري ـ ـ ـ ـ ـة
) ،(Pineal glandو يـ ـقوم هـ ـذا الهورمون الموجب الشحنـ ـة بمعادلـ ـة الشـ ـ ـ ـ ـوارد الحرة ذات الشحنة السالبـ ـة
و يـ ـزيل األفعال الضارة لها .و لسـ ـ ـوء الحظ فــإن هذه الغـ ـدة تضمحـ ـل في سن األربعـ ـين .و كذلك الثيوالت
و هي مركبات تحتوي على عنص ـ ـر الكبريـ ـ ـ ـت المخت ـ ـ ـ ـ ـزل مثل ( ،)Glutathioneو )،α-Lipoic acid (LA
)( Ubiquinone و ) ، N-acetylcysteine (NACو حمض اليوري ـ ـ ـ ـ ـك ،و ،NADPHو NADHو
.]67[ Coenzyme Q10
مضـــادات أكســـــــــــدة غـــذائيـــــــــة
هي عبارة عن مركبات يكون مصدرها نباتي منها الخضروات ،الفواكه ،الحبوب ،النباتات الطبية
و األعشاب العطرية .و يمكن أن تحتوي هذه النباتات على مركبات فينولية مثل األحماض الفينولية،
الفالفونيدات ،األنتوسيانيدات ،التانينات ،الكومارينات ،الكاروتينويدات ،الليبوكين ،و الفيتامينات،
والمعادن ،فقد أثبتت عدة دراسات أن الفاعلية المضادة لألكسدة للمركبات الفينولية راجع إلى خاصية
األكسدة و اإلرجاع والتي يمكن أن تلعب دو ار هاما في امتصاص و تعديل الجذور الحرة و تمنع
األكسجين األحادي و الثالثي و تفكك البروكسيدات .و قد يكون مص ـ ـ ـدرها حيواني منها اللحوم الحمراء،
و لحوم الدواجن و األسماك و البيض و تحتوي على الفيتامينات ( C ،Aو ،) Eاألحماض الدهنية
) ،(𝜔 − 3و معادن نادرة مثال السيلينيوم ،المنغنيز ،المغنيسيوم و الزنك [.]101 ,100
-2مضــــادات أكســــــدة صنــــــاعية
تستخـ ـ ـ ـ ـ ـدم مضـ ـادات األكس ـ ـ ـ ـ ـدة الصناعيـ ـ ـة كثي ـ ـ ـ ار في صناعـ ـ ـ ـة الم ـ ـ ـواد الغذائيـ ـ ـة ،نذكر منها:
BHAيطل ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــق علـ ـ ـ ـ ــى م ـ ــركب تج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــاري .وه ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــو عب ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــارة ع ــن مزي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــج من مركبي ـ ـ ـ ـ ـ ــن هم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــا:
2-tert-butyl-4-hydroxyanisolو 3-tert-butyl-4- hydroxyanisol
من أهم خواص هذين المركبين قدرتهما على المحافظة على قابليتهما كمواد مضادة لألكسدة في الغذاء
أثناء التسخين كالقلي و الخبز ،لذا فإن الـ ـ BHAيضاف إلى شرائح البطاطا .كما أنه أبيض شمعي ،له
درجة انصهار منخفضة ،و يشكل في قوالب لسهولة حفظه و تقليـ ـ ـ ـ ـل حجمه ،و يذوب في الجليسيريـ ـدات
و المذيبات العضوية و ال يذوب في الماء ،و له رائحة خاصة تظهر عند ارتفاع درجة ح اررته [.]102
33 | 2018
اإلجهاد التأكسدي ومضادات األكسدة الفصـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل الث ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــاني
OH OH
O O
هو من مض ـ ـادات األكس ـ ـدة التي تصنع تجاريا الستعماله في المنتج ـ ـ ـات البتروليـ ـ ـ ـة و المطاطيـ ـ ـ ـة
و استعمل بعد ذلك في منتجات األغذية.
و يمتاز هذا المركب بأنه أبيض اللون بلوري صلب و له ثباتية في درجات الح اررة العالية ،و هو أقل
كفاءة من الـ ـ BHAو هو مهم لذوبانه في الجليسيريدات و عدم ذوبانه في الماء .و في وجود الحديد في
معلبات األغذية أو في األغذية في حد ذاتها يمكن للـ ـ ـ BHTأن يعطي لون أصفر[.]102
HO
3,5-Di-tert-butyl-4-hydroxy Toluene
1 - IIIالبكتيــــــــــريا
نبــــذة تاريخـيـــــة 1 - 1 - III
في ع ـ ـ ـ ـام 1676اكتشف Anton Van Leeuwenhoekعالم الميكروب ـ ـ ـ ـات بواسطة المجه ـ ـ ـ ـر
البسيط [ ،]103إال أنه بعد اختراع المجهر المركب عام 1820من قبل العالم Hookeو الذي فتح الضوء
على علم البكتيريا و الذي وصفها باألنواع المجهرية الصغيرة ،بعدها توالت الدراسات و األبحاث المفصلة
عن البكتيريا ،من ذلك التي قدمها كل من ) 1895-1822( Louis pasteurو الذي اقترح نظري ـ ـ ـ ـة
الجرثومـ ـة ،و الع ـ ـ ـ ـالم األلم ـ ـ ـ ـاني Robert Kochهو أول ع ـ ـ ـ ـالم أثبت النظرية السببي ـ ـ ـ ـة بين الميكروب ـ ـ ـ ـات
و األمراض الحيوانية ،أما أول من استخدم مصطلح البكتيريا فهو العالم ايرنبيرغ .]104[ Ehrenberg1829
فقد عرفها بأنها كائنات وحيدة الخلية تنتمي إلى بدائيات النوى [ ،]103تسمى هذه الخاليا بالبدائية النوى
ألنها تحوي إضافة إلى الهيولى منطقة كثيفة ذات شكل غير منتظم ،تسمى المنطقة النووية ،إذ تفتقد هذه
الخاليا لغشاء فاصل بين الهيولى و المنطقة النووية التي تحوي المادة الوراثية ،و هو الفرق الرئيسي بين
الخاليا البدائية النوى و الخاليا الحقيقية [.]104
كما يمكن تعريف البكتيريا بأنها كائنات دقيقة الحجم ،ال ترى إال بالمجهر ،توجد في كل مكان ،في الهواء
و في الماء ،و على جسم اإلنسان ،و داخل قناته الهضمية ،و جهازه التنفسي [.]105 ,103
[]104
1 - 3 - 1 - IIIحسب توزيع أسواطها
[]105
2 - 3 - 1 - IIIحسب الشكل
البكتيريــــا العصويــة ) :(Bacilliالتي تأخذ خالياها شكل العصويات الصغيرة تحت المجهر.
البكتيريــــا الكرويـــــــــة ) :(Cocciالتي تأخذ خالياها شكل الكريات الصغيرة.
البكتيريــــا الحلزونية ) :(Spiralالتي تأخذ الشكل الحلزوني.
البكتيريــــا الواويــــــــة ) :(Vibrioالتي تأخذ شكل الواو أو الضمة العربية.
[]107
3 - 3 - 1 - IIIحسب الوسط الذي تعيش فيه
بكتيريــــا هوائيــــــــــــــــة ) :(Aerobicوهي البكتيريا التي تعيش فقط في وجود الهواء الجوي ،وتعتبر
المصدر األساسي لتسمم المواد الغذائية.
بكتيريــــا ال هوائيـة ) :(Anaerobicو هي البكتيريا التي تعيش فقط في غياب الهواء الجوي.
بكتيريــــا ال هوائية اختيارية ) :(Facultative Anaerobicو هي البكتيريا التي يمكنها العيش و
النمو ،في ظل وجود الهواء الجوي أو عدمه.
[]107
4 - 3 - 1 - IIIحسب التغذية
بكتيريــــا عضوية التغذية :هي البكتيريا التي تحصل على الكربون من تحليل المواد النيئة كالسكر.
يوضـ ـ ـ ـح االختـ ـ ـالف في ت ــركيب ج ـ ـ ـ ـدار الخليـ ـ ـ ـة بالتلويـ ـ ـن ،حسب تقني ـ ـ ـ ـة غ ـ ـ ـرام ) ( GRAM
نسبـ ـ ـة للعـ ـ ـالم J . GRAMالمكتشفة سنة ،1884و استنبط نوعين من خالل هذه الطريقة [:]108 ,103
بكتيريــــا غــــــرام موجب ) :(gram positiveعند تلوينها تمتص اللون وتظهر أرجوانية.
بكتيريــــا غــــــرام سالب ) :(gram négativeتحرر صبغ و تظهر حمراء.
و يظهر جدار خلية البكتيريا غرام موجب أسمك من جدار خلية البكتيريا غرام سالب ،وهذا بسبب التركيب
الكيميائي المختلف [.]103
فإما أن تكون:
بكتيريــــا ضارة:
توجد بكتيريا ضارة تهاجم اإلنسان ،فتسبب له أم ارضا و مشاكل صحية عديدة ،و ذلك على نحو
ما يحدث في أم ارض :السل و الكوليار ،التيفوئيد ،السعال الديكي ،الزهري و السيالن [ ،]109و من بين
البكتيريا الضارة و المسببة لألم ارض نذكر:
هي بكتيريا عصوية (على شكل قضيب) ،سالبة الغرام ،القولونية اختيارية الهواء ،تندرج ضمن
عائلة األمعائيات ،ذات أبعاد من 1إلى 3ميكرومتر ،توجد عادة في أمعاء الثدييات بما في ذلك البشر
معظمها ليس مسببا لألمراض ،تلعب دو ار هاماً في األمعاء [ .]110و لكن بعض السالالت تكون مسببة
لألمرض كأمراض :الجهاز البولي ،اإلسهال الطفيلي ،التهاب السحايا و تسمم الدم[.]111
ا
[]112
الشكل ) :(1 – IIIصورة موضحة لفحص مجهري لل ـ Esherichia coli
المكـ ـ ـ ـورات العنقوديـ ـ ـ ـة الذهبيـ ـ ـ ـ ـة هي نوع من البكتي ـ ـ ـ ـ ـريا موجبة الغ ـ ـ ـ ـ ـرام [ ،]113تنتمي إلى جنس
المكـ ـ ـ ــورات العنقودية ،سميت بذلك ألنها تبدو وكأنها قذيفة ،ترتبـ ـ ـ ـط في مجموعات على شكل عنقـ ـ ـ ـود
العنب ،قط ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرها حوالي 1ميكرومتر ،غير متحـ ـ ـ ـ ـركة ،ال هوائية اختياريـ ـ ـ ـا ،تنمو بالتنفس الهوائي أو
بالتخم ـ ـ ـ ـ ـر إذ تخم ـ ـ ـ ـر العديد من الكاربوهيد ارت ببطئ منتجة حمض الالكتيك ،تم اكتشاف المكورات من
طرف باستور و كوخ في .[114]1878 - 1877
على الرغم من أن هذه البكتيريا وجدت كثيار في البشر إال أنها تعد من البكتيريا المسببة ألمارض
اإلنسان .إذ يمكن أن تسبب التهابات الجلد أو التهاب األذن الوسطى ،كما يمكن أن تؤدي إلى تسمم الدم.
و عدوى المستشفيات [ ،]116و مقاومتها للمضادات الحيوية []115
و هي أيضا مسؤولة عن التسمم الغذائي
في بعض األحيان تعد مشكلة كبيرة لعالج المرضى.
الشكل ) :(2 – IIIصـ ـ ـورة موضحـ ـ ـة لفحص مجهـ ـ ـري للمكــورات العنقوديـ ـ ــة الذهبيـ ـ ــة
[]112
Staphylococcus aureusـ
مما يفسر نموها و تكاثرها في األوساط االستشفائيـ ـ ـة حيث تنمو في األجهـ ـ ـزة الطبيـ ـ ـة ،األفرشـ ـ ـة ،األلبسة.
و تكون ممرضة بضعف الجهاز المناعي للجسم [.]109
a b
الشكل ) :(3 – IIIصورة مجهرية لنمو مستعمرات الزائفة الزنجارية Pseudomonas aeruginosa
[]118
:aتحت إضاءة عادية :b ،تحت إضاءة األشعة فوق البنفسجية
[]121
الشكل ) :(4 – IIIصورة موضحة لرسم تخطيطي لل ـ Salmonilla
2 - IIIالمضـــــادات الحيـــــــوية
1 - 2 - IIIنبذة تاريخية
رغم أن مفهوم المضاد الحيوي لم ينشأ إال في القرن العشرين إال أن استخدامه قد بدأ في الصين
منذ أكثر من 2500سنة ،وكثي ار من الحضارات القديمة كالحضارة الفرعونية و الحضارة اإلغريقية ،فقد
استعملوا النباتات في عالج الكثير من األمراض و العدوى دون التنبه إلى المادة الفعالة داخل النباتات،
في ألمانيا عام 1909طور بول أرليك ) (Paul Ehrlichمضادا حيويا ضعيف المدى أسماه سالفرسان
) (Salvarsanو أستخدم في عالج السيالن الذي كان منتش ار بكثرة في هذه الفترة ،و كان االكتشاف
ر عام 1928بواسطة أليكساندر فليمينج )(Alexander Fleming
الحقيقي للمضادات الحيوية في إنجلت ا
حيث اكتشف البينيسيلين و أثبت أن عفن Penicillium notatumينتج مادة البنسلين القادرة على القضاء
على بعض أنواع الجراثيم [.]122
و بعد عشرة أعوام قام أرنست تشين و هاورد فلوري بتحضير نوع صافي من البنسلين و حصال
على جائزة نوبل في الطب عام 1945و منـ ـ ـذ ذلك الوقت أكتشف المئات من المضادات الحيوي ـة ،و أمكن
التعرف عليها و استعمل بعضها في العالج الداخلي لإلنسان [.]122
2 - 2 - IIIتعريــــــف
استعملت كلمة المضاد الحيوي ألول مرة بواسطة العالم Vulleminسنة 1889الذي عرفها بأنها
الظروف التي يمكن تحتها لكائن حي إبادة كائن حي آخر ليحتفظ هو بحياته و وجوده ،و ال يختلف
تعريف Vulleminلهذه الظاهرة كثي ار عن التعريف الحالي و الذي ذكره Waksmanسنة ) ( 1945في أن
هذه الظاهرة ترجع إلى إفراز مواد كيماوية ذات تأثير ضار بالميكروبات [ ،]123و قادرة على قتل أو تعجيز
كائن حي آخر.
إن تصنيف المضادات الحيوية يعتمد على الوظيفة األساسية للمضاد الحيوي في الجسم و التي
تنقسم إلى قسمين [:]124
تمنع تكاثر الخلية البكتيريـ ـ ـ ـة وهو ما يسـ ـ ـ ـاعد في القضـ ـ ـاء عليها مثل :سلفوناميـ ـ ـ ـد ،كلـ ـ ـ ـورام
فينكـ ـ ـ ـول.
إما عن طريق التأثير على جدار خليتها ،أو بالتسبب في انتفاخ خليتها و انفجارها ،أو بمنع
تكوين مادة البروتين داخل خليتها ،مثل. Penicillin ،Gentamicin ،Ampicillin :
تنقسم الطرق القياسية لتحديد تأثير نشاط المضاد الحيوي إلى قسمين[:]123 ,122
هي الطرق التي تعتمد على زرع البكتيريا في البيئات الصناعيـ ـ ـة لتحديد نشاط المضـ ـ ـاد الحيوي،
و منها اختبار الحساسية ،و يتـ ـ ـ ـم باختبـ ـ ـ ـار االنتشـ ـ ـ ـار في أطبـ ـ ـ ـاق اآلجـ ـ ـ ـار )،(Dissemination method
و يتم بطريقتين هما اختبار التخطيط الشعاعي و اختبار األقراص و هي األكثر استعماال.
و هي التي تعتمد على استخدام التقنيات المتطورة و تستخدم في حال طلب سرعـ ـ ـة التشخيص
أو عجز الطرق الميكروبيولوجية ،و من هذه الطرق:
قياس العكـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـارة.
قياس الك ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـدر.
قياس النش ـ ـ ـاط اإلنزيمي.
يتضمن هذا الفصل ،أوال تقديـ ــر النســبة المئ ــوية للـرطــوب ـ ـ ـ ــة في التمـ ــر ،ثانيا تعيين نسبة النواة
إلى الثمرة ،ثالثا استخالص وتقدير كمية المادة العضوية و المادة غير العضوية ،و في األخير الكشف
الكيميائي لبعض المواد الفعالة في التمر ،و إلنجاز هذا العمل تم االستعانة بالمواد و التجهيزات الموجودة
على مست ـ ـ ـ ـوى مخبـ ــر تثميـ ـ ـ ـن و ترقيـ ــة الم ـ ـوارد الصحراوي ـ ـة ( )VPRSبج ـ ـامعة قاص ـ ـدي مرب ـ ـاح بورقلـ ـ ـ ـة
و مخبر ترقية و تكنولوجيا الموارد الصحراوية ( )VTRSبجامعة حم ـ ـ ـ ـة لخض ـ ـر بال ـ ـوادي و المتمثلة في
مايلي:
وتنطبـ ـ ـ ــوشت Tnbفي شهر اكتوبر من عام ،2013و قد تم جمع الثمار من المعهد الوطني للبحوث
الزراعية بسيدي مهدي -تقرت INRAAبمنطقـ ـ ـ ـ ـ ــة وادي ريـ ـ ـ ـ ــغ.
الجدول ( :)2 - Iالتوزيـ ـ ـ ـع الجغرافي لألصنـ ـ ـ ـاف الخمسـ ـ ـ ـة المستخدمـ ـ ـ ـة في الدراسـ ـ ـ ـة مع تاريـ ـ ـ ـخ نضجها
[]125
و جنيهـ ـ ـ ـا
من شهر أكتـ ـ ـ ــوبر إلى أوت (ميـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـزاب ،الوادي) شائعة :الزيب ـ ــان ،واد ريغ ،
نوفمب ـ ـ ـ ـ ــر سبتمب ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــر (متليـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــلي) الوادي ،منيعة ،وأقل شيوعا DB
يق ـ ــع المعـ ـ ــد الوطني للبحوث الزراعية بسيدي مهدي INRAAبمدينة تقرت التي تقع في الجزء
الشمالي لوادي ريغ ،هذا األخير يقع في الجنوب الشرقي الجزائري على طول العرق الشرقي الكبير بين
والية وادي سوف وتقرت .و يعتبر منطقة زراعية بالدرجة األولى ،حيث تشمل هذه المنطقة عدة واحات
والشكل ( )1 - Iيوضح األراضي الرطبة الرئيسية ]،[126
(المعروفة بإنتاجها للتمور) وأكثرها إنتاجا هي تقرت
في واد ريغ.
الجزائر
واد ريغ
إفريقيا
[]127
الشكل ( :)1 - Iالموقع الجغرافي لألراضي الرطبة الرئيسية في وادي ريـ ـ ـ ـ ـ ــغ
غــــــــــــــــرس
Gh
شتـــــــــــــــاية
Cht
دقلة بيضاء
DB
تنسيـــــــــــن
Tns
تنطبوشت
Tnb
لتحديد رطوبة عينة ما نتبع الطريقة المعتمدة من طرف ،]128[ Reeb and Milotaمع بعض
التعديالت الطفيفة.
-طريــــــــقة العمل
نقوم بتعيين مقدار فرق الوزن قبل عملية التجفيف و بعدها ،عند درجة ح اررة تقدر ب ـ ـ ،105 °Cفي هذه
الدراسـ ـ ـ ـ ـة نقوم بوزن 10 gمن العينة (الوزن الرطب) بعدها يجفف في فرن التجفيف عند درجة ح ـ ـ ـ ـ اررة
105 °Cلمدة 24ساعة و نحسب الوزن ثم نرجعها إلى الفرن و نتركها 17سا عند نفس الشروط و نقيس
الوزن ،و نكرر العملية لمدة 4سا ،و عند ثبات الوزن نتوقف و نحسب الوزن الجاف ،و لتعيين نسبة
الرطوبة نطبق العالقة ).(1 - I
الوزن الرطب – الوزن الجاف
= (%) Hـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ × 100 )………… (1 - I
الوزن الجاف
تعيين نسبة النوى إلى ثمرة التمر و ذلك بوزن عينة عشوائية متكونة من 10تمرات ثم نفصل
النوى عن التمر ،و نقوم بحساب وزن النوى لنفس العينات ،العملية تطبق على األصناف الخمسة
و لتعيين نسبة النوى إلى ثمرة التمر نطبق العالقة ).(2 - I []29
للتمر
طريقة العمل
م ـ ــرت هذه العملية بث ـ ــالث م ـ ـ ـراحل حسب طريقـ ـ ـ ــة .]130 ,129[ )1975( A.O.A.C
.1قبــــل الحــــرق
.2عنــــد الحــــرق
نقوم بحرق 15gمن العينة (لحمية التمر) لمدة خمس ساعات بواسطة جهاز الترميد على درجة ح اررة
.550°C
.3بعــــد الحــــرق
نضع ال ــبوتقات الخزفية في مجفف ( )Desiccatorلمدة نصف ساعة ،ثم نزنها هذا الوزن يمثل مجموع
وزن الوعاء باإلضافة إلى رماد العينة ( المادة غير العضوية أو المعدنية) ،و منه نستنتج وزن المادة
العضوية.
تم التعبير عن النتائج التجريبية على شكل متوسط حسابي ( )Mلكل القيم المتحصل عليها ( ثالث
مكررات) ±االنحراف المعياري (.)SD
استخدمت طــرق معتمــدة للكشــف عن أهــم الم ـواد الفع ــالة فــي التمــر.
-1المستخلـــص المــائــي
قمنا بوزن 2gمن الجزء اللحمي لكل صنف تمر مقطع و مجفف ونقعت في 20mlمن الماء
المقطر المغلى ،مصحوبا بالرج لمدة ،24 hيرشح المزيج بواسطة ورق الترشيح و نستخدم هذه الرشاحة
في الكشف الكيميائي [.]131
-2المستخلـــص الكحولـــــي
تم إعداد المستخلص الكحولي بوزن 5gمن الجزء اللحمي لكل نوع مقطع و مجفف ونقع في
20mlمن مزيج متكون من ) ( methanol/H2O) (8/2لمدة 24 hفي درجة ح اررة الغرفة مرفوق بعملية
الرج ،يرشح المزيج بواسطة ورق الترشيح و نستخدم هذه الرشاحة في الكشف الكيميائي[.]131
-1تحضيـــــــــر الكواشـــــــف
كاشــــــــــــــف مايـــــــــــــــــر :Mayers reagentيحضـ ـ ـ ـ ـ ـ ــر بإذابة 13.5 gمن كلوريـ ـ ــد الزئبق HgCl2و 5 g
ال نبوب الثاني 1ml :من المزيج نظيف لها بعض القطرات من كاشف مايـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـر.
-3المالحظــــــة :ظه ـ ـ ـ ـ ـور راسب بلـ ـ ـ ـ ـ ـون برتقـ ـ ـ ـ ـ ـالي دليـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل على وجـ ـ ـ ـ ـود القلوي ـ ـ ـ ـ ـدات.
ت -الكشــف عن الفينــــــــــوالت Phenols
-1طريقة العمل :وفقا للطريقة المستعملة من طرف ،]134[ Pandithنعالج المستخلص الكحولي بواسطة
قطرات من محلول كلوريد الحديد الثالثي ) (FeCl3بتركيز % 5المحضر حديثا.
-2المالحظــــــة :تدرج اللون من فاتح إلى داكن يميل إلى السواد هو دلي ـ ـ ـل على وجود الفين ـ ـ ـ ـ ـوالت.
ث -الكشــف عن الفلوباتانينــات Phlobatannins
-3طريقة العمل :وفقا للطريقة المستعملة من طرف ،]135[ Samejo, Sumbul et alلكل 0.5gمن الجزء
اللحمي لكل صنف تمر مقطع و مجفف غليناها في 10mlمن الميثانول بعدها نقوم بعملية الترشيح،
نظيف إلى الرشاحة قطع أو شرائح المغنيزيوم و بحذر بعض قطرات من حمض الهيدروكلوريك
المركز . HCl
-1المالحظــــــة :ظه ـ ـ ـ ـ ـور ل ـ ـ ـون أحمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـر دليـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل على وج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـود الفالفونويـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـدات.
ح -الكشــف عن الستيرويـــــدات Steroids
-1طريقة العمل :وفقا للطريقة المستعملة من طرف ،]136[ RNS and Muninنمزج 2mlمن المستخلص
المائي مع 2mlمن الكلوروفورم و نظيف لها بحذر قطرات من حمض الكبريت H2SO4المركز.
-2المالحظــــــة :تشك ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل طبقـ ـ ـة أو حلقـ ـ ـة زرق ـ ـ ـاء /خض ـ ـراء دلي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل على وجود الستيروي ـ ـ ـ ـ ـدات.
-1طريقة العمل :وفقا للطريقة المستعملة من طرف 1g ،]133[ Al-Daihan, Al-Faham et alمن الجزء
اللحمي لكل صنف تمر مقطع و مجفف نغليها في 10mlمن الماء المقطر ثم نرشح ،بعدها نضع
الرشاحة في أنبوب اختبار و نظيف لها 3mlمن الماء المقطر و نرج بقوة.
-2المالحظــــــة :تشك ـ ـ ـ ـ ـل رغ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـوة تؤكـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـد وج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـود الصابونيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـن.
د -الكشــف عن الكربوهيـــدرات Carbohydrates
-1طريقة العمل :وفقا للطريقة المستعملة من طرف Pandithو ،]137 ,134[ Yadav and Agarwalaنضع
في أنبوب اختبار 2mlمن المستخلص المائي و نظيف لها حجم 2mlمن مزيج متساوي الحجم من
محلول فهلينج Aو ،Bبعدها نسخن المزيج.
-2المالحظــــــــة :ظه ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـور راس ـ ـ ـ ـ ـ ـب أحم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـر أجـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـوري دلي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل على وجـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـود الكربوهي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـدرات.
