0402 4.2.1药理学4.2.2药代动力学 2 1933 Gpha 1 灌胃给药对实验动物中枢神经系统的影响

天津天诚新药评价有限公司专题编号：1933-GPHA/1
目录
研究时间节点.............................................................................................................................4
研究人员与工作内容表.............................................................................................................5
摘要.............................................................................................................................................6
1 试验目的.................................................................................................................................8
2 遵循的规范和指导性文件.....................................................................................................8
2.1 药物非临床研究质量管理规范（GLP）...................................................................... 8
2.2 动物管理（AAALAC）................................................................................................. 8
2.3 指导原则..........................................................................................................................8
2.4 其它..................................................................................................................................8
3 供试品和对照品.....................................................................................................................8
3.1 基本信息..........................................................................................................................8
3.2 配制及保存......................................................................................................................9
3.3 供试品检测......................................................................................................................9
3.4 剩余供试品的处理........................................................................................................11
4 实验动物...............................................................................................................................11
4.1 动物选择依据................................................................................................................11
4.2 动物基本信息................................................................................................................11
4.3 动物设施........................................................................................................................12
4.4 动物饲料........................................................................................................................12
4.5 动物饮用水....................................................................................................................12
4.6 动物垫料........................................................................................................................12
4.7 动物饲养条件................................................................................................................12
4.8 动物饲养管理................................................................................................................13
4.9 动物福利........................................................................................................................13
5 主要试剂及配制...................................................................................................................13
5.1 普通试剂........................................................................................................................13
5.2 工具试剂........................................................................................................................13
6 主要仪器...............................................................................................................................13
7 试验设计...............................................................................................................................14
7.1 试验设计依据................................................................................................................14
第 2页共 46页
7.2 组别设置........................................................................................................................15
7.3 剂量设置........................................................................................................................15
7.4 给药途径及选择理由....................................................................................................15
7.5 给药频率、给药体积....................................................................................................16
7.6 检查指标........................................................................................................................16
8 试验方法...............................................................................................................................16
8.1 动物接收与检验............................................................................................................16
8.2 动物适应期观察............................................................................................................16
8.3 动物筛选、分组、标识及处理....................................................................................16
8.4 给药................................................................................................................................17
8.5 检测指标........................................................................................................................17
9 数据分析方法.......................................................................................................................19
10 影响研究可靠性和造成研究工作偏离试验方案的异常情况.........................................19
11 试验结果.............................................................................................................................19
11.1 对自主活动的影响......................................................................................................19
11.2 对平衡协调能力的影响..............................................................................................23
11.3 与阈下剂量戊巴比妥钠的协同睡眠作用..................................................................24
11.4 对体温的影响..............................................................................................................25
12 试验结论.............................................................................................................................25
13 原始资料保存地点.............................................................................................................25
14 参考文献.............................................................................................................................26
附表Ⅰ：个体数据表...............................................................................................................27
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研究时间节点
试验内容试验日期
试验开始 20200402
动物引进 20200407、20200714
给药 20200410、20200716
自主活动检测 20200716、20200717
平衡协调能力检测 20200716、20200717
与阈下剂量戊巴比妥钠的协
20200410
同睡眠作用检测
体温检测（伴随心血管试验） 20200401~20200424
试验完成见报告封面研究结束日期
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研究人员与工作内容表
职责姓名主要工作内容
全面负责、方案制订、动物筛选、
专题负责人钟飞供试品配制、动物称重、给药、临床观察、
试验数据采集、动物安乐死、数据复核、报告撰写
专题负责人助理潘德桐供试品配制、数据处理、数据统计
动物接收检验、动物称重、动物筛选、动物分组、
主要试验者（1）孙程颖
临床观察、给药、试验数据采集、动物安乐死
动物接收检验、动物称重、动物筛选、动物分组、
（2）付合明
给药
（3）段蕊动物称重、试验数据采集、给药
（4）申宸动物接收检验、动物安乐死、试验数据采集
（5）李坤玲动物安乐死、试验数据采集
（6）任萌动物称重、动物分组、临床观察
（7）周博宇试验数据采集
（8）张海娇试验数据采集
（9）刘约瑟动物接收检验、试验数据采集
（10）徐德璐供试品配制
（11）康玮给药
供试品管理肖宇萌供试品管理
供试品分析贾长虹供试品检测负责人
临床兽医（1）葛鹏主管兽医
（2）门建悦兽医
（3）吴昊泽兽医
动物保障人员葛鹏动物保障负责人
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摘要
专题名称 DT678 灌胃给药对实验动物中枢神经系统的影响
专题编号 1933-GPHA/1
专题负责人钟飞
委托单位北京双鹭药业股份有限公司
研究机构天津天诚新药评价有限公司
供试品 DT678
溶媒对照 0.5%羧甲基纤维素钠溶液（简称 0.5%CMC-Na 溶液）
阳性对照药地西泮注射液
实验动物（1）ICR 小鼠，100 只，SPF 级，雌雄各半；（2）比格犬，8 只，普
通级，雌雄各半。
组别设置（1）小鼠试验设置 5 个组，分别为溶媒对照组、阳性对照组、DT678
低、中、高剂量组，每组 10 只；（2）比格犬试验设置 4 个组，分别
为溶媒对照组、DT678 低、中、高剂量组。
给药剂量（1）小鼠试验低、中、高剂量设计为 5、15、45 mg/kg，阳性对照剂
量为 7 mg/kg，溶媒对照组给予等体积的 0.5%CMC-Na 溶液；（2）
比格犬试验低、中、高剂量设计为 1、3、6 mg/kg，溶媒对照组给予
等体积的 0.5%CMC-Na 溶液。
给药方式灌胃
给药周期单次给药
检查指标（1）小鼠试验：给药前、药后 0.5、1.5、3、6、10、24 小时各记录一
次小鼠自主活动和平衡协调能力，药后 0.5 小时检测与阈下剂量戊巴
比妥钠的协同睡眠作用；（2）比格犬试验：给药前、药后 0.5、1、2、
4、6、10、24 小时各记录一次比格犬体温。
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研究结果
（1）小鼠单次灌胃给药后可见：与溶媒对照组比较，药后 0.5、1.5、3、6、10、24
小时低、中、高剂量组动物自主活动指标（总路程、平均速度、运动时间、静息时间）
未见明显药物影响；药后 0.5、1.5、3、6、10、24 小时低、中、高剂量组动物平衡协调
能力未见明显异常；药后 0.5 小时与阈下剂量戊巴比妥钠协同睡眠动物数未见明显差异；
（2）比格犬单次灌胃给药后可见：与溶媒对照组比较，药后 0.5、1、2、4、6、10、
24 小时低、中、高剂量组动物体温均未见明显差异。
研究结论
（1）小鼠单次灌胃给予剂量达到 45 mg/kg 的 DT678，未见药物对动物自主活动、
平衡协调能力产生明显影响，亦未见药物与阈下剂量戊巴比妥钠产生协同睡眠作用。
（2）比格犬单次灌胃给予剂量达到 6 mg/kg 的 DT678，未见药物对体温产生明显
影响。
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1 试验目的
本试验观察 DT678 灌胃给药对实验动物中枢神经系统的影响，包括自主活动、平
衡协调能力、阈下剂量戊巴比妥钠的协同睡眠作用以及体温的变化（体温指标结合
DT678 灌胃给药对比格犬心血管系统的影响试验进行检测，相关供试品、实验动物、试
验设计、试验方法等信息详见该专题）。通过本试验研究确定 DT678 可能关系到人的
安全性的非期望药理作用，为临床研究和安全用药提供参考。
2 遵循的规范和指导性文件
2.1 药物非临床研究质量管理规范（GLP）
本专题按照原 CFDA（现 NMPA）颁布的《药物非临床研究质量管理规范》（第 34
号令）[1]的要求进行。
2.2 动物管理（AAALAC）
本公司动物管理遵循: Guide for the Care and Use of Laboratory Animals》[2]。
2.3 指导原则
原 CFDA（现 NMPA）:《药物安全药理学研究技术指导原则》[3]。
ICH:S7A: Safety Pharmacology Studies for Human Pharmaceuticals[4] 。
2.4 其它
试验实施过程中将执行本公司相关的标准操作规程（SOPs）和试验方案或方案修订。
3 供试品和对照品
3.1 基本信息
3.1.1 供试品
名称：DT678；编号：1933；批号：20191109；性状：黄色粉末、无臭；含量：99.5%；
保存条件：避光、密闭、阴凉处；有效期：20211108（暂定）；提供单位：北京双鹭药
业股份有限公司；质量检测：合格。
3.1.2 溶媒对照品
名称：羧甲基纤维素钠（CMC-Na）；规格：800~1200mPaꞏs/500 g/瓶；编号：G-1701；
批号：20161025；性状：白色或微黄色纤维状粉末；保存条件：常温；有效期：20241112；
生产单位：国药集团化学试剂有限公司。
3.1.3 阳性对照药
名称：地西泮注射液；规格：2 mL: 10 mg；批号：1806151；保存条件：遮光、密
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闭；有效期：20200531；生产厂家：天津金耀药业有限公司。
名称：地西泮注射液；规格：2 mL: 10 mg；批号：1903101；保存条件：遮光、密
闭；有效期：20210228；生产厂家：天津金耀药业有限公司。
3.2 配制及保存
3.2.1 溶媒对照品配制
溶媒对照：0.5%羧甲基纤维素钠溶液（简称 0.5%CMC-Na 溶液）。
0.5%CMC-Na 溶液的配制（以配制 100 mL 为例）：称取 CMC-Na 粉末 0.5 g，先在
容器内加入适量去离子水，边搅拌边加入 CMC-Na 粉末，连续搅拌至 CMC-Na 全部溶
解后，用去离子水稀释为 100 mL。
所配制溶液 2～8℃保存，有效期 10 天。
3.2.2 供试品配制
低剂量（5 mg/kg）组用药（0.25 mg/mL）的配制（以配制 100 mL 为例）：称取 DT678
粉末 0.025 g，放入研钵内先加入少量 0.5%CMC-Na 溶液进行研磨，研磨充分后再分多
次逐步加入 0.5%CMC-Na 溶液稀释并转入量筒内（注意转移完成后研钵内不应留有药
物残余），最后加入 0.5%CMC-Na 溶液至 100 mL 后转入合适的避光容器内，超声波清
洗机超声 15 min，磁力搅拌器 400 转搅拌 2min，混匀。
中、高剂量供试品配制方法同低剂量，具体用量参见下表：
剂量（mg/kg）浓度（mg/mL） DT678（g）总体积（mL）
15 0.75 0.075 100
45 2.25 0.225 100
转速说明：根据所配制药液体积的不同转速可适当调整，体积越大转速越高，但需避免转速太
大产生气泡。
供试品的称量和配制均需在避光条件下操作。
根据稳定性结果，配制后药液有效期设定为 72 h，保存条件设定为 2～8 ℃避光。供
试品药液在给药前 1-3 天配制，从冰箱取出后，超声 30-60 min 再给药。
3.2.3 阳性对照药配制
取地西泮注射液 2 mL，加入 0.9%氯化钠注射液混匀至 28.6 mL，配制成浓度为 0.35
mg/mL 的溶液。常温保存，有效期 1 个月。
3.3 供试品检测
3.3.1 供试品均一性检测
DT678 在 0.2 mg/mL～200 mg/mL 浓度范围内，与介质 0.5%CMC-Na 混合后，低高