ذ -الكشــف عن التربانويـــــدات Terpenoids
-1طريقة العمل :وفقا للطريقة المستعملة من طرف ،]135[ Samejo, Sumbul et alفي أنبوب اختبـ ـ ـ ـ ـ ـ ـار
وضعن ـ ـ ـ ـ ـ ـا 2mlمن المستخلص المائي و أضفنا له حجم 2mlمن الكلوروفورم و بحذر أضفنا
قطرات من حمض الكبريت المركز.
-2المالحظــــــة :تشكـ ـ ـ ـ ـل طبقـ ـ ـة أو حلقـ ـ ـة زرق ـ ـ ـ ـ ـاء /خض ـ ـ ـ ـراء دليـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل على وج ـ ـ ـود التربانويـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــدات.
ر -الكشــف عن الكومارينـــــات Coumarins
-1طريقة العمل :وفقا للطريقة المستعملة من طرف ،]138[ Savithramma, Rao et alفي أنبوب اختبار
وضعنا 2mlمن المستخلص المائي و أضفنا له حجم 3mlمن محلول هيدروكسيد الصوديوم NaOH
-1طريقة العمل :وفقا للطريقة المستعملة من طرف ،]135[ Samejo, Sumbul et alفي أنبوب اختبار
وضعنا 2mlمن المستخلص المائي و أضفنا له من 5إلى 6قطرات من محلول هيدروكسيد
فــي ه ــذا الج ـ ــزء سيت ـ ـ ـ ـ ـ ــم مناقشة و دراس ـ ـ ـ ـة النت ـ ـ ـ ـ ـائج التجريبي ـ ـ ـ ـ ـة المتحصل عليها.
من خالل النتائج الموضحة في الجدول ( ،)4 - Iنالحظ أن نسبة الرطوبة في التمر تختلف من صنف
إلى آخر ،و تتراوح ما بين 18.001 %إلى ،33.220 %و مرتبة وفق الترتيب التالي:
Tnb ˃ Cht ˃ Gh ˃ Tns ˃ DB
و مقارنة بمعيار جودة فاكهة نخيل التمر و التي تعتمد على عدة عوامل من بينها مقدار الرطوبة حيث
مع النتائج المتحصل عليها نجد أن أفضل األصناف هو Tnbو Chtيليه []139
تكون ما بين 26و % 30
Ghثم Tnsلتكون DBأقل هذه األصناف جودة اعتمادا على معيار الرطوبة.
الجـــدول( :)5 - Iنسبــة النـ ـواة إلى الث ـ ــمرة في أصناف التمر المدروسة
نسبة النوى % وزن لحمة التمر()g وزن النوى()g الوزن الكلي للتمر()g نوع التمر
14.225 56.0881 9.3017 65.3898 Gh
11.024 80.2993 9.9489 90.2482 Cht
21.487 55.3766 15.1552 70.5318 DB
11.482 65.3724 8.4795 73.8519 Tns
11.426 77.2086 9.9598 87.1684 Tnb
من خالل النتائج الموضحة في الجدول ( ،)5 - Iنالحظ أن نسبة النوى في التمر تختلف من صنف إلى
آخر ،و تتراوح ما بين 11.024 %إلى ،21.487 %و مرتبة وفق الترتيب التالي:
DB ˃ Gh ˃ Tns ˃ Tnb ˃ Cht
و بمقارنة النتائج مع النتائج المتحصل عليها من طرف ( Hussein, Alhadrami et alالنسبة ما بي ـ ـن 10
و ،]140[ )% 15و ( ما بين 11و )% 18لـ ـدى كل من Besbes, Blecker et alو Nehdi, Omri et al
وزن التــــــــــمرة :حسب دراسات تمت على تمور جزائرية [.]143
وزن لحمية التـمر :حسب دراسات تمت على تمور عراقي ـ ـ ــة [.]144
نســـبة النـــــوى :حسب د ارسـ ــات تمت على ت ـ ــمور عراقيـ ـ ــة [.]145
الجـــدول( :)6 - Iنسبة المادة العضوية و المادة غير العضوية ألنصناف التمر المدروسة
نسبة المادة غير نسبة المادة العضوية المادة غير العضوية المادة العضوية المادة االبتدائية صنف
العضوية % % )(g )(g )(g التمر
2.512 97.488 0.3768 14.6239 15.0007 Gh
2.149 97.851 0.3223 14.6785 15.0008 Cht
3.811 96.189 0.5716 14.4292 15.0008 DB
2.647 97.353 0.3971 14.6031 15.0002 Tns
2.840 97.160 0.426 14.5746 15.0006 Tnb
نالحظ من خالل الجدول ( )6 - Iأن نسبة المادة العضـ ـ ـ ـوية أعلى بكثير من نسبة المادة غير العضـ ـ ـ ـوية
(الم ـ ـ ـادة المعدني ـ ـ ـة) ،كما أنها تختلف من صنف إلى آخـ ـ ـ ـر ،أعالها في صنف Chtبنسبـ ـ ـ ـة % 97.851
و أدناها في صنف DBوبنسبة ،% 96.189أما ترتيب األصناف كان على النحو التالي:
Cht ˃ Gh ˃ Tns ˃ Tnb ˃ DB
و بالمقابل فإننا نسجل نسب صغيرة للمادة غير العضوية ،التي تختلف أيضا من صنف إلى آخر وتتراوح
ما بين % 2.149و ،% 3.811حيث جاء ترتيب هذه النسب لألصناف الخمسة المدروسة كالتالي:
DB ˃ Tnb ˃ Tns ˃ Gh ˃ Cht
نت ـ ـائج هذه الدراس ـ ـة تتوافق إلى حد كبي ـ ـر مع نتائ ـ ـج توصل إليها كل من Ben Salah Mohamed et al
حول 15صنف من التم ـ ـر التونسية و الذي ـ ـن وج ـ ـ ـدو أن نسب الم ـ ـادة غي ـ ـر العض ـ ـوية تت ـ ـراوح م ـ ـا بين
% 1.95إلى ،]146[ % 4ودراسة قام بها Saad et alحول 11صنف من التمور السعودية وجدوا أن النسب
تتراوح ما بين 1.96%إلى ،]147[ 2.88%في حين كانت أقل من نتائج توصلت إليها دراسة لخمسة أصناف
من التمور لمنطقة ورقلة ،حيث وجد أن هذه النسب تتراوح ما بين %1.888إلى ،]29[ %15.106و يمكن
تفسير هذا االختالف إلى تفاوت نسبة المعادن الموجودة في التربة من منطقة إلى أخرى.
أظهرت النتائج وجود و غياب بعض المركبات الفعالة طبيا لألصن ـ ـاف الخمسة كما هو موضح في
الجدول(.)7 - I
الصنف
Tnb Tns DB Cht Gh
المادة الكيميائية
Alkaloids
- - - - -
القلويدات
phenols
+ + + + +
الفينوالت
Phlobatanins
- - - - -
الفلوباتانينات
Flavonoids
+ + + + +
الفالفونويدات
Steroids
- - - - -
الستيرويدات
Saponins
+ + + + +
الصابونين
Carbohydrates
+ + + + +
الكربوهيدرات
Terpenoids
- - - - -
التربانويدات
Coumarins
+ + + + +
الكومارينات
Proteins
- - - - -
البروتينات
من خالل النتائج الممثلة في الجدول ( )7 - Iنالحظ وجود الفينوالت ،الفالفونويدات ،الكومارينات،
الكربوهيدرات و الصابونين على مستوى جميع األصناف ،حيث أثبتت دراسات سابقة وجود بعض هذه
المركبات [ ،]148كما أثبت وجود بعض هذه المركبات أيضا في سعف النخيل مثل :الفينوالت،
الفالفونويدات ،الصابونين و الكربوهيدرات [ ،]149فالحماية التي يوفرها استهالك المنتجات النباتية مثل
الخضر ،الفواكه والبقوليات ترتبط معظمها بوجود المركبات الفينولية [ ،]150و التي يمكن أن تكون
انخفاض معدل ،]155 [,154 ,150
مضادات أكسدة للوقاية من أمراض القلب [ ،]153-151تقليل اإللتهاب
و مرض السكري [ .]161 ,160أما الفالفونويدات فيتم استهالكها بشكل منتظم في غذاء []159-156
السرطان
اإلنسان و لها نشاطات بيولوجية مختلفة بما في ذلك المضادة لإللتهابات ،مكافحة السرطان و خصائص
مضادة للفيروسات [ ،]162و نفس الشيء بالنسبة للكومارينات فهي تمتلك نشاط حيوي مضاد للتخثر ،طارد
للديدان و مهدئ و منوم [.]163
في حين وجـ ـ ـ ـ ــد أن فـ ـ ــاكهة التمر تحـ ـ ـ ــتوي على %70من الك ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـربوهي ـ ـ ـ ـ ــدرات معظمهـ ـ ـ ـ ــا عب ـ ـ ـ ـ ــارة عـ ـ ــن
سكريـ ـ ـ ـ ـ ـ ــات (السكري ــات الكلي ـ ــة من ،)%88 - 44إما على شكـل سكري ـ ــات أح ــادية (فركتوز و الجلوكوز)،
و التي من السهل امتصاصها من قبل الجسم البشري ،أو سكريات ثنائية (سكروز) والتي تتطلب وقت
أطول لتحويلها عن طريق الهضم إلى سكريات أحادية ،بسبب هذا تعتبر هذه الثمار مصدر عالي للطاقة،
حيث نجد أن 100gمن لحمية التمر توفر 314سعرة ح اررية و هذا ما يعادل بالتقريب 1Kgمن لحم
الضأن [.]29
أما الصابوني ـ ـن فهي مركبات ثانوية تتوزع على نطاق واس ـ ـع في المملكة النباتي ـ ـة و هي بمثابة الحاج ـ ـز
أو الدرع في النظام الدفاعي للنباتات ضد الكائنات الممرضة و الحيوانات العاشبة [ ،]165 ,164لذلك فهي
موجودة في األنسجة النباتية األكثر عرضة للفطريات والهجوم البكتيري الجرثومي و الحشرات الضارة
،]166و بالتالي وجودها يوفر الحماية لثمار نخيل التمر .في حين سجل غياب وجود كل من [,164
القلويدات ،الفلوباتانينات ،الستيرويدات ،التيربينات و البروتينات ،فربما هذا الغياب خاصة القلويدات له
أثـ ـ ـر إيجابي كون هذه الفاكه ـ ـ ـ ـة صالحة لألكل ،فقـ ـ ـ ـد أص ـ ـدر كل من البرنامج الدولي للسالم ـ ـة الغذائيـ ـ ـة
و منظم ـ ـة األغذي ـ ـة العالمية FAOبيان يفيد بأن إستهالك الحبوب الملوثة و النباتات الطبية التي تحوي
pyrrolizidine alkaloidsيسبب األمراض المزمنة [.]167
في هذا الجزء سيتـ ـ ـم تقدير كميـ ـة المركبـات الفينولية و الفالفونويديـة لمستخلصات الجـزء اللحمي لثمار
نخيل التمر ثم دراس ـة فعاليتها المضادة لألكس ـدة بطريقتيـن ،األولى كيميائية باستعمـال ثالث اختبارات:
اختب ـ ـار ج ـ ـ ـذر ال ـ ،DPPHاختب ـ ـار القدرة االرجاعي ـ ـة للحديد و اختب ـ ــار إرجـاع ) Mo (VIإلى )، Mo (V
.
Biochem
99% الميثانول )Methanol (CH3-OH
99.8%
Chemopharma
Biochem
99% حمض الغاليك ((OH) 3C6H2COOH,H2O) Gallic Acid
Chemopharma
97% Biochem
كلوريد األلمنيوم (AlCl3,6H2O) Aluminium chloride
98% Chemopharma
Biochem
98% هيدروكسيد الصوديوم )NaOH( Sodium hydroxide
Chemopharma
-2األجهـــــــــــــــــزة
أجـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـريت الد ارس ـ ـ ـ ــة باستعمال عدة أجهزة ،جهاز الطرد المركزي و هذا في تحضير المستخلصات
الفينولية ،و لدراس ـة الخصائص المضادة لألكسدة لهذه المستخلص ــات استعملنا في:
الدراسة الكيميائية :جهـ ـاز مطي ـ ـ ـ ـافية ف ـ ـوق البنفسجي ـ ـة و المرئيـ ـ ـ ـ ـة جه ـ ـ ـ ـاز).(SpectroScan 80D/80DV
الدراسة الكهـــــروكيميائيــــة :لدراسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة السلـ ـ ـ ـ ـ ـ ـوك الكهروكيميـ ـ ـ ـ ـ ـائي المضاد لألكسدة استعملنا جـ ـ ـ ـ ـهاز
) ،)PGZ301VoltaLab40متصل من جهة بجهاز كمبيوتر مزود ببرنامج Volta Master 4لمعالـجـة
النتائج باستعمـ ـ ـ ـ ـال طريقـ ـ ـ ـ ـة الفولطامتري الحلقي ،و من جهة أخرى متصل بخلي ـ ـ ـ ـ ـة زجـ ـ ـ ـاجيـ ـ ـ ـ ـة ذات
حج ـ ـ ـم 25mlمزودة بغطاء يحت ـ ـ ـ ـوي على خمس ثق ــوب ،ثالث ـ ـ ـ ـ ـة تسمح بدخـ ـ ـ ـ ـ ـول المساري (المرجعي،
المساعد ،العمل) و الرابـ ـ ـ ـ ـع لتزوي ـ ـ ـد الوسـ ـ ـ ـ ـ ـط باألوكسجين و الذي نطبق عليه تيـ ـ ـار للحصـ ـ ـول على
،O•−و الخ ـ ـ ـامس خاص بإضافة المستخلصات المـ ـ ـراد دراستها بواسطة حقنة .حيث استخـ ـ ـ ـ ـدم
جذر الـ ـ 2
مسرى الكـ ـالوميل المشبـ ـ ـ ـع ) (SCEكمسرى مرجـ ـ ـ ـ ـ ـعي ،سـ ـ ـ ـلك البـ ـ ـ ـ ـ ـالتين كمسرى مس ـ ـ ـ ـ ـاعد ،و مسرى
الكـ ـ ـربون الزج ـ ـ ـ ـ ـاجي ) (Ø = 3mmكمسرى عم ـ ــل.
استخراج المركبات المضادة لألكسدة من جميع أصناف النخيل نفذت باستخدام أربعة أنظمة وفقا
مع تعديالت طفيفة .نقع 5gم ـ ـن []168
للطريقة المستعملة من طرف Al-Farsi, Alasalvar et al. 2005
ك ـ ـ ـل صن ـ ـ ـف في 50 mlم ـ ـ ـن:
النظام ال ول :الماء المقطر H2O
النظام الثاني :الميثانول المطلق Absolute methanol
النظام الثالث :مزيج مكون من )( Methanol/H2O) (8/2
النظام الرابع :مزيج مكون من )( Acetone / H2O) (7/3
لمدة 24س ـ ـ ـاعة في درج ـ ـة ح ـ ـ ـ ـ اررة الغ ـ ـ ـ ـرفة مع ال ـ ـ ـ ـرج لمـ ـ ـ ـ ـدة س ـ ـ ـاعتين ،ت ـ ـم ط ـ ـرد الخليـ ـ ـ ـط ( × 3500
زمن قدره 15دقيـ ـ ـ ـ ـ ـقة) ،و الت ـ ـ ـ ـ ـرشيح باستخ ـ ـ ـ ـ ـدام ورق الترشيـ ـ ـ ـ ـح ثم التبخيـ ـ ـ ـ ـر باستخـ ـ ـ ـدام المبخـ ـ ـ ـ ـر
ال ـ ـ ـ ـدوار .بعـ ـ ـ ـ ـدها نذيب الناتج المتحصل عليه في 20mlمن الميثـ ـ ـ ـانول .و يحفـ ـ ـ ـ ـظ في الثالج ـ ـ ـة حتى
وقت القيـ ـ ـ ـام بالتحالي ـ ـ ـ ـل الالزمة .المخطط ( )1 - IIيوضح طريق ـ ــة استخـ ـ ـ ــالص المركبات الفينولية
بواسطـ ـ ــة أربعة أنظـمة مختلفة لالستخالص.
استخلصت الفينوالت حسب طريقة .[169] Marie-Josphe Amiot et alمع بعض التعديالت لتحسين
و التي تعتمد على ثالث مراحل: []168
مردود االستخالص مستوحاة من طريقة Al-Farsi, Alasalvar et al
نقوم بنقع 10 gمن كل عينة مهيأة في 100 mlمن الهكسان لمدة 24ساعة ثم نقوم بالترشيح،
الرشاحة تبخر و يحسب مردود اللبيدات ،أما الراسب يجفف ليستعمل في الخطوة الموالية.
مالحظة :نطبق نفس الخط ـ ـ ـوات على جميـ ـ ـع األصنـ ـ ـ ـ ـاف و في كل األنظم ـ ـ ـة فنحصـ ـ ـ ـل على 20راسب.
-2االستخالص صلب سائل (النـــــــــقع)
ينقع الراسب في 100 mlلكل نظام مستعمل لمدة 24ساعة في درجة ح اررة الغرفة مع الرج لمدة
ساعتين .تم طرد الخليط ( × 3500زمن قدره 15دقيقة) ،و الترشيح باستخدام ورق الترشيح ثم التبخير
باستخدام المبخر الدوار للتخلص من الميثانول و األسيتون لنتحصل على الطور المائي هذا األخير
يستعمل في الخطوة التالية.
نغسل ثالث مرات الطور المائي المتحصل عليه بحجم يساويه من أسيتات اإليثيل مع إضافة 2ml
من حمض أورثو فوسفوريك ) (2%و 2mlمن كبريتات األمونيوم ) ((NH4)2SO4 20%التي تعمل على
سهولـة مـ ـرور المركبـ ـ ـات الفينولي ـة إلى الطـ ـور العضوي ،ثم نبخره تحت الضغط المخلخل باستعمال جهاز
المبخر الدوار تحت درجة .40°Cنذيب الناتج المتحصل عليه في 10mlمن الميثانول المطلق ،ثم تحفظ
المستخلصـ ـ ــات الميث ـ ــانولية في الثالجـ ـ ــة لحين إج ـ ـ ـ ـراء التحليالت الالزمـ ـ ــة عليها .و المخطط ()2 - II
يوضح طريق ـ ــة استخـ ـ ـ ــالص المركبات الفينولية الحرة بواسطـ ـ ــة أربعة أنظـمة مختلفة لالستخالص.
الرشاحة
فينول خام
تبخير الرشاحة 40 °C
يحفظ في الثالجة
المخطط ( :)1 - IIطريقة استخالص المركبات الفينولية المرتبطة و الحرة معا ) المستخلصات )((B
الرشاحة ()1
الراسب ()1 الترشيح ()1
النقع في 100 mlمن كل نظام لمدة 24ساعة مع الرج لمدة ساعتين هكسان مسترجع
تبخير الهكسان
ساعتين
الطور المائي استخالص سائل – سائل بواسطة أسيتات اإليثيل 2ml +من حمض أورثو
فوسفوريك ) (2%و 2mlمن كبريتات المونيوم ) ، (2%ثالث مرات
فينول خام
المخطط ( :)2 - IIطريقة استخالص المركبات الفينولية مستخلصات أسيتات االيثيل)المستخلصات )((F
تم تعيين كمية المركبات الفينولية الكلية TPCللمستخلصات باستخــدام كاشـ ـ ــف فوليـ ـ ـ ـ ــن و باالعتمـ ـ ــاد
على طريـقـ ــة ،]168[ Al-Farsi, Alasalvar et alمع بعض التعديالت الطفيفـ ـ ـة ،النتـ ـ ـائج المتحصـ ـ ـل عليها
عبـ ـ ـ ـر عن ـ ـ ـها بالـ ـ mgعلى أس ـ ـ ـاس Gallic acidالمك ـ ـ ـافئ لكل 100 gمـ ـ ـ ـن الوزن الجـ ـ ـ ـ ـاف للتم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــر
).(mg GAE/100g dw
حضر محلول معيـ ـ ـ ـ ـاري من حمض الغاليـ ـ ـ ـ ـك بتركيز ( ،)0.3g/lثم حضرت منه سلسلة عيـ ـ ـ ـ ـارية
بتراكيز ( .)0.03- 0.3 g/lأخذ 200µlمن كل محلول عياري و أضيف إليـ ـ ـ ـ ـه 1500µlمن كاشف الفوليـ ـ ـ ـ ـن
سيکالتو( )Folin–Ciocalteu reagentممدد 10مرات بالماء المقطر( )500mMمزج و ترك 5دقائق ،ثم
أضفنا للمزيج 1500µlمن محلول كربونات الصوديوم ( )Na2CO3بتركيز ، 60 g/lمزج الناتج و حف ـ ـ ـظ
في الظالم و في درجـ ـ ـ ـ ـة ح ـ ـ ـ اررة الغرفـ ـ ـ ـة لمـ ـ ـ ـدة 90دقيق ـ ـ ـة ،ث ـ ـ ـ ـم قيست االمتصـ ـ ـاصية بجهـ ـ ـ ـاز مطي ـ ـافية
SpectroScan 80D/80DVعند طول موجة .725nm
تحضيـــــــــر العينـــــــــــــات
حضر تركيز ممدد لكل مستخلص و عومل بنفس الطريقة التي عوملت بها السلسلة العيارية لحمض
الغاليك.
العالقة المستعـملة في حســــاب كميـــة الـ TPC
𝐴 𝑉
)C(mg/100g) = (𝐾 × 𝐹 × 𝑃) × 100 ………… (1 - II
حيث أن:
: Aاالمتصاصية عند .725nm
: Kهو ميل المنحنى القياسي لحمض الغاليك ) ،(GAو يساوي في هذه الدراسة ( 6.157 nm.l/gالشكل
(.))1 - II
: Fمعامل التمديد بالنسبة للمستخلصات.
تم تقدير كمية المركبات الفالفونويديـ ـ ـ ـ ـة الكلية TFCللمستخلصات باستخدام الطريقة اللونيـ ـ ـ ـ ـة
لكلوريـ ـ ـ ـ ـد األلومنيـ ـ ـ ـ ـوم و باتبـ ـ ـ ـ ـاع الطريقة المستعملة من طرف ،]69[ Kim, Jeong, & Leeمع بعض
التعديـ ـ ـ ـ ـالت الطفيفة ،النتـ ـ ـ ـ ـا ئج المتحصل عليها عبر عنها بالملليغرام من الكيرسيتين المكـ ـ ـ ـ ـافئ لكل 100
غرام من الوزن الجـ ـ ـ ـ ـاف للمـ ـ ـ ـ ـادة النباتية ).(mg QE/100g dw
حضر محلول معي ـ ـ ـ ـاري من الكيرسيتين بتركيز ( ،)0.2g/lثم حضرت منه سلسلة عي ـ ـ ـ ـارية بتراكي ـ ـ ـ ـز
( .)0.02-0.2 g/lأخذ 500µlمن كل محلول عي ـ ـ ـ ـاري و أضيف إلى 150µlمن محلول نترات
الصوديوم ) ،(5%ثـ ـ ـ ـ ـ ـم أضيف إليهما 300µlمن المحـ ـ ـ ـلول اإليثانولي لثالثي كلوريـ ـ ـ ـ ـد االلوميني ـ ـ ـ ـوم
) ،(AlCl3 10%يحضن المزي ـ ـ ـ ـج لمدة 5دقائق ،ث ـ ـ ـ ـم قيست االمتصـ ـ ـاصية بجهـ ـ ـ ـاز مطي ـ ـافية
( )SpectroScan 80D/80DVعند طول موجة .510 nm
تحضيـــــــــر العينـــــــــــــات
حضر تركيز ممدد لكل مستخلص و عومل بنفس الطريقة التي عوملت بها السلسلة العيارية
للكرسيتين.
حيث أن:
' : Aاالمتصاصية عند .510nm
' : Kميل المنحنى القياسي للكرسيتين ) (QEفي هذه الدراسة هو ( 31.767 nm.l/gالشكل (.))4 - II
' : Fمعامل التمديد بالنسبة للمستخلصات.
' : Cكمية الفالفونويـ ـ ــدات الكلية ).(mg/100g
: Vالحجم المذاب فيه الخالصة الفينولية.
: pالكتلة االبتدائية للعينة بالغرام.
ت ـ ـ ـ ــم تحديـ ـ ــد و تعييـ ـ ـ ـ ـن القـ ـ ـ ـدرة اإلرجاعي ــة للمستخلصـ ـ ــات باتب ـاع الطريـ ـ ـ ـ ــقة المستعملة من طرف
،]170[Kumaran & Joel Karunakaranحيث استخ ـ ـ ـ ـ ـدم حمض األسكوربي ـ ـك كمحلول معياري و كل من
ال ـ BHAو ال ـ BHTكشواهد مرجعية.
حضر محلول معياري من حمض األسكوربيك بتركيز ) ،(0.56 mMثم حضرت منه سلسلة عيارية
بتراكيز) . (0.056-0.56 mMنأخذ 1mlمن كل محلول عياري و نضيف له 2.5mlمن محلول منظم
فوسفاتي ( ، )0.2 M, pH 6.6ثم نضيف 2.5mlمن محلول ( ، K3Fe(CN)6 )1% w/vيحضن الخليط عند
درجة ح اررة 50°Cلمدة 20mnثم يضاف إليه 2.5mlمن محلول ) ،TCA (10%و تؤخذ 2.5mlمن
الخليط و تضاف لها 2.5mlمن الماء المقطر و 0.5mlمن محلول ) FeCl3 (0.1%و نقيس االمتصاصية
عند طول موجة .700nmحضرت العينة الضابطة بإضافة جميع المواد باستثناء إضافة 1mlمن الماء
المقطر بدال من المحلول المعياري ،حيث يدل التزايد في االمتصاصية على القدرة االرجاعية.
و نفس الشيء بالنسب ــة للشـ ـ ـ ـ ـواهد المرجع ـيـ ـ ــة لكـ ـ ــل من محل ـ ـ ــول BHTبتركيـ ـ ـ ــز ) ،(0.1g/lيحضـ ـ ــر
منه سـ ــلس ـ ــلة عيـ ـ ـ ــارية بتراكيـ ـ ـز) ،(0.01-0.1 g/lو محل ــول BHAبتركيـ ــز ) (0.1 g/lيحضر منه س ــلسـ ـ ــلة
عي ـ ـ ــارية بتراكي ـ ـز) .(0.01-0.1 g/lتعامـ ـ ـ ــل بنفس الطـ ـ ـ ـريقة التي ع ــوملت بها السـ ــلسـ ــلة العي ــارية للمحل ـ ــول
المعيـ ــاري لحمض األسـ ـ ــكوربيك.
تحضيـــــــــر العينـــــــــــــات
حضر محلول أم لكل مستخلص بتركيز معين ثم حضرت منه تراكيز ممددة وعوملت بنفس الطريقة
التي عومل بها حمض األسكوربيك.
يتم قياس الفعالية المضادة لألكسدة وفق مقدار يدعى :AEACو هو يمثل الفعالية المضادة لألكسدة
(Ascorbic acide Equivalent المكافئة لحمض األسكوربيك من طرف المستخلصات المدروسة
)Antioxydant Capacity
K
= AEAC )………… (3 - II
ʹK
حيث:
:AEACالقدرة المضادة لألكسدة المكافئة لحمض األسكوربيك.
: Kميل المنحى الخاص بالمستخلصات.
ʹ : Kميل المنحى القياسي لحمض األسكوربيك في هذه الدراسة يساوي ( 0.8933الشكل (.))7 - II
-2اختبــــــــــار جـــــــــذر الـــ DPPH
.
ت ـ ـم تعيي ـ ـ ـن القـ ـ ـ ـ ـ ـ ـدرة اآلسـ ـ ـ ـ ـ ـرة الجـ ـ ـ ـذريـ ـة للمستخلصـ ـ ـ ـ ـات المـ ـ ـدروس ـة على الجـ ـ ـذر المستق ـ ـ ـ ـر DPPH
.
على أساس الطريقـة المستخدمة من طرف ،]171[ Govardhan Singh, Negi, & Radhaحيث استخ ـ ـ ـ ـ ـدم
حمض األسكوربيك و BHAو BHTكمحاليل معيارية.
حضر محلول معياري من حمض األسكوربيك بتركيز) ،(0.1mMثم حضر منه سلسلة عيارية
بتراكيز) .(0.01-0.1 mMتم إضافة 𝑙𝜇 150من كل محلول عياري إلى 3mlمن المحلول الميثانولي لجذر
ررة الغرفة لمدة 30mn
الـ ـ DPPHذو تركيز ،0.1 mMيرج الخليط جيدا ثم يحضن في الظالم بدرجـ ـة ح ا
.
و نقيس االمتصاصية عند طول موجة ،517 nmيحتوى األنبوب الشاهد على نفس الحجم من المذيب
(الميثانول) في مكان المحلول المعياري لقياس االمتصاصية العظمى للـ ،DPPHو نفس الشيء بالنسبة
.
للمحاليـ ـ ـ ـل المعياريـ ـ ـ ـة لكل من محلول BHTبتركيز ) (0.35 g/lو يحضـ ـ ـ ـر منه سلسلة عياريـ ـ ـ ـة بتراكيـ ـ ـ ـ ـز
) (0.035-0.35 g/lو محـلول BHAبتركيــز) (0.1 g/lو يحضـر منـه سلسلة عيارية بتراكيـز).(0.01-0.1 g/l
تعامل بنفس الطريقة التي عوملت بها السلسلة العيارية للمحلول المعياري لحمض األسكوربيك.
تحضيـــــــــر العينـــــــــــــات
حض ـ ـ ــر محلــول أم لكــل مستخلـ ــص بتركي ـ ـ ـ ــز معي ـن ثم حضـ ـ ــرت منه تراكيـ ـ ـ ــز ممـ ـ ــددة و ع ـ ــوملت
بنفـ ـ ـ ــس الط ـ ـ ـ ـريقة التي عـوملت بها المحاليـ ـ ـ ـل المعيـ ـ ـ ــارية.
.
ت ـ ـم تعيين الق ـ ـ ــدرة التثبيطية للمستخلصات بحس ـ ـ ـ ــاب النسبة المئ ـ ـ ـ ــوية للتثبيط ) (I%للـ ـ ـ DPPHبالعـ ـ ـالقة
التاليـ ـ ـ ـ ـ ـة:
𝒊𝑨𝑨𝟎 −
= 𝑰% )× 100 ………… (4 - II
𝟎𝑨
حي ـ ـ ـ ـث:
: 𝐴0االمتصـ ـ ـاصيـ ـ ـة الضوئيـ ـ ـة للجـ ـذر الح ـر في غيـاب المستخلص ـات بعـ ـ ـد 30دقيق ـ ـ ـ ـ ـة.
𝑖𝐴 :االمتص ـ ـ ـاصيـ ـ ـة الضوئيـ ـ ـة للخلي ـ ـ ـ ـ ـط (الج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـذر +المستخ ـ ـ ـلص) بع ـ ـ ـد 30دقيق ـ ـ ـ ـ ــة.
.
: 𝐼%نسب ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة تثبي ـ ـ ـ ـ ـط العـ ـ ـ ـ ـ ـامل المضـ ـ ـ ـ ـاد لألكسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـدة للج ـ ـ ـ ـ ـذر الحـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـر .DPPH
عبـ ــّــر على القـ ـ ـ ـ ــدرة التثبيطيـ ـ ـ ـ ـ ــة للمستخلص ـ ـ ـ ــات بقيمـ ـ ـ ــة IC50و هي أقـ ـ ـ ـ ـ ــل تركيـ ـ ـ ـ ـ ـ ــز يثب ـ ـ ـ ــط 50%من
.
نشاط الجذر ، DPPHو تحسب انطالقا من المعادلة التي تحدد نسبة التثبيط بداللة تركيز المثبط.
50
= IC50 )………… (5 - II
K
قـ ــدرنا الفعالي ـ ـ ــة المض ـ ــادة لألكس ــدة على أسـ ـ ـ ـ ــاس طـريق ـ ـ ـ ــة ،]172[ Prieto et alمـ ـ ـ ــع بعض
التعدي ـ ـ ـ ــالت التي ق ـ ـ ــام بها ،]173[ Dasgupta et alحيث استخـ ـ ـدم حم ـض األسكوربيـ ـك كمحلول معي ـ ـ ـاري
و كل من ال ـ BHAو ال ـ BHTكشـ ـ ـواهد مرجعية.
حضـ ـر محلـ ـ ـول معي ـ ـاري مـ ـ ـن حمض األسكوربيك بتركيز) ،(0.001mMثم حضرت منه سلسلة عيارية
بتراكيز) .(0.0001-0.001mMنأخذ 0.3mlمن كل محــول عياري و نضيف ل ــها 3mlمن محل ــول محضر
يحتــوي على موليبـدات األمونيوم ( ،)4mMفوسفات الص ـ ــوديوم ( )28mMو حــمض الكبريتيك (.)0.6M
يحضن الخلي ـ ـط في حم ـ ـام م ـ ـ ـائي عنـ ـ ـد درجة ح اررة 95°Cلمدة .90mnنتـ ـ ـرك العين ـ ـات تبـ ـرد في درجـ ـ ـة
حـ ـ ـ اررة الغ ـ ـ ـرفة ثم نقيس االمتصاصيـ ـ ـ ـة عن ـ ـ ـ ـد ط ـ ـ ـول مـ ـ ـوجة .695nmحسبت القدرة المضـ ـ ـادة لألكس ـ ـدة
اعتمـ ـ ـ ـادا على العـ ـالقة البيانيـ ـ ـة بين تركي ـ ـ ـز حمض األسـ ـ ــكوربيك و االمتصاصية.
حضـ ـ ــر محلـ ــول الشـ ــاهد المرجعي لكل من BHAو BHTبتركيز 0.1 g/lو حضـ ــرت لكل واحد منهما
بتركي ـ ــز ) ،(0.01-0.1g/lو عوملتا بنفس الطريقة التي عوملت بها السلسلة العيارية
سلسلـ ـ ـ ـ ــة عياريــة ا
للمحلول المعياري لحمض األسكوربيك.
تحضيـــــــــر العينـــــــــــــات
حضـ ـ ــر محلول أ م لكل مستخل ـ ـ ــص بتركي ـ ــز معين ثم حض ـ ــرت منه تراكيـ ـ ــز مم ـ ــددة و ع ـ ـ ـ ــوملت
بنف ـ ــس الطـ ـ ـ ـ ـريقة التي ع ـ ـ ــوملت ب ـ ــها السلسلة العيارية للمحلول المعياري لحمض األسكوربيك.
تم تعيين القدرة الكلية المضادة لألكسدة بحساب المقدار TACو ذلك من العالقة التالية:
K
= TAC )………… (6 - II
ʹK
حيث:
:TACالقدرة الكلية المضادة لألكسدة.
: Kميل المنحى الخاص بالمستخلصات.
ʹ : Kميل المنحى القياسي لحمض األسكوربيك في هذه الدراسة يساوي ( 0.9498الشكل (.))15 - II
2 - 4 - 2 - 1 - IIالطـــريـــــــقة الكهروكيميــــــائيـــــــــة
،]174[ Le Bourvellec et alمع بعض التعديالت الطفيفة التي قام بها ،]175[ Belfar et alحيث استخـ ـ ـدمنا
حمض الغاليك و حمض األسكوربيك كشـ ـ ـواهد مرجعية.
يعتبر مسرى العمل الركيزة األساسية للدراسة الكهروكيميائية حيث تتم على سطحه عملي ـة األكس ـ ـ ـ ـدة
و اإلرجاع ،لذا وجب التأكد من خلو السطح من أي مادة تعمل على إعاقة عملية األكسدة و اإلرجــاع،
كوجود أكاسيد أو مادة مرجعة أو دهون ،من هنا كانت أهمية معالجة السطح و تنظيفه قبل كل تجربة،
تعتمد هذه المعالجة على تنظيف السطح فيزيائيا باستعمال أوراق كربيد السيليكون ( ،)4000و كيميائيا
باستعمال األسيتون إلزالة الدهون ،و الماء المقطر إلزالة األمالح ،كما يجفف السطح من الماء ألنه يؤثر
على التركيز و بالتالي على القياسات.
نحضر تركيز 0.1Mمن ملح ) ،(Bu4NPF6نمزجه مع المذيب العضوي DMFو نضعه في خلية
العمل ،نقوم بعملية الرج لمدة 5دقائق و ذلك لتجانس المحلول.
عضوي هو ،DMFوفي وجود ملح ) (Bu4NPF6بتركيز 0.1 Mو ذلك على مسرى من الكربون الزجاجي
ذا قطر ،3mmأما المسرى المرجعي فهو عبارة عن مسرى الكالومال المشبع بكلوريد البوتاسيوم ،قمنا
بتحديد مجال الكهروفعالية ألكسدة و إرجاع األكسجين على قطب الكربون الزجاجي ،حيث حدد مجال
المسح من ) 0Vإلى ،(-1.6Vو سرعة المس ـ ـ ـ ـح ، 0.1 Vs-في النظام المغلق ،يت ـ ــم تشبيع الخليـ ـ ـ ــة
باألوكسجين فائق النقاوة عن طريق الفوران لمدة 15دقي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــقة.
تمت دراسة بعض المحاليل المعيارية لبعض المركبات كل مركب على حدى في النظ ـ ـ ـ ـ ـام (O2 /
حضر محلول أم لكل مستخلص و بتركيز معين ثم دراسته بنفس الطريقة التي اعتمدناها في دراسة
المحاليل المعيارية.
و -طريقة حساب إجمالي القدرة المضادة لأل كسدة I%انطالقا من المنحنيات الفولطا مترية الحلقية
C1 V1
C1 V1 = CT VT = CT )………… (7 - II
VT
يتم تحديد إجمالي الفاعلية المضادة لألكسدة من خالل حساب المقدار ( I)%الذي يمثل النسبة
،)O•−يتم حسابه من خالل القمة المصعدية للفولتاموغرام الحلقي المتغيرة
الالزمة لتثبيط الجذر الحر ( 2
𝑆i0𝑃𝑎 _ i
= )I(% 𝑎𝑃
× 100 )………… (8 - II
𝑎𝑃i0
التحليل اإلحصائي
تم التعبير عن النت ـ ـائج التجريبيـ ـ ـة على شكل متوس ـ ـط حس ـ ـابي ( )Mلكل القي ـ ـم المتحصـ ـ ـ ـل عليـ ـ ـها ( ثالث
2 - IIالنتائج و المناقشة
1 - 2 - IIمردود االستخالص
الجدول :)2 - II( .مردود االستخالص بالنسبة للمستخلصـ ـ ـ ـ ـ ـات RBو RFو مردود استخالص اللبيـ ـ ـ ـ ـ ـدات
RL
نالحظ من خـ ـ ـ ــالل النتـ ــائج الموضحة في الجـ ـ ــدول ( ،)2 - IIاختالف في نسب RLمن صنف إلى
آخر و أنها محصورة ما بين 0.289%و 1.128%لصنف Tnbوصنف DBعلى التوالي ،وجاء ترتيب
األصناف كالتالي:
DB > Tns > Cht > Gh > Tnb
هذه النتائج ال تتوافق مع نتائج توصل لها كل من ، El-Sohaimy and Hafezو الذين وجدوا أن
نسبة اللبيدات في التمر ، % 2.90و ألن الغـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـذاء الصحي هو الغـ ـ ـ ـ ـ ـ ـذاء الذي يح ـ ـ ـ ـ ـ ــوي نسب
منخفض ـ ـ ـ ـ ـ ــة من الدهون ،و ارتفاعها في الجس ـم (الـدم) يعرض الجسم للخطر و يضعه أمام احتم ـ ـال دائم
لإلصـ ـ ـ ـ ـ ـ ـابة بأمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـراض القلب ،و تصلب الشرايين الذي يمكن أن يتطور إلى سكتة دماغيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة أو نوبـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة
قلبيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة [ ،]176و استنادا إلى هذه النتـ ـ ـ ـ ـ ـ ـائج يمكننـ ـ ـ ـ ـ ـ ـا اعتبار األصنـ ـ ـ ـ ـ ـ ـاف المستخدمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة في الدراسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة
بغض النظـ ـ ـ ـ ـ ـ ـر عن باقي مكونـ ـ ـ ـ ـ ـ ـات التمر أنها غير مضـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرة لصحة اإلنسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـان كونها تحتـ ـ ـ ـ ـ ـ ـوي على
نسب منخفضة من الدهـ ـ ـ ـ ـ ـ ـون.
كما نالح ـ ـ ـ ـ ــظ اختـ ـ ــالف في نسـ ـ ـ ـ ــب م ـ ـ ـ ـ ــردود االستخالص من مستـ ـ ـ ــخلص إلى آخ ــر على حس ـ ـ ـ ـ ـ ــب
النظـ ـ ــام ،الصنف و أيضـ ـ ـا طريقة االستخالص ،و الذي تؤكده دراس ـ ـ ـات قـ ـ ـام بها كل من Sultana et al
و ،Siddhuraju and Beckerفقد وجدوا أن كمية المركبات المضادة لألكسدة تتأثر بطريقة االستخالص،
و نوع العينـ ـ ـة و األهم من ذلك تأثيـ ـ ـر األنظمة (المذيبات) فكل نظـ ـ ـ ـ ــام يتميـ ـ ـز بخصائص منها القطبي ـ ـ ـة
و المركبات التي تذوب فيه [ ،]179-177كما نالحظ بدرجة كبيرة الفرق الشاسع بين نسب RBو .RF
-المستخلصات )(B
-المستخلصات )(F
نالحظ أن نسبة ال ـ RFتنحصر ما بين 0.526%و 2.308 %لكل من مستخلص ال ـ Acetone/ H2O
صنف Chtو مستخلص الـ Methanolصنف Tnsعلى التوالي ،و جاء ترتيب نسب ال ـ RFلهذه
المستخلصات وفق الترتيب التالي:
حسب الصنف:
> Tns > Tnb Cht > DB > Gh
حسب النظـ ـ ـ ــام:
Methanol > Methanol / H2O > H2O > Acetone/ H2O : Gh
Methanol / H2O > Methanol > H2O > Acetone/ H2O : Cht
H2O > Methanol / H2O > Acetone/ H2O > Methanol : DB
Methanol > H2O > Methanol / H2O > Acetone/ H2O :Tns
Methanol / H2O > Methanol > H2O > Acetone/ H2O :Tnb
قدرت كميـ ـ ـة المركبـ ـ ـات الفينوليـ ـ ـة باستعمـ ـ ـال المنحنى القيـ ـ ـاسي للـ ـ Gallic acidكما هو موضـ ـ ـح
فـ ـ ـي الشكل ( ، )1 - IIإذ حسبت كمية الـ ـ TPCبالـ ـ ـ mgعلى أساس Gallic acidالمكافئ لكل 100 gمن
الوزن الجاف للتمر).(mg GAE/100g DW
2,0
1,4
االم ت صا ص ية )(725 nm
1,2
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30
)C (mg/ml
الشكل ( :)1 - IIالمنحنى المعياري لالمتصاصية بداللة تركيز حمض الغاليك Gallic acid
انطـ ـ ـ ـ ــالقا من المنحنى المعي ـ ـ ـ ـ ـ ــاري لل ـ Gallic acidو بتطبي ـ ـ ــق الع ـ ـ ـ ـ ــالقة ( )1 - IIنستنت ـ ـ ـ ــج القي ـ ـ ـ ـ ـ ــم المدونة
في الجـ ـ ـ ـ ـ ــدول (.)3 - II
من خالل النتائج الموضحة في الجـ ـ ـ ـدول ( )3 - IIنالحظ اختـ ـ ـ ـالف في كمية TPCمن مستخلص
إلى آخر ،هذا االختـ ـ ـ ـالف تتسبب فيـ ـ ـ ـه عـ ـ ـ ـدة عوامل منها صنف التمـ ـ ـ ـر ،نوع المذيب و طريقة
االستخـ ـ ـ ـالص ،كما نالحـ ـ ـ ـظ الفرق الكبيـ ـ ـ ـر بين كمية TPCBو TPCFهذه النتـ ـ ـ ـائج توافق نتـ ـ ـ ـائج توصل
إليها .]180[ Singh. Negi et al
350
Gh
Cht
300
DB
Ths
250 Tnb
)TPCB (mg/100g
200
150
100
50
0
H2O )Acétone/H2O (7/3) MethOH/H2O (8/2 MethOH
ال نظــــــام
من خـ ـ ـالل النتائج الموضح ـ ـ ـ ـة في الجدول ( )3 - IIو الممثلـة بياني ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـا في الشك ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـل ( )2 - IIنالحظ أن كميــة
الـ ـ TPCBلجميــع األصناف و فـ ـ ـ ــي مخت ـلــف األنظمة تراوح ـ ـ ـ ـ ـ ــت ما بيـ ــن )(84.510-305.550mgGAE/100 g
حيث سجلنا أعلى قيمة لمستخلص Acetone/ H2Oصنف Chtبمقدار ،305.550mgو أدنى قيمة للمستخلص
المائي صنف Tnbبمق ـ ـدار ،84.510 mgحيث رتبت ه ـ ـ ـ ـذه النتائج كالتالي:
بالنسبـة لصنف Cht ،Ghو DBكان ال ـ Acetone/ H2Oأكثر األنظمــة فاعلية يليه الـ ـ Methanol / H2O
ث ـ ـ ـم ال ـ ،Methanolبينم ـ ـا صنف Tnsفق ـ ـد ك ـان أحسنها الـ ـ Methanol / H2Oيلي ـ ـه الـ ـ Acetone/ H2O
الكميـ ــة تنحصـ ــر ما بيـ ـ ــن ) (2.89 -141.35 mg GAE/100 gو ) (2.98 -8.45 mg GAE/100 gعلى
الت ـ ـ ـ ـوالي[ ،]181[]40في حي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـن جاءت أقل من نت ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـائج دراسـ ـ ـ ـ ـة قام بها Benmeddour. Mehinagic et al
و الذين وجدو أن الكمية تنحصر ما بين ).[21] (225.57 - 954.59 mg GAE/100 g
من خـالل نت ــائج الج ـ ــدول ( ،)3 - IIو الممثلة بيانيا في الشكل ( )3 - IIنالحظ أن كمي ـ ــة ال ـ ـ ـ TPCF
لجمي ـ ـ ــع األصناف و فـ ـ ـ ــي مخت ـلــف األنظمة تراوح ـ ــت ما بيـ ـ ــن ) (12.506-42.394mgGAE/100 gحيث
سجلنـ ـ ـ ـا أعلى قيمـ ـ ـ ـة لمستخلص ال ـ Methanolصنف Tnsبمق ـ ـ ـ ـدار .42.394mgوأدنـ ـ ـ ـ ـى قيم ـ ـ ـ ـة
للمستخلص المائي صنف Chtبمق ـ ـ ـ ـ ـدار .12.506 mg
Gh
40 Cht
DB
Tns
Tnb
30
)TPCF(mg/100g
20
10
0
)Aceton/H20(7/3 )MeOH/H2O(8/2 MeOH H2O
ال مذي ب
بالنسب ـ ـ ـ ـة لصنـ ـ ـ ـف Ghك ـ ـ ـ ـان ال ـ Acetone/ H2Oأكثـ ـ ـ ـ ـر األنظمــة فاعليـ ـ ـة يلي ـ ـ ـ ـ ـ ـه ال ـ Methanolثـ ـ ـم
الـ ـ ،Methanol / H2Oبينم ـ ـ ـ ـ ـا صنف Chtو DBفق ـ ـ ـ ـ ـد ك ـ ـ ـ ـ ـان ال ـ Methanol / H2Oأحسنه ـ ـ ـ ـا يلي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـه
ال ـ Acetone/ H2Oثم الـ ـ ، Methanolأم ـا صنف Tnsو Tnbفق ـ ـ ـد كـ ـ ـان ال ـ Methanolأفضلهـ ـ ـ ـا يلي ـ ـ ـ ـ ـ ـه
ال ـ Acetone/ H2Oثم الـ ـ Methanol / H2Oليكون ال ـ H2Oأقل هذه األنظمة فاعلية في االستخالص
88 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
على مستوى كل األصناف .إن النتـائج المتحصل عليـها في ه ـ ـذه الدراسة تختلف عن النت ـ ـائج المتحصل
عليـها فـي دراسـة لـ ـ Ghiaba et alو الذين وجدو أن قيم المحتوى الكلي للمركبات الفينولية الحرة لخمسة
أصنـ ـ ـاف من التمـ ـ ـور الج ـ ـ ـزائرية لمنطقـ ـ ـة ورقل ـ ـ ـ ـ ـة تراوحت ما بي ـ ـ ـ ـن )(41.80 -84.73 mg GAE/100 g
] ،[20و بالتالي فإن المزج بين الماء و المذيبات العضوية يسهل استخراج المواد الكيميائية القابلة للذوبـ ـ ـان
في الم ـ ـاء و المذيبـ ـ ـات العضوية ،لهذا السبب تكون كميـ ـ ـة TPCفي المذيبـ ـ ـات العضوية و الماء مثل:
( ) Methanol / H2O( ، )Acetone/ H2Oأعلى من كمية TPCفي الماء أو . Methanol
قدرت كمية المركبات الفالفونويدية باستعمال المنحنى القياسي للكرسيتين ) (Quercetinكما هو موضح
في الشكل ( ،)4 - IIإذ حسبت كمية الـ ـ TFCبالـ ـ ـ mgعلى أساس الكرسيتين المكافئ لكل 100 gمن
الوزن الجاف للتمر ) ، (mg QE/100 g DWالنتائج مسجلة في الجدول (.)4 - II
0,7
0,4
0,3
0,2
0,1
0,0
0,000 0,002 0,004 0,006 0,008 0,010 0,012 0,014 0,016 0,018 0,020
)C (mg/ml
انطـ ـ ـ ـ ــالقا من المنحنى المعي ـ ـ ـ ـ ـ ــاري للكرسيتين ،وبتطبي ـ ـ ــق الع ـ ـ ـ ـ ــالقة ( )2 - IIنستنت ـ ـ ـ ــج القي ـ ـ ـ ـ ـ ــم المدونة
في الجـ ـ ـ ـ ـ ــدول (.)4 - II
الجدول ( :)4 - IIكمية الـ ـ TFCBو TFCFللمستخلصات Bو المستخلصات Fعلى التوالي
من خالل نت ـ ـائج الج ـ ـدول ( )4 - IIو الممثلة بيانيا في الشكل ( )5 - IIنالحظ أن كمية ال ـ ـ ـ TFCBلجمي ـ ـ ــع
األصناف و ف ـ ــي مختــلـ ـ ـ ـ ــف األنظمة تراوح ــت ما بيـ ـ ـ ـ ــن ) (1.221-19.748mg QE/100 gحيث سجلنـا
أعلى قيم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة لمست ـ ــخلص Acetone/ H2Oصن ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـف Chtبمقدار ،19.748mgو أدنى قيم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة
للمستخلص المائي صنف Ghبمقــدار .1.221mg
22
Gh
20
Cht
18 DB
Ths
16 Tnb
)TFCB(mg/100g 14
12
10
8
6
4
2
0
H2O )Aceton/H20 (7/3) Methanol/H2O (8/2 Methanol
ال نظام
كان الـ ـ Acetone/ H2Oأكثر األنظمة فاعلية في االستخالص في حين كان ال ـ ـ H2Oأقلها فاعلية على
مستوى األصناف الخمسة.
النت ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــائج المتحصل عليـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــها أقل بكثيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــر مـ ـ ـ ــن النتـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــائج الت ـ ـ ــي توصل إليـ ـ ـ ـ ـ ـ ــها كل من
Benmeddour. Mehinagic et alو Masmoudi-Allouche. Touati et alحيث وجـ ـ ـ ـ ـ ــدوا الكمية م ـ ـ ـ ــا بين
) (15.22-299.74 mg QE/100 gو ) (15.15-26.09 mg QE/100 gعلى التوالي ].[21, 182
من خالل نتائج الجدول ( )4 - IIو الممثلة بيانيا في الشكل ( )6 - IIنالحظ أن الكميـة الكليــة للـ ـ ـ TFCF
لجمي ـ ـ ــع األصناف و فـ ـ ـ ــي مخت ـلــف األنظمـــــة تراوحـ ـ ــت ما بين ) (4.798-12.284mg QE/100 gحيث
سجلنا أعلى قيمة لمستخلص Acetone/ H2Oصنف Ghبمق ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـدار .12.284 mgو أدنـ ـ ـ ــى قيمة
للمستخلص الم ـ ـ ـ ـائي لنفس الصنف بمقـ ـ ـدار .4.798 mg
13 Gh
12 Cht
DB
11
Tns
10 Tnb
9
)TFCF (mg/100g
8
7
6
5
4
3
2
1
0
)Aceton/H20 (7/3 )MeOH/H2O (8/2 MeOH H2O
ال نظام
كان Acetone/ H2Oأكثر األنظمة فاعلية في االستخالص في حين كان ال ـ ـ H2Oأقلها فاعلية ،و على
مستوى األصناف الخمسة.