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浓度上中下三层溶液中 DT678 检出浓度的 RSD≤15%，药液均一。
3.3.2 供试品稳定性检测
DT678 在 0.2 mg/mL～200 mg/mL 浓度范围内，与介质 0.5%CMC-Na 混合后，常温
避光放置 6 h、常温光照 3h 及 2～8 ℃避光保存 24h，低高浓度 DT678 测定值与 0h 测定
值 RE 绝对值≤15%，含量未发生显著变化，药液稳定。
3.3.3 伴随研究专题的供试品检测
对用于自主活动与平衡协调能力检测、协同睡眠的供试品药液进行浓度及均一性检
测，结果表明：DT678 低、中、高剂量组药液的浓度准确，药液均一。具体检测结果见
表 1、2。
表 1 供试品均一性和浓度检测结果（自主活动与平衡协调能力）
检测内容低剂量组中剂量组高剂量组
药液浓度(mg/mL) 0.25 0.75 2.25
上层药液(mg/mL) 0.233 / 2.10
中层药液(mg/mL) 0.256 / 2.16
下层药液(mg/mL) 0.244 / 2.12

均一性
X ±SD(mg/mL) 0.244±0.0116 / 2.13±0.0332
RSD(%) 4.75 / 1.56
检测结果均一 / 均一
测定浓度(mg/mL) 0.256 0.748 2.16
浓度 RE(%) 2.28 -0.206 -3.78
检测结果合格合格合格
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表 2 供试品均一性和浓度检测结果（协同睡眠）
检测内容低剂量组中剂量组高剂量组
药液浓度(mg/mL) 0.25 0.75 2.25
上层药液(mg/mL) 0.247 / 2.18
中层药液(mg/mL) 0.256 / 2.26
下层药液(mg/mL) 0.251 / 2.20

均一性
X ±SD(mg/mL) 0.251±0.00453 / 2.21±0.0402
RSD(%) 1.80 / 1.82
检测结果均一 / 均一
测定浓度(mg/mL) 0.256 0.729 2.26
浓度 RE(%) 2.27 -2.86 -0.343
检测结果合格合格合格
3.4 剩余供试品的处理
剩余药液详细登记后作为一般废弃物进行处理。
4 实验动物
4.1 动物选择依据
参照《药物安全药理学研究技术指导原则》的要求，以及该药品的本身特性，选择
啮齿类动物小鼠用于观察供试品对自主活动、平衡协调能力、与阈下剂量戊巴比妥钠的
协同睡眠作用的影响；比格犬为常用非啮齿动物，与小鼠比较，更方便检测体温指标，
因此选择比格犬用于观察供试品对体温的影响。
4.2 动物基本信息
用于与阈下剂量戊巴比妥钠协同睡眠作用检测的动物：
种系：ICR 小鼠；等级：SPF 级；周龄：引进时 4～6 周；数量：56 只，适应期结
束选择 50 只动物进行试验；性别：雌雄各半；体重：引进时体重 16.6-19.2 g。分组选
用动物体重为 20.0-21.8 g (♂)和 19.5-21.5 g(♀)；供应单位：北京维通利华实验动物技术
有限公司；生产单位许可证编号：SCXK（京）2016-0006；实验动物质量合格证编号：
1100112011014658、1100112011014659；接收日期：20200407。
用于自主活动和平衡协调能力检测的动物：
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种系：ICR 小鼠；等级：SPF 级；周龄：引进时 4～6 周；数量：56 只，适应期结
束选择 50 只动物进行试验；性别：雌雄各半；体重：引进时体重 17.0-19.4 g。分组选
用动物体重为 20.1-22.3 g (♂)和 19.2-21.1 g(♀)；供应单位：北京维通利华实验动物技术
有限公司；生产单位许可证编号：SCXK（京）2016-0006；实验动物质量合格证编号：
1100112011042832、1100112011042833；接收日期：20200714。
4.3 动物设施
设施名称：天津天诚新药评价有限公司动物实验楼（屏障环境）；设施地址：天津
市滨海高新区滨海科技园惠仁道 308 号；实验动物使用许可证号：SYXK（津）2016-0009；
签发单位：天津市科学技术委员会。
4.4 动物饲料
名称：SPF 大小鼠维持饲料；灭菌方式：：60Co 辐照；供应单位：北京科澳协力饲
料有限公司；动物饲料生产许可证号：京饲证（2018）06073；签发单位：北京市农业
局；批号：20033213、20063213。
饲料检测：每批饲料均有质量合格证和饲料供应单位提供的自检报告，每年由饲料
供应单位提供近期第三方饲料检测报告。
饲料检测结果：各项检测指标均符合要求。
4.5 动物饮用水
饮用水来源：1T/h 型多重微孔滤膜过滤系统制备的无菌水（四级过滤紫外灭菌）；
饮水方式：用饮水瓶直接灌装供应，动物自由饮水。
饮用水检测：屏障环境动物饮用水每季度由本中心自检微生物指标，每年送专业的
第三方检测机构进行卫生学评价检测。
饮用水检测结果：各项检测指标均符合要求。
4.6 动物垫料
名称：刨花垫料；灭菌方式：60Co 辐照；垫料批号：19129613、20069613；供应单
位：北京科澳协力饲料有限公司。
垫料检测：每年由垫料供应单位提供近期第三方垫料检测报告。
垫料检测结果：各项检测指标符合要求。
4.7 动物饲养条件
动物饲养于聚丙烯鼠盒中，鼠盒规格为长×宽×高＝32cm× 21cm×17cm，雌雄分养，
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每盒饲养同性别 1～5 只动物；温度：设定温度范围 20℃～26℃；湿度：设定湿度范围
40%～70%；换气次数：不少于 15 次全新风/小时；光照：12 小时明 12 小时暗交替。
4.8 动物饲养管理
除特殊要求（如禁食）外，动物自由采食，自由饮水。饮水瓶和瓶中动物饮用水每
天更换，使用后饮水瓶经脉动真空灭菌器高压消毒后再次使用。
饲养笼具每周更换 1 次，所有动物饲养笼具均通过脉动真空灭菌器高压消毒后进入
屏障环境使用；动物饲养笼架每周清洁、消毒擦拭 1 次。动物饲养观察室每天进行清洁
消毒，范围包括：地面、台面、桌面、门窗和进排风口。屏障环境使用的消毒液包括：
0.1%新洁尔灭溶液、0.1%过氧乙酸溶液和 1:250 的 84 消毒液，三种消毒液轮流使用，
每周使用一种。
4.9 动物福利
本公司已通过国际实验动物饲养管理评估与认证协会（AAALAC）认证，有专门的
实验动物管理与使用委员会（IACUC）负责动物福利方面的监督、审查和指导工作。本
试验的动物使用方法经机构 IACUC 批准。IACUC 批准号为：2020040304、2020070904。
5 主要试剂及配制
5.1 普通试剂
名称：0.9%氯化钠注射液：规格：250 mL: 2.25 g；批号：D19071209A；生产厂家：
山东科伦药业有限公司。
名称：0.9%氯化钠注射液：规格：250 mL: 2.25 g；批号：1912233402；生产厂家：
石家庄四药有限公司。
5.2 工具试剂
名称：戊巴比妥钠：规格：25 g/瓶；批号：160606；生产厂家：德国默克；配制：
称取 0.0604 g 戊巴比妥钠粉末，加入 0.9%氯化钠注射液混匀至 50 ml，配制成 1.2 mg/mL
溶液，常温保存备用。
6 主要仪器
试验使用的主要仪器及详细信息见表 3：
第 13页共 46页
表 3 主要仪器列表
仪器名称仪器型号仪器编号生产厂家