ه ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــذه النت ـ ـ ـ ـ ـ ــائج تتوافق مع نتائج توصلت إليها ،Ghiaba et alو أفض ـ ـ ـ ـ ــل من نت ـ ـ ـ ـ ــائج توص ـ ـ ـ ـ ـ ــل
إليـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــها كل مـ ـ ــن ،Masmoudi-Allouche. Touati et alحيث وج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــدوا أن قي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم TFCتت ـراوح مــا
بين )) (7.552-14.10 Rutin eq mg/100 gو ) (3.00-8.02 mg QE/100 gعلى التوالي [.]182 ,20
1- 4 - 2 - IIالطـــريـــــــقة الكيميــــــائيـــــــــة
يقيس اختبار القوة االختزالية قدرة المضاد لألكسدة على إعطاء إلكترون باستخدام طريقة اختزال
مركب فريسيانيد البوتاسيوم ) (Potassium ferricyanideو هذا بإرجاع الحديد الثالثي ) (Fe+3إلى الحديد
الثنائي ) (Fe+2و ذلك بمنحه إلكترون كما هو موضح في التفاعل (.[183] )1 - II
حيث يتغير لون المزيج من اللون األصفر إلى اللون األخضر و هذا نتيجة إلرجاع الحديد الثالثي )(Fe+3
2
Gh Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
2
Gh Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
1,0
0,9
Gh Methanol;
2
R = 0.99
2
Cht
0,9 Gh H2O; R = 0.99
BHA Ethanol
2
R = 0.99 0,8
2
0,8 BHT Ethanol R = 0.99
Gh 0,7
(700 nm) االم ت صا ص ية
0 ,6 AscA
0,3
A b so rb an ce (7 0 0 n m )
2
0,3 0 ,5
A sc o rb ic a c id Cht Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
0 ,4 2
Cht Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
0 ,3
0,2 0 ,2
y = 0.8933x 0,2 Cht Methanol;
2
R = 0.99
0 ,1 R² = 0.997 Cht H2O;
2
R = 0.99
0,1 0 ,0
0,1 BHA Ethanol
2
R = 0.99
0 ,0 0 ,1 0 ,2 0 ,3 0 ,4 0 ,5 0 ,6 2
C (m M )
BHT Ethanol R = 0.99
0,0
0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
1/n 1/n
0,9
DB 1,2 Tns 2
Tns Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
0,8
2
Tns Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2
0,7 Tns Methanol; R = 0.99
1,0 2
Tns H2O; R = 0.99
(700 nm) االم ت صا ص ية
2
BHA Ethanol R = 0.99
0,6 2
BHT Ethanol R = 0.99
0,8
0,5
0,4 0,6
0,0 0,0
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
1/n 1/n
2
BHA Ethanol R = 0.99
1,0 2
BHT Ethanol R = 0.99
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1
1/n
BHA لألصنـ ـ ـاف الخمسـ ـ ـ ـة و مقارنتها مع الـ ـB أثـ ـ ـ ـ ـر القوة االختزاليـ ـ ـة للمستخلص ـ ـات:)7 - II( الشكل
94 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
1,2 Gh 2
1,2 Cht 2
Gh Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
Gh Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
2 2
Gh Methanol/H2O (8/2);R = 0.99 Gh Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2 2
Gh Methanol; R = 0.99 1,0 Gh Methanol; R = 0.99
1,0 2
Gh H2O;
2
R = 0.99 Gh H2O; R = 0.99
2
BHA Ethanol
2
R = 0.99 BHA Ethanol R = 0.99
2
BHT Ethanol
2
R = 0.99 BHT Ethanol R = 0.99
0,8 0,8
0,6 0,6
0,4
0,7
0,4
0,6 AscA
A bsorbance (700nm )
0,5
A scorbic acid
0,4
0,3
y = 0.8933x 0,2
0,2 0,2
0,1 R² = 0.997
0,0
0,0
C (m M )
0,0
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
1/n 1/n
1,0
DB 1,0 Tns
0,9
0,8
0,8
(700 nm) االم ت صا ص ية
0,7
(700 nm) االم ت صا ص ية
0,6
0,6
0,5
0,4
0,4
2
DB Acetone/H2O (7/3); R = 0.99 2
Tns Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
0,3 2
DB Methanol/H2O (8/2);R = 0.99 2
Tns Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2
0,2 DB Methanol; R = 0.99 Tns Methanol;
2
R = 0.99
DB H2O;
2
R = 0.99
0,2 2
Tns H2O; R = 0.99
2
0,1 BHA Ethanol R = 0.99 BHA Ethanol
2
R = 0.99
2
BHT Ethanol R = 0.99 BHT Ethanol
2
R = 0.99
0,0 0,0
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
1/n 1/n
1,0
Tnb
0,8
(700 nm) االم ت صا ص ية
0,6
0,4
2
Tnb Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
2
T nb Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2
0,2 Tnb Methanol; R = 0.99
2
Tnb H2O; R = 0.99
2
BHA Ethanol R = 0.99
2
BHT Ethanol R = 0.99
0,0
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
1/n
BHA لألصنـ ـ ـ ـ ـاف الخمسـ ـ ـ ـة و مقارنتها مع الـ ـF أثـ ـ ـ ـ ـر القوة االختزالي ـة للمستخلصـ ـ ـ ـات:)8 - II( الشكل
95 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
من خالل الشكلين (( )7 - IIو ( ،))8 - IIنالحظ أن القوة االختزالية لجميع المستخلصات المدروسة تزداد
بزيادة تراكيزها ،وعبر عن هذه القوة بقيم AEACBو AEACFللمستخلصات Bو المستخلصات Fعلى
التوالي ،و المدونة في الجدول ( )5 - IIحيث تبين أن المستخلصات Bتختزل بقوة أيون الحديديك لمركب
فريسيانيد البوتاسيوم إلى صورة أيون الحديدوز مقارنة مع المستخلصـ ـ ـات Fو هذا في صنف ،Chtأما
باقي األصناف فإن قيم AEACمتباينة ،و يمكن أن يفسر هذا بأن المركبات الفينولية المرتبطة باإلضافة
إلى مركبات أخرى عززت زيادة هذه الفعالية.
الجدول ( :)5 - IIقيم AEACBو AEACFللمستخلصات Bو المستخلصات Fعلى التوالي
من خالل نتائج الجدول ( )5- IIو الممثلة بيانيا في الشكل ( )9 - IIنالحظ أن قيم AEACBلمستخلص ــات
جمي ـ ـ ـ ــع األصن ـ ـاف و ف ـ ـ ـ ــي مخت ـلــف األنظمـة تراوحـ ــت م ـا بي ـ ـ ــن ) ، (2.228-11.835 mMحيث سجلنا
أعلى قيمـ ــة لمست ــخلص Acetone/ H2Oصنـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـف Chtبمقـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـدار ،11.835 mMوأدنى قيم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة
للمستخلص الم ـ ـ ـ ـ ـ ـائي صنـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـف Ghبمق ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــدار .2.228 mM
15
H2O
)Acetone/H2O (7/3
)Methanol/H2O (8/2
Methanol
10 Ethanol
)AEAC (mM
5
0
Gh Cht DB Tns Tnb BHT BHA
ال ص نف
Cht > DB > Tns > Tnb > Gh > BHA > BHT
من خالل نتائج الجدول ( )5 - IIو الممثلة بيانيا في الشكل ( )10 - IIنالح ـ ـ ـ ـ ـظ أن قي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم AEACF
للمستخلصات الفينولي ـ ـ ــة الح ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرة لجمي ـ ـ ــع األصن ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـاف وفـ ـ ـ ــي مخت ـلــف األنظمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة تراوحـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــت ما
بيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــن ) (3.540-8.482 mMحيث سجلنا أعلى قيمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة لمستخلص Acetone/ H2Oصنف Gh
بمقـ ـ ـ ـ ــدار ،8.482 mMو أدنى قيمة للمستخلص المـ ـ ـائي لنفس الصنـ ـ ـف بمقدار .3.540 mM
9,0 H2O
8,5
)Acetone/H2O (7/3
8,0
7,5 )Methanol/H2O (8/2
7,0 Methanol
6,5 Ethanol
6,0
5,5
)AEACF (mM
5,0
4,5
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
Gh Cht DB Tns Tnb BHT BHA
ال ص نف
> Gh > Tns > Tnb DB > Cht > BHA > BHT
إن االختالف الموجود في القدرة االرجاعية بين مختلف المستخلصات يمكن أن يكون بسبب اختالف
المركبات الفعالة (المركبات الفينولية) التي تحويها هذه المستخلصات و التي لها القدرة على ذلك ،حيث
أثبت هذا في العديد من الدراسات نذكر على سبيل المثال دراسات قام بها .]181[ Sadeghi et al
2 - 1 - 4 - 2 - IIاختبــــــــــار جـــــــــذر الــ DPPH
.
يتميز الجذر الحر لجزيء ال ـ DPPHباالستقرار ألن له إلكترون واحد مفرد على ذرة واحدة
.
المستقر[ ،]185حيث يعتم ـ ـ ـ ـد مب ـ ـ ـ ـ ـ ـدأ ه ـ ـ ـ ـذا التفاعـ ـ ـ ـ ـ ـل على التغير اللوني لجذر ال ـ DPPHمن اللون
.
البنفسجي الشديد إلى اللون األصفر الفاتح [ .]185 ,184نستعمل لهـ ـ ـذا الغرض مطيافيـ ـ ـة ما فوق البنفسجـ ـ ـي
و المرئي ) ،(UV/Visibleو تقاس االمتصاصية عند طول الموجة .517nm
80 90
Gh Cht
70 80
70
60
60
50
50
40
40 2
2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99 Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
30 2 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99 30 Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2 2
Methanol; R = 0.99 Methanol; R = 0.99
20 2 2
H2O; R = 0.99 20 H2O; R = 0.99
2 2
AAsc R = 0.99 AAsc R = 0.99
10 BHT
2
R = 0.99 10 BHT
2
R = 0.99
2 2
BHA R = 0.99 BHA R = 0.99
0 0
0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 0,45 0,000,020,040,060,080,100,120,140,160,180,200,220,240,260,280,300,320,340,360,38
80 80
DB Tns
70 70
DPPH Scavenging Effects (%)
DPPH Scavenging Effects (%)
60 60
50 50
40 40
2 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99 Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
30 2 30 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99 Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2 2
Methanol; R = 0.99 Methanol; R = 0.99
20 2 20 H2O;
2
R = 0.99
H2O; R = 0.99
2 2
AAsc R = 0.99 AAsc R = 0.99
10 BHT
2
R = 0.99 10 BHT
2
R = 0.99
2 2
BHA R = 0.99 BHA R = 0.99
0 0
0,000,020,040,060,080,100,120,140,160,180,200,220,240,260,280,300,320,340,360,38 0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40
70 Tnb
DPPH Scavenging Effects (%)
60
50
40
2
30 Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2
20 Methanol; R = 0.99
2
H2O; R = 0.99
2
AAsc R = 0.99
10 2
BHT R = 0.99
2
BHA R = 0.99
0
0,000,020,040,060,080,100,120,140,160,180,200,220,240,260,280,300,320,340,360,38
.
إلى مختلف تراكيزDPPH منحنيات بيانية توضح نسب تثبيط جذر ال ـ ـ ـ:)11 - II( الشكل
BHT و ال ـ ـBHA الـ ـ،B المستخلصات
100 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
70 75
Gh Cht
65 70
60 65
DPPH Scavenging Effects (%)
40 45
40
35
35
30 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
30
25 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2
25
20 Methanol; R = 0.99 Methanol;
2
R = 0.99
H2O;
2
R = 0.99
20 2
15 H2O; R = 0.99
AAsc
2
R = 0.99
15 2
10 AAsc R = 0.99
2
BHT R = 0.99 10 BHT
2
R = 0.99
5 BHA
2
R = 0.99 5 2
BHA R = 0.99
0 0
0,000,020,040,060,080,100,120,140,160,180,200,220,240,260,280,300,320,340,360,38 0,000,020,040,060,080,100,120,140,160,180,200,220,240,260,280,300,320,340,360,38
80 DB 70 Tns
70
DPPH Scavenging Effects (%)
60
60
50
50
40
40
2 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99 30 Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
30 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.98 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2 2
Methanol; R = 0.99 20 Methanol; R = 0.95
20 H2O;
2
R = 0.99 H2O;
2
R = 0.99
2 2
AAsc R = 0.99 AAsc R = 0.99
10 BHT
2
R = 0.99
10 2
BHT R = 0.99
2 2
BHA R = 0.99 BHA R = 0.99
0 0
0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 0,000,020,040,060,080,100,120,140,160,180,200,220,240,260,280,300,320,340,360,38
80 Tnb
70
DPPH Scavenging Effects (%)
60
50
40
2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
30 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.94
2
Methanol; R = 0.99
20 H2O;
2
R = 0.99
2
AAsc R = 0.99
10 BHT
2
R = 0.99
2
BHA R = 0.99
0
0,000,020,040,060,080,100,120,140,160,180,200,220,240,260,280,300,320,340,360,38
.
إلى مختلف تراكيزDPPH منحنيات بيانية توضح نسب تثبيط جذر ال ـ ـ ـ:)12 - II( الشكل
BHT و ال ـ ـBHA الـ ـ،F المستخلصات
101 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
انطالقا من الشكلين ( )11 - IIو ( )12 - IIو بتطبيق العالقة ) (5 - IIنستطيع حساب المقادير
المدونة في الجدول (.)6 - II
الجدول ( :)6 - IIقيم BIC50و FIC50للمستخلصات Bو المستخلصات Fعلى التوالي
)BIC50 (mg/ml
لقد أفادت العديد من الدراسات العالقة الطردية بين القدرة المضادة لألكسدة و التركيز الكلي للفينول [، ]186
و يتم التفاعل بالشكل التالي [ ،]187حيث RHمضاد لألكسدة :
N N
N. HN
ثنائي فينيل بكريل الهيد ارزيل(لون بنفسجي) ثنائي فينيل بكريل الهيد ارزين (لون أصفر)
في هذه الدراس ـ ـ ـ ـة تم تقيي ـ ـ ـ ـم القدرة المض ـ ـ ـ ـادة لألكس ـ ـ ـ ـدة على أس ـ ـ ـ ـاس قيمة IC50و المسجلة في
الجدول ( ،)6 - IIمن خ ـ ـ ـ ـالل الج ـ ـ ـ ـدول نالح ـظ أن قي ـ ـ ـ ـم IC50للمستخلصـ ـات )BIC50( Bأق ـ ـ ـ ـل م ـ ـ ـ ـن
قي ـ ـ ـ ـم IC50للمستخلص ـ ـ ـ ـات ،)FIC50( Fهذه القيم محصورة ما بين ) ،(0.400 - 0.077 mg/mlو يمكن أن
يفسر هذا بأن المركبات الفينولية المرتبطة باإلضافة إلى مركبات أخرى عززت هذه الفعالية.
من خالل نتائج الجدول ( )6 - IIو الممثلة بيانيا في الشكل ( )13 - IIنالحظ أن هناك اختالف
في قي ـ ـ ـم ،BIC50حيث سجلنـ ـ ـا أعلى قيم ـ ـ ـة في المستخلص المـ ـ ـائي صن ــف Ghبمق ـ ـدار ،0.368 mg/ml
و أدن ــى قيمة لمستخلص الـ ـ Methanol / H2Oصنف Chtبمقـ ـدار .0.077mg/mlكما نالحـ ـ ـ ـ ـظ أن
صنف Chtكان أكثــر األصنـاف فعالية ،حيث فاقت قدرته المضادة لألكسدة كل من الـ ـ ،BHAال ـ BHT
0,30
0,25
0,20
0,15
0,10
0,05
0,00
Gh Cht DB Tns Tnb BHT BHA AAsc
ال ص نف
من المعلوم أنه كلما كانت قيم BIC50صغيرة كلما كانت الفعالية كبيرة حيث رتبت هذه الفعالية كالتالي:
على مستوى األصناف
Cht > AscA > Tnb > BHA > DB > Tns > Gh > BHT
أما على مستوى األنظمــة و الموضحة في الشكل ( ،)11 - IIفنالحظ أن نسب تثبيط جذر ال ـ ـ DPPH
.
تختلف من صنف إلى آخر ،حيث وجد أن الـ ـ Methanol / H2Oأفضل هذه األنظمــة بينما الـ ـ H2O
أضعفها لكل من صنف Ghو Chtو ، DBفي حين وجد أن ال ـ H2Oأفضلها و الـ ـ Methanolأضعفها
بالنسبة لـصنف ، Tnsأما صنف Tnbفكان أفضلها الـ ـ Acetone/ H2Oو أضعفها الـ ـ . Methanol
من خالل نتائج الجدول ( )6 - IIو الممثلة بيانيا في الشكل ( )14 - IIنالحظ اختالف في قيم
،FIC50حيث سجلنـ ـ ـ ـ ـا أعـ ـ ـ ـ ـلى قيمـ ـ ـ ـ ـة في مستخلص ال ـ Methanol / H2Oصنـ ـ ـ ـ ـف Ghبمقدار
،0.400mg/mlو أدن ـ ــى قيمة في مستخلص الـ ـ Acetone/ H2Oلنفس الصنف بمقدار .0.152mg/ml
H2O
)Acetone/H2O (7/3
0.40
)Methanol/H2O (8/2
0.35
Methanol
0.30
)IC50 DPPH (mg/ml
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0.00
Gh Cht DB Tns Tnb BHT BHA AAsc
ال ص نف
من المعلوم أنه كلما كانت قيم FIC50صغيرة كلما كانت الفعالية كبيرة حيث رتبت هذه الفعالية كالتالي:
على مستوى األصناف
AscA > BHA > Gh > Tnb > Cht > DB > Tns > BHT
.
أما على مستوى األنظمــة و الموضحة في الشكل ( ،)12 - IIفنالحظ أن نسب تثبيط جذر الـ ـ DPPH
تختلف من صنف إلى آخر ،حيث وجد أن الـ ـ Acetone/ H2Oأفضل هذه األنظمــة بالنسبة لصنف Gh
و Chtو ، DBفي حين Tnsو Tnbفكان أفضلها H2Oو Methanol / H2Oعلى التوالي .هناك
عدة دراسات أثبتت قدرة المستخلصات الفينولية للتمر على كسح جذر الـ ـ DPPHمن بينها دراسة قام بها
،Kchaou et alو أخـ ـ ـ ـرى قامت بها Ghiaba et alلستة أصنـ ـ ـ ـاف من التمـ ـ ـ ـور التونسية لمنطقـ ـ ـ ـة تـ ـ ـ ـوزر
و خمسـ ـ ـ ـة أصناف من التمـ ـ ـ ـور الجزائرية لمنطقـ ـ ـ ـة ورقلة على التـ ـ ـ ـوالي [ ،]42 ,20هـ ـ ـ ـذه الدراسات توافق
دراستنـ ـ ـ ـا و يبقى االختـ ـ ـ ـالف في درجة الكسـ ـ ـ ـح ،فقد وجـ ـ ـ ـدت Ghiaba et alأن نسبـ ـ ـ ـة IC50محصـ ـ ـ ـورة
ما بين ) ،(0.011-0.021 mg/mlوهي أقل من النتـ ـ ـ ـائج المتحصل عليها في دراستنـ ـ ـ ـا و بالتـ ـ ـ ـالي أفضـ ـ ـ ـل
قـ ـ ـ ـدرة على الكس ـ ـ ـ ـ ـح ،أما Masmoudi-Allouche et alفقد وج ـ ـ ـ ـ ـدوا أن قي ـ ـ ـ ـ ـم IC50محصـ ـ ـ ـ ـ ـورة ما بين
) ،]182[ (0.089-0.123 mg/mlو هي أكبر من القيم المتحصل عليها في دراستنا ،خاصة في صنف ،Cht
.
و بالتالي صنف Chtأكثر األصناف قدرة مضادة لألكسدة ( كسح جذر الـ ـ ـ ) DPPHمقارنة باألصناف
المدروسة األخرى.
3 - 1 - 4 - 2 - IIاختبــــــــــار إرجـــــــاع الموليبـــــــدات )Mo (VI
ه ـ ـ ـو اختب ـ ـ ـ ـار سري ـ ـ ـع و منخف ـ ــض التكلفـ ــة و سهـ ـ ــل التكـ ـ ـرار ،يسم ـ ــح بقيـ ـ ـاس القـ ـ ـ ـدرة المضـ ـ ـادة
لألكس ـ ـ ـدة للمستخلصات المراد دراستها ،حيث يعتم ـ ـ ـ ــد المبـ ـ ـ ـ ــدأ األسـ ـ ـ ـ ـ ــاسي لتقيي ـ ـ ـ ـ ـ ــم القـ ـ ـ ــدرة المضـ ـ ــادة
على إرجـ ـ ـ ـ ـ ـ ــاع ) Mo (VIإلى ) Mo (Vبواسطة لألكسـ ـ ـ ــدة في اختب ـ ـ ـ ـ ــار phosphomolybdenum
المستخلص ـ ــات النباتي ـ ــة التي تحت ـ ــوي على المركبـ ــات المضـ ــادة لألكسـ ــدة لتشكيل معقد أخض ـ ــر
في pHحامضي (وسط حامضي) ،و هي تقييم لمجم ــوع مضــادات []189 ,188
)))phosphate/Mo(V
4,5 2
3,8
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
2 Gh 3,6 Cht
4,0 Methanol/H O (8/2);R = 0.99
2 3,4
Methanol;
2
R = 0.99 3,2
H2O;
2
R = 0.99 3,0
3,5
2,8
2,6
3,0
2,4
2,2
2,5 2,0
1,8
1,2
2,0 1,6
y = 0,9498x + 0,0401
1,0 1,4
R² = 0,99
(nm) االم ت صا ص ية
1,5 0,8
1,2
1,0 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
1,0
0,6 Ascorbic Acid
0,8 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
0,4
AscA 0,6 2
Methanol; R = 0.99
0,4
0,5 0,2 H2O;
2
R = 0.99
0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 0,2
mMيز ال ترك 0,0
0,0
0,0000,0010,0020,0030,0040,0050,0060,0070,0080,0090,0100,0110,0120,0130,0140,015
0,0000,0020,0040,0060,0080,0100,0120,0140,0160,0180,0200,0220,0240,0260,0280,0300,032
1/n
1/n
3,6 2 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99 Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
3,4 Cht
Methanol/H O (8/2);R
2
= 0.99
DB 4,0 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
Tns
3,2 2
2 2
3,0 Methanol; R = 0.99 Methanol; R = 0.99
2
3,5 2
2,8 H2O; R = 0.99 H2O; R = 0.99
2,6 3,0
(695 nm)االم ت صا ص ية
2,4
2,2
2,5
2,0
1,8
2,0
1,6
1,4
1,2 1,5
1,0
0,8 1,0
0,6
0,4 0,5
0,2
0,0 0,0
0,000 0,002 0,004 0,006 0,008 0,010 0,012 0,014 0,016 0,000 0,002 0,004 0,006 0,008 0,010 0,012 0,014
1/n 1/n
5 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2 Tnb
2
Methanol; R = 0.99
4 H2O;
2
R = 0.99
(695 nm)االم ت صا ص ية
0
0,0000,0010,0020,0030,0040,0050,0060,0070,0080,0090,0100,0110,0120,0130,0140,0150,0160,0170,018
1/n
ألصناف التمر المدروسة في اختبارB أثر القوة المضادة لألكسدة للمستخلصات:)15 - II( الشكل
إرج ـ ـ ــاع الموليب ـ ـ ــدات
106 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
2 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99 3,4 Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
3,5 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
Gh 3,2 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
Cht
Methanol;
2
R = 0.99 3,0 Methanol;
2
R = 0.99
3,0 H2O;
2
R = 0.99 2,8 H2O;
2
R = 0.99
2,6
2,4
2,5
2,2
2,0
2,0 1,8
1,2
1,6
y = 0,9498x + 0,0401 1,4
1,5 1,0
R² = 0,99
1,2
(nm) االم ت صا ص ية
0,8
1,0
1,0 0,6 Ascorbic Acid
0,8
0,4
AscA 0,6
0,5 0,4
0,2
0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2
1/n 1/n
3,0 2 3,0 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99 Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
2,8 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
DB 2,8 2
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
Tns
2,6 2 2,6 Methanol;
2
R = 0.99
Methanol; R = 0.99
2
2,4 H2O;
2
R = 0.99 2,4 H2O; R = 0.99
2,2 2,2
(695 nm)االم ت صا ص ية
2,0 2,0
1,8 1,8
1,6 1,6
1,4 1,4
1,2 1,2
1,0 1,0
0,8 0,8
0,6 0,6
0,4 0,4
0,2 0,2
0,0 0,0
0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11
1/n 1/n
4,5 2
Acetone/H2O (7/3); R = 0.99
Methanol/H2O (8/2);R = 0.99
2 Tnb
4,0
2
Methanol; R = 0.99
2
3,5 H2O; R = 0.99
(695 nm)االم ت صا ص ية
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12
1/n
ألصناف التمر المدروسة في اختبارF أثر القوة المضادة لألكسدة للمستخلصات:)16 - II( الشكل
إرج ـ ـ ــاع الموليب ـ ـ ــدات
107 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
انطالقا من الشكلين ( )15 - IIو ( )16 - IIو بتطبيق العالقة ) (6 - IIنستطيع حساب المقادير المدونة في
الجدول (.)7 - II
) TACB ( mM
النظام
Methanol/ H2O Acetone/H2O
H2O Methanol
)(8/2 )(7/3
الصنف
162.321±25.489 206.667±2.514 226.522±4.744 179.501±1.739 Gh
288.885 ±7.951 178.914±9.865 215.075±5.606 198.916±6.651 Cht
291.135±16.686 112.501±0.814 90.725±10.535 89.717±3.0792 DB
348.042±6.860 345.536±7.798 242.240±6.049 145.855±7.021 Tns
281.561±24.831 315.921±26.184 210.779±11.659 200.000±8.039 Tnb
0.881±0.074 BHT
0.869±0.065 BHA
) TACF ( mM
النظام
Methanol/ H2O Acetone/H2O
H2O Methanol
)(8/2 )(7/3
الصنف
5.639±0.096 26.648±0.526 21.982±40.985 26.139±1.547 Gh
10.241±0.148 29.790±0.224 70.782±3.550 8.682±0.145 Cht
11.168±0.673 8.686±0.521 23.942±0.780 12.669±0.104 DB
6.830±0.378 31.114±1.129 33.974±0.161 29.315±0.881 Tns
6.041 ±0.190 27.281±0.889 65.256±5.450 13.438±0.071 Tnb
0.881±0.074 BHT
0.869±0.065 BHA
في هذه الدراسة تم اعتماد حمض األسكوربيك كمعيار مرجعي ،ال ـ BHAو ال ـ BHTكشواهد
مرجعية .من خالل الجدول ( )7 - IIنالحظ أن جميع المستخلصات تملك قدرة مضادة لألكسدة (إجمالي
القدرة المضادة لألكسدة )TACو التي تختلف من مستخلص إلى آخر ،فنجد قيم إجمالي القدرة المضادة
لألكسدة للمستخلصات الفينولية المرتبطة و الحرة TACBأعلى من قيم إجمالي القدرة المضادة لألكسدة
للمستخلصات الفينولية الحرة ،TACFهذه القيم محصورة ما بين ) ،(5.639-348.042 mMو هذا يمكن أن
يفسر على أن المركبات الفينولية المرتبطة باإلظافة إلى مركبات أخرى موجودة في المستخلصات B
380
360 )Acetone/H2O (7/3
340 )Methanol/H2O (8/2
320 Methanol
300 H2O
280 Ethanol
260
240
)TACB (mM
220
200
180
160
140
120
100
80
60
40
20
0
Gh Cht DB Tns Tnb BHT BHA
ال ص نف
Tns > Tnb > DB > Cht > Gh > BHT > BHA
أمـ ـ ـا على مستـ ـ ـوى األنظمة و الممثلة في الشكل ( )15 - IIفنالحظ التن ـ ـاسب الطردي بي ـ ـن االمتصـ ـاصية
و تركيز المستخلصات ،و أن أفضل المستخلصات هو المستخلص المائي لكل من Chtو DBو ،Tns
أما صنف Ghو Tnbفقد كان أفضلها ال ـ Methanol / H2Oو ال ـ Methanolعلى التوالي.