ML104 EQ02-0206 梅特勒托利多仪器有限公司
ML203 EQ02-0207 梅特勒托利多仪器有限公司
电子天平 EQ02-0134
E1200-1 EQ02-0135 常熟市双杰测试仪器厂
EQ02-0136
小鼠自发活动箱：安徽淮北正华生物
动物行为轨迹
/ EQ01-1501 仪器设备有限公司；EthoVision XT
记录分析仪
软件：Noldus Information Technology。
EQ03-1602
转棒式疲劳仪 YLS-4C 安徽淮北正华生物仪器设备有限公司
EQ03-1603
7 试验设计
7.1 试验设计依据
7.1.1 指导原则
根据《药物安全药理学研究技术指导原则》的要求。
7.1.2 药理及临床拟用情况
DT678 是氯吡格雷结构类似药，属于血小板聚集抑制剂，可选择性地抑制二磷酸腺
苷（ADP）与它的血小板受体的结合及继发的 ADP 介导的糖蛋白 GPⅡb/Ⅲa 复合物的活
化。
该药临床拟用于预防和治疗因血小板高聚集而引起的心脑及其它动脉循环障碍疾
病，可用于预防和治疗冠心病、急性心肌梗死、脑血栓、中风等血栓性疾病，临床拟用
剂量为 3 mg/人/天。
7.1.3 药效学试验
DT678 对大鼠血小板聚集的抑制作用试验结果：DT678 灌胃给药后，能剂量依赖性
抑制 ADP 诱导的大鼠血小板聚集，0.1-3 mg/kg 即开始明显发挥其抑制作用，3 mg/kg
几乎达最大效应；DT678 抗 ADP 诱导的血小板聚集的半数有效剂量(ED50)为 0.22 mg/kg。
DT678 对大鼠动-静脉旁路血栓形成的影响试验结果：DT678 灌胃给药后，可剂量
依赖性地抑制动-静脉旁路血栓形成，使血栓湿重降低，DT678 0.1、0.3、1 mg/kg 可使
湿重抑制率分别达 14.2%、46.6%、60.0%，起效剂量为 0.3mg/kg。
DT678 对大鼠颈动脉血栓形成的影响试验结果：DT678 灌胃给药后，可剂量依赖性
地延长血栓形成时间，起效剂量为 0.3mg/kg。
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DT678 对 FeCl3 诱导的大鼠脑血栓作用的试验结果：DT678 灌胃给药 24h 后，可不
同程度恢复受损神经功能，降低神经缺陷评分，可使脑梗死范围及脑水肿程度降低，起
效剂量均为 1mg/kg。
7.1.4 药代动力学预试资料
健康比格犬单次灌胃给予 1mg/kg DT678 后，血浆中 DT678 和活性代谢物的 Tmax
分别为 0.5±0.0 h、1.0±0.0 h，AUC0-t 分别为 660±173 nMꞏh、127±23.5 nMꞏh，Cmax 分别
为 431±234 nM、60.6±26.0 nM。
7.1.5 毒理预试资料
大鼠单次给药毒性试验预试验：大鼠单次灌胃给予 2000 mg/kg 的 DT678，除对大
鼠体重有一过性降低作用外，未出现其它明显毒性反应。
大鼠重复灌胃给药 2 周毒性试验预试验：以 5、40、200 mg/kg 对大鼠连续灌胃给
药 14 天，主要毒性反应为体重减轻，大鼠的 NOAEL 剂量为 40 mg/kg。
7.1.6 结构类似药氯吡格雷安全药理试验 FDA 文献资料[5]
清醒小鼠经口给予最高 250 mg/kg 的氯吡格雷，自主活动无异常。大鼠给予 125、
250 mg/kg 的氯吡格雷，有轻微的心电图改变，但没有行为学改变。氯吡格雷临床人推
荐服用剂量为 75 mg/人/天。
综合上述依据，本试验 DT678 低、中、高剂量分别设定为 5 mg/kg、15 mg/kg、45
mg/kg，按照体表面积折算，本试验的低、中和高剂量分别相当于小鼠的临床等效剂量
的 8.13、24.39 和 73.13 倍[6]（人按 60 kg 体重计算，临床拟用剂量为 0.05 mg/kg）。
7.2 组别设置
自主活动、平衡协调能力和协同睡眠三个指标的检测均设置 5 个组，分别为溶媒对
照组、阳性对照组、低、中、高剂量组，每组小鼠 10 只，雌雄各半。
7.3 剂量设置
溶媒对照组：0.5%CMC-Na 溶液；
低、中、高剂量组：5 mg/kg、15 mg/kg、45 mg/kg；
阳性对照组：7 mg/kg 地西泮注射液；
协同睡眠工具药：24 mg/kg 戊巴比妥钠溶液。
7.4 给药途径及选择理由
DT678 临床用药途径为口服给药，选用与临床用药途径相同的给药途径，即灌胃给
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药；神经系统阳性药地西泮注射液给药途径与供试品相同，为灌胃给药；协同睡眠工具
试剂戊巴比妥钠溶液为腹腔注射给药。
7.5 给药频率、给药体积
单次给药。各组小鼠给药体积均为 20 mL/kg，协同睡眠工具试剂戊巴比妥钠溶液给
药体积 20 mL/kg。
7.6 检查指标
自主活动与平衡协调能力（结合进行）、与阈下剂量戊巴比妥钠的协同睡眠作用以
及体温的变化。
8 试验方法
8.1 动物接收与检验
8.1.1 动物接收
实验动物由试验人员及动物保障部门人员共同接收。接收时运输工具符合要求，外
包装符合要求且无破损。动物供应单位提供的动物合格证明内容与申请购买的动物种
属、级别、数量和性别一致。动物外包装经 75%酒精喷雾消毒、紫外灯照射 3 分钟后由
第一传递柜传入检疫间。
8.1.2 动物检疫
动物传入检疫间后，拆开动物包装纸箱，核对动物各性别数量与动物合格证明所载
事项完全一致。用记号笔在鼠尾标记动物检疫号，然后逐一对动物进行检查(包括性别、
体重、头部、躯干部、尾部、四肢、皮毛、精神、活动等)。检验中所有动物均未见异
常。
8.2 动物适应期观察
动物检疫后放入饲养笼中，每笼 3~5 只，雌雄分养，并在笼具上悬挂标签，放在检
疫间的饲养架中进行适应期饲养。动物适应期饲养观察 2 天，适应期每天对动物进行全
面的观察，在适应期第 1 天和适应期结束称量动物体重。适应期间所有动物未见任何异
常。
8.3 动物筛选、分组、标识及处理
8.3.1 动物筛选
从检疫号为 1~28 的动物（接收日期：20200714）中选择状态良好、体重接近相应
平均值的雌、雄各 25 只小鼠，共计 50 只动物用于自主活动和平衡协调能力指标的检测；
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从检疫号为 29~56 的动物（接收日期：20200407）中选择状态良好、体重及体重增长值
接近相应平均值的雌、雄各 25 只小鼠，共计 50 只动物用于与阈下剂量戊巴比妥钠协同
睡眠作用的检测。
8.3.2 动物分组
用于自主活动、平衡协调能力指标检测的小鼠以及用于与阈下剂量戊巴比妥钠协同
睡眠作用检测的小鼠，采用体重随机区组的方法，将各自筛选出的动物分成 5 个组，即
溶媒对照组、阳性对照组及低、中、高剂量组。每组 10 只动物，雌雄各半。
8.3.3 标识方法
个体标识：分组后，各组动物用动物标记笔进行编号标记，溶媒对照组、阳性对照
组、低、中、高剂量组每组动物雄性标记为 1～5 号，雌性标记为 6～10 号。
饲养笼标识：在动物饲养笼具上悬挂笼具标签。
实验室标识：饲养观察室门口悬挂实验室标识牌。
8.3.4 动物处理
分组后剔除的剩余动物用于试验技术练习；入组动物待试验结束后进行安乐死处
理。
8.4 给药
给药方式：灌胃给药。
溶媒对照组给予 0.5%CMC-Na 溶液，低、中、高剂量组和阳性对照组分别给予相
应剂量的药液。给药过程中，采用磁力搅拌器持续混匀供试品药液。给药浓度及体积见
表 4。
表 4 给药浓度和体积
组别给药剂量（mg/kg）给药浓度（mg/mL）给药体积（mL/kg）

溶媒对照组 0 0 20
阳性对照组 7 0.35 20
低剂量组 5 0.25 20
中剂量组 15 0.75 20
高剂量组 45 2.25 20
8.5 检测指标
8.5.1 临床观察
观察内容：精神外观、行为活动、分泌及排泄物等。
观察频率：适应期及试验期每日观察 1 次，如毒性反应持续较长，应在发现的最初
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期阶段进行持续的观察。
观察范围：各组全部动物。
8.5.2 自主活动
检查项目：总路程、运动时间、静息时间、平均速度。
检查动物：各组全部动物。
检查频率：给药前、药后 0.5、1.5、3、6、10、24 小时。
检查方法：将各组动物放入行为轨迹记录分析仪的小鼠自发活动箱中，摄录小鼠 7
分钟内的活动视频，应用 EthoVision XT 软件分析小鼠自主活动指标。（注：视频前 2
分钟为适应时间，后 5 分钟用于数据分析）。
8.5.3 平衡协调能力
检查项目：动物从转棒上落下的次数。
检查频率：给药前、药后 0.5、1.5、3、6、10、24 小时时间点后 10 分钟。
检查方法：应用转棒式疲劳仪测定 3 分钟内动物从转棒上落下的次数（不包括主动
跳下的次数），落下 3 次以上（包括 3 次）记录为阳性（失去平衡）。
8.5.4 与阈下剂量戊巴比妥钠的协同睡眠作用
检查项目：睡眠动物数。
检查频率：溶媒对照组、低、中、高剂量组给药后 0.5 小时，阳性对照组给药后 1
小时。
检查方法：溶媒对照组、低、中、高剂量组给药后 0.5 小时、阳性对照组给药后 1
小时给予戊巴比妥钠，15 分钟内翻正反射消失达 1 分钟以上者为睡眠阳性。
8.5.5 体温（结合 DT678 灌胃给药对比格犬心血管系统的影响试验）
检查项目：肛温。
检查频率：给药前、药后 0.5、1、2、4、6、10、24 小时时间点后 10 分钟。
检查方法：应用电子体温计检测动物体温。体温原始数据见“DT678 灌胃给药对比
格犬心血管系统的影响”专题相关原始记录，供试品、实验动物、实验动物设施及饲养、
试验设计、试验方法等相关信息也见该专题方案。
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9 数据分析方法[6,7]
试验数据均采用 SPSS 软件进行统计处理。
计量资料：用均数±标准差（X±S）表述。先进行方差齐性检验（levene 检验
法），若资料满足方差齐性条件，选择单因素方差分析法（one-way ANOVA）进
行统计，若方差分析的 P≤0.05，则进行组间的多重比较(Dunnett t 检验法)，比较各
组与溶媒对照组的差异；若计量资料不满足方差齐性的条件，则采用 Kruskal-Wallis
秩和检验法，若统计量的 P≤0.05，则进行组间的多重比较，比较各组与溶媒对照
组的差异。按计量资料统计的数据包括自主活动指标。
计数资料：选择χ2 检验法，若统计量的 P≤0.05，采用 Bonferroni 法进行组间
多重比较，校正检验水准。按计数资料统计的数据包括平衡协调能力和协同睡眠
指标。
体温指标选择拉丁方设计的方差分析方法，若方差分析的组间总体 P≤0.05，
则进行组间的多重比较（Dunnett t 检验法），比较各组与溶媒对照组的差异。
检验水准α=0.05，P≤0.05 表示统计学差异显著。各组与溶媒对照组进行比较，
并结合专业知识综合分析供试品对动物各项检查指标的影响。
10 影响研究可靠性和造成研究工作偏离试验方案的异常情况
分析数据时发现 20200409 所做的自主活动指标检测阳性对照组与溶媒对照组比较，
各时间点未见显著差异，证明本次试验结果不可信，产生的数据应舍弃，该部分试验重
做。
11 试验结果
11.1 对自主活动的影响
与溶媒对照组比较，药后 10 h 低剂量组动物的运动时间增加、静息时间减少，其它
各时间点低、中、高剂量组的自主活动指标（总路程、平均速度、运动时间、静息时间）
未见统计学差异。阳性对照组动物药后 0.5 h 总路程、平均速度减少，药后 3 h 运动时间
减少、静息时间增加。药后 10 h 低剂量组动物运动时间的增加与静息时间的减少，数值
变化不大，非药物作用影响。自主活动检查统计结果见表 5～表 11。
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表 5 DT678 给药前对小鼠自主活动的影响（ X ±S, n=10）
项目溶媒对照组阳性对照组低剂量组中剂量组高剂量组
总路程（cm） 1770.917±627.131 2242.128±263.892 2128.895±279.851 2276.914±355.145 2093.788±359.869
运动时间（s） 170.384±31.553 196.712±12.913 196.660±12.376 203.436±21.043 196.748±12.390
静息时间（s） 129.616±31.553 103.288±12.913 103.340±12.376 96.564±21.043 103.252±12.390
平均速度（cm/s） 5.903±2.090 7.473±0.881 7.097±0.934 7.591±1.185 6.982±1.202
表 6 DT678 给药后 0.5 h 对小鼠自主活动的影响（ X ±S, n=10）
总路程（cm） 1571.658±598.786 1028.202±561.604* 1950.941±251.256 1762.089±571.940 1732.283±284.369

运动时间（s） 158.848±45.442 132.264±60.603 178.228±25.218 161.780±43.261 170.560±22.692
静息时间（s） 141.152±45.442 167.736±60.603 121.772±25.218 138.216±43.260 129.440±22.692
平均速度（cm/s） 5.240±1.997 3.427±1.872* 6.505±0.837 5.874±1.907 5.775±0.948
注：采用单因素方差分析或秩和检验，与溶媒对照组比较，*P＜0.05。
表 7 DT678 给药后 1.5 h 对小鼠自主活动的影响（ X ±S, n=10）
总路程（cm） 1449.624±512.982 1452.664±532.776 1773.096±291.120 1670.467±260.519 1712.155±447.415
运动时间（s） 150.736±27.687 158.024±33.565 172.916±16.731 164.800±15.842 167.124±15.972
静息时间（s） 149.264±27.687 141.976±33.565 127.084±16.731 135.200±15.842 132.872±15.974
平均速度（cm/s） 4.833±1.708 4.842±1.777 5.910±0.970 5.568±0.868 5.708±1.491
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表 8 DT678 给药后 3 h 对小鼠自主活动的影响（ X ±S, n=10）
总路程（cm） 1474.885±466.070 1035.884±501.358 1456.442±205.905 1489.369±292.602 1134.669±315.362
运动时间（s） 150.316±28.705 115.064±44.992* 152.400±19.522 155.132±19.260 129.116±32.923
静息时间（s） 149.676±28.709 184.936±44.992* 147.596±19.523 144.864±19.256 170.884±32.923
平均速度（cm/s） 4.917±1.553 3.452±1.671 4.855±0.686 4.964±0.977 3.782±1.052

总路程（cm） 1516.318±457.189 1338.205±437.359 1685.284±384.162 1374.432±372.133 1483.058±403.367

运动时间（s） 149.756±27.076 146.276±13.381 164.540±23.585 146.176±32.238 148.564±25.908
静息时间（s） 150.240±27.073 153.724±13.381 135.460±23.585 153.824±32.238 151.436±25.908
平均速度（cm/s） 5.054±1.525 4.460±1.458 5.618±1.281 4.582±1.241 4.944±1.345
总路程（cm） 1524.947±713.067 1819.924±495.235 2090.738±394.177 2072.374±323.795 1706.193±492.207
运动时间（s） 150.876±43.445 160.568±22.081 188.016±21.517* 180.544±22.682 163.884±32.399
静息时间（s） 149.124±43.445 139.428±22.084 111.984±21.517* 119.456±22.682 136.116±32.399
平均速度（cm/s） 5.083±2.377 6.066±1.649 6.970±1.315 6.908±1.078 5.688±1.642

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总路程（cm） 1599.006±680.883 1679.282±326.753 1526.956±363.801 1821.242±366.359 1471.441±283.611
运动时间（s） 148.884±39.770 162.060±22.165 157.808±27.856 176.968±23.723 157.616±18.672
静息时间（s） 151.116±39.770 137.940±22.165 142.192±27.856 123.032±23.723 142.384±18.672
平均速度（cm/s） 5.330±2.269 5.597±1.089 5.090±1.213 6.071±1.221 4.903±0.946
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11.2 对平衡协调能力的影响
与溶媒对照组比较，低、中、高剂量组动物药后 0.5、1.5、3、6、10、24 h 平衡协
调能力未见明显药物影响，药后 0.5、1.5 h 阳性对照组试验阳性反应动物数显著增多。
平衡协调能力检查统计结果见表 12～表 18。
表 12 给药前 DT678 对小鼠平衡协调能力的影响
组别给药剂量（mg/kg）动物数(只) 阴性动物数(只) 阳性动物数(只) 阳性率
溶媒对照组 0 10 10 0 0%
阳性对照组 7 10 10 0 0%
低剂量组 5 10 10 0 0%
中剂量组 15 10 10 0 0%
高剂量组 45 10 10 0 0%
表 13 给药后 0.5 h DT678 对小鼠平衡协调能力的影响
溶媒对照组 0 10 10 0 0%
阳性对照组 7 10 2 8 80%**
低剂量组 5 10 10 0 0%
中剂量组 15 10 10 0 0%
高剂量组 45 10 10 0 0%
注：采用χ2 检验，与溶媒对照组比较，**P<0.01。
表 14 给药后 1.5 h DT678 对小鼠平衡协调能力的影响
溶媒对照组 0 10 10 0 0%
阳性对照组 7 10 4 6 60%*
低剂量组 5 10 10 0 0%
中剂量组 15 10 10 0 0%
高剂量组 45 10 10 0 0%
注：采用χ2 检验，与溶媒对照组比较，*P<0.05。
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表 15 药后 3 h DT678 对小鼠平衡协调能力的影响
溶媒对照组 0 10 10 0 0%
阳性对照组 7 10 10 0 0%
低剂量组 5 10 10 0 0%
中剂量组 15 10 10 0 0%
高剂量组 45 10 10 0 0%
溶媒对照组 0 10 10 0 0%
阳性对照组 7 10 10 0 0%
低剂量组 5 10 10 0 0%
中剂量组 15 10 10 0 0%
高剂量组 45 10 10 0 0%
溶媒对照组 0 10 10 0 0%
阳性对照组 7 10 10 0 0%
低剂量组 5 10 10 0 0%
中剂量组 15 10 10 0 0%
高剂量组 45 10 10 0 0%
溶媒对照组 0 10 10 0 0%
阳性对照组 7 10 10 0 0%
低剂量组 5 10 10 0 0%
中剂量组 15 10 10 0 0%
高剂量组 45 10 10 0 0%
11.3 与阈下剂量戊巴比妥钠的协同睡眠作用
与溶媒对照组比较，低、中、高剂量组动物药后 0.5 h 与阈下剂量戊巴比妥钠的协
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同睡眠动物数未见明显差异，阳性对照组药后 1 h 协同睡眠动物数明显增加。协同睡眠
检查统计结果见表 19。
表 19 DT678 与阈下剂量戊巴比妥钠的协同睡眠作用
溶媒对照组 0 10 10 0 0%
阳性对照组 7 10 1 9 90%**
低剂量组 5 10 10 0 0%
中剂量组 15 10 10 0 0%
高剂量组 45 10 10 0 0%
注：采用χ2 检验，与溶媒对照组比较，**P<0.01。
11.4 对体温的影响（结合 DT678 灌胃给药对比格犬心血管系统的影响试验）