من خالل نتائج الجدول ( )7 - IIو الممثلة بيانيا في الشكل ( )18 - IIنالحظ تبـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــاين فـ ـ ـ ـ ــي
قيـ ـ ـ ـ ـ ـ ــم ،TACFحي ـ ـ ـ ـ ــث سجلنا أعلى قيمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة فـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــي مستخلص ال ـ Methanol / H2Oصنـ ـ ـ ـ ـ ـ ــف Cht
بمق ـ ـ ـ ـ ـ ــدار ،70.782 mMو أدنى قيمة في المستخلص المائي صنف Ghبمقدار .5.639 mM
80
75 )Acetone/H2O (7/3
)Methanol/H2O (8/2
70
Methanol
65 H2O
60 Ethanol
55
50
)TACF (mM
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
Gh Cht DB Tns Tnb BHT BHA
ال ص نف
Cht > Tnb > Tns > Gh > DB > BHT > BHA
أمـ ـ ـا على مستـ ـ ـ ـوى األنظمة و الممثلة في الشكل ( )16 - IIفنالحظ التناسب الطردي بي ـ ـن االمتص ـ ـاصي ـ ـة
و تركيز المستخلصات ،كما نالحـ ـ ـظ أن مستخلص ال ـ Methanol / H2Oأفضل األنظم ـ ـ ـة ألصنـ ـ ـ ـ ـاف
Tns ،DB ،Chtو ،Tnbأما صنف Ghفقد كان ال ـ Methanolأفضلها ،هذه النتائج تتوافق إلى حد
كبيـ ـ ـ ـر مع النتـ ـ ـ ـائج التي توصلت إليها الباحثة غ .زينب في دراستها التحليلية لفينوالت بعض أصناف
نخيل التمر [ ،]29حيث وجـ ـ ـ ـدت القيـ ـ ـ ـم محص ـ ـ ــورة ما بيـ ـ ـ ـن ).(17.491-71.691 mM
4 - 1 - 4 - 2 - IIعالقــــــــة االرتبــــــــاط
في الطريقة الكيميائية اعتمدنا ثالث اختبارات لدراسة الفاعلية المضادة لألكسدة للمستخلصات B
و المستخلصات ،Fو من خالل عالقة االرتباط نحاول معرفة العالقة بين TPCو ،TFCو العالقة بين
TPCو االختبارت المضادة لألكسدة الثالثة ،و العالقة بين TFCو االختبارت المضادة لألكسدة الثالثة.
من خ ـ ـ ــالل النتائج الموضحة في الشكلين ( )22 - IIو ( )23 - IIنالحظ وجود ارتباط خطي موجب بين
TPCو ،TFCو بين TPCو االختبارت المضادة لألكسـ ـ ــدة ،و بين TFCو االختبارت المضادة
لألكسـ ـ ــدة ،و قيم عالقة االرتباط ) (R2محصورة بين 0.000و ، 0.976بحيث القي ـ ـ ـم المحصورة بين 0.000
و 0.326تكون عالقة االرتب ـ ـ ـاط ضعيفة ،و القي ـ ـ ـم المحصورة بين 0.416و 0.693تكون عالقة االرتباط
متوسطة ،و القي ـ ـ ـم المحص ـ ـ ـورة بين 0.706و 0.976تكون عالقة االرتب ـ ـ ـاط جي ـ ـ ـدة ،و يمكن التعبير عنها
بالشكل التالي:
-1المستخلصــــــــات B
0,13 )Acetone/H2O (7/3 R² = 0,976
Methanol/H2O (8/2) R² = 0,902
0,12
Methanol R² = 0,188
0,11 H2O R² = 0,796
0,10
0,09
0,08
)TFCB (mg/ml
0,07
0,06
0,05
0,04
0,03
0,02
0,01
a
0,00
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6
)TPCB (mg/ml
)AEAC B(mM
7
7
6
6
5
5
4
4
3
3
2
2
1
1 b
0
0
0,00 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,13
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6
)TFCB (mg/ml
)TPCB (mg/ml
0,40 0,40
Acetone/H2O (7/3) R² = 0,416 )Acetone/H2O (7/3 R² = 0,301
0,38
0,38
0,36 'c
Methanol/H2O (8/2) R² = 0,800
0,36 c Methanol/H2O (8/2) R² = 0,614
Methanol R² = 0,919 0,34 Methanol R² = 0,104
0,34 H2O R² = 0,195 H2O R² = 0,003
0,32
0,32 0,30
0,30 0,28
0,28 0,26
0,26 0,24
0,22
0,24
0,20
0,22 0,18
0,20 0,16
0,18 0,14
0,16 0,12
0,10
0,14
0,08
0,12 0,06
0,10 0,04
0,08 0,02
0,06 0,00
0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,13 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6
)TACB (mM
200 200
180 180
160 160
140 140
120 120
100 100
80 80
Acetone/H2O (7/3) R² = 0,043
60 60
Methanol/H2O (8/2) R² = 0,000
40 40
20 Methanol
H2O
R² = 0,178
R² = 0,627
20 d
0 0
0,00 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,13 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6
توج ـ ـ ـد عالق ـ ـ ـة ارتبـ ـ ـاط جي ـ ـ ـ ـدة بي ـ ـ ـن TPCBو TFCBبالنسب ـ ــة للنظـ ــام )( acetone / H2O) (7/3
و ) ،(methanol/H2O) (8/2و ضعيفة في كل من absolute methanolو الم ــاء ،H2Oهذا يدل على
أن تركيز TPCBو TFCBيكون عالي عند المزج بين المذيب العضوي و الماء ،كما يدل على أنه توجد
مركبات فينولية أخرى غير المركبــات الفالفونويديـة في المستخلصـات المدروســة.
توجـ ـ ـ ـ ـ ــد عـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــالقة ارتبـ ـ ـ ـ ـ ــاط جي ـ ـ ـ ـ ــدة بيـ ـ ـ ـ ـ ـ ــن TPCBو قي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم AEACBفـ ـ ـ ـ ــي كـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــل م ـ ـ ـ ـ ـ ـن
مسـ ـ ـ ـ ـتخلص الـ ـ ) ( acetone / H2O) (7/3و ال ـ ) ، (methanol/H2O) (8/2و متوسط ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة ف ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـي
مسـ ـ ـ ـ ـتخلص الـ ـ ، absolute methanolو ضعيفة في مستخلص الـ ـ ،H2Oفي حين جاءت عالقة االرتباط
جي ـ ــدة بي ـ ــن TFCBو قيم AEACBفـ ـ ــي مستخلص الـ ـ ) ،( acetone / H2O) (7/3و متوسطـ ـ ـة فـ ـ ـي
مستخلص ال ـ ) ، (methanol/H2O) (8/2و ضعيفة في مستخلص الـ ـ absolute methanolو مستـ ـ ـ ـ ـخلص
الـ ـ ،H2Oو يفسر هذا بأن المزج بين المذيب العضوي و الماء يعزز زيادة هذه الفعالية ،كما يـدل هـذا
على أنه توجد مركبات فينوليـة موج ـودة في مستخلصات عن غيـرها لها القـدرة على اإلرجـاع ،و بأنه توجـد
مركبـات فينولية غي ـر الفالفونويـدات لها قـ ـدرة إرجاعيـة كذلك ،و هذه النتـائج تتفق مع نت ـ ـ ـائج توص ـ ـل لها
.]40[ Biglari. AlKarkhi et al
توجـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــد عالق ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة ارتب ـ ـ ـ ـ ــاط مت ـ ــوسـ ـ ـ ـ ـطة بي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــن TPCBو قي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــم BIC50فـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـي مسـ ـ ـ ـ ـتخلص
الـ ـ ) ، (methanol/H2O) (8/2و ضعيف ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة فـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـي مستخلصـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـات الـ ـ )،( acetone / H2O) (7/3
الـ ـ absolute methanolو الـ ـ ،H2Oأما عالقة االرتباط بين TFCBو قيـ ـ ــم .BIC5فقد ج ـ ـ ـ ـ ـاءت متوسطة
فـ ـ ــي مستخلص الـ ـ ) ، (methanol/H2O) (8/2و ضعيفة في مستخلص ـ ـ ـ ـ ـات الـ ـ )، ( acetone / H2O) (7/3
الـ ـ absolute methanolو مستخلص الـ ـ ،H2Oو ه ـ ــذا ي ـ ــدل على أنه باإلضافة إلي وجود الفالفونويدات
في مستخلص الـ ـ ) (methanol/H2O) (8/2هنـ ـ ـاك مركبـ ـ ـات فينوليـ ـ ـة أخ ـ ـرى مسـ ـ ـ ـؤولة عن كسـ ـ ـ ـح جذر
الـ ـ DPPHمثل :الكومارينات و التي أثبت وجودها في اختبارات الكشف الكيميائي.
.
توجـ ـ ــد عالقـ ـ ــة ارتبـ ـ ــاط ضعيفة بيـ ـ ــن TPCBو قيـ ـ ــم TACBفـ ـ ــي كل المستخلصات و هذا يدل على أن
النوعية هي التي أثرت و ليس الكمية ،بدليل أن المستخلص المائي بالرغم من أنه األقل تركيز لكنه
األكثر فعالية ،نفس الشيء بالنسبة لعالقة االرتباط بين TFCBو قيـ ـ ــم TACBباستثناء مستخلص الـ ـ H2O
التي كانت العالقة فيه متوسطة ،و يمكن أن يفسر ذلك بأن المركبات الفينولية العالية القطبية بصفة عامة
و المركبات الفالفونويدة بصفة خاصة هي المسؤول عن هذه القدرة المضادة لألكسدة.
-2المستخلصات F
0,26
0,24 a
0,22
0,20
0,18
0,16
)TFCF (mg/ml
0,14
0,12
0,10
0,08
0,06 2
)Acetone/H2O (7/3 R = 0.072
0,04 2
Methanol/H2O (8/2) R = 0.041
2
0,02 Methanol R = 0.621
2
H2O R = 0.001
0,00
0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 0,55 0,60 0,65 0,70 0,75 0,80 0,85
)TPCF(mg/ml
6,5
AEACF (mM)
5,0
4,5 6,0
4,0
3,5 5,5
3,0
5,0
2,5
2,0 4,5
1,5 Acetone/H2O (7/3) R² = 0,468
Methanol/H2O (8/2) R² = 0,092 4,0
1,0
0,5 Methanol R² = 0,211 3,5
b
H2O R² = 0,008
0,0
0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24 0,26 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 0,55 0,60 0,65 0,70 0,75 0,80 0,85
0,42 0,42
Acetone/H2O (7/3) R² = 0,069 2
Acetone/H2O (7/3) R = 0.706
0,40
0,38
c' Methanol/H2O (8/2) R² = 0,733
Methanol R² = 0,050
0,40
c 2
Methanol/H2O (8/2) R = 0.449
0,38 2
H2O R² = 0,182 Methanol R = 0.144
0,36 0,36 2
H2O R = 0.672
0,34 0,34
0,32 0,32
FIC50 (mg/ml)
FIC50 (mg/ml)
0,30 0,30
0,28 0,28
0,26 0,26
0,24 0,24
0,22 0,22
0,20 0,20
0,18 0,18
0,16 0,16
0,14 0,14
0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24 0,26 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 0,55 0,60 0,65 0,70 0,75 0,80 0,85
75 75
Acetone/H2O (7/3) R² = 0,289 Acetone/H2O (7/3) R² = 0,812
70 70
65
Methanol/H2O (8/2) R² = 0,234
Methanol R² = 0,472 65
Methanol/H2O (8/2) R² = 0,251
Methanol R² = 0,809
d
H2O R² = 0,000 H2O R² = 0,224
60 60
55 55
50 50
45 45
TACF (mM)
TACF (mM)
40 40
35 35
30 30
25 25
20 20
15 15
10 10
5 d' 5
0 0
0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24 0,26 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 0,55 0,60 0,65 0,70 0,75 0,80 0,85
114 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
توجد عالقة ارتباط متوسطة بين TPCFو TFCFفي ال ـ ـ ، absolute methanolو ضعيفة في
كل من ال ـ ـ ) ، ( acetone / H2O) (7/3الـ ـ ) (methanol/H2O) (8/2و الم ــاء ،H2Oو هذا يدل على أن
تركيز المركبات الفينولية و الفالفونويدية يختلف من نظـ ــام إلى آخر ،كما يدل على أنه توجد مركبات
أخرى غير المركبــات الفالفونويديـة في المستخلصـات المدروســة.
توج ـ ــد عالقة ارتب ـ ـ ــاط جي ـ ــدة بي ـ ــن TPCFو قيم AEACFفـ ـ ــي مستخلص الـ ـ ،H2Oومتوسطـ ـ ـة
فـ ـ ـي مستخلص الـ ـ ) ( acetone / H2O) (7/3و مستخلص الـ ـ ، absolute methanolو ضعيفة في
مستخلص الـ ـ ) ، (methanol/H2O) (8/2في حين جاءت عالقة االرتباط متوسطة بي ـ ــن TFCFو قيم
AEACFفـ ـ ــي مستخلص الـ ـ ) ،( acetone / H2O) (7/3و ضعيفة في باقي المستخلصات ،و هذا يدل
على أنه توجد مركبات فينولية موجودة في مستخلصات عن غيرها لها القدرة على اإلرجاع ،كما أنه توجد
مركبات فينولية غير الفالفونويدات لها قدرة إرجاعية كذلك.
توجــد عالقـ ـة ارتب ــاط جيــدة بيــن TPCFو قيم FIC50فـي مستخلص الـ ـ )،( acetone / H2O) (7/3
و متوسطـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة ف ـي مستخلصـ ـ ـ ـات الـ ـ ) (methanol/H2O) (8/2و ال ـ ـ ، H2Oو ضعيفـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة في مستخل ـ ـ ـ ـ ـ ـص
الـ ـ ،absolute methanolأما عالقة االرتباط بين TFCFو قيـ ـ ــم FIC50فقد جـ ـ ـ ـ ــاءت جي ـ ـ ـ ــدة فـ ـ ــي
مستخلص الـ ـ ) ، (methanol/H2O) (8/2و ضعيفة في باقي المستخلصات ،و يمكن أن يفسر هذا بأن
المزج بين المذيب العضوي و الماء عزز زيادة هذه الفعالية ،كما يمكن أن ي ـ ــدل هذا بأن الفالفونويدات
في مستخلص الـ ـ ) (methanol/H2O) (8/2هي المسؤولة عن كسح جذر ال ـ ، DPPHأما باقي
.
المستخلصات فاحتمال أن ترجع المسؤولي ـ ـ ـ ـة إلي مركبات فينولي ـ ـ ـ ـة أخرى عدا الفالفونوي ـ ـ ـدات مثل:
األحماض الفينوليـ ـ ـة أو الكومارين ـ ـ ـات ،هذه األخي ـ ـ ـ ـرة أثبت وجودها في اختبارات الكشف الكيميائي.
توجــد عالقـة ارتباط جيــدة بيـن TPCFو قي ـ ــم TACFفي كل من مستخلص الـ ـ )( acetone / H2O) (7/3
و مستخلص الـ ـ ، absolute methanolو ضعيفة في باقي المستخلصات ،أما بالنسبة لعالقة االرتباط بين
TFCFو قيـ ـ ــم TACFفقد جاءت متوسطة في مستخلص الـ ـ ، absolute methanolو ضعيفة في باقي
المستخلصات.
2- 4 - 2 - IIالطـــريـــــــقة الكهروكيميــــــائيـــــــــة
1 - 2 - 4 - 2 - IIفولتاموغرام الكسجيــــــــن ) 𝟐
(𝐎𝟐 /𝐎•−
قمنا بتحدي ـ ـ ـ ـد مجـ ـ ـال الكهروفعالية للكهروليت المسـ ـ ـ ـاعد مع المذيب حيث ح ـ ـ ـدد المج ـ ـال من 0 V
150
100
.- O2+ é
O2
50
0
] I [µA/cm
2
-50
-100
.-
O2 O2 + é
-150
-200
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
]E [V/SCE
الشكل ( :)21 - IIفولتاموغرام النظام ( O2/ O2•−الفولتاموغرام ) في وسط DMF + 0.1M Bu4NPF6
قمنا بتسجيل المخططات الفولطامترية إلرج ـ ـ ـ ــاع O2بوجـ ـ ــود المحاليل المعيارية بهـ ـ ــدف تقييـ ـ ــم
.O•−نالحظ أن الزيادة في تركيز المحاليل العيارية تؤدي إلى
قدرتهـ ـ ـ ــا المض ـ ـ ــادة لألكسـ ـ ـ ــدة ألسـ ـ ـ ــر الجذر 2
100 100
50 50
AscA
0 0
]I [µA/cm2
]I [µA/cm2
-50 -50
0,0 ml 0,0 ml
0,2 ml GA 0,1 ml
0,3 ml 0,2 ml
-100 0,4 ml -100 0,3 ml
0,5 ml
0,4 ml
0,6 ml
0,5 ml
0,7 ml
-150 0,6 ml
1,0 ml -150
0,7 ml
1,1 ml
1,0 ml
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
]E[V/SCE
]E[V/SCE
وجود تراكيز مختلفة من حمض السكوربيك AscA وجود تراكيز مختلفة من حمض الغاليكGA
)(𝐎𝟐 /𝐎•−
3 - 2 - 4 - 2 - IIفولتاموغرام العينات ( تأثيـــــــر العينــــــات على النظـــــــام ) 𝟐
تم في هذه الدراسـ ـ ـة اختيـ ـ ـار نظام واحد الذي هو الـ ـ ) (Methanol/H2O) (8/2للمستخلص ـ ـ ـات B
و المستخلصات ،Fأي دراسة عشر مستخلصات و مقارنتها بنفس الطريقة المتبعة في المحاليل
المعيارية ،تم تسجيل المخطط ـ ـ ــات الفولطامترية إلرج ــاع O2بوجـ ـ ــود المستخلصـ ـ ــات الفينوليـ ـ ــة للحمي ـ ـ ــة
.O•−و انطالقا من النتائج الحظنا
التم ـ ـ ـ ــر بهـ ـ ــدف تقييـ ـ ــم قدرتهـ ـ ـ ــا المض ـ ـ ــادة لألكسـ ـ ـ ــدة ألسـر جذر الـ ـ 2
O•−في
أن الزي ـ ـ ـ ـادة في تركيز المستخلصات الفينولي ـ ـ ـة يؤدي إلى انخفاض في كثافة التيار األنودي لـ ـ 2
حين ال يوجد تغيير ملحوظ في كثافة التيار الكاتودي لــ O2خاصة في المستخلصات ،Fكما هو موضح
في الشكل ( )24 - IIو الشكـ ـ ـ ـ ـل ( ،)25- IIكما نالحظ أن مفعول المستخلصات Bفي خفض كثافة التيار
O•−أعلى بكثير من المستخلصات .F
األنودي و بمعنى آخر قدرتها المضادة لألكسدة في أسـ ـ ـ ــر الجذر 2
150 150
100 100
50 50
0 Gh 0 Cht
I [µA/cm ]
2
I [µA/cm ]
2
0,0 ml 0,0 ml
-50 0,2 ml -50 0,2 ml
0,6 ml 0,6 ml
1,0 ml 1,0 ml
-100 1,4 ml -100 1,4 ml
1,8 ml 1,8 ml
2,2 ml 2,2 ml
-150 2,6 ml -150 2,6 ml
3,0 ml 3,0 ml
3,6 ml 3,6 ml
-200 3,8 ml -200 3,9 ml
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2 -1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
E [V/SCE] E [V/SCE]
150 150
100 100
50 50
DB Tns
0 0
I [µA/cm ]
2
I [µA/cm ]
2
0,0 ml 0,0 ml
-50 0,2 ml -50 0,2 ml
0,6 ml 0,6 ml
1,0 ml 1,0 ml
-100 1,4 ml -100 1,4 ml
1,8 ml 1,8 ml
2,2 ml 2,2 ml
-150 2,6 ml -150 2,6 ml
3,0 ml 3,0 ml
3,6 ml 3,6 ml
-200 3,8 ml -200 3,8 ml
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2 -1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
E [V/SCE] E [V/SCE]
150
100
50
0 Tnb
I [µA/cm ]
2
0,0 ml
-50 0,2 ml
0,6 ml
1,0 ml
-100 1,4 ml
1,8 ml
2,2 ml
-150 2,6 ml
3,0 ml
3,6 ml
-200 3,8 ml
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
E [V/SCE]
لجميعB بوجود تراكيز مختلفة من المستخلصاتO2 /O2•− منحنى الفولطامتري للنظام:)24 - II( الشكل
.0.1Vs بسرعة، على إلكترود من الفحم الزجاجيDMF + 0.1M Bu4NPF6 في وسط،األصناف
-
118 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
150 150
100 100
50 50
Gh Cht
0 0
I [µA/cm ]
I [µA/cm ]
2
2
0,0 ml 0,0 ml
-50 0,1 ml -50 0,1 ml
0,4 ml 0,6 ml
0,8 ml 1,0 ml
-100 1,2 ml -100 1,4ml
1,6 ml 1,8ml
2,0 ml 2,3 ml
-150 2,6 ml -150 3,0ml
3,0 ml 3,3 ml
3,6 ml 3,6 ml
3,9 ml -200 3,9 ml
-200
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2 -1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
E [V/SCE] E [V/SCE]
150 150
100 100
50 50
DB Tns
0 0
I [µA/cm ]
I [µA/cm ]
2
0,0 ml
-50 0,0 ml
0,1 ml -50 0,1 ml
0,6 ml
0,6 ml
1,0 ml
1,0 ml
-100 1,4ml -100 1,4ml
1,8ml
1,8ml
2,3 ml
2,3 ml
-150 3,0ml
-150 3,0ml
3,3 ml
3,3 ml
3,6 ml
3,6 ml
-200 3,9 ml
-200 3,8 ml
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2 -1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
E [V/SCE] E [V/SCE]
150
100
50
Tnb
0
I [µA/cm ]
0,0 ml
2
0,2 ml
-50 0,6 ml
1,0 ml
1,4 ml
-100 1,8 ml
2,2 ml
2,6 ml
-150 3,0 ml
3,4 ml
3,6 ml
-200 3,8 ml
-1,8 -1,6 -1,4 -1,2 -1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2
E [V/SCE]
لجميعF بوجود تراكيز مختلفة من المستخلصاتO2 /O2•− منحنى الفولطامتري للنظام:)25 - II( الشكل
.0.1Vs- بسرعة، على إلكترود من الفحم الزجاجيDMF + 0.1M Bu4NPF6 في وسط،األصناف
119 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة لألكسدة الفصل الثاني
انطالقا من الشكلين ( )24 - IIو ( )25 - IIو بتطبيق الع ـ ـ ـالقة ) (8 - IIنستطي ـ ـع رسم المنحني ـ ـ ـات الممثلة
في الشكلين ( )26 - IIو ( )27 - IIعلى التوالي.