比格犬单次灌胃给予 DT678，与溶媒对照组比较，低、中、高剂量组动物药后 0.5、
1、2、4、6、10、24 小时均未见药物对动物体温的明显影响。体温检查统计结果见表
20。
表 20 DT678 对比格犬体温（℃）的影响（ X ±S, n=8）
低剂量组中剂量组高剂量组

检测时间溶媒对照组
（1 mg/kg）（3 mg/kg）（6 mg/kg）
给药前 38.653±0.364 38.630±0.377 38.676±0.157 38.804±0.235
药后 0.5 h 38.510±0.378 38.453±0.375 38.461±0.237 38.598±0.192
药后 1 h 38.389±0.395 38.353±0.352 38.329±0.234 38.529±0.225
药后 2 h 38.246±0.432 38.200±0.331 38.229±0.278 38.365±0.204
药后 4 h 38.183±0.375 38.040±0.293 38.170±0.305 38.243±0.262
药后 6 h 37.945±0.295 37.831±0.246 37.915±0.229 37.993±0.176
药后 10 h 37.818±0.294 37.795±0.286 37.735±0.231 37.970±0.193
药后 24 h 38.231±0.333 38.261±0.362 38.271±0.296 38.351±0.307
12 试验结论
（1）小鼠单次灌胃给予剂量达到 45 mg/kg 的 DT678，未见药物对动物自主活动、
平衡协调能力产生明显影响，亦未见药物与阈下剂量戊巴比妥钠产生协同睡眠作用。
（2）
比格犬单次灌胃给予剂量达到 6 mg/kg 的 DT678，未见药物对体温产生明显影响。
13 原始资料保存地点
试验资料存档：在试验结束后交天津天诚新药评价有限公司档案室存档；地址：天
津市滨海高新区滨海科技园惠仁道 308 号；电话：022-84845231；联系人：赵峰。
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14 参考文献
[1] 《药物非临床研究质量管理规范》（局令第 34 号），国家食品药品监督管理总局，
2017 年 7 月，http://www.cfdi.org.cn/resource/news/9196.html。
[2] Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, 第八版, 美国, 国家科学院出版,
2011.
[3] 《药物安全药理学研究技术指导原则》，国家食品药品监督管理总局，2014 年 5 月，
http://www.sda.gov.cn/WS01/CL1036/100983.html。
[4] Safety Pharmacology Studies for Human Pharmaceuticals, ICH S7A , 2000,
https://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Safety/S7A/Step4/S7A_Guideli
ne.pdf
[5] 氯吡格雷 FDA 申报资料（NDA NO.20-839）
[6] FDA:Estimating the Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical Trials For
Therapeutics in Adult Healthy Volunteers. https://www.fda.gov/media/72309/download
[7] 徐叔云, 卞如濂等. 药理实验方法学. 第三版. 北京: 人民卫生出版社, 2001.
[8] 方积乾. 生物医学研究的统计方法. 高等教育出版社, 2006.
第 26页共 46页
附表Ⅰ：个体数据表
表Ⅰ-1 给药前小鼠自主活动个体数据
平均速度
组别动物号性别总路程(cm) 运动时间(s) 静息时间(s)
(cm/s)
1 ♂ 1081.03 149.20 150.80 3.60
2 ♂ 1989.28 159.96 140.04 6.63
3 ♂ 1346.32 145.56 154.44 4.49
4 ♂ 1859.57 185.92 114.08 6.20

溶媒对照组
5 ♂ 2264.71 211.84 88.16 7.55
6 ♀ 658.87 120.00 180.00 2.20
7 ♀ 1788.75 177.44 122.56 5.96
8 ♀ 2400.40 200.48 99.52 8.00
9 ♀ 2729.27 210.28 89.72 9.10
10 ♀ 1590.97 143.16 156.84 5.30
1 ♂ 2282.99 203.24 96.76 7.61
2 ♂ 2709.04 199.64 100.36 9.03
3 ♂ 2421.00 197.96 102.04 8.07
4 ♂ 2184.78 175.44 124.56 7.28

阳性对照组
5 ♂ 2364.01 215.32 84.68 7.88
6 ♀ 2066.53 211.16 88.84 6.89
7 ♀ 2483.85 199.44 100.56 8.28
8 ♀ 2141.86 176.20 123.80 7.14
9 ♀ 1900.13 195.16 104.84 6.33
10 ♀ 1867.09 193.56 106.44 6.22
1 ♂ 2366.60 190.88 109.12 7.89
2 ♂ 1911.51 211.56 88.44 6.37
3 ♂ 1924.17 185.36 114.64 6.41
4 ♂ 1786.26 193.24 106.76 5.95

低剂量组
5 ♂ 1940.08 203.72 96.28 6.47
6 ♀ 2152.64 192.24 107.76 7.18
7 ♀ 2588.45 215.56 84.44 8.63
8 ♀ 2311.68 187.48 112.52 7.71
9 ♀ 2436.38 208.28 91.72 8.12
10 ♀ 1871.18 178.28 121.72 6.24
第 27页共 46页
续表Ⅰ-1 给药前小鼠自主活动个体数据
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 2188.68 196.12 103.88 7.30
2 ♂ 2330.01 207.64 92.36 7.77
3 ♂ 2688.35 229.00 71.00 8.96
4 ♂ 2486.32 190.76 109.24 8.29

中剂量组
5 ♂ 2381.26 230.40 69.60 7.94
6 ♀ 2060.81 212.68 87.32 6.87
7 ♀ 2713.56 222.56 77.44 9.05
8 ♀ 2331.44 199.40 100.60 7.77
9 ♀ 2106.18 177.40 122.60 7.02
10 ♀ 1482.53 168.40 131.60 4.94
1 ♂ 2226.40 193.08 106.92 7.42
2 ♂ 2016.60 200.96 99.04 6.72
3 ♂ 2098.99 212.24 87.76 7.00
4 ♂ 1792.80 195.08 104.92 5.98

高剂量组
5 ♂ 1776.98 198.76 101.24 5.92
6 ♀ 1929.25 184.12 115.88 6.44
7 ♀ 2322.12 210.40 89.60 7.74
8 ♀ 1817.79 174.48 125.52 6.06
9 ♀ 2978.31 210.36 89.64 9.94
10 ♀ 1978.64 188.00 112.00 6.60
第 28页共 46页
表Ⅰ-2 给药后 0.5 h 小鼠自主活动个体数据
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1859.12 182.36 117.64 6.20
2 ♂ 1491.54 164.76 135.24 4.97
3 ♂ 1066.98 137.24 162.76 3.56
4 ♂ 832.05 119.76 180.24 2.77

溶媒对照组
5 ♂ 2107.71 207.92 92.08 7.03
6 ♀ 539.21 65.44 234.56 1.80
7 ♀ 1943.55 186.68 113.32 6.48
8 ♀ 2270.41 211.48 88.52 7.57
9 ♀ 2156.01 182.04 117.96 7.19
10 ♀ 1450.00 130.80 169.20 4.83
1 ♂ 711.68 88.44 211.56 2.37
2 ♂ 1892.61 181.52 118.48 6.31
3 ♂ 1351.19 144.76 155.24 4.50
4 ♂ 1220.04 201.76 98.24 4.07

阳性对照组
5 ♂ 550.50 69.80 230.20 1.83
6 ♀ 758.29 136.08 163.92 2.53
7 ♀ 1930.30 220.32 79.68 6.43
8 ♀ 992.34 149.00 151.00 3.31
9 ♀ 303.02 27.72 272.28 1.01
10 ♀ 572.05 103.24 196.76 1.91
1 ♂ 2408.25 209.76 90.24 8.03
2 ♂ 1626.22 153.16 146.84 5.42
3 ♂ 1570.76 155.24 144.76 5.24
4 ♂ 1867.86 157.84 142.16 6.23

低剂量组
5 ♂ 2059.94 182.60 117.40 6.87
6 ♀ 2020.62 214.04 85.96 6.74
7 ♀ 2135.54 190.40 109.60 7.12
8 ♀ 2113.38 198.52 101.48 7.04
9 ♀ 1907.88 178.48 121.52 6.36
10 ♀ 1798.96 142.24 157.76 6.00
第 29页共 46页
续表Ⅰ-2 给药后 0.5 h 小鼠自主活动个体数据
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1603.70 153.44 146.52 5.35
2 ♂ 2000.01 163.20 136.80 6.67
3 ♂ 2100.89 176.08 123.92 7.00
4 ♂ 1799.30 158.08 141.92 6.00

中剂量组
5 ♂ 343.23 46.80 253.20 1.14
6 ♀ 1797.35 175.04 124.96 5.99
7 ♀ 2541.59 202.48 97.52 8.47
8 ♀ 1829.15 182.32 117.68 6.10
9 ♀ 2044.01 194.36 105.64 6.81
10 ♀ 1561.66 166.00 134.00 5.21
1 ♂ 1871.79 165.24 134.76 6.24
2 ♂ 1892.64 160.80 139.20 6.31
3 ♂ 1979.13 207.24 92.76 6.60
4 ♂ 1866.95 172.16 127.84 6.22

高剂量组
5 ♂ 1489.13 156.44 143.56 4.96
6 ♀ 1879.85 201.32 98.68 6.27
7 ♀ 1951.96 195.32 104.68 6.51
8 ♀ 1175.11 146.96 153.04 3.92
9 ♀ 1350.14 148.24 151.76 4.50
10 ♀ 1866.13 151.88 148.12 6.22
第 30页共 46页
表Ⅰ-3 给药后 1.5 h 小鼠自主活动个体数据
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1498.88 153.48 146.52 5.00
2 ♂ 1019.52 124.16 175.84 3.40
3 ♂ 1060.62 131.64 168.36 3.54
4 ♂ 1139.10 127.64 172.36 3.80