18
Gh (y = 221,13x + 3,6336 )R² = 0,994 60
16 Cht (y = 362,67x + 3,8349 )R² = 0,995 55
DB (y = 374,8x + 1,4261 )R² = 0,995
14 Tns (y = 404,98x + 0,8325 )R² = 0,966 50
Tnb(y = 376,26x + 3,2394 )R² = 0,994 45
12 AAsc (y = 5410,9x - 7,4939 )R² = 0,994
40
GA (y = 4221,1x )R² = 0,993
10 35
I%
I%
30
8
25
6 Gh (y = 3244,6x + 21,436 )R² = 0,975
20
Cht (y = 7709,2x )R² = 0,991
4 15 DB (y = 3635,9x + 5,811 )R² = 0,999
10 Tns (y = 6401,1x + 3,1403 )R² = 0,994
2 Tnb (y = 3231,5x + 22,742 )R² = 0,994
5 AAsc (y = 5410,9x - 7,4939 )R² = 0,994
0 0 GA (y = 4221,1x )R² = 0,993
0,000 0,002 0,004 0,006 0,008 0,010 0,012 0,014 0,016 0,018 0,020 0,000 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 0,006 0,007 0,008 0,009 0,010 0,011 0,012
الشكل ( :)27 - IIمنحنيات بيانية توضح نسب الشكل ( :)26 - IIمنحنيات بيانية توضح نسب
نالحظ من خالل الشكلين )( )26 - IIو ( ()27 - IIأن هناك تناسبا طرديا بين نسبة تثبيط الجذر
( I % O•−نسبة النشـ ـ ـ ـاط المض ـ ـ ـاد لألكس ـ ـ ـدة) و تركيـ ـ ـز المستخلصـ ـ ـات و هذا ما يوافـق دراس ـ ـ ـ ـات
الحر 2
قامت بـ ـ ـها ،]20[ Ghiaba et alحيث تم في هذه الدراسة اعتماد GAو AscAكمحاليل معيارية.
O•−نقوم بحساب قيمة IC50من العالقة الخطية لنسبة
و لتعيين قدرة المستخلصات على كبح الجذر الحر 2
النشاط المضاد لألكسدة بداللة تركيز المستخلصات المدروسة ،هذه القيمة تعبــر عن التركيـ ــز الالزم
O•−االبتدائـي ،قيـ ـ ـم IC50مسجلة فـ ـ ـي الجـ ـ ـ ـدول ( )8 - IIو
لتثبيـ ـ ــط نصـ ــف تركي ـ ـ ــز الجـ ـ ـ ــذر الحـ ـ ـر 2
القيـــــــم
)ICF50 (mg/ml )ICB50 (mg/ml
الصنـــــــف
0.210 0.009 Gh
0.127 0.006 Cht
0.130 0.012 DB
0.121 0.007 Tns
0.124 0.008 Tnb
0.012 GA
0.008 AscA
من خـ ـ ـ ـ ـالل الجـ ـ ـ ـ ـدول ( )8 - IIنالحـ ـ ـ ـ ـظ أن القـ ـ ـ ـ ـدرة المضـ ـ ـ ـ ـادة لألكسدة في كسـ ـ ـ ـ ـح جذر 2
O•−
للمستخلصات (ICB50) Bأعلى بكثير من القدرة المضادة لألكسدة للمستخلصـ ـات (ICF50) Fو في
جمي ـ ـ ـع األصن ـ ـاف و محصورة ما بين ) ،(0.006 - 0.210 mg/mlو يمكن تفسير ذلك إلى االختالف في
كمية و نوعية المركبات الفينولية الموجودة في هذه المستخلصات ،و هذا يمكن أن يفسر على أن
المركبات الفينولية المرتبطة باإلظافة إلى مركبات أخرى عززت زيادة هذه الفعالية.
الش ـ ـ ـ ـ ــكل ( )28 - IIيوضـ ـ ـ ــح بياني ـ ـ ـ ـ ــا الفـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــرق الكبيـ ـ ـ ـ ـ ــر بيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــن قي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم ICB50و قي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم ، ICF50كم ـ ـ ـ ــا
O•−و
يوضـ ـ ــح أيض ـ ـ ـ ــا أن صـ ـ ـ ـنـف Chtأكثـ ـ ـ ـ ـ ــر األصن ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـاف ق ـ ـ ـ ــدرة مضــادة ف ـ ـ ــي كب ـ ـ ـ ــح ج ـ ـ ـ ــذر الـ ـ 2
0,15
)IC50 (mg/ml
0,10
0,05
0,00
Gh Cht DB Tns Tnb
ال ص نف
حيث رتبت هذه النتائج على مست ــوى األصن ـ ـ ـ ـاف و من األكث ـ ــر فعاليـ ــة إلى األقل فعاليـ ـ ــة كالت ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـالي:
Cht > Tns > Tnb = AscA > Gh > DB= GA
AscA > GA > Tns > Tnb > Cht > DB > Gh
هذه النتائج ال تتوافق مع نتائج توصلت إليها الباحثة غ .زينب في دراستها التحليلية لفينوالت بعض
أصناف نخيل التمر [ ،]29حيث وجدت أن قيم ICF50محصورة ما بين ).(0.033-0.085mg/ml
مفعول المضاد الحيوي يش ّكل ضغطا (تثبيط أو قتل) على البكتيريا لكن الطفرات الّتي تظهر في
النسل
بعض الخاليا البكتيرّية تجعلها تنجو من مفعول المضاد الحيوي .بعد ذلك تنتقل هذه الميزة إلى ّ
يتميز بكونه جيال ذا مقاومة كاملة للمضاد الحيوي [ .]190و بما أن العلماء و الباحثين
المقبل الّذي ّ
أصبحوا أكثر إدراكا لهذه الحقيقة و لآلثار الجانبية الناجمة عن استخدام المضادات الحيوية بدأوا يبحثون
عن البدائل ذات المصدر الطبيعي ،و التي لها مفعول مضاد للميكروبات ،و نستطيع استخدامها بديال
عن المضادات الحيوية الكيميائية ،من بين هذه البدائل المركبات الفينولية و التي أثبتت فعاليتها في
التالي: العديد من الدراسات ،لهذا أردنا معرفة مدى تأثير المستخلصات الفينولية للتمر لذلك قمنا بالعمل
اختبار الفعالية المضادة للبكتيريا للمستخلصـ ـ ـ ـ ـات الميث ـ ــانولية للجـ ـ ـ ـ ـ ـزء اللحمي لثمار نخيل التمر على
ثالثة سالالت من البكتيريـ ـ ـ ـا و تحديـ ـ ـ ـ ـ ـد قيم ـ ـ ـ ـ ـ ـة أق ـ ـ ـ ـ ـ ـل تركي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـز لتثبيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـط نم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـو البكتيريـ ـ ـ ـ ـا MICلكـ ـ ـل
مستخلص عل ـ ـ ـ ـى ك ـ ـ ـ ـ ـ ـل ساللة من السالالت البكتيري ـ ـ ـ ـ ـة بواسط ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة طريقـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة اإلنتش ـ ـ ـ ـ ــار ،ه ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــذه
الد ارس ـ ـ ـ ـ ـ ــة تمـ ـ ـ ـ ــت في المخـ ـ ـ ـ ــبر المركزي بمستشفى محمـ ـ ـ ـ ـ ـ ــد بوضيـ ـ ـ ــاف بمدينـ ـ ـ ـ ـ ــة ورقلـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة.
معظ ـ ـ ـم الم ـ ـ ـواد و المحاليـ ـ ـ ـل المستعملة في التجـارب عاليـ ـ ـ ـة النق ـ ـ ـاوة ،و الج ـ ـ ـدول ( )1 - IIIيوضـ ـ ـ ـح ذلك.
طــــــريقة العمــــــــل
باستعمـ ـ ــال طريق ـ ـ ـ ـ ـ ــة االنتشـ ـ ـ ـ ـ ــار بواسط ـ ـ ـ ـ ـ ــة األقراص وفقـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـا للطريقـ ـ ـ ـ ـ ـة المستعمل ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة مـ ـ ـ ـ ـن
،تـ ـ ــم حس ـ ـ ـ ـ ـ ــاب الفاعلية المضـ ـ ـ ــادة للبكتيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـريا بقي ـ ـ ـ ـ ــاس قطـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــر ][191
طـ ـ ـ ـرف Soumia et al
الجدول ( :)02 - IIIالس ـ ـ ــالالت البكتيريـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة المستخدم ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة في الد ارسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة
-2تحضيـــــــــر المستخلصـــــــــــــــــات
بنفس الطريقة المتبعة في تحضير المستخلصات المستعملة في دراسة الفعالية المضادة لألكسدة
الف ـ ـرق في حف ـ ـ ـظ المستخلص يكون في DMSOبدل الميثـ ـ ـانول لضم ـ ــان اتص ـ ــال الميك ـ ــروبات []169 ,168
و العوام ـ ــل المض ـ ــادة لها[ ،]193ولكي تكون دراسة مقارنة وحدنا تراكيز المستخلصات 500 g/lو منها
حضرنا سلسلة تراكيز (.)500 g/l ،400 ،300 ،200 ،100 ،50 ،25
ساعة على درجة ،27°Cوتسجل النتيجـة بقيـاس قط ــر منطقة التثبيـط ))Diameters of inhibition zones
حيث يعرف الـ MICبأنـ ـ ـ ـ ـه أضعف تركي ـ ـ ـ ـ ـ ــز للمضـ ــاد الميكـ ـ ـ ـ ـروبي يثبـ ـ ـ ـ ـط كـ ـ ـ ـ ـل نمـ ـ ـ ـ ـ ـ ـو
مـ ـ ـ ـ ـرئي بعـ ـ ـ ـ ـد فتـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرة حض ـ ـن بين 18و 24س ـ ـاعة ،و يسمح الـ MICبالتعرف على حساسيـ ــة أو مقاوم ـ ـ ـ ـة
السـ ـ ـ ـ ـ ـ ـالالت الميكروبي ـ ـة ضـ ـ ـ ـ ـ ـ ـد المركب ـ ـات المض ـ ـادة حيث كلما كـ ـ ـ ـ ـان التركيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـز صغي ـ ـ ار كانت
الحساسي ـ ـة كبيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرة أو مقاوم ـ ـة الميكـ ــروب ضعيفة و العكس صحيـ ــح [.]194
التحليـــــــل اإلحصـــــــائي
تم التعبير عن النت ـ ـائج التجريبيـ ـ ـة على شكل متوسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـط حسـ ـ ـ ـ ـ ـ ـابي ( )Mلكل القيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم المتحصـ ـ ـ ـل
عليـ ـ ـها ( ثالث مكـ ـ ـ ـ ـررات) ±االنحراف المعياري (.)SD
النتــــــــــــــــائج و المناقشــــــــــــــــــة
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة للبكتيريا الفصل الثالث
2 - IIIالنتائـــــــج و المناقشــــــة
1 - 2 - IIIدراسة الفعالية المضادة للبكتيريا لمستخلصات لحمية التمر ضد البكتيريا بطريقة اإلنتشار
بواسطـــــــــــــة القراص في وسط صلب )(Disc Diffusion Method
عنـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـد دراس ـ ـ ـ ـ ـة الفاعلية البيـ ـولوجية تحصلنا على النت ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـائج الموضحة في الجـدولين ()03 - III
و ( )04 - IIIحيث:
المستخلصات : Bالمستخلص ـ ـات الميثانولي ـ ـة الخام يحوي مجم ـ ـوعة الفين ـ ـوالت الحرة و المرتبطـة معا.
المستخلصات : Fطور خالت اإليثيل للمستخلصات الميثانولية الخام يحوي مجموعة الفينوالت الحرة.
1 -1 - 2 - IIIدراسة الفعالية المضادة للبكتيريا للمستخلصات B
Gh Cht
DB Tns
Tnb
الشكل ( :)01 - IIIصورة موضحة للفعالية التثبيطية للمستخلصات Bتجاه بكتيريا الـ ـ E. coli
Gh Cht
DB Tns
Tnb
الشكل ( :)02 - IIIصورة موضحة للفعالية التثبيطية للمستخلصات Bتجاه بكتيريا الـ ـ S. aureus
Gh Cht
DB Tns
Tnb
الشكل ( :)03 - IIIصورة موضحة للفعالية التثبيطية للمستخلصات Bتجاه بكتيريا الـ ـ P. aerugino
انط ـ ـ ـ ـ ـالقا من األشك ـ ـ ـ ـ ـال ( )03 - III( ،)02 - III( ،)01 - IIIنقيـ ـ ـ ـ ــس أقطـ ـ ـار التثبيـ ـ ـ ـ ـط و نسجلها في
الجـ ـ ـدول (.)03 - III
قطر التثبيط تجاه كل ساللــــة بكتيريـــة بالـــ )(mm التركيز الصنف نوع المستخلص
P. aerugino S. aureus E. coli )(mg/ml
- - - 25
نالحـ ـ ـظ من خالل األشك ـال ( )02 - III( ،)01 - IIIو ( ،)03- IIIو المسجلة عدديـا في الجـ ـدول
( )03 - IIIأن السالالت البكتيرية الثالثة لم تبد أي حساسية تج ـ ـ ـاه المستخلص ـ ـ ـات ،Bو يمكن تفسير هذه
النتائج وفقا لما توصلت إليه دراسات سابقة ،فقد تكون المركبـ ـ ـات الفعالة موجودة بكميـ ـ ـات غيـ ـ ـر كافية في
المستخلصات الخام أو أنها تحوي مركبات فعالة بكميات عالية و مكونات أخرى تظهر تأثيرات مضادة
) (antagonisticللتأثير اإليجابي للعوامل الفعالة بيولوجيا ،أو قد تكون المستخلصات فعالة ضد أنـ ـ ـ ـواع
جرثومية أخرى غير مستخدمة بالدراسة الحالية [ ،]195فقد أثبت من خالل الفحص الكيميائي للمركبات
احتواء األصناف الخمسـ ـ ـ ـة لكميات معتب ـ ـ ـ ـ ـرة من الكربوه ـ ـ ـ ـيدرات ،ه ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـذه األخيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـرة تعد وس ـ ـط مالئم لنمـو
البكتي ـ ـ ـريا ،و هذا ما يوافق الفرضية الثانية.
الشكل ( :)04 - IIIصـ ـ ـورة موضحـ ـ ـة للفعاليـ ـ ـة التثبيطيـ ـ ـة للمستخلصـ ـ ـات Fلألصنـ ـ ـاف المستعملـ ـ ـة
بتركيـ ـ ـز 500 mg/mlتجاه السالالت البكتيرية المستخدمة في الدراسة
إنطالقا من الشكل ( )04 - IIIاستنبطنا النتائج المدونة في الجدول (.)04 - III
الجدول ( :)04 - IIIمعدالت أقطار التثبيط للمستخلصات Fتجاه السالالت البكتيرية.
قطر التثبيط تجاه كل ساللة بكتيرية بالـــ )(mm التركيز التركيز نوع
الصنف
P. aerugino S. aureus E. coli )(𝝁g/Dic )(mg/ml المستخلص
- - - 250 25
- - - 500 50
- - - 1000 100
- - - 2000 200
- 07.333 ± 0.577 07.000 ± 0.000 3000 300
07.000 ± 0.000 07.667 ± 0.577 09.667 ± 0.577 4000 400 Gh
10.667 ± 0.577 08.000 ± 0.000 13.667 ± 0.577 5000 500
135 | 2018
النتائ ـ ــج والمن ـ ـ ــاقش ـ ــة الفعالية المضادة للبكتيريا الفصل الثالث
لقد أثبت في العديد من الدراسات الخصائص المضادة للبكتيريا للتمور [ ،]196 ,22و بناءا على
النتائج المسجلة في الجدول ( )04 - IIIفإن كل األصناف المدروسة تمتلك هذه الخاصية ،حيث أبدت
جميع السالالت البكتيرية حساسية تجاه المستخلصات ،و لكن تختلف هذه الحساسية من صنف إلى آخر
و من ساللة إلى أخرى موضحة في الشكل (.)04 - III
فقد أبدت E. coliحساسية عالية تجاه مستخلص Ghمقارنة بالمستخلصات األخرى و بقطر تثبيط قدره
13.667 ± 0.577 mmعند تركيز ،500 mg/mlفي حين كانت أقلها تجاه مستخلص Chtو بقطر تثبيط
بقيمة 09.000 ± 0.000 mmعند نفس التركيز ،لكن فعالية هذه المستخلصات كانت أقل بكثير من
فعالية المضادات الحيوية ( GNو )ANبدليل الحساسية العالية لهذه البكتيريا تجاه المضادات الحيوية عند
تراكيز جد صغيرة ،حيث جاء ترتيب هذه الحساسية من األعلى إلى األدنى كالتالي:
أما بالنسبة ل ـ S. aureusفقد أبدت حساسي ـ ـة عالية تجاه مستخلص DBمقارنة بالمستخلصـ ـ ـات األخرى
و بقطر تثبيط قدره 10.667 ± 0.577mmعند تركيز ،500 mg/mlفي حين كانت أقلها تجاه مستخلص
،Tnbو بقطر تثبيط بقيمة 07.000 ± 0.000 mmعند نفس التركيز ،لكن فعالية هذه المستخلصات
كانت أقل بكثير من فعالية المضادات الحيوية ( AN ،GNو )Cبدليل الحساسية العالية لهذه البكتيريا
تجاه المضادات الحيوية عند تراكيز جد صغيرة ،حيث جاء ترتيب هذه الحساسية من األعلى إلى األدنى
كالتالي:
DB > Tns > Gh = Cht > Tnb
أما بالنسبة ل ـ P. aeruginoفقد أبدت حساسية عالية تجاه مستخلص Tnsمقارنة بالمستخلصات األخرى
و بقطر تثبيط قدره 13.000 ± 0.000 mmعند تركيز ،500 mg/mlفي حين كانت أقلها تجاه مستخلص
،Tnbو الذي لم يبد أي فعالية تجاه هذه الساللة البكتيرية ،لكن فعالية هذه المستخلصات كانت أقل بكثير
من فعالية المضادات الحيوية ( AN ،GNو )TCCو الدليل الحساسية العالية لهذه البكتيريا تجاه
المضادات الحيوية عند تراكيز جد صغيرة ،حيث جاء ترتيب هذه الحساسية من األعلى إلى األدنى
كالتالي:
> Tns > DB Gh > Cht > Tnb
يمكن تفسير هذه النتائج بناءا على احتواء هذه المستخلصات موادا لها القدرة في تثبيط نمو
األحياء المجهرية ،و هذا ما يتوافق مع دراسات سابقة و التي أوضحت أن هذا التثبيط يعود إلى وجود
الكاليكوسيدات فض ـ ـ ـال عن تأثي ـ ـ ـر المجاميع الفعالة األخرى مثل :القلويدات الفالفونويدات و الراتنجـ ـ ـات
و المركبات الفينولية و التانينات جعل هذه المستخلصات ذات فعالية تجاه األحياء المجهرية ( البكتيريا،
الفطريات ،الفيروسات) [ ،]197و أن اختالف تأثير هذه النواتج األيضية الثانوية في التأثير يعود إلى
إختالف أنواع هذه المواد الفعالة و كمياتها [ ،]198و هذا ما يتوافق مع نتائج الكشف الكيميائي و التي
أثبت وجود بعض هذه المواد ( الفينوالت و الفالفونويدات) في كل األصناف المدروسة.
2 - 2 - IIIتحديــــد أدنى تركيــــز للتثبيـــــط )Minimal inhibitory concentration (MIC
أما فيما يخص قيم MCIنالحظ أنها تختلف من مستخلص إلى آخر فقد أتت النتائج على النحو التالي:
الجدول ( :)05 - IIIقيم MCIللمستخلصات Fمع قطر التثبيط تجاه السالالت البكتيرية المستخدمة في
الدراسة
انط ـ ـ ـالقا من الج ـ ـ ـدول ( )05 - IIIنالح ـ ـ ـظ أن ه ـ ـ ـذه النت ـ ـ ـ ـ ـ ـائج أفض ـ ـ ـل من نت ـ ـ ـ ـ ـ ـائج توص ـ ـ ـل الي ـ ـ ـها
Samad et alتجاه E. coliو تتوافق معها تجاه ، S. aureusو الذين وجدو أن قيم MCIللمستخلص
الميثانولي لصنف Safawiتجاه بكتيريا الــ E. coliهي 400 mg/mlو بقطر تثبيط ، 7.0 ± 0.0 mm
و بقيمة 400 mg/mlلصنف Ajwaتجاه نفس نوع البكتيرية ،كما وجدو أن قيم MCIللمستخلص
تجـ ـ ـ ـ ـاه S. aureusو بقطـ ـ ـ ـ ـر تثبيـ ـ ـ ـ ـط قـ ـ ـ ـ ـدره الميثـ ـ ـ ـ ـانولي لصنف Mabroomهـ ـ ـ ـ ـي 100 mg/ml
،6.3 ± 0.3mmو بقيمة 300 mg/mlلصنـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـف Ajwaتج ـ ـ ـ ـ ـاه نفس ن ـ ـ ـ ـ ـوع البكتيري ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـة و بقط ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـر
تثبي ـ ـ ـ ـ ـط .]25[ 7.0 ± 0.0 mm
المــــــــــ ارجع
باللغة العربيــــــــــة
ج.م.ح ،المديرس ،.أصناف التمور (الشجرة الطيبة) في الخليج ،2009 ،الكويت :مكتبة الكويت الوطني ـ ـة :ص .9 []26
غ.ح.ح ،علي ،.التصني ـ ـ ـ ـف النب ـ ـ ـ ـاتي والوص ـ ـ ـ ـف الم ـ ـ ـ ـورفولوجي والت ـ ـ ـ ـركيب التش ـ ـ ـ ـريحي لنخل ـ ـ ـ ـة التم ـ ـ ـ ـر []27
( : 2003،)Phoenix dactylifera L.دائرة بلدية أبو ظبي وتخطيط المدن ،إدارة اإلرشاد والتسويق الزراعي
والثروة الحيوانية :ص .27 -26 -19 -17 -14 ، 12 -2
غ ،زينب ،.دراسة تحليلية للبيدات و فينوالت و مكونات أخرى لبعض أصناف نخيل التمر المحلية .رسالة []29
خالل نمو ونضج ثمار نخيل التمر صنف الحالوي .مجلة أبحاث البصرة :)36(6 .2010 ،ص .124-115
ع .ه ،عبد الواحد ،.ع .م ،عبد ،.التغيرات في الفعالية اإلنزيمية إلنزيمي (االنفرتيز و السيلوليز) و بعض المواد []36
الكيمياوية خالل نمو ونضج ثمار نخيل التمـ ـر .مجلة البصرة ألبحاث نخلة التمر :)2-1(3 .2004 ،ص .59-53
ع .ع .ا ،سعيد ،.كيمياء الجذور الحرة ،2001.األردن :دار المسيرة للنشر و التوزي ـ ـ ـع و الطب ـ ـاعة :ص -16 -15 []53
.18
ا.ع .ا ،أحمد ،.غ ،مروان ،.أساسيات كيمياء األغذية .الطبعة األولى ،2006 .ليبيا :دار الكتاب الجديد المتحدة: []102
ص .544-543
د.م.ع.ا ،معارج ،.وراثة األحياء الدقيقة ،1995 .شركة الشهاب للنشر والتوزيع :ص .20-18 []105
ا.ح.م .العذاري ،و أ.ع.م .السلطانية ،دراسة كمية و نوعية المركبات القلوانية و الصابونينية ألوراق و ثمار []132
بعض األصناف من نبات السدر :)2( 4 .2012 ،magazin of alkufa university for biolog .ص . 17-1
باللغة الجنبيــــــــــة
] 1[
T. Devasagayam, J. Tilak, K. Boloor, K.S. Sane, S.S. Ghaskadbi, and R. Lele, Free radicals
and antioxidants in human health: current status and future prospects. Japi, 2004.
52(794804): p. 794-804.
] 2[
K.A. Wojtunik-Kulesza, A. Oniszczuk, T. Oniszczuk, and M. Waksmundzka-Hajnos, The
influence of common free radicals and antioxidants on development of Alzheimer’s Disease.
Biomedicine & Pharmacotherapy, 2016. 78: p. 39-49.
] 3[
V. Sivanandham, Free radicals in health and diseases─ a mini review. Pharmacol Onl .2011 ,
:1p. 1062-1077.
] 4[
D.M. Radomska-Leśniewska, A. Hevelke, P. Skopiński, B. Bałan, J. Jóźwiak, D. Rokicki, E.
Skopińska-Różewska, and A. Białoszewska, Reactive oxygen species and synthetic
antioxidants as angiogenesis modulators: Clinical implications. Pharmacological Reports,
2016. 68(2): p. 462-471.
] 5[
D. Brambilla, C. Mancuso, M.R. Scuderi, P. Bosco, G. Cantarella, L. Lempereur, G. Di
Benedetto, S. Pezzino, and R. Bernardini, The role of antioxidant supplement in immune
system, neoplastic, and neurodegenerative disorders: a point of view for an assessment of the
risk/benefit profile. Nutrition journal, 2008. 7(1): p. 29.
] 6[
B. Halliwell, Antioxidants in human health and disease. Annual review of nutrition, 1996.
16(1): p. 33-50.
] 7[
N.Q.A. Maged and N.A. Abbas, Antibacterial activity of Phoenix dactylifera L. leaf extracts
against several isolates of bacteria | مجلة الكوفة للعلوم الطبية البيطرية.Kufa Journal For Veterinary
Medical Sciences, 2013. 4(2) : p. 45-50.
] 8[
T.J. Whitman, Community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus skin and
soft tissue infections. Disease-a-Month, 2008. 54(12): p. 780-786.
] 9[
H.J. de Boer, A. Kool, A. Broberg, W.R. Mziray, I. Hedberg, and J.J. Levenfors, Anti-fungal
and anti-bacterial activity of some herbal remedies from Tanzania. Journal of
Ethnopharmacology, 2005. 96(3): p. 461-469.
]10[
N. Alzoreky and K. Nakahara, Antibacterial activity of extracts from some edible plants
commonly consumed in Asia. International journal of food microbiology, 2003. 80(3): p. 223-
230.
]11[
G. Konning, C. Agyare, and B. Ennison, Antimicrobial activity of some medicinal plants from
Ghana. Fitoterapia, 2004. 75(1): p. 65-67.
]12[
A.M. Mahasneh and A.A. El-Oqlah, Antimicrobial activity of extracts of herbal plants used in
the traditional medicine of Jordan. Journal of Ethnopharmacology, 1999. 64(3): p. 271-276.
]13[
L.I. El-Juhany, Degradation of Date Palm Trees and Date Production in Arab Countries:
Causes and Potential Rehabilitation. Australian Journal of Basic and Applied Sciences, 2010.
4(8): p. 3998-4010.
]14[
A. Akkak, V. Scariot, and R. Botta. Isolation and characterization of nuclear microsatellite
markers in date palm (Phoenix dactylifera L.). in International proceedings, Torino (Italia).
Atti dell’International workshop on the role of biotechnology for the characterization and
conservation of crop, forestry, animal and fishery genetic resources. 2005.
]15[
A. Zaid and E.J. Arias-Jiménez, Date palm cultivation. FAO Plant Production and Protection,
2002. 156: p. 110.
]16[
S. Livingston, K.-A. Mufargi, and M. Suhkeli, Chemical control of leaf spot of date palm
(Phoenix dactylifera) in sultanate of Oman. Plant Pathology Journal, 2002. 18(3): p. 165-166.
]17[
M. Elleuch, S. Besbes, O. Roiseux, C. Blecker, C. Deroanne ,N.-E. Drira, and H. Attia, Date
flesh: Chemical composition and characteristics of the dietary fibre. Food chemistry, 2008.
111(3): p. 676-682.
]18[
M. Al-Farsi, C. Alasalvar, A. Morris, M. Baron, and F. Shahidi, Comparison of antioxidant
activity, anthocyanins, carotenoids, and phenolics of three native fresh and sun-dried date
140 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
(Phoenix dactylifera L.) varieties grown in Oman. Journal of Agricultural and Food
Chemistry, 2005. 53(19): p. 7592-7599.
]19[
F. Biglari, A.F. AlKarkhi, and A.M. Easa, Cluster analysis of antioxidant compounds in dates
(Phoenix dactylifera): Effect of long-term cold storage. Food chemistry, 2009. 112(4): p. 998-
1001.
]20[
G. Zineb, M. Boukouada, A. Djeridane, M. Saidi, and M. Yousfi, Screening of antioxidant
activity and phenolic compounds of various date palm (Phoenix dactylifera) fruits from
Algeria. Mediterranean Journal of Nutrition and Metabolism, 2012. 5(2): p. 119-126.
]21[
Z. Benmeddour, E. Mehinagic, D.L. Meurlay, and H. Louaileche, Phenolic composition and
antioxidant capacities of ten Algerian date (Phoenix dactylifera L.) cultivars: A comparative
study. Journal of Functional Foods, 2013. 5(1): p. 346-354.
]22[
S. Al-Daihan and R.S. Bhat, Antibacterial activities of extracts of leaf, fruit, seed and bark of
Phoenix dactylifera. African Journal of Biotechnology, 2012. 11(42): p. 10021-10025.
]23[
El Sohaimy S.A., Abdelwahab A.E., Brennan C.S., and A.-e. A.M., Phenolic Content,
Antioxidant and Antimicrobial activities of Egyptian Date Palm (Phoenix dactylifera L.)
Fruits. Australian Journal of Basic and Applied Sciences, 2015. 9(1): p. 141-147.
]24[
R. Ravishanker and S. Raut, Studies on Antibacterial Compounds from Methanolic Extract of
Fruit (Barhee Dates) of Phoenix dactylifera and its Applications. Int. J. Rec. Biotech, 2016.
4(1): p. 32-41.
]25[
M.A. Samad, S.H. Hashim, K. Simarani, and J.S. Yaacob, Antibacterial Properties and
Effects of Fruit Chilling and Extract Storage on Antioxidant Activity, Total Phenolic and
Anthocyanin Content of Four Date Palm (Phoenix dactylifera) Cultivars. Molecules, 2016.
21(4): p. 419.
]28[
P. Ozenda, Flore du Sahara. 2 ed. 1977, PARIS: Centre national de la recherche scient(fique.
130.
]31[
M.S. Baliga, B.R.V. Baliga, S.M. Kandathil, H.P. Bhat, and P.K. Vayalil, A review of the
chemistry and pharmacology of the date fruits (Phoenix dactylifera L.). Food Research
International, 2011. 44(7): p. 1812-1822.
]32[
I.A. Ahmed, A.W.K. Ahmed, and R.K. Robinson, Chemical composition of date varieties as
influenced by the stage of ripening. Food Chemistry, 1995. 54(3): p. 305-309.
]33[
M. Fadel, L. Kurmestegy, M. Rashed, and Z. Rashed, Fruit color properties of different
cultivars of dates (Phoenix dactylifera, L.). Agricultural Engineering International: CIGR
Journal, 2006. 8: p. 1-9.
]34[
W. Al-Shahib and R.J. Marshall, The fruit of the date palm: its possible use as the best food
for the future? International journal of food sciences and nutrition, 2003. 54(4): p. 247-259.
]37[
S. Hasegawa, D.C. Smolensky, and V.P. maier, Hydrolytic enzymes in date and their
application in the softening of tough dates and sugar wall dates. Report of Annual Date
Growers inst.Rept, 1972. 49: p. 6-8.
]38[
L. Xu, L. Ming-an, D. Guo-tao, C. Shan-bo, and Y.-j. Ren, Changes in Activity of PG, PE, Cx
and LOX in Pulp during Fruit Growth and Development of Two Different Ripening-Season
Pear Cultivars. American-Eurasian J .Agric. & Environ, 2008. 3(3): p. 445-450.
]39[
V.H.Dowson and A. Aten, Date handling. (1962), Date handling ,processing and packing
FAO Agric.
]40[
F. Biglari, A.F. AlKarkhi, and A.M. Easa, Antioxidant activity and phenolic content of various
date palm( Phoenix dactylifera) fruits from Iran. Food chemistry, 2008. 107(4): p. 1636-1641.
]41[
Y.J. Hong, F. Tomas-Barberan, A.A. Kader, and A.E. Mitchell, The flavonoid glycosides and
procyanidin composition of Deglet Noor dates (Phoenix dactylifera). Journal of agricultural
and food chemistry, 2006. 54(6): p. 2405-2411.
]42[
W. Kchaou, F. Abbès, C. Blecker, H. Attia, and S. Besbes, Effects of extraction solvents on
phenolic contents and antioxidant activities of Tunisian date varieties (Phoenix dactylifera
L .).Industrial crops and products, 2013. 45: p. 262-269.
]43[
O. Sorg, Oxidative stress: a theoretical model or a biological reality? Comptes rendus
biologies, 2004. 327(7): p. 649-662.
141 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
]44[
M.M. Berger, Manipulations nutritionnelles du stress oxydant: état des connaissances.
Nutrition clinique et métabolisme, 2006. 20(1): p. 48-53.
]45[
L.A. Pham-Huy, H. He, and C. Pham-Huy, Free Radicals, Antioxidants in Disease and
Health. Int J Biomed Sci. 2008 Jun;4(2):89-96.
]46[
S. Parthasarathy, N. Santanam, S. Ramachandran, and O. Meilhac, Oxidants and antioxidants
in atherogenesis. An appraisal. J Lipid Res, 1999. 40(12): p. 2143-57.
]47[
M. Valko, C.J. Rhodes, J. Moncol, M. Izakovic, and M. Mazur, Free radicals, metals and
antioxidants in oxidative stress-induced cancer. Chem Biol Interact, 2006. 160(1): p. 1-40.
]48[
M. Valko, H. Morris, and M.T. Cronin, Metals, toxicity and oxidative stress. Curr Med Chem,
2005. 12(10): p. 1161-208.
]49[
M. Chatterjee, R. Saluja, S. Kanneganti, S. Chinta, and M. Dikshit, Biochemical and
molecular evaluation of neutrophil NOS in spontaneously hypertensive rats. Cell Mol Biol,
2007. 53(1): p. 84-93.
]50[
P. Sharma, A.B. Jha, R.S. Dubey, and M. Pessarakli, Reactive Oxygen Species, Oxidative
Damage, and Antioxidative Defense Mechanism in Plants under Stressful Conditions. Journal
of Botany, 2012. 2012(2012): p. 26.
]51[
D. Wu and P. Yotnda, Production and Detection of Reactive Oxygen Species (ROS) in
Cancers. 2011(57): p. 1-4.
]52[
D. Wu and A.I. Cederbaum, Alcohol, oxidative stress, and free radical damage. Alcohol
Research and Health, 2003. 27: p. 277-284.
]54[
A.D. Sarma, A.R. Mallick, and A.K. Ghosh, Free Radicals and Their Role in Different
Clinical Conditions: An Overview. International Journal of Pharma Sciences and Research,
2010. 1(3): p. 185-192.
]55[
S. Sen, R. Chakraborty, C. Sridhar, Y. Reddy, and B. De, Free radicals, antioxidants, diseases
and phytomedicines: current status and future prospect. International Journal of
Pharmaceutical Sciences Review and Research, 2010. 3(1): p. 91-100.
]56[
A. Rahal, A. Kumar, V. Singh, B. Yadav, R. Tiwari, S. Chakraborty, and K. Dhama,
Oxidative stress, prooxidants, and antioxidants: the interplay. BioMed research international,
2014. 2014. p. 1-9.
]57[
P.B. Desai, S. Manjunath, S. Kadi, K. Chetana, and J. Vanishree, Oxidative stress and
enzymatic antioxidant status in rheumatoid arthritis: a case control study. Eur Rev Med
Pharmacol Sci, 2010 .14 )11( : p. 959-67.
]58[
T. Fukai and M. Ushio-Fukai, Superoxide dismutases: role in redox signaling, vascular
function, and diseases. Antioxidants & redox signaling, 2011. 15(6): p. 1583-1606.
]59[
K. Yen, H.B. Patel, A.L. Lublin, and C.V. Mobbs, SOD isoforms play no role in lifespan in ad
lib or dietary restricted conditions, but mutational inactivation of SOD-1 reduces life
extension by cold. Mechanisms of ageing and development, 2009. 130(3): p. 173-178.
]60[
N. Odajima, T. Betsuyaku, K. Nagai, C. Moriyama, D. Wang, T. Takigawa, K. Ogino, and M.
Nishimura, The Role of Catalase in Pulmonary Fibrosis. Respiratory Research, 2010. 11(1).
]61[
B.J. Day, Catalase and glutathione peroxidase mimics. Biochemical pharmacology, 2009.
77(3): p. 285-296.
]62[
S. Herbette, P. Roeckel‐Drevet, and J.R. Drevet, Seleno‐independent glutathione peroxidases.
Febs Journal, 2007. 274(9): p. 2163-2180.
]63[
L. Piacenza, G. Peluffo, M.N. Alvarez, J.M. Kelly, S.R. Wilkinson, and R. Radi,
Peroxiredoxins play a major role in protecting Trypanosoma cruzi against macrophage-and
endogenously-derived peroxynitrite. Biochemical Journal, 2008. 410(2): p. 359-368.
]64[
X. Wu, Z. Fu, and X. Wang, Peroxiredoxins in colorectal neoplasms. Histology and
histopathology, 2010. 25(10): p. 1297.
]65[
L. Flohé and F. Ursini, Peroxidase: a term of many meanings. Antioxidants & redox
signaling, 2008. 10(9): p. 1485-1490.
]66[
M.N. Alvarez, G. Peluffo, L. Piacenza, and R. Radi, Intraphagosomal peroxynitrite as a
macrophage-derived cytotoxin against internalized trypanosoma cruzi consequences for
oxidative killing and role of microbial peroxiredoxins in infectivity. Journal of Biological
Chemistry, 2011. 286(8): p. 6627-6640.
142 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
]67[
J. Karthikeyan and P. Rani, Enzymatic and non-enzymatic antioxidants in selected Piper
species .Indian journal of experimental biology, 2003. 41(2): p. 135-140.
]68[
Y. Velioglu, G. Mazza, L. Gao, and B. Oomah, Antioxidant activity and total phenolics in
selected fruits, vegetables, and grain products. Journal of agricultural and food chemistry,
1 :)10(46 .998p. 4113-4117.
]69[
D.-O. Kim, S.W. Jeong, and C.Y. Lee, Antioxidant capacity of phenolic phytochemicals from
various cultivars of plums. Food Chemistry, 2003. 81(3): p. 321-326.
]70[
M.I. Gil, F.A. Tomás-Barberán, B. Hess-Pierce, D.M. Holcroft, and A.A. Kader, Antioxidant
activity of pomegranate juice and its relationship with phenolic composition and processing.
Journal of Agricultural and Food chemistry, 2000. 48(10): p. 4581-4589.
]71[
B. Xu, S. Yuan, and S. Chang, Comparative analyses of phenolic composition, antioxidant
capacity, and color of cool season legumes and other selected food legumes. Journal of Food
Science, 2007. 72(2): p. S167-S177.
]72[
V. Katalinic, M. Milos, T. Kulisic, and M. Jukic, Screening of 70 medicinal plant extracts for
antioxidant capacity and total phenols. Food Chemistry, 2006. 94(4): p. 550-557.
]73[
A. Djeridane, M. Yousfi, B. Nadjemi, D. Boutassouna, P. Stocker, and N. Vidal, Antioxidant
activity of some Algerian medicinal plants extracts containing phenolic compounds. Food
Chemistry, 2006. 97(4): p. 654-660.
]74[
P. Bodzek and T. Wielkoszynski, [Evaluation of vitamin C and E concentration--some
nonenzymatic indicators of antioxidant protective barrier in pregnant women]. Wiad Lek,
2003. 56(11-12): p. 508-14.
]75[
G. Castellano, J. Tena, and F. Torrens, Classification of phenolic compounds by chemical
structural indicators and Its relation to antioxidant properties of posidonia oceanica (L.)
Delile. environment, 2012. 2: p. 231-250.
]76[
D.M. Pereira, P. Valentão ,J.A. Pereira, and P.B. Andrade, Phenolics: From chemistry to
biology. Molecules, 2009. 14(6): p. 2202-2211.
]77[
C. Manach, A. Scalbert, C. Morand, C. Rémésy, and L. Jiménez, Polyphenols: food sources
and bioavailability. The American journal of clinical nutrition, 2004. 79(5): p. 727-747.
]78[
B.H. Havsteen, The biochemistry and medical significance of the flavonoids. Pharmacology &
therapeutics, 2002. 96(2): p. 67-202.
]79[
B. Jean, Pharmacognosie et phytochimie des plantes médicinales (3e éd.) 1999, Paris
Technique et Documentation Lavoisier. P.201.
]80[
L. Fukumoto and G. Mazza, Assessing antioxidant and prooxidant activities of phenolic
compounds. Journal of agricultural and food chemistry, 2000. 48(8): p. 3597-3604.
]81[
E. Anouar, P. Košinová, D .Kozlowski, R. Mokrini, J. Duroux, and P. Trouillas, New aspects
of the antioxidant properties of phenolic acids: a combined theoretical and experimental
approach. Physical chemistry chemical physics, 2009. 11(35): p. 7659-7668.
]82[
A. Ghasemzadeh and N .Ghasemzadeh, Flavonoids and phenolic acids: Role and biochemical
activity in plants and human. Journal of medicinal plants research, 2011. 5(31): p. 6697-6703.
]83[
S. Quideau, D. Deffieux, C. Douat‐Casassus, and L. Pouységu, Plant polyphenols: chemical
properties, biological activities, and synthesis. Angewandte Chemie International Edition,
2011. 50(3): p. 586-621.
]84[
M. Saxena, J. Saxena, and A. Pradhan, Flavonoids and phenolic acids as antioxidants in
plants and human health. Int J Pharm Sci Rev Res :)2(16 .2012 ,p. 130-4.
]85[
A. Mansouri, G. Embarek, E. Kokkalou, and P. Kefalas, Phenolic profile and antioxidant
activity of the Algerian ripe date palm fruit (Phoenix dactylifera). Food Chemistry, 2005.
89(3): p. 411-420.
]86[
G.R. Beecher, Overview of dietary flavonoids: nomenclature, occurrence and intake. The
Journal of nutrition, 2003. 133(10): p. 3248S-3254S.
]87[
A.R. Tapas, D. Sakarkar, and R. Kakde, Flavonoids as nutraceuticals: a review. Tropical
Journal of Pharmaceutical Research, 2008. 7(3): p. 1089-1099.
]88[
R.J. Nijveldt, E. Van Nood, D.E. Van Hoorn, P.G. Boelens, K. Van Norren, and P.A. Van
Leeuwen, Flavonoids: a review of probable mechanisms of action and potential applications.
The American journal of clinical nutrition, 2001. 74(4): p. 418-425.
143 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
]89[
L.H. Cazarolli, L. Zanatta, E.H. Alberton, B. Figueiredo, M.S. Reis, P. Folador, R.G.
Damazio, M.G. Pizzolatti, B. Silva, and F.R. Mena, Flavonoids: prospective drug candidates.
Mini Reviews in Medicinal Chemistry, 2008. 8(13): p. 1429-1.440
]90[
J.B. Harborne and C.A. Williams, Advances in flavonoid research since 1992.
Phytochemistry, 2000. 55(6): p. 481-504.
]91[
P. Cos, L. Ying, M. Calomme, J.P. Hu, K. Cimanga, B. Van Poel, L. Pieters, A.J. Vlietinck,
and D.V. Berghe, Structure-activity relationship and classification of flavonoids as inhibitors
of xanthine oxidase and superoxide scavengers. Journal of Natural Products, 1998. 61(1): p.
71-76.
]92[
M. Kotani, M. Matsumoto, A. Fujita, S. Higa, W. Wang, M. Suemura, T. Kishimoto, and T .
Tanaka, Persimmon leaf extract and astragalin inhibit development of dermatitis and IgE
elevation in NC/Nga mice. Journal of Allergy and Clinical Immunology, 2000. 106(1): p. 159-
166.
]93[
S. Yamamura, K. Ozawa, K. Ohtani, R. Kasai, and K. Yamasaki, Antihistaminic flavones and
aliphatic glycosides from Mentha spicata. Phytochemistry, 1998. 48(1): p. 131-136.
]94[
A. Villar, M.A. Gasco, and M.J. Alcaraz, Some aspects of the inhibitory activity of hypolaetin-
8-glucoside in acute inflammation. J Pharm Pharmacol, 1987. 39(7): p. 502-7.
]95[
M.J. Martin, E. Marhuenda, C. Perez-Guerrero, and J.M. Franco, Antiulcer effect of naringin
on gastric lesions induced by ethanol in rats. Pharmacology, 1994. 49(3): p. 144-50.
]96[
C.-M. Shih, H. Lin, Y.-C. Liang, W.-S. Lee, W.-F. Bi, and S.-H. Juan, Concentration-
dependent differential effects of quercetin on rat aortic smooth muscle cells. European journal
of pharmacology, 2004. 496(1): p. 41-48.
]97[
K. Khanbabaee and T. van Ree, Tannins: classification and definition .Natural product
reports, 2001. 18(6): p. 641-649.
]98[
P.W. Hartzfeld, R. Forkner, M.D. Hunter, and A.E. Hagerman, Determination of hydrolyzable
tannins (gallotannins and ellagitannins) after reaction with potassium iodate. Journal of
Agricultural and Food Chemistry, 2002. 50(7): p. 1785-1790.
]99[
P. Schofield, D. Mbugua, and A. Pell, Analysis of condensed tannins: a review. Animal Feed
Science and Technology, 2001. 91(1): p. 21-40.
]100[
A.M. Chahardehi, D. Ibrahim, and S.F. Sulaiman, Antioxidant activity and total phenolic
content of some medicinal plants in Urticaceae family. Journal of Applied Biological
Sciences, 2009. 3(2): p. 25-29.
]101[
R.A. Larson, The antioxidants of higher plants. Phytochemistry. 27(4): p. 969-978.
]103[
G. Muriel, M. I. William, A. Ricardo, J. C. Henderson, P. Daniele, C. Q. José, R. Daniel, S.
Tilman, T. Stéphane, and M. Viso, Encyclopedia of Astrobiology 2ed. 2015: Springer-Verlag
Berlin Heidelberg.
]104[
M. FATHIMA, N.P. RAJAGOVINDAN, and N. SHANTHA, BIOLOGY BOTANY. 2007,
College Road, Chennai, India. 305.
]106[
D.L. EMILE Pr ., BURDIN Jean-Claude , , Les Bactéries. 1973, Paris. p. 11-14.
]107[
C. P, Interpretative reading of antimicrobial susceptibility testes. ASM News, 1992. 58: p.
368-375.
]108[
J.H. Jorgensen and M.J. Ferraro, Antimicrobial susceptibility testing: general principles and
contemporary practices. Clinical Infectious Diseases, 1998: p. 973-980.
]109[
S. Robert-Dernuet, Antibiotique et antibiogrammes. Décarie Vigot 1995: p. 322.
]110[
S. Michanie, Escherichia coli O157: H7 La bacteria que disparó el HACCP en la industria de
la carne. Énfasis alimentos, 2003. 9(3): p. 1-7.
]111[
R.L. Vogt and L. Dippold, Escherichia coli O157: H7 outbreak associated with consumption
of ground beef, June–July 2002. Public health reports, 2005. 120(2): p. 174-178.
]112[
Q. Feng, J. Wu, G. Chen, F. Cui, T. Kim, and J. Kim, A mechanistic study of the antibacterial
effect of silver ions on Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Journal of biomedical
materials research, 2000 :)4(52 .p. 662-668.
]113[
H. Dabernat, Avril J.-L., Denis F., and M. H, Bactériologie clinique. 3e édition ed. 2000. 608
]114[
Methicillin Resistan Staphylococcus aureus. January 2011. Last Updated: p. 1-25.
144 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
]115[
E. Beli, R. Maçi, S. Çoçoli, and H. Memoçi, Staphylococcus aureus in locally produced white
cheese in Tirana market. Albanian Journal of Agricultural Sciences, 2014: p. 519-523.
]116[
A.L. Panlilio, D.H. Culver, R.P. Gaynes, S. Banerjee, T.S. Henderson, J.S. Tolson, and W.J.
Martone, Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in US hospitals, 1975–1991. Infection
Control & Hospital Epidemiology, 1992. 13(10): p. 582-586.
]117[
A.L. Baltch and R.P. Smith, Pseudomonas aeruginosa: infections and treatment.
Pseudomonas aeruginosa: infections and treatment., 1994(12).
]118[
K. Sauer, A.K. Camper, G.D. Ehrlich, J.W. Costerton, and D.G. Davies, Pseudomonas
aeruginosa displays multiple phenotypes during development as a biofilm. Journal of
bacteriology, 2002. 184(4): p. 1140-1154.
]119[
L. Su and C .Chiu, Salmonella: clinical importance and evolution of nomenclature. Chang
Gung medical journal, 2007. 30(3): p. 210-219.
]120[
M. Parra, J. Durango, and S. Máttar, Microbiología, patogénesis, epidemiología, clínica y
diagnóstico de las infecciones producidas por Salmonella. Revista MVZ Córdoba, 2002. 7(2):
p. 187-200.
]121[
N. Korsak, A. Clinquart, and G. Daube, Salmonella spp. dans les denrées alimentaires
d’origine animale: un réel problème de santé publique. Ann. Méd. Vét, 2004. 148: p. 174-
193.
]122[
A. Bauer, W. Kirby, J.C. Sherris, and M. Turck, Antibiotic susceptibility testing by a
standardized single disk method. American journal of clinical pathology, 1966. 45(4): p. 493.
]123[
H.M. Ericsson and J.C. Sherris, Antibiotic sensitivity testing. Report of an international
collaborative study. Acta pathologica et microbiologica scandinavica, 1971(217): p. 90 - 217.
]124[
R.W. Finberg, R.C. Moellering, F.P. Tally, W.A. Craig, G.A. Pankey, E.P. Dellinger, M.A.
West, M. Joshi, P.K. Linden, and K.V. Rolston, The importance of bactericidal drugs: future
directions in infectious disease. Clinical infectious diseases, 2004. 39(9): p. 1314-1320.
]125[
S.Hannachi, D.Khitri, A.Benkhalifa, and A.R.A.B.d.l. perrière, INVENTAIRE VARIETAT DE
LA PALMERIE ALGERIENNE. 1998, Anep Rouiba (ALGRIE). 44-52-88-112.
]126[
C.-R. Robert, L'Oued R'ir. Annales de Géographie, 1925. 34(187): p. 53-59.
]127[
E. Bensaci, M. Saheb, Y. Nouidjem, A. Bouzegag, and M. Houhamdi, Biodiversité de
l'avifaune aquatique des zones humides sahariennes: cas de la dépression d'Oued Righ
(Algérie). Physio-Géo. Géographie physique et environnement, 2013(Volume 7): p. 211-222.
]128[
J.E. Reeb and M.R. Milota. Moisture content by the oven-dry method for industrial testing. in
50th Western Dry Kiln Association Meeting. 1999.
]129[
A.O.A.C, Official methods of Analysis. Association of Official Analytical chemists, 1975.
13th Washington D.C: p. U.S.A.
]130[
M. Pinta, Spectrométrie d’absorption atomique. Vol. N°7819. 1980, Masson paris:
Application a l’analyse chimique.
]131[
T.Y. Soro, F. Traore, and J. Sakande, Activité analgésique de l'extrait aqueux de Ximenia
americana (Linné) (Olacaceae). Comptes Rendus Biologies, 2009. 332(4): p. 371-377.
]133[
S. Al-Daihan, M. Al-Faham, N. Al-shawi, R. Almayman, A. Brnawi, and R. shafi Bhat,
Antibacterial activity and phytochemical screening of some medicinal plants commonly used
in Saudi Arabia against selected pathogenic microorganisms. Journal of King Saud
University-Science, 2013. 25(2): p. 115-120.
]134[
J.I. Pandith, Phytochemical screening of certain plant species of Agra City. Journal of drug
delivery and therapeutics, 2012. 2(4): p. 135-138.
]135[
M.Q. Samejo, A. Sumbul, S. Shah, S.B. Memon, and S. Chundrigar, Phytochemical screening
of Tamarix dioica Roxb. ex Roch. Journal of Pharmacy Research, 2013. 7(2): p. 181-183.
]136[
Y. RNS and A. Munin, Phytochemical analysis of some medicinal plants. Journal of
Phytology, 2011. 3(12): p. 10-14.