溶媒对照组
5 ♂ 1722.67 161.72 138.28 5.74
6 ♀ 652.99 106.44 193.56 2.18
7 ♀ 1522.12 167.04 132.96 5.07
8 ♀ 2131.95 185.20 114.80 7.11
9 ♀ 2317.29 191.92 108.08 7.72
10 ♀ 1431.10 158.12 141.88 4.77
1 ♂ 2155.69 176.24 123.76 7.19
2 ♂ 1566.64 184.12 115.88 5.22
3 ♂ 1464.50 192.36 107.64 4.88
4 ♂ 509.39 106.96 193.04 1.70

阳性对照组
5 ♂ 1672.23 171.40 128.60 5.57
6 ♀ 1119.73 127.08 172.92 3.73
7 ♀ 1361.15 206.80 93.20 4.54
8 ♀ 1302.11 128.20 171.80 4.34
9 ♀ 1032.99 127.48 172.52 3.44
10 ♀ 2342.21 159.60 140.40 7.81
1 ♂ 2302.05 197.84 102.16 7.67
2 ♂ 1732.61 157.84 142.16 5.78
3 ♂ 1664.45 163.28 136.72 5.55
4 ♂ 1391.43 174.48 125.52 4.64

低剂量组
5 ♂ 1655.88 167.48 132.52 5.52
6 ♀ 1956.89 182.76 117.24 6.52
7 ♀ 1784.64 167.16 132.84 5.95
8 ♀ 1459.25 142.40 157.60 4.86
9 ♀ 2165.27 191.96 108.04 7.22
10 ♀ 1618.49 183.96 116.04 5.39
第 31页共 46页
续表Ⅰ-3 给药后 1.5 h 小鼠自主活动个体数据
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1338.60 149.28 150.72 4.46
2 ♂ 1711.47 164.84 135.16 5.70
3 ♂ 1631.89 152.12 147.88 5.44
4 ♂ 1707.65 156.64 143.36 5.69

中剂量组
5 ♂ 1931.35 182.24 117.76 6.44
6 ♀ 1612.73 188.64 111.36 5.38
7 ♀ 1784.79 175.72 124.28 5.95
8 ♀ 1587.30 151.84 148.16 5.29
9 ♀ 2148.38 181.04 118.96 7.16
10 ♀ 1250.51 145.64 154.36 4.17
1 ♂ 1439.07 157.48 142.52 4.80
2 ♂ 1549.65 163.36 136.64 5.17
3 ♂ 1685.76 168.84 131.16 5.62
4 ♂ 1221.27 143.44 156.56 4.07

高剂量组
5 ♂ 1951.12 175.60 124.36 6.50
6 ♀ 1589.96 169.48 130.52 5.30
7 ♀ 1614.87 168.88 131.12 5.38
8 ♀ 1376.37 145.04 154.96 4.59
9 ♀ 2825.97 184.56 115.44 9.42
10 ♀ 1867.51 194.56 105.44 6.23
第 32页共 46页
表Ⅰ-4 给药后 3 h 小鼠自主活动个体数据
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1445.02 130.32 169.64 4.82
2 ♂ 1470.33 152.44 147.56 4.90
3 ♂ 926.85 116.44 183.56 3.09
4 ♂ 1729.94 160.04 139.96 5.77

溶媒对照组
5 ♂ 1961.74 194.92 105.04 6.54
6 ♀ 887.27 127.20 172.80 2.96
7 ♀ 1059.15 121.96 178.04 3.53
8 ♀ 1906.02 184.12 115.88 6.35
9 ♀ 2211.58 182.20 117.80 7.37
10 ♀ 1150.95 133.52 166.48 3.84
1 ♂ 1649.96 157.72 142.28 5.50
2 ♂ 1426.55 146.48 153.52 4.76
3 ♂ 727.28 108.04 191.96 2.42
4 ♂ 921.63 115.12 184.88 3.07

阳性对照组
5 ♂ 628.61 94.56 205.44 2.10
6 ♀ 253.35 10.24 289.76 .84
7 ♀ 1551.58 150.64 149.36 5.17
8 ♀ 1534.02 140.92 159.08 5.11
9 ♀ 1186.16 145.20 154.80 3.95
10 ♀ 479.70 81.72 218.28 1.60
1 ♂ 1751.24 162.40 137.60 5.84
2 ♂ 1441.69 154.76 145.24 4.81
3 ♂ 1246.91 141.12 158.88 4.16
4 ♂ 1101.71 108.44 191.56 3.67

低剂量组
5 ♂ 1258.79 156.36 143.64 4.20
6 ♀ 1572.70 174.92 125.08 5.24
7 ♀ 1531.47 158.20 141.76 5.10
8 ♀ 1679.70 165.84 134.16 5.60
9 ♀ 1405.29 167.16 132.84 4.68
10 ♀ 1574.92 134.80 165.20 5.25
第 33页共 46页
续表Ⅰ-4 给药后 3 h 小鼠自主活动个体数据
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1242.02 151.68 148.32 4.14
2 ♂ 1333.05 134.56 165.44 4.44
3 ♂ 1600.98 151.60 148.40 5.34
4 ♂ 1695.76 175.12 124.88 5.65

中剂量组
5 ♂ 1830.17 184.12 115.88 6.10
6 ♀ 1278.86 147.32 152.68 4.26
7 ♀ 1841.68 171.72 128.28 6.14
8 ♀ 1179.40 128.40 171.60 3.93
9 ♀ 1796.19 170.64 129.36 5.99
10 ♀ 1095.58 136.16 163.80 3.65
1 ♂ 952.06 118.04 181.96 3.17
2 ♂ 561.20 62.04 237.96 1.87
3 ♂ 1441.50 142.68 157.32 4.81
4 ♂ 1231.54 136.56 163.44 4.11

高剂量组
5 ♂ 1242.34 164.00 136.00 4.14
6 ♀ 1178.22 168.08 131.92 3.93
7 ♀ 1405.49 148.12 151.88 4.68
8 ♀ 930.43 107.88 192.12 3.10
9 ♀ 820.03 96.96 203.04 2.73
10 ♀ 1583.88 146.80 153.20 5.28
第 34页共 46页
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1700.98 176.80 123.20 5.67
2 ♂ 1353.04 132.04 167.92 4.51
3 ♂ 1071.93 117.64 182.36 3.57
4 ♂ 789.38 106.48 193.52 2.63

溶媒对照组
5 ♂ 1845.70 189.12 110.88 6.15
6 ♀ 2182.65 176.32 123.68 7.28
7 ♀ 1681.14 160.00 140.00 5.60
8 ♀ 2033.38 159.32 140.68 6.78
9 ♀ 1485.19 141.24 158.76 4.95
10 ♀ 1019.79 138.60 161.40 3.40
1 ♂ 1948.64 172.92 127.08 6.50
2 ♂ 1878.48 141.68 158.32 6.26
3 ♂ 724.40 149.68 150.32 2.41
4 ♂ 1110.88 141.44 158.56 3.70

阳性对照组
5 ♂ 1726.11 152.32 147.68 5.75
6 ♀ 1279.52 158.64 141.36 4.27
7 ♀ 1397.76 146.32 153.68 4.66
8 ♀ 1552.26 136.72 163.28 5.17
9 ♀ 949.31 139.56 160.44 3.16
10 ♀ 814.69 123.48 176.52 2.72
1 ♂ 1939.03 183.76 116.24 6.46
2 ♂ 1611.86 146.16 153.84 5.37
3 ♂ 1413.77 155.72 144.28 4.71
4 ♂ 854.07 118.68 181.32 2.85

低剂量组
5 ♂ 2282.00 208.72 91.28 7.61
6 ♀ 1670.07 159.60 140.40 5.57
7 ♀ 1931.94 163.32 136.68 6.44
8 ♀ 1868.04 175.92 124.08 6.23
9 ♀ 1781.30 166.12 133.88 5.94
10 ♀ 1500.76 167.40 132.60 5.00
第 35页共 46页
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1724.83 180.72 119.28 5.75
2 ♂ 974.17 122.88 177.12 3.25
3 ♂ 1376.83 145.28 154.72 4.59
4 ♂ 651.99 82.60 217.40 2.17

中剂量组
5 ♂ 1068.21 114.84 185.16 3.56
6 ♀ 1468.53 168.16 131.84 4.90
7 ♀ 1890.48 188.08 111.92 6.30
8 ♀ 1527.33 150.72 149.28 5.09
9 ♀ 1538.43 164.32 135.68 5.13
10 ♀ 1523.52 144.16 155.84 5.08
1 ♂ 1522.81 156.52 143.48 5.08
2 ♂ 1290.12 127.32 172.68 4.30
3 ♂ 1488.91 171.16 128.84 4.96
4 ♂ 1294.25 118.72 181.28 4.31

高剂量组
5 ♂ 1144.81 151.56 148.44 3.82
6 ♀ 1213.13 130.84 169.16 4.04
7 ♀ 1388.99 148.24 151.76 4.63
8 ♀ 1387.97 124.08 175.92 4.63
9 ♀ 2570.52 205.04 94.96 8.57
10 ♀ 1529.07 152.16 147.84 5.10
第 36页共 46页
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 978.64 122.16 177.84 3.26
2 ♂ 795.67 112.48 187.52 2.65
3 ♂ 1016.76 128.76 171.24 3.39
4 ♂ 956.48 100.44 199.56 3.19

溶媒对照组
5 ♂ 1783.87 168.76 131.24 5.95
6 ♀ 833.39 115.00 185.00 2.78
7 ♀ 2509.30 214.40 85.60 8.36
8 ♀ 2572.63 224.64 75.36 8.58
9 ♀ 2268.25 174.56 125.44 7.56
10 ♀ 1534.48 147.56 152.44 5.11
1 ♂ 1757.18 175.80 124.20 5.86
2 ♂ 2147.34 168.52 131.48 7.16
3 ♂ 851.24 124.12 175.88 2.84
4 ♂ 1668.37 154.40 145.60 5.56