]137[
R. Yadav and M. Agarwala, Phytochemical analysis of some medicinal plants. Journal of
phytology, 2011. 3(12).
]138[
N. Savithramma ,M.L. Rao, and D. Suhrulatha, Screening of medicinal plants for secondary
metabolites. Middle-East Journal of Scientific Research, 2011. 8(3): p. 579-584.
145 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
]139[
A.A. Kader and A.M. Hussein, HARVESTING AND POSTHARVEST HANDLING OF
DATES, in The International Center for Agricultural Research in the Dry Areas. 2009. p. 1-
15.
]140[
A.S. Hussein, G.A. Alhadrami, and Y.H. Khalil, The use of dates and date pits in broiler
starter and finisher diets. Bioresource Technology, 1998. 66(3): p. 219-223.
]141[
S. Besbes, C. Blecker, C. Deroanne, N.-E. Drira, and H. Attia, Date seeds: chemical
composition and characteristic profiles of the lipid fraction. Food Chemistry, 2004. 84(4): p.
577-584.
]142[
I. Nehdi, S. Omri, M.I. Khalil, and S.I. Al-Resayes, Characteristics and chemical composition
of date palm (Phoenix canariensis) seeds and seed oil. Industrial Crops and Products, 2010.
32(3): p. 360-365.
]143[
A. Said, D. Kaoutrher, B. Ahmed, M. Tama, and T. Brahim, Dates Quality Assessment of the
Main Date Palm Cultivars Grown in Algeria. Annual Research & Review in Biology, 2014.
4(3): p. 487.
]144[
M.A. Meligi and G.F. Sourial, Fruit quality and general evaluation of some Iraqi date palm
cultivars grown under conditions of barrage region. First symposium on the date palm, 1982:
p. 212-220.
]145[
S. Mohammed, H. Shabana, and K. Mawlod, Evaluation and identification of Iraqi date
cultivars: fruit characteristics of fifty cultivars. Date Palm J, 1983. 21(1): p. 27-55.
]146[
M. Ben Salah and R. Hellali, Composition chimique des fruits de 15 cultivars tunisiens de
palmier dattier (Phoenix dactylifera L.). PGRN. FAO. Bioversity, 2011. 148: p. 19-25.
]147[
F. Saad, M. Shaheen, and M. Bacha, Chemical Analysis of Fruits of Some Saudi-Grown Date
Palm Cultivars with Emphasis on their min-eral content. Proc. Saudi BioI. Soc, 1986. 9: p.
25-33.
]148[
S.O. Oni, A.M. Adeosun, O.A. Ladokun, O.M. Ighodaro, and M. Oyedele, Nutritional and
phytochemical profile of niger cultivated date palm ( Phoenix Dactilyfera L). J Food Nutr Sci,
2015 :3 .p. 114-118.
]149[
N.K. Al-Dawah and S.L. Ibrahim, Phytochemical characteristics of Date Palm (Phoenix
dactylifera L.) leaves extracts | مجلة الكوفة للعلوم الطبية البيطرية.Kufa Journal For Veterinary
Medical Sciences, 2013. 4(1): p. 90-95.
]150[
A. Khoddami, M.A. Wilkes, and T.H. Roberts, Techniques for analysis of plant phenolic
compounds. Molecules, 2013. 18(2): p. 2328-2375.
]151[
J. Dai and R.J. Mumper, Plant phenolics: extraction, analysis and their antioxidant and
anticancer properties. Molecules, 2010. 15(10): p. 7313-7352.
]152[
H.H. Wijngaard, C. Rößle, and N. Brunton, A survey of Irish fruit and vegetable waste and by-
products as a source of polyphenolic antioxidants. Food Chemistry, 2009. 116(1): p. 202-207.
]153[
A.T. Hoye, J.E. Davoren, P. Wipf, M.P. Fink, and V.E. Kagan, Targeting mitochondria.
Accounts of chemical research, 2008. 41(1): p. 87-97.
]154[
L. Zhang, A.S. Ravipati, S.R. Koyyalamudi, S.C. Jeong, N. Reddy, P.T. Smith, J. Bartlett, K.
Shanmugam, G. Münch, and M.J. Wu, Antioxidant and anti-inflammatory activities of
selected medicinal plants containing phenolic and flavonoid compounds. Journal of
agricultural and food chemistry, 2011. 59(23): p. 12361-12367.
]155[
X.-H. Jin, K. Ohgami, K. Shiratori, Y. Suzuki, Y. Koyama, K. Yoshida, I. Ilieva, T. Tanaka,
K. Onoe, and S. Ohno, Effects of blue honeysuckle (Lonicera caerulea L.) extract on
lipopolysaccharide-induced inflammation in vitro and in vivo. Experimental Eye Research,
2006. 82(5): p. 860-867.
]156[
W. Sawadogo, A. Maciuk, J. Banzouzi, P. Champy, B. Figadere, I. Guissou, and O.
Nacoulma, Mutagenic effect, antioxidant and anticancer activities of six medicinal plants from
Burkina Faso. Natural product research, 2012. 26(6): p. 575-579.
]157[
C. Pieme, V. Penlap, J. Ngogang, and M. Costache, In vitro cytotoxicity and antioxidant
activities of five medicinal plants of Malvaceae family from Cameroon. Environmental
toxicology and pharmacology, 2010. 29(3): p. 223-228.
]158[
S. Ramos, Cancer chemoprevention and chemotherapy: dietary polyphenols and signalling
pathways. Molecular nutrition & food research, 2008. 52(5): p. 507-526.
146 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
]159[
V. Slivova, G. Zaloga, S.J. DeMichele, P. Mukerji, Y.-S. Huang, R. Siddiqui, K. Harvey, T.
Valachovicova, and D. Sliva, Green tea polyphenols modulate secretion of urokinase
plasminogen activator (uPA) and inhibit invasive behavior of breast cancer cells. Nutrition
and cancer, 2005. 52(1): p. 66-73.
]160[
W. Kusirisin, S. Srichairatanakool, P. Lerttrakarnnon, N. Lailerd, M. Suttajit, C. Jaikang, and
C. Chaiyasut, Antioxidative activity, polyphenolic content and anti-glycation effect of some
Thai medicinal plants traditionally used in diabetic patients. Medicinal Chemistry, 2009. 5(2):
p. 139-147.
]161[
A. Scalbert, C. Manach, C. Morand, C. Rémésy, and L. Jiménez, Dietary polyphenols and the
prevention of diseases. Critical reviews in food science and nutrition, 2005. 45(4): p. 287-306.
]162[
E.R. Lee, G.H. Kang, and S.G. Cho, Effect of flavonoids on human health: old subjects but
new challenges. Recent Pat Biotechnol, 2007. 1(2): p. 139-50.
]163[
G. Dinelli, A.S. Carretero, R. Di Silvestro, I. Marotti, S. Fu, S. Benedettelli, L. Ghiselli, and
A.F. Gutiérrez, Determination of phenolic compounds in modern and old varieties of durum
wheat using liquid chromatography coupled with time-of-flight mass spectrometry. Journal of
Chromatography A, 2009. 1216(43): p. 7229-7240.
]164[
C.Y. Cheok, H.A.K. Salman, and R. Sulaiman, Extraction and quantification of saponins: A
review. Food Research International, 2014. 59 :p. 16-40.
]165[
J.M. Augustin, V. Kuzina, S.B. Andersen, and S. Bak, Molecular activities, biosynthesis and
evolution of triterpenoid saponins. Phytochemistry, 2011. 72(6): p. 435-457.
]166[
E. Wina, S. Muetzel, and K. Becker, The Impact of Saponins or Saponin-Containing Plant
Materials on Ruminant Production A Review. Journal of agricultural and food chemistry,
2005. 53(21): p. 8093-8105.
]167[
H. Wiedenfeld and J. Edgar, Toxicity of pyrrolizidine alkaloids to humans and ruminants.
Phytochemistry Reviews, 2011. 10(1): p. 137-151.
]168[
M. Al-Farsi, C. Alasalvar, A. Morris, M. Baron, and F. Shahidi, Compositional and sensory
characteristics of three native sun-dried date (Phoenix dactylifera L.) varieties grown in
Oman. J Agric Food Chem, 2005. 53(19): p.91-7586 .
]169[
M.J. Amiot, A. Fleuriet, and J.J. Macheix, Importance and evolution of phenolic compounds
in olive during growth and maturation. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1986.
34(5): p. 823-826.
]170[
A. Kumaran and R. Joel Karunakaran ,In vitro antioxidant activities of methanol extracts of
five Phyllanthus species from India. LWT - Food Science and Technology, 2007. 40(2): p.
344-352.
]171[
R.S. Govardhan Singh, P.S. Negi, and C. Radha, Phenolic composition, antioxidant and
antimicrobial activities of free and bound phenolic extracts of Moringa oleifera seed flour.
Journal of Functional Foods, 2013. 5(4): p. 1883-1891.
]172[
P. Prieto, M. Pineda, and M. Aguilar, Spectrophotometric quantitation of antioxidant capacity
through the formation of a phosphomolybdenum complex: specific application to the
determination of vitamin E. Analytical biochemistry, 1999. 269(2): p. 337-341.
]173[
N. Dasgupta and B. De, Antioxidant activity of some leafy vegetables of India: A comparative
study. Food Chemistry, 2007. 101(2): p. 471-474.
]174[
C. Le Bourvellec, D. Hauchard, A. Darchen, J.-L. Burgot, and M.-L. Abasq, Validation of a
new method using the reactivity of electrogenerated superoxide radical in the antioxidant
capacity determination of flavonoids. Talanta, 2008. 75(4): p. 1098-1103.
]175[
M.L. Belfar, T. Lanez, A. Rebiai, and Z. Ghiaba, Evaluation of antioxidant capacity of
propolis collected in various areas of Algeria using electrochemical techniques. Int. J.
Electrochem. Sci, 2015. 10: p.9651-9641 .
]176[
S. El-Sohaimy and E. Hafez, Biochemical and nutritional characterizations of date palm fruits
(Phoenix dactylifera L.). J Appl Sci Res, 2010. 6: p. 1060-1067.
]177[
B. Sultana, F. Anwar, and M. Ashraf, Effect of extraction solvent/technique on the antioxidant
activity of selected medicinal plant extracts. Molecules, 2009. 14(6): p. 2167-2180.
147 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
]178[
B. Sultana, F. Anwar, and R. Przybylski, Antioxidant activity of phenolic components present
in barks of Azadirachta indica, Terminalia arjuna ,Acacia nilotica, and Eugenia jambolana
Lam. trees. Food Chemistry, 2007. 104(3): p. 1106-1114.
]179[
P. Siddhuraju and K. Becker, Antioxidant properties of various solvent extracts of total
phenolic constituents from three different agroclimatic origins of drumstick tree (Moringa
oleifera Lam.) leaves. J Agric Food Chem, 2003. 51(8): p. 2144-55.
]180[
R.G. Singh, P.S. Negi, and C. Radha, Phenolic composition, antioxidant and antimicrobial
activities of free and bound phenolic extracts of Moringa oleifera seed flour. Journal of
Functional Foods, 2013. 5(4): p. 1883-1891.
]181[
Z. Sadeghi, J. Valizadeh, and O.A. Shermeh, Antioxidant activity and total phenolic contents
of some date varieties from Saravan Region, Baluchistan, Iran. Journal of Medicinal Plants
Research, 2015. 9(4): p. 78-83.
]182[
F. Masmoudi-Allouche, S. Touati, K. Mnafgui, N. Gharsallah, A. El Feki, and N. Allouche,
Phytochemical profile, antioxidant, antibacterial, antidiabetic and anti-obesity activities of
fruits and pits from date palm (Phoenix dactylifera L.) grown in south of Tunisia. Journal of
Pharmacognosy and Phytochemistry, 2016. 5(3): p. 15-22.
]183[
N. Amessis-Ouchemoukh, I.M. Abu-Reidah, R. Quirantes-Piné, K. Madani, and A. Segura-
Carretero, Phytochemical profiling, in vitro evaluation of total phenolic contents and
antioxidant properties of Marrubium vulgare (horehound) leaves of plants growing in Algeria.
Industrial Crops and Products, 2014. 61(0): p. 120-129.
]184[
P.C. Eklund, O.K. Långvik ,J.P. Wärnå, T.O. Salmi, S.M. Willför, and R.E. Sjöholm,
Chemical studies on antioxidant mechanisms and free radical scavenging properties of
lignans. Organic & biomolecular chemistry, 2005. 3(18): p. 3336-3347.
]185[
L. Ma, H. Chen, W. Zhu, and Z. Wang, Effect of different drying methods on physicochemical
properties and antioxidant activities of polysaccharides extracted from mushroom Inonotus
obliquus. Food Research International, 2013. 50(2): p. 633-640.
]186[
B. Matthäus, Oxidation of edible oils. Oxidation in foods and beverages and antioxidant
applications. Volume 2: Management in different industry sectors, 2010: p. 183-238.
]187[
P. Molyneux, The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating
antioxidant activity. Songklanakarin J Sci Technol, 2004. 26(2): p. 211-219.
]188[
S. Laouini, L. Segni, M. Ouahrani, N. Gherraf, and S. Mokni ,Phytochemical analysis,
antioxidant and antimicrobial activities of leaves extract of date palm grown in Algeria.
Journal of Fundamental and Applied Sciences, 2012. 4(2): p. 142-154.
]189[
A.B. Aliyu, M.A. Ibrahim, A.M. Musa, A.O. Musa, J.J. Kiplimo, and A.O. Oyewale, Free
radical scavenging and total antioxidant capacity of root extracts of Anchomanes difformis
Engl.(Araceae). Acta Pol Pharm, 2013. 70(1): p. 115-21.
]190[
R.T. Cirz, J.K. Chin, D.R. Andes, V. de Crécy-Lagard, W.A. Craig, and F.E. Romesberg,
Inhibition of mutation and combating the evolution of antibiotic resistance. PLoS Biol, 2005.
3(6): p. e176.
]191[
Krimat Soumia, Dob Tahar, Lamari Lynda, Boumeridja Saida, Chelghoum Chabane, and M.
Hafidha, Antioxidant and antimicrobial activities of selected medicinal plants from Algeria.
Journal of Coastal Life Medicine, 2014. 2(6): p. 478-483.
]192[
S. Shakouie, M. Esk, S. Shahi, M. FroughReihani, M. Soroush, and A. Gosili, Antimicrobial
efficacy of AH-Plus, adseal and Endofill against Enterococcus Faecalis-an in vitro study.
African Journal of Microbiology Research, 2012. 6(5): p. 991-994.
]193[
P. Hili, C. Evans, and R. Veness, Antimicrobial action of essential oils: the effect of
dimethylsulphoxide on the activity of cinnamon oil. Letters in applied microbiology, 1997.
24(4): p. 269-275.
]194[
B. Kablan, M. Adiko, and D. Abrogoua, Évaluation in vitro de l’activité antimicrobienne de
Kalanchoe crenata et de Manotes longiflora utilisées dans les ophtalmies en Côte d’Ivoire.
Phytothérapie, 2008. 6(5): p. 282-288.
]195[
H. Jouad, M. Haloui, H. Rhiouani, J. El Hilaly, and M. Eddouks, Ethnobotanical survey of
medicinal plants used for the treatment of diabetes, cardiac and renal diseases in the North
centre region of Morocco (Fez-Boulemane). J Ethnopharmacol, 2001. 77(2-3): p. 175-82.
148 | 2018
الم ارج ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــع
]196[
M.N. Al-Seeni, Minerals content and antimicrobial efficacy of date extracts against some
pathogenic bacteria. Life Sci J, 2012. 9: p. 504-508.
]197[
F.A. Draughon, Use of botanicals as biopreservatives in foods .Food Technology, 2004.
58(2): p. 20- 28.
]198[
E. Nweze, J. Okafor, and O. Njoku, Antimicrobial activities of methanolic extracts of Trema
guineensis (Schumm and Thorn) and Morinda lucida benth used in Nigerian. Bio-research,
2004. 2(1): p. 39-46.
149 | 2018
الخاتمـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــة
الخاتمــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــة
الخاتمـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــة
ين ـ ـدرج هذا العمل في إط ـ ـار تثميـ ـ ـن بعض التمـ ـ ـور في منطق ـ ـ ـة وادي ري ـ ـغ ،نظ ار لما لها من قي ـ ـم
غذائي ـة و اقتصادية لسكان هذه المنطقة ،لكنها تفتقر إلى الدراسات العلمية التي تبرز فوائدها الصحية.
لذا ركزنا اهتمامنا على دراسـ ـ ـة لحمية خمس أصنـ ـ ـاف من التمور الموجودة و المشهـ ـ ـورة في هذه المنطق ـ ـ ـة
و هي Tns ،DB ،Cht ،Gh :و ،Tnbو هذا بالكشف الكيميائي ألهم المركبات الفعالة و استخالص
المركب ـ ـ ـات الفينوليـ ـ ـ ـة لهـ ـ ـذه األصن ـ ـ ـاف باستعمـ ـ ـ ـال تقنيتين و باستخـ ـ ـ ـ ـدام أربعة أنظم ـ ـ ـة (المستخلصات B
و المستخلصات ،)Fثم تقدير المحتوى الكلي للفينوالت و الفالفونويدات لهذه المستخلصات ،و تقييم
الفعالية المضادة لألكسدة بطريقتين (طريقة كيميائية و طريقة كهروكيميائية) ،و الفعالية المضادة للبكتيريا
لهذه المستخلصات.
من خالل نتائج الكشف الكيميائي لبعض المركبات الفعالة أثبتنا وجود كل من الفينوالت،
الفالفونويدات ،الكومارينات ،الكربوهيدرات و الصابونين ،في حين سجلنا غياب كل من القلويدات،
الفلوباتانينات ،الستيرويدات ،التيربينات و البروتينات ،و هذا على مستوى األصناف الخمسة.
بصفة عامة أثبتت النتائج أفضلية المستخلصات Bعلى المستخلصات Fو هذا في التقدير الكمي
للفينوالت و الفالفونويدات الكلية و تقييم الفعالية المضادة لألكسدة ،و على العكس من ذلك فإن
المستخلصات Fأفضل من المستخلصات Bفي تقييم الفعالية المضادة للبكتيريا.
من خالل نتائج التقدير الكمي أثبت احتواء مستخلص الـ ـ Acetone/ H2Oصنف Chtأعلى كمية
للفينوالت الكلية ،و احتواء مستخلص ال ـ Acetone/ H2Oصنف Chtأعلى كمية للفالفونويدات الكلية
مقارنة بالمستخلصات األخرى.
و قد جاءت نتائج التقييم في الفعالية المضادة لألكسدة كالتالي:
قدرة عالية الطريقة الكيميائي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة :في اختبار ال ـ DPPHأظهر مستخلص Methanol / H2Oصـ ـ ـ ـنـف
.
Cht
في كسح جذر ال ـ DPPHمقارنة بالمستخلصات األخرى ،في حين جاء مستـ ـ ـ ـ ــخلص Acetone/ H2O
.
صنف Chtأفضل المستخلصات فعالية في اختبار القدرة االرجاعية للحديد ،أما المستخلص المائي
لصنف Tnsفقد كان أفضل هذه المستخلصات قدرة مضادة لألكسدة في اختبار موليبدات الفوسفات.
الطريقة الكهروكيميائية :اعتمدنا فيها على تقنية الفلطا متري الحلقي و ذلك لتقدير فعالية المستخلصات
،O•−حيث أظهرت النتـ ـ ـ ـ ــائج القدرة العالية لمستخلص ال ـ Methanol / H2Oصـ ـ ـ ـنـف
في كسح جذر الـ ـ 2
أما فيما يخص الفعاليـ ـ ـ ـة المضـ ــادة للبكتيـ ـ ـ ـريا فق ـ ـ ـد اختبـ ـ ـ ـرنا حساسية ثالثة سـ ـ ـ ــالالت بكتي ـ ـ ـ ـ ـرية (
)P. aerugino ، S. aureus،E. coliتجاه المستخلصات الفينولية ،حيث أظهرت النتائج مايلي :لم تبد أي
بكتيريا من السالالت البكتيرية الثالثة أي حساسية تجاه المستخلصات ،Bفي حين أبدت السالالت
البكتيرية الثالث حساسية تجاه المستخلصات - Fفقد أبدت E. coliحساسية عالية تجاه مستخلص Gh
مقارنة بالمستخلصات األخرى ،أما بالنسبة S. aureusفقد أبدت حساسية عالية تجاه مستخلص DB
مقارنة بالمستخلصات األخرى ،أما بالنسبة P. aeruginoفقد أبدت حساسية عالية تجاه مستخلص Tns
مقارنة بالمستخلصات األخرى -لكن هذه المستخلصات لم تصل إلى مستوى فعالية المضادات الحيوية.
بناءا على هذه النتائج يمكن اعتبار مستخلصات أصناف التمور المدروسة غنية نوعا ما بالمركبات
المضادة لألكسدة خاصة صنف Chtهذا األخير صنف نادر لذا يجب أن نساعد في الحث على غرسه
في باقي مناطق الوطن و العالم ،في حين تمتلك مستخلصات هذه األصناف نشاطية مضادة للبكتيريا
ضعيفة.
لذلك نأمل في المستقبل أن يتم فصل و تنقية المركبات الفينولية خاصة صنف Chtلكي نحدد بالضبط
المركبات المسؤولة عن الفعالية المضادة لألكسدة و كذا تحسين الفعالية المضادة للبكتيريا ،باالظافة إلى
دراسة أصناف أخرى من التمور بالألخص النادرة منها.
واد ريــغ ،ورقـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــلة ،ال ـ ـ ـوادي ،متلي ـ ـ ـ ـ ـلي ،مـ ـ ـزاب،
تاريــــــــخ الجني :جويلي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــة ( تيــدك ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــالت) ،أوت سبتمب ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــر في باقي المن ـ ـ ـ ـ ـ ــاطق.
لــــون الثمـــــــــــار في مرحلة التمـــــــــر :بني أو كهرمان لــــون الطلـــــع :أصفر برتقـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــالي
األوراس.
لـــون الثمــار في مرحلة التمـــر :أصفر أو كهرمان لـــــــــــون الطلــــــع :أصفر برتق ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــالي
شكـــــــــــل النــــــــــواة :مستقيـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم شكـل الثمــار :بيضـ ـاوي أو مستقي ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم
لـــون النــــــــــواة :رمادي أو بني فات ـ ـ ـ ـح وزن 20ثمــــــــــــرة 70 :إلـ ـ ـ ـ ـى 165غ
شكـــــــــــل النــــــــــواة :بشكل الزيتونة أو مستقي ـ ـ ـ ــم لـــــــــــون الطلــــــــــــع :أصفر برتقـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ــالي
وزن 20نـــــــــــــواة 13 :إل ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـى 20غ حجـــــــم الثمـــــــــــار :صغيـ ـ ـ ــر إلى متوسـ ـ ـ ــط
لـــــــــــون النــــــــــواة :بني فاتح أو بني وزن 20ثمــــــــــــــــــــــــــــرة 100 :إلى 200غ
طـــــــــــول النخلـــــــة 385 :سـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم لـــــــون الثمــــار في مرحلة البســــــر :أصفر
الزيبان ،األوراس.
تاريــــــــخ الجني :سبتمبر (تيــدكلــت) ،أكتـ ـ ـ ـ ــوب ــر باقي المن ـ ـ ــاطق
طـــــــــــول النخلـــــــــــة 275 :سـ ـ ـ ـ ـ ـ ـ ـم لــون الثمار في مرحلة البســـر :أصفر
المنشــــــــــــــــورات العلمية
العالميـــــــــة
1- C. Bensaci, Z. Ghiaba, and M. Saidi, Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 2015,
7 (7): 27-31. Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 2015. 7(7): p. 27-31.
الملتقيـــــــــــــــات العلمية
العالميـــــــــة
1- BENSACI Cheyma, SAIDI Mokhtar, GHIABA Zineb and Youcef Cherbi, 4ème Congrès
International de Biodiversité Végétale et de Biotechnologie: In vitro Antioxidant and
Antibacterial Activities of Methanol Extract of three Date Palm (Phoenix dactylifera L.) Fruits
from Algeria: Marrakech 6 - 7 Octobre 2017.
2- BENSACI Cheyma, SAIDI Mokhtar and GHIABA Zineb. 2ème séminaire international en
biologie « Valorisation des Bio-Ressources dans les Zones Arides »: Antioxidant and
Antibacterial Activities of Date Palm (Phoenix dactylifera L.) Fruits from Oued Righ Region:
Bechar 10 - 11 Décembre 2017.
3- BENSACI Cheyma, SAIDI Mokhtar, GHIABA Zineb , Assia Belfar and Mahdi Belguidoum,
INTERNATIONAL SEMINAR ON MEDICINAL PLANTS: Phytochemical screening, Total
antioxidant capacity and antibacterial activity of Degla Beida and Tinissine Date Palm (Phoenix
dactylifera L.) Fruits from Algeria : EL-OUED 17 – 18 January 2018.
الوطنيــــــــــة
1- BENSACI Cheyma, YCB Days 2014: Preliminary Phytochemical Analysis and Phenolic content
of three Algerian date (Phoenix dactylifera L.) cultivars: A comparative study: BECHAR 21-23
October 2014.
2- BENSACI Cheyma, SAIDI Mokhtar and GHIABA Zineb. 1er SEMINAIRE NATIONAL “
PHYTOTHERAPIE & SANTE”. Comparison of phenolic content and antioxidant activity of
three date palm (Phoenix dactylifera L.) cultivars: In different solvent systems: BLIDA les 16, 17
et 18 Mai 2017.
3- BENSACI Cheyma, SAIDI Mokhtar and GHIABA Zineb. Séminaire National sur la Valorisation
des Substances Naturelles. STUDY OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF SOME DATE
PALM (PHOENIX DACTYLIFERA L.) FRUITS FROM ALGERIA: El-Oued 11-12 Octobre
2017.
4- BENSACI Cheyma, SAIDI Mokhtar and GHIABA Zineb. Séminaire National sur les Plantes
Spontanées. In vitro antibacterial activity of Ghars and Tinissine date palm (Phoenix dactylifera
L.) fruits from Algeria: a comparative study: Ghardaïa le 15 Novembre 2017.
162 | 2018