阳性对照组
5 ♂ 1707.78 130.88 169.12 5.69
6 ♀ 2598.99 191.12 108.88 8.66
7 ♀ 2015.45 171.72 128.28 6.72
8 ♀ 2106.83 174.40 125.60 7.02
9 ♀ 2092.34 174.32 125.64 6.97
10 ♀ 1253.72 140.40 159.60 4.18
1 ♂ 2552.90 199.56 100.44 8.51
2 ♂ 1774.83 199.08 100.92 5.92
3 ♂ 2020.16 183.36 116.64 6.73
4 ♂ 1541.51 168.92 131.08 5.14

低剂量组
5 ♂ 2468.44 198.72 101.28 8.23
6 ♀ 2286.21 213.48 86.52 7.62
7 ♀ 1729.27 172.24 127.76 5.76
8 ♀ 2317.73 182.32 117.68 7.73
9 ♀ 2563.52 215.80 84.20 8.55
10 ♀ 1652.81 146.68 153.32 5.51
第 37页共 46页
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1968.88 166.68 133.32 6.56
2 ♂ 2454.10 223.16 76.84 8.18
3 ♂ 1730.77 163.92 136.08 5.77
4 ♂ 1900.56 158.16 141.84 6.34

中剂量组
5 ♂ 2120.25 190.48 109.52 7.07
6 ♀ 2011.93 180.04 119.96 6.71
7 ♀ 2013.97 174.96 125.04 6.71
8 ♀ 2220.94 169.68 130.32 7.40
9 ♀ 2697.57 216.08 83.92 8.99
10 ♀ 1604.77 162.28 137.72 5.35
1 ♂ 1702.85 182.76 117.24 5.68
2 ♂ 1712.13 183.12 116.88 5.71
3 ♂ 2344.56 177.52 122.48 7.82
4 ♂ 1610.78 162.20 137.80 5.37

高剂量组
5 ♂ 1880.96 174.04 125.96 6.27
6 ♀ 2044.11 211.16 88.84 6.81
7 ♀ 1751.82 171.96 128.04 5.84
8 ♀ 942.84 102.64 197.36 3.14
9 ♀ 837.28 115.48 184.52 2.79
10 ♀ 2234.60 157.96 142.04 7.45
第 38页共 46页
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1520.87 143.48 156.52 5.07
2 ♂ 1481.38 138.24 161.76 4.94
3 ♂ 1025.18 134.56 165.44 3.42
4 ♂ 546.80 69.40 230.60 1.82

溶媒对照组
5 ♂ 2251.49 183.28 116.72 7.50
6 ♀ 731.76 108.64 191.36 2.44
7 ♀ 2007.11 195.88 104.12 6.69
8 ♀ 2467.14 178.12 121.88 8.22
9 ♀ 2384.73 190.12 109.88 7.95
10 ♀ 1573.60 147.12 152.88 5.25
1 ♂ 1519.35 154.84 145.16 5.06
2 ♂ 2184.16 161.04 138.96 7.28
3 ♂ 1331.17 144.24 155.76 4.44
4 ♂ 2103.88 201.40 98.60 7.01

阳性对照组
5 ♂ 1764.01 180.36 119.64 5.88
6 ♀ 1577.07 158.44 141.56 5.26
7 ♀ 1663.22 178.40 121.60 5.54
8 ♀ 1164.61 120.84 179.16 3.88
9 ♀ 1952.62 170.12 129.88 6.51
10 ♀ 1532.73 150.92 149.08 5.11
1 ♂ 1012.92 130.04 169.96 3.38
2 ♂ 1869.79 169.88 130.12 6.23
3 ♂ 1017.06 145.84 154.16 3.39
4 ♂ 1889.56 157.00 143.00 6.30

低剂量组
5 ♂ 1294.47 148.36 151.64 4.31
6 ♀ 1990.98 209.56 90.44 6.64
7 ♀ 1760.70 172.20 127.80 5.87
8 ♀ 1621.56 167.72 132.28 5.41
9 ♀ 1573.33 171.32 128.68 5.24
10 ♀ 1239.19 106.16 193.84 4.13
第 39页共 46页
平均速度
(cm/s)
1 ♂ 1651.13 171.96 128.04 5.50
2 ♂ 1315.68 133.32 166.68 4.39
3 ♂ 1693.37 153.16 146.84 5.64
4 ♂ 1951.54 212.16 87.84 6.51

中剂量组
5 ♂ 1919.59 177.96 122.04 6.40
6 ♀ 1743.81 165.68 134.32 5.81
7 ♀ 2147.69 185.68 114.32 7.16
8 ♀ 1930.04 197.80 102.20 6.43
9 ♀ 2534.96 202.24 97.76 8.45
10 ♀ 1324.61 169.72 130.28 4.42
1 ♂ 1501.06 178.24 121.76 5.00
2 ♂ 1626.82 155.16 144.84 5.42
3 ♂ 1782.51 166.88 133.12 5.94
4 ♂ 1190.95 136.08 163.92 3.97

高剂量组
5 ♂ 1817.33 186.88 113.12 6.06
6 ♀ 1194.96 166.12 133.88 3.98
7 ♀ 1167.64 128.96 171.04 3.89
8 ♀ 1343.64 156.20 143.80 4.48
9 ♀ 1222.26 138.32 161.68 4.07
10 ♀ 1867.24 163.32 136.68 6.22
第 40页共 46页
表Ⅰ-8 给药前小鼠平衡协调能力个体数据
动物号性别溶媒对照组阳性对照组低剂量组中剂量组高剂量组
1 ♂ - - - - -
2 ♂ - - - - -
3 ♂ - - - - -
4 ♂ - - - - -
5 ♂ - - - - -
6 ♀ - - - - -
7 ♀ - - - - -
8 ♀ - - - - -
9 ♀ - - - - -
10 ♀ - - - - -
表Ⅰ-9 给药后 0.5 h 小鼠平衡协调能力个体数据
1 ♂ - ＋ - - -
2 ♂ - - - - -
3 ♂ - - - - -
4 ♂ - ＋ - - -
5 ♂ - ＋ - - -
6 ♀ - ＋ - - -
7 ♀ - ＋ - - -
8 ♀ - ＋ - - -
9 ♀ - ＋ - - -
10 ♀ - ＋ - - -
注：3 分钟内落下 3 次以上（包括 3 次）记为“＋”
第 41页共 46页
表Ⅰ-10 给药后 1.5 h 小鼠平衡协调能力个体数据
1 ♂ - ＋ - - -
2 ♂ - - - - -
3 ♂ - - - - -
4 ♂ - ＋ - - -
5 ♂ - ＋ - - -
6 ♀ - - - - -
7 ♀ - ＋ - - -
8 ♀ - ＋ - - -
9 ♀ - - - - -
10 ♀ - ＋ - - -
注：3 分钟内落下 3 次以上（包括 3 次）记为“＋”
表Ⅰ-11 给药后 3 h 小鼠平衡协调能力个体数据
1 ♂ - - - - -
2 ♂ - - - - -
3 ♂ - - - - -
4 ♂ - - - - -
5 ♂ - - - - -
6 ♀ - - - - -
7 ♀ - - - - -
8 ♀ - - - - -
9 ♀ - - - - -
10 ♀ - - - - -
第 42页共 46页
1 ♂ - - - - -
2 ♂ - - - - -
3 ♂ - - - - -
4 ♂ - - - - -
5 ♂ - - - - -
6 ♀ - - - - -
7 ♀ - - - - -
8 ♀ - - - - -
9 ♀ - - - - -
10 ♀ - - - - -
1 ♂ - - - - -
2 ♂ - - - - -
3 ♂ - - - - -
4 ♂ - - - - -
5 ♂ - - - - -
6 ♀ - - - - -
7 ♀ - - - - -
8 ♀ - - - - -
9 ♀ - - - - -
10 ♀ - - - - -
第 43页共 46页
1 ♂ - - - - -
2 ♂ - - - - -
3 ♂ - - - - -
4 ♂ - - - - -
5 ♂ - - - - -
6 ♀ - - - - -
7 ♀ - - - - -
8 ♀ - - - - -
9 ♀ - - - - -
10 ♀ - - - - -
表Ⅰ-15 小鼠协同睡眠个体数据
1 ♂ - ＋ - - -
2 ♂ - ＋ - - -
3 ♂ - ＋ - - -
4 ♂ - ＋ - - -
5 ♂ - - - - -
6 ♀ - ＋ - - -
7 ♀ - ＋ - - -
8 ♀ - ＋ - - -
9 ♀ - ＋ - - -
10 ♀ - ＋ - - -
注：“＋”表示睡眠；“－”表示未睡眠。
第 44页共 46页
表Ⅰ-16 比格犬体温个体数据（℃）
药后药后药后药后药后药后药后
组别动物号性别给药前
0.5 小时 1 小时 2 小时 4 小时 6 小时 10 小时 24 小时
1 ♀ 37.82 37.65 37.56 37.45 37.60 37.45 37.27 37.69
3 ♀ 38.62 38.40 38.13 37.89 37.92 37.70 37.65 38.00
5 ♀ 38.69 38.54 38.40 38.15 37.92 37.90 37.86 38.01
6 ♀ 39.05 38.86 38.72 38.68 38.55 38.41 38.23 38.70

溶媒对照组
7 ♂ 38.70 38.56 38.49 38.36 38.49 37.85 37.94 38.55
8 ♂ 38.72 38.66 38.63 38.52 38.19 38.05 37.88 38.15
9 ♂ 38.72 38.60 38.39 38.17 38.09 38.01 37.65 38.30
12 ♂ 38.90 38.81 38.79 38.75 38.70 38.19 38.06 38.45
1 ♀ 38.72 38.59 38.49 38.35 38.26 38.09 37.92 38.59
3 ♀ 37.72 37.59 37.60 37.55 37.50 37.41 37.20 37.79
5 ♀ 38.72 38.52 38.36 38.19 38.05 37.95 37.80 37.90
低剂量组 6 ♀ 38.70 38.39 38.10 37.90 37.79 37.75 37.80 38.25

（1 mg/kg） 7 ♂ 38.72 38.59 38.48 38.39 38.25 37.54 37.71 38.30
8 ♂ 38.85 38.60 38.55 38.30 38.10 37.98 37.97 38.62
9 ♂ 38.69 38.47 38.52 38.30 37.95 37.88 37.76 37.92
12 ♂ 38.92 38.87 38.72 38.62 38.42 38.05 38.20 38.72
第 45页共 46页
续表Ⅰ-16 比格犬体温个体数据（℃）
药后药后药后药后药后药后药后
组别动物号性别给药前
0.5 小时 1 小时 2 小时 4 小时 6 小时 10 小时 24 小时
1 ♀ 38.75 38.55 38.29 38.32 38.40 37.92 37.52 38.56
3 ♀ 38.80 38.66 38.62 38.49 38.39 38.40 38.17 38.56
5 ♀ 38.30 38.02 37.92 37.72 37.61 37.80 37.66 37.92

中剂量组 6 ♀ 38.69 38.50 38.27 38.05 37.93 37.82 37.65 37.90
（3 mg/kg） 7 ♂ 38.69 38.50 38.39 38.29 38.11 37.98 37.89 38.25
8 ♂ 38.75 38.72 38.65 38.59 38.49 37.59 37.57 38.15
9 ♂ 38.75 38.55 38.29 38.32 38.40 37.92 37.52 38.56
12 ♂ 38.68 38.19 38.20 38.05 38.03 37.89 37.90 38.33
1 ♀ 38.72 38.56 38.40 38.20 37.95 37.90 37.72 38.15
3 ♀ 38.80 38.60 38.51 38.40 38.19 38.07 38.00 38.11
5 ♀ 38.60 38.47 38.50 38.39 38.42 38.25 38.06 38.19
高剂量组 6 ♀ 39.13 38.72 38.75 38.42 38.17 38.05 38.12 38.70

（6 mg/kg） 7 ♂ 38.56 38.39 38.15 38.02 37.92 37.94 37.72 38.05
8 ♂ 38.59 38.39 38.42 38.30 38.12 37.90 38.23 38.46
9 ♂ 38.88 38.69 38.62 38.47 38.55 37.68 37.82 38.90
12 ♂ 39.15 38.96 38.88 38.72 38.62 38.15 38.09 38.25
第 46页共 46页

0402 4.2.1药理学4.2.2药代动力学 2 1933 Gpha 1 灌胃给药对实验动物中枢神经系统的影响

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0402 4.2.1药理学4.2.2药代动力学 2 1933 Gpha 1 灌胃给药对实验动物中枢神经系统的影响

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天津天诚新药评价有限公司 专题编号：1933-GPHA/1

专题负责人助理 潘德桐 供试品配制、数据处理、数据统计

（5） 李坤玲 动物安乐死、试验数据采集

（7） 周博宇 试验数据采集

（8） 张海娇 试验数据采集

（9） 刘约瑟 动物接收检验、试验数据采集

（10） 徐德璐 供试品配制

供试品管理 肖宇萌 供试品管理

供试品分析 贾长虹 供试品检测负责人

专题名称 DT678 灌胃给药对实验动物中枢神经系统的影响

溶媒对照 0.5%羧甲基纤维素钠溶液（简称 0.5%CMC-Na 溶液）

实验动物 （1）ICR 小鼠，100 只，SPF 级，雌雄各半；（2）比格犬，8 只，普

组别设置 （1）小鼠试验设置 5 个组，分别为溶媒对照组、阳性对照组、DT678

低、中、高剂量组，每组 10 只；（2）比格犬试验设置 4 个组，分别

给药剂量 （1）小鼠试验低、中、高剂量设计为 5、15、45 mg/kg，阳性对照剂

量为 7 mg/kg，溶媒对照组给予等体积的 0.5%CMC-Na 溶液；（2）

比格犬试验低、中、高剂量设计为 1、3、6 mg/kg，溶媒对照组给予

等体积的 0.5%CMC-Na 溶液。

检查指标 （1）小鼠试验：给药前、药后 0.5、1.5、3、6、10、24 小时各记录一

次小鼠自主活动和平衡协调能力，药后 0.5 小时检测与阈下剂量戊巴

未见明显药物影响；药后 0.5、1.5、3、6、10、24 小时低、中、高剂量组动物平衡协调

能力未见明显异常；药后 0.5 小时与阈下剂量戊巴比妥钠协同睡眠动物数未见明显差异；

（1）小鼠单次灌胃给予剂量达到 45 mg/kg 的 DT678，未见药物对动物自主活动、

（2）比格犬单次灌胃给予剂量达到 6 mg/kg 的 DT678，未见药物对体温产生明显

本试验观察 DT678 灌胃给药对实验动物中枢神经系统的影响，包括自主活动、平

验设计、试验方法等信息详见该专题）。通过本试验研究确定 DT678 可能关系到人的

本专题按照原 CFDA（现 NMPA）颁布的《药物非临床研究质量管理规范》（第 34

本公司动物管理遵循: Guide for the Care and Use of Laboratory Animals》[2]。

名称：地西泮注射液；规格：2 mL: 10 mg；批号：1806151；保存条件：遮光、密

名称：地西泮注射液；规格：2 mL: 10 mg；批号：1903101；保存条件：遮光、密

溶媒对照：0.5%羧甲基纤维素钠溶液（简称 0.5%CMC-Na 溶液）。

0.5%CMC-Na 溶液的配制（以配制 100 mL 为例）：称取 CMC-Na 粉末 0.5 g，先在

容器内加入适量去离子水，边搅拌边加入 CMC-Na 粉末，连续搅拌至 CMC-Na 全部溶

解后，用去离子水稀释为 100 mL。

低剂量（5 mg/kg）组用药（0.25 mg/mL）的配制（以配制 100 mL 为例）：称取 DT678

粉末 0.025 g，放入研钵内先加入少量 0.5%CMC-Na 溶液进行研磨，研磨充分后再分多

次逐步加入 0.5%CMC-Na 溶液稀释并转入量筒内（注意转移完成后研钵内不应留有药

物残余），最后加入 0.5%CMC-Na 溶液至 100 mL 后转入合适的避光容器内，超声波清

洗机超声 15 min，磁力搅拌器 400 转搅拌 2min，混匀。

根据稳定性结果，配制后药液有效期设定为 72 h，保存条件设定为 2～8 ℃避光。供

试品药液在给药前 1-3 天配制，从冰箱取出后，超声 30-60 min 再给药。

取地西泮注射液 2 mL，加入 0.9%氯化钠注射液混匀至 28.6 mL，配制成浓度为 0.35

mg/mL 的溶液。常温保存，有效期 1 个月。

DT678 在 0.2 mg/mL～200 mg/mL 浓度范围内，与介质 0.5%CMC-Na 混合后，低高

浓度上中下三层溶液中 DT678 检出浓度的 RSD≤15%，药液均一。

DT678 在 0.2 mg/mL～200 mg/mL 浓度范围内，与介质 0.5%CMC-Na 混合后，常温

避光放置 6 h、常温光照 3h 及 2～8 ℃避光保存 24h，低高浓度 DT678 测定值与 0h 测定

检测内容 低剂量组 中剂量组 高剂量组

药液浓度(mg/mL) 0.25 0.75 2.25

上层药液(mg/mL) 0.233 / 2.10

中层药液(mg/mL) 0.256 / 2.16

下层药液(mg/mL) 0.244 / 2.12

RSD(%) 4.75 / 1.56

测定浓度(mg/mL) 0.256 0.748 2.16

浓度 RE(%) 2.28 -0.206 -3.78

检测内容 低剂量组 中剂量组 高剂量组

药液浓度(mg/mL) 0.25 0.75 2.25

上层药液(mg/mL) 0.247 / 2.18

中层药液(mg/mL) 0.256 / 2.26

下层药液(mg/mL) 0.251 / 2.20

RSD(%) 1.80 / 1.82

测定浓度(mg/mL) 0.256 0.729 2.26

浓度 RE(%) 2.27 -2.86 -0.343

种系：ICR 小鼠；等级：SPF 级；周龄：引进时 4～6 周；数量：56 只，适应期结

天津天诚新药评价有限公司专题编号：1933-GPHA/1

专题负责人助理潘德桐供试品配制、数据处理、数据统计

（5）李坤玲动物安乐死、试验数据采集

（7）周博宇试验数据采集

（8）张海娇试验数据采集

（9）刘约瑟动物接收检验、试验数据采集

（10）徐德璐供试品配制

供试品管理肖宇萌供试品管理

供试品分析贾长虹供试品检测负责人

实验动物（1）ICR 小鼠，100 只，SPF 级，雌雄各半；（2）比格犬，8 只，普

组别设置（1）小鼠试验设置 5 个组，分别为溶媒对照组、阳性对照组、DT678

给药剂量（1）小鼠试验低、中、高剂量设计为 5、15、45 mg/kg，阳性对照剂

检查指标（1）小鼠试验：给药前、药后 0.5、1.5、3、6、10、24 小时各记录一

检测内容低剂量组中剂量组高剂量组

检测内容低剂量组中剂量组高剂量组

仪器名称仪器型号仪器编号生产厂家

组别给药剂量（mg/kg）给药浓度（mg/mL）给药体积（mL/kg）

项目溶媒对照组阳性对照组低剂量组中剂量组高剂量组

项目溶媒对照组阳性对照组低剂量组中剂量组高剂量组